CS203207B1 - Agents for evolving cells from tissues or from cultivating vessels surface in the form of powder granulate or mouldings and method of producing them - Google Patents

Agents for evolving cells from tissues or from cultivating vessels surface in the form of powder granulate or mouldings and method of producing them Download PDF

Info

Publication number
CS203207B1
CS203207B1 CS52178A CS52178A CS203207B1 CS 203207 B1 CS203207 B1 CS 203207B1 CS 52178 A CS52178 A CS 52178A CS 52178 A CS52178 A CS 52178A CS 203207 B1 CS203207 B1 CS 203207B1
Authority
CS
Czechoslovakia
Prior art keywords
weight
granulate
dried
moldings
excipients
Prior art date
Application number
CS52178A
Other languages
English (en)
Slovak (sk)
Inventor
Pavel Veber
Jozef Baluch
Ladislav Hana
Jan Lesko
Original Assignee
Pavel Veber
Jozef Baluch
Ladislav Hana
Jan Lesko
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Pavel Veber, Jozef Baluch, Ladislav Hana, Jan Lesko filed Critical Pavel Veber
Priority to CS52178A priority Critical patent/CS203207B1/cs
Publication of CS203207B1 publication Critical patent/CS203207B1/cs

Links

Landscapes

  • Medicinal Preparation (AREA)

