CS217193B1 - Způsob výroby antilipemicky účinného přípravku - Google Patents
Způsob výroby antilipemicky účinného přípravku Download PDFInfo
- Publication number
- CS217193B1 CS217193B1 CS299960A CS299960A CS217193B1 CS 217193 B1 CS217193 B1 CS 217193B1 CS 299960 A CS299960 A CS 299960A CS 299960 A CS299960 A CS 299960A CS 217193 B1 CS217193 B1 CS 217193B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- heparin
- polysaccharide
- antilipemically
- methanol
- ethanol
- Prior art date
Links
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims description 8
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims description 6
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 21
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 claims description 17
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 claims description 17
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 16
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 claims description 15
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 claims description 15
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 claims description 13
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 claims description 12
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 claims description 9
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 230000014508 negative regulation of coagulation Effects 0.000 claims description 7
- 238000006277 sulfonation reaction Methods 0.000 claims description 7
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 5
- 239000000047 product Substances 0.000 claims description 5
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 4
- KEQGZUUPPQEDPF-UHFFFAOYSA-N 1,3-dichloro-5,5-dimethylimidazolidine-2,4-dione Chemical compound CC1(C)N(Cl)C(=O)N(Cl)C1=O KEQGZUUPPQEDPF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 claims description 3
- -1 alkaline earth metal salt Chemical class 0.000 claims description 3
- XTHPWXDJESJLNJ-UHFFFAOYSA-N chlorosulfonic acid Substances OS(Cl)(=O)=O XTHPWXDJESJLNJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 239000012467 final product Substances 0.000 claims description 3
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 claims description 3
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 claims description 3
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 125000000623 heterocyclic group Chemical group 0.000 claims description 2
- 230000003301 hydrolyzing effect Effects 0.000 claims description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 claims description 2
- 239000007858 starting material Substances 0.000 claims description 2
- 229910052784 alkaline earth metal Inorganic materials 0.000 claims 2
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 claims 2
- 239000003513 alkali Substances 0.000 claims 1
- 239000002585 base Substances 0.000 claims 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 5
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 230000002402 anti-lipaemic effect Effects 0.000 description 3
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 2
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 description 2
- 229940127219 anticoagulant drug Drugs 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 150000003222 pyridines Chemical class 0.000 description 2
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 2
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 2
- 239000002699 waste material Substances 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MSWZFWKMSRAUBD-IVMDWMLBSA-N 2-amino-2-deoxy-D-glucopyranose Chemical compound N[C@H]1C(O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O MSWZFWKMSRAUBD-IVMDWMLBSA-N 0.000 description 1
- 206010058667 Oral toxicity Diseases 0.000 description 1
- 108090000190 Thrombin Proteins 0.000 description 1
- 208000007536 Thrombosis Diseases 0.000 description 1
- 206010070863 Toxicity to various agents Diseases 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- MSWZFWKMSRAUBD-UHFFFAOYSA-N beta-D-galactosamine Natural products NC1C(O)OC(CO)C(O)C1O MSWZFWKMSRAUBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- UDSAIICHUKSCKT-UHFFFAOYSA-N bromophenol blue Chemical compound C1=C(Br)C(O)=C(Br)C=C1C1(C=2C=C(Br)C(O)=C(Br)C=2)C2=CC=CC=C2S(=O)(=O)O1 UDSAIICHUKSCKT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 1
- NWWQJUISNMIVLJ-UHFFFAOYSA-N cyclotetrasulfur Chemical class S1SSS1 NWWQJUISNMIVLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000600 disaccharide group Chemical group 0.000 description 1
- 125000004185 ester group Chemical group 0.000 description 1
- 238000012869 ethanol precipitation Methods 0.000 description 1
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 1
- 229960002442 glucosamine Drugs 0.000 description 1
- 239000002565 heparin fraction Substances 0.000 description 1
- 239000008240 homogeneous mixture Substances 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 1
- FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N ninhydrin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)C(O)(O)C(=O)C2=C1 FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 231100000418 oral toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 150000002978 peroxides Chemical class 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 239000012286 potassium permanganate Substances 0.000 description 1
- 235000004252 protein component Nutrition 0.000 description 1
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 229960004072 thrombin Drugs 0.000 description 1
Landscapes
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
Description
Vynález se týká způsobu výroby antilipemicky účinného přípravku.
Při posledních fázích výroby heparinu z hovězích plic, např. podle čs. patentu číslo 91 903, kdy jsou prakticky všechny bílkovinné a ostatní balastní látky odstraněny a konečný produkt se čistí acetonovou frakcienací, získá vedle vysoce aktivní heparinové frakce, použi telné k terapeutickým účelům (antikoagulační aktivita 100 až 130 m.j./mg), ještě značný podíl vedlejší pólysacharidové frakce, která se vyznačuje velmi nízkou antikoagulační a antilipemiekou aktivitou (15 až 30 m.j./mg) a která až dosud nebyla prakticky zužitkovatelná a představovala odpad. Podle okolností činí množství této vedlejší polysacharidové frakce 6-8ňásobek hmotnosti čistého heparinu.
