CS236663B2 - Manufacturing process of macro antibiotics 2%-dihydro-2%-deoxy-5-%-mycaminosyltylonolide - Google Patents
Manufacturing process of macro antibiotics 2%-dihydro-2%-deoxy-5-%-mycaminosyltylonolide Download PDFInfo
- Publication number
- CS236663B2 CS236663B2 CS818255A CS825581A CS236663B2 CS 236663 B2 CS236663 B2 CS 236663B2 CS 818255 A CS818255 A CS 818255A CS 825581 A CS825581 A CS 825581A CS 236663 B2 CS236663 B2 CS 236663B2
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- omt
- dmt
- formula
- medium
- antibiotic
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P13/00—Preparation of nitrogen-containing organic compounds
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H17/00—Compounds containing heterocyclic radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
- C07H17/04—Heterocyclic radicals containing only oxygen as ring hetero atoms
- C07H17/08—Hetero rings containing eight or more ring members, e.g. erythromycins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
- C12P19/44—Preparation of O-glycosides, e.g. glucosides
- C12P19/60—Preparation of O-glycosides, e.g. glucosides having an oxygen of the saccharide radical directly bound to a non-saccharide heterocyclic ring or a condensed ring system containing a non-saccharide heterocyclic ring, e.g. coumermycin, novobiocin
- C12P19/62—Preparation of O-glycosides, e.g. glucosides having an oxygen of the saccharide radical directly bound to a non-saccharide heterocyclic ring or a condensed ring system containing a non-saccharide heterocyclic ring, e.g. coumermycin, novobiocin the hetero ring having eight or more ring members and only oxygen as ring hetero atoms, e.g. erythromycin, spiramycin, nystatin
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/465—Streptomyces
- C12R2001/54—Streptomyces fradiae
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
- Y10S435/886—Streptomyces
- Y10S435/896—Streptomyces fradiae
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Virology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Public Health (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
Description
Vynález se týká makrolidových antibiotik, zejména sloučenin, podobných známé sloučenině tylosinu, popsané například v Tetrahedron Letters, 2339 (1970).
Přestože tylosin je velmi cennou sloučeninou, je stále zapotřebí nacházet nová antibiotika již proto, že mohou vznikat odolné kmeny. Mimoto ipři modifikaci struktury je možno získat jiné spektrum citlivých mikroorganismů. Na neštěstí chemické modifikace ve struktuře makrolidových antibiotik typu tylosinu jsou výjimečně obtížné. V J.
Org. Chem. 44 (12), 2050-2 (1979) se například uvádí téměř nepřekonatelné problémy, které vznikají při pokusu o štěpení mycinosylglykosidové vazby tylosinu chemickým způsobem. Ve většině případů tedy nezbývá než nacházet nové mikroorganismy, a to buď přírodně se vyskytující nebo syntetické za účelem získání podobných struktur.
Nyní bylo zjištěno, že makrolidová antibiotika obecného vzorce I
CH* (II ζ
kde
Q . znamená atom vodíku nebo skupinu
OH
jako'ž i z farmac.eutického - 'hlediska'přijatelné estery těchto látek nebo - jejich' adiční soli s kyselinami způsobují inhibici růstu pathogenních mikroorganismů.
V : případě, že Q znamená zbytek cukru mykarózy, je - sloučenina obecného vzorce I 20~dihydro-20-desoxy-23-demy'Ci'nosyl'tylosin (DH—DO—DMT):
V případě, že Q znamená atom vodíku, je sloučenina obecného vzorce I 20-dehydro-20-desoxy-5-0-mykammosyltylonslid (DH—DO—DMT):
CHy
Přestože nejsou uvedeny stereochemické údaje pro svrchu uvedené struktury, je zřejmé, že stereochemie je totožná se stereochemií tylosinu. Neutrálním cukrem je mykaróza a aminocukrem je myikammóza.
Jak již bylo uvedeno, působí DH—DO— —DMT a DH—DO—OMT inhibici růstu mikroorganismů, pathogenních pro živočichy. Je možno uvést, že DH—DC—DMT a DH— —DO—OMT jsou antibakteriální látky, které jsou účinné proti grampozitivním . mikroorganismům a proti čeledi Mycoplasma.
DH—DO—DMT je možno estei^ifikovat na hydroxylových skupinách v poloze 2‘, 4“, 3“, 23 a 3- a DH—DO—OMT je možno esterifikovat na hydroxylových -skupinách v po loze 2‘, 4‘, 23 a 3 za vzniku cenných acylesterový-ch derivátů. Nejjednodušší je esterifikace hydroxylových skupin ' v poloze 2* a 4‘. Typické estery jsou estery msnokarboxclových kyselím nebo po^este^ -dikarboxyiových kyselin o 2 až 18 atomech uhlíku.
DH—DO—DMT, DH—DO—OMT a jejich acylestery jsou zásadité látky, které se mění při reakci -s kyselinami na adiční soli. Tyto adiční soli jsou stejně účinné a tvoří také součást vynálezu.
Předmětem -vynálezu je způsob výroby mOkrolidových antibiotik 20-dihydrs-20-deoxy-23-demycmosyltylosinu a 20-di,hcdrs-20-desxc-5-O-mycaminosyltylsnslidu obecného vzorce I
236683
О
Ct13
III kde
Q znamená atom vodíku nebo
OH
nebo z farmaceutického hlediska přijatelného esteru nebo adiční soli této látky s kyselinou, vyznačující se tím, že se pěstuje kmen Streptomyces fradiae ATCC 31733 v živném prostředí s obsahem využitelných zdrojů uhlíku, dusíku a anorganických solí v· submerzní kultuře za aerobních podmínek při teplotě 10 až 40 °C do nahromadění antibiotika obecného vzorce I a popřípadě se odštěpí mykarosylová skupina z makrolidového antibiotika obecného vzorce I, v němž Q má odlišný význam od atomu vodíku 'hydrolýzou v kyselém prostředí při pH 4 nebo nižším a při teplotě 20 až 100 °C za získání makrolidového antibiotika obecného vzorce I, kde Q znamená atom vodíku.
