CS228510B2 - Method for producing a packing prod for quick liquid chromatography - Google Patents
Method for producing a packing prod for quick liquid chromatography Download PDFInfo
- Publication number
- CS228510B2 CS228510B2 CS484781A CS484781A CS228510B2 CS 228510 B2 CS228510 B2 CS 228510B2 CS 484781 A CS484781 A CS 484781A CS 484781 A CS484781 A CS 484781A CS 228510 B2 CS228510 B2 CS 228510B2
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- gel
- water
- vinyl
- esterification
- molecular weight
- Prior art date
Links
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 title claims description 16
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title 1
- 238000012856 packing Methods 0.000 title 1
- 239000000178 monomer Substances 0.000 claims abstract description 47
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 claims abstract description 21
- 229920001567 vinyl ester resin Polymers 0.000 claims abstract description 21
- 150000001732 carboxylic acid derivatives Chemical class 0.000 claims abstract description 20
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims abstract description 10
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 claims description 37
- 238000005886 esterification reaction Methods 0.000 claims description 32
- 238000007127 saponification reaction Methods 0.000 claims description 31
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 29
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 21
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 7
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 4
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 41
- 239000011148 porous material Substances 0.000 abstract description 26
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 abstract description 25
- 238000006116 polymerization reaction Methods 0.000 abstract description 18
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 abstract description 13
- ZFSLODLOARCGLH-UHFFFAOYSA-N isocyanuric acid Chemical group OC1=NC(O)=NC(O)=N1 ZFSLODLOARCGLH-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 13
- 125000000391 vinyl group Chemical group [H]C([*])=C([H])[H] 0.000 abstract description 5
- 238000007334 copolymerization reaction Methods 0.000 abstract description 2
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 abstract 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 abstract 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 abstract 1
- 230000000704 physical effect Effects 0.000 abstract 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 216
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 38
- 238000005227 gel permeation chromatography Methods 0.000 description 30
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 23
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 23
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 20
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 20
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 18
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 18
- DKPFZGUDAPQIHT-UHFFFAOYSA-N butyl acetate Chemical compound CCCCOC(C)=O DKPFZGUDAPQIHT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 15
- XTXRWKRVRITETP-UHFFFAOYSA-N Vinyl acetate Chemical compound CC(=O)OC=C XTXRWKRVRITETP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 14
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 13
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 12
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- KOMNUTZXSVSERR-UHFFFAOYSA-N 1,3,5-tris(prop-2-enyl)-1,3,5-triazinane-2,4,6-trione Chemical compound C=CCN1C(=O)N(CC=C)C(=O)N(CC=C)C1=O KOMNUTZXSVSERR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- OZAIFHULBGXAKX-UHFFFAOYSA-N 2,2'-azo-bis-isobutyronitrile Substances N#CC(C)(C)N=NC(C)(C)C#N OZAIFHULBGXAKX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 125000004185 ester group Chemical group 0.000 description 10
- WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N Acetic anhydride Chemical compound CC(=O)OC(C)=O WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 9
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- IMROMDMJAWUWLK-UHFFFAOYSA-N Ethenol Chemical group OC=C IMROMDMJAWUWLK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 8
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 8
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 7
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 7
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 6
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 6
- 108010062374 Myoglobin Proteins 0.000 description 6
- 102000036675 Myoglobin Human genes 0.000 description 6
- 108010058846 Ovalbumin Proteins 0.000 description 6
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 description 6
- 238000011088 calibration curve Methods 0.000 description 6
- 229940092253 ovalbumin Drugs 0.000 description 6
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 6
- NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N 2-Propenoic acid Natural products OC(=O)C=C NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 5
- 238000000862 absorption spectrum Methods 0.000 description 5
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 5
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 5
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 5
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 4
- 239000004372 Polyvinyl alcohol Substances 0.000 description 4
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 4
- NNBZCPXTIHJBJL-UHFFFAOYSA-N decalin Chemical compound C1CCCC2CCCCC21 NNBZCPXTIHJBJL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 4
- 150000002148 esters Chemical group 0.000 description 4
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 4
- 229920002689 polyvinyl acetate Polymers 0.000 description 4
- 239000011118 polyvinyl acetate Substances 0.000 description 4
- 229920002451 polyvinyl alcohol Polymers 0.000 description 4
- 239000002002 slurry Substances 0.000 description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 4
- 238000010557 suspension polymerization reaction Methods 0.000 description 4
- ZWEHNKRNPOVVGH-UHFFFAOYSA-N 2-Butanone Chemical compound CCC(C)=O ZWEHNKRNPOVVGH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M Potassium hydroxide Chemical compound [OH-].[K+] KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 3
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 3
- 230000032050 esterification Effects 0.000 description 3
- UIWXSTHGICQLQT-UHFFFAOYSA-N ethenyl propanoate Chemical compound CCC(=O)OC=C UIWXSTHGICQLQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 3
- 239000003999 initiator Substances 0.000 description 3
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 3
- 238000005809 transesterification reaction Methods 0.000 description 3
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 3
- BBMCTIGTTCKYKF-UHFFFAOYSA-N 1-heptanol Chemical compound CCCCCCCO BBMCTIGTTCKYKF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004342 Benzoyl peroxide Substances 0.000 description 2
- OMPJBNCRMGITSC-UHFFFAOYSA-N Benzoylperoxide Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(=O)OOC(=O)C1=CC=CC=C1 OMPJBNCRMGITSC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IMNFDUFMRHMDMM-UHFFFAOYSA-N N-Heptane Chemical compound CCCCCCC IMNFDUFMRHMDMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 2
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LEHOTFFKMJEONL-UHFFFAOYSA-N Uric Acid Chemical compound N1C(=O)NC(=O)C2=C1NC(=O)N2 LEHOTFFKMJEONL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- TVWHNULVHGKJHS-UHFFFAOYSA-N Uric acid Natural products N1C(=O)NC(=O)C2NC(=O)NC21 TVWHNULVHGKJHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 2
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 2
- 235000019400 benzoyl peroxide Nutrition 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- CVSVTCORWBXHQV-UHFFFAOYSA-N creatine Chemical group NC(=[NH2+])N(C)CC([O-])=O CVSVTCORWBXHQV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DDRJAANPRJIHGJ-UHFFFAOYSA-N creatinine Chemical compound CN1CC(=O)NC1=N DDRJAANPRJIHGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DIOQZVSQGTUSAI-UHFFFAOYSA-N decane Chemical compound CCCCCCCCCC DIOQZVSQGTUSAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 108010074605 gamma-Globulins Proteins 0.000 description 2
- AOGQPLXWSUTHQB-UHFFFAOYSA-N hexyl acetate Chemical compound CCCCCCOC(C)=O AOGQPLXWSUTHQB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000017169 kidney disease Diseases 0.000 description 2
- 208000019423 liver disease Diseases 0.000 description 2
- 238000004062 sedimentation Methods 0.000 description 2
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 2
- 239000001488 sodium phosphate Substances 0.000 description 2
- 229910000162 sodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000011008 sodium phosphates Nutrition 0.000 description 2
- 229910001220 stainless steel Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000010935 stainless steel Substances 0.000 description 2
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 2
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 2
- RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K trisodium phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])([O-])=O RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 229940116269 uric acid Drugs 0.000 description 2
- PXXNTAGJWPJAGM-UHFFFAOYSA-N vertaline Natural products C1C2C=3C=C(OC)C(OC)=CC=3OC(C=C3)=CC=C3CCC(=O)OC1CC1N2CCCC1 PXXNTAGJWPJAGM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920003170 water-soluble synthetic polymer Polymers 0.000 description 2
- JYEUMXHLPRZUAT-UHFFFAOYSA-N 1,2,3-triazine Chemical class C1=CN=NN=C1 JYEUMXHLPRZUAT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OOSZCNKVJAVHJI-UHFFFAOYSA-N 1-[(4-fluorophenyl)methyl]piperazine Chemical compound C1=CC(F)=CC=C1CN1CCNCC1 OOSZCNKVJAVHJI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RBEZRHJPYHNADB-UHFFFAOYSA-N 2-(2-hydroxyethoxy)ethyl 2,3-dimethylbut-2-enoate Chemical compound CC(C)=C(C)C(=O)OCCOCCO RBEZRHJPYHNADB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WYGWHHGCAGTUCH-UHFFFAOYSA-N 2-[(2-cyano-4-methylpentan-2-yl)diazenyl]-2,4-dimethylpentanenitrile Chemical compound CC(C)CC(C)(C#N)N=NC(C)(C#N)CC(C)C WYGWHHGCAGTUCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WDQMWEYDKDCEHT-UHFFFAOYSA-N 2-ethylhexyl 2-methylprop-2-enoate Chemical compound CCCCC(CC)COC(=O)C(C)=C WDQMWEYDKDCEHT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FRIBMENBGGCKPD-UHFFFAOYSA-N 3-(2,3-dimethoxyphenyl)prop-2-enal Chemical compound COC1=CC=CC(C=CC=O)=C1OC FRIBMENBGGCKPD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HRPVXLWXLXDGHG-UHFFFAOYSA-N Acrylamide Chemical compound NC(=O)C=C HRPVXLWXLXDGHG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004971 Cross linker Substances 0.000 description 1
- BRLQWZUYTZBJKN-UHFFFAOYSA-N Epichlorohydrin Chemical compound ClCC1CO1 BRLQWZUYTZBJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical class OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YIVJZNGAASQVEM-UHFFFAOYSA-N Lauroyl peroxide Chemical compound CCCCCCCCCCCC(=O)OOC(=O)CCCCCCCCCCC YIVJZNGAASQVEM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101000878457 Macrocallista nimbosa FMRFamide Proteins 0.000 description 1
- CERQOIWHTDAKMF-UHFFFAOYSA-M Methacrylate Chemical compound CC(=C)C([O-])=O CERQOIWHTDAKMF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- NTIZESTWPVYFNL-UHFFFAOYSA-N Methyl isobutyl ketone Chemical compound CC(C)CC(C)=O NTIZESTWPVYFNL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UIHCLUNTQKBZGK-UHFFFAOYSA-N Methyl isobutyl ketone Natural products CCC(C)C(C)=O UIHCLUNTQKBZGK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N O-Xylene Chemical compound CC1=CC=CC=C1C CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 1
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 1
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 230000000274 adsorptive effect Effects 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 238000013019 agitation Methods 0.000 description 1
- 150000001338 aliphatic hydrocarbons Chemical class 0.000 description 1
- 150000004945 aromatic hydrocarbons Chemical class 0.000 description 1
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 1
- 239000007810 chemical reaction solvent Substances 0.000 description 1
- 229960003624 creatine Drugs 0.000 description 1
- 239000006046 creatine Substances 0.000 description 1
- 229940109239 creatinine Drugs 0.000 description 1
- 239000003431 cross linking reagent Substances 0.000 description 1
- 238000010612 desalination reaction Methods 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- LSXWFXONGKSEMY-UHFFFAOYSA-N di-tert-butyl peroxide Chemical compound CC(C)(C)OOC(C)(C)C LSXWFXONGKSEMY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 229910001873 dinitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 238000000921 elemental analysis Methods 0.000 description 1
- -1 ester compounds Chemical class 0.000 description 1
- YCUBDDIKWLELPD-UHFFFAOYSA-N ethenyl 2,2-dimethylpropanoate Chemical compound CC(C)(C)C(=O)OC=C YCUBDDIKWLELPD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MEGHWIAOTJPCHQ-UHFFFAOYSA-N ethenyl butanoate Chemical compound CCCC(=O)OC=C MEGHWIAOTJPCHQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BLZSRIYYOIZLJL-UHFFFAOYSA-N ethenyl pentanoate Chemical compound CCCCC(=O)OC=C BLZSRIYYOIZLJL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001879 gelation Methods 0.000 description 1
- 150000002334 glycols Chemical class 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000002329 infrared spectrum Methods 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- GJRQTCIYDGXPES-UHFFFAOYSA-N iso-butyl acetate Natural products CC(C)COC(C)=O GJRQTCIYDGXPES-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FGKJLKRYENPLQH-UHFFFAOYSA-M isocaproate Chemical compound CC(C)CCC([O-])=O FGKJLKRYENPLQH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- OQAGVSWESNCJJT-UHFFFAOYSA-N isovaleric acid methyl ester Natural products COC(=O)CC(C)C OQAGVSWESNCJJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 229920000609 methyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000001923 methylcellulose Substances 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- TVMXDCGIABBOFY-UHFFFAOYSA-N octane Chemical compound CCCCCCCC TVMXDCGIABBOFY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 1
- 239000003002 pH adjusting agent Substances 0.000 description 1
- 239000012466 permeate Substances 0.000 description 1
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007870 radical polymerization initiator Substances 0.000 description 1
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 238000007493 shaping process Methods 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 229940074545 sodium dihydrogen phosphate dihydrate Drugs 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 229920001059 synthetic polymer Polymers 0.000 description 1
- ASTWEMOBIXQPPV-UHFFFAOYSA-K trisodium;phosphate;dodecahydrate Chemical compound O.O.O.O.O.O.O.O.O.O.O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])([O-])=O ASTWEMOBIXQPPV-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 238000005353 urine analysis Methods 0.000 description 1
- 239000011800 void material Substances 0.000 description 1
- 239000011240 wet gel Substances 0.000 description 1
- 239000008096 xylene Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
- B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
- B01J20/22—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof comprising organic material
- B01J20/26—Synthetic macromolecular compounds
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Solid-Sorbent Or Filter-Aiding Compositions (AREA)
- Addition Polymer Or Copolymer, Post-Treatments, Or Chemical Modifications (AREA)
Abstract
Description
Vynález se týká nového granulovaného zesilovaného kopolymeru, náplně pro vysoce citlivou rychlou kapalinovou chromatografii obsahující tento zesilovaný kopolymer a zpUsobu jeho výroby. Vynález se zvláště týká náplně pro ' kapalinovou chromatografii vhodné pro vysoce citlivé a do vysokého stupně prováděné dělení nebo analýzu sloučenin, rozpuštěných ve vodném roztoku, separačním mechanismem na základě gelové permeační chromatografie, která obsahuje kopolymer sestávající alespoň z jedné jednotky vinylalkoholu, alespoň jedné jednotky vinylesteru karboxylové kyseliny a alespoň jedné jednotky zesilovaného monomeru, obsahujícího isokyanurátový kruh a zpUsobu její výroby.The present invention relates to a novel granulated crosslinked copolymer, to a high-sensitivity flash liquid chromatography cartridge containing the crosslinked copolymer, and to a process for its preparation. More particularly, the present invention relates to a liquid chromatography cartridge suitable for the highly sensitive and high degree of separation or analysis of compounds dissolved in an aqueous solution by a gel permeation chromatography separation mechanism comprising a copolymer consisting of at least one vinyl alcohol unit, at least one vinyl ester unit % of a carboxylic acid and at least one cross-linked monomer unit containing an isocyanurate ring and a process for its preparation.
