CS207575B2

CS207575B2 - Method of preparation of new oxime derivates of the 7-aminothiazolylacetamidocephalsporan acid

Info

Publication number: CS207575B2
Application number: CS45277A
Authority: CS
Inventors: Rene Heymes; Andre Lutz
Original assignee: Roussel Uclaf
Priority date: 1976-01-23
Filing date: 1977-01-24
Publication date: 1981-08-31
Also published as: FR2361894B2; FR2361894A2

Description

Vynález se týká způsobu přípravy nových oximových derivátů . kyseliny 7-aminothiazolylacetaimidocefalosporanové, které mají výraznou antibiotickou účinnost jednak vůči grampozitivním bakteriím, jakými jsou například stafylokoky a streptokoky, zejména vůči stafylokokům, které jsou rezistentní k penicilinu, a jednak vůči gramnegativ ním bakteriím, jakými jsou například koliformní bakterie, Klebsiella, Salmionella a Próteus.

Předmětem vynálezu jé způsob přípravy nových oximových derivátů kyseliny 7-amínothiazolylacetamidocefalosporanové obecného vzorce Г

ve kterém

Rc znamená atom vodíku, tritylovou skupinu nebo chloracetylovou skupinu,

R’c znamená atom vodíku, tritylovou skupinu nebo nenasycenou alkylovou skupinu s 1 až 4 uhlíkovými atomy,

A znamená atom vodíku nebo ekvivalent alkalického kovu, kovu alkalických zemin, hořčíku nebo aminové organické báze a vlnitá čára znamená, že skupina OR’c se může nacházet v jedné nebo druhé z obou možných poloh syn nebo anti, přičemž v případě, že R’c znamená tritylovou skupinu, potom i Rc znamená tritylovou skupinu a v případě, že R’c znamená atom vodíku, potom i Rc znamená atom vodíku, jehož podstata spočívá v tom, že se uvede v reakci kyselina 7-aminocefalosporanová vzorce

CHjO-C-CHj

O s kyselinou obecného vzorce líc

(II cl nebo s funkčním derivátem této kyseliny, přičemž v uvedeném obecném vzorci líc, ve kterém

Rd znamená tritylovou skupinu nebo· chloracetylovou skupinu a

R’d znamená tritylovou skupinu nebo nasycenou nebo' nenasycenou alkylovou skupinu s 1 až 4 uhlíkovými atomy, ' za vzniku produktu obecného vzorce Ic nh-r

(lei ve kterém

Rd a R’d mají výše uvedený význam, přičemž tento produkt odpovídá produktu obecného vzorce Γ, ve kterém

Rc znamená tritylovou skupinu nebo·· chloracetylovou skupinu a

R’c znamená tritylovou skupinu nebo nenasycenou anebo nasycenou alkylovou skupinu s 1 až 4 uhlíkovými atomy, · · načež se výše uvedený produkt obecného vzorce Ic hydrolyzuje v kyselém prostředí nebo· hydrogenolyzuje anebo se na . něj působí thiomočovinou a to podle · významů obecných substituentů· Rd a , R'd , .к , získání produktu obecného .. vzorce . Ib

ve · kterém

R”t znamená atom vodíku nebo nasycenou anebo· nenasycenou alkylovou skupinu s celkovým počtem uhlíkových atomů 1 až 4, přičemž uvedený produkt odpovídá produktu obecného vzorce Γ, ve kterém

Rc a A znamenají každý atom vodíku a

R’c znamená atom vodíku nebo· nasycenou nebo nenasycenou alkylovou skupinu s 1 až 4 uhlíkovými atomy, načež se produkty obecných vzorců Ic nebo Ib případně převedou na soli.

Předmětem vynálezu je rovněž způsob přípravy produktů obecného vzorce I

(II ve · kterém

R znamená atom vodíku nebo· tritylovou skupinu,

R’ znamená atom vodíku, tritylovou skupinu · nebo nasycenou nebo nenasycenou alkylovou skupinu s 1 až 4 uhlíkovými atomy,

A znamená atom vodíku nebo ekvivalent alkalického kovu, kovu alkalických zemin, hořčíku nebo aminové organické báze· a vlnitá čára znamená, že skupina OR’ se může nacházet . v jedné, nebo druhé z m.ožných poloh syn nebo anti, přičemž v případě, že R’ znamená tritylovou skupinu, potom·· i R znamená tritylovou skupinu a v případě, že R’ .znamená atom vodíku, potom i R znamená atom · vodíku, jehož podstat spočívá v tom, že se uvede v reakci kyselina 7-aminoccfalosporanová vzorce

s kyselinou obecného vzorce II

S^N

ORÍ (II) kde

R_t znamená tritylovou skupinu a

Rf znamená tritylovou skupinu nebo nasycenou nebo nenasycenou alkylovou skupinu s 1 až 4 uhlíkovými atomy, nebo s jejím funkčním derivátem za vzniku produktu obecného vzorce Ia

R_ř a R_f’ mají výše uvedený význam, přičemž uvedený produkt odpovídá produktu obecného vzorce I, ve kterém

R znamená tritylovou skupinu a

R’ znamená tritylovou skupinu nebo nasycenou nebo· nenasycenou alkylovou skupinu s 1 až 4 uhlíkovými atomy, načež se produkt obecného vzorce Ia případně hydroilyzuje v kyselém prostředí anebo* se hydrogenolyzuje za vzniku produktu obecného vzorce Ib

(1Ы ve kterém

Rj” znamená atom vodíku nebo nasycenou nebo* nenasycenou alkylovou skupinu s celkovým počtem uhlíkových atcimů 1 až 4, přičemž uvedený produkt odpovídá produktu obecného vzorce I, ve kterém

R a A znamenají každý atom vodíku a

R’ znamená atom vodíku nebo nasycenou nebo nenasycenou alkylovou skupinu s 1 až 4 uhlíkovými atomy, načež se produkty obecných vzorců Ia a Ib případně převedou na soli.

Předmětem vynálezu je rovněž způsob přípravy produktů obecného vzorce Ib

ve kterém

Rf’ znamíená atom vodíku nebo nasycený neboi nenasycený alkylový zbytek s 1 až 4 uhlíkovými atomy, přičemž tento produkt odpovídá produktu obecného vzorce Г, ve kterém

Rc a A znamenají každý atom vodíku a

Rc’ znamená atom vodíku nebo nasycenou nebo nenasycenou alkylovou skupinu s 1 až 4 uhlíkovými atomy, jehož podstata spočívá v tom, že se působí kyselinou na sůl obecného vzorce Ic, ve kterém

Rd znamená tritylovou skupinu a

Rď znamená tritylovou skupinu nebo nasycenou nebo nenasycenou alkylovou skupinu s 1 až 4 uhlíkovými atomy, za vzniku produktu obecného vzorce Ib, nebo se působí hydrogenolyzačním činidlem na sůl produktu obecného vzorce Ic, ve kterém

Rd znamená tritylovou skupinu a

Rď znamená tritylovou skupinu nebo nasycenou nebo nenasycenou alkylovou skupinu s celkovým počtem uhlíkových atomů 1 až 4, za vzniku soli produktu obecného vzorce Ib, nebo se působí thiomcčovinou na sůl produktu obecného vzorce Ic, ve kterém

Rd znamená chloracetylovou skupinu a nasycenou nebo nenasycenou alkylovou skupinu s 1 až 4 uhlíkovými atomy, za vzniku soli produktu obecného vzorce Ib.

(Ib/ ve kterém

Rf’ znamená atom vodíku nebo nasycenou nebo· nenasycenou alkylovou skupinu s celkovým počtem uhlíkovým atomů 1 až 4, přičemž tento produkt odpovídá produktu obecného· vzorce I, ve kterém

R a A znamenají každý atom vodíku a

R’ znamená atom vodíku nebo nasycenou nebo nenasycenou alkylovou skupinu s celkovým počtem uhlíkových atomů 1 až 4, jehož podstata spočívá v tom, že se působí kyselinou na sůl produktu obecného vzorce la, ve kterém

R_;1 znamená tritylovou skupinu a

Rf znamená tritylovou skupinu nebo· nasycenou nebo nenasycenou alkylovou skupinu s celkovým počtem uhlíkových atomů 1 až 4, za vzniku produktu obecného· vzorce Ib, nebo se půhobí hydrogenolyzačním činidlem na sůl produktu obecného vzorce Ia, ve kterém,

Ri· znamená tritylovou skupinu a

R_t’ znamená tritylovou skupinu nebo nasycenou nebo nenasycenou alkylovou skupinu s 1 až 4 uhlíkovými atomy, k získání produktu obecného vzorce Ib.

Jakožto příklady obecných substituentů Rc’ a R’, znamenajících nasycenou nebo nenasycenou alkylovou skupinu s 1 až 4 uhlíkovými atomy, lze uvést methylovou skupinu, ethylovou skupinu, propylovou skupinu, isopropylovou skupinu, butylovou skupinu, sek.butylovou skupinu, terč.butylovou skupinu, vinylovou skupinu, propenylovou skupinu, · butenylovou skupinu, ethinylovou sklupinu a propargylovou skupinu.

Jakožto příklady · konkrétních představitelů obecného substituentu A lze uvést zejména ekvivalent sodíku, draslíku, lithia, vápníku nebo hořčíku; jakožto příklady organických bází, které mohou být zastoupeny obecným substituentem A, lze uvést trimethylamin, triethylamin, methylamin, propylamln, N,N-dimethylethanolamin, tris(hydroxyinethyljamiiioetlian, arginín nebo· lysin.

Jakožto příklady produktů obecného vzorce · Γ a produktů obecného vzorce I je možné uvést produkty, popsané v dále uvedených příkladech provedení · a zejména:

— kyselinu 3-acetoxymethyl-7-[2-(2-aminoi-4-thiazolyl) ^-'methoxyiminoacetamidoi]-3-cef em-4-karboxylovou, — sodnou sůl kyseliny 3-acetoxymethylt -7- [ 2- (2-amino-4-thiazolyl) -2-m^ethoxyiminoacetamido]-3-cefem-4-karboxylové, — kyselinu 3-acetoxymethyl-7-[2-(2-am-noi-4-thiazoilyl) -2-methoxyimin,oacetamido-]-3-cefem-4-karboxylovou, isomer · syn, — sodnou sůl kyseliny 3-acetoxymethyl-7- [ 2- (2-amino-4-thiazoly i ) -2-methoxyimi noacetamido] -3-cef em-4-karboxylové, isomer syn, — kyselinu 3-acetoxymethyl-7-[2-(2-amino-4-thiazolyl) -2-methoxyiminιOιacttamido· ] -3-cefem-4-karboxylovou, — sodnou sůl kyseliny 3-acetoxymethyl-7- [ 2- (2-am-no-4-thiazolyl) -2-methoxy-mιinoacetamido·]-3-cefem-4-karboxylové, získanou postupem popsaným v příkladu provedení, — krystalickou sodnou sůl kyseliny· 3-acetoxyimethyl-7- [ 2- (2-31^110-4--10820^1) -2-methoxy iminoacetamido]-3-cefem-4-karboxylové, isomer· syn, — kyselinu 3-acetoxymethyl-7-[2-(2-ammo-4-thiazolyl ] -2-ethoxyiminoacetamido]-3-cefem-4-karboxylovou, isomer syn a její soli s alkalickými kovy, kovy alkalických zemin, hořčíkem nebo aminovými organickými bázemi — kyselinu 3-acetoxymethyl-7-[2-(2-aminOt4-thiazoΊyl) -2-/ (2-propenyl J oxyiminoi/^t^iftamido ]-3-oefem-4-karboxylovoui, isomer syn a její soli s alkalickými kovy, · kotvy alkalických zemin, hořčíkem nebo· aminovými organickými bázemi a — kyselinu 3-acetoxymethyl-7-[2-(2-amino-4-th-azolyl) -2-/ (1-methylethoxy-ш-по] acetamido/ ] t3-cefem-4-karroxylovou, isomer syn a její soli s alkalickými· kovy, kovy alkalických zemin, hořčíkem· nebo aminovými ·organickým- bázemi.

Je samozřejmé, že produkty obecného· vzorce I mohou existovat:

— buď ve· formě dané obecným vzorcem I — nebo· ve formě produktů obecného vzorce Iz

ve kterém

R, R’ a A mají výše uvedený význam.

Je samozřejmé, že rovněž produkty obecného vzorce Γ mohou existovat v obou formách, uvedených pro produkty obecného vzorce· I.

Při výhodném způsobu provedení způsobu přípravy produktů obecného vzorce· Γ nebo obecného vzorce I podle vynálezu se na kyselinu 7-aminocefalosporanovou působí funkčním derivátem kyseliny obecného vzorce·: líc nebo II, jako· například anhydridem nebo chloridem této kyseliny, přičemž uvedený anhydrid může být připraven in šitu působením chloromravenčanu isobutylnatého nebo dicyklohexylkarbodiimidu na uvedenou kyselinu.

Rovněž je možné použít i dalších halogenidů nebo* dalších anhydridů, vytvořených in šitu působením dalších chlormravenčanů alkylnatých, dialkylkarbodiimidů nebo· dalšího dicykloa-lkylkarbodimidu. Rovněž je možné použít dalších derivátů kyselin, jako· například azidu kyseliny, aktivovaného amidu kyseliny nebo aktivovaného* esteru kyseliny, vytvořeného například s· hydroxysukcinímidem, p-nitrofenolem nebo 2,4-dinit-rofenolem·. V případě, že se reakce kyseliny 7-amtoocefalosporanové provádí s haloigenidem kyseliny obecného¹ vzorce· líc nebo II nebo· s anhydridem vytvořeným s chloromravenčanem isobutylnatým, potom* se s výhodou reakce provádí v přítomnosti· bazického· činidla.

Jakožto bazického činidla je možné použít, například uhličitanu alkalického* kovu nebo terciární organické báze, jakou je· například N-meehylmorfolin, pyridin nebo trlalkylamin, jako například triethylamin.

Jakožto příklady kyselého· hydrolyzačního činidla, kterým se případně působí na produkty obecného vzorce Ic nebo Ia, je možné uvést kyselinu mravenčí, kyselinu, trifluoroctovou. nebo kyselinu octovou. Tyto kyseliny mohou být použity v bezvodém prostředí nebo* ve vodných roztocích. Jakožto hydrolyzační činidlo je možné zejména uvést systém zinek./kyselina octová.

K odštěpení tritylových skupin se s výhodou použije bezvodé kyseliny trifluoroctové nebo vodného roztoku kyseliny mravenčí nebo kyseliny octové.

Působením thiomočoviny na produkt obecného vzorce Ic, ve kterém

Rd znamená chloracetylovou skupinu a

Rď znamená chloracetylovou skupinu nebo nasycenou nebo nenasycenou alkylovou skupinu s celkovým počtem uhlíkových atomů 1 až 4, se s výhodou provádí v neutrálním nebo kyselém prostředí. Tento typ reakce byl popsán Masakim [J. A. C. S. 90, 4508 (1968)].

Produkty obecného vzorce Ic, Ia nebo Ib mohou být převedeny na odpovídající soli o sobě známými · metodami. Převedení uvedených kyselin na odpovídající soli může být například provedeno· působením· minerální báze, jakou je například hydroxid sodný nebo hydroxid draselný anebo hydrogeuhličitan sodný, nebo soli substituované nebo· nesubstituované alifatické karbo xylové kyseliny, jakou je například kyselina diethyloctová, kyselina ethylhexanová a zejména· kyselina octová.

Výhodnými solemi výše uvedený kyselin jsou sodné soli.

Převedení · kyselin na odpovídající soli může být rolvněž provedeno působením organické báze, jakou je například triethylamin.

Pro přípravu solí mohou být · rovněž namísto volných kyselin použity · jako výchozí látky solváty · volných kyselin. Jako* příklady těchto solvátů je například možné uvést solváty získané s vodou, s kyselinou mravenčí nebo· s alkoholem.

Solváty s alkoholem a to· zejména s ethanoiem mohou být rovněž získány například působením směsi alkoholu a vody na solvát vytvořený s kyselinou mravenčí, načež se· rezultující roztok zahustí.

Uvedené převedení kyselin na odpovídající soli se· s· výhodou provádí v rozpouštědle nebo ve· směsi rozpouštědel, jakými jsou například· voda, ethylether, methanol, ethanol nebo aceton.

Soli se získají v· amorfní nebo* krystalické formě a to podle použitých reakčních podmínek.

Krystalické soli se s výhodou připraví reakcí volných kyselin nebo jejich solvátů, vytvořených například s· kyselinou mravenčí nebo s ethanolem, · a jednou z výše uvedených solí alifatických karboxylových· kyselin, s výhodou s octanem· sodným.

Při přípravě sodné soli se reakce provádí ve vhodném· organickém · Rópcoištědle, jakým je· například methanol, přičemž rozpouštědlo může obsahovat malé · množství vody.

Kromě tbho je · možné převést amorfní soli na soli krystalické. Za tím- účelem se· amorfní sodná sůl, která může být · ve formě solvátů například s 0,5, · 1 nebo 1,5 mol vody, rozpustí ve vhodném organickém rozpouštědle, s· výhodou v nízkoimolekulárním alkoholu, jakým· je například methanol, načež se krystalizace provede buď přímot nebo přídavkem dalších· rozpouštědel, jakými jsou například ethanol, isopropanol, n-butanol, aceton, ethery a obecně organická rozpouštědla mísíteIná s vodou.

Jestliže· výchozí produkt, rozpouštědlo· nebo, obě uvedené složky obsahují vodu, potom může být získána krystalická· sůl ve formě · hydrátu; tak například krystalická sodná sůl kyseliny j^--^^ceto'*xymethyl-7-[2-(2-aminj>4-titóaz^:oilýl ] -2-methoxyiminoacetamido]-3-cefem-4-karboxylová, která se nachází v isomerní formě syn, může být izolována například s 0,5, 1 nebo· 1,5 mol vody.

