CS207346B2 - Chemical indication papers - Google Patents

Description

Vynález se týká chemických indikačních papírků a zvláště přípravků nanášených na indikační papírky k vyvolání viditelné barevné reakce, která je nepřímo úměrná množství materiálu s přípravkem· vstupujícím do^{1 * * * V} reakce. Takovýto· přípravek se může rovněž používat ke zjišťování přítomnosti kyseliny močové v kapalinách.

Zkušební proužky běžné dnes používané jsou založeny na přímém použití kolorimetrické techniky, při níž se vyvolá míra zbarvení, která je úměrná koncentraci materiálu, · který se zkouší. Jedním z příkladů takových indikačních papírků je indikační papírek, jehož se používá pro kvantitativní zjišťování glukózy v kapalinách, kde papírek je tvořen savým materiálem napuštěným indikační směsí, jež obsahuje jako indikátor o-tolidin.

V případech, že glukóza je obsažená ve zkušebním vzorku, dochází k vytvoření modrého zabarvení, jehož intenzita· je přímo úměrná k množství přítomné glukózy. Aby se zjišťovala koncentrace glukózy, je třeba provádět vizuální hodnocení zabarvení, k němuž došlo, tak, že se provádí porovnání papírku s kalibrovanou barevnou stupnicí.

Zkoušky pro zjišťování hladiny kyseliny močové v tělesných kapalinách, jako v 'séru nebo v moči, se běžně dnes neprovádějí za používání zkušebních papírků. Jsou založeny na reakci kyseliny močové v alkalickém roztoku s fosfor wolframovou kyselinou, která vytváří modré zbarvení nebo chlomofor.

Hloubka modrého zbarvení takto vyvolaného je úměrná koncentraci kyseliny močové v kapalině. Tento typ zkoušek ovšem, má podstatnou nevýhodu spočívající v tom, že všechny bílkoviny v séru se · musí vysrážet a odstranit zdlouhavou filtrací a centrifu-gováním před přidáním reagující složky, aby ce zabránilo tvorbě chromoforů z ' · vlastních bílkovin a aby se také zabránilo· tvoření zákalu tím, že na sobe vzájemně působí tyto· bílkoviny spolu o reakčními složkami. Tato předběžná opatření jsou velmi náročná na čas a kromě toho zkouška nemá dostatečně specifickou povahu, · poněvadž další redukující látky zasahují působením na některé reakční složky navrhované pro tento účel.

Další zkoušky jichž se používá jsou založeny na enzymu urikasa, který přeměňuje kyselinu močovou na allantoin a peroxid vodíku. Například při jedné z těchto· zkoušek se na kapalinu obsahující kyselinu močovou působí enzymem · při pH přibližně 8,5 až 9. Peroxid vodíku se pak uvádí v reakci s· chromogenem za přítomnosti enzymu pero-xidasy při pH 5, ·aby se získal oxidovaný chromoge-n s rozličnými zabarveními. Hloubka vytvořeného zabarvení rovněž kolísá úměrně s koncentrací kyseliny močové, jež je přítomna - a obvykle -se . porovnává s kalibrovanou barevnou stupnicí. Nevýhodou tohoto postupu včetně zkoušky posléze uváděné je, že používají principu přímé kolorimetrle, kde změny zabarvení 'za - vyšších úrovní koncentrace kyseliny močové klesají a - proto z toho vyplývá značná obtížnost podle získaných zrakových vjemů porovnávat barvy a určovat přesné množství kyseliny močové. Nedostatek vizuální rozlišovací schopnosti lidského oka činí semikvantitativní zjištění nepřesným, což znamená, že chyba se obvykle pohybuje od 66 - do 200¹ - %. I když při nízkých koncentracích vizuální rozlišování může být přijatelně -přesné, při vyšších koncentracích, to jest tehdy, kdy dochází v ' biologických -systémech ič-a_í3t_o k -odchylkám -od normálního stavu, roste obtížnost provádět rozlišení a je v podstatě nemožné takové rozlišení provést.

