CS209379B1 - Vakcínaprotiinfekčněj burzitíde z atenuovaného kineňa a spósobjej přípravy - Google Patents
Vakcínaprotiinfekčněj burzitíde z atenuovaného kineňa a spósobjej přípravy Download PDFInfo
- Publication number
- CS209379B1 CS209379B1 CS49680A CS49680A CS209379B1 CS 209379 B1 CS209379 B1 CS 209379B1 CS 49680 A CS49680 A CS 49680A CS 49680 A CS49680 A CS 49680A CS 209379 B1 CS209379 B1 CS 209379B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- virus
- cultures
- vaccine
- cell
- inoculated
- Prior art date
Links
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 title claims description 29
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 title claims description 24
- 230000002238 attenuated effect Effects 0.000 title claims description 10
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 7
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims description 7
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 title description 3
- 241000700605 Viruses Species 0.000 claims description 63
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 claims description 29
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 claims description 25
- 235000013330 chicken meat Nutrition 0.000 claims description 24
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 claims description 21
- 206010006811 Bursitis Diseases 0.000 claims description 16
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims description 15
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 14
- 210000002308 embryonic cell Anatomy 0.000 claims description 14
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 9
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims description 8
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims description 8
- 230000000120 cytopathologic effect Effects 0.000 claims description 7
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 claims description 7
- 230000007850 degeneration Effects 0.000 claims description 6
- 235000014676 Phragmites communis Nutrition 0.000 claims description 5
- 235000013601 eggs Nutrition 0.000 claims description 5
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 5
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 5
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 5
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims description 4
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 claims description 4
- 238000003556 assay Methods 0.000 claims description 4
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims description 4
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 claims description 4
- 238000010790 dilution Methods 0.000 claims description 4
- 239000012895 dilution Substances 0.000 claims description 4
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims description 4
- 230000036512 infertility Effects 0.000 claims description 4
- 239000002609 medium Substances 0.000 claims description 4
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 claims description 4
- 208000027312 Bursal disease Diseases 0.000 claims description 3
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 claims description 3
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 claims description 2
- 102000004407 Lactalbumin Human genes 0.000 claims description 2
- 108090000942 Lactalbumin Proteins 0.000 claims description 2
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 claims description 2
- 238000002941 microtiter virus yield reduction assay Methods 0.000 claims description 2
- 230000000644 propagated effect Effects 0.000 claims description 2
- 238000004448 titration Methods 0.000 claims description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 claims 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 claims 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 claims 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 claims 1
- 210000001161 mammalian embryo Anatomy 0.000 claims 1
- 230000000391 smoking effect Effects 0.000 description 10
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 5
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 5
- 230000008774 maternal effect Effects 0.000 description 5
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 description 3
- 210000002257 embryonic structure Anatomy 0.000 description 3
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 3
- 244000144977 poultry Species 0.000 description 3
- 235000013594 poultry meat Nutrition 0.000 description 3
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 description 3
- 241000271566 Aves Species 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 2
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 2
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 2
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 2
- 230000001850 reproductive effect Effects 0.000 description 2
- 230000000405 serological effect Effects 0.000 description 2
- 230000001018 virulence Effects 0.000 description 2
- 208000010370 Adenoviridae Infections Diseases 0.000 description 1
- 206010060931 Adenovirus infection Diseases 0.000 description 1
