CS211239B1 - Způsob přípravy koncentrovaných puntíkovaných roztoků sérových imunoglobulinů skupiny G, A, M - Google Patents
Způsob přípravy koncentrovaných puntíkovaných roztoků sérových imunoglobulinů skupiny G, A, M Download PDFInfo
- Publication number
- CS211239B1 CS211239B1 CS469980A CS469980A CS211239B1 CS 211239 B1 CS211239 B1 CS 211239B1 CS 469980 A CS469980 A CS 469980A CS 469980 A CS469980 A CS 469980A CS 211239 B1 CS211239 B1 CS 211239B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- group
- solution
- immunoglobulin
- immunoglobulins
- concentration
- Prior art date
Links
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 title claims abstract description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title abstract description 5
- 238000000034 method Methods 0.000 title description 8
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 claims abstract description 51
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 claims abstract description 51
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 claims abstract description 25
- 238000010257 thawing Methods 0.000 claims abstract description 11
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 10
- 238000007710 freezing Methods 0.000 claims abstract description 9
- 230000008014 freezing Effects 0.000 claims abstract description 9
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims abstract description 7
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 7
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 6
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims abstract description 6
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 claims abstract description 3
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 claims abstract description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims abstract description 3
- 238000011146 sterile filtration Methods 0.000 claims abstract description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 2
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 claims description 2
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 claims 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 claims 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 abstract description 3
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 abstract description 3
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 abstract description 2
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 abstract description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 20
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 5
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 4
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 3
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 3
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 239000012460 protein solution Substances 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- IYLLULUTZPKQBW-UHFFFAOYSA-N Acrinol Chemical compound CC(O)C(O)=O.C1=C(N)C=CC2=C(N)C3=CC(OCC)=CC=C3N=C21 IYLLULUTZPKQBW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- WYTGDNHDOZPMIW-RCBQFDQVSA-N alstonine Natural products C1=CC2=C3C=CC=CC3=NC2=C2N1C[C@H]1[C@H](C)OC=C(C(=O)OC)[C@H]1C2 WYTGDNHDOZPMIW-RCBQFDQVSA-N 0.000 description 1
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000001166 ammonium sulphate Substances 0.000 description 1
- 239000002826 coolant Substances 0.000 description 1
- 238000007599 discharging Methods 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 238000000859 sublimation Methods 0.000 description 1
- 230000008022 sublimation Effects 0.000 description 1
- 238000005292 vacuum distillation Methods 0.000 description 1
Landscapes
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
Přípravě koncentrovaných petrifikovaných
roztoků sérových imunoglobulinů
skupiny G, A, M se týká diagnostické a terapeutické
imunologie a je založena na tom,
že při stacionárním zmrazení při -5
až -50 ¾ po dobu 2 až 24 hodin a stacionárním
rozmražení při +5 ΐ až + 20 T po
dobu 2 až 48 hodin vzniká v roztoku
imunoglobulinů skupiny G, A, M koncentrační
gradient v důsledku čeho ve spodní části
nádoby se bude nacházet zakoncentrovaný
roztok, který se vypouětí a dále zpracovává
sterilní filtrací. Proces zmrazení a rozmražení
lze podle potřeby opakovat.
Purifikované imunoglobuliny skupiny
G, A, M se rozpouští v apyrogenní vodě
na koncentraci bílkovin 8 ± 2 % při
hodnotě pH 4,0 až 8,0. Po odstranění
nízkomolekúlámích sloučenin z imunoglobulinového
roztoku skupiny G, A, M pomocí
průtokové dialysy anebo gelové filtrace
proti 0,1 až 1,0 procentnímu roztoku
chloridu sodného y destilované apyrogenní
vodě o teplotě 0 % až +6 X se provádí
jeho sterilizace filtrací a naplnění
kolony je možné do 75 % objemu.
Description
Vynález se týká způsobu přípravy koncentrovaných purifikovaných roztoků sérových imunoglobulinů skupiny G, A, M.
Imunoglobulinové preparáty skupiny G, A, U začínají být v současnosti Široce používány zejména v klinické terapeutické praxi. Současná technologická praxe přípravy imunoglobulinových preparátů skupiny G, A, M buá laboratorních anebo určených pro terapeutické účely se v převážné míře zakončentrovává lyofilizací.