Kapalinová chromatografie představuje zpUsob dělení nebo analýzy, využívající rozdíl v rychlosti vymývání v dUsledku určitých interakcí mezi pevnou fází, tj. náplní a ' složkami určenými k oddělení, které jsou rozpuštěné v pohybující se kapalné fázi. ZpUsob, ve kterém se použije náplň o malé velikosti částic a vysoké mechanické pevnosti a dosahuje se vysoce citlivé dělení nebo analýzy vedením rozpouštědla při vysoké rychlosti po krátkou dobu, se obecně označuje jako vysoce citlivá rychlá kapali2 nová chromatografie a používá se v různých oborech.Liquid chromatography is a method of separation or analysis utilizing the difference in elution rate due to certain interactions between the solid phase, i.e. the fill and the components to be separated, which are dissolved in the moving liquid phase. The method in which a small particle size and high mechanical strength cartridge is used and a highly sensitive separation or analysis by solvent conduction at high speed for a short time is achieved is generally referred to as high sensitivity flash liquid chromatography and is used in various fields.
Gelová permeační chromatografie je jednou z forem kapalinové chromatografie, využívající princip, že složka s menší velikostí molekuly, než je velikost pórU v náplni (označované jako „gel“) proniká do gelu v závislosti na své velikosti molekuly, zatímco složka s větší velikostí molekul prochází vně gelu. Tímto zpUsobem mohou být složky postupně vymývány rozpouštědlem v pořadí od složky s větší velikostí molekuly.Gel permeation chromatography is one form of liquid chromatography, utilizing the principle that a component with a smaller molecule size than the pore size of the cartridge (referred to as a "gel") penetrates into the gel depending on its molecule size, while a larger molecule component passes outside the gel. In this way, the components may be successively eluted with the solvent in order from the larger molecule component.
Gelová permeační chromatografie se mUže roztřídit podle rozpouštědel použitých pro dělení nebo analýzu na systémy používající organické prostředí a na systémy s ’ vodným prostředím. Z těchto dvou systémU je možné gelovou permeační chromatografií založenou na systému s vodným prostředím použít k oddělení nebo pro analýzu ve vodě rozpustných syntetických polymerU, sacharidU, aminokyselin a proteinU. Tento zpUsob je zvláště vhodný v biochemii a lékařství jako jednoduchý analytický postup, který se mUže s úspěchem použít pro analýzu séra bez předchozího zpracování vzorku nebo beze změny rozpouštědla během analýzy, jak se požaduje v běžné kapalinové chromatografii při použití adsorpce a distribu ce, - a rovněž při zisku většího množství informací. Zvláště složky krve a moči jsou v úzkém vztahu s chorobami ledvin nebo jater nebo symptomy, jakož i karcinomem. Z toho důvodu existuje značná potřeba objevit gel pro vysoce citlivou rychlou - kapalinovou chromatografií, zvláště gely pro systém založený na vodním prostředí pro gelovou permeační chromatografií, které jsou vhodné pro dělení nebo analýzu zmíněných složek.Gel permeation chromatography can be sorted according to solvents used for separation or analysis into systems using organic media and systems with aqueous media. Of these two systems, aqueous permeation gel permeation chromatography based on an aqueous medium system can be used to separate or analyze water-soluble synthetic polymers, carbohydrates, amino acids, and proteins. This method is particularly useful in biochemistry and medicine as a simple analytical procedure that can be successfully used for serum analysis without prior sample processing or solvent change during analysis as required by conventional liquid chromatography using adsorption and distribution, and also when gaining more information. In particular, blood and urine components are closely related to kidney or liver diseases or symptoms, as well as cancer. Therefore, there is a great need to discover a gel for high-speed liquid chromatography, especially gels for an aqueous-based system for gel permeation chromatography, which are suitable for separating or analyzing said components.
Pro systém založený na vodném prostředí u gelové permeační chromatografie, se běžně používá gel, připravený zesíťováním dextranu s epichlorhydrinem (Sephadex). Tento gel je však tak zvaný měkký gel, jeho póry využité k separaci jsou tvořeny zesíťovanou strukturou, avšak mechanická pevnost gelu je malá. Z toho důvodu nemůže být tento gel použit pro rychlou gelovou permeační chromatografií.For an aqueous-based system in gel permeation chromatography, a gel prepared by crosslinking dextran with epichlorohydrin (Sephadex) is commonly used. However, this gel is a so-called soft gel, its pores used for separation are formed by a cross-linked structure, but the mechanical strength of the gel is low. Therefore, this gel cannot be used for flash gel permeation chromatography.
Dále je také známa příprava gelu pro typ vodného prostředí tím, že se zmýdelní částice kopolymeru vinylacetátu a 1,4-butandiol divinyletheru, jak je uvedeno v americkém patentu č. 3 586 626. Avšak jak připouští W. Heitz, autor tohoto amerického patentu, kopolymerovatelnost monomerů použitých pro tento gel je nízká (viz W. Heitz, J. Chromato.gr. - - 53,. 37, 1970), a proto vytvářený gel nemá dostatečnou pevnost a prakticky nemůže být použit pro vysoce citlivou rychlou kapalinovou ' chromatografií.Further, it is also known to prepare a gel for an aqueous medium type by saponifying vinyl acetate and 1,4-butanediol divinylether copolymer particles, as disclosed in U.S. Patent No. 3,586,626. However, as admitted by W. Heitz, U.S. Pat. the copolymerizability of the monomers used for this gel is low (see W. Heitz, J. Chromato.gr. 53, 37, 1970), and therefore the gel formed does not have sufficient strength and practically cannot be used for high speed liquid chromatography.
Dále se uvádí, že gel pro typ vodného prostředí o vyšší mechanické pevnosti se dá připravit zmýdelněním částic kopolymeru, například diethylenglykoldimetakrylátu nebo - diglycidylmetakrylátu s vinylacetátem, a potom - zesíťováním zmýdelněného- kopolymeru, jak je popsáno v americkém - patentu č. 4 104 208. Tento způsob je však složitý a je obtížné- získat gel ' - s konstantní kvalitou a dobrou reprodukovatelností. - Kromě toho je známo, že je - možné - získat tvrdý gel polývinylalkoholu zmýdelněním kopolymeru vinylacetátu a zesnujícího činidla se - strukturou - triazinového kruhu v takovém rozsahu, že infračervené absorpční spektrum esteru při 1730 cm1 zcela zmizí, jak je popsáno v britském patentu č. 2 034 328 A. Výzkumy prováděné autory - tohoto vynálezu však ukázaly, že gel získaný tímto způsobem má malou mechanickou pevnost - a v této souvislosti není gel vhodný pro rychlou gelovou permeační chromatografii, při které se používá gelu - s menší velikostí částic, například se středním průměrem částic menším než asi 20 μΐη. Uvedený gel může být použit při průmyslovém dělení, kdy se může použít gelu o větší velikosti částic, bez zvláštního požadavku na mechanickou pevnost, jako je tomu například při odsolování vodného roztoku polymeru.It is further disclosed that a gel for a type of aqueous medium of higher mechanical strength can be prepared by saponification of copolymer particles such as diethylene glycol dimethyl methacrylate or diglycidyl methacrylate with vinyl acetate and then crosslinking the saponified copolymer as described in U.S. Patent No. 4,104,208. However, this process is complex and difficult to obtain a gel with constant quality and good reproducibility. In addition, it is known that it is possible to obtain a hard polysyl alcohol gel by saponification of a vinyl acetate copolymer with a crosslinking agent having a structure of a triazine ring to such an extent that the infrared absorption spectrum of the ester at 1730 cm 1 disappears completely as described in British Patent No. A. Investigations carried out by the authors - of the present invention, however, have shown that the gel obtained by this method has low mechanical strength - and in this context the gel is not suitable for rapid gel permeation chromatography using a gel - with a smaller particle size, for example with a mean particle diameter of less than about 20 μΐη. The gel can be used in industrial separation where a larger particle size gel can be used, without a particular requirement for mechanical strength, such as desalination of an aqueous polymer solution.
Aby bylo možné použít tento gel pro systém založený na vodném prostředí pro rychlou gelovou permeační - chromatografii, musí mít pórovitou strukturu o přísně regulova telné velikosti odpovídající velikosti molekul složek určených k separaci, stejně jako musí mít malou velikost částic s dostatečnou mechanickou pevností. Dále je nutné, aby gel byl hydrofilní s nízkou adsorpční schopností vzhledem ke složkám, určeným k separaci ve vodném roztoku.In order to use this gel for an aqueous based system for rapid gel permeation chromatography, it must have a porous structure of strictly controllable size corresponding to the size of the molecules of the components to be separated, as well as a small particle size with sufficient mechanical strength. Furthermore, it is necessary that the gel be hydrophilic with a low adsorption capacity relative to the components to be separated in aqueous solution.
Na tyto požadavky se zaměřili autoři tohoto vynálezu při vyvinutí gelů pro systém založený na vodném prostředí pro gelovou permeační chromatografii. Výsledkem je gel, obsahující převážně hydroxyskupiny, esterové skupiny a jednotky zesíťujícího monomeru v polymerní kostře, mající póry vhodné pro separaci nebo analýzu předmětných látek ve vodném roztoku a vykazující mechanickou pevnost dostatečnou k použití při vysokých rychlostech nebo vysokých tlacích a způsob výroby tohoto gelu.These requirements have been addressed by the present inventors in developing gels for an aqueous-based system for gel permeation chromatography. The result is a gel containing predominantly hydroxy groups, ester groups, and crosslinking monomer units in the polymer backbone, having pores suitable for separating or analyzing the subject matter in aqueous solution and exhibiting mechanical strength sufficient to be used at high speeds or high pressures, and a method for making the gel.
Předmětem tohoto vynálezu je způsob výroby náplně pro rychlou kapalinovou chromatografii, který spočívá v tom, že se monomerní směs alespoň jedné jednotky vinylesteru karboxylové kyseliny se 2 až 5 atomy uhlíku a alespoň jedné jednotky zesíťujícího monomeru obecného vzorce ve- kterémAn object of the present invention is to provide a process for the preparation of a flash liquid chromatography cartridge comprising: a monomer mixture of at least one unit of C 2 -C 5 vinyl ester and at least one unit of cross-linking monomer of the formula wherein:
Rl, R2 a R3 jsou stejné nebo - rozdílné - a náleží do skupiny tvořené —CH2—CH = CH2, —CH2-C = CH a —CH2—C = CH2,R1, R2 and R3 are the same or - different - and belong to the group consisting of —CH2 —CH = CH2, —CH2 —C = CH and —CH2 — C = CH2,
....... CH3 z....... CH3 z
při -molárním poměru vinylesteru karboxylové kyseliny k - zesíťujícímu monomeru 1:at a molar ratio of vinyl carboxylic acid ester to crosslinking monomer 1:
: 0,88 až 1: 0,22, s výhodou 1: 0,11 až 1: 0,18 · nechá zpolymerovat v suspenzi a získaný granulovaný kopolymer se podrobí reesterlfikaci nebo zmýdelnění v rozsahu, při kterém reesterifikační poměr nebo poměr zmýdelnění činí 0,4 až 0,8, s výhodou 0,45 až 0,75.: 0.88 to 1: 0.22, preferably 1: 0.11 to 1: 0.18, and allowed to polymerize in suspension and the resulting granulated copolymer is re-esterified or saponified to the extent that the re-esterification ratio or saponification ratio is 0 4 to 0.8, preferably 0.45 to 0.75.
Příkladné provedení vynálezu je znázorněno na připojených výkresech, kde obr. 1 představuje kalibrační křivku pro gel pro gelovou permeační chromatografii podle vynálezu a uvádí definici vyloučené molekulové hmotnosti (označeno jako МНт), obr. 2 je infračervené absorpční spektrum gelu podle příkladu 1 a obr. 3 až 5 jsou chromatogramy, získané při použití gelů podle příkladů 1, 2 a 5.An exemplary embodiment of the invention is shown in the accompanying drawings, in which Fig. 1 is a calibration curve for a gel for gel permeation chromatography according to the invention and provides a definition of the excluded molecular weight (denoted as М Нт ). Fig. 2 is infrared absorption spectrum of gel according to Example 1; 3 to 5 are chromatograms obtained using the gels of Examples 1, 2 and 5.
Gel pro použití v systému s vodným prostředím pro rychlou gelovou permeační chromatografií musí vykazovat mechanickou pevnost, odolávající vysokým rychlostem nebo vysokým tlakům, stejné jako musí být hydrofilní. Hydrofilnost gelu podle vynálezu je docílena obsahem hydroxyskupin v kostře polymeru. Tyto hydroxyskupiny se mohou tvořit reesterifikací nebo zmýdelněním esterových skupin v kopolymeru alespoň jednoho vinylesteru karboxylové kyseliny s alespoň jednoho zesíťujícího monomeru, obsahujícího isokyanurátový kruh. Ukázalo se však, že se mechanická pevnost gelu sníží v případě, když jsou všechny esterové skupiny reesterifikovány nebo zmýdelněny. Pokud je nezměněných esterových skupin příliš mnoho, sníží ae hydrofilnost gelu a složky rozpuštěné ve vodném roztoku se snadno adsorbují. Nyní bylo zjištěno, že je vhodné provádět reesterifikací nebo zmýdelnční do takové míry, aby bylo asi 40 až asi ' 80 % esterových skupin převedeno na hydroxyskupiny. Poměr reesterifikace nebo poměr zmýdelnění Y (0 < Y š 1) je vyjádřen rovnicí 1:The gel for use in an aqueous medium system for rapid gel permeation chromatography must exhibit a mechanical strength that resists high velocities or high pressures, as well as being hydrophilic. The hydrophilicity of the gel according to the invention is achieved by the content of hydroxy groups in the polymer backbone. These hydroxy groups may be formed by re-esterification or saponification of ester groups in a copolymer of at least one vinyl ester of a carboxylic acid with at least one cross-linking monomer containing an isocyanurate ring. However, it has been shown that the mechanical strength of the gel is reduced when all ester groups are re-esterified or saponified. If too much unchanged ester groups are too low, the hydrophilicity of the gel and components dissolved in the aqueous solution are readily adsorbed. It has now been found convenient to carry out the esterification or saponification to such an extent that about 40 to about 80% of the ester groups are converted to hydroxy groups. Reesterification ratio or saponification ratio Y (0 <Y š 1) is expressed by equation 1:
a + b (1) kde a a b jsou molární poměry alespoň jedné jednotky -alespoň vinylalkoholu a alespoň jedné jednotky vinylesteru karboxylové kyseliny v kopolymeru.a + b (1) wherein a and b are the molar ratios of at least one unit - at least vinyl alcohol and at least one unit of vinyl ester of the carboxylic acid in the copolymer.