DH—DO—DMT a DH—DO—OMT je možno extrahovat z alkalického filtrátu živného prostředí pomocí polárních organických rozpouštědel a tyto látky je pak možno dále čistit extrakcí, chromatografií a/nebo krystalizací.
Způsobem podle vynálezu je rovněž možno získat DH—DO—OMT hydrolýzou DH— —DO—OHT v mírně kyselém prostředí.
Absorpční spektrum DH—DO—DMT ve volné formě a DH—DO—OMT ve volné formě v Infračerveném světle v chloroformu je uvedeno na přiloženém výkrese.
Obr. 1 — DH—DO—DMT.
Obr. 2 — DH—DO—OMT.
Dále budou popsány vlastnosti DH—DO— —DMT a DH—DO—OMT.
DH—DO—DMT
Struktura této sloučeniny je zřejmá ze vzorce I.
DH—DO—DMT je bílá 'krystalická pevná látka o teplotě tání 198 až 200 °C. DH—DO— —DMT má následující přibližně procentuální složení: uhlík 63 %, vodík 9 °/o, dusík 2 procenta, kyslík 26 %. DH—DO—DMT má empirický vzorec C38H65NO12 a molekulovou hmotnost přibližně 728 (727 podle stanovení hmotovým spektrometrem).
Spektrum této látky v infračerveném světle v chloroformu je znázorněno na obr. 1. Pozorovatelná absorpční maxima se nacházejí při následujících frekvencích: (cm-1):
3676 (malé), 3598 (malé), 3470 (velké široké), 3010 (intenzívní), 2974 (intenzívní), 2938 (intenzívní), 2925 (hrb), 2880 (intenzívní), 2799 (malé), 2457 (malé široké), 1715 (intenzívní), 1676 (střední), 1629 (malé), 1595 (velmi intenzívní), 1456 (intenzívní), 1411 (intenzívní), 1380 (intenzívní), 1363 (hrb), 1315 (intenzívní), 1273 (malé), 1263 (hrb), 1220 (malé široké), 1184 (intenzívní), 1162 (intenzívní), 1144 (malé), 1117 (střední), 1096 (hrb), 1076 (intenzívní/ /hrb), 1050 (velmi intenzívní), 1015 (intenzívní), 997 (střední), 986 (střední), 958 (střední), 923 (střední), 905 (střední), 867 (malé), 842 (střední), 720 (široké) a 660 (malé).
Absorpční spektrum DH—DO—DMT v ultrafialovém světle v 95% neutrálním ethanolu má absorpční maximum při 283 nm (ε 21,800).
DH—DO—DMT ve volné formě má následující specifickou otáčivost:
[a]D25 —46,3° (c = 3,3, CHsOH).
DH—DO—OMT
DH—DO—OMT je bílá krystalická pevná látka o teplotě tání 214 až 217 °C. DH—DO— —OMT má následující přibližné procentuální složení: uhlík 64 %, vodík 9 %, dusík
2,5 %, kyslík 24,5 %. DH—DO—OMT má empirický vzorec C31H53NO9 a molekulovou hmotnost přibližně 584 (583 při provedení hmotové spektrometrie).
Absorpční spektrum DH—DO—OMT ve volné formě v infračerveném světle v chloroformu je znázorněno na obr. 2. Pozorova- i
I fc !» telná absorpční maxima se vyskytují při následujících frekvencích: (cm'1):
3677 (velmi malé), 3601 (malé), 3422 (široké), 3006 (intenzívní), 2971 (intenzívní), 2937 (intenzívní), 2879 (intenzívní), 2798 (malé), 1714 (intenzívní), 1677 (intenzívní), 1627 (malé), 1593 (velmi intenzívní), 1457 (intenzívní), 1407 (malé), 1382 (střední), 1362 (hrb), 1315 (střední), 1269 (malé), 1181 (velmi intenzívní), 1141 (malé), 1115 . (malé), 1079 a 1058 (intenzívní, dublet), 1008 (střední), 983 (střední), 923 (malé), 903 (malé), 865 (malé), 835 (malé), 712 (široký), 658 (malé) a 629 (malé).
Absorpční spektrum DH—DO—OMT v ultrafialovém světle v 95% neutrálním ethanolu má absorpční maximum při 282 nm (ε 22,400).
DH—DO—OMT ve volné formě má následující specifickou otáčivost:
[«Id25 —7,35° (c = 6, CH3OH).
Údaje Ή nukleární magnetické resonance (NMR) při 360 MHz pro. DH—DO—OMT ve volné formě v CDC13 jsou uvedeny v následující tabulce 1.
Tabulka 1
NMR při 360 MHz pro DH—DO—OMT
Poloha | * |
2 | 2,0 až 2,5 |
3 | 3,7 až 3,85 |
4 | 1,64 |
5 | 3,7 až 3,85 |
6 | NA** |
7 | NA |
8 | 2,8 |
10 | 6,27 |
11 | 7,27 |
13 | 5,78 |
14 | 2,91 |
15 | 4,96 |
16 | NA/1,64 |
17 | 0,96 |
18 | 1,05 |
19 | 1,49 |
20 | 0,89 |
21 | 1,18 |
22 | 1,82 |
23 | 3,7 až 3,85 |
1‘ | 4,31 |
2‘ | 3,55 |
3‘ | 2,40 |
4‘ | 3,08 |
5‘ | 3,22 |
6‘ | 1,31 |
NMe2 | 2,51 |
* ppm směrem dolů od tetramethylsllanu (vnitřní standard) ” Na nebylo provedeno
DH—DO—DMT a DH—DO—OMT ve volné formě jsou rozpustné ve vodě a ve většině polárních organických rozpouštědel jako acetonu, methanolu, ethanolu, chloroformu, dimethylformamidu a dimethylsulfoxidu. Adiční soli DH—DO—DMT a DH—DO—OMT s kyselinami jsou rozpustnější ve vodě než volné látky.