Metoda lyofilizace klade velké néroky a náročné požadavky na výrobní zařízení, je značně drahá a vyžaduje nepřetržitou servisní pozornost. Navíc je potřeba konstatovat, že v přirozených podmínkách ekosféry naSí planety se za fyziologických ba ani za patologických podmínek nevyskytují tak nízké hodnoty vakua ve spojení s teplotami, které se běžně užívají při lyofilizaci.
Technologický postup může taktéž část některých nízkomolekulárních sloučenin s biochemicko-fyziologickou aktivitou v roztoku imunoglobulinů skupiny G, A, li koncentračně obohacovat vzhledem k jejich koncentraci ve výchozí surovině, z které byly imunoglobuliny izolovány a jednak se zpravidla do imunoglobulinového roztoku zanáší nízkomolekulární anorganické nebo organické sloučeniny použité jako precipitans.
Odstraňování vody v průběhu lyofilizace má za následek zvySování koncentrace imunoglobulinů skupiny G, A, M a všech v roztoku přítomných nízkomolekulárních látek a poměrně zvýSená teplota na konci mrazové sublimace je zdrojem aktivační energie dostačující na vytvoření nežádoucích interakcí těchto látek s molekulami imunoglobulinů skupiny G, A, M.
Koncentrace bílkovinných roztoků pomocí lyofilizace se sice oelosvětově hojně používá, ale hledají se i jiné metody zakoncentrování bílkovinných roztoků založené jendak na vakuovém oddestilovávéní vody a prchavých součástí (Smith K. J., Watt J. C., Watson C. N., Mastenbroek G. G. A.: Vox Sang. 22, 120, 1972) a jednak na oddělování vody a nízkomolekulárních látek pomocí membránových systémů (Friendli Η., Fournier Ε., Volk T., Kistler P.:
Vox Sang. 33, 93, 1977).
Podstata způsobu výroby koncentrovaných purifikovaných roztoků sérových imunoglobulinů skupiny G, A, M spočívá v tom, že bílkovinný materiál obsahující purifikované imunoglobuliny skupiny G, A, M se rozpouští v takovém množství destilované apyrogenní vody o teplotě 0 °C až +6 ?C, aby se hodnota koncentrace bílkovin nacházela v rozmezí 2 % až 5 % a hodnota pH mezi 4,0 až 8,0, odstranění nízkomolekulárních sloučenin se z imunoglobulinového roztoku skupiny G, A, M provede zejména pomocí průtokové dialyzy anebo gelové filtrace proti 0,1 až 1,0 procentnímu roztoku chloridu sodného v destilované apyrogenní vodě o teplotě 0 °C až +6 °C, imunoglobulinový roztok skupiny G, A, M se sterilizuje zejména filtrací vyznačující se tím, že sterilizovaný roztok imunoglobulinů skupiny G, A, M se vnese do vysterilizované mrazově koncentrační zpravidla kovové kolony, kterou zaplní až do 75 % objemu ve které se imunoglobulinový roztok skupiny G, A, íi stacionárně zmrazí například na -5 °C až -50 °C po dobu 2 až 24 hodin a opět stacionárně rozmrazí například při +5 °C až +20 °C po dobu 2 až 48 hodin a potom sé z kolony odebere zahuštěný roztok imunoglobulinů skupiny G, A, M o stanovené koncentraci, anebo se proces zmrazovéní a rozmrazování opakuje, potom se imunoglobulinový roztok skupiny G, A, M dále zpracovává například sterilní filtrací.
Vynález je dále objasněn na příkladech provedení jimiž jeho rozsah není ani omezen ani vyčerpán.
Příklady provedení
Příklad 8. 1
Výchozí surovinou je bílkovinná pasta precipitátu imunoglobulinů skupiny G, A, M získaná způsobem podle Pejaudiera a spol. (Pejaudier L., Audran R., Steinbuch M.:
Vox Sang. 23, 165, 1972).