Y tedy - ukazuje poměr uvedených jednotek v kopolymeru.Thus, Y shows the ratio of said units in the copolymer.
Veličiny a a b se mohou vypočítat z hustoty hydroxyskupin (označované dále symbolem ,,4θη“ ) v gelu a množství alespoň jedné jednotky zesíťujícího monomeru obsahujícího isokyanurátový kruh. - qoH značí ekvivalent alespoň jedné jednotky vinylalkoholu na -hmotnostní jednotku gelu a může být stanovena reakcí gelu s anhydridem kyseliny octové v pyridinu, jako -rozpouštědle, přičemž se zjišťuje množství spotřebovaného anhydridu kyseliny octové při reakci s hydroxyskupinami nebo změna hmotnosti gelu a koncentrace hydroxyskupin se vypočte z této naměřené hodnoty. Například, pokud se spotřebuje 1 milimol anhydridu kyseliny octové v reakci s 1 g suchého gelu, činí qQH tohoto gelu 1 mmol/g.The quantities a and b can be calculated from the density of the hydroxy groups (hereinafter referred to as "4θη") in the gel and the amount of at least one cross-linking monomer unit containing the isocyanurate ring. qoH is equivalent to at least one vinyl alcohol unit per gel weight unit and can be determined by reacting the gel with acetic anhydride in pyridine as the solvent to determine the amount of acetic anhydride consumed in the reaction with the hydroxy groups or the gel weight change and the hydroxy group concentration. calculated from this measured value. For example, if 1 millimole of consumed acetic anhydride was reacted with 1 g of dry gel, Q H Q makes the gel of 1 mmol / g.
Druhy jednotek zesíťujícího monomeru, obsahujícího -isokyanurátový kruh, mohou být identifikovány jejich infračerveným absorpčním spektrem a jejich -počet může -být stanoven z obsahu dusíku, získaného elementární analýzou gelu. Jinými slovy veličina a může být zjištěna z hodnoty qoH a veličina b z hodnoty získané odečtením celkového množství alespoň jedné jednotky vinylalkoholu a alespoň jedné jednotky zesíťujícího monomeru od celkového množství alespoň jedné jednotky vinylalkoholu, alespoň jedné jednotky vinylesteru karboxylové kyseliny a alespoň jedné jednotky zesíťujícího monomeru v gelu. Chemická struktura vinylkarboxylá.tových skupin může být potvrzena identifikací karboxylové kyseliny vzniklé úplnou reesterifikací nebo zmýdelněním gelu. Pokud jsou podmínky pro výrobu gelu známy, je rovněž možno vypočítat Y - ze složení výchozích látek a qoH vytvořeného gelu. Je výhodné, aby se poměr reesterifikace nebo poměr zmýdelnění pohyboval - v rozmezí od 0,45 do asi 0,75. -Zatímco se hodnota qoH mění v závislosti na vinylesteru karboxylové kyseliny, použité jako- výchozí látka, stupeň zasíťování -a poměr reesterifikace -nebo poměr zmýdelnění činí podle předkládaného vynálezu 3 až 11 milimol -na g suchého gelu.The types of crosslinking monomer units containing the isocyanurate ring can be identified by their infrared absorption spectrum and their number can be determined from the nitrogen content obtained by elemental gel analysis. In other words, the quantity a can be obtained from the value of qoH and the quantity b from the value obtained by subtracting the total amount of at least one unit of vinyl alcohol and at least one unit of crosslinking monomer from the total amount of at least one unit of vinyl alcohol, at least one unit of vinyl ester of carboxylic acid and at least one unit of crosslinking monomer in gel . The chemical structure of the vinyl carboxylate groups can be confirmed by identifying the carboxylic acid resulting from complete re-esterification or saponification of the gel. If the conditions for producing the gel are known, it is also possible to calculate Y - from the composition of the starting materials and the qoH of the gel formed. It is preferred that the re-esterification ratio or saponification ratio be in the range of from 0.45 to about 0.75. While the qoH value varies depending on the vinyl ester of the carboxylic acid used as the starting material, the degree of crosslinking, and the re-esterification ratio or saponification ratio according to the present invention is 3 to 11 millimoles per g dry gel.
Tak - má gel podle vynálezu, obsahující současně odpovídající jednotky vinylalkoholu, vinylesteru karboxylové -kyseliny a zesíťující monomer s obsahem isokyanurátového kruhu, vynikající vlastnosti pro použití při rychlé gelové permeační chromatografii. Tato skutečnost je podložena faktem, že jednotky residuálních esterových skupin v -gelu ovlivňují -uchování mechanické pevnosti gelu a také faktem, že tyto jednotky mají vyšší hydrofilnost ve srovnání s jednotkami - zesíťujícího monomeru, - čímž se snižuje adsorpční schopnost gelu ve srovnání s případem, kdy je mechanická pevnost udržována pouze zesíťujícím monomerem.Thus, the gel according to the invention, comprising simultaneously the corresponding units of vinyl alcohol, vinyl ester of carboxylic acid and crosslinking monomer containing isocyanurate ring, has excellent properties for use in rapid gel permeation chromatography. This is due to the fact that the units of residual ester groups in the gel affect the maintenance of the mechanical strength of the gel and also the fact that these units have a higher hydrophilicity compared to the units of the crosslinking monomer, thereby reducing the adsorption capacity of the gel. wherein the mechanical strength is maintained only by the crosslinking monomer.
Mezi -gely připravenými reesterifikací nebo zmýdelněním - kopolymeru vinylesteru karboxylové kyseliny a zesíťujícího monomeru s obsahem isokyanurátového kruhu, má gel připravený -při použití většího množství zesíťujícího monomeru větší mechanickou pevnost. Vzhledem k tomu, že zesilující monomer neobsahuje žádné hydroxyskupiny, a nemohou tedy hydroxyskupiny vzniknout hydrolýzou, má gel kopolymeru, -obsahujícího větší množství jednotek zesíťujícího monomeru v - polymerní kostře, - sníženou hydrofilnost. -K použití - gelu pro rychlou gelovou permeační chromatografií musí gel obsahovat optimální množství -isokyanurátových jednotek. Je výhodné, aby -se stupeň zesíťování (označený jako „X“] -pohyboval v rozmezí 0,2 s X < asi 0,4.Among the gels prepared by re-esterification or saponification of a copolymer of a vinyl ester of a carboxylic acid and a cross-linking monomer containing an isocyanurate ring, the gel prepared when using a larger amount of cross-linking monomer has greater mechanical strength. Since the crosslinking monomer does not contain any hydroxy groups and therefore cannot be formed by hydrolysis, the gel of the copolymer, containing a plurality of crosslinking monomer units in the polymer backbone, has reduced hydrophilicity. -For use, the gel for rapid gel permeation chromatography must contain an optimal amount of -isocyanurate units. It is preferred that the degree of crosslinking (referred to as "X") moves within a range of 0.2 with an X < about 0.4.
X je vyjádřeno rovnicí 2:X is represented by Equation 2:
v 3c a + b + 3c (2) kde a - a b mají shora uvedený význam a c značí molární poměr alespoň jedné jednotky zesíťujícího monomeru obsahujícího isokyanurátový kruh v celkovém množství alespoň jedné jednotky vinylalkoholu, alespoň jedné jednotky vinylesteru karboxylové kyseliny a alespoň jedné jednotky zesíťuj’ícího monomeru kopolymeru.v 3c a + b + 3c (2) where a - ab are as defined above ac denotes the molar ratio of at least one isocyanurate ring-containing crosslinking monomer unit to the total of at least one vinyl alcohol unit, at least one vinyl ester carboxylic acid unit and at least one crosslinker unit of a copolymer monomer.
Ve vzorci mohou být veličiny a a b stanoveny popsanými postupy . a veličina c může být stanovena z hodnot elementární analýzy gelu nebo esterifikačního gelu. Pokud jsou známy podmínky pro přípravu gelu, může být X snadno stanoveno výpočtem z molů vinylesteru karboxylové kyseliny a zesíťujícího monomeru, použitého v polymerizaci, náhradou za (a + b] a c v popsaném vzorci.In the formula, a and b may be determined by the procedures described. and the quantity c can be determined from the elemental analysis values of the gel or esterification gel. If the conditions for preparing the gel are known, X can be readily determined by calculating from the moles of the vinyl ester of the carboxylic acid and the crosslinking monomer used in the polymerization, replacing (a + b] and c in the formula described.
S veličinou X ve shora uvedeném rozmezí má gel s malou velikostí částic dostatečnou pevnost k tomu, aby se dal použít při vysokém tlaku a podmínkách vysoké rychlosti. . Takový gel je rovněž dostatečně hydrofilní a obtížně adsorbuje složky ve vodném roztoku, zvláště proteiny a aminokyseliny a tudíž je zvláště vhodný k použití pro gelovou permeační chromatografii o vysoké rychlosti. Dále je vhodné, že gel podle vynálezu zabezpečuje současně shora uvedené rozmezí hodnot X a Y.With variable X in the above range, the small particle size gel has sufficient strength to be used under high pressure and high speed conditions. . Such a gel is also sufficiently hydrophilic and difficult to adsorb components in aqueous solution, especially proteins and amino acids, and is therefore particularly suitable for use in high speed gel permeation chromatography. It is further preferred that the gel of the invention simultaneously provides the above-mentioned X and Y values.
U běžného^ měkkého gelu musí být za účelem zvýšení vyloučené molekulové hmotnosti [označované jako Mlimj, tj. minimální molekulové hmotnosti látky, která nemůže pronikat do pórů gelu, snížen stupeň zesilováni k rozšíření sítě, což musí nezbytně vést ke zvýšení opětného přijímání vody (označovaného jako WR), s výsledkem způsobujícím nevýhodné zmenšení mechanické pevnosti. Zvláště v případě, kdy je velikost částic malá, dá se předpokládat vznik nepříznivých účinků, jako tlakové ztráty v naplněné koloně v důsledku snížené mechanické pevnosti. Proto se používají gely, které mají průměr částic alespoň 50 μΐη.In a conventional soft gel, in order to increase the excreted molecular weight (referred to as M lim j, i.e. the minimum molecular weight of a substance that cannot penetrate the gel pores), the degree of crosslinking to expand the network must be reduced, necessarily leading to increased water uptake (referred to as W R ), resulting in a disadvantageous reduction in mechanical strength. Especially when the particle size is small, adverse effects such as pressure drop in the packed column due to reduced mechanical strength can be expected. Therefore, gels having a particle diameter of at least 50 μΐη are used.
Gel podle vynálezu má naproti tomu hodnotu WR asi 0,5 až 2,0 g vody/g suchého gelu bez ohledu na MHra, a může být tedy i v případě, kdy je hodnota MHm vysoká, použit pro gelovou permeační chromatografií pro vysoké rychlosti. Toto je pozoruhodné u gelů typu pro vodné prostředí pro rychlou gelovou permeační chromatografii, kde se mohou použít gely s průměrem částic nejvýše 20 μΐη, které mají požadovanou dostatečnou mechanickou pevnost, Wr je definováno jako množství (g) vody, kterou může obsahovat jeden gram suchého gelu, když je gel udržován v rovnováze s vodou, a je měřítkem množství pórů v gelu použitém při gelové permeační chromatografií.The gel according to the invention, on the other hand, has a W R value of about 0.5 to 2.0 g water / g dry gel regardless of the M game , and thus can be used for gel permeation chromatography even when the M Hm value is high. high speed. This is remarkable for aqueous gel type gels for rapid gel permeation chromatography, where gels with a particle diameter of not more than 20 μΐη having the required sufficient mechanical strength can be used, Wr is defined as the amount (g) of water that can contain one gram of dry of the gel when the gel is maintained in equilibrium with water, and is a measure of the amount of pores in the gel used in gel permeation chromatography.
Při zvýšeném Wr se hmotnost podílu polymerního skeletu na jednotku objemu gelu ve vodě, to znamená hmotnost samotného gelu, relativně sníží. Pokud je tedy Wr příliš velké, sníží se mechanická pevnost gelu ve vodě a je nemožné zvýšit rychlost proudění, což má za následek ztráty tlaku v koloně. Naproti tomu, pokud je Wr příliš malé, množství pórů v gelu, které fungují při gelové permeační chromatografií se sníží, čímž se zmenší schopnost separace na gelu. Proto je rozhodující pro gel typu pro vodné prostředí pro rychlou gelovou permeační chro^^tt^o^i?^fii mít hodnotu Wr v příslušném rozmezí.With increased Wr, the weight of the polymer skeleton fraction per unit volume of gel in water, i.e. the weight of the gel itself, is relatively reduced. Thus, if Wr is too large, the mechanical strength of the gel in water will decrease and it is impossible to increase the flow rate, resulting in loss of column pressure. In contrast, if Wr is too small, the amount of gel pores that function in gel permeation chromatography is reduced, thereby reducing the ability to separate on the gel. Therefore, it is critical for an aqueous-type gel for rapid gel permeation chromatography to have a Wr value within the appropriate range.
Je vhodné, aby gel pro rychlou gelovou permeační chromatografií se strukturou podle tohoto vynálezu, vykazoval Wr v rozmezí asi od 0,5 asi do 2,0 g vody/g suchého gelu, zvláště asi 0,8 až asi 2,0 g vody/g suchého gelu. Gel podle tohoto vynálezu může mít Wr v takovém rozsahu. Wr se stanoví takto:Suitably, the flash gel permeation chromatography gel having the structure of the present invention exhibits a Wr in the range of about 0.5 to about 2.0 g water / g dry gel, particularly about 0.8 to about 2.0 g water / g dry gel. The gel of the invention may have a Wr to such an extent. Wr is determined as follows:
Gel, ponořený ve vodě ve zcela vyváženém stavu, se odstředí za účelem odstranění vody, lpící na povrchu gelu, a stanoví se jeho hmotnost Wí. Gel se vysuší a stanoví se jeho suchá hmotnost W2. Wr se vypočte z této rovnice:The gel, immersed in water in a fully balanced state, is centrifuged to remove water adhering to the gel surface and its weight W i is determined. Dry the gel and determine its dry weight W2. Wr is calculated from the following equation:
Mim gelu . podle vynálezu se může pohybovat v širokém rozmezí. Jak bylo uvedeno, Mim značí minimální molekulovou hmotnost sloučeniny, která nemůže pronikat do pórů gelu. Sloučeniny a látky mající molekulovou hmotnost nižší, než je tato kritická hodnota, mohou být oddělovány gelovou permeační chromatografií, avšak sloučeniny, mající molekulovou hmotnost vyšší, než je tato kritická hodnota, nepronikají do pórů gelu, nýbrž procházejí přímo mezerami mezi gely. Tyto sloučeniny vykazuj! v podstatě stejný eluční objem bez ohledu na molekulovou hmotnost a nemohou být oddělovány gelovou permeační chromatografií.Mim gel. according to the invention can be varied within a wide range. As noted, Mim refers to the minimum molecular weight of a compound that cannot penetrate the gel pores. Compounds and substances having a molecular weight lower than this critical value can be separated by gel permeation chromatography, but compounds having a molecular weight higher than this critical value do not penetrate the gel pores, but pass directly through gaps between gels. These compounds exhibit: essentially the same elution volume regardless of molecular weight and cannot be separated by gel permeation chromatography.
