CS216810B2 - Method of fixing the sampled substances in several reaction systems,each acting under different reaction parameters - Google Patents
Method of fixing the sampled substances in several reaction systems,each acting under different reaction parameters Download PDFInfo
- Publication number
- CS216810B2 CS216810B2 CS785778A CS577878A CS216810B2 CS 216810 B2 CS216810 B2 CS 216810B2 CS 785778 A CS785778 A CS 785778A CS 577878 A CS577878 A CS 577878A CS 216810 B2 CS216810 B2 CS 216810B2
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- reaction
- parameters
- components
- test
- sample
- Prior art date
Links
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 title claims abstract description 114
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 33
- 239000000126 substance Substances 0.000 title claims description 31
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims abstract description 103
- 230000004044 response Effects 0.000 claims abstract description 22
- 230000008859 change Effects 0.000 claims abstract description 20
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 11
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 11
- 239000012491 analyte Substances 0.000 claims description 11
- 239000002775 capsule Substances 0.000 claims description 10
- 239000000758 substrate Substances 0.000 claims description 10
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 8
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 8
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims description 7
- 230000002452 interceptive effect Effects 0.000 claims description 7
- 238000003556 assay Methods 0.000 claims description 6
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 claims description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims description 2
- 239000000376 reactant Substances 0.000 claims 2
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 claims 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 abstract description 6
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 2
- 239000000470 constituent Substances 0.000 abstract 3
- 239000000123 paper Substances 0.000 description 28
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 27
- 239000003094 microcapsule Substances 0.000 description 14
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 14
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 12
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 12
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 11
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 10
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 10
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 102000001554 Hemoglobins Human genes 0.000 description 8
- 108010054147 Hemoglobins Proteins 0.000 description 8
- 238000005538 encapsulation Methods 0.000 description 7
- KJFMBFZCATUALV-UHFFFAOYSA-N phenolphthalein Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1C1(C=2C=CC(O)=CC=2)C2=CC=CC=C2C(=O)O1 KJFMBFZCATUALV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N Malonic acid Chemical compound OC(=O)CC(O)=O OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000002250 absorbent Substances 0.000 description 6
- 230000002745 absorbent Effects 0.000 description 6
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 6
- 108010024957 Ascorbate Oxidase Proteins 0.000 description 5
- 239000004952 Polyamide Substances 0.000 description 5
- 239000007979 citrate buffer Substances 0.000 description 5
- 238000005470 impregnation Methods 0.000 description 5
- 229920002647 polyamide Polymers 0.000 description 5
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 5
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 4
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 4
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 4
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 4
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 4
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 4
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 4
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 4
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 4
- -1 polypropylene Polymers 0.000 description 4
- 239000002356 single layer Substances 0.000 description 4
- 150000000994 L-ascorbates Chemical class 0.000 description 3
- IOVCWXUNBOPUCH-UHFFFAOYSA-M Nitrite anion Chemical compound [O-]N=O IOVCWXUNBOPUCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 3
- 150000004982 aromatic amines Chemical class 0.000 description 3
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 3
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 3
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 3
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 3
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 230000003204 osmotic effect Effects 0.000 description 3
- 235000021317 phosphate Nutrition 0.000 description 3
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 3
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 3
- KIBNFCSPPOYXPP-UHFFFAOYSA-N 3-methyl-1-phenylthieno[2,3-c]pyrazole-5-carboxylic acid Chemical compound C1=2SC(C(O)=O)=CC=2C(C)=NN1C1=CC=CC=C1 KIBNFCSPPOYXPP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BTJIUGUIPKRLHP-UHFFFAOYSA-N 4-nitrophenol Chemical compound OC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 BTJIUGUIPKRLHP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 2
- AEMOLEFTQBMNLQ-AQKNRBDQSA-N D-glucopyranuronic acid Chemical compound OC1O[C@H](C(O)=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O AEMOLEFTQBMNLQ-AQKNRBDQSA-N 0.000 description 2
- QXNVGIXVLWOKEQ-UHFFFAOYSA-N Disodium Chemical class [Na][Na] QXNVGIXVLWOKEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000053187 Glucuronidase Human genes 0.000 description 2
- 108010060309 Glucuronidase Proteins 0.000 description 2
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 2
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010046334 Urease Proteins 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 2
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 2
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 2
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 229940097042 glucuronate Drugs 0.000 description 2
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 2
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 2
- 150000002826 nitrites Chemical class 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 2
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 2
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 2
- 238000006068 polycondensation reaction Methods 0.000 description 2
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- LPXPTNMVRIOKMN-UHFFFAOYSA-M sodium nitrite Chemical compound [Na+].[O-]N=O LPXPTNMVRIOKMN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000009736 wetting Methods 0.000 description 2
- HJVAFZMYQQSPHF-UHFFFAOYSA-N 2-[bis(2-hydroxyethyl)amino]ethanol;boric acid Chemical compound OB(O)O.OCCN(CCO)CCO HJVAFZMYQQSPHF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IQUPABOKLQSFBK-UHFFFAOYSA-N 2-nitrophenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1[N+]([O-])=O IQUPABOKLQSFBK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FRIBMENBGGCKPD-UHFFFAOYSA-N 3-(2,3-dimethoxyphenyl)prop-2-enal Chemical compound COC1=CC=CC(C=CC=O)=C1OC FRIBMENBGGCKPD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XZKIHKMTEMTJQX-UHFFFAOYSA-N 4-Nitrophenyl Phosphate Chemical compound OP(O)(=O)OC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 XZKIHKMTEMTJQX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BTJIUGUIPKRLHP-UHFFFAOYSA-M 4-nitrophenolate Chemical compound [O-]C1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 BTJIUGUIPKRLHP-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- HFDLDPJYCIEXJP-UHFFFAOYSA-N 6-methoxyquinoline Chemical compound N1=CC=CC2=CC(OC)=CC=C21 HFDLDPJYCIEXJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 229920002134 Carboxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004743 Polypropylene Substances 0.000 description 1
- DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M Sodium laurylsulphate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCCCCCOS([O-])(=O)=O DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000004141 Sodium laurylsulphate Substances 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 235000021355 Stearic acid Nutrition 0.000 description 1
- 241001104043 Syringa Species 0.000 description 1
- 235000004338 Syringa vulgaris Nutrition 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- 241000209140 Triticum Species 0.000 description 1
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 description 1
- 239000008351 acetate buffer Substances 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 239000002390 adhesive tape Substances 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 1
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- XKNKHVGWJDPIRJ-UHFFFAOYSA-N arsanilic acid Chemical compound NC1=CC=C([As](O)(O)=O)C=C1 XKNKHVGWJDPIRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229950002705 arsanilic acid Drugs 0.000 description 1