V poslední době bylo- nalezeno, že lze vyrobit svrchovaně přesné indikační papírky, jestliže 'se předem - stanovené -množství barevného- indikátoru vnese- do- pevného' inertního nosiče, to jest indikátoru, který reaguje - na materiál, který -se -má zjistit tak, -žeztrácí barvu v přímém poměru k množství tohoto -materiálu. Poněvadž hraniční bod znamená -po - barevné - stránce nepřítomnost zabarvení, pak skutečnost, že množství materiálu, který se zjišťuje je nad -nebo· pod důležitou nebo vybranou mezní hodnotou, lze tuto hodnotu - velmi přesně určovat. Zásada kontinuálního testování může být nahrazena měřením přesného kritického koncového stavu, -což může -samozřejmě zahrnovat použití řady indikačních papírků, -což umožní zjišťování -velmi -přesných -rozmezí.

Předmětem vynálezu jsou tedy -chemické indikační papírky pro zjišťování kyseliny močové -v kapalinách -za alkalických podmínek ve zvoleném rozmezí koncentrace, - například 5,6 až 7,6 mg/lOl ml, -vyznačující -se tím, že papírek -obsahuje ve -směsi předem stanovené množství -zdroje jodu, indikátoru jodu, například rozpustný -škrob, amylóza, amylopektin, dextrin, a-naftoflavon, polyvinylpyrrolidon, -polyvinylalkohol, glykogen nebo glykolát sodné soli -škrobu nebo- jiný polysacharid, poskytující barevnou -reakci -s jodem, a látky, rozpouštějící jod na inertním a pevném nosiči, například sůl jodu na inertní podložce, jako· je filtr ze skleněných vláken -nebo inertní filtrační papír, přičemž v roztoku pro přípravu papírku je koncentrace zdroje jodu -0,025 -až -0,034 % hmot./ /obj., indikátoru jodu o -koncentraci 0,5 -až 2,5 % hmot./obj. -a látky, rozpouštějící jod o koncentraci ·6 až 12 - % hmot./obj., přičemž uvedené složky se -mísí -v objemovém poměru iil- : 1 : - 1.

V kolorimetrii tvoří- indikátory -obvykle chemické látky, které jsou -schopné absorbovat s výhodou -světlo- při určité -vlnové délce, to- jest ve viditelné části spektra s -výsledkem že se jeví jako -zbarvené. Tato schopnost je určována - strukturou sloučeniny, například organické sloučeniny mající chromoforová seskupení, to jest nenasycené skupiny atomů jako

-N = n- =C=S -N = O

O

-N = _O -CH~N- = C=O >C= C< -Λ=Ν-ΝΗmohou -být -zbarveny. Chromoformní povahu má také aromatický kruh -chinoidní struktury. Přítomnost kterékoliv -z prvních -čtyř skupin nebo chinoidního kruhu, sama o- sobě vyvolává zbarvení látky, -obvykle žluté. Látky s ketonickými -skupinami potřebují ovšem aby -byly přítomny - dvě z těchto skupin - úzce navazujících na sebe a -dvojná vazba C = C musí být alespoň šestinásobně konjugovaná, aby se zajistilo absorbování světla ve viditelné části spektra.

Vlastnost sloučeniny, která byla zbarvena Se může intensifikovat nebo 'modifikovat přítomností -dalších skupin, i -když -tyto- skupiny nejsou chramofory - jako je hydroxylové nebo- aminová skupina, - dále -skupina NHR nebo NRs, kde- R značí alkylovou -skupinu. Vzájemné působení - zbarvené -sloučeniny s jejím okolím, to jest agregací nebo absorbcí na pevné látky .nebo· rozpuštěním -v různých může -mít silný modifikační účinek na - barvu. Sférické vztahy -mohou také změnit barvu sloučeniny a to tak, že jedna forma- bude zbarvena- a druhá bude bezbarvá.

Vedle organických molekul jsou také anorganické molekuly, které jsou -zbarveny, například kovy, zvláště přechodné - kovy - a některé nekovy jako halogeny. Z kovů kovy které mají neúplné 3d elektronové - obaly tvoří tyto zbarvené ionty v roztoku.