Bílkovinný materiál se rozpouští v takovém množství apyrogennl destilované vody 0 teplotě 0 °C až +6 °C, aby hodnota koncentrace bílkovin se nacházela v rozmezí 2 až 5 %. Rozpouštění se urychluje mícháním. Po rozpuětění se imunoglobulinový roztok skupiny G, A, li vyčeří například filtrací.
V technologických poměrech jsou výše uvedené podmínky zpravidla zachovány tehdy když rozpouštíme 1 kg imunoglobulinové pasty ve 2 000 ml destilované apyrogenní vodě o teplotě 0 °C až + 6 °C. Hodnota pH takto vzniklého imunoglobulinového roztoku skupiny G, A, M bývá zpravidla mezi pH 4,0 až S,0 a koncentrace bílkvin bývá mezi 2 až 5 %. Takto připravený roztok purifikovanýoh imunoglobulinů skupiny G, A, li se vyěeří například filtrací a nízkomolekulární sloučeniny se z imunoglobulinového roztoku skupiny G, A, li odstraní například gelovou filtrací anebo dialýzou proti 0,1 až 1,0 procentnímu roztoku chloridu sodného v destilované apyrogenní vodě o teplotě 0 °C až +6 °C.
Imunoglobulinový roztok skupiny G, A, li se po odstranění nízkomolekulárních látek podrobí sterilizaci například filtrací a umístní se do vysterilizované koncentrační aparatúry.
Za optimální rozměry technologických mrazově koncentračních kolon se považují takové, kde průměr kruhové anebo úhlopříčka čtvercové nebo obdélníkové základní plochy kolony ku výšce kolony se pohybují v poměru 1 : 2 až 1 : 10.
Množství imunoglobulinového roztoku skupiny G, A, M vsazeného do kolony nemá překročit 75 % objemu mrazově koncentrační kolony. Přístup chladu má být orientován hlavně vertikálním směrem ze spodu k vrchu a až potom směrem horizontálním od vnějšku ku vnitřku. Vrchní část kolony má zamrzat poslední a umožnit kapalině vytlačované v důsledku zvětšováni objemu, aby mohla vystoupit nezamrzlým středem.
Zmrazování se provádí například při -50 °C až -5 °C po dobu 2 až 24 hodin a rozmrazování při +5 °C až +20 °C po dobu 2 až 48 hodin. Mamrazování a rozmrazování má být pomalé a plynulé přičemž kapalina zejména po rozmražení se nesmí pohybovat nebo mechanicky míchat. Dobu potřebnou na zmrazení a rozmražení je nutno pro každý konkrétní typ aparatúry stanovit empiricky.
Pokud se nejedná o velmi objemné kolony lze zmrazení realizovat vložením kolony do mrazícího pultu a rozmrazování realizovat vyjmutím z mrazícího pultu a umístěním kolony do pokojové teploty. Velkoobjemov.é mrazově koncentrační kolony musí mít chladicí jakož i ohřívací potrubí stočeno hadovitě okolo kolony odspodu směrem k vrchu kolony.
Roztok imunoglobulinů skupiny G, A, M se po stacionárním rozmražení vypouští z kolony po malých objemech například po 100 ml až 500 ml a vyhodnocuje se obsah bílkovin, například spektrofotometricky nebo refraktometricky a oddělí se ty konkrétní frakce kde koncentrace poklesla pod hranici našeho zájmu například pod 10 g imunoglobulinů skupiny G, A, M na litr.
Zakoncentrovaný roztok imunoglobulinů skupiny G, A, M se podrobí dalšímu zpracování jako například sterilní filtraci. V případě potřeby lze proces zakoncentrování opakovat.
Příklad δ. 2
Výchozí surovinou může být bílkovinná pasta imunoglobulinů skupiny G, A, Ií izolovaná pomocí jiných precipitačnich sloučenin. Na preeipitaci balastních bílkovin ze směsi imunoglobulinů skupiny G, A, M může být použit síran amonný a rivanol (Schwick H. G., Fischer J., Geiger H.: Progr. Immunobiol. Standard 4, 86, 1970; Schwick H. G.: Vox 3ang 23, 82, 1972), kyselina boritá (Pejaudier L., Audran R., Steinbuch M.: Vox Sang. 23, 165, 1972) a kyselina kaprylová (Blatrix C., Israel J., Reinert Ph., Griscelli C., Steinbuch M.:
La nouvelle Presse Medicale 5, 1 193, 1976).