DH—DO—DMT a DH—DO—OMT je možno od sebe odlišit chromatografii na tenké vrstvě. Přibližné hodnoty Rf pro DH—DO— —DMT a DH—DO—OMT v jednom ze systémů jsou shrnuty v následující tabulce 2. K detekci bylo užito absorpčního spektra v ultrafialovém světle.
Tabulka 2
Údaje získané při chromatografii na tenké vrstvě a- b
Sloučenina Hodnota Rf
DH—DO—OMT0,53
DH—DO—DMT0,64
Poznámky k tabulce 2:
a prostředí: silikagel 60 (E. Merek, Darmstadt) b rozpouštědlo: směs ethylacetátu a diethylaminu v poměru 95 : 5.Příprava DH—DO—OMT
Způsobem podle vynálezu je rovněž možno získat DH—DO—OMT hydrolýzou DH— —DO—DMT v mírně kyselém prostředí. Podmínky hydrolýzy v tomto prostředí jsou z literatury známy. K uskutečnění hydrolýzy je možno užít roztoků o pH 4 nebo nižším.
Další reakční podmínkou je teplota v rozmezí 20 až 100 °C. Doba reakce, nutná k dovršení hydrolýzy se mění v závislosti na pH reakční směsi a na použité teplotě. Při vyšším pH je reakční rychlost nižší a při vyšší teplotě se reakční rychlost zvyšuje. Reakce se provádí tak, že se působí ná DH—DO— —DMT mírně kyselým roztokem na dobu dostatečnou k odstranění mýkarosylové skupiny za vzniku DH—DO—OMT.
Je také možno postupovat tak, a někdy je to zvláště výhodné, že se DH—DO—OMT připravuje tak, že se působí na ' DH—DO— —DMT přímo ve fermentačním prostředí, v němž je tato látka získána, přičemž se užívá hydrolýzy za mírně kyselých podmínek po dobu, dostatečnou k převedení DH—DO— —DMT na DH—DO—OMT, jak bylo- popsáno svrchu. Takto získaný DH—DO—OMT je možno izolovat z fermentačního prostředí běžným způsobem.
Esterové deriváty
DH—DO—DMT je možno esterifikovat na hydroxylových skupinách v polohách 2‘, 4“, 3“, 23 a 3 za vzniku acylesterových derivátů tak, že se působí acylačními činidly známým způsobem. DH—DO—OMT je možno esterifikovat na hydroxylových skupinách v polohách 2‘, 4‘, 23 a 3.
Typickými acylačními Činidly jsou anhydridy, halogenidy, které se užívají obvykle v kombinací se zásadou nebo jinou látkou pohlcující kyselinu a aktivní estery organických kyselin. Acylaci je rovněž možno provádět při použití směsi organické kyseliny a dehydratačního činidla, například N,N-dicyklohexylkarbodiimidu. Acylaci je rovněž možno provádět enzymaticky, jaik bylo popsáno Okamotem a dalšími v US patentu č. 4 092 473. Vzniklé acylové deriváty je možno oddělit a čistit známým způsobem.
Nejsnadnější je esterifikace na hydroxylové skupině v poloze 2‘ a 4‘. Esterifikací DH—DO—OMT tedy vznikají 2‘-monoesterové deriváty při použití selektivní esterifikace, známé z literatury, postupuje se například tak, že se na antibiotikum působí stechiometrickým množstvím nebo malým přebytkem acylačního činidla, například anhydridu kyseliny při teplotě místnosti po dobu 1 až 24 hodin do dovršení esterifikace.
Tyto deriváty je možno izolovat z reaikční směsi běžnými postupy jako extrakcí, chromatografií a krystalizaci. Esterifikací DH— —DO—OMT za obdobných podmínek se získají 2‘,4‘-diesterové deriváty. 2‘-monoestery DH—DO—OMT je možno získat hydrolýzou odpovídajících 2‘-monoesterů DH—DO—DMT v mírně kyselém prostředí svrchu uvedeným způsobem. Smíšené 2',4‘-diestery DH—DO— —OMT je možno získat esterifikací 2‘-monoesterů DH—DO—OMT svrchu uvedeným způPoužitelnými estery jsou estery organických kyselin včetně kyselin alifatických, cykloalifatických, arylkarboxylových, aralkylkarboxylových, heterocyklických karboxylových kyselin, kyselin sulfonových a alkoxykarbonylových o 2 až 18 atomech uhlíku a estery anorganických kyselin, například kyseliny sírové a fosforečné.
Příkladem vhodných esterů mohou být estery odvozené od kyseliny octové, chloroctové, propionové, máselné, isovalerové, alkoxykarboxylových kyselin, kyseliny stearové, cyklopropankarboxylové, cyiklohexankarboxylové, jž-cyklohexylpropionové, 1-adamantankarboxylové, benzoové, fenyloctové, fenoxyoctové, mandlové a 2-thienyloctové, jakož i kyselin alkylsulfonových, arylsulfonových, a aralkylsulfonových.
Arylkyseliny a aralkylkyseliny popřípadě nesou substituenty, například atomy halogenu, nitroskupiny, nižší alkoxyskuplny a podobně na aromatickém jádře. Vhodnými estery jsou rovněž poloestery, odvozené od dikarboxylových kyselin jako kyseliny jantarové, maleinové, fumarové, malonové a ftalové.
Výhodnou skupinu tvoří estery, přijatelné z farmaceutického hlediska. Ostatní esterové deriváty je možno použít jako muzipri). dukty.
Soli
DH—DO—DMT, DH—DO—OMT a jo||Ch deriváty mohou tvořit adiční soli s kysnu, námi. Adiční soli DH—DO—DMT a DH—Dl) —OMT a acylderiváty těchto sloučenin s Ry. selinami rovněž spadají do oboru vynrthn’.n. Tyto solí je možno použít například к 1/'(I’ láci, čištění a krystalizaci DH—DO-DMT DH—DO—OMT a jejich acylových derivátů’ Mimoto jsou uvedené soli daleko lépe pustné ve vodě.