Některé anorganické molekuly samy o sobě, jako je - -napiříklad jod, jsou jen mírně zbarveny avšak v komplexu s jinak- nezbarvenýrni -sloučeninami bývá barva modifikována nebo zintenzívněna. Jod jestliže je ve formě -komplexu tri-jodového iontu, může být adsorbován na koloidní makromolekuly škrobu k vytvoření dobře známého· tmavomodrého zbarvení. Přidání kovového- iontu ke sloučenině, která je jinak nezbarvená, může také vést k vytvoření -zbarvené látky.

V případě přípravku na zkoušení kyseliny močové -zbarvený indikátor - obsahuje zdroj jodu a jodový -indikátor. Používaný zdroj - jodu -může být sám -roztok Jodu nebo jeho- kom207346 plexu, který je stabilní při uskladnění, avšak který uvolňuje jod za podmínek -testu. Jestliže -se používá jod, pák se muší roztok čerstvě připravit -a bezprostředně použít ke zkoušení, poněvadž -tento materiál je -těkavý a jeho· roztoky nejsou proto- stabilní. S výhodou -se užívá zdroje, který tvoří komplex, to jest jodotorm, -ve kterém je jod například kombinován s povrchově - aktivní látkou. Množství zdroje jodu se -zřetelem na podklad bude záviset na výsledném· krajním bodu, to- Jest úroveň hladiny kyseliny močové, při -níž -mizí Zbarvení.

Například v případě -že zkušební přípravek má tímto způsobem Ukazovat hladiny kyseliny močové, které jsou vyšší než je u zdravých dospělých mužů, například 7 mg na 1'100 -ml v krevním plasmatu, pak lze výhodně roztok jodového- zdroje- tak -upravit, aby •obsahoval na nosiči -20,49 miter ogramů jodu na cm2. Objem nasycenosti nosiče je 2,46 X X liO^-2 mil -diagnostického- přípravku na cm.2. Je zřejmé, že lze používat přiměřeně rozdílná množství složek přípravků k tomu, aby se prováděla indikace hladiny -6 mg/OOO -ml, která se vyžaduje u zdravých žen. Jiné hraniční body, -které jsou charakteristické pro onemocnění vyvolávající vyšší - hladinu kyseliny močové, lze rovněž připravit pokud je to žádoucí.

Pohotově k dispozici jsoucí jodový indikátor je rozpustný škrob, který je v komplexu s volným jodem, který se přizpůsobí- zkušebním podmínkám -a -vyvolává -modré zabarvení -za alkalických podmínek, jehož stupeň klesá při přidání kyseliny močové. Lze používat ta!ké alternativních jodových indikátorů, jako amylosy nebo amylopetetinu, jež oboj jsou složkami přítomnými ve škrobu, dextrinu, a-naftoflavonu, - polyvinylpyrrolidonu, -polyvinylalkoholu, glykogenu, 'sodné soli škrobového glyk-o-lrtu. nebo jiných polysacharidů, jenž vyvolávají vyhovující barevnou reakci s jodem. Množství škrobu se může výhodně pohybovat o-d 0,5 do 2,5 %, s výhodou 1 %, to jest v přebytku se -zřetelem na úhrnné niimž-ství potenciálně k -disposici jsoucího- . jodu v přípravku. *

V jiných případech zbarvená látka, - alby - byla užitečná jako indikátor, muší být schopna aby vstupovala nebo alespoň částečně se podílela na -reakci s výsledkem, že íbar^:v^:a se ztrácí nebo odssnaní. Systémy s dvojnými vazbami chromotormních skupin lze odstranit redukcí -a tím. vytvořit plně nasycenou bezbarvou sloučeninu. Například. diazomethan se -může redukovat na bezbarvý methylliydrazin.

Některé barevné -sloučeniny vykazují nevratnou změnu nebo ztrátu barvy oxidací za tvorby bezbarvých látek. Jako alternativa může také -docházet ke ztrátě barvy tehdy, když - dochází k adsorbování nebo -uvolňování protonu v důsledku změn v hodnotě pH, což je -doprovázeno tautomerním -novým uspořádáním molekuly a odbouráním -chromoforové skupiny.

Taková -změna - například nastává -u p-nitrotenolu.

Tento· -princip - může být použit v řadě zkušebních situací, kde množství metabolitu kyseliny -vystoupilo· vzhledem k chorobnému stavu.