Mnm může být získána z kalibrační křivky gelové permeační chromatografie. Tato kalibrační křivka se získá nanesením logaritmu molekulových hmotností jednotlivých vzorků, jejichž molekulové hmotnosti jsou známy na ordinátu a eluční objem- každého vzorku nanesením na abscissu ve vztahu ke koloně, vyplněné gelem, jak je znázorněno na obr. 1. To představuje vztah mezi elučním objemem a molekulovou hmotností látky, určené k oddělení na chromatogramu. Šikmá čára a čára rovnoběžná s ordinátou jsou na tomto grafu v podstatě přímky a část, ve které se tyto přímky stýkají, je křivka. Mum v předkládaném vynálezu je vyjádřeno jako hodnota na ordinátě v bodě, ve kterém prodloužení šikmé přímky prochází prodloužením čáry, paralelní k ose y. Μ,™ je jednou z vlastností gelu a značí vyloučenou molekulovou hmotnost, při které může gel sloužit separačním účinkem založeném na rozdílech ' ve velikosti molekul. Sloučeniny s molekulou větší než odpovídá ' vyloučené molekulové hmotnosti jsou vymývány, aniž by došlo k oddělení.M nm can be obtained from the calibration curve of gel permeation chromatography. This calibration curve is obtained by plotting the logarithm of the molecular weights of the individual samples whose molecular weights are known on the ordinate and the elution volume of each sample by applying to the abscissa relative to the gel-filled column as shown in FIG. and the molecular weight of the substance to be separated in the chromatogram. In this graph, the oblique line and the line parallel to the ordinate are essentially straight lines, and the part in which these lines meet is a curve. The noise in the present invention is expressed as the ordinate value at the point where the extension of the oblique line passes through the extension of the line parallel to the y-axis. Μ ™ is one of the properties of a gel and denotes an excluded molecular weight at which the gel can serve a separation effect based on differences in molecular sizes. Compounds with a molecule greater than the excluded molecular weight are eluted without separation.
Podle vynálezu je hodnota MHm stanovena při použití standardní sloučeniny o známé molekulové hmotnosti, ve formě póly228510 ethylenglykolů nebo dextranů a destilované vody jako rozpouštědla. Vzhledem к tomu, že obchodně dostupné, ve vodě rozpustné standardní polymery mají molekulovou hmotnost nižší než 2 000 000, nemůže být úplná kalibrační křivka získána u gelu, jehož hodnota Mlim převyšuje 2 000 000. MJim takového gelu nemůže být přesně stanoveno a je -odhadováno z průsečíku prodloužené kalibrační křivky, stanovené pro molekulové hmotnosti nižší než 2 000 000 a čáry rovnoběžné s ordinátou y, která je stanovena za stejných podmínek, odpovídajících gelu o nižší hodnotě МНт.According to the invention, the M Hm value is determined using a standard compound of known molecular weight, in the form of poly228510 ethylene glycols or dextrans and distilled water as solvent. Since к that commercially available water-soluble standard polymers have a molecular weight less than 2,000,000, can not be complete calibration curve obtained by gel whose value exceeds lim M 2000 M 000. Jim such a gel can not be accurately determined, and - estimated from the point of intersection of the extended calibration curve, determined for molecular weights less than 2 000 000 and the line parallel to the ordinate y, which is determined under the same conditions, corresponding to the gel with a lower value of М Нт .
Pro získání mechanické pevnosti gelu, vhodné pro rychlou gelovou permeační chromatografii a současné nízké adsorpční schopnosti, pohybuje se stupeň zesíťování X výhodně v rozmezí od 0,24 do 0,32, pokud MUrn odpovídá 103 až 105, a stupeň zesíťování X se pohybuje v rozmezí od 0,27 do 0,35 v případě, že МИт náleží do rozmezí od 105 do 10».To obtain a mechanical gel strength suitable for rapid gel permeation chromatography and at the same time low adsorption capability, the degree of crosslinking X is preferably in the range of 0.24 to 0.32 when M Urn is 10 3 to 10 5 , and the degree of crosslinking X is it ranges from 0.27 to 0.35 when М Ит is within the range of 10 5 to 10 ».
Gel podle vynálezu může být definován jako zcela porézní tvrdý gel, který má v suchém stavu velkou specifickou plochu povrchu. Zcela porézní struktura značí strukturu, mající jemné póry rovnoměrně rozdělené ve vnitřních částech částic. Obecně řečeno, organické syntetické polymery, mající zesíťovanou strukturu se nechají nabobtnat v rozpouštědle, vykazujícím afinitu к polymerům a následně se vysuší. V případě měkkého gelu, kde jsou póry, vyplněné rozpouštědlem při bobtnání, udržovány pouze sítí zesíťování, nemůže tato síť udržovat stav při nabobtnání i po vysušení a póry z větší části zmizí. V takovém případě je specifická plocha povrchu omezena v podstatě na vnější povrch částic, vykazuje obecně velmi nízké hodnoty, menší než 1 m2/g. Na druhé straně, v případě tvrdého gelu s pevnou porézní strukturou, zůstává struktura pórů v podstatě zachována, i když v porovnání se stavem po nabobtnání dojde к určitému smrštění po vysušení. Jinými slovy, povaha pórů je permanentní. Tvrdý gel tedy vykazuje mnohem větší plochu povrchu než měkký gel.The gel of the invention may be defined as a completely porous hard gel having a high specific surface area in the dry state. An entirely porous structure refers to a structure having fine pores evenly distributed in the inner portions of the particles. Generally speaking, organic synthetic polymers having a cross-linked structure are swollen in a solvent exhibiting affinity for the polymers and then dried. In the case of a soft gel, where the pores filled with solvent during swelling are maintained only by the crosslinking network, this network cannot maintain the swelling state even after drying and the pores largely disappear. In such a case, the specific surface area is limited substantially to the outer surface of the particles, generally showing very low values, less than 1 m 2 / g. On the other hand, in the case of a hard gel with a solid porous structure, the pore structure remains essentially maintained, although some shrinkage after drying occurs compared to the state after swelling. In other words, the nature of the pores is permanent. Thus, a hard gel has a much larger surface area than a soft gel.
Gel podle tohoto vynálezu má specifickou plochu povrchu asi 5 až asi 1000 m2/g. U gelu, který má specifickou plochu povrchu menší, než je spodní hranice rozmezí se rozumí, že jde o gel se strukturou homogenního typu (měkký gel), který převážně neobsahuje jemné póry a není tedy vhodný pro rychlou gelovou permeační chromatografii.The gel of the invention has a specific surface area of about 5 to about 1000 m 2 / g. A gel having a specific surface area less than the lower limit of the range is understood to be a gel with a homogeneous type structure (soft gel) which is predominantly free of fine pores and is therefore not suitable for rapid gel permeation chromatography.
Specifická plocha povrchu se může měřit různými známými postupy, ale u tohoto vynálezu se stanovuje nejužívanějším postupem, metodou, kterou publikovali S. Brunauer, P. Emmet a E. Teller v J. Am. Chem. Soc., 60, 309 — 316 (1928). Při této metodě, zkráceně označované BET, se pracuje za použití plynného dusíku. Pro měření specifické plochy povrchu je nezbytné dostatečně vysušit vzorky. Vzhledem к tomu, že gel podle vynálezu obtížně schne v důsledku vysoké hydrofilnosti, je vhodnější vlhký gel nejprve uvést do rovnováhy s acetonem a gel teprve potom vysušit za sníženého tlaku při teplotách nižších než asi 60 °C.The specific surface area may be measured by various known methods, but in the present invention it is determined by the most commonly used method, according to the method of S. Brunauer, P. Emmet and E. Teller in J. Am. Chem. Soc., 60, 309-316 (1928). This method, abbreviated as BET, is carried out using nitrogen gas. It is necessary to sufficiently dry the samples to measure the specific surface area. Since the gel of the invention is difficult to dry due to high hydrophilicity, it is preferable to first equilibrate the wet gel with acetone and then dry the gel under reduced pressure at temperatures below about 60 ° C.
Gel podle vynálezu vykazuje střední průměr částic, označený jako Dw, asi 4 až asi 200 дт. Zvláště výhodné vlastnosti pro vysoce citlivou rychlou kapalinovou chromatografii vykazuje gel v případě, že Ďw je malý, například v rozmezí od asi 5 do asi 20 μπι. Pokud je požadována zvláště vysoká schopnost separace, je výhodné, aby hodnota Dw gelu činila asi 5 až asi 12 ^m. Dw se měří speciálním počitadlem a vypočte podle následující rovnice:The gel of the invention has a mean particle diameter, denoted D w , of about 4 to about 200 d. Particularly advantageous properties for high speed liquid chromatography are exhibited by the gel when d w is small, for example in the range of about 5 to about 20 µπι. If a particularly high separation ability is desired, it is preferred that the D w value of the gel is about 5 to about 12 µm. D w is measured with a special counter and calculated according to the following equation:
— Σ (ni. di4) Dw = F(bi7ďPl ve které di značí průměr částice, a ni je četnost výskytu průměru částic di.- Σ (ni. Di 4 ) Dw = F (bi7ïP1 in which di denotes the diameter of the particle, and ni is the occurrence frequency of the particle diameter di.
V oboru kapalinové chromatografie je dobře známo, že je možno zlepšit separační schopnost zmenšením částic náplně. Když však prochází rozpouštědlo kolonou, vyplněnou gelem o malém rozměru částic, zvyšuje se nebezpečí ztráty tlaku ve srovnání s případem, kdy se použije gel o větší velikosti částic. Pokud je mechanická pevnost gelu malá, dochází к deformaci gelu, což má za následek abnormálně velkou ztrátu tlaku. Gel s malou velikostí částic je nepoužitelný pro vysoce citlivou rychlou kapalinovou chromatografií.It is well known in the art of liquid chromatography that it is possible to improve the separation ability by reducing the fill particles. However, as the solvent passes through a column filled with a small particle size gel, the risk of pressure loss increases when compared to a larger particle size gel. If the mechanical strength of the gel is low, the gel deforms, resulting in an abnormally high pressure loss. The small particle size gel is unusable for high speed liquid chromatography.
Vzhledem к tomu, že mechanická pevnost gelu podle vynálezu může být úspěšně zlepšena regulací různých vlastností, včetně poměru reesterifikace nebo poměru zmýdelnění a stupně zesítění, odolává gel vysokým rychlostem a vysokým tlakům přes malou velikost jeho částic.Since the mechanical strength of the gel of the invention can be successfully improved by controlling various properties, including the re-esterification ratio or the saponification ratio and the degree of cross-linking, the gel resists high velocities and high pressures despite its small particle size.
Gel podle vynálezu, vykazující uvedené vlastnosti, může být vyroben suspenzní polymerací monomerní směsi alespoň jednoho vinylesteru karboxylové kyseliny a alespoň jednoho zesilujícího monomeru, obsahujícího isokyanurátový kruh v přítomnosti rozpouštědla, které může rozpouštět směs monomerů, avšak je obtížně rozpustné ve vodě a reesterifikací nebo zmýdelněním částic výsledného kopolymeru do takové míry, aby poměr reesterifikace nebo poměr zmýdelnění činil asi 0,4 až 0,8.A gel according to the invention exhibiting said properties can be made by suspension polymerization of a monomer mixture of at least one vinyl ester of a carboxylic acid and at least one crosslinking monomer containing an isocyanurate ring in the presence of a solvent which can dissolve the monomer mixture but is difficult to dissolve in water and reesterify or saponify the particles to a degree such that the reesterification or saponification ratio is about 0.4 to 0.8.
Vinylester karboxylové kyseliny, který může být použit v tomto vynálezu, je sloučenina, mající alespoň jednu polymerovatelnou vinylkarboxylovou skupinu a náleží do skupiny, tvořené vinylestery karboxylové kyseliny se 2 až 5 atomy uhlíku. Příkladem takových vinylesterů karboxylové kyseliny je vinylacetát, vinylpropionát, vinylbutyrát, vinylvalerát a vinylpivalát, které mohou být použity jednotlivě nebo v kombinaci dvou nebo více druhů. Z těchto vinylesterů karboxylové kyseliny jsou zvláště výhodné vinylacetát a vinylpropionát, vzhledem ke snadnosti polymerace, reesterifikace, zmýdelnění i dostupnosti.A vinyl ester of a carboxylic acid which can be used in the present invention is a compound having at least one polymerizable vinyl carboxylic acid group and belongs to the group consisting of vinyl esters of a carboxylic acid having 2 to 5 carbon atoms. Examples of such vinyl esters of carboxylic acid are vinyl acetate, vinyl propionate, vinyl butyrate, vinyl valerate and vinyl pivalate, which may be used singly or in combination of two or more kinds. Of these vinyl carboxylic acid esters, vinyl acetate and vinyl propionate are particularly preferred due to their ease of polymerization, re-esterification, saponification and availability.
Zesíťující monomer, mající isokyanurátový kruh a použitelný ve způsobu podle vynálezu, je reprezentován vzorcem:The crosslinking monomer having an isocyanurate ring and useful in the process of the invention is represented by the formula:
ve kterémin which
Ri, Rz a R3 mohou být stejné nebo rozdílné a náleží do skupiny, tvořenéR 1, R 2 and R 3 may be the same or different and belong to the group formed
-CHz-CH = CH2, —CH2— C - CH— a —CH2—C = CH2.-CH 2 -CH = CH 2, —CH 2 -C -CH-, and —CH 2 —C = CH 2 .