Produkty obecného vzorce líc, ve kterém mají obecné subsťituenty výše uvedený význam, mohou být připraveny tak, že se na produkt obecného vzorce IV

Produkty obecného vzorce II, ve kterém mají obecné substituenty výše uvedený význame, mohou být připraveny tak, že se na produkt obecného; vzorce IV

OR (IV) ve kterém

R’ znamená atom vodíku, tritylovou skupinu nebo: nasycenou nebo nenasycenou alkylovou skupinu э 1 až 4 uhlíkovými atomy a

Alk znamená alkylovou skupinu s 1 až · 4 uhlíkovými atomy, působí buď funkčním· derivátem tritylové ' skupiny, nebo v případě, že ' R’ znamená atom vodíku nebo nasycenou · nebo nenasycenou alkylovou skupinu s celkovým počtem ' uhlíkových atolmů 1 až 4, funkčním derivátem chloracetylové skupiny za vzniku produktu obecného vzorce Vc

CO^Alk (ivl ve kterém ve kterém

R’ znamená atom· vodíku, tritylovou . skupinu nebo nasycenou nebo nenasycenou alkylovou skupinu s 1 až 4 uhlíkovými atomy a

Alk znamená alkylovou skupinu s 1 až 4 uhlíkovými atomy, působí funkčním derivátem tritylové skupiny za vzniku produktu obecného vzorce V

I»

NH-Rd

, OR d (Vc)

Rd znamená tritylovou skupinu nebo chloracetylovou skupinu a

Rď znamená tritylovou skupinu nebo· nasycenou nebo nenasycenou alkylovou skupinu s 1 až 4 uhlíkovými atomy, přičemž znamená-li Rď chloracetylovou skupinu, . potom. i Rd znamená chloracetylovou skupinu, načež se . na produkt obecného vzorce Vc · · působí bází a . · potom kyselinou k získání produktu obecného· vzorce Tle

NH-Rd sN \=7 co₂h

Ϊ ORd (HO ve· kterém'

Rd a Rď mají výše uvedený význam.

Rt znamená tritylovou skupinu a

Rf znamená tritylovou skupinu nebo· nasycenou nebo nenasycenou alkylovou skupinu s · 1 až 4 uhlíkovými atomy, načež se na produkt obecného vzorce V působí bází a potom. kyselinou za vzniku produktu Οbecného vzorce II

NířR₁

CO.H

ORj (II) ve kterém

Ri a Rf mají výše uvedený význam.

Při provádění způsobu přípravy produktů obecného· vzorce líc nebo· produktů obecného vzorce II podle vynálezu se jako funkčního derivátu tritylové skupiny s výhodou použije tritylchlbridu v přítomnosti triethylamínu nebo jiných terciárních aminových bází, jakými jsou například trialkylaminy, methylmorfolin nebo< pyridin.

Funkčním derivátem chloracetylové skupiny je s výhodou anhydrid kyseliny chloroctové nebo halogenid, jako například monochloracetylchlorid.

V případě, že se reakce к získání produktu obecného vzorce Vc provádí s chloracetylhalogemdem, potom se s výhodou pracuje v přítomnosti bazického činidla, které je identické s bazickými činidly, která již byla citována výše.

Jakožto báze, které se použije pro zmýdelnění produktu obecného vzorce V nebo obecného vzorce Vc, se s výhodou použije » hydroxidu sodného; kromě toho* je možné použít i dalších bází, jakými jsou například uhličitan draselný nebo hydroxid barnatý.

Jakožto kyseliny, které se použije pro izo• láci kyseliny obecného vzorce II nebo obecného’ vzorce líc, se s výhodou použije zředěné kyseliny chlorovodíkové; kromě toho může být použito i kyseliny octové nebo kyseliny mravenčí.

Produkty obecného vzorce IV, ve kterém mají obecné substituenty výše uvedený význam, mohou být připraveny tak, že se působí thiomočovinou na produkt obecného vzorce III

СГС/^-С-С-СС^^Ц' о и

OR (III) ve kterém

R’ znamená atom vodíku, tritylovou skupinu nebo nasycenou nebo nenasycenou alkylovou skupinu s celkovým počtem uhlíkových atomů 1 až 4, za vzniku po předešlém působení bází produktu obecného vzorce IV

ve kterém

R’ a Alk mají výše uvedený význam.

Při výhodném způsobu provedení se jakožto báze, které má být použito к získání produktu obecného vzorce IV, použije cctanu draselného. Rovněž je možné použít uhličitanů a hydrogenuhličitanů alkalických kovů, jako například uhličitanu sodného nebo uhličitanu draselného ve zředěném vodném roztoku.

Bylo zjištěno, že konfigurace syn nebo anti produktů obecného vzorce Г a produktů obecného vzorce I se řídí konfigurací produktů obecného vzorce IV vzhledem к tomu, že konfigurace produktů, získaných z produktů obecného vzorce IV, může být během syntézy zachována.

Stejně tomu tak je samozřejmě v případě produktů, získaných z produktů obecného* vzorce IVa a produktů obecného vzorce IV”, poněvadž tyto produkty jsou zahrnuty v obecném vzorci IV.

Konfigurace produktů obecného vzorce IV závisí na zachování určitého počtu podmínek během přípravy produktů obecného· vzorce IV.

Ták bylo například zjištěno, že jestliže se působení thiomočoviny na produkty obecného· vzorce III provádí:

a) bud ve vodném rozpouštědle, jakým je například vodný roztok acetonu nebo vodný roztok ethanolu,

b) nebo při okolní teplotě a použití v podstatě stechiometrického množství thimočoviny při dosti krátké reakční době asi 1 až 3 hodin

c) anebo při zachování všech výše uvedených podmínek uvedených v odstavcích a) i b), pcrtoto se získá isomer konfigurace syn.

Produkty obecného vzorce IV, připravené v dále uvedených příkladech 3, 8, 10, 12 a 21, mají tedy konfiguraci syn.

Produkty obecného vzorce Г a to zejména produkty obecného vzorce I, ve kterých mají obecné substituenty výše uvedený význam, zejména produkty uvedených obecných vzorců konfigurace syn, mají velmi dobrou antibiotickou účinnost jednak vůči grampozitivním bakteriím, jakými jsou například stafylokoky a streptokoky, zejména vůči penicilinu rezistentní stafylokoky, a jednak vůči gramnegativním bakteriím, jakými jsou například koiiformní bakterie, Klebsielly, Salmonelly a Próteus.

Vzhledem к výše uvedeným vlastnostem mohou být uvedené produkty použití jakožto léčiva při léčení nemocí způsobených nákazou choroboplodnými zárodky, zejména při léčení onemocnění, jejichž příčinou je napadení stafylokoky, jako například otrava krve stafylokoky, pyodermitidy, septické a hnisající rány, anthrax, phlegmony, erisipelie, chřipky, bronchopneumonie a zápaly plic.

Uvedené farmaceuticky přijatelné produkty mohou být rovněž použity jako léčiva při léčení collibacilos a přidružených infekcí, při léčení infekcí způsobených mikroorganismy Próteus, Klebsiella a Salmonella a při léčení ostatních onemocnění, vyvolaných gramnegativními bakteriemi.

Farmaceuticky přijatelné produkty obecného· vzorce I mohou být použity při přípravě farmaceutických přípravků, obsahujících jakožto účinnou látku alespoň jeden z uvedených produktů a zejména jeden z produktů konfigurace syn, popsaných v příkladech.

Tyto přípravky mohou být podávány perorálně, rektálně, parenterálně nebo lokálně topickolu aplikací na pokožku nebo do svalů.

Uvedené přípravky mohou být v tuhé nebo v kapalné formě, která je běžně používaná v lékařství, jako například mohou být použity ve formě normálních tablet nebo dražé, granulí, čípků, injekčních přípravků, mastí, krémů nebo gelů; tyto přípravky mohou být připraveny o sobě známými metodami.

Účinná látka, popřípadě účinné látky mohou být v uvedených farmaceutických přípravcích inkorporovány do obvykle používaných pomocných látek, jakými jsou například talek, arabská guma, laktosa, škrob, stearát hořečnatý, kakaové máslo, vodná nebo nevodná vehikula, tuky rostlinného. nebo živočišného původu, parafinové deriváty, glykoly, rozličné smáčedla, dispergační nebo emulgační činidla a konzervační prostředky.

Dávka účinné látky je závislá na druhu nemoci, která je léčena, na věku a stavu léčené osoby, nja způsobu aplikace účinné látky a na účinné látce samotné.

Tato dávka může například činit 0,25 g až 4 g denně při perorální aplikaci produktu, popsaného v příkladu provedení 4 nebo 7, člověku neboi třikrát denně 0,5 až 1 g při intramuskulární aplikaci.

V následující části popisu bude vynález blíže objasněn formou příkladů provedení, přičemž tyto příklady nikterak neomezují rozsah vynálezu.

Příklad 1

Kyselina 3-acetoxymethyl-7- [ 2- (2-tritylamino-4-thiazolyl)-2-tritylhydroxyiminoacetamido!]-3-cefem-4-karboxylová

Stupeň A

Ethyl- [ 2- (2-amino-4-thiazoly 1) -2-hy droxyiminojacetát

К 5 cm³ ethanolu a 0,76 g thiomočoviny se přidají 2 g ethyl-(χ-chlor-a-oximinoacetyljacetátu a takto· získaná směs se míchá při okolní teplotě celkem šestnáct hodin, přičemž vykrystalizuje hydrochlorid. К reakční směsi se přidá 5 cm³ etheru a reakční směs se odstředí. Pevný podíl se promyje směsí ethanol-ether (1 : 1) a potom ještě etherem к získání 1,55 g hydrochloridu.

1,55 g výše uvedeným způsobem získaného hydrochloridu se rozpustí při teplotě 40 až 50 °C v 8 cm? vody, načež se získaný roztok neutralizuje na hodnotu pH 5 až 6 přídavkem octanu sodného. Volný amin přitom vykrystalizuje. Reakční směs se zchladí na ledové lázni, načež se odstředí, pevný podíl se promyje vodou a vysuší к získání

1,22 g isomeru anti.

Teplota tání produktu je 154 °C.

Matečné louhy a promývací roztoky se spojí a takto spojená frakce se zahustí a vylouží vodou; po promytí etherem se přidá hydrogenuhllčitan sodný a směs se odstředí. Pevný podíl se potom promyje vodou к získání 1,9 g produktu, který se při chromatografli na tenké vrstvě rozdělí do dvou skvrn. Produkt se vyčistí chromatografií na kysličníku křemičitém a elucí etherem. Čisté frakce isomeru syn se spojí a zahustí. Zbytek se rozetře s etherem a odstředí; pevný podíl se potom vysuší к získání 50 mg tohoto isomeru.

Stupeň В

Ethyl- [ 2- (2-tritylamino-4-thiazolyl) -2-tritylhydroxyimino ] acetát

К roztoku 5,4 g produktu, připraveného ve stupni A, v 54 cm³ chloroformu a 7,5 cm³ triethylaminu se přidá při teplotě 10 stupňů Celsia roztok 15 g tritylchloridu ve 30 cm³ chloroformu. Po hodinovém stání v klidu se reakční směs promyje 40 cm³vody a 20 cm³ vody, obsahující 4 cm? kyseliny chlorovodíkové, dekantuje, vysuší a zahustí к suchu.

Zbytek se extrahuje 10 cm³ etheru; po přidání 50 cm³ methanolu se směs míchá, odstředí, načež se pevný podíl proímyje methanolem к získání 14,2 g požadovaného produktu ve dvou podílech.

Stupeň C

Kyselina 2- (2-tritylamino-4-thiazolyl) -2-tritylhydroxyiminooctová

10,5 g esteru, získaného ve stupni B, se suspenduje při teplotě blízké refluxní teplotě v 55 cm³ dioxanu. К rézultující supensi se potom pomalu přidá 17 cm³ 2 N roztoku hydroxidu sodného. Reakční směs se potom ještě zahřívá к dosažení mírného refluxu, načež se směs ochladí a vyloučená sůl se odstředí. Získaná sůl se extrahuje 60 cm³ methylenchloridu, 20 cm³ vody a 2 cm³kyseliny octové. Vzniklá kyselina se odstředí a promyje vodou к získání prvního podílu 7 g kyseliny.

Z matečného louhu se odpaří dioxan, načež se přidá 20 cm³ methylenchloridu, 10 cm³ vody a 1 cm³ kyseliny octové. Potom se izoluje druhý podíl 1,5 g téhož produktu. Celkem se tedy získá 8,5 g.

20757S

Analýza pro С_йНззОзМз8.0,5 H₂O:

vypočteno:

75,85 % С, 5,03 θ/ο Η, 6,17 % Ν, 4,7 % S; nalezeno:

75,8 °/ο C, 4,9 % Η, 5,9 % Ν, 4,6 % S.

Stupeň D

Kyselina 3-acetoxymethyl-7[ 2- (2-tritylamino-4-thiazolyl) -2-tritylhydroxyinpnoacetamiido]-3-cef em-4-karboxylová

К míchané suspenzi 8,5 g kyseliny, připravené ve stupni C, v 50 ml methanolu se přidá 5 ml N-methylmorfolinu. Takto získaná směs se míchá po doibu deseti minut při teplotě 30 °C, načež se к ní přidá 30 ml methylenchloridu; směs se potom zahustí, načež se к ní přidá 100 ml etheru, provede se oddělení vrstev, odstředění, prclmytí etherem a vysušení, přičemž se získá první podíl 7,2 g soli. Potcim se provede zahuštění к suchiu, extrakce etherem; přitom se získá druhý podíl téhož produktu.

4,24 g výše uvedené morfolinové soli se za míchání suspenduje v 60 ml methylenchloridu. Rezultující směs se míchá po dobu pěti minut, načež se ochladí na teplotu —5 °C а к takto ochlazené směsi se přidá 6 ml molárního roztoku isobutylchlorofoirmiátu v methylenchloridu. Směs se potom míchá po dobu patnácti minut při teplete —5 °C, načež se ochladí na teplotu —20 °C; к ochlazené siměsi se potom přidá roztok 1,36 g kyseliny 7-aminocefalosporanové v 25 ml methylenchloridu a 1,4 ml triethylaminu.

Výše uvedeným způsobem získaná směs se nechá stát jednu hodinu při okolní teplotě, načež se promyje 50 ml vody, obsahující 10 ml 1N kyseliny chlorovodíkové; provede se odstředění, dekantace, promytí vodou a zahuštění к suchu. Zbytek se rozetře s etherem, odstředí a promyje etherem, přičemž se získá 4,5 g surového produktu.

Takto získaný surový produkt se potom míchá při teplotě 10 °C po dobu jedné hodiny v 10 ml methylenchloridu. Nerozpustný podíl se odstředí a promyje methylenchlorideim. К filtrátu se potom přidá 50 ml etheru, načež se rezultující směs míchá. Potom se vyloučená sraženina odstředí a promyje etherem к získání 2,29 g požadovaného produktu.

Získá se ještě druhý podíl (0,856 g) produktu. Celkem se tedy získá 3,146 g požadovaného produktu.

Příklad 2

Kyselina 3-acetoxymethyl-7- [ 2- (2-amino-4-thiazoly 1 ]-2-hy dr oxyiminoacetamido ]-3-cefem-4-karboxylová

2,29 g produktu, získaného v příkladě

1774 cm⁴ (beta-laktam)

1740 cm¹

1676 cm¹

1630 cm¹

1520 cm¹ provedení 1, se suspenduje v 18,4 ml 50% vodného roztoku kyseliny mravenčí. Získaná směs se potom intenzívně míchá při teplotě 55 °C po dobu patnácti minut.

Ke směsi se potom po předchozím ochlazení přidá 10 mil vody, načež se provede odstředění, promytí vodoiu, zahuštění za vakua, přidání acetonu, odstředění, přidání 30 ml ethieiru, smíchání odstředění a promytí etherem к získání 0,665 g produktu. Rovněž se získá 0,123 g produktu v krystalické formě; celkem se tedy získá 0,788 g produktu.

0,735 g uvedeného produktu se rozpustí v 7,5 ml ethanolu а к rezultujícímu¹ roztoku se přidá 7,5 ml acetonu. Potom se přidá 70 mg aktivního uhlí, načež se provede odstředění, ddehnlání rozpouštědel, přidání a oddělení ethanolu, promytí v ethanolu; přitom se získá první podíl 0,450 g produktu; druhý podíl produktu činí 0,105 g.

Infračervené spektrum:

\ C=O /

c=c nh₂NH

Příklad 3

Kyselina 3-acetoxymethyl-7[ 2- (2-tritylamino-4-thiazolyl) -2-methoxyiminoacetamido] -3-cef em-4-karboixylová

Stupeň A

Ethyl- [ 2- (2-amino-4-thlazolyl ] -2-methoxyiminioijacetát

Ke 3 ml absolutního ethanolu se přidá 1 g ethyl-(χ-chlor-a-methoxyímlnoacetyljacetátu, načež se к takto získanému roztoku přidá 0,42 g rozetřené thiomočoviny. Rezultující směs se potom míchá při okolní teplotě po dobu dvou hodin. Směs se poltem zředí 60 ml etheru, přičemž vykrystalizuje vzniklý hydrochlorid; provede se rozmíchání směsi, odstředění, prcimytí a vysušení, přičemž se získá 685 mg hydrochloridu.

Získaný hydrochlorid se rozpustí ve 4 ml vody teplé 50 °C а к rezultujícímu roztoku se přidá octan draselný к dosažení hodnoty pH roztoku 6, přičemž uvolněný amin vykrystalizuje. Potom se provede ochlazení, odstředění, promytí vodou a vysušení к získání 270 mg požadovaného produktu. Teplota tání produktu je 161 °C. Získaný produkt má konfiguraci syn. NMR-spektrum (CDCL₃ 60 MHZ) p. p. m.:

(N—OCH₃)

6,7 (proton thiazolového kruhu).