Aby se dosáhlo sledované viditelné reakce, která indikuje určitou koncentraci látky, pak látka sama nebo v kombinaci s jiným! činidly - musí být schopna redukovat indikátor jestliže obsahuje- nenasycené chromoformní skupiny nebo musí být 'schopna oxidovat indikátor nevratně do- -bezbarvého· stavu. Jako alternativa látka - -musí - být schopná vyskytovat - se jako· -donor nebo- akceptor protonů nebo musí být -schopná měnit -stav pH tak, aby se vyvolalo nové uspořádání ve struktuře indikátorů.

V některých případech je -třeba používat dodatkových reakčních složek, -aby se vyvolala změna varu. Na -příklad v přípravku na zkoušení kyseliny -močové je -třeba používat látky podporující rozpouštění jodu, jako je jodid draselný, aby se zvýšila rozpustnost zdroje jodu, jako v případě trijodidových iontů, které -map vyšší rozpustnost než molekuly jodu. Asi 9 °/o jodidu draselného vypočteného se vztahem na úhrn jodu se ukázalo jako dostačující pro tento účel. Další vhodné látky podporující rozpouštění jodu mohou zahrnovat -další jodidy nebo -povrchově aktivní látky.

Poněvadž řada známých zbarvených látek vhodných jako indikátory je nesmírně veliká, je proto snadné najít indikátor, který by snadno spolupůsobil s -materiálem, který se má zkoušet. Při této· volbě může- jít i zjištění hodnoty pK, -dále -oxidačního a redukčního -potenciálu a podobných vlastností jednotlivých funkčních skupin materiálu.

Další faktory, které ovlivňují volbu vhodného indikátoru vedle typu reakce, -o- kterou může jít, tvoří zjištění, zda- jsou pohotově- a bez velkých -nákladů te -dispozici v čistém- stavu. S výhodou má látka být -snadno rozpustná ve - vodních -^y^s^ti^mech nebo jiných větších rozpouštědlech, aby se tak usnadnilo· ukládání látky na nosič. Vedle toho indikátor má být s výhodou stabilní ·na světle a · vzduchu a nemá se rozrušovat delším skladováním. Kromě toho nemá reagovat s jinými látkami používanými ve zkušebním systému a · nemá tedy - tvořit sloučeniny naho komplexy, které by · · rušivě zasahovaly do jejího působení.

Pevný nosič, na který se ukládá diagnostický přípravek ' podle vynálezu, musí být inertní a v žádném · případě nesmí reagovat se složkami tvořícími přípravek. Je výhodné, aby přilnavost na povrch nosiče se vytvářela · jen s malým pronikáním do hloubky nebo bez tohoto pronikání.

Výhodný typ · nosiče ' je filtr ze skelných vláken o nízké porézncsti, jako je filtr GF/C (Whatman), který má základní hmotnost přibližně 55 g/m² a schopnost difuse vody 3,0 cm· · u svislého pásku filtru za minutu, · je však · možno· používat také jiných Inertních nosičů, jako jsou nosiče připravené z inertních plastických vláken a podobně.

Nosič musí být schopný adsorbovat určité konstantní objemové · množství 'zkušebního přípravku do· vláknité struktury.

Jako alternativa může být nosič tvořen hladkým, neadsorbujícím filmem, avšak použití tohoto typu má nevýhodu spočívající v tem, že objem přípravku na film nanášeného se musí měřit, aby se udrželo množství konstantní a jednotné.

Nosič může být · dále upevněn na nepropustný spodní film například ·z polyvinylchloridu z důvodu jeho ochrany · a také z důvodu zabránění ukládání nečistot do filmu nebo jejich pronikání filmem.

S · výhodou pevný inertní nosič upevněný na spodní film, 'se upravuje ve formě zkušebního pásku. Množství výše popsané 'zkušební látky na plošnou výměru nosiče závisí na výsledném požadovaném koncovém bodu · reakce, na typu kapaliny která se · má zkoušet a na konstantním 'objemu zkušební kapaliny, která nasytí nebo přilne na povrch pásku.