Bílkovinný materiál se rozpouští v takovém množství apyrogenní vody zpravidla destilované o těplotě 0 °C až +6 °C, aby hodnota koncentrace bílkovin se nacházela v rozmezí až 5 %. Rozpouštění se urychluje mícháním. Po rozpuštění se imunoglobulinový roztok skupiny G, A, M vyčeří například filtrací, Roztok imunoglobulinů skupiny G, A, Ií se zpracovává v dalším postupu jako v příkladě č. 1.
V případě, že by spodní výtokový otvor na vypouštění zakoncentrovaného roztoku imunoglobulinů skupiny G, A, H nemohl být otevřen lze zakoncentrovaný roztok imunoglobulinů skupiny G, A, M odsávat vrchem kolony. Odsávání se provádí pomocí tenké skleněné trubice, která se opatně ponoří až na dno nádoby, na kterou je napojená například gumová hadice s možností připojení na vakuum.
Účinnést zakoncentrování lze demonstrovat na tomto případě. Při zákoneentrování 3 litrů roztoku imunoglobulinů skupiny G, A, M o výchozí koncentraci 10 g na litr byl po prvním zmrazení a rozmražení získaný roztok, který po vypuštění po jednotlivých frakcích a 50 ml vykazoval tento koncentrační gradient.
Ve | frakci | δ. 1 | bylo | stanoveno | 36 | e | imunoglobulinů | G, | A, M | na | litr |
Ve | frakci | č. 5 | bylo | stanoveno | 27 | g | imunoglobulinů | G, | A, M | na | litr |
Ve | frakci | č. 10 | bylo | stanoveno | 20 | g | imunoglobulinů | G, | A, M | na | litr |
Ve | frakci | č. 15 | bylo | stanoveno | 15 | g | imunoglobulinů | G, | A, ω | na | litr |
Ve | frakci | č. 20 | bylo | stanoveno | 11 | e | imunoglobulinů | G, | A, M | na | litr |
Koncentrace ve frakcích 21 až 60 byla pod 10 g imunoglobulinů skupiny G, A, M na litr t.j. pod hranici našeho zájmu.
Při zakoncentrování 3 litrů roztoku imunoglobulinů skupiny G, A, li o výchozí koncentraci 10 g na litr byl po dvojnásobném zmrazení a rozmražení získán roztok, který po vypuštění po jednotlivých frakcích a 50 ml vykazoval tento koncentrační gradient.
Ve | frakci | č. 1 |
Ve | frakci | č. 5 |
Ve | frakci | č. 10 |
Ve | frakci | č. 15 |
Ve | frakci | č. 20 |
bylo stanoveno 58 bylo stanoveno 35 bylo stanoveno 20 bylo stanoveno 13 bylo stanoveno 8 g imunoglobulinů g imunoglobulinů g imunoglobulinů g imunoglobulinů g imunoglobulinů
G, | A, | M | na | litr |
G, | A, | M | na | litr |
G, | A, | M | na | litr |
G, | A, | M | na | litr |
G, | A, | M | na | litr |
Koncentrace ve frakcích 21 až 60 byla pod 8 g imunoglobulinů skupiny G, A, M na litr t.j. mnohem níže než je hranice našeho zájmu.
