CS212760B2 - Method of preparing ergot alkaloids - Google Patents
Method of preparing ergot alkaloids Download PDFInfo
- Publication number
- CS212760B2 CS212760B2 CS782524A CS252478A CS212760B2 CS 212760 B2 CS212760 B2 CS 212760B2 CS 782524 A CS782524 A CS 782524A CS 252478 A CS252478 A CS 252478A CS 212760 B2 CS212760 B2 CS 212760B2
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- amino acid
- atcc
- phenylalanine
- halogen
- group
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 12
- 229960003133 ergot alkaloid Drugs 0.000 title claims abstract description 8
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 7
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 claims description 26
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 26
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical class OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 claims description 16
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims description 16
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims description 16
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 16
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical group CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 claims description 15
- 229910052736 halogen Chemical group 0.000 claims description 10
- 150000002367 halogens Chemical group 0.000 claims description 10
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims description 7
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 4
- LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K tripotassium phosphate Chemical compound [K+].[K+].[K+].[O-]P([O-])([O-])=O LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 4
- CNMAQBJBWQQZFZ-LURJTMIESA-N (2s)-2-(pyridin-2-ylamino)propanoic acid Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC1=CC=CC=N1 CNMAQBJBWQQZFZ-LURJTMIESA-N 0.000 claims description 3
- VOWKMMDXKYIBPG-YFKPBYRVSA-N (2s)-2-amino-3-(1h-pyrazol-5-yl)propanoic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=NN1 VOWKMMDXKYIBPG-YFKPBYRVSA-N 0.000 claims description 3
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 claims description 3
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 150000001370 alpha-amino acid derivatives Chemical class 0.000 claims description 3
- 235000008206 alpha-amino acids Nutrition 0.000 claims description 3
- -1 furylalanine Chemical compound 0.000 claims description 3
- 125000001449 isopropyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 claims description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 3
- 239000003471 mutagenic agent Substances 0.000 claims description 3
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 claims description 3
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 claims description 3
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 claims description 3
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 claims description 2
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 claims description 2
- 125000000959 isobutyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])* 0.000 claims description 2
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 claims description 2
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 claims description 2
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 claims description 2
- 229910000160 potassium phosphate Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 235000011009 potassium phosphates Nutrition 0.000 claims description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 2
- YWYZEGXAUVWDED-UHFFFAOYSA-N triammonium citrate Chemical compound [NH4+].[NH4+].[NH4+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O YWYZEGXAUVWDED-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 125000006313 (C5-C8) alkyl group Chemical group 0.000 claims 1
- 241000221760 Claviceps Species 0.000 claims 1
- 150000002994 phenylalanines Chemical class 0.000 claims 1
- 241000221751 Claviceps purpurea Species 0.000 abstract description 8
- 206010020772 Hypertension Diseases 0.000 abstract description 2
- 208000019695 Migraine disease Diseases 0.000 abstract description 2
- 206010027599 migraine Diseases 0.000 abstract description 2
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 abstract description 2
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 abstract 1
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 22
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 20
- 229960005190 phenylalanine Drugs 0.000 description 15
- 229930013930 alkaloid Natural products 0.000 description 13
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 13
- 229960003136 leucine Drugs 0.000 description 11
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 235000010633 broth Nutrition 0.000 description 10
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 10
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 9
- 150000003797 alkaloid derivatives Chemical class 0.000 description 8
- OFKDAAIKGIBASY-VFGNJEKYSA-N ergotamine Chemical compound C([C@H]1C(=O)N2CCC[C@H]2[C@]2(O)O[C@@](C(N21)=O)(C)NC(=O)[C@H]1CN([C@H]2C(C3=CC=CC4=NC=C([C]34)C2)=C1)C)C1=CC=CC=C1 OFKDAAIKGIBASY-VFGNJEKYSA-N 0.000 description 8
- 229960004943 ergotamine Drugs 0.000 description 8
- XCGSFFUVFURLIX-UHFFFAOYSA-N ergotaminine Natural products C1=C(C=2C=CC=C3NC=C(C=23)C2)C2N(C)CC1C(=O)NC(C(N12)=O)(C)OC1(O)C1CCCN1C(=O)C2CC1=CC=CC=C1 XCGSFFUVFURLIX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 7
- 229930015720 peptide alkaloid Natural products 0.000 description 7
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- HEFIYUQVAZFDEE-MKTPKCENSA-N ergocristine Chemical compound C([C@H]1C(=O)N2CCC[C@H]2[C@]2(O)O[C@](C(N21)=O)(NC(=O)[C@@H]1C=C2C=3C=CC=C4NC=C(C=34)C[C@H]2N(C)C1)C(C)C)C1=CC=CC=C1 HEFIYUQVAZFDEE-MKTPKCENSA-N 0.000 description 6
- HEFIYUQVAZFDEE-UHFFFAOYSA-N ergocristinine Natural products N12C(=O)C(C(C)C)(NC(=O)C3C=C4C=5C=CC=C6NC=C(C=56)CC4N(C)C3)OC2(O)C2CCCN2C(=O)C1CC1=CC=CC=C1 HEFIYUQVAZFDEE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 6
- NIGWMJHCCYYCSF-UHFFFAOYSA-N Fenclonine Chemical compound OC(=O)C(N)CC1=CC=C(Cl)C=C1 NIGWMJHCCYYCSF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 5