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 1
- 241000711404 Avian avulavirus 1 Species 0.000 description 1
- 241001260012 Bursa Species 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- 208000032843 Hemorrhage Diseases 0.000 description 1
- 241000711450 Infectious bronchitis virus Species 0.000 description 1
- 206010061217 Infestation Diseases 0.000 description 1
- 206010062049 Lymphocytic infiltration Diseases 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 208000010359 Newcastle Disease Diseases 0.000 description 1
- 208000035415 Reinfection Diseases 0.000 description 1
- 241000607142 Salmonella Species 0.000 description 1
- 230000024932 T cell mediated immunity Effects 0.000 description 1
- 208000011589 adenoviridae infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 1
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 1
- 206010006451 bronchitis Diseases 0.000 description 1
- 239000013043 chemical agent Substances 0.000 description 1
- 231100000676 disease causative agent Toxicity 0.000 description 1
- 210000004602 germ cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000012447 hatching Effects 0.000 description 1
- 210000003494 hepatocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000036732 histological change Effects 0.000 description 1
- 206010020718 hyperplasia Diseases 0.000 description 1
- 210000003297 immature b lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000008076 immune mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 1
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 1
- 229940027941 immunoglobulin g Drugs 0.000 description 1
- 210000003000 inclusion body Anatomy 0.000 description 1
- 238000009434 installation Methods 0.000 description 1
- 230000002427 irreversible effect Effects 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 210000003292 kidney cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 230000001926 lymphatic effect Effects 0.000 description 1
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 230000017074 necrotic cell death Effects 0.000 description 1
- 230000001338 necrotic effect Effects 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 230000007918 pathogenicity Effects 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 210000001995 reticulocyte Anatomy 0.000 description 1
- 229920002477 rna polymer Polymers 0.000 description 1
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 210000001541 thymus gland Anatomy 0.000 description 1
- 230000003313 weakening effect Effects 0.000 description 1
- 230000004584 weight gain Effects 0.000 description 1
- 235000019786 weight gain Nutrition 0.000 description 1
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Description
ČESKOSLOVENSKÁ SOCIALISTICKÁ REPUBLIKA ( 19 ) POPIS VYNALEZU K AUTORSKÉMU OSVEDČENIU 209379 (11) (Bl) (22) Přihlášené 24 01 80(21) (PV 496-80) (51) Int. Cl.3 A 61 K 39/12 ÚŘAD PRO VYNÁLEZY A OBJEVY (40) Zverejnené 27 02 81 (45) Vydané 01 07 83 (75)
Autor vynálezu ČASNOCHA EUGEN MVDr. CSc., ZVOLEN a ČERNÍK KAREL MVDr.
CSc., NITRA (5 4) Vakcína proti infekčněj burzitíde z atenuovaného kineňa a spósob jej přípravy
Vynález sa týká vakcíny proti inf ekčne j burzitídekurčiat (chorobě Gumboro) a spósobu jej přípravyz kmeňa virusu, izolovaného na Slovensku a atenu-ovaného sériovými pasážami, v buňkových kultú-rach.
Infekčná burzitis (choroba Gumboro) je viruso-vé ochorenie kurčiat, popísané prvý raz v roku1957, ktoré prebieha velmi často subklinicky, alevyvolává pokles prírastkov hmotnosti a spomalenierastu, čo aj pri nízkej mortalitě je příčinou hospo-dářsky významných strát. Póvodcom infekčnej burzitídy je virus, ktorý jemimoriadne rezistentný vo vonkajšom prostředíproti pósobeniu fyzikálnych a chemických pro-striedkov. Přetrvává v kontaminovaných priesto-roch a to je příčinou rekurentnej infekcie nasledu-júcich zástavov hydiny. Virusová partikula, ktorejchýba obal, má priemer 60 nm. Obsahuje jedno-vláknitú ribonukleínovú kyselinu, zloženú z dvochsegmentov. Molekulová hmotnost’ genomu virusuje 1,75 až 1,8 x 106.
Infekcia vnímavých kurčiat do veku 14 týždňovvyvolává degeneráciu a nekrózu nezrelých lymfo-cytov B vo Fabríciovej burze, čo má za následokselektívne zníženie produkcie imunoglobulínuG a tým irreverzibilné oslabenie imunitných me-chanizmov. Nekrotické změny v týmuse a slezinemájů nepriaznivý vplyv aj na vývoj bunkovej imunitnej odpovede. Zvýšená vnímavost’ sa preja-vuje osobitne voči vírusom pseudomoru hydiny,infekčnej bronchitídy, E. coli, salmonelám, vočivirusu Markovej choroby a voči infekčnej bronchi-tíde a adenovírusovej infekcii počas obdobiaznášky.
Virus je možno izolovat iba niekoTko dní poinfekcii v kuřácích zárodkoch bez specifikovanýchpatogénnych zárodkov (SPF) a pasážovať ho v kur-čatách SPF alebo v buňkových kultúrach, připrave-ných z vajec SPF. V roku 1978 bolo v západnej Európe zamoře-ných 60 až 100 % reprodukčných chovov hydiny.V ČSSR sa podfa předběžných výsledkov sérolo-gických prieskumov a izolácie virusu zistil vysokýstupeň zamorenosti chovov masových i nosivýchplemien vírusom infekčnej burzitídy.
