CS248901B1

CS248901B1 - Způsob výroby fungicidinu

Info

Publication number: CS248901B1
Application number: CS772874A
Authority: CS
Inventors: Stanislav Cizek; Vaclav Cechner; Vladimir Prochazka
Original assignee: Stanislav Cizek; Vaclav Cechner; Vladimir Prochazka
Priority date: 1974-11-13
Filing date: 1974-11-13
Publication date: 1987-03-12

Abstract

Vynález se týká způsobu výroby fungicidinú kultivací mikroorganismu Streptomyces noursei v tekuté živné půdě, obsahující zdroje asimilovatelného uhlíku a dusíku a : minerální živné soli, za aerobních podmínek. Jako zdroje dusíku byly použity sušené kvasnice, popř- extrakt z nich a/nebo sojové mouky a/nebo kukuřičného škrobu a/nebo arašídové mouky a/nebo pšeničního šrotu a/nebo sladového šrotu v množství 0,2 až 2,0 % hmot. objemových.

Description

Vynález se týká způsobu výroby fungicidinu kultivací mikroorganismu Streptomyces noursei v tekuté živné půdě obsahující zdroje asimilovatelného uhlíku a dusíku a minerální živné soli, za aerobních podmínek.

Při dosavadním způsobu výroby uvedeného antibiotika se používá jako složek živné půdy v různých fázích přípravy kultur produkčního kmene Streptomyces noursei, například prosa, aminokyselin, jako tyrosinu, nikotinové kyseliny, asparaginu, glutamové kyseliny, L-cysteinu /k přípravě spor pro očkování/, kukuřičného extraktu, uhličitanu vápenatého nebo mikromletého vápence, glukózy, dusičnanu amonného a chloridu sodného /k přípravě vegetativního ínokula/.

Pro přípravu vlastní produkční půdy se používá obvykle kukuřičného extraktu jako zdroje organického dusíku a růstových faktorů, jako živné soli, uhličitanu vápenatého nebo mikromletého vápence, jako zdroje anorganického dusíku amonných solí a jako zdroje uhlíku glukózy, fruktosového sirupu, popř. škrobu. Na živných půdách tohoto složení se dosahuje určité výše výtěžků, která se podle podmínek pohybuje v rozmezí 25 000 až 30 000 mj/ml fungicidinu.

Bylo zjištěno, že výtěžky fungicidinu při fermentaci na půdách obvyklého složení lze zvýšit o 30 až 60 % opatřením, které je předmětem tohoto vynálezu a jehož podstata spočívá v tom, že se jako zdroje asimilovatelného dusíku organického původu používá úplně nebo- částečně sušených kvasnic a/nebo extraktu z kvasnic a/nebo sojové mouky a/nebo kukuřičného šrotu a/nebo arašídové mouky a/nebo pšeničného šrotu a/nebo sladového šrotu, v množství 0,2 až 2,0 %hmotnostně objemových.

Sušenými kvasnicemi lze s výhodou nahradit směs aminokyselin, používanou dosud při přípravě sporového ínokula, v půdě pro přípravu vegetativního inokula lze jmenovanou složkou nahradit kukuřičný extrakt a v produkční nesuspenzní půdě lze nahradit kukuřičný extrakt, využívaný dosud jako jediný zdroj organického dusíku a růstových faktorů, bud úplně nebo částečně, popřípadě s přídavkem dalších uvedených látek.

Způsob podle vynálezu znamená značný ekonomický přínos při fermentační výrobě fungicidu, především podstatným zvýšením výtěžků. Je jednoduše realizovatelný bez jakýchkoliv úprav zařízení a bez mimořádných nároků na obsluhu.

Bližší podrobnosti způsobu podle vynálezu jsou patrny z následujících příkladů provedení.

Příklady provedení

Přikladl

Fermentační půda objemu 60 ml, obsahující 0,5 % kukuřičného extraktu, 0,5 % sušených kvasnic, 2,0 % glukózy, 8,0 % fruktosového sirupu, 0,25 % sojové mouky /nebo stejné váhové množství arašídové mouky/ a 1,0 % mikromletého vápence, byla zaočkována 3 ml vegetativního inokula kmene Streptomyces noursei, starého 28 hod.

Vegetativní inokulum bylo připraveno na inokulační tekuté půdě tohoto složení: kukuřičný extrakt 0,25 %, sojová mouka 1 %, glukóza 4,4 Ž, dusičnan amonný 0,5 %, mikromletý vápenec 0,5 % a chlorid sodný 0,2 %. K očkování bylo použito prostých konzerv, kde aminokyseliny byly nahrazeny 1,0 % sušených kvasnic.

Fermentace probíhala 120 hod. na reciprokém třepacím stroji pří teplotě 28 °C. Po ukončení fermentace obsahovala půda 38 000 mj/ml fungicidinu. Kontrolní fermentace, provedená s inokulem přiraveným na prose, obsahujícím 0,01 % tyrosinu, asparaginu, kyseliny glutamové, kyseliny nikotinové a L-cysteinu, poskytla výtěžek 26 000 mj/ml fungicidinu.

Příklad 2

Fermentační půda objemu 60 ml, obsahující 0,5 % kuluřičného extraktu, 0,001 % kyselého fosforečnanu draselného, 0,5 % sušených kvasnic, 0,25 % sojové mouky, 2,0 % glukózy, 8,0 % fruktosového sirupu, 0,5 % dusičnanu amonného a 1,0 % mikromletého vápence, byla zaočkována 3 ml vegetativního inokula kmene Streptomyces noursei, starého 28 hod., připraveného na půdě, ve které byl kukuřičný extrakt úplně nahrazen sušenými kvasnicemi.