V případě, že se mají zkoušet · kapaliny obsahující částice v suspenzi, například krev, •nosič obsahující zkušební nebo diagnostický přípravek na němí uložený může být doplněn · například' polopropustnou 'membránou, která může například být tvořena · nitrocelulosovou nebo podobnou hmotou. Takový materiál umožňuje, aby jím prošla čirá kapalina, nikoliv však pevné látky jsoucí v suspenzi, například krevní buňky, což však může někdy znesnadnit zjišťování konce reakce ve značné míře. Taková filtrující membrána ' se může ukládat ponořením nosiče nesoucího již diagnostický · přípravek a s výhodou upevněného* na 'opěrné fólii do roztoku materiálu tvořícího· membránu v těkavém organickém rozpouštědle s následným vysušením.

Pro· diagnosu dny (Arthritis uratica) lze používat vhodných proužků ke zjišťování množství kyseliny močové v krvi, jež je vyšší než 6 mg/lW m-l u žen nebo 7 mg/100 ml u mužů. Za· alkalických podmínek například za· přítomnosti boraxu nebo alkalického kovu se kyselina močová · oxiduje na allantoin. Aby se indikovala · tato oxidace, lze používat trjjodidu >a · škrobového indikátoru. Při oxidaci kyseliny močové · se tríjodidové ionty redukují na jod, což je provázeno · ztrátou barvy. K testování dny se proto používá zkušebních pásků, které mají ' množství indikátoru na nich uloženého takového stupně, aby · zde byl ekvivalent pro ·6,5 mg/100· 'ml u · žen, nebo 7,5 mg/100 m-l u mužů. Jakmile · bylo zjištěno, že· hranice kyseliny · močové v · krvi se rovná této hladině nebo je vyšší než tyto hladiny, je užitečné používat řady zkušebních pásků, které mají odstupňované konce reakce nad ‘6,5 mg/100 ml nebo 7,5 mg/ /109 ml, aby se přesněji určovala hladina přítomné kyseliny močové.

Vzorky moči nebo krve se mohou proto upravit na · alkalický stupeň pH vyšší než 9,0, s výhodou 9,5 před zkoušením, vedle možnosti odstranění buněk, například krevních buněk, pokud je to· nutné.

Jako · obměna se může · zkušební přípravek dále zdokonalit a doplnit tím, že' se vytvoří polopгcρustná vrstva, do které je včleněna alkalická látka v předem stanoveném množství 'ta v rozpustné · formě,· 'takže _ když se zkoušená kapalina nanese na diagnostický pásek, upraví se hodnota pH přiměřeně alkalickým směrem během · průchodu touto vrstvou ještě před tím, než se dostane do styku s diagnostickou látkou. Uhličitany alkalických kovů jako uhličitan sodný, zvláště v miktronizované formě, tse ukázaly jako zvláště vhodné pro tento účel. Například suspenze tohoto materiálu do skladby membrány, jež by poskytla roztok větší než Ι,ββ X X 1O-2 mol, s výhodou 3,'77X 10~² mol, se pokládá za výhodnou pro vytvoření druhé a vnější polopro^pustné vrstvy na horní straně vnitřní ochranné polopropustné vrstvy.

Aby 'tse us^i^^^i^ilo 'zjišťování předem stanoveného konce· reakce, který se zjišťuje, to jest v ' případě, že indikátor je bezbarvý, může být přidán komparátcr (porovnávací složka). Takový komparátor je podobného · složení jako hlavní diagnostický přípravek ve všech směrech s obměnou, že neobsahuje žádný indikátor nebo jen jeho malé množství ta může proto jasně ukázat -bezbarvý stav nosiče a v tomto případě přítomnost materiálu, který ' se má · zkoumat v mezích stanoveného rozsahu koncentrace. Alternativně v případě, že je zde stupeň zbarvení maskovaný zkušební kapalinou, tento efekt · je použitím komparátoru vyloučen a lze tedy i tak zjišťovat konec reakce. Komparátor se · s výhodou umísťuje v poloze přiléhající k nosiči.

V případě, ' že je kapalinou, která se zkoumá, krev, může se zjišťování konce reakce ztížit · přítomností červených· krevních buněk.

Tyto lze odstranit a místo krve použít jen sérum nebo plasma.