Příkladem vhodných solí mohou být s<ilt vzniklé standardními reakcemi s orgiím,., kými kyselinami, například kyselinou stv,j. vou, chlorovodíkovou, fosforečnou, octovou jantarovou, citrónovou, mléčnou, mnh»in<j* vou, fumarovou, palmitovou, žlučovou, p(l. moovou, slizovou, D-glutamovou, D-knfrovou, glutarovou, glykolovou, fialovou, vinnou, mravenčí, laurovou, stearovou, šaliny, lovou, methansulfonovou, benzensulfono. vou, sorbinovou, pikrovou, benzoovou, sknřicoivou a podobnými kyselinami.
Adiční soli s kyselinami, přijatelná z farmaceutického hlediska tvoří zvláště výhodnou skupinu solí, které je možno získat způsobem podle vynálezu. Pod tímto po|ninm se rozumí soli, které je možno podat jako bezpečná a účinná léčiva teplokrevným vočichům.
Výroba DH—DO—DMT a DH—DO—OMT při použití S. fradiae
DH—DO—DMT a DH—DO—OMT je možno získat tak, že se pěstuje kmen Streptoinycim fradiae, například S. fradiae ATCC 3L733, který produkuje tuto látku v submerzní kultuře za aerobních podmínek ve vhodném živném prostředí do nahromadění antibiotika. Živným prostředím, užitým к pěstování Streptomyces fradiae ATCC 31733 múžo byt jakékoli běžné prostředí. Z důvodů hospodárnosti, optimálního výtěžku a snadnosti izolace jsou některá živná prostředí výhod, nější.
Výhodnými zdroji uhlíku při fermentacl ve větším měřítku jsou uhlohydráty, napřiklad dextrin, glukóza, škrob a kukuřičná mouka a oleje, například sójový olo|. Vý. hodnými zdroji dusíku jsou kukuřičná mouka, sójová mouka, rybí mouka, aminokyseliny a podobně. Z anorganických solí, ktorň je možno včlenit do živného prostředí jdo především o běžné rozpustné soli, obsahující železo, draslík, sodík, hořčík, vápník, amonné ionty, chloridové ionty, ionty ц|щ! čitanové, síranové, dusičnanové a podobně.
Živné postředí má také obsahovat základní stopové prvky, které jsou nutné pro růst a vývoj použitého produkčního organismu. Tyto stopové prvky jsou běžně pří236663 tomny jako nečistoty v ostatních složkách živného prostředí v množství, dostatečném ke splnění růstových požadavků organismu. Může však být zapotřebí přidat malé množství, například 0,2 ml/1 protipěnivého činidla jako polypropylenglykolu molekulové hmotnosti přibližně 2000, a to zejména při fermentacl ve velkém měřítku, kde pěnění živného prostředí se stává velkým problémem.
Pro výrobu větších množství DH—DO — —DMT a DH—DO—OMT je výhodná fermentace v submerzní kultuře za aerobních podmínek v tanku. Pro výrobu větších množství DH—DO—DMT a DH—DO—OMT je výhodné fermentace v tanku v submerzní kultuře za aerobních podmínek. Malá množství DH—DO—DMT a DH—DO—OMT je možno získat v třepací kultuře. Protože při očkování sporami organismu ve větším tanku dochází к období lag, je výhodnější užít vegetativního očkovacího materiálu. Befetativní očkovací materiál se získá tak, že se naočkuje malý objem živného prostředí sporami nebo myceliálními fragmenty organismu, čímž se získá čerstvá aktivní rostoucí kultura organismu. Vegetativní očkovací materiál se pak přenese do většího tanku. Prostředí, užité pro vegetativní očkovací materiál může být totéž jako prostředí, užité ve větší fermentaci, je však možno užít i jiného prostředí.
S. fradiae ATCC 31733 je možno pěstovat pří teplotě 10 až 40 °C. К optimální produkci antibiotika dochází při teplotě přibližně 28 °C.
Jak je to běžné v submerzní kultuře za aerobních podmínek, nechá se živným prostředím probublávat sterilní vzduch. Pro účinnou produkci antibiotika má být nasycení vzduchem v tanku 30% nebo vyšší při teplotě 28 °C a atmosférickému tlaku.
Produkci antibiotika je možno sledovat v průběhu fermentace tak, že se odebírají vzorky a srovnávají se testováním proti organismům, která jsou na toto antibiotikum citlivá. Použitelným organismem je například Staphylococcus aureus ATCC 9144. Biologická zkouška se obvykle provádí automatickou zákalovou metodou. Mimoto je možno sledovat produkci antibiotika kapalinovou chromatografií při detekci ultrafialovým světlem.
Po skončení fermentace v submerzní kultuře za aerobních podmínek je možno DH— —DO—DMT nebo DH—DO—OMT izolovat z fermentačního prostředí známým způsobem.
Izolace DH—DO—DMT nebo DH—DO—OMT se nejprve provádí filtrací fermentačního prostředí. Zfiltrované živné prostředí je možno dále čistit za získání požadovaného antibiotika. К čištění je možno užít celou řadu způsobů. Výhodným způsobem čištění zfiltrovaného živného prostředí je způsob, při němž se živné prostředí upraví na pH 9 a pak se extrahuje vhodným rozpouštědlem, například ethylacetátem, amylacetátem, nebo methylisobutylketonem, organická fáze se extrahuje vodným kyselým roztokem a antibiotikum se vysráží alkalizací vodného extraktu. Další čištění je možno provést extrakcí, chromatografií a/nebo srážecími metodami.
Nový mikroorganismus, který je schopen produkovat DH—DO—DMT a DH—DO—OMT byl získán chemickou mutací kmene Streptomyces fradiae, který produkuje tylosin.
Tento nový mikroorganismus produkujepouze velmi malé množství tylosinu, avšak jako hlavní složky produkuje DH—DO—DMT’ a DH—DO—OMT v přibližně stejném množství.