Description

POPIS VYNALEZU
K AUTORSKÉMU OSVEDČENIU ČESKOSLOVENSKÁ SOCIALISTICKÁ
REPUBLIKA (19)
(22) Přihlášené 26 01 78(21) (PV 521-78) (40) Zverejnené 29 02 80 203207 (11) (31) (511 Int. Cl? C 12 N 5/00
ÚŘAD PRO VYNÁLEZYA OBJEVY (45) Vydané 15 09 83 (75)
Autor vynálezu VEBER PAVEL RNDr. CSc., BALTJCH TOZEF RNDr,,
HÁNA LADISLAV ing. CSc. a LESKO JÁN ing. CSc., BRATISLAVA f 54 j Přípravky pře uvolňovanie buniek z tkaniv alebo z povrchukultivačných nádob vo formě prášku granulátu alebo výliskova spdsob ich výroby 1
Vynález sa týká sposobu výroby príprav-kov pre uvolňovanie buniek z tkaniv aleboz povrchu kultivačných nádob vo forměprášku, granulátu alebo výliskov (najčastej-šie tabliet alebo brikiet), připravovaných zpráškovaných homogenizovaných alebo gra-nulovaných zmesí proteolytických enzýmov,chelátotvorných látok a pomocných látokpozostávajúcich převážné z anorganickýchsolí.
Pre přípravu buňkových suspenzi! zo živo-čišných tkaniv sa používajú rožne proteoly-tické enzýmy, ako napr. trypsin, pankreatín,pronáza, elastáza, chymotrypsín a iné. Ob-dobné uvolňovanie buniek z povrchu kulti-vačných nádob sa vykonává uvedenými en-zýmami. Okrem roztokov vyššie spomenu-tých enzýmov sa používajú pre uvolňovanietkaniv a uvolňovanie buniek z kultivačnýchnádob roztoky chelátotvorných látok ako na-příklad kyselina etyléndiamínotetraoctová,kyselina citrónová a iné. Enzýmy alebo che-látotvorné látky sa zvyčajne rozpúšťajú vizotonickom roztoku chloridu sodného, kto-rý sa vhodné pufruje na určité pH, kde jemaximálna účinnost enzýmu. Doposial' satieto přípravky vyrábajú pre použitie při kul-tivácii buniek a tkaniv in vitro vo forměsterilných roztokov alebo lyofilizátov k pria-memu použitiu (katalog firmy Difco, USA r. 2 1976, Gibco, USA r. 1976, Flow, Anglia r.1977).
Vo vodných roztokoch je trypsin, ako a)iné proteolytické enzýmy nestabilný a pod-liehá proteolytickému autorozkladu. V prie-behu skladovania sa enzymatická aktivitaznižuje a výrobky sa stávajú neštandardný-mi. Při skladovaní 0,25% roztoku trypsinuv pufrovanom fyziologickom roztoku pri pH,pri -(-4 °C je trypsin použitelný maximálně2—3 týždne a pri skladovaní pri —20 °C jetrypsin stabilný 6 mesiacov (Von A. Mayr,P. A. Bachmann, B. Bibrack. G. Wittmann:Virologische arbeitsmethoden. VEB GustavFischer, Verlag Jena 1974).
Vynález odstraňuje nevýhody tým, že nazvýšenie stability prípravkov pre uvolňova-nie buniek z tkaniv a povrchov kultivačnýchnádob sa enzýmy, chelátotvorné látky a po-mocné látky pozoetávajúce prevážne z an-organických solí homogenizujú, upravujú doformy granulátu alebo sa formujú na vhod-ných lisovacích strojoch (za podmienok u-vedených nižšie) do formy výliskov, gulovi-tého, válcovitého, šošovkového, alebo inéhovhodného tvaru.
Podstatou vynálezu sú teda přípravky preuvolňovanie buniek z tkaniv alebo povrchukultivačných nádob vo formě prášku, gra-nulátu alebo vo formě výliskov najma tab- 203207 203207 liet a brikíet, ktoré obsahujú 1—40 % hmot-ných % proteolytických enzýmov najmatrypsinu, chymotrypsínu, pankreatínu, pro-názy, elastázy, kolagenázy a iné alebo che-látotvorné látky najma dvojsodné soli kyse-liny etyléndiamínotetraoctové jednotlivo,alebo v zmesiach. Ďalej přípravky obsahu-jú 60—99 hmotných % pomocných látokako sú: chlorid sodný, chlorid draselný, glukóza, kyslý fosforečnan sodný, kyslý fosforečnan draselný, stredný fosforečnan sodný, stredný fosforečnan draselný, kyslý uhličitan sodný, tris-hydroxymethylaminomethan, chlorid vápenatý, chlorid horečnatý, polyethylénglykol, polyvinylpyrolidón, methylcelulósa, fenolová červeň, N-2-hydiOxyethyipipefazni-N'-2-tíÍÍin--sulfonová kyselina,N-tris-hydroxymethylmethylglycin,2-(N-morfolino)-etan sulfónová kyselina,>piperazin-N,N‘-bis (2-ethan-sulf onová kyse-lina, N,N-bis-k (2-hydroxyethyl jglycin, N- (tris- (hydr oxymethyl) methy 1-2-amino-ethan sulfonová kyselina, 2-bis- (hydroxyethyl) -imino-2-hydr oxy-methyl ) -1-3-propándiol,hydr oxyethyl piperazín-N’-3-propánsulfonová kyselina a ďalšie.