Složení inokulační půdy: 1,0 % sušených kvasnic, 0,5 % sojové mouky, 4,4 % glukózy,

0,5 % dusičnanu amonného, 0,5 % mikromletého vápence, 0,2 % chloridu sodného. Fermentováno na reciprokém třepacím stroji při teplotě 28 °C. Po ukončení fermentace obsahovala půda 44 000 mj/ml fungicidinu. ·

Kontrolní fermentace provedená s půdou, obsahující 1,18 % kukuřičného extraktu, 2,0 % glukózy, 8,0 % fruktosového sirupu, 0,5 % dusičnanu amonného a 1,0 % mikromletého vápence, zaočkovaná vegetativním inokulem Streptomyces noursei, starým 28 hod., připraveným na inokulační půdě s obsahem 0,25 % kukuřičného extraktu, 1,0 % sojové mouky, 4,4 % glukózy, 0,5 % mikromletého vápence a 0,2 % chloridu sodného, poskytla výtěžek 25 000 mj/ml fungicidinu.

Příklad 3

Fermentační půda objemu 60 ml, obsahující 1,0 % sušených kvasnic, 0,001 % kyselého fosforečnanu draselného, 0,5 % sojové mouky, 2,0 % glukózy, 8,0 % fruktózového sirupu, 1,0 % mikromletého vápence a 0,5 % dusičnanu amonného, byla zaočkována 3 ml vegetativního inokula kmene Streptomyces noursei, starého 28 hod. připraveného na inokulační pude se sušenými kvasnicemi. Fermentováno 120 hod. na reciprokém třepacím stroji při teplotě 28 °C. Po ukončení fermentace obsahovala půda 50 000 mj/ml fungicidinu.

Kontrolní fermentace provedená na půdě s kukuřičným extraktem, očkovaná inokulem 28 hod. starým, poskytla výtěžek 28 000 mj/ml fungicidinu.

Příklad 4

Fermentační půda objemu 60 ml, obsahující 1,0 % sušených kvasnic, 0,001 % kyselého fosforečnanu draselného, 0,5 % kuluřičného šrotu, 2,0 % glukózy, 8,0 % fruktózového sirupu, ‘1,0 % mikromletého vápence a 0,5 % dusičnanu amonného, byla naočkována 3 ml vegetativního inokula kmene Streptomyces noursei, starého 28 hod. Fermentováno 120 hod. na reciprokém třepacím stroji při teplotě 28 °C. Po ukončení fermentace obsahovala půda 56 000 mj/ml fungicidinu.·

Kongroln.í fermentace provedená na půdě s kukuřičným extraktem, očkovaná inokulem 28 hod. starým, poskytla výtěžek 31 000 mj/ml fungicidinu.

Příklad 5 ml fermentační půdy, obsahující 1,0 % sušených kvasnic, 0,5 % pšeničného šrotu,

2,0 % glukózy, 8,0 % fruktozového sirupu, 1,0 % mikromletého vápence .a 0,5 % dusičnanu amonného· bylo po zaočkování 3 mi vegetativního inokula kmene S.noursei fermentováno za stejných podmínek jako v příkladu 4 s produkcí 50 000 mj/ml fungicidinu. Kontrolní fermentace poskytla výtěžek 28 000 mj/ml fungicidinu.

Příklad 6 ml fermentační půdy, obsahující 1,0 % sušených kvasnic, 0,001 % kyselého fosforečnanu draselného, 0,25 % sladového šrótu, 6,0 % rozpustného škrobu, 1,0 % mikromletého vápence a 0,5 % dusičnanu amonného, bylo po zaočkování 3 ml vegetativného inokula kmene S.nourse^i fermen továno za stejných podmínek jako v příkladu 4 s produkcí 38 000 mj/ml fungicidinu. Kontrolní fermentace poskytla výtěžek 26 000 mj/ml fungicidinu.

Pří -klad 7 ml fermentační půdy, obsahující 0,5 % kvasničného extraktu, 0,5 % sojové mouky,

2,0 % glukózy, 0,001 % kyselého fosforečnanu draselného, 6,0 % fruktozového sirupu, 0,5 % dusičnanu vápenatého a 1,0 % mikromletého vápence, bylo po zaočkování 3 ml vegetativného inokula kmene S.noursei fermentováno za stejných podmínek jako v příkladu 4 s produkcí 44 000 mj/ml fungicidinu. Kontrolní fermentace poskytla výtěžek 30 000 mj/ml fungicidinu.

Příklade ml fermentační půdy, obsahující 1,0 % sušených kvasnic, 0,5 % sojové mouky, 0,5 % dusičnanu amonného, 7,0 % amylázou ztekuceného škrobu, 1,0 % mikromletého vápence a 0,001 % kyselého fosforečnanu draselného bylo po zaočkování 3 ml vegetativního inokula kmene Streptomyces noursei fermentováno za stejných dpomínek jako v příkladu 4 s produkcí 48 000 mj/ml fungicidinu. Při kontrolní fermentaci bylo dosaženo produkce 30 000 mj/ml fungicidinu.

Claims

z Způsob výroby fungicidinu kultivací mikroorganismem Streptomyces noursei v tekuté živné půdě obsahující zdroje asimilovatelného uhlíku a dusíku a minerální živné soli, za aerobních podmínek, vyznačující se tím, že se jako zdroje asimilovatelného dusíku organického původu používá úplně nebo částečně sušených kvasnic a/nebo extraktu z kvasnic a/nebo sojové mouky a/nebo kukuřičného šrotu a/nebo arašídové mouky a/nebo pšeničného šrotu a/nebo sladového šrotu, v množství 0,2 až 2,0 % hmot. objemových.