Nový mikroorganismus, který produkuje DH—DO—DMT a DH—DO—OMT je rovněž možno klasifikovat jako Streptomyces fradiae. Kultura tohoto organismu bylo uložena ve sbírce The Američan Type Culture Colection, 12301 Parklawn Drive, Rockville, Maryland, 2,0852, 16. října 1980, kultury je možno získat pod číslem ATCC 31733.
Jako je tomu v případě jiných organismů, vlastnosti Streptomyces fradiae ATCC 31733 se poněkud mění. Je například možno získat umělé varianty nebo mutanty ikmene ATCC 31733 působením různých fyzikálních nebo chemických mutagenů, jako jsou například ultrafialové světlo, paprsky X, paprsky gamma nebo N-methyl-N‘-nitro-N-nitrosoguanidin. Všechny přírodní a umělé varianty, mutanty a rekombinanty kmene Streptomyces fradiae ATCC 31733, které sí uchoivávají svou schopnost produkovat DH—DO—DMT a/nebo DH—DO—OMT je možno užít při provádění způsobu podle vynálezu.
DH—DO—DMT a DH—DO—OMT inhibují růst pathogenních bakterií, zvláště gram-pozitivních bakterií čeledi Mycoplasma. V následující tabulce 3 jsou uvedeny minimální inhibiční koncentrace (MICJ při měření standardním zřeďovacím způsobem v agaru, za těchto podmínek inhibují DH—DO—DMT a DH—DO—OMT ve volné formě růst některých bakterií.
236863
1413
Tabulka 3
Účinost in vitro pro DH—DO—DMT a DH—DO—OMT
Organismus
MIC (.ug/ml)
DH—DO—DMT DH—DO—OMT
Streptococcus aureus NRRL В 313 | 128 | 4 |
Staphylococcus aureus V41 | 128 | 4 |
Staphylococcus aureus X400 | > 128 | 8 |
Staphylococcus aureus S13E | 64 | 4 |
Staphylococcus epidermidis EPI1 | 128 | 8 |
Staphylococcus epidermidis EPI2 | 64 | 8 |
Streptococcus pyogenes C203 | > 128 | 8 |
Streptococcus pneumoniae Parik 1 | > 128 | 8 |
Streptococcus faecium ATCC 9790 | > 128 | 16 |
Streptococcus sp. skupina D 9960 | > 128 | 16 |
Haemophilus influenzae C. L. | > 128 | 16 |
Haemophilus influenzae 76 | > 128 | 16 |
Shigella sonnei N9 | > 128 | > 128 |
Escherichia coli N10 | > 128 | > 128 |
Escherichia coli EC14 | > 128 | > 128 |
Escherichia coli TEM | > 128 | 64 |
Klebsiella pneumoniae X26 | > 128 | 4 |
Klebsiella pneumoniae KAE | > 128 | > 128 |
DH—DO—OMT rovněž inhibuje některé anaerobní bakterie. Tabulka 4 shrnuje MIC pro DH—DO—OMT v případě těchto· bakterií. Stanovení bylo prováděno zředěním na agaru při odečítání za 24 hodiny.
Tabulka 4
Účinnost DH—DO—OMT in vitro proti anaerobním bakteriím
Bactero dss melaninogenicus
1856/28 | > 8 |
Bacteroides melam‘nogeuicus | |
2736 | >8 |
Bacterioides vulgatis 1211 | > 8 |
Bacteroides corrodens 1874 | > 8 |
Fusobacterium symbiosum | |
1470 | > 8 |
Fusobacterium necrophorum | |
6054A | 8 |
Organismus MIC (^g/mlj
Clostridium difficile 29942
Clostridium perfringens 812
Clostridium septicum 11282
Eubacterium aerofaciens 12352
Peptococcus asaccharolyticus
1302> 8
Peptococcus prevoti 1281> 8
Peptostreptococcus anaerobius 1428 >8
Peptostreptococcus intermedius
1264 >8
Propionibacterium acnes 792
Bacteroides bragilis 111 >8
Bacteroides feagilis 1877>8
Bacteroides fragilis 1936B> 8
Bacteroides thetaiotaomicron
1438> 8
DH—DO—OMT působí inhibici růstu Chlamydia trachomatis v buněčné kultuře při MIC 0,5 .ug/niL Mimoto působí DH—DO— —OMT inhibici čeledi Mycoplasma. Například byla stanovena pro DH—DO—OMT hodnota MIC 12,5 ,ug/ml proti M. gallisepticum a M. synviae.
DH—DO—OMT má také iv vivo antimikrobiální účinnost proti experimentálním bakteriálním infekcím. V případě, že se dvě dávky zkoumané látky podají myším v průběhu experimentální infekce, je možno vyjádřit zjištěnou účinnost jako hodnotu EDso (účinná látka v mg/kg, schopná zachránit 50 % pokusných zvířat, jak bylo popsáno v publikaci Warren Wick a další J. Bacteriol. 81, 233 až 235 (1961)]. Hodnoty EDso, které byly zjištěny pro DH—DO—OMT ve volné formě jsou uvedeny v následující tabulce 5.
í
2366S3
1516
Tabulka 5*
Účinnost DH—DO—OMT proti experimentální infekci u myší
Organismus Cesta podání LDsoEDso (mg/kg X 2)
Staphylococcus aureus 3055 Staphylococcus aureus 3055 Streptococcus pyogenes C203 Streptococcus pneumoniae Park I
Makrolidy podle vynálezu budou obvykle užity pro léčebné účely ve formě veterinárních přípravků, v nichž makrolidová účinná složka bude smísena s jedním nebo větším počtem netoxických nosičů. Povaha těchto přípravků je zcela běžná a je známa každému odborníkovi.
Přestože DH—DO—DMT a jeho deriváty mají určitou antibakteríální účinnost, je výhodnější užít tyto látky jako meziprodukty pro výrobu DH—DO—OMT.