- 229940072107 ascorbate Drugs 0.000 description 1
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 1
- 238000005422 blasting Methods 0.000 description 1
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 description 1
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 description 1
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010948 carboxy methyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000008112 carboxymethyl-cellulose Substances 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 238000005354 coacervation Methods 0.000 description 1
- 238000004040 coloring Methods 0.000 description 1
- 230000009918 complex formation Effects 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000007891 compressed tablet Substances 0.000 description 1
- 230000006835 compression Effects 0.000 description 1
- 238000007906 compression Methods 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 230000027326 copulation Effects 0.000 description 1
- 239000002173 cutting fluid Substances 0.000 description 1
- 230000002939 deleterious effect Effects 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000006193 diazotization reaction Methods 0.000 description 1
- 229940079919 digestives enzyme preparation Drugs 0.000 description 1
- VIYFPAMJCJLZKD-UHFFFAOYSA-L disodium;(4-nitrophenyl) phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-][N+](=O)C1=CC=C(OP([O-])([O-])=O)C=C1 VIYFPAMJCJLZKD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- UPBDXRPQPOWRKR-UHFFFAOYSA-N furan-2,5-dione;methoxyethene Chemical compound COC=C.O=C1OC(=O)C=C1 UPBDXRPQPOWRKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003365 glass fiber Substances 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 229930182480 glucuronide Natural products 0.000 description 1
- 239000012456 homogeneous solution Substances 0.000 description 1
- 230000003301 hydrolyzing effect Effects 0.000 description 1
- 230000002706 hydrostatic effect Effects 0.000 description 1
- 238000007654 immersion Methods 0.000 description 1
- 230000000415 inactivating effect Effects 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 239000006193 liquid solution Substances 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- 208000010658 metastatic prostate carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 239000003607 modifier Substances 0.000 description 1
- 238000003541 multi-stage reaction Methods 0.000 description 1
- 150000004780 naphthols Chemical class 0.000 description 1
- 239000004745 nonwoven fabric Substances 0.000 description 1
- QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Natural products CCCCCCCC(C)CCCCCCCCC(O)=O OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 230000005501 phase interface Effects 0.000 description 1
- 238000005191 phase separation Methods 0.000 description 1
- 150000002989 phenols Chemical class 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 150000003013 phosphoric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- XNGIFLGASWRNHJ-UHFFFAOYSA-L phthalate(2-) Chemical compound [O-]C(=O)C1=CC=CC=C1C([O-])=O XNGIFLGASWRNHJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 230000000704 physical effect Effects 0.000 description 1
- 238000011197 physicochemical method Methods 0.000 description 1
- QVLTXCYWHPZMCA-UHFFFAOYSA-N po4-po4 Chemical compound OP(O)(O)=O.OP(O)(O)=O QVLTXCYWHPZMCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000006116 polymerization reaction Methods 0.000 description 1
- 229920001155 polypropylene Polymers 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 239000012429 reaction media Substances 0.000 description 1
- 238000006479 redox reaction Methods 0.000 description 1
- 230000004043 responsiveness Effects 0.000 description 1
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 1
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 235000019333 sodium laurylsulphate Nutrition 0.000 description 1
- 235000010288 sodium nitrite Nutrition 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 238000005507 spraying Methods 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 239000008117 stearic acid Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 230000009182 swimming Effects 0.000 description 1
- 239000000057 synthetic resin Substances 0.000 description 1
- 229920003002 synthetic resin Polymers 0.000 description 1
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 1
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 1
- 239000002023 wood Substances 0.000 description 1
- 239000002759 woven fabric Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/72—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving blood pigments, e.g. haemoglobin, bilirubin or other porphyrins; involving occult blood
- G01N33/721—Haemoglobin
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/26—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving oxidoreductase
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/34—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving hydrolase
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/34—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving hydrolase
- C12Q1/42—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving hydrolase involving phosphatase
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10S436/903—Diazo reactions
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10T—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER US CLASSIFICATION
- Y10T436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10T436/16—Phosphorus containing
- Y10T436/166666—Phosphorus containing of inorganic phosphorus compound in body fluid
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10T—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER US CLASSIFICATION
- Y10T436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10T436/17—Nitrogen containing
- Y10T436/173076—Nitrite or nitrate
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Immunology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Hematology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Investigating Or Analyzing Non-Biological Materials By The Use Of Chemical Means (AREA)
Description
Vynález se obecně vztahuje k oboru zkoušení složení různých prostředí za použití zkušebních prostředků, zejména se týká způsobu stanovení látky v několika reakčních systémech, z nichž se každý uplatňuje za odlišných reakčních parametrů.
Až dosud byl vyvinut velký počet zkušebních prostředků pro stanovení specifických složek v kapalinách, jako je moč a krev. Tyto zkušební prostředky měly různé formy. Jednou z nejoblíbenějších forem byly zkušební papírky indikující po navlhčení vzorkem požadovanou složku. Některé z těchto prostředků jsou vhodné pro stanovení takových složek, jako je glukóza, bílkovina, skrytá krev a podobné látky v tělesných tekutinách, zatímco jiné se hodí pro stanovení různých složek v jiných kapalinách, jako ve vodě v plaveckých bazénech, v řezných tekutinách apod.
Tyto známé zkušební systémy byly obvykle systémy jednofázového typu a obsahovaly jednu nebo více reakčních složek pro udržení reakčních parametrů při zkušební reakci ve specifickém rozmezí, aby reakce mohla probíhat, například pufr pro udržování specifického rozmezí hodnoty pH.
Některé z těchto systémů zahrnovaly více než jednu reakci a pokud tyto reakce bylo možno provádět za stejných reakčních podmínek, byly takové systémy uspokojivé. Existuje však řada situací, kdy je třeba, aby probíhala více než jedna reakce, přičemž jednotlivé reakce buď probíhají pouze, nebo optimálně za různých reakčních podmínek nebo v různém prostředí například při různých úrovních pH. Když se v takovém systému použije prostředků, u kterých se udržují reakční parametry pro jednu z těchto reakcí, například když se udržuje pH v určitém specificky vymezeném rozmezí, má to za následek, že jedna nebo více reakcí probíhá v systému za podmínek, které nejsou optimální.
Systémy, u kterých se provádí více reakcí za jednoho souboru reakčních parametrů mají další nevýhodu v tom, že v nich nelze použít určitých reakčních složek vykazujících nejlepší informační hodnotu, poněvadž tyto složky nejsou akceschopné za reakčních podmínek vyžadovaných jinou reakcí probíhající v systému.
I když tyto známé jednofázové systémy uspokojovaly velkou potřebu, chemické metodologie, kde byly aplikovatelné, byly ve svém rozsahu omezeny. Značné oblasti analýzy nebylo až dosud možno provádět pomocí běžných zkušebních systémů vzhledem k omezením vyplývajícím z udržování reakčních (podmínek v jednom poměrně úz216810
218810 kém rozmezí. Z oblastí analýzy, ve kterých nebylo možno uplatnit známé zkušební systémy, lze uvést široký rozsah analytických metod zahrnujících několikastupňové reakce, které probíhají buď pouze, nebo optimálně za různých reakčních parametrů, například různém pH, iontové síle, v přítomnosti jiných reakčních činidel apod. Z jiných vlivů znemožňujících použití běžných zkušebních systémů lze uvést přítomnost interferujících látek, které je nutno inaktivovat, aby se dosáhlo spolehlivého stanovení analyzovaných látek a dále opožděné přidání některé ze složek, která je buď nestálá nebo má za určitých podmínek škodlivý účinek.