Jako alternativní postup je po'stup, při němž se krevní buňky zcela odstraní a spláchnou z povrchu pásku tím, že se vytvoří polopropustná vrstva, která nejen chrání zkušební přípravek, ale která také působí jako filtr. Vedle toho se imůže do krve přidat antikoagulační složka jako heparin, aby se zabránilo, aby červené krevní buňky nezaschly a neucpaly pásek, nebo místo toho vnější polopropustná vrstva nebo její povrch se může přiměřeně napustit nebo opatřit povlakem antikoagulantu tohoto druhu.

Zkoušená kapalina, například krev, se nanese na zkušební pásek, nechá se v klidu krátkou dobu, například 5 minut a pak se pásek spláchne tekoucí vodou a zkoumá. V okamžiku skončení reakce na komparátorové pásce nemá být normálně žádné zbarvení, naproti tornu zkušební páska může si uchovat určitý stupeň zabarvení, který ukazuje, že koncentrace materiálu, například kyseliny močové, je nižší než jaká by odpovídala předpokládanému konci reakce. Jestliže barva vybledne, pak to znamená, obsah zkoušené látky vyšší než je obsah, který by byl ukazatelem chorobného stavu pro lékaře a proto je třeba provádět další zkoušky a zjišťování nebo je třeba obstarat si další vzorky.

Dalším hlediskem sledovaným ve vynálezu je tedy způsob stanovení minimální a maximální hladiny materiálu, například kyseliny močové v kapalinách, při němž se vzorek zkoušené kapaliny způsobem výše definovaným uvede do styku se zkušebním přípravkem, kapalina se nechá reagovat se zkušebním přípravkem a pozoruje se přítomnost nebo nepřítomnost barevné reakce. Když se použije řady přípravků, které představují řadu různých koncových bodů reakce, pak se může zjistit hladina kyseliny močové v rámci dvou rozličných hodnot.

Je možno proto připravit řadu testů, při níž je použito řady pásků podle vynálezu, přičemž každý pásek má odlišné předem stanovené množství indikátoru na něm uloženého. Výsledek tedy je řada pásků, z nichž každý má odlišný kritický koncový bod reakce, při kterém se stane indikátor bezbarvým.

Výhodou těchto zkušebních přípravků je, že jde o jednoduchý a levný systém, který se dá snadno vyrobit. Dále není třeba nákladného zařízení při používání a proto může být к dispozici všem lékařům i bez specializace. Ctění výsledků je snadné, protože se použije zásady inverzní koloriímetrie a výsledkem je, že není třeba provádět porovnání s kalibrovanými barevnými stupnicemi, jež je doprovázeno nevýhodami plynoucími z nepřesného kvantitativního odhadu vytvořeného zabarvení. Výsledek je velmi rychle к dispozici, což jest zvlášť příznivé v porovnání s dlouhými zkouškovými časy, které trvají déle než hodinu, když se použije postupů dříve popsaných »a používaných. Vynález je blíže popisován na následujících příkladech, které nemají omezující význam.

Příklad 1

Zkušební pásek pro zjišťování kyseliny močové

A) Příprava zkušebních činidel

a) Zdroj jedu

Obsah jodu v přípravku majícím povahu jodoforu Weocodyne se stanovil titrací s IX XliO^-2 N thiosulfátu sodného. Jodofor se zředí vodou к získání 2,5XlíO~³ mol roztoku jodu. Jod v této koncentraci, když se uvede do komplexu se škrobem a jodidem draselným, bude ekvivalentem pro 7 mg kyseliny mečové na 100 ml pro ekvivalentní objemovou reakci.

b) Látka podporující rozpuštění jodu

Připraví se 9% roztok jodidu draselného v destilované vodě.

c) Jodový indikátor g rozpustného škrobu ss suspenduje v 90 ml destilované vody a vaří '3 minuty a pak se zředí 10 ml destilované vody к získání 1% škrobového přípravku.

d) Zkušební přípravek

103 ml zředěného jodoforu Wescodyne se přidá do 1'0'0 ml 9% roztoku jodidu draselného a směs se opatrně míchá aby se zabránilo napěnění. Do směsi se přidá 1.00· ml 1% roztoku škrobu a takto vytvořený přípravek se opatrně míchá, aby nedošlo к napěnění.

