CS231217B1

CS231217B1 - Diagnostický prostředek

Info

Publication number: CS231217B1
Application number: CS809235A
Authority: CS
Inventors: Frantisek Svec; Karel Bouchal; Eva Zurkova; Jaroslav Kalal; Hans-Georg Batz; Paul Tanswell; Manfred Baier
Original assignee: Frantisek Svec; Karel Bouchal; Eva Zurkova; Jaroslav Kalal; Batz Hans Georg; Paul Tanswell; Manfred Baier
Priority date: 1980-12-23
Filing date: 1982-06-03
Publication date: 1984-10-15
Also published as: CS225368B1; CS225010B1; CS413582A1; CS225369B1; CS225366B1; CS225367B1; HU191603B

Abstract

Diagnostický prostředek obsahuje hydrofilní latexové částice o průměru 0,15 až 1 ,5 <um sestávající ze zpolymerizovaných jednotek obecného vzorce -CH. CR X - CH, - R , kde R* 1 je vodík nebo metyl a X je —0— nebo -CO-O- a R2 je skupina -CH=O, -CH(OH)-CH2-NH2, -CH - CH, nebo -CH(0H)-CH,-SH nebo a,'2 2 směsi zpolymerizovaných jednotek obecného vzorce I s 1 až 99 % hmot. zpolymerizovaných monomerů vybraných ze skupiny zahrnující 3tyren, divinylbenzen, alkyl- či hydroxyalkylakryláty nebo metakryláty, akryl- či metakrylemidy, N-vinylpyrrolidon, vinylacetát, butadien a isopren, na nichž je přímo nebo přes prostorovou spojku navázána biologický a/nebo immunologicky aktivní látka vybraná ti ce skupiny zahrnující peptidy, proteiny, enzymy, hormony, vitaminy, antigeny, protilátky a mikroorganismy.

Description

(54) Diagnostický prostředek

Diagnostický prostředek obsahuje hydrofilní latexové částice o průměru 0,15 až ,5 <um sestávající ze zpolymerizovaných jednotek obecného vzorce

-CH.

CR

X - CH, - R , kde

R^{* 1} je vodík nebo metyl a

X je —0— nebo -CO-O- a

R² je skupina -CH=O, -CH(OH)-CH₂-NH₂,

-CH - CH, nebo -CH(0H)-CH,-SH nebo a,'^{2 2} směsi zpolymerizovaných jednotek obecného vzorce I s 1 až 99 % hmot. zpolymerizovaných monomerů vybraných ze skupiny zahrnující 3tyren, divinylbenzen, alkyl- či hydroxyalkylakryláty nebo metakryláty, akryl- či metakrylemidy, N-vinylpyrrolidon, vinylacetát, butadien a isopren, na nichž je přímo nebo přes prostorovou spojku navázána biologický a/nebo immunologicky aktivní látka vybraná ti ce skupiny zahrnující peptidy, proteiny, enzymy, hormony, vitaminy, antigeny, protilátky a mikroorganismy.

2312Π

Vynález se týká diagnostického prostředku, jehož charakteristickým znakem je, že jednou ze součástí jsou latexové částice.

Hydrofilní latexové částice nacházejí Široké uplatnění v nejrůznějších oblastech biochemie, zejména jako nosiče biochemicky či iramunologieky aktivních látek. Dosavadní způsoby syntézy latexových částic schopných vázat na svém povrchu biochemicky či immunologicky aktivní látky spočívá zejména ve standardní emulzní polymerizaci. Princip běžné emulzní polymerizace je obecně znám a spočívá v dispergování ve vodě omezeně rozpustného monomeru nebo směsi ve vodě rozpustných monomerů ve vodném roztoku emulgátoru a iniciátoru, zahřátí směsi na teplotu, při níž jsou generovány radikály zahajující řětezovou polymerizaci a udržování této směsi při požadované teplotě za mícháni po dobu potřebnou k dosažení určité konverze.

Samotná polymerizace probíhá zpočátku v koloidních útvarech zvaných micely (v nichž je monomer rozpustný) tvořených vhodně stericky uspořádanými molekulami povrchově aktivní látky. Po skončené polymerizaci zůstává povrchově aktivní látka i nadále na povrchu vzniklých polymerních latexových částic a stabilizuje je tek proti koagulaci. Odstranění emulgátoru je sice z větší části možné, leč dochází bu3 k nevratné ztrátě individuálního charakteru diskrétních polymerních částic jejich agregací při koagulaci nebo alespoň k nemožnosti uvedení částic resuspendováním do původního stavu. Tato nevýhoda klasických latexů je odstranitelná použitím techniky tzv. bezemulgátorové emulzní polymerizece, kdy částice jsou autostabilizovány ionogenními skupinami, jež jsou součástí polymerního řetězce vzniklou při iniciační reakci.

