CS203818B1 - Spdsob přípravy merkaptodeoxycelulózy - Google Patents
Spdsob přípravy merkaptodeoxycelulózy Download PDFInfo
- Publication number
- CS203818B1 CS203818B1 CS430179A CS430179A CS203818B1 CS 203818 B1 CS203818 B1 CS 203818B1 CS 430179 A CS430179 A CS 430179A CS 430179 A CS430179 A CS 430179A CS 203818 B1 CS203818 B1 CS 203818B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- chelaton
- mercaptodeoxycellulose
- thiol
- cellulose
- preparation
- Prior art date
Links
Landscapes
- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
Description
POPIS VYNÁLEZU
K AUTORSKÉMU OSVEDČENIU 203818 (Π) (Bl)
ČESKOSLOVENSKA SOCIALISTICKÁ
REPUBLIKA <1S)
/22/ Přihlášené 22 06 79/21/ /PV 4301-79/ (51) Int. Ci? C 08 B 15/02
ÚŘAD PRO VYNÁLEZY
A OBJEVY (40) Zverejnené 30 06 80(45) Vydané 15 11 82 (75)
Autor vynálezu
GEMEINER PETER ing. CSc., BRATISLAVA (54) Spdsob přípravy merkaptodeoxycelulózy > i ·.
Vynález sa týká spósobu přípravy merkaptodeoxycelulózy z chlorodeoxycelulózy.
Vodonerozpustne nosiče obsahujúce tiolové skupiny majú Široké možnosti uplatneniá v róz- nych oblastíach enzymového inžinierstva. Najčastejšie sa používajú v afinitnej chromatografiitiolových enzýmov /Methods in Enzymology 34 jAffinity Techniquesj 1974/ a pri imobilizácii „enzýmov/0. R. Zaborsky, Immobilized Enzymes, CRC Cleveland 1974/. Až na polyakrylamidovéhoprechodcu /Enzacryl Polythiol, Koch-Light/ sa dnes vyrábajú polytioly výlučné na báze póly-sacharidov, a to hlavně agarózy napr.: Activated Thiol-Sepharose 4B, Thiopropyl-Sephaťose 6B,či sietovanej agarózy napr.: příslušné polytioly série Sepharose CL, všetko Pharmacia FineChemicals, Uppsala. Příprava týchto polysacharidov obsahujúcich tiolové skupiny vychádza z aktivácie poly-sacharidu brómkyánom [Activated Thiol-Sepharose 4B, Upplands Grafíska AB /1974/; resp. z 0-al-kylácie agarózy bis-epoxidmi či A-halohydrínrai /R. Axén, H. Dřevin, J. Carlsson, Acta Chem.
Scand. B 29 / 1975/ 471 ; H. Nishikawa, P. Bailon, J. Solid-Phase Biochem. 1 33/. Uvede- • né postupy jednak používajú u nás netradičné polysachatidy /agaróza, dextrán/ ako aj devizovéchemikálie /napr.: brómkyán, glutathión, 2,2'-dipyridyldisulfid, bisepoxidy, dithiothreitol/.
Naviac u celulózy nedávajú tieto spósoby přípravy uspokojivé výsledky /J, Zemek, t. Kuniak, P. Gemeiner, PV - 7358/78/. Na druhej straně sa javí ako vhodný východiskový materiál pre pří-pravu tiol-polysacharidov chlórodeoxycelulóza /CD-celulóza/, lahko pripravitelná za miernychreakčných podmienok s poměrně vysokými stupčami substitúcie /DS 0,3/ /T. L. Vigo, C. W. Welch,Textile J. Res. 40 /1970/ 109/. Chlór v tejto CD-celulóze možno nahradit běžnými nukleofilný-mi substituentami, napr. -amino, -merkapto, -hydroxy a iné. Tak je v případe chlórodeoxydéx-tránu popísaná substitúcia za tiosíran za vzniku tiosíran-deoxydextránu /TSD-dextránu/ /A. F.
Kolová et al., Cell. Chem. Technol. 12 /1978/553/. Takýto TSD-dextrán sa potom prevedie alka-lickým štiepením v prostředí argonu na merkaptodeoxydextrán /MD-dextrán/. 203818 203818 2
Naše výsledky výskumu v tejto oblasti ukázali, že aj CD-celulózu je možiio uspokoj ivopreviest na tiosíran-deoxycelulózu. Jej redukcia tiolmi, ako sd napr.: kyselina tioglykolováalebo Z^merkaptoetanol v slabo alkalickom prostředí a v přítomnosti chelátotvorných činidiel,vedře ku tvorbě merkaptodeoxy-celulózy.