- 239000000047 product Substances 0.000 description 5
- UCTWMZQNUQWSLP-UHFFFAOYSA-N adrenaline Chemical compound CNCC(O)C1=CC=C(O)C(O)=C1 UCTWMZQNUQWSLP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 4
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 4
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 3
- UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N Benzene Chemical compound C1=CC=CC=C1 UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000004395 L-leucine Substances 0.000 description 3
- 235000019454 L-leucine Nutrition 0.000 description 3
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 3
- YDOTUXAWKBPQJW-UHFFFAOYSA-N alpha-Ergocryptinine Natural products C1=CC(C=2C(N(C)CC(C=2)C(=O)NC2(C(=O)N3C(C(N4CCCC4C3(O)O2)=O)CC(C)C)C(C)C)C2)=C3C2=CNC3=C1 YDOTUXAWKBPQJW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229950001817 alpha-ergocryptine Drugs 0.000 description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 3
- TWUGNQDJTPOAIE-NSLWYYNWSA-N ergocryptine Chemical compound C([C@H]1N(C)C2)C([C]34)=CN=C4C=CC=C3C1=C[C@H]2C(=O)N[C@@]1(C(C)C)C(=O)N2[C@@H](CC(C)C)C(=O)N3CCC[C@H]3[C@]2(O)O1 TWUGNQDJTPOAIE-NSLWYYNWSA-N 0.000 description 3
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 3
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 3
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 3
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 3
- TYYYSRHHJOVPKV-RXMQYKEDSA-N (2r)-2-amino-2-hydroxy-3-methylbutanoic acid Chemical compound CC(C)[C@@](N)(O)C(O)=O TYYYSRHHJOVPKV-RXMQYKEDSA-N 0.000 description 2
- ZAGRKAFMISFKIO-UHFFFAOYSA-N Isolysergic acid Natural products C1=CC(C2=CC(CN(C2C2)C)C(O)=O)=C3C2=CNC3=C1 ZAGRKAFMISFKIO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N Tartaric acid Natural products [H+].[H+].[O-]C(=O)C(O)C(O)C([O-])=O FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 239000002585 base Substances 0.000 description 2
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 description 2
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 2
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 2
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 2
- LIMAOLZSWRJOMG-HJPBWRTMSA-N dihydroergocristine Chemical compound C([C@H]1C(=O)N2CCC[C@H]2[C@]2(O)O[C@](C(N21)=O)(NC(=O)[C@H]1CN(C)[C@H]2[C@@H](C3=CC=CC4=NC=C([C]34)C2)C1)C(C)C)C1=CC=CC=C1 LIMAOLZSWRJOMG-HJPBWRTMSA-N 0.000 description 2
- 229960004318 dihydroergocristine Drugs 0.000 description 2
- HESHRHUZIWVEAJ-JGRZULCMSA-N dihydroergotamine Chemical compound C([C@H]1C(=O)N2CCC[C@H]2[C@]2(O)O[C@@](C(N21)=O)(C)NC(=O)[C@H]1CN([C@H]2[C@@H](C3=CC=CC4=NC=C([C]34)C2)C1)C)C1=CC=CC=C1 HESHRHUZIWVEAJ-JGRZULCMSA-N 0.000 description 2
- 229960004704 dihydroergotamine Drugs 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 2
- ZAGRKAFMISFKIO-QMTHXVAHSA-N lysergic acid Chemical compound C1=CC(C2=C[C@H](CN([C@@H]2C2)C)C(O)=O)=C3C2=CNC3=C1 ZAGRKAFMISFKIO-QMTHXVAHSA-N 0.000 description 2
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 2
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 2
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 2
- 239000011975 tartaric acid Substances 0.000 description 2
- 235000002906 tartaric acid Nutrition 0.000 description 2
- YGOTZDUFHLLYJO-GSVOUGTGSA-N (2r)-2-amino-2-hydroxypropanoic acid Chemical compound C[C@@](N)(O)C(O)=O YGOTZDUFHLLYJO-GSVOUGTGSA-N 0.000 description 1
- LVEGHYQEUBTHQL-REOHCLBHSA-N (2s)-2-(sulfinylamino)propanoic acid Chemical compound OC(=O)[C@H](C)N=S=O LVEGHYQEUBTHQL-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- QDGAVODICPCDMU-UHFFFAOYSA-N 2-amino-3-[3-[bis(2-chloroethyl)amino]phenyl]propanoic acid Chemical compound OC(=O)C(N)CC1=CC=CC(N(CCCl)CCCl)=C1 QDGAVODICPCDMU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WTOFYLAWDLQMBZ-UHFFFAOYSA-N 2-azaniumyl-3-thiophen-2-ylpropanoate Chemical compound OC(=O)C(N)CC1=CC=CS1 WTOFYLAWDLQMBZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XWHHYOYVRVGJJY-UHFFFAOYSA-N 4-fluorophenylalanine Chemical compound OC(=O)C(N)CC1=CC=C(F)C=C1 XWHHYOYVRVGJJY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LUMNWCHHXDUKFI-UHFFFAOYSA-N 5-bicyclo[2.2.1]hept-2-enylmethanol Chemical group C1C2C(CO)CC1C=C2 LUMNWCHHXDUKFI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000700199 Cavia porcellus Species 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 239000007836 KH2PO4 Substances 0.000 description 1
- SNDPXSYFESPGGJ-BYPYZUCNSA-N L-2-aminopentanoic acid Chemical compound CCC[C@H](N)C(O)=O SNDPXSYFESPGGJ-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- SNDPXSYFESPGGJ-UHFFFAOYSA-N L-norVal-OH Natural products CCCC(N)C(O)=O SNDPXSYFESPGGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 1
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000009754 Vitis X bourquina Nutrition 0.000 description 1
- 235000012333 Vitis X labruscana Nutrition 0.000 description 1
- 240000006365 Vitis vinifera Species 0.000 description 1
- 235000014787 Vitis vinifera Nutrition 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 238000005903 acid hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002908 adrenolytic effect Effects 0.000 description 1
- 238000005273 aeration Methods 0.000 description 1
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 1
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 description 1
- 238000005904 alkaline hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 125000003545 alkoxy group Chemical group 0.000 description 1
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 229960004543 anhydrous citric acid Drugs 0.000 description 1
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 1
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 1
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 1
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 1
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 238000009833 condensation Methods 0.000 description 1
- 230000005494 condensation Effects 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 239000012458 free base Substances 0.000 description 1
- 238000007429 general method Methods 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 125000005843 halogen group Chemical group 0.000 description 1