DH—DO—OMT, acylesterové deriváty této látky a její adiční soli s kyselinami je možno užít jako povrchové desinfekční prostředky. Pro tento účel jsou vhodné roztoky s malou koncentrací, například 0,01 hmotnostních %. Tyto roztoky, výhodné také jako smáčedlo a čisticí prostředek je možno užít к desinfekci osob a povrchů tam, kde je důležité udržení sterilních podmínek.
Vynález bude osvětlen následujícími příklady.
Příklad 1
A. Fermentace DH—DO—DMT a DH—DO— —OMT v třepací lahvi
Lyofilizovaná peleta Streptomyces fradiae ATCC 31733 se disperguje v 1 až 2 ml sterilizované vody. 0,5 ml tohoto roztoku se užije к naočkování 150 ml vegetativního živného prostředí následujícího složení:
Složka Množství (°/o) kukuřičný výluh1,0 extrakt z kvasnic0,5 sójové poikrutiny0,5 uhličitan vápenatý0,3 sójový olej (surový)0,45 deionizovaná voda97,25
Je také možno postupovat tak, že se vegetativní kultura S. fradiae ATCC 31733, uchovávána po objemu 1 ml v kapalném dusíku nechá rychle roztát a pak se užije к naočkování vegetativního živného prostředí. Naočkované vegetativní živné prostředí se inkubuje v Erlenmeyerově baňce o objemu 500 ml při teplotě 29 °C po dobu 48 hodin v uzavřené třepačce pří 300 výkyvech za minutu.
Toto inkub ováné vegetativní živné ipro-
perorálně | 100 | 44 |
podkožně | 221 | 37,3 |
perorálně | 64 | 75,3 |
perorálně | 20,4 | 223,6 |
středí se v množství 0,5 ml užije к naočkování 7 ml produkčního prostředí, které má následující složení:
Složka | Množství (°/o) |
řepná melasa | 2,0 |
kukuřičná mouka | 1,5 |
rybí mouka | 0,9 |
kukuřičný gluten | 0,9 |
chlorid sodný | 0,1 |
hydrogenfosforečnan | |
amonný | 0,04 |
uhličitan vápenatý | 0,2 |
sójový olej (surový) | 3,0 |
deionizovaná voda | 91,36 |
Naočkované fermentační prostředí se inkubuje v lahvi o objemu 50 ml při teplotě 29 CC po dobu 6 dní v uzavřené třepačce při 300 výkyvech za minutu.
B. Fermentace DH—DO—DMT a DH—DO— —OMT v tanku
Aby bylo možno získat větší objem očkovacího materiálu, užije se 1200 ml inkubovaného vegetativního prostředí, připraveného způsobem podle odstavce А к naočkování 950.10 ~3 m3 vegetativního živného prostředí následujícího složení:
Složka | Množství (°/o) |
kukuřičný výluh | 1,0 |
sójová mouka | 0,5 |
extrakt z kvasnic | 0,5 |
uhličitan vápenatý | 0,3 |
sójový olej (surový) | 0,5 |
lecithin (surový) | 0,015 |
voda | 97,185 |
Živné prostředí se upraví na pH 8,5 přidáním roztoku hydroxidu sodného o koncentraci 50 °/o.
Toto vegetativní prostředí se inkubuje v tanku o objemu 1325.10“3 m3 48 hodin při teplotě 28 °C za současného provzdušňování a míchání.
545.103 m3 inkubovaného živného projuředí z druhého stupně se užije к naočkování 3785,41.103 m3 sterilního produkčního prostředí následujícího složení:
236683
Složka | Množství (%) |
rybí mouka | 0,875 |
kukuřičná mouka | 1,5 |
kukuřičný gluten | 0,875 |
uhličitan vápenatý | 0,2 |
chlorid sodný | 0,1 |
hydrogenfosforečnan | |
amonný | 0,04 |
řepná melasa | 2,0 |
sójový olej (surový) | 3,0 |
lecithin | 0,09 |
voda | 91,32 |
Živné prostředí se upraví na pH 7,2 přidáním roztoku hydroxidu sodného o koncentraci 50 %.
Naočkované produkční prostředí se podrobí fermentaci v tanku o objemu 6056. . 10-3 m3 ipo dobu 8 až 9 dnů při teplotě 28 °C. Fermentační živné prostředí se provzdušňuje sterilním vzduchem tak, aby bylo nasyceno rozpuštěným kyslíkem na 30 až 50 % a současně se míchá běžnými míchadly rychlostí 250 otáček za minutu.
Příklad 2
Izolace DH—DO—DMT a DH—DO—OMT litrů živného prostředí, připraveného způsobem podle příkladu 1, odstavec В se zfiltruje za použití pomocného prostředku pro filtraci. Myceliální koláč se promyje vodou a 30 litrů filtrátu a promývacího roztoku se upraví na pH 9,1 přidáním lO °/o hydroxidu sodného. Výsledný roztok se dvakrát extrahuje ethylacetátem (15 litrů a 5,5 litrů). Ethylacetátové extrakty se slijí a extrahují 9 litry a pak 3 litry zředěného roztoku kyseliny fosforečné, vodná fáze se upraví na pH 4,1 přidáním kyseliny fosforečné o koncentraci 28 %. 8,8 litrů slitých vodných extraktů se upraví na pH 9,2 přidáním hydroxidu sodného, načež se dvakrát extrahují chloroformem, pokaždé 2 litry. Chloroformové extrakty se vysuší a odpaří dosucha, čímž se získá 32 g pevného materiálu.
g tohoto materiálu se rozpustí v ethyl acetátu a zpracovává se pomocí šestistupňového protiproudového zpracování ethylacetátem a 0,5 M fosfátovým pufrem o pH 6,1, čímž se získá 2,5 g DH—DO—OMT. Dalším šestistupňovým zpracováním při pH 5,5 se získá ještě 0,1 g DH—DO—OMT. DH— —DO—OMT se pak nechá krystalizovat z bezvodého acetonu.