Při podrobnějším studiu této polysacharidové frakce bylo zjištěno chromatografickou analysou jejího hydrolyzátu, že jde o cukerný polykondensát, jehož chemické složení je velmi podobné heparinu, a v němž byla dokázána uronová kyselina a glukosamin. Pozoruhodný byl i nízký obsah síry (2,97 %) a vysoký obsah dusíku (7,03 %), ač bílkovinné složky nebyly chromatograficky zjištěny (reakce s ninhydrinem a bromfenolovou modří byla negativní). Optická aktivita [“]p = +5 °.
Jorpes (Heparin in the Treatment of Thrombosis, Oxford Press, 1946) uvádí, že Běžný heparin může být nehomogenní směsi mono- (6,36 # S), di- (10,58 % S), tri- (13,58 % S) až tetrasírových esterů (15,81 % S, uvažuje-li se disacharidová jednotka jako základ heparinová makromolekuly) a zároveň připouští možnost existence samotného, síry prostého heparinového polysacharidu v organismu.
Jestliže by v případě výše popsané odpadní polysacharidové frakce šlo o látku, odpoví217193 dající obsahem síry uvedeným nejnižším esterům, měla by mít umělá sulfonace, tj. zvýšení obsahu estersírových skupin v molekule, za následek nejen ňejvyéší možná zvýšení obsahu sí ry, nýbrž i zvýšení biologické aktivity. Tento předpoklad byl pokusně potvrzen. Sulfonací se zvýšil obsah síry z původních 2,97 % na 14,50 % a současně se zvýšila antikoagulační a antilipemická aktivita získaného produktu na hodnotu, odpovídající in vltro účinnosti vy soče aktivního heparinu, jak je patrno z tabulky:
| látka | S | N | antikoagul. aktivita | antilipem. aktivita | |
| původní polysacharidové frakce po sulfonací | 2,97% 14,50% | 7,03% 1,96% | O o m «— + + | 15 až 30 m.j./mg 100 až 120 mj./mg | o o IA |
Antilipemická aktivita srovnávána s heparinem jako standardem = 100 %.
Předmětem vynálezu je způsob výroby antilipemicky účinného přípravku sulfonací polysacharidu kyselinou chlorsulfonovou v prostředí pyridinu nebo jiné heterocyklické terciární báze, při zvýšené teplotě 60 až 105 °C, hydrolýzou vzniklého sulfonačního produktu a jeho izolací srážením methanolem nebo ethanolem a převedením v sůl alkalického kovu nebo kovu alkalických zemin, která se izoluje srážením methanolem nebo ethanolem, přičemž podstata způsobu podle vynálezu záleží v tom, že se jako výchozí látky použije polysachari dové frakce odpadající při výrobě a čištění heparinu z hovězích plic, charakterizované obsahem síry 2,5 až 3,5 %, obsahem dusíku 6,5 až 7,5 % a antikoagulační aktivitou in vitro 15 až 30 m.j./mg, přičemž se sulfonace vede až k dosažení obsahu síry 13 až 16 %, vztaženo na sušinu konečného produktu.
Při farmakologickém průzkumu antilipemicky účinného přípravku vyrobeného výše uvede# ným způsobem, byla stanovena toxicita intravenosně na myších hodnotou LD^q = 450 až 650 mg/kg (toxicita heparinu stanovená týmž způsobem má hodnotu LDjq = 300 až 1 200 mg/kg) Perorální toxicitu přípravku se nepodařilo stanovit; ani při podání dávky 10 000 mg/kg u myši nebyly pozorovány toxické příznaky.
Ve srovnání s heparinem mé přípravek podle vynálezu 80 % jeho antikoagulační aktivity· ...
Způsobem podle vynálezu je možno zpracovat a využít polysacharidovou frakci odpadající při výrobě heparinu v množství, které hmotnostně představuje několikanásobek výtěžku čistého heparinu a získat tak levnou, netoxickou a účinnou klinickou náhražku heparinu.
Příklad provedeni kg polysacharidové frakce, odpadající při výrobě heparinu, se sulfonuje ve směsi 1 litru chlorsulfonové kyseliny a 4 litrů bezvodého pyridinu při 100 °C do rozpuštění (asi 30 minut). Reakční směs se potom hydrolyzuje 5 litry studené vody a vzniklý čirý roztok se sráží trojnásobným objemem (30 litry) methanolu nebo ethanolu. Při tom se vyloučí pyridinová sůl polysírového esteru polysacharidu, která se izoluje a promývá třikrát po 10 litrech horkého methanolu nebo ethanolu za účelem odstranění zbytků sulfonač ního média. Surový produkt se potom rozpustí v 10 litrech vody a alkalizuje koncentrovaným vodným roztokem hydroxidu sodného na pH 8,0 až 8,5. Tím se převede pyridinové sůl polysírového esteru polysacharidu v sůl sodnou, které se z roztoku sráží opět trojnásobným objemem methanolu nebo ethanolu a izoluje. Výtěžek je 1,0 až 1,2 kg suché substance s obsahem síry 14,5 %., dusíku 1,96 %, = + 1 0 a antikoagulační aktivitou nejméně 100 m.j./mg (stanoveno thrombinovým testem podle Studera-Wintersteina).