Stupeň В

Ethyl-2- (2-tritylamlno-4-thiazolyl) -2-methoxyiminoacetát

4.6 g produktu, připraveného v předcházejícím stupni se rozpustí při teplotě 30 °C v 92 ml mfethylenchloridu. Rezultující roztok se ochladí na teplotu —10 °C а к takto ochlazenému roztoku se přidá triethylamin v množství 2,9 ml; směs se potom ochladí až na teplotu —35 °C, načež se ke směsi přidá během patnácti minut 6,1 g tritylchloridu. Reakční směs se potom nechá stát při okolní teplotě po dobu dvou a půl hodiny. Reakční směs se promyje vodou, potom 0,5 N kyselinou chlorovodíkovou a konečně vodným roztokem octanu sodného. Dále se provede vysušení, zahuštění, extrakce etherem, opětovně zahuštění, rozpuštění v methanoilu, přidání vody a etheru, krystalizace, odstředění, a promytí etherem к získání 6,15 g požadovaného produktu. Teplota tání produktu je 120 °C.

Získaný produkt má konfiguraci syn.

Stupeň C

Kyselina 2-(2-tritylamino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminooctová

7,01 g esteru, získaného ve stupni B, se rozpustí ve 35 ml dioxanu. Takto získaný roztok se zahřeje na olejové lázni na teplotu 110 °C, načež se к roztoku přidá během pěti minut 9 ml 2 N roztoku hydroxidu sodného; reakční směs se potom zahřívá к varu pod zpětným chladičem po dobu třiceti minut. Sodná sůl vykrystalizuje. Reakční směs se ochladí, odstředí; po promytí dioxanem a potom etherem se získá první podíl soli o hmotnosti 5,767 g.

Matečný louh se potom zahustí к získání druhého podílu produktu o hmotnosti 1,017 gramu; celkem se tedy získá 6,784 g soli.

3,06 g uvedené soli se přidá к 65 ml methylenchloridu a 6,5 ml 2 N kyseliny chlorovodíkové; po promytí vodou, vysušení a zahuštění к suchu se získá v kvantitativním výtěžku volná kyselina.

Získaný produkt má konfiguraci syn.

NMR-spektrum (DMSO, 60 MHZ) p. p. m.:

3,68 [N-OCH3)

6.6 (proton thiazolového kruhu).

Stupeň D

Kyselina 3-acetoxymethy 1-7[ 2- (2-tritylamino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-cefem-4-karboxylová

Suchá kyselina, získaná ve stupni C, se rozpustí ve 30 ml bezvodého methylenchloridu. К rezultujícímu roztoku se přidá 0,78 dicyklohexylkarbodiimidu a směs se míchá při teplotě okolí po dobu jedné hodiny. Vy tvořená dicyklohexylmočovina se odstředí; po ochlazení na teplotu —10 °C se přidá roztok 1,01 g kyseliny 7-aminocefalosporanové ve 13 ml methylenchloridu a 0,9 ml triethylamínu. Reakční směs se potom nechá ohřát na teplotu okolí, načež se к ní přidá 1 ml kyseliniy octové; po odstředění, promytí vodným roztokem kyseliny chlorovodíkové a vodou, vysušení, zahuštění к suchu a extrakcí 10 ml dioxanu se přidá 1 ml vody a 3 ml nasyceného roztoku hydrogenuhličitanu sodného. Po míchání, odstředění, promytí, zahuštění к suchu, extrakci methylenchloridem, promytí 10 ml vody a 5 ml normální kyseliny chlorovodíkové, dekantaci, promytí vodou, vysušení, přidání a oddělení etheru se získá 1,747 g surového produktu, který se vyčistí rozpuštěním v octanu ethylnatém a následným vyloučením po přidání etheru. Takto se získá 1,255 g čistého produktu.

Získaný produkt má konfiguraci syn.

Ethyl- (χ-chlor-a-methoxyiminoacety 1) acetát, použitý, jakožto výchozí látka v příkladě provedení 3, byl připraven následujícím způsobem:

22,5 g ethyl-(y-chlor-a-oximinoacetyl)acetátu se přidá ke 100 ml methylenchloridu. Získaná směs se umístí na ledovou lázeň a za míchání se к této směsi pomalu přidává čerstvý roztok diazomethanu [21,6 g/1) v celkovém· množství 275 ml.

Reakční směs se nechá reagovat, načež se přebytek diazomethanu rozloží malým množstvím hliníku. Směs se potom zahustí a čistí elucí na kysličníku křemičitém za použití methylenchloridu jakožto elučního činidla. Získá se 11,93 g požadovaného produktu.

Ethyl- [ 2- (2-amino-4-thiazolyl )-2-methoxyimino] acetát, použitý v příkladě 3, byl rovněž připraven následujícím způsobem:

Stupeň a

Ethyl- (2-acetyl-2-methoxyimino) acetát

180 g ethyl-(2-acetyl-2-hydroxyimino)acetátu v surovém stavu se přidá к 900 ml čistého acetonu. К výsledné směsi se pod dusíkem a při teplotě 10 °C přidá 234 g uhličitanu draselného; potom se přidá 103 ml dimethylsulfátu. Reakční směs se míchá po dobu tří hodin při teplotě okolí, načež se ke směsi přidá led a takto vzniklá směs se nalije do 4 litrů vody; po extrakci methylenchloridem, promytí vodou a vysušení se oddestilují rozpouštědla. Získá se 185 gramů požadovaného produktu.

Stupeň b

Ethyl- (4-brom-2-methoxyiminoacetyl) acetát

197 g produktu, získaného v předcháze jícím stupni a, se přidá к 1 litru methylen

2075 75 chloridu, načež se к získané směsi přidá 200 mg kyseliny p-toluensulfonové. Potom se přidá při teplotě 20 °C jedna desetina z celkového množství roztoku 191 g čistého bromu ve 200 ml methylenchloridu. Když se reakce rozběhne, přidá se zbylé množství roztoku bromu běheim jedné hodiny při teplotě 20 °C. Teplota se potom nechá vystoupit na 25 °C. Po promytí ledovou vodou, reextrakci methylenchloridem a vysušení se oddestiluje rozpouštědlo. Získá se 268 g požadovaného produktu.

Stupeň c

Ethyl- [ 2- (2-amino-4-thiazoly 1 ] -2-ethoxyiminojacetát g thiomočoviny se přidá ke 270 ml ethanolu a 540 ml vody. К této směsi se potom pod dusíkovou atmosférou přidá během, půl hodiny 268 g produktu, získaného ve stupni b, ve 270 ml ethanolu. Reakční siměs se míchá při teplotě 20 °C po dobu jedné hodiny. Směs se potom ochladí na teplotu 15 а к takto· ochlazené směsi se přidává v malých dávkách hydrogenuhličitan draselný к dosažení hodnoty pH 5. Po odstředění, promytí vedou a vysušení se získá 133,8 g požadovaného produktu. Získaný produkt je identický s produktem, získaným ve stupni A.

Příklad 4

Kyselina 3-acetoxymethyl-7 [ 2- (2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-cefem-4-karboxylcvá

0,975 g produktu, získaného v příkladě 3, se míchá po dobu deseti minut při teplotě 55 °C ve 4 ml 50% vodného roztoku kyseliny mravenčí. К reakční směsi se potom přidají 4 ml vody a směs se odstředí a zahustí к suchu za vakua. Po rozdělení ve 2 ml ethanolu, odstředění, promytí ethanclem a potom etherem se získá 0,428 g čistého produktu.

Analýza: Pro C^HiyOyh^ vypočteno:

42,19 % C, 3,76 % H, 15,37 % N, 14,08 % S; nalezeno:

42,3 % C, 4,1 % H, 15.2 % N, 13,0 % S.

Získaný produkt má konfiguraci syn.

NMR-spektrum (DMSO 60 MHZ) p. p. m.:

2,03 (—CCH₃), dublet

II o

9,58 J= 8 Hz (CONH)

6,76 (proton thiazolového kruhu).

Příklad 5

Diethylaminová sůl kyseliny 3-acetoxyme thyl-7- [ 2- (2-tritylamino-4-thiazolyl) -2- (methoxyiminoi) acetamido] -3-cefem-4-karboxylová

Kyselina 3-acetoxymethyl-7-[2-(2-tritylamino-4-thiazolyl )-2-( methoxyimino) acetamido]-3-cefem-4-karboxylová v surovém stavu, získaná, jak bylo uvedeno v příkladu 3, kondenzací kyseliny 2-(2-tritylamino-4-thiazolyl )-2-methoxyiminooctové ve formě anhydridu, připraveného pomocí dicyklohexylkarbodiimidu a 40,8 g kyseliny cefalosporanové, se rozpustí, ve 350 ml dioxanu. К této· směsi se potom za míchání pomalu přidá 350 ml etheru nasyceného kyselinou sírovou a potom 33 ml diethylaminu. Reakční směs se potom míchá po dobu 20 minut, načež se odstředí vykrystalizovaná diethylaminová sůl kyseliny 2-(2tritylamino-4-thiazolyl) -2-met hoxyiminooctové. Tato sůl se dvakrát promyje 30 ml směsi dioxan-ether, přičemž se získá 62,6 g uvedené soli.

Filtrát se zahustí až do sirupovité konsistence а к takto zahuštěnému filtrátu se přidá dva a půl litru etheru nasyceného kyselinou sírovou. Reakční směs se míchá a potom odstředí. Získá se 110,3 g diethylaminové soli. Získaný produkt má konfiguraci syn.

Příklad6

Kyselina 3-acetoxymethyl-7- [ 2- (2-amino-4-thiazolyl) -2- (methoxyimino) acetamido ] -3-cefem-4-karboxylová g produktu, získaného v příkladě 5, se přidá ke 180 ml 50% vodného roztoku kyseliny mravenčí teplému 50 °C. Reakční směs se potom míchá při teplotě 50 °C po dobu 20 minut, načež se odstředí vytvořený trifenylkarbinol. Přidá se 180 ml ethanolu a provede se zahuštění к suchu za sníženého tlaku. Zbytek se extrahuje směsí 100 ml vody a 20 ml ethanolu, načež se provede opětovné zahuštění. Zbytek se louží 100 ml vody a po 15ti minutovém míchání při teplotě 15 °Č, odstředění a promytí vodou a potom, etherem se získá 15,6 g požadovaného produktu.

Tento produkt je identický s produktem, získaným v příkladě 4.

P ř í к 1 a d 7

Sodná sůl kyseliny 3-acetoxymethyl-7-[2- (2-amino>-4-thiazolyl) -2- (methoxyimino ] acetamido]-3-cefem-4-karboxylové

45,55 g kyseliny 3-acetoxymethyl-7-[2-(2-amino-4-thiazolyl) -2- (methoxyimino) acetamido ] -3-cefem-4-karboxylové, získané postupy, popsanými v příkladech 4 nebo 6, se přidá ke 100 ml destilované vody. К takto vzniklé směsi se postupně přidá 8 g hydrogenuhličitanu sodného a okolo 20 ml ethanolu.

Potom se opět přidá ethanol v množství 80 ml a 4,5 g aktivního uhlí. Vzniklá směs se míchá po: dobu 5 minut. Potom se provede zfiltrování, propláchnutí ethanolem a zahuštění к suchu za vakua. Zbytek se extrahuje 100 ml ethanolu a po zahuštění к suchu se zbytek rozpustí ve 100 ml methanolu. К takto vzniklému roztoku se přidají dva litry acetonu a po intenzívním· míchání, odstředění, opláchnutí acetonem a etherem a po vysušení za vakuo se získá

43.7 g bílého produktu, který na vzduchu hydratuje к získání celkové hmotnosti 45,2 gramu.

[a]_D = -I- 55° + 2° (0,8 % vody)

Analýza: vypočteno:

40,24 % C, 3,38 % H, 14,67 % N, 13,43 % S,

4,81 % Na;

nalezeno:

40,3 % C, 3,8 % H, 14,4 % H, 13,3 % S,

4,84 % Na.

Získaný produkt má konfiguraci syn. NMR-spektrum: (60 MHZ D₂O) p. p. in.:

2,01 (COCH₃) dublet při 9,53

J = 8 HZ (NHCO)

6,75 (thiazolový proton).

Příklad 8

Kyselina 3-acetoxymethyl-7[ 2- (2-tritylamino-4-thiazolyl )-2-/( 2-pr openyl) oxyimino/acetamidoi] -3-cef em-4-karboxylová

Stupeň A

Ethyl- [ 2- (2-amino-4-thiazolyl )-2-/( 2-propenyl Joxyimino·/ ] acetát

a) 9,7 g ethyl-(2-hydroxyiminO'-4-chloracetyl)acetátu, 30 ml acetonu a 9,15 ml 3-jódpropenu se ochladí v ledové lázni, načež se к takto ochlazené směsi přidá 27,5 ml 2 N roztoku hydroxidu sodného a reakční směs se potom nechá stát při teplotě okolí po dobu dvou a půl hodiny.

b) К reakční směsi se přidá 3,8 g thtomočoviny, načež se reakční směs zahřívá na teplotu 60 °C po· dobu 15 minut a potom ještě po dobu 45 minut při teplotě okolí. Aceton se oddestiluje a přidá se imethylenchlorid, voda a uhličitan draselný. Po míchání, dekantaci, reextrakci methylenchloridem, vysušení a zahuštění к suchu se získá 9,75 g zbytku, který se chrcmatografuje na kysličníku křemičitém za použití etheru jakožto elučního činidla; izoluje se

2.7 g produktu, který se převede do isopropyletheru. Vyloučené krystaly se odstředí, propláchnou a vysuší. Získá se 783 mg požadovaného produktu.

Teplota tání produktu je 100 °C.

Stupeň В

Ethyl-[ 2- (2-trity lamino-4-thiazólyl )-2-/(2propenyl) oxyimino/ ] acetát

Smísí se 511 mg produktu, připraveného ve stupni A, 0,92 ml dimethylformamidu,

1,8 ml methylenchloridu a 0,29 ml trlethylaminu. Takto získaná směs se ochladí na teplotu —15 °C, načež se к ní přidá 615 mig tritylchloridu. Po jedenapůlhodinovém stání této směsi při okolní teplotě se přidá 1N kyselinla chlorovodíková v množství 2 ml a potom 5 mil vody. Po dekantaci, vysušení a zahuštění к suchu se získá 1,28 g surového produktu.

Získaný produkt má konfiguraci syn.

Stupeň C

Kyselina 2- (2-tritylamlno-4-thiazoilyl) -2-/ (2-propeny 1) oxyimino/octová

Směs 1,28 g produktu, získaného ve stupni B, 6,2 ml dioxanu a 3 ml 2 N roztoku hydroxidu sodného se zahřeje na teplotu 120 °C. Tato směs se potom zahřívá к varu pod zpětným chladičem po dobu jedné hodiny. Vykrystalizuje sodná sůl, která se odstředí, promyje směsí ether-dioxan a vysuší, přičemž se izoluje 805 mg produktu.

Uvedený produkt se převede do 10 ml methylenchloridu a 3 ml 1 N kyseliny chlorovodíkové, načež se získaná směs míchá až к rozpuštění. Po· dekantaci, vysušení, zahuštění к suchu, převedení do etheru, odstředění se izoluje 715 mg požadovaného produktu.

Teplota tání produktu je 170 °C. Získaný produkt má konfiguraci syn.

Stupeň D

Kyselina 3-acetoxymethy 1-7-( 2- (2-tritylamino-4-thiazolyl )-2-/ (2-propenyl) oxyimino/acetamido] -3-cefem-4-karboxylová

Smísí se 470 mg produktu, připraveného ve stupni C, 5 ml methylenchloridu a 130 mg dicyklohexylkarbodiimidu, načež tato směs přelije malým množstvím methylenchloridu a potom míchá jednu hodinu při teplotě okolí; po odstředění vytvořené dlcykloihexylmočoviny se filtrát ochladí а к němu se přidá pod atmosférou inertního plynu 136 mg kyseliny 7-aminocefalosporanové ve formě roztoku ve 2,4 ml imethylenchloridu a 0,14 ml triethylaminu. Reakční směs se ponechá stát při teplotě okolí po dobu jedné a půl hodiny, načež se přidá 1N kyselina chlorovodíková v množství 2 ml a voda; po míchání, dekantaci, promytí vodou, vysušení a zahuštění se získá 610 mg surového produktu.

Získaný produkt má konfiguraci syn.

Příklad 9

Kyselina 3-acetoxymethyl-7-[ 2- (2-amino-4-thiazioily 1) -2-/ (2-propeny 1 Joxyimino/acetamido ] -3-cef em-4-karboxylová

Směs 610 mg produktu, získaného v příkladě 8, a 3 ml 50% vodného roztoku kyseliny mravenčí se zahřívá na teplotu 60 stupňů Celsia po dobu 15 minut, načež se přidají 4 ml voidy; po míchání, odstředění trifenylkarbinolu, opláchnutí vodou, zahuštění za vakua, převedení do vody, odstředění a opláchnutí se získá 120 mg požadované kyseliny.

Teplota tání produktu je asi 160 °C.

Ultrafialové spektrum:

V ethanolu: max 236 nmí Ef¹ = 375 ε = 18 000 inflexe 252 nm E_t ¹ = 316 inflexe 295 nm! E^ = 138 ε = 6600

Ve směsi ethan-N/10 kyselina chlorovodíková:

max 263 nm E!¹ = 380 ε = 18 300 inflexe 280 nm Ej¹ = 317

NMR-spektrum (DMSO 90 MHZ) p. p. m.:

2,02 (OAc)

6,68 (thiazolový proton).

Získaný produkt má tedy konfiguraci syn.