СНзСНз
Z těchto zesíťujících monomerů má triallylisokyanurát (Ri=Ra=R3 = —CH2—CH = = CH2) dobrou schopnost kopolymerace s vinylacetátem a dobrou stabilitu při reesterifikaci nebo zmýdelnění a v této souvislosti je mu dávána přednost pro použití jako zesíťující monomer.Of these crosslinking monomers, triallyl isocyanurate (R 1 = R a = R 3 = -CH 2 -CH = CH 2) has good copolymerization with vinyl acetate and good stability in re-esterification or saponification, and in this context is preferred for use as a cross-linking monomer.
Molární poměr vinylesterů karboxylové kyseliny к zesíťujícímu monomeru, který se může použít, je obvykle 1 к asi 0,08 až asi 0,22. Podle použití získaného gelu je molární poměr vinylesterů karboxylové kyseliny к použitému zesíťujícímu monomeru s výhodou 1 к asi 0,11 až asi 0,16 nebo zvláště výhodně 1 к asi 0,12 až asi 0,18.The molar ratio of vinyl esters of carboxylic acid to the crosslinking monomer that can be used is usually 1 k about 0.08 to about 0.22. Depending on the use of the gel obtained, the molar ratio of vinyl esters of carboxylic acid to the crosslinking monomer used is preferably 1 k about 0.11 to about 0.16 or particularly preferably 1 k about 0.12 to about 0.18.
Jiné monomery, jako je například 2-ethylhexylmethakrylát a akrylamid, které jsou kopolymerovatelné s vinylesterem karboxylové kyseliny a zesíťujícím monomerem, se mohou použít v množství například až do asi 3 °/o hmotnostních, vztaženo na hmotnost vinylesterů karboxylové kyseliny, co v podstatě nemá nepříznivý účinek na vlastnosti a separační výkon gelu.Other monomers, such as 2-ethylhexyl methacrylate and acrylamide, which are copolymerizable with a vinyl ester of a carboxylic acid and a crosslinking monomer, may be used in amounts up to about 3% by weight based on the weight of the vinyl ester of the carboxylic acid. effect on gel properties and separation performance.
К vytvoření permanentních pórů v částicích kopolymeru а к současné kontrole množství pórů, velikosti pórů a distribuce velikosti pórů, se к systému pro polymeraci v suspenzi přidá alespoň jedno ředidlo, které může rozpouštět směs monomerů, která je ale obtížně rozpustná ve vodě.To create permanent pores in the copolymer particles and at the same time control the pore amount, pore size and pore size distribution, at least one diluent is added to the slurry polymerization system, which can dissolve the monomer mixture, but which is poorly soluble in water.
Příkladem takových ředidel, které se mohou použít při způsobu podle vynálezu, jsou aromatické uhlovodíky, jako je toluen, xy len a dekalin, alifatické uhlovodíky, jako je heptan, oktan a děkan, esterové sloučeniny, jako je n-butylacetát, isobutylacetát a n-hexylacetát, methylethylketon, a n-heptanol, které mohou být použity samotné nebo v kombinaci dvou nebo více druhů. Vhodné množství ředidla, které může být použito podle vynálezu, se pohybuje v rozmezí od asi 20 do asi 200 dílů hmotnostních na 100 dílů hmotnostních směsi monomerů. Pokud je množství ředidla nižší, než je uvedená spodní hranice tohoto rozmezí, množství pórů v gelu se příliš sníží a současně se zmenší separační schopnost gelu. Pokud je toto množství vyšší než udaná horní hranice shora uvedeného rozmezí, zmenší se mechanická pevnost gelu a gel ztrácí schopnost к použití při vysokých rychlostech a vysokých tlacích. Výhodné množství ředidla je v rozmezí od asi 20 do asi 100 dílů hmotnostních na 100 dílů hmotnostních směsi monomerů.Examples of such diluents that may be used in the process of the invention are aromatic hydrocarbons such as toluene, xylene and decalin, aliphatic hydrocarbons such as heptane, octane and decane, ester compounds such as n-butyl acetate, isobutyl acetate and n- hexyl acetate, methyl ethyl ketone, and n-heptanol, which may be used alone or in combination of two or more species. A suitable amount of diluent that can be used in the present invention is from about 20 to about 200 parts by weight per 100 parts by weight of the monomer mixture. If the amount of diluent is less than said lower limit of this range, the amount of pores in the gel will decrease too much and at the same time the gel separation capacity will decrease. If this amount is higher than the stated upper limit of the above range, the mechanical strength of the gel is reduced and the gel loses its ability to be used at high speeds and high pressures. A preferred amount of diluent is in the range of about 20 to about 100 parts by weight per 100 parts by weight of the monomer mixture.
Za účelem kontroly velikosti pórů a distribuce velikosti pórů gelu může se použít lineárního polymeru rozpustného ve směsi monomerů v kombinaci s ředidlem shora popsaným.To control the pore size and gel pore size distribution, a linear polymer soluble in the monomer mixture may be used in combination with the diluent described above.
Lineární polymer, který může být použit podle tohoto vynálezu, je lineární polymer, který se může rozpustit ve směsi monomerů v koncentraci alespoň 1 % hmotnostního. Příkladem takových lineárních polymerů jsou polyvinylacetát a polystyren. Množství použitého lineárního polymeru činí až do asi 10 dílů hmotnostních, výhodně asi 0,3 až asi 10 dílů hmotnostních na 100 dílů hmotnostních monomerní směsi. Použitím lineárního polymeru v kombinaci s ředidlem se může snadno vyrobit gel, který má větší průměr pórů, tj. má vysoké Мцт.The linear polymer which can be used according to the invention is a linear polymer which can be dissolved in the monomer mixture at a concentration of at least 1% by weight. Examples of such linear polymers are polyvinyl acetate and polystyrene. The amount of linear polymer used is up to about 10 parts by weight, preferably about 0.3 to about 10 parts by weight, per 100 parts by weight of the monomer mixture. Using a linear polymer in combination with a diluent, can be easily produced a gel having a larger pore diameter, i.e. has high Мц т.
Iniciátor, který se může použít pro polymeraci v suspenzi podle tohoto vynálezu, může být libovolný upotřebitelný iniciátor radikálové polymerace. Vhodným příkladem mohou být iniciátory typu azosloučeniny, jako 2,2-azobisisobutyronitril a 2,2‘-azobis(2,4-dimethylvaleronitrilj a iniciátory peroxidového typu, jako je benzoylperoxid, lauroylperoxid, di-terc.butylperoxid a kumenhydroperoxid. Množství iniciátoru radikálové polymerace je obecně v rozmezí od asi 0,1 do asi 5 dílů hmotnostních na 100 dílů hmotnostních monomerní směsi.The initiator that can be used for the suspension polymerization of the present invention can be any useful free radical polymerization initiator. Suitable examples are azo-type initiators such as 2,2-azobisisobutyronitrile and 2,2'-azobis (2,4-dimethylvaleronitrile) and peroxide-type initiators such as benzoyl peroxide, lauroyl peroxide, di-tert-butyl peroxide and cumene hydroperoxide. it is generally in the range of about 0.1 to about 5 parts by weight per 100 parts by weight of the monomer mixture.
Při provádění polymerace v suspenzi je výhodné přidat к vodné fázi stabilizátor suspenze zvolený ze skupiny tvořené o sobě známými organickými polymerními stabilizátory, jako je polyvinylalkohol a methylcelulóza. Množství použitého stabilizátoru suspenze je v rozmezí od asi 0,1 do asi 3 % hmotnostních, vztaženo na hmotnost vody, jako prostředí pro polymeraci v suspenzi. Je-li nutné nebo v případě potřeby je možné použít kombinace s prostředkem pro úpravu pH, jako fosforečnanem sodným. Je výhodné udržovat přibližně neutrální hod228510 notu pH suspenze. Velikost částic granulovaného polymeru získaného polymerací je možné měnit změnou druhu a množství stabilizátoru suspenze nebo rychlost míchání.When carrying out suspension polymerization, it is preferable to add a suspension stabilizer selected from the group consisting of organic polymeric stabilizers known per se, such as polyvinyl alcohol and methylcellulose, to the aqueous phase. The amount of suspension stabilizer used is in the range of about 0.1 to about 3% by weight, based on the weight of water, as the suspension polymerization medium. Combinations with a pH adjusting agent such as sodium phosphate may be used if necessary or necessary. It is preferred to maintain approximately neutral pH of the suspension suspension. The particle size of the granulated polymer obtained by polymerization can be varied by varying the type and amount of suspension stabilizer or agitation rate.
Objemový nebo hmotnostní poměr mezi organickou fází a vodnou fází při polymeraci v suspenzi není podstatný a může být takový, jaký se obvykle volí při provádění polymerace v suspenzi.The volume or weight ratio between the organic phase and the aqueous phase in slurry polymerization is not critical and may be as conventionally selected when performing slurry polymerization.
•Polymerační teplota se pohybuje obecně v rozmezí · od asi 50 do· asi 90 °C, výhodně od asi 60 do asi 80 °C.The polymerization temperature is generally in the range of from about 50 to about 90 ° C, preferably from about 60 to about 80 ° C.
Doba polymerace je obvykle asi 10 až 50 hodin.The polymerization time is usually about 10 to 50 hours.
Po ukončení polymerace se částice - výsledného kopolymeru odfiltrují, dostatečně promyjí vodou, horkou vodou, acetonem a podobně, aby se odstranil lineární polymer, stabilizátor suspenze, zbývající monomery, ředidla atd., ulpívající na částicích a kopolymer se potom suší.After completion of the polymerization, the resulting copolymer particles are filtered off, washed sufficiently with water, hot water, acetone and the like to remove the linear polymer, suspension stabilizer, remaining monomers, diluents, etc. adhering to the particles, and the copolymer is then dried.
Takto získané částice kopolymeru se reesterifikují nebo zmýdelní. Reesterifikace může být prováděna v alkoholu, jako- methanolu, ethanolu a podobně jako v rozpouštědle. Zmýdelnění se může provádět ve vodě nebo· ve směsi vody a alkoholu, jako methanolu, ethanolu a podobně, jako v rozpouštědle, vždy za použití kyseliny, například kyseliny sírové, kyseliny chlorovodíkové a podobně, nebo zásady, jako hydroxidu sodného, hydroxidu draselného a podobně.The copolymer particles thus obtained are re-esterified or saponified. The esterification can be carried out in an alcohol such as methanol, ethanol and the like in a solvent. The saponification can be carried out in water or in a mixture of water and an alcohol such as methanol, ethanol and the like, as in a solvent, using an acid such as sulfuric acid, hydrochloric acid and the like or a base such as sodium hydroxide, potassium hydroxide and the like. .
Teplota pro reesterifikaci nebo zmýdelnění je obvykle asi 0 až asi 60 °C, výhodně asi 0 až asi 40 °C. Doba reesterifikace nebo zmýdelnění se pohybuje v rozmezí od asi 5 do asi 50 hodin.The temperature for re-esterification or saponification is usually about 0 to about 60 ° C, preferably about 0 to about 40 ° C. The time of re-esterification or saponification ranges from about 5 to about 50 hours.
K výrobě gelů, jejichž velikost částic je malá, a které odolávají vysokým tlakům a vysokým rychlostem, je nutné podle tohoto vynálezu, aby poměr reesterifikace nebo poměr zmýdelnění byl v rozmezí od asi 0,4 do asi 0,8. Pokud jsou · všechny esterové skupiny v gelu reesterifikovány nebo zmýdelněny, to znamená pokud činí poměr reesterifikace nebo zmýdelnění 1,0, může se získat vysoce hydrofilní gel, jehož mechanická pevnost nutně není dostatečná. Výhodný poměr reesterifikace nebo poměr zmýdelnění je asi 0,45 až asi 0,75. Podmínky pro reesterifikaci nebo zmýdelnění se mohou příslušně volit změnou druhu reakčního rozpouštědla, reakční teploty, reakční doby a podobně.In order to produce gels whose particle size is small and which resist high pressures and high velocities, it is necessary according to the invention that the re-esterification ratio or saponification ratio is in the range of about 0.4 to about 0.8. If all the ester groups in the gel are re-esterified or saponified, i.e. if the ratio of the re-esterification or saponification is 1.0, a highly hydrophilic gel can be obtained whose mechanical strength is not necessarily sufficient. A preferred re-esterification ratio or saponification ratio is about 0.45 to about 0.75. The conditions for re-esterification or saponification can be appropriately selected by changing the type of reaction solvent, reaction temperature, reaction time and the like.
Po reesterifikaci nebo zmýdelnění se získané částice odfiltrují a dostatečně promyjí studenou nebo horkou vodou. Podle potřeby se částice roztřídí, aby se získaly částice použitelné jako náplň pro vysoce citlivou rychlou kapalinovou chromatografií, například tím, že se částice dispergují ve vodě, aby se tím umožnilo jejich jednoduché roztřídění využitím rozdílu v rychlosti sedimentace.After re-esterification or saponification, the obtained particles are filtered off and washed sufficiently with cold or hot water. If necessary, the particles are sorted to obtain particles usable as a high-speed liquid chromatography cartridge, for example by dispersing the particles in water to allow them to be easily sorted by utilizing the difference in sedimentation rate.