Profylaxia nákazy vychádza z týchto prin-cípov: — virus je velmi rozšířený v populácii, je mimo-riadne rezistentný a dlhodobe přežívá v pro-středí; — nákaza sa prenáša horizontálně a infikovat’ samóžu aj čerstvo vyliahnutě kurčatá; — kurčatá móžu disponovat’ materskými proti-látkami, ktoré poskytujú dočasnú ochranu, alesúčasne brzdia vývoj aktivněj imunity.
Nešpecifická profylaxia je založená na obecných 209379 209379 zásadách zoohygieny: súčasné osadzovanie a vy-prázdňovanie hál, obmetizenie presunov materiálua prechádzania osob a účinná dezinfekcia formalí-novými parami. Špecifická profylaxia je založená na pasívnejochraně kurčiat materskými protilátkami, ktorátrvá 2 až 3 týždne a na aktívnej imunizácii kurčiata reprodukčných nosnic. K očkovaniu sapoužívajúživé vakcíny z virusu o rozličnom stupni virulencie,pomnoženom v násadových vakciach z chovov bezspecifikovaných patogénnych zárodkov (SPF).(Becht, H„ Rapp. OIE, 1977, č. 201, s. 9;BENNEJEAN, G., Rapp. OIE, 1977, č. 216, s. 8;Cessi, D. — Gualandi, G. L., Rapp. OIE, 1977, č.211, s. 10; Cullen, G. A. — Wyeth, P. J., Vet. Rec.,99, 1976, č. 21, s. 418; Thomton, D. H., Rapp.OIE, 1977, č. 200, s. 16; Yadin, H. - Hoekstra, J.,Rapp. OIE, 1977, č. 212, s. 7; Zanella, A. — a i.,Avian Pathol., 6, 1977, č. 1, s. 8). .
Pokusné bola připravená a preskúšaná aj vakcí-na z virusu adaptovaného na kultúry buniek;embryonálnej burzy, embryonálnych obličiek a fiJbroblastov a pomnoženého v kultúrach kuřácíchfibroblastov z vajec SPF (Skeeles, J. K. — a i.,Avian Dis., 23, 1979, č. 2, s. 456).
Virusový kmeň infekčnej burzitídy Z-2037 bolizolovaný na buňkových kultúrach kuřácích em-bryonálnych fibroblastov v roku 1977 z lymf atické-ho ajbarátu infikovaných kurčiat linie Shaver v lo-kality Turčianské Teplice. Pomocou 5-jodo-2-de- ,zoxyuridínu bolo potvrdené, že izolát patří doskupjny ribovírusov. Virus nie je obalený, lebochloroformové skúšky na přítomnost’ esenciálnychlipidov sú negativné. Je termostabilný, odoláváteplo te 56 °C po dobu 30 minút bez zníženiainfekčného titra pre kuracie fibroblasty. Je cytopa-togěnny, replikuje sa a pomnožuje na kuřácíchembryonálnych buňkách (KEB) a kuřácích em-bryonálnych obličkových buňkách (KEOB) zatvorby drobno-guličkovitého cytopatického efek-tu, charakteristického pre virusy infekčnej burzití-dy. Izolovaný virusový kmeň bol porovnávanýs réferenčným kmeňom Stuttgart (prof. Woernle).V jadrách infikovaných buniek nevytvára inklúznetelieska. Křížové neutralizačně testy aprecipitačnétesty v agarovom geli s antisérami proti referenčné-mu kmeňu Stuttgart a proti izolátu Z-2037 súpozitivně, čo svědčí pre ich antigénnu zhodnosť.
Infekčný titer izolátu v tretej pasáži na KEB bolrelativné nízký: 103 TKID50 . ml-1. Kuracie em-bryá bez materských protilátok, infikované prvými2 až 3 pasážami virusu nevykazovali makroskopic-ké změny a ich mortalita nepřevýšila 20 %. Kurča-tá bez materských protilátok, infikované vírusominfekčnej burzitídy (v dávke 0,1 ml virusu adjusto-vaného na 1000 TKID50) cestou intrakonjunkti-válnou a perorálnou vo veku 5 dní, klinickyneochoreli. Morfologicky mali zvačšené Fabricioveburzy so specifickými histologickými změnami,svedčiacimi pre burzitídu s hyperplaziou retikulo-cytov v časti burzálnych folikulov. Rovnako v peče-ni infikovaných kurčiat bola pozorovatelná lymfo- cytárna infiltrácia perivaskulámych priestorova sporadické ložiská s vakuolámou degeneráciouhepatocytov resp. hemoragie.