Uvedený vynález se týká způsobu stanovení látky ve vzorku v několika reakčních systémech, z nichž se každý uplatňuje za odlišných reakčních parametrů. Podstatou vynálezu je, že se vzorek uvede do styku s několikasystémovým zkušebním prostředkem, který obsahuje několik složek spojených s alespoň dvěma reakčními systémy fungujícími za odlišných reakčních parametrů, přičemž alespoň jedna z uvedených složek způsobuje odezvu v přítomnosti stanovované látky a alespoň jedna další z uvedených složek způsobuje při styku se vzorkem za reakčních parametrů, při kterých se uplatňuje první z uvedených reakčních parametrů na parametry, při kterých se uplatňuje alespoň jeden z jiných uvedených reakčních systémů, přičemž uvedený několikasystémový zkušební prostředek je popřípadě kombinován s nosičem, a pak se sleduje detegovatelná reakce.
Použitý, několikasystémový zkušební prostředek obsahuje alespoň jednu složku reagující s analyzovanou složkou a alespoň jednu další složku, která mění reakční parametry.
Způsobu podle vynálezu lze použít při analytických metodách, které vyžadují intermedlární změnu reakčních parametrů pomocí jedné operace.
Výhodou způsobu podle vynálezu je, že ho lze použít i v těch případech, kdy běžné zkušební systémy selhávají v důsledku přítomnosti látek, které ruší detekci hledané složky nebo v důsledku nestálosti používaných reakčních činidel v prostředí, ve kterém se stanovení provádí.
Zkušební prostředek použitý podle vynálezu může obsahovat více než jednu složku způsobující odezvu na stanovenou látku. Složkou způsobující odezvu na stanovovanou látku může být s výhodou barevný indikátor, antigen, protilátka, enzym nebo jiná specifická vazebná složka apod. Ze změn parametrů, které se za použití způsobu podle vynálezu provádějí, se dává obzvláštní přednost modifikaci pH, modifikaci iontové síly, upravování, obsahu některých látek, například odstraňování interferujících látek a modifikaci reakční rychlosti.
Ve výhodném provedení obsahuje několikasystémový zkušební prostředek více složek spojených s alespoň dvěma reakčními systémy fungujícími za odlišných prvních a druhých reakčních parametrů, přičemž alespoň jedna z uvedených složek způsobuje Odezvu v přítomnosti stanovené látky v prvním reakčním systému za uvedených prvních reakčních parametrů a alespoň jedna z jiných uvedených složek způsobuje po styku se vzorkeih změnu reakčních parametrů na druhé reakční parametry, za kterých se uplatňuje druhý reakční systém.
Podle dalšího výhodného způsobu provedení je v několikasystémovém zkušebním prostředku použitém podle vynálezu alespoň jedna z uvedených složek způsobujících změnu reakčních parametrů enkapsulována (zapouzdřena) tak, aby byla při styku se vzorkem uvolnitelná a způsobila po svém uvolnění vytvoření uvedených druhých reakčních parametrů, za kterých se uplatňuje uvedený druhý reakční systém. Pro zapouzdřování še přednostně používá mikrokapslí, které se vyrábějí běžnou zpouzdřovací technikou, Mikrokapsle obsahují složku způsobující změnu reakčních parametrů. Mikrokapsle jsou přednostně osmosensitivní a tím se umožňuje uvolnění jejich obsahu. Mohou být rovněž vytvořeny z látky, která je rozpustná v roztoku vzorku. Kromě složky měnící reakční parametry, mohou být rovněž zapouzdřeny jiné složky, jako složky, které optimálně reagují za reakčních parametrů druhého reakčního systému.
Podle dalšího výhodného provedení způsobu podle vynálezu se používá několikasystémového zkušebního prostředku, ve kterém alespoň jedna složka způsobující změnu uvedených reakčních parametrů sestává alespoň ze dvou komponent, které spolu po styku se vzorkem vzájemně reagují za vzniku uvedených druhých reakčních parametrů, za kterých se uplatňuje druhý systém. Vzájemně reagujícími složkami jsou přednostně katalyzátor, jako enzym a jeho substrát. Jedna nebo obě ze vzájemně reagujících komponent mohou být popřípadě zapouzdřeny v mikrokapslích.
Podle ještě dalšího výhodného provedení vynálezu obsahuje několikasystémový zkušební prostředek více složek spojených s alespoň dvěma reakčními systémy, které fungují za odlišných reakčních parametrů, přičemž alespoň jedna z uvedených složek způsobuje odezvu v přítomnosti stanovované látky ve druhém nebo dalším reakčním systému a alespoň jedna další z uvedených složek desaktivuje v prvním reakčním systému látku obsaženou ve vzorku, která interferuje se složkou způsobující odezvu na stanovovanou látku. Složka způsobující odezvu na stanovovanou látku je přednostně zapouzdřena nebo jinak odloučena, aby došlo к jejímu uvolnění po reakci složky desaktivující interferující látku. Může se po216810 užít ochranného navázání této látky na ' určená místa nebo jiných dobře známých technik.
Několikasystémový zkušební prostředek používaný při způsobu podle vynálezu lze upravit pokud se týče jeho složek tak, aby se hodil pro. kterékoli . ze shora uvedených provedení. Může být rovněž zapracován do nosiče, jako je nasákavá nebo nenasákavá matrice nebo smíšen s pojivý za vzniku aplikačních forem, jako jsou zkušební papírky indikující po navlhčení vzorkem zkoušenou složkou nebo tablety.
Podle jedné alternativy se může aplikační forma připravit tak, že se do nosné matrice současnou nebo postupnou impregnací zavede alespoň jedna složka způsobující odezvu na zkoušenou látku ve vzorku v alespoň jednom reakčním systému spolu se složkami způsobujícími změnu reakčních parametrů. Když se nosná matrice impregnuje kapalným roztokem, po této operaci se vysuší. Když se pro. zapouzdření složek použije mikrokapslí, provádí se zapouzdřování obyvkle předem a nezávisle na jejich zavedení do nosné matrice. Ať již mikrokapsle obsahují složky způsobující odezvu na zkoušenou látku nebo složky účinné pro změnu reakčních parametrů, přednostně se zavádějí do matrice po zavedení ostatních složek. Mikrokapsle lze impregnací zavést dovnitř nosné matrice, navrstvit na matrici nebo soustředit ve středu aplikační formy. Aplikační forma může být spojena s podložkou, jako například s částí . umožňující uchopení, z organické plastické hmoty.