Gel podle tohoto vynálezu obsahuje v polymerním skeletu převážně hydroxyskupiny, esterové skupiny a jednotky zesilujícího monomeru, které mají isokyanurátový kruh · a · jsou dostatečně hydrofilní při takovém obsahu hydroxylů, jako spadá do shora uvedeného rozsahu. Gel nemá schopnost adsorbovat řadu sloučenin rozpuštěných ve · vodě. Proto při separaci nebo analýze ve vodě rozpustných syntetických polymerů, sacharidů nebo proteinů, má gel kalibrační křivky, ve kterých je vztah mezi elučním objemem a logaritmem molekulové hmotnosti materiálu určeného k oddělení, vyjádřen v podstatě přímými čarami nebo mírnými křivkami. To znamená, že je gel podle tohoto vynálezu vhodný pro použití v gelové permeační chromatografií typu s vodným prostředím. Při analýze vzorků, sestávajících z různých složek, jako například v případě séra nebo moči, jsou však při použití gelu podle tohoto vynálezu některé· složky slabě adsorbovány na gelu, na co ukazuje větší eluční objem, než by se dal předpokládat z jejich molekulové hmotnosti. Výsledkem tohoto může být zjištění řady píků. Kromě toho gel nemá téměř žádnou · adsorbční schopnost pro proteiny, jako · je albumin a eluuje proteiny v objemu, odpovídajícímu jejich molekulové hmotnosti. Proto při použití gelu podle vynálezu při analýze séra nebo moči není tedy nutné odstranit proteiny. Vzhledem k tomu, že gel · podle vynálezu obsahuje hydroxyskupiny, esterové skupiny a jednotky zesifujícího monomeru, majícího isokyanurátový kruh, ve vhodných poměrech, dá se předpokládat, · že malá adsorpční schopnost gelu kromě separačního účinku, založeného na rozdílech · ve velikosti molekul, poskytuje gel s dobrou separační schopností.The gel of the present invention contains predominantly hydroxyl groups, ester groups and monomer crosslinking units in the polymer backbone having an isocyanurate ring and are sufficiently hydrophilic at a hydroxyl content within the above range. The gel does not have the ability to adsorb a variety of compounds dissolved in water. Therefore, when separating or analyzing water-soluble synthetic polymers, carbohydrates or proteins, the gel has calibration curves in which the relationship between the elution volume and the logarithm of the molecular weight of the material to be separated is expressed by substantially straight lines or mild curves. That is, the gel of the present invention is suitable for use in aqueous permeate gel permeation chromatography. However, when analyzing samples consisting of various components, such as serum or urine, using the gel of the present invention, some of the components are weakly adsorbed onto the gel, indicating a larger elution volume than would be expected from their molecular weight. This can result in the detection of a number of peaks. In addition, the gel has almost no adsorptive capacity for proteins such as albumin and elutes proteins in a volume corresponding to their molecular weight. Therefore, it is not necessary to remove proteins when using the gel of the invention in serum or urine analysis. Since the gel according to the invention contains hydroxyl groups, ester groups and crosslinking monomer units having an isocyanurate ring in suitable proportions, it can be assumed that the low adsorption capacity of the gel in addition to the separation effect based on differences in molecular sizes provides gel with good separation ability.
Gel podle předkládaného vynálezu vykazuje dále velmi dobrou mechanickou pevnost · s hodnotou Wr udržovanou uvnitř uvedeného rozmezí. Proto bez ohledu na malou velikost částic odolává gel podle vynálezu vysokým tlakům a vysokým rychlostem.Furthermore, the gel of the present invention exhibits very good mechanical strength with a Wr value maintained within said range. Therefore, despite the small particle size, the gel of the invention resists high pressures and high speeds.
Gel pro rychlou gelovou permeační chromatografii ve vodném médiu musí splňovat · následující požadavky:The gel for rapid gel permeation chromatography in an aqueous medium must meet the following requirements:
obsahovat póry v gelu, vykazovat malou adsorpční schopnost a míti dostatečnou mechanickou pevnost, aby obstály při vysokých tlacích nebo vysokých rychlostech i při malých rozměrech částic. Gel podle vynálezu splňuje všechny tyto· požadavky, přičemž tyto vlastnosti vyplývají z hodnot X, pohybujících se v uvedených rozmezích, poměru reesterifikace nebo poměru zmýdelnění a hodnot Wr.contain pores in the gel, exhibit poor adsorption capacity and have sufficient mechanical strength to withstand high pressures or high velocities even at small particle sizes. The gel according to the invention fulfills all of these requirements, which properties result from the X-values within the stated ranges, the re-esterification ratio or the saponification ratio and the Wr values.
Takovéto vynikající separační vlastnosti a mechanické pevnosti, jako vykazuje gel podle vynálezu, nemohou být například u gelu tvořeného kopolymerem vinylalkoholu a triallylisokyanurátu, u něhož je hodnota X nízká a absorpce infračerveného absorpčního spektra při 1730 cm_1 zcela vymizela, jak je uvedeno v britském patentu čísloSuch excellent release properties and mechanical strength such shows gel of the invention can be for example in a gel consisting of a copolymer of vinyl alcohol and triallyl isocyanurate, wherein the value of X is low and the absorption of infrared absorption spectrum at 1730 cm _1 disappeared completely, as disclosed in British Patent No.
034 328 A. Z toho důvodu není takový gel vhodný pro použití jako náplň pro vysoce citlivou rychlou kapalinovou chromatografii.Therefore, such a gel is not suitable for use as a high-speed liquid chromatography cartridge.
Velikost pórů gelu podle vynálezu může být volena v širokém rozmezí. Gel podle vynálezu není tudíž vhodný pouze pro separaci nebo analýzu ve vodě rozpustných syntetických. polymerů, sacharidů nebo proteinů, ale rovněž pro analýzu složek s molekulovou hmotností od několika set tisíc do několika miliónů, obsažených v krvi a moči a které se zdají mít úzkou souvislost s chorobami jater nebo ledvin nebo symptomů, jakož' i karcinomu. Kromě toho, vzhledem k tomu, že je gel podle vynálezu určen pro své vynikající vlastnosti k použití pro rychlou gelovou permeační chromatografii, mohou být tyto analýzy provedeny v krátkém časovém úseku a poskytnout větší množství informací.The pore size of the gel of the invention can be selected within a wide range. The gel of the invention is therefore not only suitable for the separation or analysis of water-soluble synthetic. polymers, carbohydrates or proteins, but also for the analysis of components of molecular weight from several hundred thousand to several million, contained in blood and urine, and which appear to be closely related to liver or kidney diseases or symptoms, as well as cancer. In addition, since the gel of the invention is intended for its excellent properties for use in rapid gel permeation chromatography, these analyzes can be performed in a short period of time and provide more information.
Gel podle vynálezu může být použit jako náplň kolony. Použitá kolona je obvykle válec vyrobený z nerezavějící oceli, přičemž je ovšem možno volit v závislosti na použití jiný typ kolony.The gel of the invention can be used as a packed column. The column used is usually a cylinder made of stainless steel, but it is possible to select another type of column depending on the application.
Vynález bude dále podrobněji objasněn příklady praktického použití, které však rozsah vynálezu nijak neomezují.The invention will be further elucidated in more detail by way of non-limiting examples.
Příklad 1Example 1
Homogenní kapalná směs sestávající ze 100 g vinylacetátu, 32,2 g (X = 0,25) triallylisokyanurátu, 100 g n-butylacetátu, 3,3 g 2,2‘-azObisisooiityronitrilu a 800 ml vodného roztoku, obsahujícího 1 % hmot, polyvinylalkoholu se stupněm polymerace asi 2400 a poměrem zmýdelnění 88 % mol., 0,05 % hmot, dihydrátu dihydrogenfosforečnanu sodného a 1,5 % hmot, dodekahydrátu hydrogenfosforečnanu sodného, byla vpravena do dvoulitrové baňky. Po důkladném promíchání za míchání se provedla při zahřívání na 65 °C po dobu 18 hodin a dále při zahřívání na 75 °C po dobu 5 hodin polymerace v suspenzi. Částice výsledného polymeru byly odděleny filtrací, promyty vodou a potom acetonem, vysušeny a podrobeny ^esse^nkací v roztoku obsahujícím 47 g hydroxidu sodného a 2 1 methanolu při 15 °C po dobu 20 hodin. Výsledné částice polymeru byly odfiltrovány, promyty vodou a dispergovány ve vodě za účelem roztřídění na základě rozdílné rychlosti-sedimentace.Homogeneous liquid mixture consisting of 100 g of vinyl acetate, 32,2 g (X = 0,25) of triallylisocyanurate, 100 g of n-butyl acetate, 3,3 g of 2,2'-azobisisobiityronitrile and 800 ml of an aqueous solution containing 1% by weight of polyvinyl alcohol with a degree of polymerization of about 2400 and a saponification ratio of 88 mol%, 0.05 wt%, sodium dihydrogen phosphate dihydrate and 1.5 wt% sodium phosphate dodecahydrate, was introduced into a 2 liter flask. After thorough mixing with stirring, polymerization in suspension was carried out at 65 ° C for 18 hours and then at 75 ° C for 5 hours. The resulting polymer particles were collected by filtration, washed with water and then acetone, dried and subjected to a solution in a solution containing 47 g of sodium hydroxide and 2 l of methanol at 15 ° C for 20 hours. The resulting polymer particles were filtered off, washed with water and dispersed in water to sort through different sedimentation rates.
Průměr částic Dw takto získaného gelu zesilovaného polyvlnylalkoholu byl změřen, přičemž byl stanoven průměr 10,0 μπι. Hustota hydroxylových skupin q0H byla stanovena popsaným postupem a byla zjištěna hodnota 7,3 mmol/g, což ukazuje na poměr reesterifikace 0,64. Rovněž bylo potvrzeno infračervenou adsorpcí spektra gelu po reesterifikaci, jak je znázorněno na obr. 2, že ye skeletu polymeru zbyly esterové skupiny. Infračervené spektrum bylo měřeno po vytvarování gelu do KBr tablet při použití in fračerveného spektrofotometru. Gel vykazoval nasákavost vody 1,58 g vody/g suchého gelu a specifickou plochu povrchu 95 m2/g.The particle diameter D w of the polyvinyl alcohol crosslinked gel thus obtained was measured to a diameter of 10.0 μπι. The density of hydroxyl groups Q 0 H was determined by the procedure described and was found to be 7.3 mmol / g, indicating a transesterification ratio of 0.64. It was also confirmed by infrared adsorption of the gel spectrum after re-esterification, as shown in Fig. 2, that the ester backbone remained. The infrared spectrum was measured after gel shaping into KBr tablets using an infrared spectrophotometer. The gel had a water absorption of 1.58 g water / g dry gel and a specific surface area of 95 m 2 / g.
Tento gel byl vpraven do kolony z nerezavějící oceli o průměru 7,5 mm a délce 50 cm a za použití diferenčního' refraktometru byly měřeny vodné roztoky dextranů a polyethylenglykolů, o různé molekulové hmotnosti. Sloučeniny z každé skupiny byly eluovány postupně v závislosti na vzrůstu molekulové hmotnosti a bylo potvrzeno, že separace byla provedena pomocí gelové permeační chromatografle. Vyloučená molekulová hmotnost Mum dextranů činila 3 χ 1Ó1. Při analýze χ-globulinu, albuminu hovězího séra, ovalbuminu a myo^lubilinu, při použití vodného roztoku 'obsahujícího 0,3 M chloridu sodného a 0,1 M fosforečnanu sodného, jako rozpouštědla v detektoru ultrafialové absorpce byly proteiny eluovány v pořadí proteinů od vyšší molekulové hmotnosti, se stupněm opětného získání v podstatě 100 °/o. Všechny vzorky byly měřeny při rychlosti toku 1 ml/min.The gel was loaded onto a 7.5 mm diameter and 50 cm long stainless steel column and aqueous solutions of dextrans and polyethylene glycols of different molecular weights were measured using a differential refractometer. Compounds from each group were eluted sequentially depending on the increase in molecular weight and it was confirmed that the separation was performed by gel permeation chromatography. The excluded molecular weight of the Mum dextrans was 3 χ 10 1 . In the analysis of χ-globulin, bovine serum albumin, ovalbumin and myobubilin, using an aqueous solution containing 0.3 M sodium chloride and 0.1 M sodium phosphate as solvent in the ultraviolet absorption detector, proteins were eluted in order of proteins from higher molecular weight, with a degree of recovery of substantially 100%. All samples were measured at a flow rate of 1 ml / min.
Vzorek roztoku sublimačně sušeného lidského séra byl kromě toho analyzován při použití naplněné kolony podle obr. 3, kde vrchol A indikuje převážně albumin, vrchol B kreatinin a vrchol C kyselinu močovou. Některé složky byly eluovány v množství větším než odpovídá prázdnému objemu kolony v důsledku jejich slabé absorpční schopnosti ke gelu, avšak počet složek byl zjištěn a oddělen po eluci χ-globulinu a albuminu.In addition, a sample of freeze-dried human serum solution was analyzed using the packed column of Figure 3, where peak A indicates predominantly albumin, peak B creatinine and peak C uric acid. Some components were eluted in an amount greater than the void volume of the column due to their poor gel absorption, but the number of components was detected and separated after elution of χ-globulin and albumin.
Příklad 2Example 2
Gel byl připraven postupem, popsaným v příkladu 1 s tím rozdílem, že místo kapalné směsi, použité v příkladu 1 byla použita kapalná směs, sestávající ze 100 g vinylacetátu, 32,2 g (X = 0,25) triallyMsokyanurátu, 40 g toluenu a 3,3 g 2,2‘-azobisisobutyronitrilu, a že reesterifikace byla prováděna při 40 °C po dobu 20 hodin. _The gel was prepared as described in Example 1 except that a liquid mixture consisting of 100 g vinyl acetate, 32.2 g (X = 0.25) triallyMisocyanurate, 40 g toluene, was used instead of the liquid mixture used in Example 1. 3.3 g of 2,2'-azobisisobutyronitrile, and that the re-esterification was carried out at 40 ° C for 20 hours. _
Výsledný gel vykazoval hodnotu Dw 9,5 ^m, q0H 9,0 mmol/g, poměr reesterifikace 0,74, Wr 1,0 g vody/g suchého gelu a specifickou plochu povrchu 38 m5/g.The resulting gel showed a value of D w of 9.5 microns, q0H 9.0 mmol / g, 0.74 transesterification ratio, Wr 1.0 g water / g dry gel and a specific surface area of 38 m 5 / g.
Gel byl vpraven do stejné kolony jako v příkladu 1 a byla prováděna analýza polyethylenglykolů s různou molekulovou hmotností. Bylo prokázáno, že eluční pořadí odpovídalo polyethylenglykolu s vyšší molekulovou hmotností a MHm odpovídal 1,9 x x 1Ο3. Všechny vzorky byly měřeny při průtokové rychlosti 1 ml/min a každá z analýz byla ukončena v průběhu 20 minut. Dále byl analyzován vzorek roztoku lyofíiizovaného lidského séra, při použití naplněné kolony, poskytující záznam, odpovídající obr. 4, kde vrchol D představuje převážně albumin, vrchol E kreatin a vrchol F kyselinu močovou. Ačkoliv je počet vrcholů zdánlivě menší než na obr. 3 v ' důsledku menší citlivosti měření, odpovídá základní model eluční křivky téměř ' zcela křivce podle obr. 3. To potvrzuje, že pomocí gelu podle tohoto příkladu je možno , provádět stanovení a oddělení složek, uvedených v příkladu.The gel was loaded on the same column as in Example 1 and polyethylene glycols of different molecular weights were analyzed. The elution order was shown to correspond to the higher molecular weight polyethylene glycol and the M Hm was 1.9 xx 1-3 . All samples were measured at a flow rate of 1 ml / min and each analysis was terminated within 20 minutes. Next, a sample of lyophilized human serum solution was analyzed using a packed column providing the record corresponding to Fig. 4, wherein peak D is predominantly albumin, peak E is creatine and peak F is uric acid. Although the number of peaks appears to be smaller than in Fig. 3 due to the lower sensitivity of the measurements, the basic model of the elution curve almost completely corresponds to the curve of Fig. 3. This confirms that the gel can be used to determine and separate components. in the example.