Příklad 10

Kyselina 3-acetoxymethy 1-7-/2- (2-trity 1 amino-4-thrazolyl ) -2- (ethoxyimino) acetamjdo/-3-cefem-4-karboxylová

Stupeň A

Ethyl- [ 2- (2-amino-4-thiazoly 1) -2-ethoxyiminoíjacetát

a) 19,4 g ethyl-(χ-chlor-a-oxyiminoaceto)асе tátu se přidá к 60 ml acetonu a 14,3 ml diethylsulfátu. Tato směs se potom, ochladí na ledoivé lázni, načež se к ní přidá během 30 minut 55 ml 2 N roztoku hydroxidu sodného. Reakční směs se potom míchá po do<bu 40 minut.

b) К reakční směsi se přidá 7,6 g thiomočoviny, načež se směs zahřívá na teplotu 55 °C po* dobů 20 minut. Dále se provede odehnání acetonu, převedení do octanu ethylnatého, přidání 6,9 g uhličitanu draselného, míchání, dekantace, reextrakce ethylacetátelm, vysušení a zahuštění к suchu. Izoluje se 17,4 g zbytku, který se chrcmatografuje na kysličníku křemičitém za použití etheru jakožto elučního činidla. Po převedení izolovaného produktu do isopropyletheru, odstředění, promytí a vysušení se získá 2,8 g požadovaného produktu. Teplota tání produktu je 129 °C.

Získaný produkt má konfiguraci syn.

Stupeň В

Ethyl- [ 2- (2-tritylamino-4-thiazolyl) -2-ethoxy imino’ ] acetát

Pod inertní atmosférou se smísí 3,16 g prodůktu, získaného ve stupni A, 6 ml bezvodého dimethylformamidu, 12 ml methylenchloiridu a 1,89 ml triethylaminu. Takto získaná směs se ochladí na teplotu —15 ^aC а к takto ochlazené směsi se potom přidá 2,98 g tritylchloridu. Reakční směs se nechá v klidu po dobu půl hodiny, přičemž teplota stoupne na 10 °C; potom, se směs udržuje po dobu tří a půl hodiny při teplotě okolí. Přidá se 13 ml 1 N kyseliny chlorovodíkové a provede se dekantace, promytí kyselinou chlorovodíkovou (1N) a vodou. Poi extrakci methylenchloridem, vysušení a zahuštění к suchu se získá 7,89 g surového produktu.

Získaný produkt má konfiguraci syn.

Stupeň C

Kyselina 2- (2-tritylamino-4-thiazolyl) -2ethoxyiminooctová

Směs 7,89 g produktu, získaného ve stupni B, 4.0 iml diolxanu a 19,5 ml 2 N roztoku hydroxidu sodného se zahřívá na teplotu 110 °C po dobu jedné hodiny. Provede se odstředění, promytí směsí ether-dioxan a potoim samotným etherem a vysušení. Získá se 6,25 g sodné soli, která se převede do 60 ml methylenchloridu a 20 ml 1N: kyseliny chlorovodíkové; obě fáze se míchají, přidá se 20 ml methanolu a provede se dekantace, opětovné promytí vodou, reextrakce směsí methylchlorid-methanol, vysušení a zahuštění; izoluje se 5,85 g kyseliny 2- (2-tritylamino-4-thiazolyl) -2-ethoxyiminooctové v čistém stavu.

Získaný produkt má konfiguraci syn.

Stupeň D

Kyselina 3-acetoxymethyl-7-[2-(2-tritylamino-4-thiazolyl )-2-( ethoxyimino·) acetamido ] -3-cef em-4-karboxylová

3,43 g kyseliny 2-(2-tritylamino-4-thiazolyl)-2-ethO'xyiminooctové, připravené ve stupni C, se suspenduje ve 34 ml methylenchloridu, načež se rezultující suspense ochladí а к takto ochlazené suspenzi se přidá 970 mg dicyklohexylkarbodiimidu. Po promytí methylenchloridem a jednohodinovém míchání při okolní teplotě se odstředí dicyklohexylmočoVina.

Filtrát sie ochladí na teplotu —20 °C, načež se к ochlazenému filtrátu přidá najednou roztok 1,02 g kyseliny 7-aminocefalosporanové v 18 ml methylenchloridu a 1,06 ml triethylaminu, ochlazený na teplotu —20 stupňů Celsia.

Reakční směs se nechá během jedné a půl hodiny ohřát, načež se přidá 1,8 ml kyseliny octové; po přidání 9 . ml 1 N kyseliny chlorovodíkové, míchání, dekantaci, promytí vodou, extrakci methylenchloridem, vysušení a · zahuštění se získá 4,56 g požadovaného produktu.

Získaný produkt má konfiguraci syn.

Příklad 11

Kyselina 3-acetoxymethyl-7- [ 2- (2-amino-4-thiazolyl) -2- (ethoxyimino) acetamido ] -3-cefem-4-karbo<xylová

4,56 g produktu, získaného v příkladě 10, se přidá ke 23 ml 50% vodného roztoku kyseliny mravenčí a takto získaná směs se zahřívá na teploitu 55 °C po dobu 15 · minut. Reakční sm,ěs se potom zředí vodou (30 ml) a odstředí se trifenylkarbinol. Po zahuštění filtrátu k suchu, převedení do· vody, ' míchání, odstředění, promytí a vysušení se získá 116 mg nečistého produktu. Zahuštěním· filtrátu se získá druhý podíl krystalického produktu v množství 674 mg; celkem se tedy získá 790 mg produktu.

Provede se následující čistění:

1,063 g surového· produktu se rozetře s 5 ml vody, načež · se takto vzniklá směs zahřívá na teplotu 70 °C po dobu 5 minut, potom se ochladí, ·opět míchá po· dobu půl hodiny, načež se pevný podíl odstředí a vysuší k získání 815 mg vyčištěného produktu. Těchto 815 mg vyčištěného proiduktu se převede do 2 ml vody a 3 ml acetonu, směs se mírně zahřeje, pevný podíl se odstředí, přidá se voda v množství 3 ml, směs se zahřeje na teplotu 60 °C, aceton se odežene probubláním dusíkem, vytvořená zrnka se odstředí, propláchnou vodou a potom etherem k získání 438 mg ' požadovaného produktu.

Analýza: Pro vypočteno:

43,49 %· C, 4,08 · % H, 14,92 % N, 13,66 % S; nalezeno:

44,5 % CJ, 4,,4 % H,· 14,8 % N, 13,3 % S. Získaný produkt má konfiguraci syn.

NMR-spektrum (60MHZ DMSO) p. p. m.:

2,05 (OAc),

6,75 (proton thiazolového kruhu).

Příklad 12

39.8 g ethyl-(2-acetyl-2-hydroxyímino· )acetátu se přidá ke 200 ml čistého acetonu. . Takto· získaná směs se ochladí na lázni s ledem a k ochlazené směsi se přidá 52 gramů uhličitanu draselného a potom. během půl hodiny 25 ml 2-jódpro-panu. Směs se potom míchá po dobu dvou hodin, přidá se 800 ml vody a 500 ml methylenchloridu a . po provedení dekantace, reextrakce methylenchloridem, vysušení, odstředění a zahuštění se izoluje 41,5 g požadovaného produktu.

Stupeň B ’

Ethyl- [ 4-br om-2- (1-methylethoxyimino) acetyl] acetát

41,5 g produktu, získaného v předcházejícím stupni, se přidá ke 190 m-l ' methylenchloridu, . obsahujícímu stopy kyseliny paratoluensulfonové. Takto získaná směs · se míchá, načež se k ní přidá . během jedné hodiny při'· teplotě okolí roztok 11,9 ml bromu v 50 ml methylenchloridu. Po míchání, přidání ledové vody, dekantaci, reextrakci methylenchloridem, opětovném promytí ledovou vodou, vysušení a zahuštění se izoluje 55 g požadovaného produktu.

Stupeň C

Ethyl- [ 2- (2-amino-4-thiazoly 1) -2- (1-methylethoxyimino) jacetát

14.9 g thiomočoviny se přidá k 55 ml ethanolu a 105 ml vody, načež se k takto vzniklé směsi přidá během 40 minut roztok 55 g produktu, připraveného· ve· stupni B, v 55 ml ethanolu. Směs se míchá po dobu dvou hodin a třiceti minut při teplotě okolí, načež se k ní přidá 220 ml 10% vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného; získaná směs se míchá a po odstředění, promytí a vysušení se izoluje 42,15 g surového produktu, který · se chromatografuje· na kysličníku křemičitém za použití etheru jakožto e-lučního činidla; frakce bohaté na požadovaný produkt se jímají, zahustí, vzniklé krystaly se louží isopropyletherem·, odstředí a promyjí k získání 10,75 g požadovaného· produktu.

Získaný produkt má konfiguraci syn.

Stupeň D

Ethyl- (2- (2-tritylamino-4-thiazoly 1 ) -2- (1-methylethoxyimino) ] acetát

Kyselina 3-acetoxymethoxy-7 [ 2- [ 2-tritylamino-4-thiazolyl) -2- (l-methylethoxyimino jacetamido: ] -3-cefem-4-karboxylová

Stupeň A

Ethyl-[ 2-acetyl-2- (1-methylethoxyimino) ] acetát g produktu, získaného ve stupni C, se smísí s 20 ml bezvodého dimethylformamidu, 40 ml methylenchloridu a 6,2 . ml triethylaminu. Rezultující směs se ochladí, načež se k ní pomalu přidá 13,2 g tritylchloridu; získaná směs se míchá po· dobu dvou a půl hodiny a potom se k této směsi přidá 43 ml normální · kyseliny chlorovodíkové, načež se po míchání, dekantaci, promytí 40 ml vody, extrakci methylenchloridem, vysušení, odstředění a zahuštění к suchu získá 27,7 g požadovaného produktu. Získaný produkt má konfiguraci syn.

Stupeň E

Kyselina 2- (2-tritylamino-4-thiazolyl ) -2- [ 1-methylethoxyimino) octová

Směs 27,7 g produktu, získaného ve stupni D, 150 ml dioxanu a 65 ml 2 N roztoku hydroxidu sodného se zahřívá к varu pod zpětným chladičem po dobu dvou hodin. Vykrystalizuje sodná sůl, která se po ochlazení směsi odstředí, promyje směsí ether-dioxan (1 : 1) a vysuší к získání 16,85 gramu surové sodné soli.

15,9 g této sodné soli se rozpustí v 15,9 g dimethylformamidu, 100 ml vody a asi 500 ml methanolu. К takto získanému roztoku se potom přidá 30 ml 2 N roztoku kyseliny chlorovodíkové, načež se odežene methanol; po zředění vodou, odstředění, promytí a vysušení se 9,8 g získaného; viskózního produktu převede do 220 ml směsi methylenchloridu a methanolu (50:50) a po zahuštění к suchu, převedení do etheru, oddělení vrstev, odstředění krystalů, promytí a vysušení se získá 4,9 g požadované kyseliny.

Teplota tání produktu je 170 °C.

Příprava analytického vzorku:

300 mg surového* produktu se rozpustí ve 2 ml methylenchloridu a 1 ml methanolu, roztok se potom zředí vodo-u a methylenchloridem, načež se po míchání, odstředění krystalů, promytí methylenchloridem a vo- . doiu a vysušení izoluje 230 mg čistého produktu pro* analýzu.

Analýza:

vypočteno:

68,77 % C, 5,34 % H, 8,91 % N, 6,8 % S; nalezeno:

68,6 %. C, 5,5 % H, 8,8 % N, 6,8 % S.

Získaný produkt má konfiguraci syn.

Stupeň F

Kyselina 3-acetoxymethyl-7- [ 2- (2-tritylamino-4-thiazoly 1) -2- (1-methylethoxyimino) acetamiidio]-3-cef em-4-karboxylová

4,89 g kyseliny, získané ve stupni E, se pod atmosférou argonu přidá к 13,5 ml dimethylformamidu. Po rozpuštění se vzniklý roztok ochladí na lázni s ledem, načež se к němiu přidá 1,62 g dicyklohexylkarbodiimidu v 16 ml methylenchloridu. Vykrystalizuje dicyklohexylmočovina. Směs se potom promíchá na lázni s ledem a po od středění, promytí methylenchloridem a vysušení se izoluje 1,424 g dicyklohexylmočoviny. Po ochlazení na lázni methanol— —led se přidá roztok 1,41 g kyseliny 7-aminocefalosporanové ve 30 ml methylenchloridu a 1,45 ml triethylaminu.

Směs se míchá po dobu tří hodin při teplotě okolí, načež se к ní přidá 20 ml normální kyseliny chlorovodíkové a po míchání, dekantaci, reextrakci methylenchloridem, vysušení a odstředění se získá 9,05 g směsi požadovaný produkt — výchozí produkt.

Po převedení do methylenchloridu, naočkování, krystalizaci za míchání se vzniklé krystaly odstředí, promyjí a vysuší к získání 1,6 g čistého původního produktu; po zahuštění к suchu se zbytek převede do isoprcpyletheru za intenzivního míchání, načež se izoluje 4,91 g nerozpustného viskozního produktu, který je požadovaným produktem.

Získaný produkt má konfiguraci, syn.

Příklad 13

Kyselina 3-acetoxymethyl-7- [ 2- (2-amino-4-thiazoly 1 )-2-( 1-methy lethoxyimino) acetamido]-3-cefem-4-karboxylová

4,91 g surového produktu, získaného v příkladu provedení 12, se přidá к 30 ml 50% vodného roztoku kyseliny mravenčí. Rezultující směs se míchá na vodní lázni teplé 60 °C, potom zředí vodou a po odstředění vytvořeného trifenylkařbinolu, promytí vodou a vysušení se izoluje 1,39’ g trifenylkarbinoilu. Po> zahuštění к suchu, převedení do vody, odstředění, promytí vodou a vysušení se získá 800 img požadovaného produktu.

Vzorek pro analýzu se získá rozpuštěním 972 mg surového produktu ve 4 ml methanolu, roztok se zředí 20 ml etheru, nerozpustný podíl se odstředí, promyje a vysuší к získání 404 mg požadované čisté kyseliny.

Teplota tání produktu je 200 °C.

Analýza: Pro vypočteno: 44,71% C, 4,38 % H, 14,48 % N, 13,26 % S; nalezeno *

44'5 % C, 4,5 % H, 14,1 % N, 13,2 % S. Získaný produkt má konfiguraci syn.

NMR-spektrum (60 MHZ DMSO) p. p. m.:

2,01 (CH₃CO);

dublet při 9,46 J 8 Hz (CONH);

6,7 (proton thiazolového kruhu).

Příklad 14

Kyselina 3-acetoxymethyl-7- [ 2- (2-trity 1amino-4-thiazolyl) -2-ethoxyiminoacetamido]-3-cefem-4-karboxylová

Stupeň А

Ethyl- [2-( 2-tritylamino-4-thiazolyl) -2-hydroxyiminojacetát, isomer anti

11,5 g ethyl-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-hydroxyimlnojacetátu (isomer anti), připraveného ve stupni A příkladu 1, se přidá к 90 ml bezvodého dimethylformamidu, načež se к této směsi přidá 24 ml trlethylaminu. Potom se přidá po malých dávkách a během půl hodiny 47,6 g tritylchloridu a směs se nechá při samovolném zahřívání stát po dobu dvou a půl hodiny. Dále se přidá 150 ml 2 N kyseliny chlorovodíkové a 600 ml vody. Směs se míchá po· dobu 15 minut, třikrát rozetře s etherem, převede do směsi methanolu, triethylamlnu a vody a míchá. Po odstředění, promytí a vysušení se izoluje 60,2 g požadovaného· produktu.

3,4 g surového produktu se rekrystalizuje ze směsi methylenchloridu a methanolu, přičemž se získá čistý produkt v množství 3 gramů.

Teplota tání produktu je 260 °C.

Stupeň В

Ethyl- [ 2- (2-tritylamino-4-thiazolyl) -2-ethoxyimínojacetát, ísomer anti

11,5 g produktu, získaného v předcházejícím studní A, a 5,85 g uhličitanu draselného se přidá к 25 ml bezvodého dtoethylformamiidu. Takto vzniklá směs se ochladí na teplotu 15 °C, načež se к ní přidá 16,7 ml ethylšulfátu a směs se nechá v klidu po dobu 4 hodin při teplotě okolí. Potom se к reakční směsi přidá 420 ml vody a 250 ml octanu ethylnatého, načež se po míchání, odstředění, loužení ethanolem, krystalizací, promytí, rozetření a vysušení se získá 6,6 g požadovaného produktu.

Teplota tání produktu je 165 °C.

Tento produkt může být rekrystalizován následujícím! způsobem:

797 mg uvedeného produktu se rozpustí ve směsi methylenchloridu a ethanolu (50 : : 50), načež se po odstředění, zahuštění к odpaření methylenchloridu krystalizací, odstředění, promytí a vysušení se izoluje 596 mig čistého produktu.

Stupeň C

Kyselina 2- (2-tritylamino-4-thiazolyl)-2-ethoxyiminooctová, ísomer anti

7,29 g produktu, připraveného ve stupni B, se přidá ke 45 ml dioxanu a 9 ml 2 N roztoku hydroxidu sodného. Takto získaná směs se zahřívá na vodní lázni za míchání na teplotu 50 °G po dobu jedné hodiny a 50 minut, načež se ochladí a naočkuje ke krystalizací v ledové vodě; potom se provede odstředění, promytí; přitoim se získá

4,2 g sodné soli. Tato sůl še louží 50 ml methylenchloridu, 40 ml vody a 11 ml normální kyseliny chlorovodíkové a po míchání, dekantaci, reextrakci, promytí, vysušení, odstředění a zahuštění к suchu se zbytek převede do 50 ml etheru a směs se po promíchání odstředí, načež se oddělené krystaly promyjí etherem к získání 3,27 g požadovaného· produktu.

Rezultující produkt taje za rozkladu při teplotě asi 200 °C.

NMR-spektrum (60 MHZ CDC1₃) p. p. m. =

7,66 (proton thiazolového kruhu),

7,36 (proton tritylové skupiny).

Stupeň D

Kyselina 3-acetoxymethyl-7-[2-(2-tritylamino-4-thiazolyl) -2-eťhoxyimlnoacetamido]-3-cefem-4-karboxyIová, isomer anti

4,1 g kyseliny, získané v předcházejícím stupni C, se přidá pod atmosférou argonu к 36 ml tetrahydrofuťanU, 27 ml methylenchloridu a 0,99 ml N-methylmíorfolinu. Takto získaná směs se ochladí na teplotu —20 stupňů Celsia, načež se к ní po kapkách přidá 1,17 ml isobUtylchlorofoirmiiátu. Reakční směs se nechá tři minuty při uvedené teplotě, načež se ochladí na teplotu —35 stupňů Celsia; к takto ochlazené směsi se přidá roztok 2,45 g kyseliny 7-aminocefalosporandvé ve 4,5 ml methylenchloridu a

2,52 ml triethylaminu. Reakční směs se potom nechá stát při samovolném zahřívání směsi po dobu dvou a půl hodiny, načež se odeženou rozpouštědla.