Podle jiného provedení může mít aplikační forma podobu tablety. Může se použít jakékoli běžného způsobu . výroby tablet, jako například lisování. Pro dosažení tvarové stálosti a celistvosti před použitím se může použít pojiv, zejména takových pojiv, která se rozpadnou nebo rozpustí při styku s rozpouštědlem kapalného zkušebního vzorku.
Pro zkoušení kapalných vzorků, při kterém se vzorek uvádí do styku se zkušebním prostředkem lze použít několikasystémových zkušebních prostředků, které neobsahují matrice, tabletovací činidla ani jiné nosiče. Odezva na určovanou látku obsaženou ve vzorku je zprostředkována tvorbou chromoforického [barevného komplexu, oxidačně redukční reakcí, tvorbou komplexu antigen-protilátka nebo enzym-substrát nebo jinou detegovatelnou změnou.
Několikasystémového zkušebního prostředku se s ohledem na účelnost a spolehlivost stanovení přednostně .používá ve formě pevného přípravku, jako aplikační formy. Aplikační forma se ponoří do vzorku nebo jinak uvede do styku se skoušeným kapalným vzorkem. Alespoň jedna ze složek zavedená do nosné matrice nebo impregnovaná v nosné matrici reaguje se stanovenou látkou nebo v její přítomnosti způsobuje jinak odezvu. Alespoň jedna další z uvedených slo žek způsobuje při styku se vzorkem ze reakčních parametrů, za kterých funguje první reakční systém, změnu těchto reakčních parametrů na parametry, za kterých funguje alespoň jeden .další reakční systém. K odezvě na stanovovanou látku může dojít za reakčních podmínek nebo parametrů existujících v době styku aplikační formy a zkoušeného vzorku nebo až v pozdějším reakčním systému po předchozí změně reakčních parametrů.
Aktivace složky způsobující změnureakčních parametrů může zahrnovat například uvolnění zapouzdřených složek nebo interakci katalyzátoru, jako enzymu s jeho substrátem. Katalyzátor a .substrát mohou spolu tedy reagovat před odezvou způsobenou složkou způsobující odezvu na zkoušenou látku, během této odezvy nebo po ní. interakce mezi enzymem a substrátem může začít i před detektcí stanovované látky tak, aby došlo ke změně parametrů po detekci, v tomto případě . však musí být vzájemný poměr enzymu a substrátu takový, aby nedošlo ke změně reakčních parametrů -před uplynutím předem určené zpožďovací periody.
Zapouzdření zajišťuje odložené uvolnění složky způsobující změnu reakčních podmínek nebo. složky způsobující odezvu na stanovovanou látku. Po předem určené zpož-: ďovací periodě vstoupí rozpouštědlo obsažené ve vzorku v důsledku osmotické . hnací síly stěnou kapsle dovnitř. Dojde k osmotickému gradientu, který postačuje pro uvolnění obsahu kapsle.
Rychlost a stupeň uvolnění obsahu kapsle je závislá na počátečním osmotickém gradientu a na vlastnostech shtěny kapsle.
Vzorek se prohlédne poté, co se uplatní reakční systémy uložené v aplikační formě. Kromě vizuálního porovnání lze použít pro vyhodnocení odezvy různých instrumentálních metod. Tím se zvýší přesnost zkoušky, poněvadž se odstraní subjektivní určení zbarvení lidským okem.
V následujícím popisu se pro větší jasnost používá specifických termínů, tyto termíny se však vztahují pouze ke zvláštním provedením vynálezu zvoleným pro ilustrativní účely a nedefinuje se nebo neomezuje se jimi rozsah vynálezu.
Termínem nosná matrice se rozumí nasákavá nebo nenasákavá matrice, která je nerozpustná ve vzorku a která si udržuje tvarovou stálost a soudržnost po vystavení fyziologickým a jiným kapalinám. Vhodnými nasákavými matricemi, kterých lze použít, jsou papír, celulóza, dřevo, rouna ze syntetických pryskyřic, skleněná vlákna, netkané a tkané látky apod.
Jako příklad nenasákavých matric lze uvést organické plastické hmoty, jako polypropylen. Matrice může být účelně připojena k nerozpustné podložce, například z polystyrenu.
Alternativně může být inertní nosič zpracován do formy ražené nebo lisované tablety obsahující běžné látky jako· disintegrační činidla, jako karboxymethylcelulóza nebo škrob, plniva, jako laktózu nebo fosfáty a mazadla, jako mastek, kyselinu stearovou nebo parafin.
Mikrokapsle, kterých lze použít podle vynálezu, lze připravit řadou dobře známých způsobů, jako jsou způsoby popsané v Greyson, U. S. patent č. 4 015 462; Angew. Chem. Internát. Edit. 14:539 (1975) a Adams, U. S. patent č. 3 092 463. Tyto metody zahrnují chemické - zpouzdřovací techniky, jako· je polykondenzace nebo koacervace na fázovém · · rozhraní nebo fyzikálně mechanické způsoby, · · jako je odstřelování nebo sprejové · -sušení. Přednostně se používá technik zahrnujících polykondenzaci na fázovém rozhraní, -separaci fází a polymeraci, protože -se jimi mikrokapsle snadno vyrobí. Pod termínem osmosensltivita se -rozumí schopnost stěn kapslí - reagovat na vnitřní hydrostatický tlak změnou fyzikálních vlastností umožňující uvolnění zapouzdřené fáze.
Aktivita enzymatických přípravků použitých v příkladech je vyjadřována v počtech jednotek aktivity na miligram sušiny. Miezinárodní jednotka (m. j.) aktivity enzymu byla definována komisí pro enzymy mezinárodního svazu pro biochemii (Commission on Enzymes of the International Union of - - - Biochemistry), jako mikromol (μΐηοΐ) substrátu využitého za minutu za specifických podmínek pH a regulace - teploty. Pokud není uvedeno jinak -používá se takto definované jednotky.
Následující příklady mají pouze ilustrativní charakter, ale rozsah vynálezu v žádném směru neomezují. Odborník může podle potřeby provést řadu změn, variací a modifikací jednotlivých složek a parametrů, aniž by vybočil -z rozsahu vynálezu.
Příklady I a II
Při detekci dusitanů jednofázovou zkušební aplikační formou musí probíhat diazotizace aromatického aminu při nízkém pH a diazotovaný amin se pak musí kopulovat s další látkou při stejně - nízkém pH. To omezuje kopulační složky, kterých lze použít, na poměrně malý počet aromatických aminů a jejich derivátů.
Když však zkouška začne při kyselém pH a pak se reakční prostředí zalkalizuje, rozšíří se tím značně počet použitelných Populačních -složek. V takovém případě lze například použít fenolů a naftolů. Takovou zkoušku lze však provést v jedné zkušební operaci jen za použití aplikační formy podle vynálezu. Následují srovnávací ilustrativní zkoušky.