Podstata vynálezu spočívá v tom, že v prvom stupni sa prevedie CD-celulóza vo vodnomroztoku tipsíranu sodného pri teplote 90 až 105 °C po dobu 35 až 45 hodin pri mólovom pomereCD skupiny pólysacharidu : tiosíran 1:10 až 15 pri hydromodule ,0 až 15 na tiosíran-deoxy-ce-lulózu, načo v druhora stupni po premytí produktu do negatívnej reakcie na tiosírany a vysušísa přidá vodný tlmivý roztok kyseliny tioglykolovej resp, 2-merkaptoetanolu o pH 7,7 až 7,9obsahujáci 1 až 5 mM Chelaton 3 pri mólovom pomere tiosíranové skupiny polysacharidu : tiol1:15 až 20 a pri hydromodule 10 až 15 a nechá pSsobií 20 až 40 minut pri teplote 20 až 30 °C. CD-celulóza připravená podlá I, L. Vigo, C. M. Welch, Textile Res, J, 40 /1970/ 109s DS 0,3 až 0,6 je dostatočne vhodná pre přípravu MD-celulózy. Takáto CD-celulóza má výraznézvýšená tepelná odolnost.
Zavedeuie tiosíranovej skupiny sa mSže prevádzat s tiosíranom sodným pri teplote 90 až105 °C po dobu 35 až 45 hodin. Výsledný produkt obsahuje 0,4 až 0,6 mmólov tiosíranových sku-pin na 1 g suchého preparátu.
Redukcia tiosíranovej skupiny na tiolová sa prevádza pflsobením kyseliny tioglykolovejči 2-merkaptoetanolu vo vodných tlmivých roztokoch pH 7,7 až 7,9 obsahujácích Chelaton 3.
Po redukcn sa produkt rýchlo premyje pufrovaným vodným roztokom obsahujácim Chelaton 3, de-stilovanou vodou obsahujácou Chelaton 3 a aceton. Výsledný produkt obsahuje 0,25 až 0,5 mmó-lov tiolových skupin na 1 g suchého preparátu. Výhodou navrhovaného spSsobu přípravy merkaptodeoxy-celulózy je, že preparáty umožňujevyrábať z domácích lacných surovin poměrně jednoduchým technologickým postupom. Příklady prevedenia Přikladl 10 g chlorodeoxy-celulózy /CD-celulózy/ obsahujácej 1,8 mmóla Cl/g sa nechá napučatv 100 ml 2,1 M vodného roztoku tiosiranu sodného. Reakčná zmes sa potom udržiava 40 hodin pri100 °C za občasného premiešania. Produkt sa premyje vodou do negatívnej reakcie na tiosírano-vé ió-ny, acetónom a nechá sa vysušit pri 40 °C. Suchý produkt sa rozsuspenduje v 80 ml 0,1 Mvodného roztoku hydrouhličitanu sodného obsahujáceho 5 mM Chelaton 3. Za stálého miešania sapřidá 10 ml kyseliny tioglykolovej a pH sa upraví přidáním koncentrovaného hydroxidu sodnéhona 7,8. Suspenzia sa nechá miešat 30 minát pri laboratórnej teplote. Produkt sa rýchlo pre-myje na sklenom filtri 0,1 M vodným roztokom hydrouhličitanu sodného obsahujácim 5 mM Chela-ton 3, destilovanou vodou obsahujácou 1 mM Chelaton 3 a acetónom, vždy do negatívnej reakciena tioly. Produkt sa vysuší pri 40 °C.
Preparát obsahuje 2,4 Z síry a O',475 mmólov/g titrovatelných tiolových skupin.
Poznámka: +Chelaton 3 - sodná sol kyséliny etyléndiaminotetraoctovej Příklad 2
Postup podlá příkladu 1 s tým rozdielora, že pri redukcii tiosiranu CD-celulózy sa použi-je ,0 ml 2-merkaptoetanolu. Suchý produkt obsahuje 2,85 Z síry a 0,33; mmólov/g titrovatelnýchtiolových skupin.