- BHEPBYXIRTUNPN-UHFFFAOYSA-N hydridophosphorus(.) (triplet) Chemical compound [PH] BHEPBYXIRTUNPN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000005984 hydrogenation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 231100000518 lethal Toxicity 0.000 description 1
- 230000001665 lethal effect Effects 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 229930014626 natural product Natural products 0.000 description 1
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 1
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- 150000002993 phenylalanine derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 150000003016 phosphoric acids Chemical class 0.000 description 1
- GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M potassium dihydrogen phosphate Chemical compound [K+].OP(O)([O-])=O GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- 150000003254 radicals Chemical class 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 210000001625 seminal vesicle Anatomy 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 231100000004 severe toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 1
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 1
- 230000003033 spasmogenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 239000008399 tap water Substances 0.000 description 1
- 235000020679 tap water Nutrition 0.000 description 1
- 239000005526 vasoconstrictor agent Substances 0.000 description 1
- 201000010653 vesiculitis Diseases 0.000 description 1
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 1
- RZLVQBNCHSJZPX-UHFFFAOYSA-L zinc sulfate heptahydrate Chemical compound O.O.O.O.O.O.O.[Zn+2].[O-]S([O-])(=O)=O RZLVQBNCHSJZPX-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P17/00—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms
- C12P17/18—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms containing at least two hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring system, e.g. rifamycin
- C12P17/182—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring heteroatoms in the condensed system
- C12P17/183—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring heteroatoms in the condensed system containing an indolo[4,3-F,G]quinoleine nucleus, e.g. compound containing the lysergic acid nucleus as well as the dimeric ergot nucleus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/06—Antimigraine agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D519/00—Heterocyclic compounds containing more than one system of two or more relevant hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring system not provided for in groups C07D453/00 or C07D455/00
- C07D519/02—Ergot alkaloids of the cyclic peptide type
Landscapes
- Organic Chemistry (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Neurology (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Description
Vynález se . týká způsobu ' přípravy námelových alkaloidů, přirozeně se nevyskytujících, kvasným postupem s určitými mutantními kmeny Claviceps purpurea za přítomnosti vhodných aminokyselin jako prekurzorů. Je· dobře známo, že námelové alkaloidy jsou amidy kyseliny lysergové, které obsahují cyklolpeptidový · podíl, biochemicky odvozený z vhodné kondenzace tří aminokyselin, z nichž jedna tj. prolin je přítomna vždy. Cyklolový zbytek zahrnuje v případě ergotaminu, kde .Ri = CH3; Ra = CH2C6H5, jednu molekulu fenylalaninu a jednu alfa-hydroxyalaninu; v případě ergokristinu, kde Ri = CH(CHj)2; R2 = CH2C6H5, zahrnuje jednu molekulu fenylalaninu .a jednu alfa-hydroxyvalinu; v případě ergokryptinu, kde Ri = CH(.CH3)?; R2 . = CH2^H(CH3)2, zahrnuje jednu.· molekulu leucinu a jednu molekulu alfa-hydroxyvalinu.
Překvapivě bylo zjištěno, že kmeny C. purpurea, které byly dříve podrobeny působení mutagenního „ činidla,. takže . nebyly .schopné růst · v · nepřítomnosti nehydroxylovaných · aminokyselin, tj. fenylalaninu nebo leucinu, jsou schopné tvořit alkaloidy obsahující jako terminální .aminokyselinu analogickou sloučeninu-přítomnou v médiu, pokud rostou v přítomnosti aminokyseliny, na ní byly mutagenně . závislost vytvořena a jejích analogických-sloučenin. Značně vyšší výtěžky alkaloidů obsahujícího analog .aminokyseliny je možné získat tak, že v prvním . stupni kvašení, .-známém jako „trofofáze“, se přidá malé množství vyžadované aminokyseliny a ve druhém .stupni kvašení, známém jako· „idiofáze“ následuje přidání velkého množství analogické sloučeniny.
Použité -kmeny jsou známými producenty námelových alkaloidů v submerzní kultuře jak byly . popsány řadou autorů jako. Spalla
C. v Gehetic of Ind. Microorganlsmus, Academia, Praha 1973, 393; Floss H. G. et al„ Phytochemistry, vol. 8, 141, 1974). Kmeny jež mohouzejména být použity jsou: C. purpurea ATCC 15383, producent ergotaminu, popsaný . v americkém patentovém spisu č. 3 276 972; . C. purpurea ATCC 201Q3, producent ergokristinu, popsán v americkém patentovém:. . spisu č. 3 567 583 a C. purpurea ATCC 20019,. producent ergokryptinu, popsaný v americkém patentovém spisu číslo 3 485 722.
Podstata vynálezu spočívá v tom, že vytváří způsob přípravy námelových alkaloidů vzorce „cyklolpeptidový podíl“
a jejich 9,10 dihydroderivátů kde Ri je vybráno ze skupiny zahrnující metyl, etyl a izopropyl; R2 je vybráno ze skupiny zahrnující R3 H
halogenem substituovanou lineární C3—C5 alkyl-skupinu a halogenem substituovanou izobutyl-skupinu, R3 je vybráno ze skupiny zahrnující C1—C4 alkyl a halogen, kvasným postupem. . . .
Podle .dalšího. vytvoření vynálezu se kmeny Claviceps purpurea ATCC 15383, ATCC 20103 nebo ATCC 20019, které byly předem působením . mutagenní látkou zmutovány tak, že. nebyly schopny růstu v nepřítomnosti nehydroxylovaných . aminokyselin, pěstují za aerobních podmínek, při teplotě 23 °C, v kapalném . médiu o pH 5,2 asi po dva týdny v přítomnosti sacharózy . jako zdroje uhlíku, citronanu amonného . jako zdroje·· .dusíku a síranu hořečnatého a primárního fosforečnanu draselného jako zdrojů síry a ' fosforu a v přítomnosti nehydroxylované .aminokyseliny, přičemž vzniknou žádané sloučeniny vzorce I, jež se extrahují, izolují a případně purifikují chromatografii na silikagelové koloně.