I.a) Připraví se impregnační roztok o pH a'si 2 v 75 ml methanolu smícháním následujících složek:
1. 0,13 g p-arsanilové kyseliny (aromatic- ký amin)
2. 3,0 g malonové kyseliny
3. - 25 ml 2,0% roztoku hydrolyzovaného
Gantrez AN 139 [polyfmaleinhydridmethylvinylether) ]
4. 0,75 g laurylsulfátu - sodného
5. 0,3 g dvojsodné soli l-naftol-3,6-disul- fonové kyseliny (kopulační složka)
Uvedeným impregnačním roztokem se napustí listy filtračního papíru Whatman č. 17 o rozměrech 10x10 cm až - do nasycení, a pak se listy 10 minut suší při 95 °C a rozřežou na kousky lxl cm.
b) Další jednofázová zkušební aplikační forma se připraví přesně tak, jako v případě a), s tím rozdílem, že pH impregnačního roztoku se nastaví na asi 6 přidáním 15 ml 2 - M citrátového pufru k roztoku vypuštěním kyseliny malonové.
c) Někollkasystémová zkušební forma podle vynálezu se připraví - takto. Listy papíru Whatman 10x10 cm se shora uvedeným způsobem nasytí impregnačním roztokem Ia) a vysuší. Pak -se- povlečou monovrstvou -polyamidových mikrokapslí 70—80 mesh, vyrobených zapouzdřením vodného -roztoku obsahujícího 13,2 g hydroxidu sodného ve 100 ml vody, a vysuší.
Zkušební formy (aplikační formy zkušebního prostředku) vyrobené podle postupů a),
b) a c) se pak zkouší tak, že se aplikují 3 kapky vzorku - na plochu lxl cm zkušební formy. Vzorek obsahuje -10 mg dusitanu -sodného ve 100 ml destilované vody. Výsledky se zajišťují po 3 - minutách. Zkušební formy vyrobené podle aj a b) nedetegují dusitan v koncentraci 10 mg/100 ml, zatímco forma
c) ihned ukáže pozitivní reakci tím, - že se její barva změní na jasně oranžovou.
Kompozice podle vynálezu se vyrobí smícháním 0,13 g p-arsanilové kyseliny, 3,0 g malonové kyseliny a 0,3 g dvojsodné soli 1-naftol-3,6-disul.fonové kyseliny přímo -s polyamidovými kapslemi popsanými v Ia. Poměr zapouzdřených a nezapouzdřených složek se může měnit podle požadované rychlosti - - a rozsahu změny pH. Přednostně se používá asi 10,0 g mikrokapslí.
Takto- vyrobená kompozice se zkouší tím, že se uvede do styku -se 3 kapkami shora popsaného vzorku ve 2 ml vzorkovnici pro kapkové zkoušky. Kompozice podle vynálezu ihned deteguje dusitan, což je zřejmé - z barevné změny.
II. Při tomto pokuse se vyrobí jednofázová zkušební forma a) a b) přesně podle postupů popsaných - v příkladech Ia a Ib.
c) Několikafázová zkušební forma podle vynálezu se připraví takto: List papíru Whatman o velikosti 10x10 cm se napustí až do nasycení roztokem připraveným podle Ia s tím- rozdílem, že se vypustí dvojsodná sůl kyseliny l-naftol-3,6-disulfonové a pak se, jak bylo dříve popsáno, vysuší. Vzniklé listy se pak povlečou monóvrstvou polyamidových -kapslí 70—80 mesh vyrobených zapouzdřením vodného roztoku obsahujícího 3,3 % dvojsodné soli kyseliny l-naftol-3.,6-disulfonové a 13,2 g/100 ml vodného hydroxidu sodného, a vysuší.
Zkušební formy vyrobené podle příkladů Ha, b a c se zkouší aplikací 3 kapek vzorku na plochu lxl cm. Vzorek obsahuje 10 mg/ /100 ml NaNO2 v destilované vodě. Výsledky se zjišťují po 3 minutách. Zkušební formy vyrobené podle a) a b) nedetegují dusitan v množství 10 mg/100 ml, zatímco, forma c) ihned vykazuje . pozitivní reakci tím, že se zbarví jasně oranžově. *
V obou těchto příkladech může při stálém nízkém pH . probíhat diazotace, ale ne kopulace. Při stálém vysokém pH může probíhat kopulace, ale ne diazotace. Pouze . v tom případě, že je na počátku pH nízké, pro diazotaci, a pak vysoké, pro kopulaci, deteguje zkušební forma dusitany.
Příklady III až V
Při analýzách acidofosfatázy prováděných při pathologických -stavech, jako při metastatickém karcinomu prostaty se musí hydrolytický účinek enzymu studovat při - pH 4,5, zatímco nejvhodnější substráty nelze sledovat při jiném, než - při alkalickém pH. To velmi omezuje počet substrátů, které - lze takto detegovat.
III.- Uvedený fakt je ilustrován na jednom zkušebním. systému:
ph 4,5 p-nitrofenyylosfát----+ p-nitrofenol (bezbarvý) acidofosfatáza -- fosfát
OHp-nitrofenol —---- p-nitrofenolátový anion (žlutý).
V jedné zkušební operaci lze tuto zkoušku provést jen za použití zkušební formy podle vynálezu, což ukazují srovnávací zkoušky se třemi zkušebními papírky.
a) Jednofázová zkušební forma se připraví takto: List filtračního papíru Katon-Dikeman 204 (E&D) 10x10 cm se nejprve napustí do nasycení ve 25 ml 0,02 M pufru z cit-ranu sodného (pH 5,0) a pak vysuší při 60 °C. Pak se napustí ve 20 ml methanolického - roztoku obsahujícího- 0,3 g -sodné soli plnltrofenyláosáátu a vysuší při 60 °C. Napuštěné listy se nařežou na zkušební formypapírky o rozměrech - lxl - cm.
b) Při přípravě několikafázové zkušební formy podle vynálezu se nejprve provedou dvě stejné impregnace, jako v příkladě Ila. Pak se list povleče monovrstvou polyamidových mikrokapslí 70—80 mesh, připravených zapouzdřením vodného roztoku obsahujícího 13,2 g hydroxidu sodného ve 100 ml vo- la dy a vysuší. Listy se pak nařežou - na .. .zkušební papírky.
c) Ve třetím píípadě se stejný flttračn í papír nejprve napustí do nasycení - 0,1 . > tris (hydrox^i^^^J^^l) aminomethanovým- pufrem (TR^J^-^-^i^ufr) o pH 8 a pak - vysuší při . 60 °C. Druhá impregnace je stejná . - jako- v příkladě lila. Napuštěné listy -se pak . - rozřežou na zkušební formy — papírky.
Připravené zkušební papírky se pak - - zkouší tím, že se na ně aplikují 2 kapky roztoku 10 mg/ml (20 jednotek/mg) . acidofosfatázy z pšeničných klíčků ve 0,02 M citrátovém:pufru. Uvedená jednotka . enzymu je· - - definována jako množství enzymu katalyzující - - u- volnění 1 ^molu nitrofenolu za - hodinu -při pH 4,8 a 37 °C. Hodnocení vzorků se.. provádí.: po 5 minutách. Papírky a) a b) se - nezbarví,zatímco papírek b) ' -. zežloutne. To . ukazuje; že při pH dojde k hýdrolýze, ale p-nitrofenol zůstává bezbarvý (papírek a). - Při . - pH . 8,0 nedojde k hýdrolýze (papírek c). Pouze v tom -případě, že je - na počátku pH - nízké, aby se - umožnila hydrolýza - a pak -. vysoké, aby se vyvinulo zbarvení, dojde . ke zbarvení papírku, což indikuje přítomnost acidofosfatázy.