Tímto způsobem se rovněž získá 1,42 g surového DH—DO—DMT. Tato látka se čistí protiproudovým systémem, který sestává z organické fáze, a to směsi ethylacetátu a heptanu v poměru 1: 2 a z vodné fáze, kterou tvoří 0,5 M fosfátový pufr o pH 6,2. Po šesti stupních se částečně oddělí DH—DO— —DMT. Pak se nechá krystalizovat z vodného met-hanolu. Z 1 g surového materiálu se získá 400 mg čištěného DH—DO—DMT.
Příklad 3
Výroba DH—DO—OMT z DH—DO—DMT
DH—DO—DMT, připravený způsobem podle příkladu 2 se rozpustí ve zředěném roztoku kyseliny chlorovodíkové (kyselina chlorovodíková se přidává do vodného roztoku tak dlouho, až se dosáhne pH 1,8). Výsledný roztok se nechá stát 24 hodin při teplotě místnosti a pak se upraví na pH 9,0 přidáním hydroxidu sodného. Alkalický roztok se extrahuje ethylacetátem, dichlormethanem nebo chloroformem. Extrakt se vysuší a odpaří ve vakuu, čímž se získá DH— —DO—OMT.
Přikládá
Další možný způsob výroby DH—DO—OMT
DH—DO—OMT je také možno připravit z DH—DO—DMT tak, že se působí na DH— —DO—DMT ve fermentačním prostředí, v němž byla tato látka získána slabou kyselinou, tak jak bylo svrchu popsáno v příkladu 3. Izolace DH—DO—OMT se provádí způsobem, který je podobný způsobu, popsanému v· příkladu 2.
Claims (1)
- Způsob výroby makrolidových antibiotik20-dihydro-20-deoxy-23-demycinosyltylosi nu a 20-dihydro-20-deoxy-5-0-mycaminosyltylonolidu obecného vzorce I (kdeQ znamená atom vodíku neboOH nebo z farmaceutického hlediska přijatelného esteru nebo adiční soli této látky s kyselinou, vyznačující se tím, že se pěstuje kmen Streptomyces fradiae ATCC 31733 v živném prostředí s obsahem využitelných zdrojů uhlíku, dusíku a anorganických solí v submerzní kultuře za aerobních podmínek při teplotě 10 až 40 °C do nahromadění antibiotika obecného vzorce I a popřípadě se odštěpí mykarosylová skupina z makrolidového antibiotika obecného vzorce I, v němž Q má odlišný význam od atomu vodíku hydroiýzou v kyselém prostředí při pH 4 nebo nižším a při teplotě 20 až 100 °C za získání makrolidového antibiotika obecného vzorce I, v němž Q znamená atom vodíku a popřípadě se vytvoří ester nebo sůl antibiotika obecného vzorce I.
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US06/205,539 US4304856A (en) | 1980-11-10 | 1980-11-10 | Process for producing 20-dihydro-20-deoxy-23-demycinosyltylosin |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CS236663B2 true CS236663B2 (en) | 1985-05-15 |
Family
ID=22762621
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CS818255A CS236663B2 (en) | 1980-11-10 | 1981-11-10 | Manufacturing process of macro antibiotics 2%-dihydro-2%-deoxy-5-%-mycaminosyltylonolide |
Country Status (22)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US4304856A (cs) |
EP (1) | EP0052005B1 (cs) |
JP (1) | JPS57108097A (cs) |
KR (1) | KR850001666B1 (cs) |
AR (1) | AR227563A1 (cs) |
AU (1) | AU7731381A (cs) |
BG (1) | BG36939A3 (cs) |
CA (1) | CA1169374A (cs) |
CS (1) | CS236663B2 (cs) |
DD (1) | DD202032A5 (cs) |
DE (1) | DE3168693D1 (cs) |
DK (1) | DK494381A (cs) |
FI (1) | FI813527L (cs) |
GB (1) | GB2086902B (cs) |
GR (1) | GR75386B (cs) |
HU (1) | HU190360B (cs) |
IE (1) | IE51826B1 (cs) |
IL (1) | IL64240A (cs) |
PH (1) | PH17375A (cs) |
PL (1) | PL233747A1 (cs) |
PT (1) | PT73947B (cs) |
ZA (1) | ZA817718B (cs) |
Families Citing this family (11)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4419508A (en) * | 1980-11-10 | 1983-12-06 | Eli Lilly And Company | 20-Dihydro-20-deoxy-23-demycinosyltylosin and process for its production |
AU551142B2 (en) * | 1981-07-09 | 1986-04-17 | Zaidan Hojin Biseibutsu Kagaku Kenkyukai | Tylosin derivatives |
US4423148A (en) * | 1982-07-02 | 1983-12-27 | Eli Lilly And Company | Process for producing 20-dihydro-20-deoxy-23-de(mycinosyloxy)tylosin |
US4528369A (en) * | 1982-07-02 | 1985-07-09 | Eli Lilly And Company | 20-Dihydro-20-deoxy-23-de(mycinosyloxy)tylosin |
US4452784A (en) * | 1982-07-19 | 1984-06-05 | Eli Lilly And Company | C-23-Modified derivatives of DMT |
US4443436A (en) * | 1982-09-13 | 1984-04-17 | Eli Lilly And Company | C-20-Modified macrolide derivatives of the macrolide antibiotics tylosin, desmycosin, macrocin, and lactenocin |
IL71032A0 (en) * | 1983-02-28 | 1984-05-31 | Lilly Co Eli | C-20 and c-23-modified macrolide derivatives |
US4629786A (en) * | 1983-02-28 | 1986-12-16 | Eli Lilly And Company | C-20- and C-23 modified macrolide derivatives |
US4468511A (en) * | 1983-02-28 | 1984-08-28 | Eli Lilly And Company | C-20- And C-23-Modified macrolide derivatives |