Po převedení zbytku do směsi methylenchloridu a vody se přidá normální kyselina chlorovodíková к dosažení hodnoty pH 1 až

2. Po extrakci methylenchloridém·, promytí, vysušení, odstředění, koncentraci, převedení do octanu ethylnatého, zředění isopropyletherem, míchání, odstředění, promytí a vysušení se získá 4,87 g požadovaného produktu (isoimer anti).

Čistění produktu se provádí následujícím způsobem:

4,87 g výše uvedeného produktu se rozpustí v 10 ml octanu ethylnatého za zahřívání, načež se získaný roztok zředí isopropyletherem, míchá a odstředí a po promytí a vysušení pevného podílu se získá 4,53 g vyčištěného produktu.

Příklad 15

Kyselina 3-acetoxymethyl-7-[ 2-(2-amino-4-thiazolyl) -2-ethoxyiminoacetamido] -3-cefem-4-karboxylová, isomer anti

4,27 g vyčištěného produktu, získaného v příkladě 14, se přidá к 20 ml vodného roztoku kyseliny mravenčí (50 : 50). Takto získaná směs se zahřívá na vodní lázni na teplotu 60 °C po dobu 20 minut, načež se ochladí a zředí vodou. Potom se provede desetiminutové míchání, odstředění trifenylkarbinolu a promytí vodou к získání 1,44 g produktu. Přidá se ethanol a směs se zahustí za vakua. Zbytek se převede do ethanolu, opět se provede zahuštění za vakua a ke zbytku se přidá 30 ml vody, načež; se směs míchá po dobil jedné hodiny na lázni s ledem. Po odstředění, promytí vodou a vysušení se získá 2,06 g požadovaného produktu.

Produkt se čistí následujícím způsobem:

2,06 g výše uvedeného produktu se rozpustí v 5 ml vodného roztoku hydrogenuhličítanU (10% roztok) a 5 ml vody. Po. od» středění zákalu a promytí vodou se po kapkách přidá koncentrovaná kyselina mravenčí к dosažení hodnoty pH 3 až 4; po odstředění krystalů, získaných po dvanácti hodi» novém klidu při teplotě okolí, promytí vodou a vysušení se získá 1,73 čistého, produktu.

Tento produkt taje za rozkladu při tep-, lotě asi 200 °C.

NMR-spektrumi (60 MHZ, DMSO) p. p. m. =

2,04 (CH₃CO);

7,5 (proton diazolového kruhu).

Příklad 16

Kyselina 3-acetoxymethyl-7-[2-(2-tritylamino-4-thiazOilyl )-2-( 1-methylethoxyimino) acetamido ] -3-cefem-4-karboxylová, isomer anti

Stupeň A

Ethyl-[ 2- (2-trltylamino-4-thiazolyl )-2- (1-methylethoxyimino) jacetát, isomer anti

Pod atmosférou argonu se smísí 6,86 ethyl- (2- (2-tritylamino-4-thiazolyl) -2-hydroxyíminojacetátu (isomer anti), připraveného podle stupně A příkladu 14, 3,51 g uhličitanu draselného 15 ml dimehylformamidu a 7,7 ml Isopropyljodidu. Směs se potom nechá v klidu po dobu čtyř a půl ho- • diny, přidá se 250 ml destilované vody a 150 ml octanu ethylnatého, načež se po míchání, dekantaci, promytí, reextrakci octanem ethylnatým, vysušení, odstředění, za- • huštění к suchu, převedení do ethanolu, naočkování ke krystalizaci, odstředění se získá 3,26 požadovaného produktu.

Teplota tání rezultujícího produktu je 182 °C.

Stupeň В

Kyselina 2-(2-tritylamino-4-thlazolyl)-2-(1-methylethoxyimino) octová, isomer anti

6,8 g produktu, získaného ve stupni A, se smísí se 41 ml dioxanu a 8,15 ml 2 N roztoku hydroxidu sodného. Takto získaná směs se zahřívá na vodní lázni na teplotu 55 °C po. dobu dvou hodin, načež se ochladí а к takto ochlazené směsi se přidá 9,5 ml 2 N kyseliny chlorovodíkové (roztok má potom; pH — 2 až 3). Po; odehnání dioxanu, krystalizaci, zředění vodou, míchání, promytí, rozetření s etherem a vysušení se získá 5,87 požadovaného, produktu.

Rezultujícf produkt taje za rozkladu při teplotě 240 °C.

NMR-spektrum (CDC1₃ 60 MHZ) p. p. m. =

7.66 (proton thiazoíového kruhu);

7,31 (tritylová skupina).

Stupeň C

Kyselina 3-acetoxymeťhyl-7- [ 2- (2-tritylamino-4-thíazolyl) -2- (1-methylethoxyimino)acetamido]-3-cefem-4-karboxylová, isomer anti

5.66 g kyseliny, získané v předcházejícím stupni B, se přidá ke směsi 48 ml tetra¹hydrofuranu, 48 ml methylenchloridu a 1,32 ml N-methylmorfolinu. Takto získaná směs se zahřívá až к rozpuštění pevného podílu, načež se ochladí na teplotu — 20 °C а к takto ofchlazené směsi se přidá 1,56 ml isobutylchlorformiátu. Reakční směs se nechá stát po dobu 10 minut při teplotě mezi —20 až —10 °C, načež se ochladí na teplotu —35 stupňů Celsia а к takto ochlazené směsi se přidá najednou 3,26 g kyseliny 7-am!intocefalosporanové v 60 ml methylenchloridu a

3,36 ml bezvodého tríethylaminu. Směs se nechá ohřát, načež se míchá po dobu tří hodin a třiceti minut. Po· odehnání rozpouštědel, vytoužení octanem ethylnatým se po dosažení úplného rozpuštění roztok míchá, načež se zředí isopropyletherem; po odstředění., promytí a vysušení se získá 5,42 g požadovaného produktu.

Čistění tohoto produktu se provádí tak, že se 5,82 g produktu, který byl získán výše uvedeným, způsobem, rozpustí za tepla ve 20 ml octanu ethylnatého, načež se takto vzniklý roztok zředí 200 ml isopropyletheru a po vysušení se izoluje 4,82 g požadovaného produktu.

Příklad 17

Kyselina 3-acetoxymethyl-7- [ 2- (2-amino-4-thiazolyl)-2-(l-methylethoxyimino)acetamido]-3-cefem-4-karboxylOvá, isomer anti

3,62 g produktu, získaného v příkladě provedení 16, se přidá к 16 ml vodného roztoku kyseliny mravenčí (50 : 50). Takto získaná směs se potom zahřívá na teplotu 60 °C po dobu 20 minut, načež se ochladí a zředí 16 ml vody. Po míchání, odstředění vytvořeného trifenylkarbinOlu, promytí vodou, vysušení se získá 1,23 g produktu.

Provede se zahuštění к suchu za vakua,

3β převedení do· ethanolu, . který se potom· znovu odežene za vakua, převedení do vody, naočkování ke krystalizací, odstředění získané krystalicko-gumovité směsi, promytí vodou a vysušení se izoluje 1,68 g požadovaného· surového' produktu.

Čistý vzorek tohoto produktu se získá následujícím způsobem:

g uvedeného produktu se rozpustí v ml 10% roztoku hydrogenuhličitanu a 5 ml vody, načež se rezultující roztok míchá po dobu 10 minut. Potdm sei provede odstředění, propláchnutí vodou, přidání · kyseliny mravenčí až k dosažení hodnoty pH rovné 3, míchání na lázni s ledem· po · dobu jedné hodiny, odstředění, opláchnutí vodou, rozpuštění gumovitého· produktu v 10 ml ethanolu za tepla, ochlazení v ledové vodě, odstředění a promytí ethanolem a potom etherem· se . získá 748 mg vyčištěného produktu. Kromě toho· lze pozorovat tvorbu krystalů ve filtrátu, který se zředí .etherem, aniž by došlo· k vysrážení, načež se uvedené · krystaly . odstředí · a · promyjí .směsí ethanoi-ether. Tímto způsobem . se získá 177 mg čistého · krystalického produktu (isomer anti).

Teplota · tání tohoto produktu je 200 °C · (za rozkladu).

NMR-spektrum·· (DMSO 60 MHZ) p. p. m. = 7,46 · (proton thiazolového kruhu);

4,43 · (proton. terciární isopropylové skupiny).

Příklad 18

Kyselina 3-acetoxymethyl-7- [ 2- (2-tritylamino-4-thiazolyl )-2-( 2-propenyloxyiminoⁱ)acetamido)^3-cefem-4-karboxylová, isomer anti

Stupeň A

Ethyl- [ · 2- (2-tritylamino-4-thiazolyl )-2-(2-propenyloxyimino') jacetát, isomer anti

Pod atmosférou · argonu ·se smísí 6,86 g ethyl42-(2-trityaamim>4-thiazolyl)-2-hydroxyimino jacetát (isomer anti), připraveného postupem, popsaným ve stupni A příkladu 14, 3,51 uhličitanu draselného, 15 ml dimethylformamidu a 7 ml allyljodidu. Takto· získaná směs se · míchá po dobu pěti hodin při teplotě . okolí, načež se k ní přidá 250 ml vody a 150 -ml octanu ethylnatého. Po míchání, dekantaci, promytí, reextrakcí octanem ethylnatym, · . vysušení, odstředění, zahuštění k suchu, vyloužení ethanolem, · naočkování ke krystalizaci, ochlazení v ledové vodě, půlhodinové krys-alizaci za míchání a odstředění a promytí oddělených krystalů se· získá 4,72 g požadovaného· produktu.

Uvedený produkt se čistí následujícím způsobem:

215 mg výše uvedeného produktu se rozpustí ve 2 ml ethanolu a 2 ml methylenchloridu. Filtrát se zahustí a potom zředí ethanolem' a nechá krystalizovat v ledové vodě. Po .odstředění, promytí a vysušení-vyloiučených krystalů se získá 70 mg vyčištěného' produktu.

Teplota tání je 90 °C (paэ-ovi-á konsistence·), nad 160 °C je produkt tekutý.

Stupeň B

Kyselina 2- (2-tri-ylammo-4-thiazoly 1) -2(2-ptopenyloxyimino) octová, isomer anti

3,71 g produktu, získaného v předcházejícím stupni A, se smísí s 22 ml dioxanu a «

4,5 ml 2 N · roztoku hydroxidu sodného. Takto získaná směs se zahřívá na vodní lázni na teplotu. 55 °C po dobu 50 minut, načež se ochladí a k takto ochlazené směsi se· po- » tom přidá 5,25 ml · 2 N kyseliny chlorovodíkové k dosažení hodnoty pH rovné 2. Po odehnání dioxanu se získá gumovitý produkt, který se zředí vodou, ochladí v ledové vodě, odstředí, opláchne vodou, načež se třikrát rozetře· s. etherem. Získá se 2,85 g požadovaného1 produktu.

Teplota tání produktu je 198 °C (produkt taje za rozkladu).

NMR-spektru,m (CDC13 90 MHz) p. p. m. =

7,64 · (proton thiazolového kruhu);

7,27 (tritylový proton).

Stupeň C

Kyselina 3-acetoxymethy 1-7-[ 2- (2-trity 1aminod-thiazolyl) -2- (2-propenyloxyimino) acetamido) -3-cefem-4-karboxylová, isomer anti

2,82 g kyseliny, získané v · předcházejícím· stupni B, se přidá k 24 ml bezvodého· tettahydrofuranu a 24 ml methylenchloridu, · načež se po · rozpuštění přidá k rezultujícímu roztoku 0,66 ml N-methylmorfolinu. Směs se . ·potom ochladí na · teplotu —20 °C a · k takto ochlazené směsi se přidá 0,78 ml iso- · bu-ylchlorformiá-u.

Směs· se · míchá 3 minuty při teplotě —20 stupňů Celsia, načež se ochladí na, teplotu —35 °C a ke směsi se přidá roztok 1,63 g <

kyseliny 7-aminocefalosporanové ve 30 ml methylenchloridu a 1,68 ml -rie-hylam'inu. Směs se nechá ohřát, načež se odeženou rozpouštědla, zbytek se vylouží methylenchloridem· a normální kyselinou chlorovodíkovou. Po1 míchání, dekantaci, promytí, reextrakci, vysušení, odstředění, opláchnutí, zahuštění k suchu, vyloužení octanem ethylnatým, zředění isopropyletherem, míchání, odstředění a promytí se získá 3,08 g požadovaného· produktu.

Produkt se čísíí následujícím . způsobem:

20757S

3,59 g výše uvedeným způsobem získaného produktu se rozpustí v 15 ml octanu ethylnatého a po- zředění isopropyletherem, míchání, odstředění sraženiny a opláchnutí v isopropyletheru se izoluje 3,33 g vyčištěného produktu.

Příklad 19

Kyselina 3-acetoxymethyl-7- [ 2- (2-amino-4-thiazolyl) -2- (2-propenyloxyimino) acetaimido]-3-cefem-4-karboxylová, isomer anti

2,53 g produktu, získaného v příkladě 18, se přidá к 11,5 ml vodné kyseliny mravenčí (50 : 50). Takto získaná směs se potom zahřívá na teplotu 60 °C po dobu 20 minut, i načež se zředí vodou, ochladí na okolní teplotu a odstředí. Po· vysušení vytvořeného trifenylkarbinolu se získá 863 mg tohoto produktu. Matečné louhy se zahustí za > vakua, přidá se ethanol a po· odehnání ethanolu, převedení gumovitého produktu do 15 ml vody, odstředění, promytí vodou a vysušení se získá 1,275 g požadovaného produktu.

Tento produkt se čistí následujícím¹ způsobem:

1,63 g surového produktu se suspenduje v 15 ml ethanolu, načež se vzniklá suspenze zahřívá к varu pod zpětným chladičem a odstředí; po promytí ethanolem se izoluje 877 mg nerozpustného produktu. К filtrátu se přidá 20 ml etheru, nerozpustný podíl se odstředí, načež se po opláchnutí ve směsi ethanol-ether a vysušení izoluje 97 mg druhého podílu produktu. Filtrát se zahustí na poloviční objem, přičemž dojde ke krystalizaci produktu. Po odstředění, promytí a vysušení se izoluje 162 mg čistého· produktu (isomer anti).

Teplota tání produktu je 180 °C (pastovitá konsistence).

NMR-spektrum (MSO 60 MHz) p. p. m. ~

7,48 (proton thiazolového kruhu);

2,04 (proton acetylové skupiny).

Příklad 20

Kyselina 3-acetoxymethy 1-7- [ 2- (2-amino-4-thiazolyl )-2-methoxyiminoacetamid>o] -3-cefem-4-karboxylová, isomer syn

Stupeň A

Ethyl- [ 2- (2-chloracetamido-4-thiazolyl) -2-methoxyimino] acetát

45,8 g ethyl-[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminojacetátu (isomer syn), připraveného postupem, popsaným ve stupni A příkladu 3, se přidá к 200 ml methylenchloridu. Destiluje se ho· 20 ml к vysušení a pa ochlazení na teplotu 10 °C se přidá 50 ml pyridinu. Přidá se 41 g anhydridu kyseliny oetové a směs se mírně zahřívá až к rozpuštění pevného podílu. Směs se potom nechá 6 hodin pod atmosférou dusíku při teplotě 20 °C, načež se přidá 5 ml vody, směs se míchá a potom nalije do 300 ml 2 N kyseliny chlorovodíkové (ochlazené ledem). Po dekantaci, extrakci methylenchloridem, promytí vodou a roztokem hydrogenuhličitanu sodného, vysušení, vyčistění aktivním· uhlím, zahuštění se přidá 300 ml isopropyletheru. Produkt vykrystalizuje. Směs se zahustí až к získání hutné pasty a po· ochlazení ledem, odstředění, promytí a vysušení se získá 45,4 g produktu,

Teplota tání uvedeného produktu je 113 °C.

Cisty vzorek produktu se získá rekrystalizací ve směsi methylenchlorid/isopropylether.

Teplota tání vyčištěného produktu je 118 °C.

NMR-spektrum (CDC1₃ 60 MHz) t 7 o \=J Jj íc) (*) Й

0CH₃ (a) triplet se středem na 1,38 p. p. m. J = = 7 Hz;

(b) singlet 4,05 p. p. m.;

(c) kvadruplet se středem na 4,44 p. p. m. J - 7 Hz;

[ d) singlet 4,33 p. p. m.;

(e) singlet 7,27 p. p. m.;, (f) singlet 9,95 p. p. m.

Stupeň В

Kyselina 2-(2-cb.loracetamido-4-thiazolyl]-2-methoxyiniinooctová, isomer syn g produktu, získaného v předcházejícím stupni A, se přidá к 230 ml absolutního ethanolu. К takto získané směsi se při teplotě 20 °C a pod atmosférou dusíku přidá 30 ml čistého hydroxidu sodného·. Produkt se rozpustí a sodná sůl začne krystalizovat za zhoustnutí reakčního prostředí. Po 16 hodinách se krystaly odstředí a promyjí. Získaná sůl se rozpustí ve vodě, zmrazí, přidá se к ní 100 ml 2 N kyseliny chlorovodíkové, nasytí se chloridem sodným a extrahuje octanem ethylnatým obsahujícím 10 % ethanolu. Poi vysušení, převedení přes aktivní uhlí, destilaci za vakua, odstranění vody benzenem, převedením do methylenchlori207575 du, zmrazení, odstředění, promytí a vysušení se získá 34,5 g požadovaného produktu.

Teplota tání tohoto produktu je asi 200 °C.

Tento’ produkt se vyčistí rekrystalizací ve směsi aceton/isopropylether.