Podle dalšího výhodného vytvoření vyná212760 lezu jsou použitými nehydroxylovanými aminokyselinami leucin, halogenem substituovaný fenylalanin, fenylalanin nebo jeho izostery, thienylalanin, alfa a beta pyrazolylalanin, furylalanin, pyridylalanin, lineární Cz— C7 alfa aminokyselina nebo přírodní halogenem substituovaná aminokyselina.
Nové námelové alkaloidy vzorce . (I) vykazují zajímavé farmakologické aktivity, udané v tabulce I, jež jsou závislé na radikálech Ri a Rz a kromě toho se tyto aktivity mohou lišit, je-li dvojná vazba v poloze 9 až 10 přítomna, nebo je-li odstraněna hydrogenací.
Například nové deriváty (I), 'kde ' Ri je СИз a Rz je substituovaný benzyl vykazující vasokonstrikční aktivitu a proto mohou být využity při léčbě migrény. Na druhé straně nové deriváty (I), kde Ri je izopropyl a R2 je buďto- substituovaný benzyl a nebo alifatický řetězec a kde dvojná vazba 9 až -10 je také hydrogenována, vykazují adrenolytickou aktivitu a aktivitu na centrální nervový systém, a proto mohou být použity při léčbě vysokého krevního tlaku.
Tabulka I iK-adrenergická blokáda
| Sloučenina | In -vitro (a) ICso mcg/ml | In vivo (b) ED50 mg/kg 1. v. | LD® (myš) (c) mg/kg i. |
| ergotamin 5‘-debenzyl-5‘-p-chlorobenzyl | 0,07 | 0,2 | 70 |
| ergotamin | 0,03 | o,l | 100 |
| dihydroergotamin 5‘-debenzyl-5‘-p-chlorobenzyl | 0,02 | 0,08 | 118 |
| dihydroergotamin | 0,02 | 0,05 | 150 |
| dihydroergokristin 5‘-debenzyl-5‘-p-chlorobenzyl | 0,05 | 0,03 | 174 |
| dihydroergokristin | 0,03 | 0,02 | 190 |
a) Blokáda α-receptorů byla stanovena proti spasmogennímu účinku adrenalinu na izolovaném morčecím semenném váčku metodou podle J. Brůggera, (Helv. Physiol. Acta. 3, 117, 1945). Koncentrace vyvolávající 50%’ inhibici účinku. působící látky byly pro každou protichůdně působící látku stanoveny graficky.'.
bj Blokáda α-receptoru u krys byla stanovena způsobem podle Luduena F. P. et al. (Arch. -Int. Pharmaoodyn CXXII, 111, 1959). EDáo je graficky určená dávka protichůdně působící látky, . jež ochrání 50 -% zvířat před letálním . účinkem 0,2 mg/kg adrenalinu, podaného intravenózně o 5 min později.
c) . -LD® u myší - byla stanovena obvyklým postupem. Z tabulky I je vidět, že tři nové deriváty vykazují ve srovnání s příbuznými sloučeninami zvýšenou -a-adrenolytickou aktivitu ’ jak „in vitro“ tak „in vivo“. Na druhé straně je poněkud snížena prudká toxicita.
Vrstva mycelu ze šikmého agaru kmenů vytvářejících buďto ergotamin nebo ergokristin nebo ergokryptin se suspenduje ve sterilní vodě a rozláme se na malé kousky třepáním ve Waringově mísiči a přefiltruje se přes hedvábný organtýn. Filtrát obsahující hlavně jednobuněčné fragmenty se ozařuje ultrafialovým světlem tak, aby bylo dosaženo- 90- až 99 % úmrtnosti. Suspenze se naředí sterilovanou vodou a vyseje- se na Petriho misky, na pevné médium s přidanou aminokyselinou, již vyžadují hledané - mutanty, tj. leucin nebo fenylalanin. Po- vhodné době inkubace se narostlé kolonie přene sou pomocí - známé techniky do prostředí, jež neobsahuje -aminokyselinu, kterou vyžadují hledané mutanty. Kmeny schopné růstu v předchozím prostředí a neschopné růstu v tomto prostředí jsou závislé na této aminokyselině. Jsou udržovány následnými přenosy v prostředí Obbáan.i.jícím aminokyselinu.
Pro vytváření analogů alkaloidů se mutanty pěstují v tekutém prostředí obsahujícím zdroj uhlíku, zdroj dusíku, zdroj fosforu, zdroj síry a některé minerální soli a kmenem vyžadovanou aminokyselinu. Množství aminokyseliny - se pohybuje - v jednotlivých případech - od 0,5 do 2 - .g^/^1. Po inkubační době- pohybující se od 3 do 5 dnů, se ke kultuře přidá analog vyžadované aminokyseliny v množství pohybujícím - se od 3 do 6 g/1 - a kultura se dále inkubuje po 9 až 11 dnů k dosažení hranice 14 dnů. Kultivace tzv. kvašení může být prováděna buďto v třepaných baňkách nebo ve fermentačních tancích různých velikostí.
V závěru kvašení živná půda kultur obsahuje analog alkaloidu a také malé množství normálního alkaloidu. Analog alkaloidu se extrahuje takto:
Živná půda se přefiltruje a mycelium se několikrát extrahuje 4% vodným roztokem kyseliny vinné. Po filtraci se vodná fáze alkalizuje na pH 9 hydroxidem sodným a extrahuje se dichlormetanem.
Organická fáze se koncentruje, precipituje a krystalizuje jako sůl kyseliny fosforečné. Volná báze se získává z fosfátu a dále obohacuje analogy přírodních alkaloidů chromatografií na koloně se silikagelem.
Oddělení nových produktů od přírodních se dosahuje trakční krystalizací.
Koncentrace alkaloidu se určuje spektrufotometricky po obarvení Van Urkovým činidlem a odečítá se při 550 mu.
Poměry mezi přirozenými a substituovanými aminokyselinami přítomnými v peptidovém podílu se zjišťují kyselou hydrolýzou alkaloidu a kvantitativním určením jednotlivých aminokyselin.