Claims (1)
- PŘEDMĚT VYNÁLEZUZpůsob přípravy koncentrovaných roztoků sérových imunoglobulinů skupiny G, A, M spočívající v tom, že bílkovinný materiál obsahujíoí purifikované imunoglobulíny skupiny G, A, M se rozpouští v takovém množství destilované apyrogenní vody o teplotě 0 °C až +6 °C, aby se hodnota koncentrace bílkovin nacházela v rozmezí 2 až 5 f> a hodnota pH mezi 4,0 až 8,0, odstranění nízkomolekulárních sloučenin se z imunoglobulinového roztoku skupiny G, A, M provede zejména pomocí průtokové dialyzy anebo gelové filtrace proti 0,1 až 1,0 procentnímu roztoku chloridu sodného v destilované apyrogenní vodě o teplotě 0 °C až +6 °C, imunoglobulinový roztok skupiny G, A, M se sterilizuje zejména filtrací vyznačující se tím, že sterilizovaný roztok imunoglobulinů skupiny G, A, M se vnese do vysterilizované mrazově koncentrační zpravidla kovové kolony, kterou zaplní až do 75 % objemu ve které se imunoglobulinový roztok skupiny G, A, M stacionárně zmrazí například při -5 °C až -50 °C po dobu 2 až 24 hodin a opět stacionárně rozmrazí například při +5 °C až +20 °C po dobu 2 až 48 hodin a potom se z kolony odebere zahuštěný roztok imunoglobulinů skupiny G, A, M o stanovené koncentraci, anebo se proces zmrazování a rozmrazování opakuje, potom se imunoglobulinový roztok skupiny G, A, M dále zpracovává například sterilní filtrací
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CS469980A CS211239B1 (cs) | 1980-07-02 | 1980-07-02 | Způsob přípravy koncentrovaných puntíkovaných roztoků sérových imunoglobulinů skupiny G, A, M |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CS469980A CS211239B1 (cs) | 1980-07-02 | 1980-07-02 | Způsob přípravy koncentrovaných puntíkovaných roztoků sérových imunoglobulinů skupiny G, A, M |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CS211239B1 true CS211239B1 (cs) | 1982-02-26 |
Family
ID=5390344
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CS469980A CS211239B1 (cs) | 1980-07-02 | 1980-07-02 | Způsob přípravy koncentrovaných puntíkovaných roztoků sérových imunoglobulinů skupiny G, A, M |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CS (1) | CS211239B1 (cs) |
-
1980
- 1980-07-02 CS CS469980A patent/CS211239B1/cs unknown
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
AU632893B2 (en) | A method of preparing a fibrinogen concentrate from blood plasma, a device for carrying out said method, and a method of preparing fibrinogen from said concentrate | |
US4141887A (en) | Process and apparatus for the production of sterile filtered blood clotting factors | |
US4789545A (en) | Removal of lipid soluble process chemicals from biological materials by extraction with naturally occurring oils or synthetic substitutes thereof | |
US4104266A (en) | Method for preparation of antihemophilic factor | |
US3560611A (en) | Process for the manufacture of preparations rich in interferon | |
EP0440633B1 (en) | Pharmaceutical for treating tumors in humans and method for making it | |
CN108976297A (zh) | 一种冷沉淀的制备方法及其在人凝血因子ⅷ生产中的应用 | |
CS211239B1 (cs) | Způsob přípravy koncentrovaných puntíkovaných roztoků sérových imunoglobulinů skupiny G, A, M | |
JP2000514783A (ja) | 物質の貯蔵 | |
DE3330770A1 (de) | Verfahren zur pasteurisierung von humanplasma | |
RU2005478C1 (ru) | Способ получения концентрата сапропеля | |
US4128637A (en) | Process for producing thymosin | |
CS211241B1 (cs) | Způsob přípravy koncentrovaných roztoků sérových gama globulinů | |
US4278592A (en) | Process and apparatus for the production of sterile filtered blood clotting factors | |
CS211240B1 (cs) | Způsob přípravy koncentrovaných purifikovaných roztoků sérových albuminů | |
Strumia et al. | The development of plasma preparations for transfusions | |
DE19729778A1 (de) | Verfahren zur Herstellung von virusinaktivierten biologischen Flüssigkeiten | |
CN116179638A (zh) | 一种鱼精蛋白多肽的制备方法及产品 | |
CN113201522B (zh) | 一种蛋白酶的精制和干燥方法 | |
SU934589A1 (ru) | Способ получени полипептидов | |
DE3851696T2 (de) | Faktor VIII- Gelfiltration. | |
WO2008054247A1 (fr) | Procédé de production d'un immunomodulateur apyrogénique | |
SU1730109A1 (ru) | Способ получени концентрата каротиноидов из моркови | |
CN1020734C (zh) | 提取超氧化物歧化酶复合物的方法 | |
CN109485750A (zh) | 一种肝素钠低温真空干燥技术 |