Analýza: Pra CsHfANaClS (277,68) vypočteno:

34,60 % C, 2,90 % H, 15,13 % N, 12,77 % Cl,

11,55 % S;

nalezeno:

34,81 % . C, 2,8 % H, 14,8 % N, 12,6 % Cl,

11,5 % S.

NMR-spektrum (DMSO 60 MHz) (e)^HY^ť_CH2^C1 (cl ícU ^N^0CH₃ (&>

(a) singlet 3,92 p. p. m.;

(b) singlet 4,38 p. p. m.;

(c) singlet okoloi 5 p. p. m.;

(d) singlet 7,58 p. p. m.;

(e) singlet 12,6 p. p. m.

Stupeň C

Kyselina 3-acetoxymethyl-7- [ 2- (2-chloracst amido-4-thiazolyl) -2-methoxyiminoacetamido]-3-cefem-4-karboxylová, isomer syn.

15,3 g produktu, získaného v předcházejícím - stupni B, se- přidá k 80 ml methylenchloridu. K takto·' získané směsi, ochlazené na 5 °C, se přidá 8 ml triethylaminu. , Při teplotě 0 °C a pod atmosférou dusíku se potom přidá 3,8 ml thionylchloridu a 26 ml methylenchloridu. Směs se nechá stát po dobu 15 minut při teplotě 0 °C, načež se k ní přidá 7 ml triethylaminu. Při teplotě , 0 stupňů Celsia a pod atmosférou dusíku se potom přidá 13,6 g kyseliny 7-aminocefalosporanové ve 100 ml methylenchloridu a 14 ml triethylaminu. Teplota reakční směsi se nechá stoupnout na 20 °C a směs se potom míchá po· dobu jedné hodiny. Takto získaný roztok se destiluje k suchu za vakua při teplotě 30 ' až ' 35 °C. Zbytek se rozpustí ve 250 m.l vody, roztok se převede přes aktivní uhlí, k takto, zpracovanému roztoku se · přidá 50 ml 2 N kyseliny chlorovodíkové. Sraženina se odstředí a promyje vodou.

Takto získaný surový produkt se suspenduje , v 80 ml ethanolu. Při teplotě 5 °C se přidá 7 ml triethylaminu. Potom se přidá za míchání a při teplotě 5 °C najednou 15 ml 4 N kyseliny sírové, načež po 15 minutách produkt vykrystalizuje. Krystaly se odstředí, promyjí ethanolem rozetřením, produktu s ethanolem- a potom etherem a vysuší za vakua k získání 18,6 g požadovaného produktu.

[os]n = +26° (±1°) Při konc. 1 % v dimethylformamldu.

NMR-spektrum- (DMSO 60 MHz)

O (c)

H-N-C-CHXt s-+n o —I--A ía >

(dl ^_OCH ^-^^сн,ос-сн₃ (Ы COJi O (a) singlet 2,03 p. p. m.;

(b) singlet 3,90 p. p. m.;

(c) singlet 4,38 p. p. m.;

(d) singlet 7,45 p. p. m.

Stupeň D

Kyselina 3-acetoxymethyl-7- [ 2- (2-amino-4-Шаг(Яу1)-2чmeťhoxyiminoa·cctam·idt ] --3-cefem-4-karboxylová, isomer syn

5,32 g kyseliny, získané v předcházejícím stupni, se suspenduje v 10,6 ml - - vody a 912 mg thiomočoviny. Při teplotě 20' °C se potom přidá 1 g hydrogenuhličitanu- draselného. Po)' rozpuštění se roztok míchá po dobu šesti hodin při teplotě 20 , °C pod· atmosférou dusíku. Po asi jedné a půl hodině započne vylučování gumovitého - produktu. Přidá se- 30: ml vody a 3 ml kyseliny mravenčí. Reakční směs se potom ochladí na teplotu °C. Po odstranění se produkt promyje vodou obsahující 10 ·% kyseliny mravenčí. Zbytek se rozpustí při teplotě asi 5 °C ve 30 ml vody, obsahující triethylamin. Při teplotě 5 °C se přidají 3 ml kyseliny mravenčí, načež se vyloučená sraženina odstředí, promyje rozetřením s vodou obsahující kyselinu mravenčí.

Tmavohnědý gumovitý produkt se oddělí. Vodné fáze se spojí a převedou přes aktivní uhlí. Získá se světle žlutý roztok, který se nasytí síranem· amonným. Vyloučená sraženina se odstředí, rozetře s vodou, odstředí a promyje znovu vodou k získání sraženiny A.

Matečné louhy se rovněž nasytí síranem amonným, což vede · k vyloučení sraženiny, která ses· odstředí a třikrát promyje k získání sraženiny B.

Sraženina A a sraženina B se spojí. Spojený podíl se převede do ethanolu, načež se získaná směs míchá po dobu jedné hodiny při teplotě 20 °C a potom· se· udržuje při teplotě 0 °C po dobu 16 hodin. Po · odstředění, promytí ethanolem a potom. etherem· a vysiušení za vakua se získá 3,47 g požadovaného produktu (isomer syn).

NMR-spektrum· (DMSO 60 MHz):

(a) singlet 2,03 p. p. m.;

(b) singlet 3,55 p. p. m.;

(c) dublet 5,19 p. p. m. J = 5 Hz (d) singlet 6,8 p. p. m.

Příklad 21

Dimethylaminová sůl kyseliny 3-acetoxymethyl-7- [ 2- ( 2-tritylamino-4--hiazolyl) -2-methoxyiminoacetamido ] -3-cefem.-4-karboxylové, isomer syn

Stupeň A

Ethyl-(2-acetyl-2-methoxyimino) acetát

4,69 kg ·ethyl-(2-acely--2-hydooιχyiminoacetyljacetátu (což odpovídá 4,21 kg čistého· produktu) se přidá k 21 litrům bezvoJ dého čistého acetonu. Při teplotě 20 až 25 stupňů Celsia se přidá 6,1 kg uhličitanu draselného. Vzniklá suspense· se míchá po· dobu 10 minut, načež se při teplotě 25 °C * přidá 3,72 kg dirnethylsulfátu. Reakční směs se míchá po dobu tří hodin při teplotě 20 až 25 °C. Získaná směs se nalije do 126 litrů demineralizované vody a extrahuje čtyřikrát 5 litry a potom 2 litry methylenchloridu. Potom se provede promytí 10· litry demineralizované vody, vysušení, odstředění, promytí 2 litry methylenchloridu¹ a destilace za vakua k získání 4,88 kg požadovaného produktu.

Rf = 0,7 (při chromatografii na tenké vrstvě silikagelu; eluční činidlo: methylenchlorid/ethylacetát· 9 : 1).

Získaný produkt je identický s produktem, získaným ve stupni a příkladu 3.

Stupeň B

Ethyl- (4-bromt- 2-те ttrox у rm inoac e ty i ) acetát

3,53 kg produktu, získaného ve stupni A, se přidá k· 18,6 litru methylenchloridu a 3,5 gramů kyseliny paratoluensulfonové. K rezultujícímu roztoku se během 30 minut a· při udržování teploty v rozmezí 22 °C + 1 °C přidá roztok 2,96 kg bromu v 3,5 litru methylenchloridu. Po· 15 minutách přidávání uvedeného roztoku lze pozorovat uvolňování kyseliny bromovodíkové. Reakční směs se míchá 45 minut při teplotě 22 °C, směs se přelije z nádoby doí nádoby a potom se· promyje dvakrát 14 litry ledové demineralizované vody.

Promývací vody · se dvakrát reextrahují 3,5 litru methylenchloridu. Po· vysušení, zfiltrování, promytí a destilaci za vakua· se získá 4,73 kg požadovaného· produktu.

Tento produkt je identický s· produktem, získaným ve stupni B příkladu 3.

Stupeň C

Ethyl- [ 2- (2-amino-4--hiazolyl) -2-methoxyimino] acetát, isomer syn

1,43 kg thiomočoviny se smísí s· 3,55 litru ethanolu a 8,1 litru demineralizované vody. Takto získaná směs se míchá po dobu 10 minut při teplotě 20 °C, načež se k ní přidá při teplotě 20 až 25 °C 4,730· kg produktu, připraveného.· ve stupni B, v 3,55 litru ethanolu. Směs- se míchá po dobu tří hodin při teplotě 20 až 25 °C, načež se ochladí na teplotu 15 až 20· °C a neutralizuje se na hodnotu pH = 71,6 litru amoniaku (184,6 g/1)·

Směs se míchá ještě 15 minut při teplotě 20 až 25 °C, načež se odstředí a promyje pětkrát 1,8 litru demineralizované vody. Získá se 2,947 kg požadovaného produktu.

čem pod atmoisférou dusíku a za· míchání. Již při teplotě 55 °C se dosáhne úplného rozpuštění.

Ke směsi udržované za varu pod zpětným chladičem a pod atmosférou dusíku se přidá 5,235 litru asi 2 N roztoku hydroxidu sodného. Dojde k rychlé krystalizaci. Reakční směs se míchá po· dobu jedné hodiny k varu pod zpětným chladičem a pod atmosférou dusíku. Potom se teplota sníží na 20 až 25 °C, načež se · tato teplota udržuje dvě hodiny. Po odstředění, čtyřnásobném promytí 2,1 litru ethanolu a vysušení se získá 4,02 kg požadovaného produktu.

Teplota · tání uvedeného produktu je 162 °C. Stupeň F

Získaný produkt je identický s produktem, získaným ve stupních A a C příkladu 3.

Stupeň D

Ethyl- [ 2- (2-tritylamino-4-th iazo· lyl) -2-rnethoxyi-minojacetát, isomer syn

3,41 kg produktu, získaného· v předcházejícím stupni C, se smísí se 17 litry methylenchloridu a 2,275 litru triethylaminu. Takto získaná směs se míchá po dobu 15 minut, načež se k ní přidá během· jedné hodiny za míchání a pod atmosférou dusíku při teplotě 20 až 25 °C 4,55 kg tritylchloridu. Směs se míchá po· dobu 20 hodin při teplotě 20 až 25 °C pod atmosférou dusíku, přičemž . dojde ke krystalizaci hydrochloridu triethylaminu.

Směs se promyje 10,2 litru 0,5 N kyseliny chlorovodíkové (ledové) a dvakrát 10,2 litru demineralizované vody (rovněž ledové). Promývací vody se reextrahují v sérii 1,7 litru methylenchloridu. Po vysušení, zfiltrování, opláchnutí · 1,7 litru methylenchloridu, a destilaci k suchu za vakua při teplotě nižší než 50 °C se získá 8,425 kg surového produktu.

Tento produkt se rozpustí při teplotě 20 až 25 °C v 8,4 litru methanolu, nfičež se přidá během jedné hodiny a , za míchání k podpoření · krystalizace 2,8 litru demineralizované vody. Směs se · potom· míchá ještě jednu hodinu, načež se provede odstředění, rozetření s dvakrát 1,7 litru methanolu s obsahem 25 % vody, vysušení pří teplotě 40 °C a· izolace· 7,165 kg požadovaného produktu.

Získaný produkt je identický s produktem získaným ve stupni B příkladu 3.

Stupeň E

Sodná sůl kyseliny 2-(2ttritylaminot4-thiazolyl J -2-^^^^íthoxyiminoacetamidooctová, isomer syn

4,175 kg produktu, · získaného· ve · stupni D, se smísí s 20,9 litru ethanolu. Tato· směs se potom· zahřívá k varu pod zpětným chladi

Kyselina 2- (2-tritylaminot4-thiazolyl) -2-methoxyiminooctová, isomer syn

500 g produktu, získaného v předcházejícím · stupni E (odpovídá 440 g suchého produktu), se smísí s 2,5 litru mehylenchloridu. Potom se během dvou minut přidá při teplotě 20 až 25 °C a za míchání pod atmosférou dusíku 2 litry asi jednonormální kyseliny chlorovodíkové. Směs· se míchá po dobu dvou hodin při teplotě 20· až 25 °C pod atmosférou dusíku. Chlormethylenová frakce se oddělí dekantací, načež se třikrát promyje· 2 litry demineralizované vody. Po reextrakci v sérii · jedním litrem methylenchloridu!, vysušení, přidání 25 g aktivního uhlí, odstředění, opláchnutí, destilaci k suchu se izoluje 481 g surového· · produktu. Tentoi produkt se převede do· 2,1 litru isopropylethéru. Po odstředění, promytí 420 ml isoproipyletheru (dvakrát) a vysušení za vakua do konstantní hmotnosti se získá 424,6 g požadovaného produktu.

Získaný produkt je identický s produktem, · získaným ve stupni C příkladu 3.

Stupeň G

Diethylaminová sůl kyseliny 3-acetoxymethyl-7- [ 2- (2-tritylammo'-4--hiazolyl )-2-methoxyiminoacetamido]-3-cefem-4-karboxylová, isomer syn

V kulaté baňce se smísí 200 g kyseliny

2- (2-tritylaminot4--hiazolyl) -2-metho^xyiminooctové, získané v předcházejícím· stupni F, s 1200 ml methylenchloridu. · Takto získaná směs se potom zahřívá k varu pod zpětným chladičem· pod atmosférou argonu, načež se za normálního tlaku oddestiluje 600 ml methylenchloridu. Teplota reakční směsi se· potom^! sníží na 18 až 20 °C a za této teploty se ke směsi přidá 54 g dicyklohexylkarbodiimidu v 54 ml methylenchloridu. Směs se míchá po dobu jedné hodiny při teplotě 18 až 20 °C pod atmosférou argonu, načež se přidá během 15 minut při uvedené teplotě roztok, připravený rozpuštěním· 61,4 g kyseliny 7-aminocefalosporanové v 900 ml methylenchloridu a 63 ml triethylaminu. Směs se míchá .po· dobu jedné a půl hodiny při teplotě 20 '°C (pH = — 6,5 až 7). Potom se ke směsi přidá 50 ml kyseliny octové, směs se míchá po dobu 15 minut při teplotě 20 °C a potom se odstředí za účelem odstranění výchozí kyseliny 7- amrnoc efalosporanové.

Provede se čtyřikrát opakované promytí 200 ml methylenchloridu. Organický roztok se třikrát promyje 400 ml demíneralizcvané vody a potom vysuší nad síranem hořečnatým. Po odstředění se provede promytí 200 ml methylenchloridu (dvakrát) a destilace k suchu za vakua, provedená pod argonem.

Suchý olejovitý extrakt · se rozpustí při teplotě 20 až 25 °C za míchání a pod atmosférou argonu v 700 ml dioxanu. Potom se za vakua a pod atmosférou argonu oddestiluje při teplotě nižší než 30 °C 300 ml směsi dioixxn-methylenchlorid. Teplota směsi se sníží na 20 °C + 2 °C, načež se přidá 500 ml etheru nasyceného kyselinou sírovou. Potom se přidá 52 ml diethylaminu. Asi po 10 minutách vykrystalizuje diethylaminová sůl kyseliny 2-[2-tritylamin^c^-4-thia^2^c^lyl) -2-methoxyiminooctová.

Směs se ponechá pod atmosférou argonu při teplotě 20 °C po· dobu jedné hodiny. Po· odstředění se· provede trojnásobné promytí 100 tol roztoku dioxanether nasycený kyselinou sírovou. Po vysušení izolované diethylaminové soli se získá 113,6 g této soli. Organický roztok se během 30 minut nalije za míchání do· 3,25 litru isopropyletheru. Směs se 15 minut míchá, načež se odstředí za vakua. Po· promytí 400 ml isopropyletheru (dvakrát) a vysušení za vakua se získá 182 g produktu, který je identický s produktem získaným v příkladě provedení 5.

Příklad 22

Kyselina S-acetoxymethylW-^-^-ammo-4-thiazolyl) -2-methoxyiminoacetamido] -3-cefem-4-karboxylová, isomer syn

182 g produktu, připraveného· v předcházejícím příkladě 21, se za míchání a pod atmosférou argonu při teplotě 28 až 30 °C přidá k 347 ml kyseliny mravenčí a 87 ml demineralizované vody. Dojde k úplnému rozpuštění a k vykrystalování trifenylkarbinolu. Směs se potom· míchá pod atmosférou argonu a při teplotě 28 až 30 °C po· dobu dvou a půl hodiny, načež se nalije během 15 minut za míchání do 1740 ml demineralizované vody a 847 g síranu amonného. Směs se míchá potom po dobu 30 minut. Po odstředění, dvojnáhobném· promytí 174 ml demineralizované vody a vysušení za vakua při teplotě 25 až 30 °C se získá 147 g směsi požadovaného produktu a trifenylkarbinolu.

Surový produkt se roztírá po dobu jedné hodiny při teplotě 18 až 20 °C' se 735 ml etheru nasyceného kyselinou sírovou. Po odstředění, dvojnásobném promytí 147 ml etheru nasyceného kyselinou · sírovou a vysušení při teplotě 25 až 30 °C se získá 89 g požadovaného produktu.

Tento produkt se suspenduje za míchání a pod atmosférou dusíku ve 445 ml ethanolu. Vzniklá suspenze se za míchání zahřeje na teplotu 45 až 50 °C a při těchto podmínkách se udržuje po dobu jedné hodiny. Potom·· se míchá · jednu hodinu při teplotě 18 až 20 °C. Po odstředění, dvojnásobném promytí 45 ml ethanolu a vysušení za vakua při teplotě 20 °C se získá 76,85 g požadovaného* produktu.