Izolát překonal 10 slepých pasáží v štvordňovýchintervaloch na kuřácích zárodkoch bez materskýchprotilátok proti infekčnej burzitíde (línia ROSS)obvyklým virologickým spósobom. Přítomnost’ vi-rusu infekčnej burzitídy v pasážovaných suspen-ziách sa sledovala na buňkových kultúrach. Titervirusu v zmesných suspenziách orgánov kuřácíchzárodkov dosahoval 102 až 103 TKIDS0 . ml-1.
Dalej sa kmeň virusu Z-2037 sériovo pasážovalna primárných kúltúrach kuřácích embryonálnychbuniek, spósobom podlá virologických metod.Přítomnost’ virusu sa dokazovala vznikom cytopa-tických zmien. Obsah virusu sa stanovil ákumulač-ným výpočtom podlá Reeda a Muencha. Po 25 až27 pasážach na KEB dosahoval virus titer najme-nej 5 x 106 TKID50 . ml"1. i Postup atenuácie virulencie virusu infekčnejburzitídy sa kontroloval intrakonjunktiválnoua perorálnou aplikáciou virusu v dávke ca 5 x 104TKID50 páťdňových kurčatám bez protilátok protivirusu infekčnej burzitídy. Infikované zvieratá sasledovali klinicky, patohistologicky najma vyšetře-ním Fabríciovej burzy a pečene a pokusnou vakci-náciou takto inokulovaných kurčiat proti pseudo-moru hydiny 7 dní po aplikácii virusu infekčnejburzitídy. Pri serologickom vyšetření kurčiat naprotilátky proti pseudomoru nesmel byť významnýrozdiel medzi pokusnou a kontrolnou skupinou.Atenuovaný virus Z-2037 bol po 10 pasážachv kuřácích embryách a 27 pasážach v kultúrachkuřácích embryonálnych buniek preskúšaný napatogenitu pre rožne věkové kategorie hydiny bezprotilátok proti infekčnej burzitíde, menovite prekuracie embryá, jednodňové kurčatá, 5 a 10-dňovékurčatá, 28-dňové brojlery a 25 týždňové nosnice.Klinické či patomorfologické změny sa nezistiliv žiadnej pokusné j skupině, pre to sa považovalatenuovaný kmeň za neškodný pre všetky věkovéskupiny kurčiat. Pokusné skupiny za 7 až 14 dní poaplikácii virusu Z-2037 odpovedali tvorbou Speci-fických protilátok, ktorých Specifičnost’ sa ověřova-la referenčným vírusom infekčnej burzitídy, kme-ňom Stuttgart.
Virus Z-2037, atenuovaný a adaptovaný nakultúry kuřácích embryonálnych buniek popísa-ným spósobom, je uložený v Čs. sbírce mikroorga-nismů, Sbírka zoopatogenních mikroorganismů,Výzkumný ústav veterinárního lékařství, Brno,pod číslom CAPM V-260.
Podstata vynálezu spočívá v tom, že vakcínaproti infekčnej burzitíde sa připravuje z kmeňaZ-2037 (CAPM V-260), izolovaného na Sloven-sku a atenuovaného a adaptovaného sériovýmipasážami na kultúry kuřácích embryonálnych bu-niek. Vakcinačný virus sa množí a titruje naprimárných alebo sekundárných kultúrach kuřá-cích embryonálnych buniek, připravených z kon-venčných vajec. Atenuovaný a adaptovaný vakci-načný virus infekčnej burzitídy Z-2037 dosahuje
Claims (3)
- 3 títer 107 TKIDS0. ml 1 a je neškodný pre všetkyvěkové kategorie kurčiat. Příklad 1 Udržiavanie výrobného kmeňa Výrobný kmeň Z-2037 sa udržuje v lyofilizova-nom stave v ampulkách zatavených pod vákuom ipri +2 až +8 °C. Pasáž na buňkových kultúrach sarobí jeden raz do roka: Dve ampulky virusus obsahom po 0,3 ml lyofilizovaného materiálu saotvoria a ich obsah sa rozpustí v 4 ml kultivačnéhomédia (Hanksov'roztok s laktalbumínhydrolyzá-tom podlá PNL 01-63-74). Takto zriedenýmvírusom sa infikuj ú kultúry kuřácích embryonál-nych buniek v 2 až 4 Roux flašiach s objemom1200 ml. Naočkované Roux flaše sa inkubujú pri37 °C. Po zistení špecifickej