IV. Jiný systém pro detekci acidofosfatázy pracuje podle následujícího reakčního schématu:
pH 4,5 . ářnolátalřindiáosfát -» fenolftalein- - (bezbarvý) acidofosfatáza + fosfát ohfenolátalřin (bezbarvý) -> fenolftalein - - (růžový).
Při - tomto pokusu se připraví stejným - způsobem, jako podle příkladů lil a, bac jednofázová a vícefázová zkušební forma - pouze s tím rozdílem, že se plnitroářnylfoffáťnahradí fřnolátaleindifo9fátřm.
Zkušební formy vyrobené podle IVa, IVb a IVc se zkouší jako v příkladě III, Zkušební formy připravené - podle a -a -c nedetegují acidofosfatázu, zatímco vícesystémová zkus šební forma ihned vykazuje pozitivní reakci, což je zřejmé ze zrůžovění - papírku.
V. Analýza na acidofosfatázu se - - - může·· též provést v jedné zkušební operaci za použití zkušební formy - připravené podle- jiné alternativy vynálezu, při které se nevyužívá mikroenkapsulace. Postup - je - - -osvětlen na srovnávacím zkoušení následujích - - tří zkušebních forem.
a) Jednofázová zkušební forma- se - připra·',ví takto:
List E&D filtračního papíru o rozměrech
10,16 x 10,16 cm se nejprve -napustí - do- - nasycení ve 25 ml - 0,02 M citrátového - pufru (pH 5) a pak se vysuší .při 60 °C. Pak .se . nasytí ve 20 ml roztoku methanolu obsahujícího 0,3 g sodné soli p-nittofenylfošáátu, vysuší při 60' °C a nastříká na zkušební papírky lxl cm.
bj Několikafázová zkušební forma podle vynálezu se připraví takto: List E&D papírku 10,16 x 10,16 cm se nasytí ve 20 ml 0,02 M citrátovém pufru o pH 5,0, obsahujícím ureázu [2000 mezinárodních jednotek (m. j.j/mlj a vysuší při 60 °C. Mezinárodní jednotka je definována jako, počet μπιοίύ amoniaku vytvořeného za minutu. Pak se list napustí ve 20 ml methanolu obsahujícího 0,3 g sodné soli p-nitrofenylíosfátu a 3,0 g močoviny, vysuší při 60 °C a stejně jako ve shora uvedeném případě nastříká na zkušební papírky.
c] Ve třetím případě se nejprve E&D papír napustí do nasycení 0,01 M TRIS-pufrem o pH 8,0 a pak vysuší ,, při 60 °C. Druhá lázeň je stejná jako v případě aj.
Zkušební formy, které se takto získají, se zkouší jako v příkladech III a IV. Zkušební formy a) a ' c) nedávají žádné zbarvení, zatímco zkušební forma b) zežloutne.
Roztok citrátového pufru obsahující ureázu a roztok močoviny se lyofilizují a smísí aniž se mísí s nosičem. Když se tato kompozice uvede do styku se zkušebním vzorkem dojde k barevné změně do žlutá. Barevná změna je stejná jako v případě zkušební formy podle příkladu V.
V těchto příkladech dojde ke vzniku zabarvení indikujícího acidofosfatázu jen v tom případě, když je pH nejprve nízké, aby se umožnila hydrolýza a pak vysoké, aby se vyvinulo zbarvení.
Příklady VI ,a VII
Vyrobí se zkušební formy podle vynálezu pro analýzu- /?-glukoronidázy následujícím způsobem:
VI. Několikafázová zkušební forma podle vynálezu se připraví podle tohoto reakčního schématu:
pH 4,8 p-nitrofenyl-/--glukuronid * p-mtrofenolj.á-glukuronidáza + glukuronát
OHp-nit-rofenol * p-nitrofenolát (žlutý).
List papíru Whatman 10 x 10 cm se napustí do nasycení ve 20 ml roztoku 60 mg p-nitrofenyl-j--glukuronidu rozpuštěného ve 20 ml vody a vysuší, během 10 minut při 60 °C. Pak se list povleče monovrstvou polyamidových míkrokapslí (70—80 mesh) připravených zapouzdřením vodného roztoku obsahujícího 13,2 g/100 ml NaOH a vysuší. Takto vyrobené listy se nastříkají na zkušební formy o rozměrech lxl cm.
Takto připravené zkušební formy se zkouší tak, že se ponoří do 1 ml 0,1 M acetátového pufru o pH 4,8 obsahujícího 4 mg/ /100 ml --glukoronidazy (0,25 m. j./mg) o teplotě 40 °C a pak se 5 minut sledují. Bě12 hem ' této doby ' jsou umístěny na bloku vyhřívaném na 37 °C. Mezinárodní jednotka. /J^^gl^l^i^i^c^i^i^ídázy je definována reakcí s fenolft^:^(in-i/^--^]^iuku:ronidem. Zkušební ' formy detegují přítomnost β-glukuronidázy, což je zřejmé ze žlutého zbarvení.
VII. Připraví se další vícefázová zkušební forma podle vynálezu stejným způsobem jako podle příkladu VI s tím rozdílem, , Že se papír napustí 20 ml roztoku 100 mg fenolftalein-/--glukuromdu ve 20 ml destilované vody. Systém pracuje podle tohoto reakčního schématu.
pH 4,8 fenolftalein-3-glukuronid - fenolftalein (bezbarvý ) p-glukuronidáza + glukuronát
OHbezbarvý eenoletalein -> fenolftalein (růžový).
Takto připravené formy vykazují při testování podle příkladu VI přítomnost Jglukuronidázy, což je zřejmé z růžového zbarvení.
Příklad VIII
Určité detekční systémy, jako například systémy pro detekci hemoglobinu v moči jsou citlivé na přítomnost interferujících látek, jako jsou askorbáty. Silná činidla odstraňující interferující látky, jako je askorbátoxidáza jsou však inaktlvovány reakčními činidly detegujícími hemoglobin.
Nyní za použití vynálezu může askorbátoxidáza odstranit interferující askorbáty v prvním reakčním systému, poněvadž reakční činidla detegující hemoglobin jsou oddělena od askorbátoxidázy zapouzdřením. Dojde pak k opožděnému uvolnění činidel detegujících hemoglobin, což umožňuje neinhibovanou detekci hemoglobinu ve druhém reakčním , systému. Následující příklad slouží k ilustraci tohoto provedení vynálezu.