Tento produkt se · smísí s 230 ml kyseliny octové. Směs se míchá po dobu · 15 minut pod atmosférou dusíku, načež se k ní přidá 77 ml demineralizované vody. Potom· se k tomuto roztoku přidá asi 700 ml vody. Směs se míchá při teplotě 18 až 20 °C po dobu jedné· hodiny, · načež se k ní přidá během 10 minut asi 269 g síranu amonného; směs se· nechá s-tát po· dobu 15 minut, načež se· k ní přidá 3,85 g aktivního uhlí. Směs se potom· míchá po dobu· 15 minut, odstředí a promyje 77 ml demineralizované· vody obsahující 25 % kyseliny octové. Potem· se za míchání přidá při teplotě 18 až 20 °C 154 ml kyseliny mravenčí a kousek finálního produktu, načež se podpoří krystalizace škrábáním tyčinky o· stěnu nádoby. Směs se nechá za míchání a při teplotě 18 až 20 °C po dobu dvou hodin · a potom při teplotě 0 až 5 °C po dobu dvou hodin. Po· odstředění se provede· promytí (čtyřikrát) 77 ml demineralizované vody obsahující 5 % kyseliny mravenčí. Po, vysušení za vakua při teplotě 20 až 25 °C se získá 49,45 g produktu ve formě formiátu.

Uvedený formiát se za míchání suspenduje během jedné hodiny při teplotě 45 až 50 ^OC ve 250 ml ethanolu, načež se suspense ponechá jednu hodinu při teplotě 18 až 20 °C. Po· odstředění, promytí (dvakrát) 50 ml ethanolu· a vysušení nejdříve při teplotě 20 °C za vakua a potom 10 až 15 hodin při teplotě 35 °C se získá 45,45 g požadovaného produktu.

[a].D = +64,5° při konc. 0,5 % ve vodě obsahující 0,5 % hydrogenuhličitanu sodného*.

Získaný produkt je identický s produktem, získaným v příkladech 4, 6 a 20.

Příklad 2 3

Sodná sůl kyseliny 3-acetoxymethyl-7-[2-(2-amino-4-thiazclyl) -2-methoxyiminoacetam-idO'] -3-cefem-4-karboxylové v krystalické formě, isomer syn

19,8 g kyseliny 3-acetoxymethyl-7-[2-(2-amino-4-thiazolyl) -2-methoxyiminoacetamido]-3-ctfem-4-karboxyicvé (isomer syn), získané podle příkladu 4, 6, 20 nebo 22 v ml jednomolárního roztoku, ootanu sodného· v methanolu. Směs se nechá krystalizovat po dobu 35 minut při teplotě okolí, načež se k ní přidá během jedné hodiny 40 ml ethanolu. Po dvou a půl hodinovém. míchání na lázni s ledem, odstředění, dvojnásobném promytí 10 ml směsi methanol-ethanol (1 : lj, dvojnásobném promytí 10 ml ethanolu, dvojnásobném promytí 20 ml etheru, vysušení (2 hodiny při teplotě 45 °C za vakua) a konečném vysušení nad kyselinou. sírovou za vakua se získá 16,191 g požadovaného krystalického· produktu.

Při dodržení nepřítomnosti vzdušné vlhkosti se získá produkt s následujícími fyzikálními vlastnostmi:

H2O [Karl Fischer) = 0,2 %

Stanovení methanolu a ethanolu plynovou chromatografií:

Methanol 0,1 %

Ethanol 0,45 %

Analýza: Pjxj C^H^N^Na (477,5) vypočteno:

40,24 % C, 3,38 % H, 14,67 % N, 13,43 · % S,

4,81 % Na;

nalezeno:

39,9 % C, 3,5 % H, 14,5 % N, 13,1 % S, 4,8 % Na.

Produkt na vzduchu hydratuje.

Rentgenové spektrum (Debye Scherrer) umožňuje potvrdit krystalickou povahu získaného produktu.

K dosažení krystalizace požadovaného produktu je rovněž možné použít isopropanolu namísto ethanolu.

Příklad 24

Sodná sůl kyseliny 3-acetoxymethyl-7-[2- (2-amino-4-thiazolyl) -2~methoxyiminoacetamido]-3-cef em-4-karboxylové v krystalické formě, isomer syn

Stupeň A

Solvát kyseliny 3-acetoxymethyl-7-[2-(2-amino-4-thiazolyl) -2-methoxyiminoacetamido]-3-cef'em-4-karboxylové (isomer syn] a kyseliny mravenčí

87,2 g diethylaminové soli kyseliny 3-acetoxymethy^- [ 2- (2-tritylamino-4-thiazolyl)-2-meehoxyiminoacetamido.] -3-cef em-4-karboxylové, připravené postupem popsaným v příkladě 5, se v malých dávkách přidá do směsi 220 ml čisté kyseliny mravenčí a 220 ml vody. Rezultující směs se míchá po dobu 30 mi-nut při teplotě 50 °C, načež se ochladí a 30,1 g trifenylkarbinolu se .oddělí filtrací. Filtrát se nalije do 450 ml vody, načež se na uhlí odstraní lehký zákal a roztok se zahustí při teplotě 40 °C za· vakua až k vytvoření sraženiny. Přidá se 200 ml bezvodého ethanolu a provede se ochlaze ní ledem, filtrace, promytí · ethanolem a etherem a vysušení za vakua.

Získá se 31,1 g požadovaného· produktu.

Analýza: Pro C16H17N5O7S2, HCO2H, H2O (541,5) vypočteno:

39,3 % C, 4,08 % H, 13,48 % N, 12,34 ·% S , 3,46 % H2O;

nalezeno:

39.2 % C, 4,1 % H, 13,2 % N, 12,8 % S,

4,15 % H2O.

Stupeň B

Krystalická sodná sůl g solvátu, čerstvě připraveného postupem, popsaným ve stupni A, se· rozpustí v 75 ml methanolu, načež se k rezultujícímu roztoku přidají 3 g aktivního· uhlí. Po filtraci se za míchání přidá · 5 ml i-sop-ropanolu. Po^r 16 hodinách při teplotě 0 °C se vzniklé krystaly oddělí. Tyto krystaly se promyjí ethanolem a potom· etherem, načež se vysuší během dvou hodin za vakua· při teplotě 50 °C.

Získá se 7,95 g požadovaného produktu.

Po· krátkém vystavení produktu vzduchu se získá následující analýza:

Pro· C_ieH16N₅NaO7S2 . 1 H2O (495,5) vypočteno:

38,78 % · C, 3,66 % H, 14,14 ·% N, 4,64 % Na,

12,94 % S;

nalezeno:

38,6 %/o C, 3^,7 % 14 , 33,8 % N, 4,6 % Na,

13.2 % S.

Příklad 25

Sodná sůl kyseliny 3-acetoxymethylt7t[2t - (2-aπlino-4-thiazolyl) t2-methoxyl·mino.acetam.ido]-3-cefemt4-karboxylové v amorfní formě (isomer syn)

Stupeň A

Solvát kyseliny 3-acetoxymethylt7-[2t(2-am-ino-4-thiazolyl) -2-methoxyiminoacetamido.]-3tcefenl-4tkarboxylové (isomer syn] a ethanolu g solvátu s kyselinou mravenčí, získaného ve stupni A příkladu provedení 24, se rozpustí ve směsi 3 litrů ethanolu (96 proč) a 350 ml vody. Takto získaný roztok se zahustí za vakua k dosažení objemu 300 ml. Solvát započne krystalizovat během zahušťování. Směs se potom ochladí během jedné hodiny na lázni s ledem a zfiltruje. Po promytí malým množstvím ethanolu a vysušení za vakua při teplotě okolí · v pří207575

temnosti koncentrované kyseliny sírové se získá 44 g požadovaného produktu.

Analýza: Pro C₁₆H₁₇N₅O₇S₂ 0,8 mol C₂H₅OH (492,3) vypočteno:

42,94 % C, 4,46 % H, 14,23 % N, 13,02 % S; nalezeno:

43,0 % C, 4,4 % H, 14,1 % N, 12,9 % S.

Stupeň В

Amorfní sodná sůl g solvátu. s ethanolem, získaného ve stupni A, se přidá při teplotě 0 °C к 60 ml vody, načež se к takto získané směsi přidá za míchání 0,504 g hydrogenuhličitanu sodného rozpuštěného v 6 ml vody. Neutrální roztok se zfiltriuje a filtrát se bezprostředně lyofilizuje. Rezultující produkt se potom vystaví krátkému působení vzduchu.

Analýza: Pro C₁₆H|₀N_sNaO7S·,. 1,5 H₂O (504,47) vypočteno:

38,09 % C, 3,8 % N, 13,88 % N; nalezeno:

38,2 % C, 3,9 % H, 13,6 % N.

Příklad 26

Sodná sůl kyseliny 3-aceto-xymethyl-7-[2-

- (2-aminoi-4-thiazolyl) -2-methoxyiminoacetamida]-3-cefem-4-karboxylové v krystalické formě (isomer syn)

Ke 4,95 g kyseliny 3-acetoxymethyl-7-[2-

- (2-amina-4-thiazoly 1) -2-methoxyiminoacetamido) -3-cefem-4-karboxylové (isomer syn), získané podle příkladu 4, 6, 20 nebo 22, se přidá 5 ml ethanolu. К této směsi se potom- přidá za míchání na lázni s ledoven vodou. 10 ml jednomolárního- vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného. Po rozpuštění se přidá 15 ml ethanolu, načež se po zahuštění za vakua při 30 °C, vytoužení ethanolem a vysušení do konstantní hmotnosti získá prášek, který se převede doi 15 ml methanolu. Směs se naočkuje ke krystalizaci, načež se odstaví přes noc do ledničky. Izoluje se 3,407 g produktu v krystalické formě.

Příklad 27

Sodná sůl kyseliny 3-acetoxymethyl-7-[2-

- (2-amlno-4-thiazolyl )-2-methoxyim-inoacetamido]-3-cefem-4-karboxytové v krystalické formě (isomer syn)

0,5 g amorfní sodné soli, získané postupem, popsaným v příkladě 25, se rozpustí ve 2 mil miethianolu, načež se za míchání po malu přidá 0,25 ml n.-butanolu a siměs se ochladí v ledničce na teplotu asi 6 °C. Krystaly se promyjí malým množstvím- chladného methanolu a suší 3 hodiny za vakua při teplotě 40 °C v přítomnosti koncentrované kyseliny sírové.

Získá se 0,2 g krystalického produktu.

Po krátkodobém prodlení rezultujícího produktu nia vzduchu se získá následující analýza:

Pro C₁₆H₁₆N₅NaO₇S₂ · 1,5 H₂O (504,47) vypočteno:

38,09 °/o C, 3,8 % H, 13,88 % N, 29,96 % O; nalezeno:

38,4 % C, 3,8 % H, 13,8 % N, 27,1 % O.

Pracuje-li se za analogických podmínek, získají se málo odlišné krystalické foirmiy, obsahující například 0,5 mol vody nebo 1 mol vody a 1 mol methanolu.

Rentgenová spektra (Debye Scherrer) výše uvedenými způsoby získaných produktů potvrzují krystalickou povahu získaných produktů.

Příklad 28

Připraví se injekční přípravek následujícího složení:

Kyselina 3-acetoxymethyl-7- [ 2- (2-amino-4-ťhiazoilyl-2-hydr'oxyim-inoacetamido]-3-cefem-4-ka.rboxytová 500 mg

Sterilní vodriý excipient q. s. p. 5 mil

Příklad 29

Připraví se injekční přípravek následujícího složení:

Kyselina 3-acetoxymethyl-7- [ 2- (2-amino-4-thiazolyl) -2-methoxyiminoacetamidoi]-3-cefem-4-karbo-xytová 500 mg

Sterilní vodný excipient q. s. p. 5 ml

Příklad 30

Připraví se injekční přípravek následujícího složení:

Sodná sůl kyseliny 3-acetoxym-ethyl-7- [ 2- (2-amino-4-thiazoiyl) -2-methoxyilminoacetamído]-3-cefem-4-karboxy!ové 500 mg Sterilní vodný excipient q. s. p. 5 ml

Příklad 31

Připraví se injekční přípravek následujícího složení:

Kyselina 3-acetoxymethyl-7-[ 2- (2-amino-4-thiazolyl)-2-(1-methylethoxyiminoi) 207575 acetarnido]-3-cefem-4-karboxylová 500 mg

Sterilní voldný excipient q. s. p. 5 ml

Příklad 3 2

Připraví · se želatinové tobolky následujícího složení:

Kyselina· 3-a.cetoxymethyl-7- [ 2- (2-amino-4-thiazolyl) -2-methoxyiminoacetamido] -3-cefem-4-karb'cixylová 250 mg

Excipient q. s. pro jednu tobolku 400 mg

P ř í k 1 a d 3 3

Připraví se želatinové tobolky následujícího složení:

Sodná sůl kyseliny 3-acetoxymethyl-7-[2- (2-amino-4-thiazolyl ) -2-methoxyiminoacetamido]-3-cefem-4-karboxylové 250 mg

Excipient · q. s. pro jednu tobolku 400 mg

Příklad 34

Připraví se · želatinové tobolky následujícího složení:

Kyselina 3-acetoxymetbyl-7-[ 2- (2-amino-4-thíazolyl )-2- ( 1-metbyletboxyimino) acetamido]-3-cefeim-4-karboxylová 250 mg

Excipient q. s. pro jednu tobolku 400 · mg

Farmakologické studie produktů, připravených způsobem· podle vynálezu.

Účinnost in vitro.

Zřeďovací metoda v kapalném prostředí.

Do série zkumavek se rozdělí vždy stejné množství sterilního živného média. Doi první zkumavky se potom vloží určité množství testovaného produktu a do každé následující zkumavky v sérii se · vloží vždy rostoucí množství · uvedeného testovaného produktu. Všechny zkumavky se potom· naočkují určitým bakteriálním kmenem.

Po dvacetičtyřhodinové nebo čtyřicetiosmlboi:Unové inkubaci v termostatu při teplotě 37 °C se· v jednotlivých zkumavkách vyhodnotí inhibice nárůstu bakteriálního kmene· v protisvětle, což umožní stanovit minimální inhibiční koncentrace (MIK, vyjádřené v ,ug/cm3).

Získané· výsledky jsou · uvedeny v následujících tabulkách {produkt, označený jakožto produkt A je kyselinou 3-acetoxymeШу1-7-[2- (2-amino-4-thiazoly )j -2-methoxyiminoacetamido!]-3-cffem-4-karboxylová ve formě isoimeru antjj.

T a b u 1 k a ' 1

Kyselina 3-acetoxymethyl-7-[2- (2-a-mino-4-thiazolyl )-2-hydroxyiminoacetamido]-3-cefem-4-karboxylová, isomer anti

MIK (jUš/ml) hodin hodin

Bakteriální kmen

Staphylococcus aureus' UC 1061,
nerezistentní vůči penicilinu	5	5
Staphylococcus· aureus UC 1128,
rezistentní vůči penicilinu	10	10
Staphylococcus aureus Exp. No 54146	5	10
Streptococcus pyogenes A 561	0,5	0,5
Bacillus subtilis ATCC 6633	2	5
Escherichia Coli ST UC 1020	3	3
Escherichia Coli RT US 1261	1	1
Escherichia Coli Exp. 1¾¾	2	2
Escherichia Coli RG R55 123D	5	10
Klebsiella pneumoniae Exp. 52145	0,6	0,6
Klebsiella pneumoniae 2536 R	20	40
Próteus mirabilis (indol-) A 235	2	2
Salm-onella typhimurium 420	2	2
Enterobacter cloacae 681	40	40

Tabulka 2
Bakteriální kmen	Produkt z příkladů	Produkt z příkladu	Produkt A
	. 4, 6, 20, 22	7
		MIK ((íg/rnl)
	24 h 48 h	24 ' h 48 h	24 h	48 h

Staphylococcus aureus ATCC 5638, nerezistentní vůči

penicilinu UC 1061 Staphylococcus aureus UC 1128, rezistentní vůči	1	1	1	2	40	40
penicilinu Staphylococcus aureus exp.	2	2	2	3	>40	>40
No. 54 146	3	3	2	2	40	40
Streptococcus pyo/enes A 561	0,02	0,05	0,01	0,01	0,4	0,4
Streptococcus faecalis 5432	2	2	1	3	>40	>40
Streptococcus faecalis 99 F 74	2	3	3	10	>40	>40
Bacillus subtilis ATCC 6633 Escherichia Coli nerezistentní	0,2	1	1	2	20 .	20
vůči tetracyklinu ATCC 9637 = UC 1020	0,2	0,2	0,1	0,1	20	40
Escherichia Coli rezistentní vůči tetracyklinu ATCC 11 303 = UC 1261	0,02	0,02	<0,02	<0,02	2	2
Escherichia Coli Exp. TO26B₀Escherichia Coli rezistentní	0,1	o'l	0,05	0,05	5	5
vůči Gentamicinu a Tobramycinu R 55 123 D	0,6	0,6—1	0,1	0,1	10	10
Klebsiella pneumoniae Exp. 52 145	0,02	0,02	<0,02	<0,02	1	1
Kle-bsiella pneumoniae 2 536 rezistentní vůči Gentamicinu	0,6	0,6	0,2	0,2	>40	>40
Próteus mirabilis (indol-)
A 235	0,02	0,02	<0,02	<0,02	2	2
Próteus vul/aris (indol+) A 232	2	40	0,2	0,6	>40	>40
Salmonella typhimuriuin 420	0,2	0,2	0,1	0,1	20	20
Providencia Du 48	5	5	1	2	40	>40

'Bakteriální kmen	Produkt z příkladů 4, 6, 20, 22	Produkt z příkladu 7 MIK 24 h 48 h	Produkt A
24 h	48 h	24 h	48 h
Pseudomonas 3 935 Exp. SG.	10	40	10 20	>40	>40
Serratia rezistentní vůči
Gentamícinu 2 532	1	1	1 1	>40	>40
Enterohacter cloacae 681	40	40
Pseudomonas 8951 RGT	40	>40
Staphylococcus Smith	1	1
Escherichia Coli	0,1	0,2
Escherichia Coli Ec	0,05	0,05
Escherichia Coli T 25 575	0,05	0,05
Escherichia Coli T 96 875	0,05	0,05