degenerácie buniek, za24 až 96 hodin, sa kultúra zmrazí pri — 20 °C,rozmrazí, přefiltruje cez sterilnú gázu a titrujev skúmavkových kultúrach. Po kontrole bakteriál-nej sterility a po stanovení obsahu virusu jezásobný kmenový materiál připravený k lyofilizáciis prídavkom 40% protekčného média (95% inakti-vovaného koňského séra a 5% glukózy) alebo sauchovává v zmrazenom stave pri — 20 °C a používása k inokulácii buňkových kultúr pri výrobě vak-cíny. Příklad 2 Příprava vakcíny na primárných buňkových kultú-rach. , j Pri výrobě vakcíny sa zásobným kmeňovýmmateriálom inokulujú kultúry kuřácích embryo-nálnych buniek v Roux flašiach v množstve 1 mlvírusovej suspenzie na jednu Roux flašu s obje-mom 1200 ml a obsahu 100 ml kultivačného mé-dia. Naočkované Roux flaše sa inkubujú pri 37 °C.Po zistení špecifickej degenerácie buniek, za 24 až96 hodin, sa kultúry zmrazia pri -20 °C, rozrtira-zia, přefiltrujú cez sterilnú gázu a titrujú v skúfnav-kových buňkových kultúrach. Po kontrole bakteri-álně j sterility a po stanovení obsahu virusu .savirusová suspenzia naplní do liekoviek ako tekutávakcína, alebo sa s prídavkom 20% protekčnéholyofilného média (3 diely 20% roztoku Laktínaa 1 diel 40% glukózy) naplní do ampúl a lyofilizujesa. Tekutá vakcína sa uchovává v zmrazenomstave, lyofilizovaná pri +2 až +8 °C. 209379 Příklad 3 ' , f Příprava vakcíny na sekundárných buňkovýchkultúrach Dobré narastené kultúry kuřácích embryonál-nych buniek v Roux flašiach o objeme 1200 ml sauvolnia roztokom verzéntrypsínu predohriatehona 37 °C. Suspenzia uvolněných buniek saprenesie .do kultivačného média a zakladá sa do Roux fliašako primárná buňková kultúra. Sekundárné kultú-ry sa inokulujú a inkubujú ako primárné kultúrya virusová suspenzia sa spracováva rovnako ako jepopísané v příklade 2. , , Éríklad 4 Kontrola vakcíny titráciou Kultúry kuřácích embryonálnych buniek na tit-ráciu virusu sa zakladajú do skúmaviek rozmerov14/15 X 90 mm v množstve 1,0 ml kultivačnéhomédia. Kultúry buniek sa infikujú pó 0,1 ml. vakcinačného virusu, riedeného postupné desaťná-sobne od 10~3 do 10~8, každé riedenie najmenej do4 skúmaviek. Inokulované skúmavkové kultúry sa inkubujú 96 až 120 hodin pri 37 °C a titer virusu saodčítá mikroskopicky podlá cytopatického účinku. virusu na buňky. TKID50 virusu sa stanoví akumu-i .lačným výpočtem podlá Reeda a Muencha. Titer. virusu vo vakcíne musí byť najmenej 105 ’ TKID50 .mU1. Príidad 5 Stanovenie neutralizačných protilátek Skúmavkové kultúry kuřácích embryonálnychbuniek sa pripravujú ako. v příklade 4. Virusová'r suspenzia s obsahom 100 až 1000 TKID5() virusu' v 0,1. ml sa zmieša s rovnakým objemom vyšetřova-ného materiálu (séra), riedeného postupné desať-násobne od 10“1 do 10“5, a nechá sa stáť 60 minútpri laboratorněj teplote. Skúmavkové kultúry sainokulujú dávkou 0,2 ml zmesi vírusovej suspenzieso sérom, každé riedenie séra najmenej do 4 skú-maviek. Skúmavkové kultúry sa inkubujú 96 až120 hodin pri 37 °C. Titer neutralizačných protilá-tek sa odčítá mikroskopicky podlá chýbania cyto-patického účinku virusu na buňky. 50% neutrali-začná dávka (ND50) sa stanoví akumulačným výpočtem podlá Reeda a Muencha. PREDMET1. Vakcína proti infekčnej burzitíde kurčiat,v tekutom alebo lyofilizovanom stave, vyznačuj úcasa tým, že obsahuje v 1 ml 105 až 107TKID50 virusuinfekčnej burzitídy CAPM V-260.