K identifikaci konečných produktů se využívají obvyklé metody instrumentální analýzy (NMR, IR, MS, UV atd.).
Fenylalanln vyžadující mutanty kmenůproducentů ergokristinu nebo ergotaminu mohou vytvářet analoga alkaloidů tím, že inkorporují na místo fenylalaninu fenylalaninové molekuly substituované v benzenovém jádru halogeny, alkyly, alkoxyly. Rovněž mohou vytvářet alkaloidy, jež mají na místě fenylalaninu inkorporovány jeho izostery jako- thionylalanin, alfa- a beta-pyrazolylalanin, - furylalanin, pyridylalanin.
Leucin vyžadující mutanty kmenů-producentů ergokryptinu mohou vytvářet analoga alkaloidů, jež mají na místě leucinu inkorporovány molekuly lineárních alfaaminokyselin s 2 až 7 atomy uhlíku. Rovněž mohou vytvářet alkaloidy, jež na místě leucinu mají inkorporovány přirozené aminokyseliny substituované halogenovými atomy jako 5,5,5-trifluoroleucin.
Příklad 1
5‘-debenzyl-5‘-p-chlprobenzylergokristin
Vrstva mycelu z 12 denního šikmého -agaru s , pevným· médiem „pep 3“, viz přiložená tabulka II, kmene ATCC 20103 C. -purpurea, producenta ergokristinu v submerzní kultuře, byla přenese na do 50 ml destilované sterilní vody a rozlámána ve Waringově mísiči po dobu 20 sekund. Suspenze byla přefiltrována přes hedvábný organtýn, 5 ml filtrátu byla vystaveno světlu (520 uwatt/om2] ultrafialové lampy po- dobu 45 sekund. Zpracovaná suspenze po vhodném ředění byla vyseta na Petriho misku s pevným médiem TM, (viz tabulka II], s přídavkem 1% fenylalaninu. Misky byly inkubovány při 28 °C po 10 až 12 dní. Narostlé kolonie byly přeneseny -známou metodou, tzv. otiskovou technikou na pevné médium TM v Petriho miskách a misky byly inkubovány -při 28 °C 10 až 12 dní.
Z 3000 přešetřených kolonií byly vybírány 4 kmeny neschopné růstu na minimálním médiu TM. Tyto kmeny byly potvrzeny izolací v mádiu TM stejně jako v médiu TM s přídavkem fenylalaninu a 2 z nich byly prokázány jako striktně na fenylalaninu závislé mutanty.
Deset 300 ml baněk, každá s 50 ml obsa hem média TG, viz tabulka II, s přídavkem 1 g/1 fenylalaninu, sterilizovaných 30 minut při 100 °C bylo jednotlivě inokulováno částí vrstvy mycelu mutantního kmene odpovídající přibližně 1 cm2 šikmého agaru s pevným médiem „pep 3“. Tyto baňky se inkubovaíy při 23 °C čtyři dny na rotační třepačce při -225 otáčkách za minutu a s- průměrem opsaného kruhu 5 cm. Tyto baňky odpovídaly vegetativní fázi.
Padesát 300 ml baněk, každá s 40 ml obsahem media T - 25, viz tabulka II, -s přídavkem - 1 - -g/1 l-íenylalaninu, -sterilizovaných 25 minut při 1015 °C bylo inokulováno, každá 5 mililitrů vegetativní kultury bylo inkubováno při 23- °C na téže třepačce jaká byla použita pro vegetativní fázi. Po 4 dnech byl do baněk přidán p-chloro-fenylalanin v koncentraci 4 g/1.
Po lOdenní inkubaci byly kultury smíchány, čímž - se získaly asi 2 litry živné půdy, ze které se vytěžilo 700 mcg/ml veškerých peptidových alkaloidů, - jež - byly - extrahovány takto.
Extrakce 5‘-debenzyl-5‘-p-chlorobenzylergokristinu .
Živná půda s kulturou byla - přefiltrována, filtrát byl odstraněn a mycelium bylo suspendováno do 5% vodného roztoku kyseliny vinné. Po důkladném roztřepání a filtraci byl precipitát dvakrát reextrahován. Spojené filtráty byly alkalizovány 20 '% NaOH na pH 9 a několikrát extrahovány dichlormetanem. Organická fáze byla promyta vodou, zakoncentrována a precipitována hexanem. Takto získaná surová - báze - (0,9 g) byla -odbarvena - aktivním uhlím, rozpuštěna - v 95%' etanolu - - a - bylo - -k - - ní přidáno - 0,8 ml 75 '% H3PÓ4. Roztok byl refluxován ve tmě po 30 minut, a - nakonec - ponechán . stát při ' 3°C 5 dní. ·.
Tímto - způsobem krystalovalo - 0,5 g fosfátu, jenž - obsahoval - směs ergokristinu (20%) a - - 5‘tdebenzylt5‘tp-chloгobenzylergokгistinu (80%]. Surová báze - byla z fosfátu získána alkalizací a extrakcí CH2CI2 a poté byla znovu krystalována z acetonu. Krystalovaný produkt byl chromatografován na koloně - se silikagelem a eluován směsí CHCI5 a metanolu s počátečním poměrem 99 :1 a konečným poměrem 90:10. Po odstranění frakcí obsahujících pravotočivé izomery, byla získána frakce -obohacená 5‘-debenzyl-5‘-p-c hlor obenzylergokristine m. Následnými krystalizacemi z benzenu, metanolu, acetonu bylo odděleno- 100 mg hledaného produktu. V MS analýze vykazoval produkt charakteristické fragmenty a m/e: 376 a 378 ; 278 a 280; 267, 153, 70. Kyselá hydrolýza peptidového podílu vedla k výtěžku aminokyselin prolinu a p-chlorofenylalaninu v poměru 1: 1. Výtěžkem alkalické hydrolýzy byla kyselina lysergová a - kyselina 3,3-dimetylpyrohroznová. . --šOS
T. t. 150 až 155 ' (rozklad] [a]D2° = —175° (chloroform)
212700
Příklad 2
Mutantní kmen získaný působením ultrafialového světla jako v příkladě 1, byl použit к inokulaci osmi baněk s médiem TG za stejných podmínek jako v příkladě 1. Na konci vegetativní fáze byl obsah baněk spojen a takto získaných 400 ml živné půdy s kulturou bylo použito к inokulaci desetilitrového fermentačního tanku, jenž obsahoval 6 litrů média T 25 s přídavkem 1% fenylalanínu. Fermentační tank byl opatřen rotačním míchadlem diskoturbinového typu se vzdušněním odpovídajícím 0,5 litrům/litr na minutu a s frekvencí 600 otáček/min. Inkubační teplota byla 23 °C. Za čtyři dny po počátku kvašení byla ke kultuře přidána 4% p-chlorofenylalaninu. Živná půda s kulturou byla sklizena 13. den kvašení.