List E&D papíru 10 x 10 cm se , ponoří , do 20 ml 0,1 M fosfátového pufru o. pH 7 obsahujícího 2 mg askorbátoxidázy (500 m. j./ . /mg) a usuší v sušárně při 60 °C. Pak se list povleče ve 20 ml suspenze mikrokapslí (37 až 200 μΐη) vyrobených z acetobutyrátu celulózy, která obsahuje 0,35 g kumenhydroperoxidu, 1,35 g triethanolammborátu, 0,08 g tolidinhydrochloridu a 0,08 g 6-methoxychinolinu. Papír se pak laminuje na proužky polystyrenu pomocí dvoustranné lepicí pásky.
Získané zkušební forby po ponoření do moči obsahující 0,03 mg/100 ml hemoglobinu a 50 mg/100 ml askorbátů zmodrají, což indikuje přítomnost hemoglobinu. Stejné formy obsahující stejné složky, které však byly napuštěny z jednoho homogenního roztoku obsahujícího všechny složky, nedetegují hemoglobin. V tomto případě je totiž příkladech, je však zřejmé, že příklady mají pouze ilustrativní charakter a že lze provést řadu změn v kombinacích a uspořádání prvků, přičemž všechny tyto modifikace spadají do rozsahu vynálezu.
askorbátoxidáza desaktivována detekčními složkami a detekce hemoglobinu je znemožněna přítomností 50 mg/100 ml askorbátu.
Vynález byl sice objasněn na konkrétních
Claims (13)
1. Způsob stanovení látky ve vzorku v několika reakčních systémech, z nichž se každý uplatňuje za odlišných reakčních parametrů, vyznačující se tím, že se vzorek uvede do styku s několíkasystémovým zkušebním prostředkem, který obsahuje několik složek spojených s alespoň dvěma reakčními systému fungujícími za odlišných reakčních parametrů, přičemž alespoň jedna z uvedených složek způsobuje odezvu v přítomnosti stanovované látky a alespoň jedna další z uvedených složek způsobuje při styku se vzorkem za reakčních parametrů, při kterých se uplatňuje první z uvedených reakčních systémů, změnu těchto reakčních parametrů na parametry, při kterých se uplatňuje alespoň jeden z jiných uvedených reakčních systémů, přičemž uvedený několikasystémový zkušební prostředek je popřípadě kombinován s nosičem, a pak se sleduje detegovatelná reakce.
2. Způsob podle bodu 1, vyznačující se tím, že se použije několikasystémového zkušebního prostředku, ve kterém složkou způsobující odezvu na stanovovanou látku je chromogenní indikátor.
3. Způsob podle bodu 1, vyznačující se tím, že se použije několikasystémového zkušebního prostředku, ve kterém složkou způsobující odezvu na stanovovanou látku je specifická vazebná reakční složka pro stanovovanou látku.
4. Způsob podle bodu 1, vyznačující se tím, že se použije několikasystémového zkušebního prostředku, ve kterém alespoň jedna složka způsobující změnu reakčních parametrů způsobuje změnu pH prvního reakčního systému na parametry, za kterých funguje alespoň jeden jiný reakční systém.
5. Způsob podle bodu 1, vyznačující se tím, že se použije několikasystémového zkušebního prostředku, ve kterém alespoň jedna složka způsobující změnu reakčních parametrů způsobuje desaktivaci látky, která interferuje se složkou způsobující odezvu v přítomnosti stanovované látky.
6. Způsob podle bodu 1, vyznačující se tím, že se použije několikasystémového zkušebního prostředku, ve kterém alespoň jedna z uvedených složek způsobuje odezvu v přítomnosti stanovované látky v prvním reakčním systému za uvedených prvních re-
VYNÁLEZU akčních parametrů a alespoň jedna z jiných uvedených složek způsobuje po styku se vzorkem změnu reakčních parametrů na druhé reakční parametry, za kterých se uplatňuje druhý reakční systém.
7. Způsob podle bodu 6, vyznačující se tím, že se použije několikasystémového zkušebního prostředku, ve kterém alespoň jedna z uvedených složek způsobujících změnu reakčních parametrů je zapouzdřena v kapsli, takže je uvolnitelná při styku se vzorkem a po svém uvolnění způsobí vytvoření druhých reakčních parametrů.
8. Způsob podle bodu 7, vyznačující se tím, že kapsle je osmosenzitivní.
9. Způsob podle bodu 6, vyznačující se tím, že se použije několikasystémového zkušebního prostředku, ve kterém alespoň jedna složka způsobující změnu uvedených reakčních parametrů sestává z alespoň dvou komponent, které spolu po styku se vzorkem vzájemně reagují za vzniku uvedených druhých reakčních parametrů, za kterých se uplatňuje druhý reakční systém.
10. Způsob podle bodu 9, vyznačující se tím, že se použije několikasystémového zkušebního prostředku, ve kterém vzájemně reagujícími složkami jsou specifické reakční složky, které se navzájem vážou.
11. Způsob podle bodu 10, vyznačující se tím, že se použije několikasystémového zkušebního prostředku, ve kterém specifickými vazebnými složkami jsou enzym a jeho substrát.
12. Způsob podle bodu 10, vyznačující se tím, že se použije několikasystémového zkušebního prostředku, ve kterém alespoň jedna z uvedených složek způsobujících odezvu způsobuje odezvu v přítomnosti stanovované látky ve druhém nebo dalším reakčním systému a alespoň jedna další z uvedených složek desaktivuje v prvním reakčním systému látku obsaženou ve vzorku, která interferuje se složkou způsobují odezvu na stanovovanou látku.