Příklad 3Example 3
Gel byl připraven postupem, uvedeným v příkladu 1 s tím rozdílem, že bylo použito kapalné směsi, sestávající ze 100 g vinylacetátu, 37,5 g (X = 0,28) triallyiisokyanurátu, 100 · g n-butylacetátu a 4,1 g polyvinylácetátu, ' se stupněm polymerace asi 500 aThe gel was prepared as in Example 1 except that a liquid mixture consisting of 100 g vinyl acetate, 37.5 g (X = 0.28) triallyl isocyanurate, 100 g n-butyl acetate and 4.1 g polyvinyl acetate was used. with a degree of polymerization of about 500 and
3,4 g 2,2‘-azobisisobntyronitrilu a reesterifikace byla prováděna při 15 °C po dobu 15 hodin.3.4 g of 2,2‘-azobisisobutyronitrile and re-esterification were carried out at 15 ° C for 15 hours.
Výslpdný gel měl Ě)w 9,1 μη, qoH 5,1 mmol/ /g (poměr reesterifikace 0,50), Wr 1,46 g vody/g suchého gelu a specifickou plochou povrchu 86 ra2/g.Výslpdný gel had E) μη w 9,1, QOH 5.1 mmol / / g (transesterification ratio 0.50) Wr 1.46 g water / g dry gel and a specific surface area of 86 RA 2 / g.
Tento gel byl vpraven do kolony, popsané v příkladu · 1 a byly prováděny analýzy polyethylenglykolů a dextranů, majících různou molekulovou hmotnost, a proteinů včetně χ-globulinu. Analýzami bylo potvrzeno, že sloučeniny každé skupiny byly eluovány v pořadí od sloučeniny mající vyšší molekulovou hmotnost a že proteiny byly eluovány se stupněm opětného získání v podstatě ' 100 %. Miim pro dextran odpovídala 8 x χ 104. Všechny vzorky byly měřeny při průtokové rychlosti 1 ml/min a každá z analýz byla ukončena během 20 minut.This gel was loaded onto the column described in Example 1 and analyzed for polyethylene glycols and dextrans having different molecular weights and proteins including χ-globulin. The analyzes confirmed that the compounds of each group were eluted in order from the higher molecular weight compound and that the proteins eluted with a recovery rate of substantially 100%. The mii m for dextran corresponded to 8 x χ 104. All samples were measured at a flow rate of 1 ml / min and each analysis was terminated within 20 minutes.
Příklad 4Example 4
Gel byl připraven postupem podle příkladu 1 při použití kapalné směsi, obsahující 116 g vinylpropionátu, 39,4 g (X = 0,29) triallylisokyanurátu, 62 g n-butylacetátu aThe gel was prepared as in Example 1 using a liquid mixture containing 116 g vinyl propionate, 39.4 g (X = 0.29) triallyl isocyanurate, 62 g n-butyl acetate and
3,9 g 2,2‘-azobisisobutyronitrilu. ReesSerřfikace byla prováděna při 40 °C po dobu 20 hodin. _3.9 g of 2,2‘-azobisisobutyronitrile. Re-sterilization was carried out at 40 ° C for 20 hours. _
ZíSkaný gel vykazoval Dw 10,8 pm, q0HThe gel obtained had a D w of 10.8 µm, q 0 H
7,7 mmol/g (poměr rrerierrfikace 0,72), WR 7.7 mmol / g (rererification ratio 0.72), W Rt
1,30 g vody/g suchého gelu a specifickou plochu povrchu 52 m2/g.1.30 g water / g dry gel and a specific surface area of 52 m 2 / g.
Tento gel byl umístěn v koloně, popsané v příkladu 1 a byly prováděny analýzy polyrthylrnglykolů a dextranů, majících různou molekulovou hmotnost a proteinů, včetně χ-globulinu. Bylo potvrzeno, že sloučeniny každé ze skupin byly eluovány v pořadí se vzrůstající molekulovou hmotností a že proteiny byly eluovány se stupněm opětného získání v podstatě 100 %. MHm pro dextran byla 2 x 104. Všechny vzorky byly měřeny při průtokové rychlosti 2 ml/ /min a každá z analýz byla ukončena během 10 minut.This gel was placed in the column described in Example 1 and analyzes of polyrthylnglycols and dextrans having different molecular weights and proteins, including χ-globulin, were performed. It was confirmed that the compounds of each of the groups were eluted in order of increasing molecular weight and that the proteins eluted with a recovery rate of substantially 100%. M Hm for dextran was 2 x 10 4 . All samples were measured at a flow rate of 2 ml / min and each analysis was completed within 10 minutes.
P ř í k 1 a d 5 .Example 1 a d 5.
Gel byl připraven postupem podle příkladu 1 při použití kapalné směsi, obsahujícíThe gel was prepared as in Example 1 using a liquid mixture containing
100 g · vinrlacrtátu, 41 g (X = 0,3) triallylisokyanurátu, 141 · g methylisobi^itylketonu a100 g of vinrlacrtate, 41 g (X = 0.3) of triallylisocyanurate, 141 g of methyl isobutyl ketone, and
2.8 g 2,2‘-azobisisobntyronilrilu a rrrsierifikace byla prováděna při 40 °C po dobu 20 hodin.2.8 g of 2,2‘-azobisisobutyronilrile and cross-checks were carried out at 40 ° C for 20 hours.
Výsledný , gel vykazoval Dw 12,1 pm, q0H 7.8· meq/g (poměr reesterifikace 0,62), WrThe resulting gel showed D w 12.1 pm, q0H 7.8 · meq / g (reesterification ratio 0.62), Wr
1,78 g vody/g suchého. geko a specifickou plochu povrchu 87 m2/g.1.78 g water / g dry. geko and a specific surface area of 87 m 2 / g.
Tento gel byl umístěn v koloně podle příkladu 1 a byla prováděna série analýz standardních vzorků polrrthylrnglykolů a dextranů s různou molekulovou hmotností. Sloučeniny každé skupiny byly eli-iovány v pořadí od sloučenin s vyšší molekulovou hmotností a Mlim pro dextran odpovídalo · 5 x 104. Rovněž analýza standardních vzorků albuminu hovězího séra, ovalbuminu a myoglobinu byla prováděna při použití naplněné kolony. Rovněž v tomto případě bylo, potvrzeno, že tyto proteiny byly eluovány v pořadí od proteinů s vyšší molekulovou hmotností a se stupněm opětného získání v podstatě 100 %. Získaný diagram je uveden na obr. 5, kde křivka G představuje eluční křivku albuminu, křivka H eluční křivku ova^uminu a křivka I eluční křivku myoglobinu. Jak je patrné z těchto výsledků, gel podle tohoto · příkladu je velmi účinný pro separaci · proteinů. Všechny vzorky byly měřeny při průtokové rychlosti 1 ml za minutu a každá z analýz byla ukončena během 20 minut.This gel was placed in the column of Example 1, and a series of analyzes of standard samples of polrthylene glycols and dextrans of different molecular weights were performed. Compounds each group were ELI Iovan in order from compounds having a higher molecular weight dextran MLI m corresponds to 5 x 10 · 4th Also, analysis of standard samples of bovine serum albumin, ovalbumin and myoglobin was performed using a packed column. Also in this case, it was confirmed that these proteins were eluted in order from higher molecular weight proteins with a recovery rate of substantially 100%. The diagram is shown in Fig. 5, where curve G represents the elution curve of albumin, curve H the elution curve of ovummin and curve I the elution curve of myoglobin. As can be seen from these results, the gel of this example is very effective for protein separation. All samples were measured at a flow rate of 1 ml per minute and each analysis was terminated within 20 minutes.
Příklad 6Example 6
Gel byl připraven postupem podle příkladu 1 při použití kapalné směsi, sestávající ze 100 g vinylacrtáto, 48 g (X = 0,33) triallylisokranoráto, 104 g n-h^anolu aThe gel was prepared as in Example 1 using a liquid mixture consisting of 100 g vinylacrtato, 48 g (X = 0.33) triallylisocranorate, 104 g n-h-anole and
3,7 g 2,2‘-azobisisobutyronitrilu.3.7 g of 2,2‘-azobisisobutyronitrile.
Výsledný gel měl Dw 9,7 μΐη, q0H 4,4 mmol/g (poměr reesterifiкacr 0,4'7), Wr 1,5 g vcdy/g suchého gelu a specifickou plochu povrchu 60 m2/g.The resulting gel had a D w of 9.7 μΐη, a q0H of 4.4 mmol / g (reesterifiocation ratio of 0.4-7), a Wr of 1.5 g v / g dry gel and a specific surface area of 60 m 2 / g.
Tento gel byl umístěn v koloně podle příkladu 1 a při použití naplněné kolony byly prováděny analýzy polyrthrlrnglrkкlů a dextranů, majících různé molekulové hmotnosti. Všechny sloučeniny byly eluovány v pořadí od nejvyšší molekulové hmotnosti. MHm pro dextran bylo 5 x 105. Všechny vzorky byly měřeny při průtokové rychlosti 1 ml/min a každá z analýz byla ukončena během 20 minut.This gel was placed in a column according to Example 1 and polyrolides and dextrans having different molecular weights were analyzed using a packed column. All compounds eluted in order of the highest molecular weight. The MHm for dextran was 5 x 10 5 . All samples were measured at a flow rate of 1 ml / min and each analysis was terminated within 20 minutes.
Poklad 7Treasure 7
Gel byl připraven postupem podle příkladu 1 při použití kapalné směsi, sestávající ze 100 g vinyl^acetátu, 52 g (X = 0,35) triallrliskCranuráto, 122 g n-butylacetátu, 6 g polyvinylacrtáto o stupni polymerace , asi 500 a 3,8 g 2,2‘-azobisiss0utyronitrilu, přičemž byla reesterinkace prováděna při 40° Celsia po dobu 20 hodin.The gel was prepared according to the procedure of Example 1 using a liquid mixture consisting of 100 g vinyl acetate, 52 g (X = 0.35) triallriskiskranurato, 122 g n-butyl acetate, 6 g polyvinylacrtato having a degree of polymerization of about 500 and 3.8 g of 2,2'-azobisis-butronitrile, the re-esterification was carried out at 40 ° C for 20 hours.
Výsledný gel měl Dw 11,4 pm, q0H 7,6 mmol/g (poměr esterové výměny 0,75), WrThe resulting gel had a D w of 11.4 µm, qOH 7.6 mmol / g (ester exchange ratio 0.75), Wr
1,65 g suchého gelu a specifickou plochu povrchu 95 m2/g.1.65 g of dry gel and a specific surface area of 95 m 2 / g.
Tento gel byl umístěn v koloně, popsané v příkladu 1 a pomocí naplněné kolony byly prováděny analýzy polyethylenglykolů a dextranů s různými molekulovými hmotnostmi a proteinů, jako je albumin hovězího séra, ovalbumin a myoglobin ve formě standardních vzorků. Bylo potvrzeno, že sloučeniny každé skupiny byly eluovány v pořadí od nejvyšší molekulové hmotnosti a regenerace proteinů odpovídala v podstatě 100 %. MHm pro dextran bylo odhadnuto na 2 χ 106.This gel was placed in a column as described in Example 1, and polyethylene glycols and dextrans of different molecular weights and proteins such as bovine serum albumin, ovalbumin and myoglobin were analyzed using standard packed columns. It was confirmed that the compounds of each group were eluted in order from the highest molecular weight and protein recovery was essentially 100%. The MHm for dextran was estimated to be 2 χ 10 6 .
Všechny vzorky byly měřeny při průtokové rychlosti 1 ml/min a každá z analýz byla ukončena během 20 minut.All samples were measured at a flow rate of 1 ml / min and each analysis was terminated within 20 minutes.
Příklad 8Example 8
Gel byl připraven postupem, popsaným v příkladu 1 při použití kapalné směsi, obsahující 100 g vinylacetátu, 64 g (X = ' 0,4) triallylisokyanurátu, 164 g n-butylacetátu, ''8,2 g polyvinylacetátu se stupněm polymerace asi 500 a 4,1 g 2,2‘-azoblsisobutyronitrilu a reesterifikace byla prováděna při 40 °C po dobu 20 hodin. .__.A gel was prepared as described in Example 1 using a liquid mixture containing 100 g vinyl acetate, 64 g (X = 0.4) triallyl isocyanurate, 164 g n-butyl acetate, 8.2 g polyvinyl acetate with a degree of polymerization of about 500 and 4.1 g of 2,2'-azoblsisobutyronitrile and re-esterification were carried out at 40 ° C for 20 hours. .__.
Výsledný gel vykazoval Dw 11,8 μτη, q0HThe resulting gel showed a Dw of 11.8 μτη, q0H
5,2 mmol/g (poměr reesterifikace 0,6), WR 5.2 mmol / g (reesterification ratio 0.6), W Rt
1,85 g vodly/g suchého gehi a specifickou plochu povrchu 120 m2/g.1.85 g water / g dry gehi and a specific surface area of 120 m 2 / g.
Tento gel byl vpraven do kolony podle příkladu 1 a byly prováděny analýzy polyethylenglykolů a dextranů, majících různou molekulovou hmotnost, a proteinů, jako je albumin, ovalbumin a myoglobin. Analýzy potvrdily, že sloučeniny každé skupiny byly eluovány v pořadí od sloučeniny s nejvyšší molekulovou hmotností a regenerace proteinů odpovídala v podstatě 100 %. Mnm pro dextran činila 1 χ 107. Všechny vzorky byly měřeny při průtokové rychlosti 1 ml/min a všechny analýzy byly ukončeny během 20 minut.This gel was loaded onto the column of Example 1 and analyzes of polyethylene glycols and dextrans having different molecular weights and proteins such as albumin, ovalbumin and myoglobin were performed. The analyzes confirmed that the compounds of each group were eluted in order from the highest molecular weight compound and the protein recovery was essentially 100%. The Mnm for dextran was 1 χ 10 7 . All samples were measured at a flow rate of 1 ml / min and all analyzes were completed within 20 minutes.