NejnovějSím příkladem této polymerizece je způsob podle čs. autorského osvědčení č. 225 010 popisující syntézu latexových hydrofilních částic homo- či kopolymerizací monomerů obecného vzorce

CH, = CR, - X - CH, - CH - CH,

2 _v/2

O kde

H₁ je vodík nebo metyl a

X je -O- nebo -CO-O- v nepřítomnosti emulgátoru vedoucí ke sférickým polymerním částicím stejné velikosti.

Tyto částice nesou jisté množství reaktivních skupin epoxidových, které lze použít k navázání biologicky či immunologicky sktivních látek na povrch částic. Epoxidová skupina nesporně splňuje řadu požadavků kladených na syntézu konjugátů polymer-aktivní látka, leč její nevýhodou je, že samotná reakce probíhá relativně pomalu. Dlouhá inkubace pak může v některých případech vést ke ztrátě biologické či immunologické aktivity. Tomu lze zabránit použitím nosičů, jejichž funkční skupiny jsou v porovnání s epoxidovou reaktivnější, tzn. že za podmínek,při nichž se immobllizace může z důvodů stability immobilizovaných látek realizovat, reagují rychleji.

To umožňuje získávat materiály vhodné pro použití v diagnostickém prostředku s dostatečnou aktivitou a bez dlouhých časových ztrát.

Předmětem vynálezu Je diagnostický prostředek, vyznačený tím, že obsahuje hydrofilní

Claims

latexové částice o průměru 0,15 až 1,5/um sestávající ze zpolymerizovaných jednotek obecného vzorce

-CH, - CR¹ ¹ 2 X - CH₂ - R , kde R¹ je vodík nebo metyl e X je -O- nebo -CQ-0 a R² je skupina -CH=O, -CH(OH)~CH₂-NH₂,

-CH - CH, nebo -CH(OH)-CH,-SH nebo směsi zpolymerizovaných jednotek obecného vzorce I \ / s 1 až 39 % hmot., zpolymerizovaných monomerů vybraných ze skupiny zahrnující styren, divinylbenzen, alkyl- či hydroxyelkylakryláty nebo metakryláty, akryl- či metakrylamidy, N-vinylpyrrolidon, vinylacetét, butadien a isopren, na nichž je přímo nebo přes prostorovou spojku navázána biologicky a/nebo immunologicky aktivní látka vybraná ze skupiny zahrnující peptidy, proteiny, enzymy, hormony, vitamíny, antigeny, protilátky a mikroorganismy.

Konkrétní použití je uvedeno v příkladech, které ukazují možnosti, avšak neomezují vynález.

Příklad 1

V 80 ml destilované vody se rozpustí 0,08 g peroxodvojsíranu draselného a 30minutovým probubláváním dusíkem se z roztoku odstraní vzdušný kyslík. Současně se stejným způsobem zbaví vzdušného kyslíku 10 ml glycidylmetakrylátu. Obě komponenty se převedou do skleněného reaktoru a dalších 10 minut se probublají dusíkem. Poté se reaktor uzavře a směs ponechá za stálého míchání 6 hodin reagovat při teplotě 65 °C. Po uplynutí této doby je konverze reakce 98 %. Reakčním produktem, je latex tvořený kulovitými, monodisperzně distribuovanými částečkami polyglycidylmetakrylátu o průměru 0,44 (Um.

Příklad 2 + H,0 + Na JO, : ^{2 4} (Latex)-OCH,-CH-CH, —-—» (Latex)-OCH,-CH - CH--? (Latex)-OCH, - CHO \/ ^{2 2} ι l^{2 2}

O OH OH

20 ml latexové suspenze polyglycidylmetakrylátu připravené podle příkladu 1 bylo mícháno přes noc při pokojové teplotě s 5 ml 2 N louhem sodným a poté 5 hodin dialyzováno proti vodě. V suspenzi bylo po přídavku 100 mg perjodátu sodného pH nastaveno na hodnotu 3 8 přes noc při pokojové teplotě mícháno a směs dialyzována proti vodě 4 hodiny.

Příklad 3

NH, (latex)-OCH,-CH - CH, \/

O

-r (latexJ-OCHg-CH - 0¾

NH₂ OH ch₂ - CO.

-OCH,

N-OC - CH,CH,C NH CH, - CH ' *2^W“2

II ch₂ - CO'

OCH,

1. amidace, 2. kyselá hydrolýza acetalu (latex)-OCH, - CH - NH - C - CHg-CHg -C - NH CH, - CHO

I c₂-oh

II