Za účelem získání zcela bílého produktu je možno použít některého ze známých způsobů odbarvování heparinu, např. pomocí peroxidů nebo manganistanu draselného.
Claims (1)
- Způsob výroby antilipemicky účinného přípravku sulfonací pólysacharidu kyselinou chlorsulfonovou v prostředí pyridinu nebo jiné heterocyklické terciární báze, při zvýšené teplotě 60 až 105 °C, hydrolýzou vzniklého sulfonačního produktu a jeho izolací srážením methanolem nebo ethanolem a převedením v sůl alkalického kovu nebo kovu alkalických zemin, která se izoluje srážením methanolem nebo ethanolem, vyznačující se tím, že se jako výchozí látky použije polysacharidové frakce odpadající při výrobě a čištění heparinu z hovězích plic, charakterizované obsahem síry 2,5 až 3,5 %, obsahem dusíku 6,5 až 7,5 % a antikoagulaČní aktivitou in vitro 15 až 30 m.j./mg, přičemž se sulfonace vede až k dosažení obsahu síry 13 až 16 %, vztaženo na sušinu konečného produktu.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS299960A CS217193B1 (cs) | 1960-05-06 | 1960-05-06 | Způsob výroby antilipemicky účinného přípravku |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS299960A CS217193B1 (cs) | 1960-05-06 | 1960-05-06 | Způsob výroby antilipemicky účinného přípravku |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS217193B1 true CS217193B1 (cs) | 1982-12-31 |
Family
ID=5368789
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS299960A CS217193B1 (cs) | 1960-05-06 | 1960-05-06 | Způsob výroby antilipemicky účinného přípravku |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS217193B1 (cs) |
-
1960
- 1960-05-06 CS CS299960A patent/CS217193B1/cs unknown
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP0014184B1 (en) | Heparin fragments having a selective anticoagulation activity and process for their preparation | |
| EP0116801B1 (fr) | Héparine dépolymérisée et supersulfatée, procédé pour sa préparation et compositions pharmaceutiques en contenant | |
| Dorfman et al. | Occurrence of urinary acid mucopolysaccharides in the Hurler syndrome | |
| US4500519A (en) | Mucopolysaccharides having biological properties, preparation and method of use | |
| EP0293539B1 (fr) | Procédé pour la dépolymérisation de l'héparine pour l'obtention d'une héparine de bas poids moléculaire dotée d'une activité antithrombotique | |
| DK165696B (da) | Desulfatohirudiner og deres farmaceutisk acceptable salte, deres fremstilling, farmaceutisk praeparat indeholdende disse forbindelser og anvendelse af forbindelserne til fremstilling af farmaceutisk middel og som analytisk reagens | |
| US4804652A (en) | Mucopolysaccharides having biological properties, preparation and application thereof as drugs | |
| NO170940B (no) | Analogifremgangsmaate for fremstilling av en terapeutisk virksom blanding av hepariner | |
| Bailey et al. | Purification of yeast hexokinase and its reaction with ββ′-dichlorodiethyl sulphide | |
| NO862876L (no) | Nye polypeptider med blodkoaguleringshemmende virkning, fremgangsmaate til deres fremstilling resp. utvinning, deres anvendelse og midler som inneholder disse. | |
| EP0432537B1 (en) | Supersulfated heparins | |
| US8193166B2 (en) | Epimerized derivatives of K5 polysaccharide with a very high degree of sulfation | |
| PT1226148E (pt) | Novos oligossacáridos, sua preparação e composições farmacêuticas que os contêm | |
| EP0536363B1 (en) | Novel heparin derivatives and process for the preparation thereof | |
| EP0199033B1 (en) | Process for producing natural heparan sulphate and dermatan sulphate in substantially pure form, and their pharmaceutical use | |
| AU599638B2 (en) | Process for preparing high-purity dermatan sulphate, and pharmaceutical compositions which contain it | |
| DE2734427C3 (de) | Verfahren zur Gewinnung von thrombinartigen Enzymen aus Schlangengiften | |
| DK174284B1 (da) | Biologisk aktive tetrasaccharider | |
| JP3279316B2 (ja) | 血栓溶解活性を有するデルマタンスルフェート及びこれを含有する製薬形態 | |
| Madinaveitia et al. | Substrates for hyaluronidase | |
| KR0184260B1 (ko) | 항트롬보 활성을 지닌 황산화 글리코스아미노글리큐로난 | |
| CS217193B1 (cs) | Způsob výroby antilipemicky účinného přípravku | |
| KR970000528B1 (ko) | 신규 황산화 폴리사카라이드 약학적으로 허용 가능한 그의 염, 이의 제조방법 및 유효성분으로서 이를 함유하는 약제 | |
| KR20090109105A (ko) | 바이오틴 또는 바이오틴 유도체와의 1개 이상의 공유 결합을 포함하는 헤파린, 이의 제조 방법 및 이의 용도 | |
| US3518243A (en) | Sulfonated derivatives of a glycopeptide extracted from animal organs,useful as drugs and a process for the preparation thereof |