Příklad 9Example 9
Gel byl připraven postupem podle příkladu 1 pří použití kapalné směsi obsahující 100 g vinylacetátu, 37,5 g (X = 0,28) triallylisokyanurátu, 69 g n-butylacetátu, 69 g dekalinu (směs cis- a trans-isomerů), 4 g polyvinylacetátu se stupněm polymerace asi 500 a 3,4 g 2,2‘-azobisisobutyronitrilu. Reesterifikace byla prováděna při 40 °C po dobu 20 hodin. __The gel was prepared as in Example 1 using a liquid mixture containing 100 g vinyl acetate, 37.5 g (X = 0.28) triallylisocyanurate, 69 g n-butyl acetate, 69 g decalin (mixture of cis- and trans-isomers), 4 g polyvinyl acetate having a degree of polymerization of about 500 and 3.4 g of 2,2'-azobisisobutyronitrile. The re-esterification was carried out at 40 ° C for 20 hours. __
Výsledný gel měl Dw 14,5 g, q0H 8,5 mmol/ /g (poměr reesterifikace 0,74), Wr 1,98 g vody/g suchého gelu a specifickou plochu povrchu 80 m2/g.The resulting gel had a D w of 14.5 g, qOH 8.5 mmol / / g (0.74 reesterification ratio), a Wr of 1.98 g water / g dry gel and a specific surface area of 80 m 2 / g.
Tento gel byl vpraven do . kolony, popsané v příkladu 1 a pomocí naplněné kolony byly prováděny analýzy polyethylenglykolů a dextranů s různými molekulovými hmotnostmi a proteinů včetně y-globulinu, ovalbuminu a myoglobinu ve formě standardních vzorků proteinu.This gel was incorporated into. The columns described in Example 1 were analyzed using polyethylene glycols and dextrans of different molecular weights and proteins, including γ-globulin, ovalbumin and myoglobin, as standard protein samples, using a packed column.
Analýzy potvrdily, že sloučeniny každé skupiny jsou eluovány v pořadí od sloučeniny s nejvyšší molekulovou hmotností ' a regenerace proteinů odpovídá v podstatě· 100 (,. Miim pro dextran byla 1 χ 106. Všechny vzorky byly měřeny při průtokové rychlosti 1 ml/min a každá z analýz byla ukončena během 20 minut.The analyzes confirmed that the compounds of each group eluted in order from the highest molecular weight compound and protein recovery was essentially 100%. Miim for dextran was 1 × 106. All samples were measured at a flow rate of 1 ml / min and each analysis was completed within 20 minutes.
Porovnávací příklad 1Comparative Example 1
Gel byl připraven postupem podle příkladu 1 s tím rozdílem,· že zmýdelnění ' bylo prováděno při 60 °C po dobu 20 hodin v roztoku, obsahujícím 60 g hydroxidu sodného, 100 g vody a 500 ml methanolu. Toto zmýdelnění nahradilo reesterifikaci, popsanou v příkladu 1. __The gel was prepared as in Example 1 except that the saponification was carried out at 60 ° C for 20 hours in a solution containing 60 g of sodium hydroxide, 100 g of water and 500 ml of methanol. This saponification replaced the re-esterification described in Example 1. __
Výsledný gel měl Dw 9,7 μΐη, q0H 13,5 mmol/g (poměr reesterifikace 0,98) a WrThe resulting gel had a D w of 9.7 μΐη, a q0H of 13.5 mmol / g (re-esterification ratio of 0.98) and a Wr
1,95 g vody/g suchého gelu.1.95 g water / g dry gel.
Podle infračerveného absorpčního spektra gelu zcela vymizela absorpce odpovídající esterové skupině při 1730 cm'1..According to the infrared absorption spectrum of the gel completely resolved absorption corresponding to the ester group at 1730 cm -1 ..
Tento gel byl vpraven do kolony podle příkladu 1 a analýzy byly prováděny za stejných chromatografických podmínek jako v příkladu 1, avšak vzhledem k nedostatečné mechanické · vlastnosti gelu byla .. ztráta tlaku v koloně tak vysoká, že nebylo možno · provádět měření.This gel was loaded onto the column of Example 1 and the analyzes were performed under the same chromatographic conditions as in Example 1, but due to insufficient mechanical properties of the gel, the pressure drop in the column was so high that measurements could not be made.
Porovnávací příklad 2Comparative Example 2
Gel byl připraven postupem podle příkladu 1 s tím rozdílem, že reesterifikace byla prováděna při 0 °C po dobu 5 hodin.The gel was prepared according to the procedure of Example 1 except that the reesterification was carried out at 0 ° C for 5 hours.
Výsledný gel měl Dw 9,0 μΐη, q0H 3,2 meq/ /g (poměr reesterifikace 0,33) a Wr 1,24 g vody/g suchého gelu.The resulting gel had a D w of 9.0 μΐη, a q 0 H of 3.2 meq / / g (reesterification ratio of 0.33) and a Wr of 1.24 g of water / g dry gel.
Gel vykazoval vysokou mechanickou pevnost a rozpouštědlo mohlo procházet kolonou podle příkladu 1, naplněnou tímto gelem při průtokové rychlosti 1 ml/min nebo vyšší, avšak analýza y-globulinu byla neúspěšná v důsledku abnormálně · velkého elučního objemu a rovněž stupeň opětného získání byl nízký.The gel showed high mechanical strength and the solvent was allowed to pass through the column of Example 1 filled with the gel at a flow rate of 1 ml / min or higher, but γ-globulin analysis failed due to an abnormally large elution volume and also the recovery rate was low.
Porovnávací příklad 3Comparative Example 3
Homogenní kapalná směs, obsahující 90 gramů vinylacetátu, 4,5 g (X = 0,017) triallylisokyanurátu, 60 g toluenu a 0,9 g· benzoylperoxidu, a 210 g vodného roztoku, obsahujícího 2 % polyvinylalkoholu, s polymeračním stupněm 500 a poměrem zmýdelnění 89 °/o, byla vpravena do llitrové baňky a po dobu 16 hodin byla při 60 °C prováděna polymerace v suspenzi. Výsledné částice polymeru byly odděleny filtrací, promyty vodou a acetonem, vysušeny a potom vystaveny zmýdelnění v kapalné směsi 50 g hydroxidu sodného, 100 g methanolu a 100 g vody při 60 °C po' dobu 30 hodin.Homogeneous liquid mixture containing 90 grams of vinyl acetate, 4,5 g (X = 0,017) of triallyl isocyanurate, 60 g of toluene and 0,9 g of benzoyl peroxide, and 210 g of an aqueous solution containing 2% polyvinyl alcohol, with a degree of polymerization of 500 and a saponification ratio of 89 Was added to a 1 L flask and slurry polymerization was carried out at 60 ° C for 16 hours. The resulting polymer particles were collected by filtration, washed with water and acetone, dried and then subjected to saponification in a liquid mixture of 50 g sodium hydroxide, 100 g methanol and 100 g water at 60 ° C for 30 hours.
Výsledný gel měl Dw 14,8 μη, q0H 18,2 mmol/g (poměr zmýdelnění 0,90), WR 3,31 g vody/g suchého gelu a specifickou plochu povrchu 0,1 m2/g. Uvedené výsledky naznačují, že gel v suchém stavu neobsahoval v podstatě žádné póry.The resulting gel had a D w of 14.8 μη, a q0H of 18.2 mmol / g (saponification ratio of 0.90), a W R of 3.31 g of water / g dry gel and a specific surface area of 0.1 m 2 / g. The results indicated that the gel in the dry state was essentially free of pores.
Tento gel byl vpraven do kolony, popsané v příkladu 1 a analýzy byly prováděny za stejných chromatografických podmínek jako v příkladu 1, avšak ztráty tlaku v koloně byly příliš vysoké v důsledku nedostatečné mechanické pevnosti gelu, takže nebylo možno provádět měření.This gel was loaded onto the column described in Example 1 and the analyzes were performed under the same chromatographic conditions as in Example 1, but the column pressure losses were too high due to insufficient mechanical strength of the gel so that measurements could not be performed.
Porovnávací příklad 4Comparative Example 4
Gel byl připraven postupem podle příkladu 1 s tím rozdílem, že bylo použito kapalné směsi, obsahující 50 g vinylacetátu, 73 g (X = 0,6) triallylisokyanurátu, 123 g n-butylacetátu a 3 g 2,2‘-azobisiso0ι.ltyronitrilu, místo kapalné směsi podle příkladu 1 a reesterifikace byla prováděna při 40 °C po dobu 20 hodin. __A gel was prepared according to the procedure of Example 1 except that a liquid mixture containing 50 g of vinyl acetate, 73 g (X = 0.6) of triallyl isocyanurate, 123 g of n-butyl acetate and 3 g of 2,2'-azobisisolyltyronitrile was used. instead of the liquid mixture of Example 1 and re-esterification was carried out at 40 ° C for 20 hours. __
Výsledný gel měl Dw 9,2 ^m, q0H 3,3 mmol/ /g (poměr reesteriflkace 0,61) a Wr 1,4 g vody/g suchého gelu.The resulting gel had a D w of 9.2 µm, qOH 3.3 mmol / g (reesterification ratio 0.61) and a Wr of 1.4 g water / g dry gel.
Tento gel byl vpraven do kolony, popsa né v příkladu 1 a byly prováděny analýzy albuminu hovězího séra, ovalbuminu a myoglobinu ve formě standardních vzorků, přičemž tyto látky byly vesměs adsorbovány na gelu při zanedbatelné eluci, takže nebylo možno stanovit vrcholy.This gel was loaded onto the column described in Example 1 and bovine serum albumin, ovalbumin and myoglobin were analyzed as standard samples, all of which were adsorbed onto the gel with negligible elution, so that peaks could not be determined.
Porovnávací příklad 5Comparative example 5
Gel byl připraven postupem podle příkladu 1 při použití kapalné ' směsi, obsahující 100 g vinylacetátu, 11 g (X = 0,1) triallylisokyanurátu, 44 g toluenu a 2,8 g 2,2‘-azobisisobutyroniirilu. __The gel was prepared as in Example 1 using a liquid mixture containing 100 g vinyl acetate, 11 g (X = 0.1) triallylisocyanurate, 44 g toluene and 2.8 g 2,2 2,8-azobisisobutyroniiril. __
Výsledný gel měl Dw 10,1 /tm, q0H 12,5' mmol/g (poměr reesterifikace 0,78) a WrThe resulting gel had a D w of 10.1 µm, a qOH of 12.5 mmol / g (reesterification ratio of 0.78) and a Wr
1,97 g vody/g suchého gelu.1.97 g water / g dry gel.
Tento gel byl umístěn v koloně podle příkladu 1 a za stejných chromatografických podmínek jako v příkladu 1 byly prováděny analýzy. Ztráta tlaku v koloně v důsledku nedostatečné mechanické pevnosti gelu však znemožnila měření.This gel was placed in the column of Example 1 and analyzed under the same chromatographic conditions as in Example 1. However, the loss of column pressure due to insufficient mechanical strength of the gel made measurement impossible.
Přestože byl vynález popsán v závislosti na specifickém provedení, bude odborníkovi zřejmé, že je možno aplikovat různé modifikace, aniž by se přesáhl rozsah vynálezu.Although the invention has been described in accordance with a specific embodiment, it will be apparent to those skilled in the art that various modifications may be practiced without departing from the scope of the invention.
Claims (1)
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP8524380A JPS5730945A (en) | 1980-06-25 | 1980-06-25 | Hydrophilic filler for gel permeation chromatography |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS228510B2 true CS228510B2 (en) | 1984-05-14 |
Family
ID=13853116
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS484781A CS228510B2 (en) | 1980-06-25 | 1981-06-25 | Method for producing a packing prod for quick liquid chromatography |
Country Status (2)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS5730945A (en) |
| CS (1) | CS228510B2 (en) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5967456A (en) * | 1982-10-12 | 1984-04-17 | Asahi Chem Ind Co Ltd | Separation of albumin by chromatography |
| GB201405624D0 (en) * | 2014-03-28 | 2014-05-14 | Synthomer Uk Ltd | Method of making a branched polymer, a branched polymer and uses of such a polymer |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS583482B2 (en) * | 1978-10-26 | 1983-01-21 | 呉羽化学工業株式会社 | Manufacturing method of hard polyvinyl alcohol |
-
1980
- 1980-06-25 JP JP8524380A patent/JPS5730945A/en active Granted
-
1981
- 1981-06-25 CS CS484781A patent/CS228510B2/en unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH0115822B2 (en) | 1989-03-20 |
| JPS5730945A (en) | 1982-02-19 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| KR101289911B1 (en) | Hydrophilic crosslinked polymer | |
| CA2349948C (en) | A chromatography method and a column material useful in said method | |
| EP0320023A2 (en) | Macroporous polymeric membranes, their preparation and their use for polymer separation | |
| CA1194644A (en) | Totally porous activated gel | |
| EP0043074B1 (en) | High speed liquid chromatographic packing and process for production thereof | |
| JP4109418B2 (en) | New chromatography equipment | |
| CN110709696B (en) | Method for separating and analyzing mixture of oligonucleotides | |
| WO2004007597A1 (en) | Porous molecularly imprinted polymer membranes | |
| US11364480B2 (en) | Chromatography medium with bound microglobules and method for the preparation thereof | |
| JP2003502465A (en) | Method for producing fluorinated polymer adsorbent particles | |
| JPH0373848A (en) | Packing material for liquid chromatography and production thereof | |
| CS228510B2 (en) | Method for producing a packing prod for quick liquid chromatography | |
| EP0129295A2 (en) | An ion exchanger | |
| JPH02280833A (en) | Compounding and separating agent and its preparation | |
| JP4758529B2 (en) | Packing agent for liquid chromatography and measuring method using the same | |
| JP4268730B2 (en) | Method for producing packing material for liquid chromatography | |
| Hosoya et al. | Efficiency of porous hydrophilic polymer-based packing materials in chromatographic analysis of drugs existing with polypeptide | |
| JP2011047859A (en) | COLUMN PACKING FOR SEPARATING HEMOGLOBIN, METHOD FOR MEASURING HEMOGLOBIN A1c, METHOD FOR MEASURING HEMOGLOBIN A1c AND ABNORMAL HEMOGLOBIN, AND METHOD FOR PRODUCING COLUMN PACKING FOR SEPARATING HEMOGLOBIN | |
| JP2010236909A (en) | Column filler for separating hemoglobins, method for measuring hemoglobin A1c and abnormal hemoglobin, and method for producing column filler for separating hemoglobins | |
| JP2004083561A (en) | Ion exchanger for separating lipoproteins and method for separating lipoproteins using the same | |
| JPH087198B2 (en) | Quantitative method for glycated hemoglobin | |
| JPH0219902B2 (en) | ||
| JP2000055897A (en) | Filler and its preparation | |
| JPS6392627A (en) | Hydrophilic porous particle | |
| JPH03179259A (en) | Filler for liquid chromatography and preparation thereof |