e) První membránový přípravek iml Kolodia v roztoku (roztok kolodia pod značkou Collodian Solution '301—2'61, British Drug Houses) se zředí v 75 ml diethyletheru (jakost pro anesthezi podle britského lékopisu) a důkladně se smísí. Kolodiový roztok se pak zředí (667) směsí diethylethe.ru a ethylalkoholu v poměru 9 : 1.

f) Druhý přípravek pro membránu obsahující přísadu pro- úpravu pH až 1Ό ml směsi diethyletheru a ethylalkoholu (9 : 1 v objemovém stavu) se přidá do 800 mg bezvodého mikronizovaného uhličitanu sodného a vzniklá suspenze se mele, aby všechny větší shluky se dispergovaly a pak se produkt uzavře v lahvích se zátkou spolu s 0010 ml zředěného koloidního roztoku připraveného podle e). Láhev se umístí do prostoru, kde se na ni působí ultrazvu207346 keře a působí se pb dbbu ·dostatečnou k dispergování všech shluků.

B) Příprava zkušebních pásků

Film nezměkčeného pólyvlnylchloridu (typ 128/5065, výrobek firmy Bakelite Xylonite Ltd.) se rozřeže na pravoúhelníky (10X54 milimetrů) a plocha široká · 10 mm · ve směru většího¹ rozměru se zdrsní za použití hrubého brusného i pásku.

Použek (140 až 150 mmX5 mm), tvořený filtrem ze skelných vláken [GFC/C Whatman, Sclentific Supplies · Co. Ltd.) se připraví. Lepidto (Britfix, nitrocelulosa od firmy Humburol Ltd.) se natře na stranu proužku ze skelných vláken, která · je proti straně s mřížkovým povrchem a také na proužku o šířce 5 mm zdrsněného povrchu připraveného obdélníku z polyvinylchloridu. Proužek ze skelného vlákna se pak přivede do · styku s povrchem nosného filmu pokrytým lepidlem.

Přidá se dostatečné množství zkušebního· přípravku připraveného podle oddílu A], a) — d) · do mělké nádoby, aby se dosáhlo· přibližně hloubky ·5 mm. Proužek ze skelných vláknem upevněný na obdélníku z PVC se ponoří do· připravené směsi na 5 vteřin, vyjme se a okraj pásku se přivede do· styku s proužkem filtračního· papíru, aby se odstranil zbytek kapaliny. Proužek se pověsí na vzduchu 2 minuty a zbytek kapaliny se odstraní za použití filtračního papíru.

P ř í k 1 a d 2

Připraví se proužek pro diagnózu jako· v příkladu 1, dostatečné množství přípravku pro· první membránu, připraveného jako v příkladu. IA), e), se dávkuje do mělké nádoby hluboké 6 mm a do ní se máčí proužek pro diagnózu. Proužke se pak suší na vzduchu a umístí se do· nádoby, do* níž nemá přístup světlo, kde nosný film z PVC je uložen plošně.

Příklad 3

Příprava komparátoru

Nařeží se ·5 mm proužky filtru se skelnými vlákny o délce 140 až 150 mm. Připraví se· zkušební přípravek podle příkladu IA), a) · až d), s obměnou, že koncentrace jodoforního zdroje jodu se sníží tak, aby jodová koncentrace byla 7,1 X10~4 mol (ekvivalent pro 2 mg kyseliny močové ve 100· ml) a umístí se v mělké nádobě.

Komparátorový pásek se namočí v činidle, vyjme, vysuší a upevní za použití lepidla na nosný film z PVC, přiléhající k prvnímu filtračnímu proužku připraveného podle příkladu 1.

P ř í k 1 a · d · 4

Připraví se komparátorový proužek jako v příkladu· 3 s · obměnou, že před upevněním na · nosný film se proužek namočí do prvního · ·přípravku pro membránu, připraveného podle příkladu IA), e).

Příklad · 5

Zkušební proužek se školným vláknem se připraví jako v příkladu 3 nebo 4 a pak se řeže na zkušební proužky o šířce 5 mm a délce 510 mm rovnoběžně s kratší osou pásku.