Celkový obsah peptidových alkaloidů činil 600 mcg/ml, z čehož 65 % byl 5*-debenzyl-5*-p-chlorobenzylergokrístin. Postup extrakce byl týž jako v příkladu 1.
Příklad 3
Týž kmen jako v příkladu 1 byl pěstován v baňkách za stejných podmínek jako v příkladu 1 během vegetativní a produkční fáze pouze s tím rozdílem, že čtvrtý den fermentace byl přidán p-fluorofenylalanin. Čtrnáctý den kvašení bylo z extrahované živné půdy získáno celkem 750 mcg/ml peptidových alkaloidů, z čehož 80 % činil 5‘-debenzyl-5‘-p-fluorobenzylergokristin.
T. 1.160 až 165 °C (rozklad) [a]D 20 — —171° (chloroform)
Příklad 4
Kmen ATCC 15383, producent ergotaminu byl ozařován ultrafialovým světlem za stejných podmínek jako v příkladu 1. Následkem tohoto působení vznikly dvě na fenylalaninu závislé mutanty z celkového množství 2000 prešetřených kolonií.
Jeden z těchto kmenů byl použit jako inokulum к pěstování v baňkách za stejných podmínek jako v příkladu 1 po dobu vegetativní a produkční fáze. 4. den produkční fáze byla přidána 4 % p-chlorofenylalaninu. Celkový výtěžek peptidových alkaloidů z živné půdy 14. dne činil 900 mcg/ml, z čehož 80% byl 5‘-debenzyl-5‘-p-fluorohenzylergotamin.
T. t. 180 až 186 °C (rozklad) [a]D20 — —150° (chloroform)
Příklad 5
Kmen ATCC 20019, producent ergokryptí10 nu, byl ozařován ultrafialovým světlem jako v příkladu 1. Následkem tohoto působení vznikly tři na leucinu závislé mutanty z celkového množství 4000 přešetřených kolonií.
Jeden z těchto kmenů byl pěstován za stejných podmínek a ve stejném médiu jako v příkladu 1, pouze s tím rozdílem, že ve vegetativní fázi bylo přidáno 1 g/1 L-leucinu a v produkční fázi 2 g/1 L-leucinu. 4. den produkční fáze bylo přidáno 6 g L-norvalinu. 14. dne živné půdy obsahovaly celkem 1000 mcg/ml peptidových alkaloidů, z nichž 80 % byl 5‘-deizobutyl-5‘-n-propylergokryptin.
T. t. 190 až 195 °C J«Jd20 = _183 °c (chloroform)
Příklad 6
Na leucinu závislý kmen použitý v příkladu 5 byl pěstován v baňkách za stejných podmínek během vegetativní a produkční fáze. 4. dne produkční fáze bylo přidáno 3 g na litr 5,5,5-trifluoroleucinu. 14. den kvašení byly živné půdy spojeny a extrahovány obecným dříve popsaným způsobem. Výtěžek činil celkem 600 mcg/ml peptidových alkaloidů s 60 % inkorporací tri-f luoroleucinu.
Příklad 7
Kmen ATCC 15383, producent ergotaminu byl pěstován v submerzní kultuře v médiu TG, viz tabulka 1 po 4 dny. Kultura byla zfiltrována na Buchnerově nálevce za sterilních podmínek, promyta vodou, suspendována v malém množství vody a homogenizována v Potterově homogenizátoru. Homogenát byl suspendován ve vodě a ozářen UV světlem 520 uwatt/cm2 po 60 sekund.
Zpracovaná suspenze byla vyseta na pevném médiu TM s 1% fenylalaninem, 1% L-leucinem, 1% d-1 alaninem. Misky byly inkubovány při 28 °C po 12 dnů. Vyrostlé kolonie byly přeneseny otiskovou metodou na pevné médium na Petriho misky a byly inkubovány při 28 °C po 12 dnů.
Z prověřených 5000 kolonií byly dvě fenylalanln dependentní mutanty.
Jeden z těchto kmenů byl použit jako inokulum pro kvašení v baňce za podmínek popsaných v příkladu 1 při vegetativní a produkční fázi. 4. dne produkční fáze byl přidán 4% p-chlorofenylalanin. Půdy 14. dne obsahovaly 1100 mog/ml všech peptidových alkaloidů, z toho 55 % 5‘-debenzyl-5‘-p-chlorobenzylergotaminu.