- 2. Spósob přípravy vakcíny podfa bodu 1, vy-značuj úci sa tým, že sa atenuovaný kmeň virusuinfekčnej burzitídy CAPM V-260 pomnožujev primárných kulturách kuřácích embryonálnych VYNÁLEZU buniek, připravených z konvenčných vajec, priteplote 36 až 39 °C po dobu 24 až 96 hodin.
- 3. Spósob přípravy vakcíny podlá bodu 1, vy-značujúci sa tým, že sa atenuovaný kmeň virusuinfekčnej burzitídy CAPM V-260 pomnožujev subkultúrach embryonálnych buniek, připrave-ných z konvečných vajec, pri teplote 36 až 39 °C podobu 24 až 96 hodin.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS49680A CS209379B1 (cs) | 1980-01-24 | 1980-01-24 | Vakcínaprotiinfekčněj burzitíde z atenuovaného kineňa a spósobjej přípravy |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS49680A CS209379B1 (cs) | 1980-01-24 | 1980-01-24 | Vakcínaprotiinfekčněj burzitíde z atenuovaného kineňa a spósobjej přípravy |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS209379B1 true CS209379B1 (cs) | 1981-11-30 |
Family
ID=5337154
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS49680A CS209379B1 (cs) | 1980-01-24 | 1980-01-24 | Vakcínaprotiinfekčněj burzitíde z atenuovaného kineňa a spósobjej přípravy |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS209379B1 (cs) |
-
1980
- 1980-01-24 CS CS49680A patent/CS209379B1/cs unknown
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Jones | Avian reovirus infections | |
| Okazaki et al. | Protection against Marek's disease by vaccination with a herpesvirus of turkeys | |
| McNulty et al. | Isolation and cell culture propagation of rotaviruses from turkeys and chickens | |
| Menendez et al. | Experimental egg-transmission of avian reovirus | |
| Lambrechts et al. | Challenge experiments to evaluate cross‐protection induced at the trachea and kidney level by vaccine strains and Belgian nephropathogenic isolates of avian infectious bronchitis virus | |
| Wolf et al. | Salmonid viruses: Infectious pancreatic necrosis virus: Morphology, pathology, and serology of first european isolations | |
| Van der Heide et al. | Infectious tenosynovitis (viral arthritis): Influence of maternal antibodies on the development of tenosynovitis lesions after experimental infection by day-old chickens with tenosynovitis virus | |
| JPH0278634A (ja) | 連続細胞系におけるｉｂｄｖの産生 | |
| DK163133B (da) | Biologisk ren praeparation af en smitsom bronchitis-virusstamme | |
| JP2011092190A (ja) | トリレオウイルスの新規抗原クラス | |
| US4302444A (en) | Vaccines for immunizing egg-laying birds against Egg Drop disease, preparation of said vaccines, and method of use of said vaccines | |
| McNeilly et al. | Studies on a new enterovirus‐like virus isolated from chickens | |
| HU189222B (en) | Process for preparing a new vaccine against infectious bronchytis | |
| Takase et al. | Serologic and pathogenetic studies on avian reoviruses isolated in Japan | |
| Takase et al. | Isolation and characterisation of cytopathic avian enteroviruses from broiler chicks | |
| Castrucci et al. | A study of cytopathic rotavirus strains isolated from calves with acute enteritis | |
| Robertson et al. | Serological characteristics of avian reoviruses of Australian origin | |
| Chettle et al. | The isolation of infectious bursal disease virus from turkeys in England | |
| Allan et al. | A direct immunofluorescence test for the rapid detection of avian influenza virus antigen in tissue impression smears | |
| KR20020013378A (ko) | 난내 투여용 ｉｂｄｖ 균주 | |
| Carmichael et al. | A Fatal Septicemic Disease of Infant Puppies Caused by Gytopathogenic Organisms with Characteristics of Mycoplasma | |
| Graham | Characterization of a reo-like virus and its isolation from and pathogenicity for parrots | |
| CS209379B1 (cs) | Vakcínaprotiinfekčněj burzitíde z atenuovaného kineňa a spósobjej přípravy | |
| Witter | Epidemiological studies relating to the control of Marek's disease | |
| Burke et al. | Avian enteric cytopathogenic viruses. II. Characteristics of a prototype |