P ř í k 1 a d 6

Zkušební proužky se připraví jako v příkladech 2, 4 a 5. Do· -mělké nádoby se dá dostatečné množství přípravku pro · druhou membránu, připraveného· · podle příkladu IA), f) a do tohoto přípravku se namočí zkušební pásky. Vysuší se pak v temnu.

Příklad 7

Od pacienta, který je podezřelý, že trpí dnou, se vezme složený vzorek moči za·' 24 hodiny a pH se upraví na hodnotu 9,0 pevným uhličitanem sodným. Alkalický vzorek se zředí v poměru 1 : 7 destilovanou vodou a na · každý proužek · komparátoru a diagnostického proužku podle příkladu ·1, '3 a· 5 se· vnese po kapce roztoku a nechá v klidu. Asi po· 5 minutách se použky zkoumají ke zjištění jakéhokoliv modrého zabarvení · a · oba diagnostické i komparátorové proužky, u nichž se zjistilo, že nedošlo k zbarvení, což ukazuje, že hladina . kyseliny močové byla· v ekvivalentním vztahu nebo větším než odpovídá zdroji jodu, ukazují, že pacient má mimořádně vysokou hladinu kyseliny močové v moči a že tedy bude třeba dalších diagnostických testů.

Příklad 8

Postupuje se · stejně jako v příkladu 7 s tím, že jako zkušební kapaliny se použije krve, která nebyla zředěna, avšak se · na ni působilo ještě pevným· heparlnem (50 jednotek v ml krve) a použitý proužek se připraví jako v příkladu ·2, 4 a 5. Před zkoušením' proužků .s hlediska zabarvení se proužky omyjí tekoucí vodou, aby se odstoa-nily červené krvinky. Výsledek je podobný jako· v příkladu

7.

P ř í k 1 a d 9

Postupuje se jako v příkladu 8 s výjimkou, že pH krve se neupravuje před zkouškou a že se použije zkušebního proužku podle ·příkladu ·6. Získají se podobné výsledky jako je uvedeno v příkladu 7.

Claims (7)

predmet vynalezu

1, vyznačující se tím, že zdrojem jodu je roztok jodu.

1. Chemické indikační papírky pro zjišťování kyseliny močové v kapalinách za alkalických podmínek ve zvoleném rozmezí koncentrace, například 5,6 až 7,6 mg/100 ml, vyznačující se tím, že papírek obsahuje ve směsi předem stanovené množství zdroje jodu, indikátoru jodu, například rozpustný škrob, amylózu, amylopektin, dextrin, a-nafto-flavon, polyvinylpyrrolidon, polyvinylalkohol, glykogen nebo glykolát sodné soli škrobu nebo jiný polysacharid, poskytující barevnou reakci s jodem, a látky, rozpouštějící jod na inertním a pevném nosiči, například sůl jodu na inertní podložce, jako je filtr ze skleněných vláken nebo inertní filtrační papír, přičemž v roztoku pro přípravu papírku je koncentrace zdroje jodu 0,02'5 až 0,034 % hmot./obj., indikátoru jodu o koncentraci 0,5 až 2,5 % hmot./obj. a látky, rozpouštějící jod o koncentraci 6 až 12 % hmot./ /obj., přičemž uvedené složky se mísí v objemovém poměru 1:1:1.

2. Chemické indikační papírky podle bodu

3. Chemické indikační papírky podle bodu 1, vyznačující se tím, že zdroj jodu je tvořen komplexem jodu, například jodoforem.

4. Chemické indikační papírky podle bodu 1 až 3, vyznačující se tím, že solí jodu je jodid draselný.

5. Chemické indikační papírky podle bodu 1 až 4, vyznačující se tím, že nosič je upevněn na nepropustném nosném filmu, například na filmu polyvinylchloridu.

6. Chemické indikační papírky podle bodu 1 až 5, vyznačující se tím, že nosič, na němž je indikátor opatřen alespoň jednou polopropustnou membránou, tvořenou nitrocelulózou.

7. Chemické indikační papírky podle bodu 5, vyznačující se tím, že v polopropustné membráně je obsaženo alkalické činidlo, například uhličitan alkalického kovu v koncentraci 1,8)8 X1O² mol až 4,5XliO^-2 mol.