T. t. 185 až 190 °C [a]D20 = —155° (chloroform)
Tabulka II
Média
| pep 3 | TM | TG | T 25 | |
| glukóza | — | — | 100 | — |
| sacharóza | g 300 | 100 | — | 300 |
| L-asparagin . HaO | — | 10 | — | —· ' |
| bezvodá kyselina citrónová | — | 10 | 15 | |
| KH2PO4 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 |
| MgSQÁ' . 7H2O | 0,5 | 0,3 | 0,3 | 0,5 |
| kvasničný extrakt | — | — | 0,1 | 0,1 |
| kci | — | — | — | 0,12 |
| FeSOí. 7H2O | 0,007 | 0,007 | 0,007 | 0,007 |
| ZnSO4.7H2O | 0,006 | 0,006 | 0,006 | 0,006 |
| pepton | 10 | — | — | — |
| agar | 20 | 18 | — | |
| ΝΉ4ΟΗ | — | — | do pH 5,2 | do pH 5,2 |
| NaOH | .— | do pH 5,2 | — | — |
| vodovodní voda | . — | — | do 1000 ml | do 1000 ml |
| destilovaná voda | do 1000 ml | do 1000 ml | — | — |
| sterilizace. . | 110 °C/20 min | 100 °C/20 min | 110 °C/30 min | 105 °C/25 min |
pRedmět vynalezu
Claims (2)
1. ' Způsob přípravy námelových alkaloidů vzorce' a jejich 9,10-dihydroderivátů, kde Ri je vybráno' ze skupiny zahrnující · metyl, etyl a izopropyl; Rz ' je vybráno ze skupiny zahrnující halogenem substituovanou lineární Cs—Cs alkyl-skuprnu a halogenem substituovanou izobutyl-skupinu, R3 je vybráno ze skupiny zahrnující C1—C4 alkyl a halogen, kvasným postupem, vyznačený tím, že kmeny Claviceps · purpurea ATCC 15383, ATCC 20103 nebo ATCC 20019, které byly předem působením mutagenní látkou zmutovány tak, že nebyly schopny růstu v nepřítomnosti nehydroxylovaných aminokyselin, se pěstují za aerobních podmínek, při teplotě 23 °C, v kapalném médiu o pH 5,2 asi po dva týdny v přítomnosti sacharózy jako zdroje uhlíku, citronanu amonného jako zdroje dusíku a síranu horečnatého· a primárního fosforečnanu draselného jako zdrojů síry a fosforu a v přítomnosti nehydroxylované aminokyseliny, přičemž vzniklé sloučeniny vzorce I, se extrahují, izolují a případně purifikují chromatografií na silikagelové koloně.
2. Způsob podle bodu 1, vyznačený tím, že použitými nehydroxylovanými aminokyselinami jsou leucin, halogenem substituovaný fenylalanin, fenylalanin nebo jeho izostery, thlenylalanin, alfa a beta pyrazolylalanin, furylalanin, pyridylalanin, lineární C2—C7 alfa aminokyselina nebo přírodní halogenem substituovaná aminokyselina.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| GB16096/77A GB1584464A (en) | 1977-04-19 | 1977-04-19 | Ergot alkaloids |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS212760B2 true CS212760B2 (en) | 1982-03-26 |
Family
ID=10071128
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS782524A CS212760B2 (en) | 1977-04-19 | 1978-04-19 | Method of preparing ergot alkaloids |
Country Status (16)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4230854A (cs) |
| JP (1) | JPS53132599A (cs) |
| AT (1) | AT369783B (cs) |
| BE (1) | BE865921A (cs) |
| CA (1) | CA1113410A (cs) |
| CH (1) | CH637658A5 (cs) |
| CS (1) | CS212760B2 (cs) |
| DE (1) | DE2816773A1 (cs) |
| DK (1) | DK145701C (cs) |
| FR (1) | FR2387989A1 (cs) |
| GB (1) | GB1584464A (cs) |
| HU (1) | HU175173B (cs) |
| IE (1) | IE46797B1 (cs) |
| NL (1) | NL7804174A (cs) |
| SE (1) | SE7804362L (cs) |
| SU (1) | SU735154A3 (cs) |
Families Citing this family (16)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CH646166A5 (it) * | 1980-09-30 | 1984-11-15 | Linnea Sa | Procedimento di sintesi parziale della vincamina e di alcaloidi indolici correlati. |
| FR2499589B1 (fr) * | 1981-02-06 | 1985-11-15 | Richter Gedeon Vegyeszet | Procede pour regler la quantite et les proportions des alcaloides qui se forment lors de la fermentation |
| US4390625A (en) | 1981-02-06 | 1983-06-28 | Richter Gedeon Vegyeszeti Gyar Rt | Method for controlling the amount and distribution of alkaloids formed in a fermentation process |
| CH649300A5 (de) * | 1981-08-07 | 1985-05-15 | Sandoz Ag | Ergopeptinderivate, ihre herstellung und verwendung. |
| HU190141B (en) * | 1983-08-10 | 1986-08-28 | Richter Gedeon Vegyeszeti Gyar Rt,Hu | New process for production of clavin-type rye-smut alcaloids |
| US5891885A (en) * | 1996-10-09 | 1999-04-06 | Algos Pharmaceutical Corporation | Method for treating migraine |
| IN2012DN04858A (cs) * | 2009-12-23 | 2015-09-25 | Map Pharmaceuticals Inc | |
| MX2013015373A (es) | 2011-06-23 | 2014-02-11 | Map Pharmaceuticals Inc | Nuevos analogos de fluoroergolina. |
| AU2012355982A1 (en) | 2011-12-19 | 2014-07-10 | Map Pharmaceuticals, Inc. | Novel iso-ergoline derivatives |
| US8946420B2 (en) | 2011-12-21 | 2015-02-03 | Map Pharmaceuticals, Inc. | Neuromodulatory compounds |
| US9012640B2 (en) | 2012-06-22 | 2015-04-21 | Map Pharmaceuticals, Inc. | Cabergoline derivatives |
| IL298871A (en) | 2020-06-12 | 2023-02-01 | Beckley Psytech Ltd | The composition consisting of the benzoate salt of 5-methoxy-N,N-dimethyltryptamine |
| EP4155306A1 (en) | 2021-01-15 | 2023-03-29 | Beckley Psytech Limited | Neuroactive ergoline analogue |