13. Způsob podle bodu 12, vyznačující se tím, že se použije několikasystémového zkušebního prostředku, ve kterém složka způsobující odezvu na stanovovanou látku je zapouzdřena v kapsli, aby se uvolnila po reakci složky desaktivující interferující látka.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US05/846,441 US4129417A (en) | 1977-10-28 | 1977-10-28 | Multisystem test means |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS216810B2 true CS216810B2 (en) | 1982-11-26 |
Family
ID=25297948
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS785778A CS216810B2 (en) | 1977-10-28 | 1978-09-06 | Method of fixing the sampled substances in several reaction systems,each acting under different reaction parameters |
Country Status (9)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4129417A (cs) |
| JP (1) | JPS5467495A (cs) |
| AU (1) | AU515162B2 (cs) |
| CA (1) | CA1100024A (cs) |
| CS (1) | CS216810B2 (cs) |
| DE (1) | DE2846967C2 (cs) |
| FR (1) | FR2407474A1 (cs) |
| GB (1) | GB2006957B (cs) |
| IT (1) | IT1109285B (cs) |
Families Citing this family (16)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4274832A (en) * | 1979-02-12 | 1981-06-23 | Eastman Kodak Company | Analytical element and method for analysis of multiple analytes |
| US4307188A (en) * | 1979-09-06 | 1981-12-22 | Miles Laboratories, Inc. | Precursor indicator compositions |
| DE3012368C2 (de) * | 1980-03-29 | 1982-04-15 | Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim | Verfahren und diagnostische Mittel zum Nachweis von Redox-Reaktionen |
| US4470125A (en) * | 1981-11-09 | 1984-09-04 | Rca Corporation | Multiplier for digital video signals using a cascade of signal-selectable memories |
| US4471055A (en) * | 1982-03-26 | 1984-09-11 | Minnesota Mining And Manufacturing Company | Process and kit for determining concentrations of aldehydes |
| US4676950A (en) * | 1984-02-03 | 1987-06-30 | Foster Research Corporation | Indicator and test device for detecting occult blood |
| US5268145A (en) * | 1988-09-01 | 1993-12-07 | Tdk Corporation | Chemical substance-sensing element |
| US5877028A (en) * | 1991-05-29 | 1999-03-02 | Smithkline Diagnostics, Inc. | Immunochromatographic assay device |
| US5998220A (en) * | 1991-05-29 | 1999-12-07 | Beckman Coulter, Inc. | Opposable-element assay devices, kits, and methods employing them |
| US6168956B1 (en) | 1991-05-29 | 2001-01-02 | Beckman Coulter, Inc. | Multiple component chromatographic assay device |
| US5837546A (en) * | 1993-08-24 | 1998-11-17 | Metrika, Inc. | Electronic assay device and method |
| US7635597B2 (en) | 1995-08-09 | 2009-12-22 | Bayer Healthcare Llc | Dry reagent particle assay and device having multiple test zones and method therefor |
| US5958584A (en) * | 1996-07-22 | 1999-09-28 | Dsm Nv | Radiation-curable, optical glass fiber coating composition and optical glass fiber drawing method |
| AU2984400A (en) | 1999-02-05 | 2000-08-25 | Taylor Technologies, Inc. | Multicomponent test systems useful in analyzing liquid samples, and uses therefor |
| US7544517B2 (en) * | 2003-12-11 | 2009-06-09 | Taylor Technologies, Inc. | Stabilized reagent, apparatus and method for measuring cyanuric acid |
| US7150995B2 (en) | 2004-01-16 | 2006-12-19 | Metrika, Inc. | Methods and systems for point of care bodily fluid analysis |
Family Cites Families (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3011874A (en) * | 1959-03-13 | 1961-12-05 | Marshall E Deutsch | Indicator strip and method of testing |
| US3006735A (en) * | 1959-09-22 | 1961-10-31 | Morton Salt Co | Quick-dip indicator |
| US3008879A (en) * | 1960-03-18 | 1961-11-14 | Miles Lab | Diagnostic composition for the quantitative determination of glucose |
| US3645853A (en) * | 1969-06-24 | 1972-02-29 | Warner Lambert Co | Diagnostic composition and method for the detection of nitrate reduction |
| JPS4945130A (cs) * | 1972-09-05 | 1974-04-30 | ||
| US4011308A (en) * | 1974-01-04 | 1977-03-08 | General Electric Company | Method for surface immunological detection of biological particles by the use of tagged antibodies |
| US3960489A (en) * | 1974-04-01 | 1976-06-01 | General Electric Company | Method and apparatus for determination of concentration of immunologically reactive biological particles |
| US3979509A (en) * | 1974-09-03 | 1976-09-07 | General Electric Company | Opaque layer method for detecting biological particles |
| US3964871A (en) * | 1974-12-18 | 1976-06-22 | Becton, Dickinson And Company | Method and device for detecting glucose |
-
1977
- 1977-10-28 US US05/846,441 patent/US4129417A/en not_active Expired - Lifetime
-
1978
- 1978-07-04 CA CA306,747A patent/CA1100024A/en not_active Expired
- 1978-08-22 AU AU39133/78A patent/AU515162B2/en not_active Expired
- 1978-08-31 FR FR7825247A patent/FR2407474A1/fr active Granted
- 1978-09-06 CS CS785778A patent/CS216810B2/cs unknown
- 1978-09-20 JP JP11471378A patent/JPS5467495A/ja active Pending
- 1978-10-11 IT IT51460/78A patent/IT1109285B/it active
- 1978-10-27 DE DE2846967A patent/DE2846967C2/de not_active Expired
- 1978-10-27 GB GB7842215A patent/GB2006957B/en not_active Expired
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| IT7851460A0 (it) | 1978-10-11 |
| US4129417A (en) | 1978-12-12 |
| DE2846967C2 (de) | 1982-05-27 |
| JPS5467495A (en) | 1979-05-30 |
| DE2846967A1 (de) | 1979-05-10 |
| CA1100024A (en) | 1981-04-28 |
| IT1109285B (it) | 1985-12-16 |
| AU515162B2 (en) | 1981-03-19 |
| GB2006957A (en) | 1979-05-10 |
| AU3913378A (en) | 1980-02-28 |
| FR2407474B1 (cs) | 1983-04-15 |
| FR2407474A1 (fr) | 1979-05-25 |
| GB2006957B (en) | 1983-02-23 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CS216810B2 (en) | Method of fixing the sampled substances in several reaction systems,each acting under different reaction parameters | |
| US5055195A (en) | Erythrocyte-retention substrates | |
| CA1078711A (en) | Diagnostic method, device and composition | |
| EP0198011B2 (en) | Field assay for ligands | |
| US3552928A (en) | Whole blood separation means and test system using same | |
| AU613508B2 (en) | Test device and method of assaying for proteins | |
| JP2638600B2 (ja) | 免疫診断装置 | |
| AU714671B2 (en) | Chemical timer for a visual test strip | |
| CA1333251C (en) | Composition and method of assaying for trace amounts of proteins | |
| AU682940B2 (en) | Method and apparatus for flow control | |
| EP0222700B1 (en) | Composition and method for determining peroxidase-like activity of hemoglobin | |
| CA1306930C (en) | Test carrier and process for the determination of coagulation parameters | |
| EP0254117A2 (en) | Immunoassay process | |
| EP0703453B1 (en) | Method for the determination of creatinine and urinary protein | |
| US5122451A (en) | Dry liquid analysis element | |
| EP0194578A2 (en) | Proteins immobilised on polyamides or cellulose hydrate and the use thereof for the preparation of biocatalysts, test strips or chromatography materials | |
| CA1285872C (en) | Binder composition and analytical element having stabilized peroxidase in layer containing the composition | |
| JPH0695954B2 (ja) | クレアチニン又はクレアチンの測定要素及び測定方法 | |
| US4440724A (en) | Composition for detecting ketone bodies and method of preparation | |
| JPS61500152A (ja) | 流動体迅速定量分析用装置 | |
| EP0345460B1 (en) | Method and device employing covalently immobilized colored dyes | |
| CS259884B2 (en) | Method of blood division | |
| US5015572A (en) | Apparatus for determining a proteolytic or esterolytic substance and method for determining a proteolytic or esterolytic substance using a layered apparatus | |
| EP0258035B1 (en) | Analytical element and method for theophylline determination having increased alkaline phosphatase isoenzyme | |
| EP0750197B1 (en) | Dry analytical element for acetaminophen assay |