DE69402714T2 (de) * | 1993-07-15 | 1997-07-31 | Pfizer | Amid-derivate von 16-gliedrige heterocyclen als antibiotische macrolide |
US6362009B1 (en) | 1997-11-21 | 2002-03-26 | Merck & Co., Inc. | Solid phase synthesis of heterocycles |
Family Cites Families (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US3178341A (en) * | 1960-06-27 | 1965-04-13 | Lilly Co Eli | Antibiotics tylosin and desmycosin and derivatives thereof |
US3326759A (en) * | 1962-07-19 | 1967-06-20 | Lilly Co Eli | Antibiotics macrocin and lactenocin |
US3344024A (en) * | 1963-04-17 | 1967-09-26 | American Cyanamid Co | Antibiotic am-684 and method of production |
BE667952A (cs) * | 1964-08-05 | |||
US4161523A (en) * | 1972-11-15 | 1979-07-17 | Schering Corporation | Rosamicin esters, acid addition salts and methods for production thereof |
US4056616A (en) * | 1976-03-05 | 1977-11-01 | Schering Corporation | Rosamicin derivatives and method of using same |
GB1587685A (en) * | 1977-03-09 | 1981-04-08 | Microbial Chem Res Found | Macrolactone derivatives and their production |
US4252898A (en) * | 1979-05-23 | 1981-02-24 | Eli Lilly And Company | Antibiotics A6888C and A6888X |
NL8004922A (nl) * | 1979-09-19 | 1981-03-23 | Toyo Jozo Kk | Deformyltylosinederivaten. |
-
1980
- 1980-11-10 US US06/205,539 patent/US4304856A/en not_active Expired - Lifetime
-
1981
- 1981-11-06 HU HU813327A patent/HU190360B/hu unknown
- 1981-11-09 FI FI813527A patent/FI813527L/fi not_active Application Discontinuation
- 1981-11-09 EP EP81305312A patent/EP0052005B1/en not_active Expired
- 1981-11-09 DK DK494381A patent/DK494381A/da not_active Application Discontinuation
- 1981-11-09 AR AR287380A patent/AR227563A1/es active
- 1981-11-09 IE IE2616/81A patent/IE51826B1/en unknown
- 1981-11-09 AU AU77313/81A patent/AU7731381A/en not_active Abandoned
- 1981-11-09 GR GR66462A patent/GR75386B/el unknown
- 1981-11-09 PH PH26459A patent/PH17375A/en unknown
- 1981-11-09 IL IL64240A patent/IL64240A/xx unknown
- 1981-11-09 ZA ZA817718A patent/ZA817718B/xx unknown
- 1981-11-09 DE DE8181305312T patent/DE3168693D1/de not_active Expired
- 1981-11-09 PL PL23374781A patent/PL233747A1/xx unknown
- 1981-11-09 PT PT73947A patent/PT73947B/pt unknown
- 1981-11-09 CA CA000389729A patent/CA1169374A/en not_active Expired
- 1981-11-09 JP JP56180250A patent/JPS57108097A/ja active Pending
- 1981-11-09 GB GB8133704A patent/GB2086902B/en not_active Expired
- 1981-11-10 DD DD81234840A patent/DD202032A5/de unknown
- 1981-11-10 BG BG054108A patent/BG36939A3/xx unknown
- 1981-11-10 KR KR1019810004342A patent/KR850001666B1/ko active
- 1981-11-10 CS CS818255A patent/CS236663B2/cs unknown
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
GB2086902B (en) | 1985-06-26 |
AR227563A1 (es) | 1982-11-15 |
DD202032A5 (de) | 1983-08-24 |
EP0052005B1 (en) | 1985-01-30 |
DK494381A (da) | 1982-05-11 |
PT73947B (en) | 1983-11-30 |
IE812616L (en) | 1982-05-10 |
AU7731381A (en) | 1982-05-20 |
PH17375A (en) | 1984-08-06 |
CA1169374A (en) | 1984-06-19 |
HU190360B (en) | 1986-08-28 |
KR850001666B1 (ko) | 1985-11-13 |
IL64240A (en) | 1985-08-30 |
DE3168693D1 (en) | 1985-03-14 |
IE51826B1 (en) | 1987-04-01 |
EP0052005A1 (en) | 1982-05-19 |
JPS57108097A (en) | 1982-07-05 |
FI813527L (fi) | 1982-05-11 |
KR830007833A (ko) | 1983-11-07 |
GB2086902A (en) | 1982-05-19 |
BG36939A3 (en) | 1985-02-15 |
GR75386B (cs) | 1984-07-13 |
US4304856A (en) | 1981-12-08 |
ZA817718B (en) | 1982-10-27 |
IL64240A0 (en) | 1982-02-28 |
PL233747A1 (cs) | 1982-11-22 |
PT73947A (en) | 1981-12-01 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US4321361A (en) | Demycinosyltylosin and process for its production | |
US4559301A (en) | Process for preparing macrocin derivatives | |
CS236663B2 (en) | Manufacturing process of macro antibiotics 2%-dihydro-2%-deoxy-5-%-mycaminosyltylonolide | |
US4385116A (en) | Demethylmacrocin and process for its production | |
CA1211731A (en) | De(mycinosyloxy)tylosin derivatives | |
KR840001193B1 (ko) | 마크로라이드 항생물질의 제조방법 | |
US4419508A (en) | 20-Dihydro-20-deoxy-23-demycinosyltylosin and process for its production | |
EP0042694A1 (en) | Macrolide antibiotics | |
US4419447A (en) | Fermentation process for producing demycinosyltylosin | |
US4486584A (en) | Demethylmacrocin compounds and derivatives thereof | |
US4537957A (en) | Process for the production of mycaminosyltylonolide | |
US4334019A (en) | Process for producing de(mycinosyloxy)tylosin | |
US4528369A (en) | 20-Dihydro-20-deoxy-23-de(mycinosyloxy)tylosin | |
US4656258A (en) | Macrocin derivatives | |
JPH0365944B2 (cs) | ||
CA1175423A (en) | Method of preparing 23-deoxy-5-0- mycaminosyltylonolide |