| GB202212116D0 (en) | 2022-08-19 | 2022-10-05 | Beckley Psytech Ltd | Pharmaceutically acceptable salts and Compositions thereof |
| US12264131B2 (en) | 2022-08-19 | 2025-04-01 | Beckley Psytech Limited | Pharmaceutically acceptable salts and compositions thereof |
| US12246005B2 (en) | 2023-06-13 | 2025-03-11 | Beckley Psytech Limited | 5-methoxy-n,n-dimethyltryptamine (5-MeO-DMT) formulations |
Family Cites Families (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CH508628A (de) * | 1968-06-25 | 1971-06-15 | Sandoz Ag | Verfahren zur Herstellung neuer heterocyclischer Verbindungen |
| CH534683A (de) * | 1970-05-26 | 1973-03-15 | Sandoz Ag | Verfahren zur Herstellung neuer Mutterkornpeptidalkaloide |
| DK140017B (da) * | 1973-07-09 | 1979-06-05 | Sandoz Ag | Fremgangsmåde til fremstilling af octahydro-oxazolo(3,2-a)pyrrolo(2,1-c)pyrazinderivater. |
| HU172649B (hu) * | 1975-04-24 | 1978-11-28 | Gyogyszerkutato Intezet | Sposob poluchenija novykh biologicheski aktivnykh lizergamidov |
| CH619468A5 (cs) * | 1976-01-12 | 1980-09-30 | Sandoz Ag | |
| US4124712A (en) * | 1976-09-06 | 1978-11-07 | Sandoz Ltd. | Ergot peptide alkaloid derivatives |
-
1977
- 1977-04-19 GB GB16096/77A patent/GB1584464A/en not_active Expired
-
1978
- 1978-03-21 US US05/888,750 patent/US4230854A/en not_active Expired - Lifetime
- 1978-03-21 CH CH307778A patent/CH637658A5/it not_active IP Right Cessation
- 1978-04-12 BE BE186745A patent/BE865921A/xx not_active IP Right Cessation
- 1978-04-12 FR FR7810745A patent/FR2387989A1/fr active Granted
- 1978-04-13 AT AT0260378A patent/AT369783B/de active
- 1978-04-17 DK DK165778A patent/DK145701C/da not_active IP Right Cessation
- 1978-04-17 JP JP4578678A patent/JPS53132599A/ja active Pending
- 1978-04-18 DE DE19782816773 patent/DE2816773A1/de not_active Withdrawn
- 1978-04-18 SU SU782606999A patent/SU735154A3/ru active
- 1978-04-18 IE IE759/78A patent/IE46797B1/en unknown
- 1978-04-18 SE SE7804362A patent/SE7804362L/xx unknown
- 1978-04-18 CA CA301,413A patent/CA1113410A/en not_active Expired
- 1978-04-18 HU HU78SO1215A patent/HU175173B/hu unknown
- 1978-04-19 NL NL7804174A patent/NL7804174A/xx not_active Application Discontinuation
- 1978-04-19 CS CS782524A patent/CS212760B2/cs unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| IE46797B1 (en) | 1983-09-21 |
| NL7804174A (nl) | 1978-10-23 |
| SE7804362L (sv) | 1978-10-20 |
| AT369783B (de) | 1983-01-25 |
| FR2387989B1 (cs) | 1980-07-04 |
| GB1584464A (en) | 1981-02-11 |
| CH637658A5 (it) | 1983-08-15 |
| DE2816773A1 (de) | 1978-10-26 |
| ATA260378A (de) | 1982-06-15 |
| US4230854A (en) | 1980-10-28 |
| DK145701C (da) | 1983-07-18 |
| FR2387989A1 (fr) | 1978-11-17 |
| JPS53132599A (en) | 1978-11-18 |
| DK165778A (da) | 1978-10-20 |
| CA1113410A (en) | 1981-12-01 |
| HU175173B (hu) | 1980-05-28 |
| IE780759L (en) | 1978-10-19 |
| SU735154A3 (ru) | 1980-05-15 |
| BE865921A (fr) | 1978-07-31 |
| DK145701B (da) | 1983-01-31 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CS212760B2 (en) | Method of preparing ergot alkaloids | |
| US4576961A (en) | Antibiotic heterocyclic oxygen compounds and use | |
| US4220641A (en) | Organic compounds | |
| US20020039768A1 (en) | Percyquinnin, a process for its production and its use as a pharmaceutical | |
| EP0236872A2 (de) | Hydroxylaminderivate, deren Herstellung und Verwendung für Heilmittel | |
| US4804660A (en) | Ergot cyclic peptide alkaloids having a venotonizing effect, useful for treating orthostatic hypotension | |
| EP0703917A1 (en) | Indolocarbazole compound useful as proteinkinase c inhibitor | |
| Kobel et al. | Ergot alkaloids | |
| US4487761A (en) | Dopamine β-hydroxylase inhibitors | |
| US7241601B2 (en) | Process for the preparation of Fexofenadine | |
| US5756536A (en) | Microbial transformation of taxol and cephalomannine | |
| CA1230567A (en) | Cl-1957a antibiotic compound and its production | |
| KR970009151B1 (ko) | Ws-9326a, ws-9326b 화합물 및 그들의 유도체 | |
| US4803217A (en) | Hapalindolinone compounds as vassopressin antagonists | |
| EP0139457A2 (en) | An antibiotic compound and its production | |
| US4091093A (en) | Protease inhibitors | |
| JP2003503412A (ja) | 海洋放線菌に由来する新規のインドロカルバゾールアルカロイド | |
| IE873046L (en) | Production of optically active bicyclo (3.3.0) octanol¹derivatives | |
| JP2002518057A (ja) | ムンバイスタチン、その製造法およびその医薬としての使用 | |
| US4463182A (en) | Antibiotic roridin E-2 | |
| SU1403991A3 (ru) | Способ получени ингибитора фермента превращени ангиотензина и штамм стрептомицета SтRертомYсеS снRомоFUSсUS NRRL 15098,используемый дл его осуществлени | |
| BG99769A (en) | Strain claviceps purpurea 822-n producer of -ergocryptine and method for the preparation of -ergocryptine | |
| Boente | Biosynthetic Studies in Heterocyclic Fungal Metabolites | |
| FR2499589A1 (fr) | Procede pour regler la quantite et les proportions des alcaloides qui se forment lors de la fermentation | |
| JP2000103798A (ja) | 細胞接着阻害剤 |