Claims (1)
- 3 203818 Příklad 3 Postup podlá příkladu 1 stý» rozdielom, že ako východisková CD-celulóza sa použije pre-parát s obsahám 3,2 ramólov Cl/g a v 1. stupni 3,85 M vodný roztok tiosíranu sodného. Suchýprodukt obsahuje 2,5 Z síry a 0,25 mmólov/g titrovatelných skupin. Vynález má uplatnenie všade, kde je potřebné izolovat či čistit enzýmy a iné bielkovinyobsahujúce tiolové skupiny a kde je výhodné imobilizovaí enzýmy prostedníctvom ich cysteíno-vých zvyškov, a to či už v priemyselnej praxi alebo vo výskuma. PREDMEI VYNALEZU Sp8sob přípravy merkaptodeoxy-celulózy vyznačený tým, že chlorodeoxycelulóza sa v prvomstupni nechá reagovat s vodným roztokom tiosíranu sodného pri teplote 90 až 105 °C po dobu35 až 45 hodin pri mólovom požere chlorodeoxy CD skupiny polysacharidu : tiosíran 1:10 až 15pri hydromodule 10 až 15, načo v druhom stupni, po premytí produktu do negatívnej reakcie natiosírany a vysušení sa přidá vodný tlmivý roztok kyseliny tioglykolovej alebo 2-mcrkaptoeta-nolu o pH 7,7 až 7,9 obsahujúci 1 až 5 mM Chelaton 3 pri mólovom pomere tiosíranové skupinypolysacharidu : tiol 1:15 až 20 a pri hydromodule 8 až 12 a nechá pSsobit 20 až·40 minut priteplote 20 až 30 °C a nakoniec sa premýva rýchlo na filtri vodným tlmivým roztokom obsahujú-cim 1 až 5 mM Chelaton 3, destilovanou vodou obsahujucou 0,5 až 1 mM Chelaton 3 a. acetónom,vždy do negatívnej reakcie na tioly. Srvrroprafia. a· p- tí»oA 7. Moit
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CS430179A CS203818B1 (cs) | 1979-06-22 | 1979-06-22 | Spdsob přípravy merkaptodeoxycelulózy |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CS430179A CS203818B1 (cs) | 1979-06-22 | 1979-06-22 | Spdsob přípravy merkaptodeoxycelulózy |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CS203818B1 true CS203818B1 (cs) | 1981-03-31 |
Family
ID=5385417
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CS430179A CS203818B1 (cs) | 1979-06-22 | 1979-06-22 | Spdsob přípravy merkaptodeoxycelulózy |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CS (1) | CS203818B1 (cs) |
-
1979
- 1979-06-22 CS CS430179A patent/CS203818B1/cs unknown
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US4308254A (en) | Material able to fix reversibly biologial macromolecules, its preparation and its application | |
CA1334042C (en) | Process for the preparation of a material for affinity chromatography | |
US4111838A (en) | Composition for chromatography | |
CA1040561A (en) | Cyanogen halide activation of carbohydrates and protein binding thereto | |
Holleman et al. | The thrombin-like enzyme from Bothrops atrox snake venom. Properties of the enzyme purified by affinity chromatography on p-aminobenzamidine-substituted agarose. | |
US4094743A (en) | Enzymes immobilized on chitosan | |
Svenson et al. | Coupling of acid labile Salmonella specific oligosaccharides to macromolecular carriers | |
ES8407516A1 (es) | Procedimiento para la obtencion de pancreatina | |
JPS5841836B2 (ja) | 可溶性肝臓ウリカ−ゼ、その製法及び尿酸の測定法 | |
CA2225447A1 (en) | Swollen starches as papermaking additives | |
SE8107868L (sv) | Forfarande for framstellning av ett polysackaridderivat av fibrinolysin | |
NO174656C (no) | Fremgangsmåte for fremstilling av et farmasöytisk preparat av en stabil vannsuspensjon av sucralfat | |
Ōtakara | Studies on the Chitinolytic Enzymes of Black-koji Mold: Part I. Viscometric Determination of Chitinase Activity by Application of Glycol Chitin as a New SubstratePart II. Purification of Chitinase | |
CS203818B1 (cs) | Spdsob přípravy merkaptodeoxycelulózy | |
Turková et al. | Immbilization on cellulose in bead form after periodate oxidation and reductive alkylation | |
ES8802458A1 (es) | Procedimiento para la preparacion de un componente activo inmovilizado destinado al diagnostico. | |
Oguntimein et al. | Purification and immobilization of Aspergillus niger β‐xylosidase | |
Stults et al. | Immobilization of proteins on partially hydrolyzed agarose beads | |
KR0131766B1 (ko) | 티올 그룹을 함유한 종합체, 이의 제조방법 및 용도 | |
US3833555A (en) | Polysaccharide cyclic carbamate containing compounds | |
DE3060628D1 (en) | Suspension of insulin crystals and process for its preparation | |
Marshall et al. | Polysaccharide synthesis on immobilized phosphorylase | |
US3033758A (en) | Preparation of levans | |
JPS61173778A (ja) | 重合体担体の活性化方法 | |
Svenson et al. | The application of cyanide-metabolizing enzymes to environmental control: I. Preparation and characterization of rhodanese and β-cyanoalanine synthase, immobilized on solid supports |