Tabulka 3

Bakteriální kmen	Produkt z příkladu 9 MIK (,ug/ml) 24 hodin 48 hodin
Staphylococcus aureus ATCC 5 638,
nerezistentní vůči penicilinu	1	2
Staphylococcus aureus UC 1128,
rezistentní vůči penicilinu	2	2
Staphylococcus aureus exp. No. 54 146	2	2
Staphylococcus aureus Co· 15, resistentní
vůči Cephialexinu	10	20
Streptoicoccus pyo/enes A 561	0,02	0,02
Streptoco'ccus faecalis 5 432	2	10
Bacillůs subtilis ' ATCC 6 633	1	1
Escherichia Coli — nerezistentní
vůči tetracyklinu	1	1
Escherichia.. Coli — rezistentní vůči
tetracyklinu ATCC 11 303	0,1	0,1
Escherichia Coli Exp. ΤΟ₂βΒβ	1	1
Escherichia Coli — rezistentní vůči
Gentaimicinu a Tobramycinu R 55 123 D	1	1
Klebsiella pneumoniae Exp. 52 145	0,05	0,1
Klebsiella pneumoniae 2 536 — rezistentní
vůči Gentamicinu	2	5
Próteus mirabilis (indol—) A 235	0,2	0,2
Próteus vul/aris (indol+) A 232	2	10
Salmonella typhimurium 420	1	10
Proividencia Du 48	3	5
Pseudomonas 3 935 Exp. SG	20	20
Serratia Resistant Gentamicine 2 532	0,4	1

I

Produkt z příkladu 11 Produkt z příkladu 15

MIK h 24 h

Tabulka 4

Bakteriální kmen h

h

Staphylococcus aureus ATCC

638 nerezistentní vůči

penicilinu	2	2	20	20
Staphylococcus aureus UC 1128
rezistentní vůči penicilinu	2	3	40	40
Staphylococcus aureus exp.
No. 54 146	2	2 '	40	40
Streptococcus pyogenes A 561	0,02	0,02	0,4	0,
Streptococcus faecalis 5 432	2	10	>100	>100
Streptococcus faecalis 99 F 74	2	20	100	100
Bacillus subtilis ATCC 6 633	0,4	0,4	10	10
Escherichia Coli nerezistentní
vůči tetracyklinu ATCC 9 637	1	1	>100	>100
Escherichia Coli rezistentní
vůči tetracyklinu ATCC 11 303	0,2	0,2	10	10
Escherichia Coli Exp. TO2eB_c	0,4	0,4	20	40
Escherichia Coli rezistentní
vůči Gentamlcinu a Tobra-
miciniu R55 123D	0,6	0,6	40	40
Klebslella pneumoniae Exp.
52 145	0,05	0,05	20	20
Klebslella pneumoniae 2 536
rezistentní vůči Gentamicinu	2	2	>100	>100
Próteus mlrabilis [indol—)
A 235	0,05	0,05	5	5
Próteus vulgaris (indol+)
A 232	1	2	>100	>100
Salmonella typhimuriům 420	1	1	100	100
Providencia Du 48	5	5	100	>100
Pseudoimonas 3 935
Exp. SG	20	40	>100	>100
Serratia rezistentní vůči
Gentamicinu 2 532	2	2	>100	>100
		Ta bulka 5
Bakteriální kmen	Produkt z příkladu 13	Produkt z příkladu :
		MIK Líg/ml)
	24 h	48 h	24 h	48 1
Staphylococcus aureu ATCC
5 638 nerezistentní vůči
penicilinu	2	5	20	20
Staphylococcus aureus UC
1128 rezistentní vůči
penicilinu	3	5	40	40
Staphylococcus aureus exp.
No. 54 146	2	5	40	40
Streptococcus pyogenes A 561	0,02	0,02	1	1
Streptococcus faecalis 5 432	5	40	100	100
Streptococcus faecalis 99 F 74	5	20	>100	>100
Bacillus subtilis ATCC 6 633	0,5	2	20	100
Escherichia Coli nerezistentní
vůči tetracyklinu ATCC 9 637	2	2	>100	>100
Escherichia Coli rezistentní
vůči tetracyklinu ATCC 11 303	0,5	0,5	20	20
Escherichia Coli Exp. To2gB₆	1	1	100	100

h

I

7-575

Produkt z příkladu 13 Produkt z příkladu 17

MIK (^g/rnl) li 48 h 24 h 48 h

Bakteriální kmen

Escherichia Coli rezistentní vůči Gentamicinu a Tobramy-

činu R 55 123 D	1	1	100	100
Klebsiella pneumoniae ' 2 536
rezistentní vůči Gentamicinu	10	10	>100	>100
Próteus mirabilis (indol—)
A 235	0,5	0,5	10	20
Próteus vulgaris (indol+)
A 232	0,5	1	>100	>100
Salmonella typhimurium 420	2	2	100	100
Providencia Du 48	5	5	>100	>100
Pseudomonas 3 935 Exp. SG	40	40	>100	>100
Serratia rezistentní vůči
Gentamicinu 2 532	2	5	>100	>100
Enterobacter . chloacae '681	40	40	100	100

Experimentální infekce bakteriálním kmenem Escherichia Coli (T) O₂6B₆.

A] Při tomto testu se studuje účinek produktů z příkladu 4, .6, 20 a 22 na experimentální infekci bakteriálního kmene Escherichia Coli (T) O26Be u myší.

Skupiny po deseti myších samečcích o průměrné tělesné hmotnosti 21,5 kg byly infikovány intraperitoneální injekcí 0,5 ml dvacetičtyřhodinové kultury (v ' živné půdě) bakteriálního . kmene Escherichia Coli (t) O₂6Bg (Institut Pasteur), zředěné na 1/6 destilovanou vodou.

Jednu hodinu, pět hodin a dvacetčtyřihodin po. uvedené injekci bylo myším podáno subkutánní injekcí nebo aplikací per os stanovené množství testovaného produktu. Potom byla pozorována úmrtnost myší . během následujících osmi dnů. Získané výsledky jsou uvedeny v následující tabulce 6.

Tabulka 6
Aplikace	Úmrtnost po 21,5 h 28,5 h	32 h	Přežiloi myší po> 8 dnech
Kontrolní skupina myší	9	1	0/10
0,05 mg subkutánně			10/10
0,1 mg subkutánně			10/10
0,25 mg subkutánně			10/10
0,1 mg per os	' - 1		9/10
0,25 mg . per . os			10/10
0,5 mg' per os			10/10

B) Postupuje se jako v předcházejícím. testu, přičemž se myši o průměrné tělesné hmotnosti 22,5 g infikují ihtraperitoneálně kulturou bakteriálního kmene Escherichia Coli (T) Ο₂βΒβ, zředěnou na 1/5,5.

Za použití produktů v příkladů provedení 4, 6, 20 a 22 se získají následující výsledky, uvedené v tabulce 7.

0 7 3 7 5

Způsob Úmrtnost po Počet myší aplikace 7 h 9 h 22 h 23 h 24 h 25 h 26 h 31 h 32 h 46 h 70 h 4 dny které přežily 45 min 35 min 30 min 50 min , 50 min 30 min ' 30 min 8. den

5β

Experimentální infekce bakteriálním kmenem Sallnonella typhimurium.

V tomto, testu byl studován účinek produktu z příkladu ' 7 na experimentální infekci bakteriálního kmene Salmonella typhimurium u myší.

Skupiny po deseti myších o průměrné tělesné hmotnosti 20,5 g byly infikovány intraperitoneální injekcí 0,5 ml dvacetičtyř hodinové kultury na hovězím bujónu bakteriálního· kmene Salmonella typhimurium 5210, zředěné ' ha 1/75 destilovanou vodou.

Jednu hodinu, čtyři hodiny, 8 hodím 24 hodin a 32 hodin po výše uvedené injekci bylo myším podáno subkutánní injekcí stanovené množství testovaného produktu.

Získané výsledky jsou shrnuty v následující tabulce 8.

Tabulka 8

Aplikace Úmrtnost po Počet myší, které přežily

10. den h 25 h 28 h 29 h 45 h 5611 70 h 5 dnů 6 dnů 7 dnů 8 dnů 9 dnů min 30 min

>>

Experimentální infekce bakteriálním kmenem Próteus Mirabilis.

V tomto testu byl studován účinek produktů z příkladů 11 a 15 na experimentální infekci bakteriálního kmene u myší.

Skupiny po deseti myších o průměrné tělesné hmotnosti 22 g se infikují intraperitoneální Injekcí 0,5 ml dvacetičtyřhodlnové kultury na hovězím bujónu bakteriálního kmene Próteus Mirabilis A 23, zředěné na 1/4.

Jednu hodinu, pět hodin a dvacetčtyři hodin poi uvedené aplikaci se myším podá subkutánní injekcí stanovené množství testovaného· produktu.

Získané výsledky jsou shrnuty v následující tabulce 9.

Úmrtnost po Počet myší, h 21 h 22 h 23 h 23 h 23 h 24 h 28 h 29 h 31 h 46 h 53 h 70 h 94 h které přežily min 30 min 15 min 10 min 30 min 45 min 20 min 45 min 8. den

<35 1Г5 rH

Studium akutní toxicity u myši při intravenózní aplikaci.

Akutní toxicita byla pro produkt z příkladu provedení 7 stanovena u myších samiček o tělesné hmotnosti v rozmezí 19 až 21 g typu Swiss CDI Specific Pathogen Fre (CH. River—Francie); pro každou dávku bylou použito skupiny 8 až 10 zvířat.

Zvířata jsou držena po dobu čtyřdenní pozorovací periody v izolovaném prostoru (teplota 21 °C + 1 °C, stabilní vlhkost; strava a voda je zvířatům poskytována „ad libitum”).

Připraví se roztok produktu z příkladu 7 o koncentraci 100· mg/ml v destilované sterilní ' a pyrogenní vodě. Tento roztok se· potom injikuje myším v proměnném objemu a při rychlosti 1 ml/min do ocasní žíly.

Získané výsledky jsod shrnuty v následující tabulce 10.

Tabulka 10

Dávka (mg/kg)

Úmrtnost po

1. dnu 2. dnu 3. dnu 4. dnu

Celková úmrtnost

500 1000 2000

0/10

0/8

Během injekce árii během uvedené čtyřdenní pozorovací periody nebyly u pokusných zvířat pozorovány symptomy otravy.

Claims

PŘEDMĚT VYNALEZU

1. Způs<ob přípravy nových oxirnových derivátů kyseliny 7-aminothiazolylacetamidoceíaaosporanové obecného vzorce I' ve kterém

Rc znamená atom vodíku, tritylovou skupinu nebo chloracetylovou skupinu,

Rc' znamená atom vodíku, tritylovou skupinu nebo ’ nenasycenou nebo nasycenou alkylovou skupinu s 1 až 4 uhlíkovými atomy,

A znamená buď atom vodíku, nebo ekvivalent alkalického kovu, kovu alkalických zemin, hořčíku nebo zbytek aminové organické báze a vlnitá čára znamená, že skupina OR’c se může nacházet v jedné nebo druhé z obou možných poloh syn nebo anti, přičemž v případě, že R’c znamená tritylovou sku pinu, potom i Rc znamená tritylovou skupinu a v případě, že R‘c znamená atom vodíku, potom i Rc znamená atom vodíku, vyznačený tím, že se uvede v reakci kyselina 7-amínocefalosporanová vzorce ²0l—CH2-^O-C- CWj coaH ⁰ s kyselinou obecného vzorce líc (lld kde

Rd znamená tritylovou skupinu nebo chloracetylovou skupinu a

R'd znamená tritylovou skupinu nebo· nasycenou nebo· nenasycenou alkylovou skupinu s 1 až 4 uhlíkovými atomy, nebo i jejím funkčním· derivátem, za vzniku produktu obecného vzorce Ic

NH-Rd (Ic) ve kterém

Rd a R'd mají výše uvedený významy přičemž tento· produkt odpovídá produktu obecnéhb vzorce Γ, ve kterém

Rc znamená tritylovou skupinu nebo chloracetylovou skupinu a

R'c znamená tritylovou skupinu nebo nasycenou anebo nenasycenou alkylovou skupinu s· 1 až 4 uhlíkovými atomy, a získaná sloučenina se popřípadě převede· na sůl ve výše uvedeném významu, načež se výše uvedený produkt Ic případně hydrolyzuje v kyselém prostředí nebo hydrogenolyzuje anébo se na· něj působí thiomočovinou a to podle významů obecných substituentů Rd a R'd za vzniku produktu obecného vzorce Ib nou nebo· nenasycenou alkylovou skupinu s 1 až 4 uhlíkovými atomy, načež se· produkt obecného vzorce Ib · popřípadě· převede na soli ve výše uvedeném· významu.
2. Způsob podlez . bodu 1 pro přípravu produktů obecného vzorce· I (!)

CH₂0C0CH₃ (lb) ve kterém

R_t” znamená atom vodíku nebo nasycenou anebo nenasycenou alkylovou skupinu s celkovým počtem uhlíkových atomů 1 až 4, přičemž uvedený produkt odpovídá produktu obecného vzorce Γ, ve kterém

Rc a A znamenají každý atom vodíku a R'c znamená atom· vodíku nebo nasyce ve kterém;

R zriamená atom vodíku nebo tritylovou skupinu,

R' znamená atom vodíku, tritylovou skupinu nebol nasycenou nebo nenasycenou alkylovlou skupinu s celkovým¹ počtem uhlíkových atomů 1 až 4,

A znamená bud atom vodíku, nebo ekvivalent alkalického kovu, kovu alkalických zemin, hořčíku nebo zbytek aminové organické báze a vlnitá čára znamená, že skupina OR' se· může nacházet v jedné nebo· druhé z možných poloh syn nebo· anti, přičemž v případě, že R' · znamená tritylovou skupinu, potom i R znamená tritylovou skupinu a v případě, že R' znamená atom · vodíku, potom i R znamená atom vodíku, vyznačený tím, že se uvede v reakci kyselina· 7-aminocefalosporanová vzorce /

/ NH~R₁ ' I.

(II! .... .

kde

Ri znamená tritylovou skupinu a

Rf znamená tritylovou skupinu · nebo nasycenou nebo nenasycenou alkylovou · skupinu s 1 až 4 uhlíkovými atomy, · nebo · s jejím funkčním derivátem, za vzniku produktu obecného vzorce Ia ve kterém

Ri a R1’ mají výše uvedený význam, přičemž uvedený produkt odpovídá produktu obecného vzorce I, ve kterém

R znamená tritylovou skupinu a

R’ znamená tritylovou skupinu nebo nenasycenou nebo nasycenou alkylovou skupinu s celkovým· · počtem uhlííkových atomů 1 až 4, a získaná sloučenina se popřípadě převede na sůl ve výše uvedeném významu, načež se· produkt obecného vzorce Ia případě hydrolyzuje v kyselém prostředí anebo se hydrogenolyzuje za vzniku produktu obecného vzorce Ib снр-с-сн₃o db] ve kterém

Ri” znamená atom vodíku nebo nasycenou nebio nenasycenou alkylovou skupinu s 1 až 4 uhlíkovými atomy, přičemž uvedený produkt odpovídá produktu obecného vzorce I, ve kterém

R a A znamenají každý atom· vodíku a

R’ znamená atom vodíku nebo· nasycenou nebo nenasycenou alkylovou skupinu s 1 · až 4 uhlíkovými atomy, načež se produkt obecného vzorce Ib popřípadě převede na soli ve výše uvedeném významu.
3. Způsob podle bodu 1 pro přípravu produktů obecného· vzorce Ib (Ib) ve kterém·

Rf” znamená atom vodíku nebo nasycený nebo· nenasycený alkylový zbytek s celkovým počtem uhlíkových atomů 1 až 4 jakož i jejich solí, přičemž tento produkt .odpovídá produktu obecného vzorce Γ, ve · kterém

Rc a A znamenají každý atom vodíku a

R’c znamená · atom vodíku nebo nasycenou nebo nenasycenou alkylovou skupinu s 1 až 4 uhlíkovými atomy, vyznačený tím, že se působí kyselinou na sůl produktu obecného vzorce Ic, ve kterém

Rd znamená tritylovou skupinu a

R’d znamená tritylovou skupinu nebo· nasycenou nebo nenasycenou alkylovou skupinu s 1 až 4 uhlíkovými atomy, za vzniku produktu obecného vzorce Ib,· nebo se působí hydrogenolyzačním činidlem · · na sůl produktu obecného vzorce Ic, ve kterém·

Rd znamená tritylovou skupinu a

R’d znamená tritylovou skupinu nebo · nasycenou nebo· nenasycenou alkylovou sku207575 pinu s 1 až 4 uhlíkovými atomy, za vzniku soli obecného vzorce Ib, nebo se působí thiomočovinou na sůl produktu obecného vzorce Ic, ve kterém

Rd znamená chloracetylovou skupinu a nasycenou nebo nenasycenou alkylovou skupinu s celkovým počtem uhlíkových atomů 1 až 4, za vzniku soli produktu obecného· vzorce Ib.
4. Způsob podle bodu 2 pro přípravu produktu obecného· vzorce Ib

C^hjO£-CW₃ o

(Ib) ve kterém

R” znamená atom vodíku . nebo nasycenou nebo nenasycenou alkylovou skupinu s celkovým počtem uhlíkových atomů 1 až 4, jakož i jejich solí, přičemž tento· produkt odpovídá produktu obecného vzorce I, ve kterém

R a A . znamenají každý atom vodíku a

R' znamená atom vodíku nebo· nenasycenou ' nebo· nasycenou alkylovou skupinu s 1 až 4 uhlíkovými atomy, vyznačený tím, že se působí kyselinou na sůl produktu obecného vzorce Ia, ve kterém

Ri znamená tritylovou · skupinu a

Rf · znamená tritylovou skupinu nebo* nasycenou nebo nenasycenou . alkylovou skupinu s celkovým počtem uhlíkových atomů 1 až 4, za vzniku produktu obecného· vzorce Ib, nebo se působí hydrogenolyzačním činidlelm. na sůl produktu obecného vzorce Ia, ve· kterém

Ri znamená tritylovou skupinu a

Rf znamená tritylovou skupinu nebo nasycenou nebo nenasycenou alkylovou skupinu s celkovým počtem' uhlíkových atomů 1 až 4, za vzniku soli produktu obecného vzorce Ib.