Enzýmy, chelátotvorné látky a pomocnélátky pozostávajúce prevážne z anorganic-kých solí sa homogenizujú s výhodou vofluidizačnom zariadení alebo v planetárnejmiešačke. Do fluidnej vrstvy zloženej z po-mocných látok sa přidává vodný alebo alko-holový roztok jednej alebo viacej pomoc-ných látok a celkový obsah enzýmov chelá-totvornej látky alebo ich zmes. Zmes sa su-ší plynom s výhodou vzduchom do 100 °Calebo sa najprv granuluje a potom suší. Vďalšom případe sa pomocné látky zmieša-jú v planetárnej miešačke a zvlhčia sa roz-tokom etanolu, propanolu, acetonu aleboich zmesou, v ktorej sú rozpuštěné látky u-pravujúce onkotický tlak najmá polyethylén-glykol, polyvinylpyrolidon ako· aj látky in-dikujúce pH ako je fenolová červeň. Zvlhče-ná zmes sa suší plynom s výhodou vzduchomdo 100 °C. Po vysušení sa ku granulátu při-dá enzým, či chelátotvorná látka alebo ichzmes a po homogenizácii sa granulát lisujena výlisky s výhodou na tablety alebo brike-ty pri tlaku od 40 do 200 MPa.
Práškovaný výsledný homogenizát alebogranulát, či tablety sa rozvážia alebo rozpl-nia do vhodných flaštičiek, sterilizujú sa ga-ma žiarením o dávke 2,5 Mrad. Práškovanýhomogenizát alebo granulát, či tablety prí-pravkov pre uvolňovanie buniek je možno 4 taktiež po rozpuštění v danom objeme re-destilovanej vody sterilizovat fiítráciou cezfilter Milipor. Účelom vynálezu je příprava kvalitnýchsuchých prípravkov pre uvolňovanie buniekz tkaniv a kultivačných nádob vo formě vý-liskov (tablet, brikíet alebo výliskov inéhovhodného tvaruj, alebo homogenizovanýchpráškov a granulátov, ktoré majú oproti do-posial' užívaných sposobom přípravy (pří-pravky tekuté, lyofilizované) výhody v do-konalej homogenizácii zložiek, dlhodobejstability, dobrej rozpustnosti, v pevnomštandardnom tvare a váhe v případe výlis-kov a zjednodušenej manipulácii pri přípra-vě a dopravě. Získané přípravky si uchová-vajú všetky vlastnosti pre uvolňovanie bu-niek zo živočišných tkaniv alebo povrchovkultivačných nádob. Výhodou úpravy výrobkov je štandardnosfpri používaní, ktorá vyplývá zo zvýšenej sta-bility suchých enzymatických prípravkov voformě homogenizovaných práškov, granulá-tov alebo výliskov (tabliet, brikíet). Table-ty je možno vnodne váhovo upravil iak, abyich bolo možné rozpušťaf v definovanom ob-jeme vody. Ekonomickou výhodou príprav-kov pre uvolňovanie buniek z tkaniv alebokultivačných nádob vo formě granulátu ale-bo tabliet je dlhodobá skladovatelnosť azmenšenie nárokov na chladiaci priestor, akoaj znížené náklady na přepravu a obalovémateriály.
Možnost výroby velkých šarží výrobkovpřipravovaných navrhovaným sposobom u-možňuje zlepšit štandardnosf enzymatickýchprípravkov. Formovanie suchých výliskovpre tkanivové kultury je možné prevádzaťbuď na běžných tabletovačkách (briketovač-kách) excentrických alebo rotačných, čiiného druhu, za normálnych atmosférickýchpodmienok pri vhodnom lisovacom tlaku,alebo opatřených špcciálnym povlakem ra-zidielj teflon, silikon alebo z inej vhodnéjhmoty) po úpravě vlhkosti východzej suro-viny a pri relatívnej vlhkosti vzduchu pro-stredia 10—50 °/o, podl'a druhu lisovanejzmesi prípravkov pre uvolňovanie buniek ztkaniv alebo kultivačných nádob. Příklad 1
Vo fluidnom zariadení sa zmieša 400 gchloridu sodného p. a., 10 g chloridu dra-selného p. a., 144,5 g stredného fosforečna-nu sodného p. a. a 5 g chloridu horečnatéhos 6 H2O p. a. Do fluidnej vrstvy sa postupnénastrekuje roztok o zložení trypsin 12,5 g,chymotrypsín 12,5 g, kyslý fosforečnan dra-selný p. a., 10 g, 8 g polyethylénglykol m. v.6000 v 50 ml redestilovanej vody. Vzniknutýgranulát sa suší pri teplote do 100 °C. Vysu-šený granulát je možné rozplniť po 0,6 g doflaštičiek a ožiari sa gama lúčmi celkovoudávkou 2,5 Mrad. Po ožiarení sa sterilný gra-nulát rozpustí v 50 ml sterilnej redestilova-nej vody a použije sa na uvolnenie buniek z

Claims (9)

  1. <5 0 3 2 0 7 kultivačných nádob, alebo z vysušeného gra-nulátu je možné lisovat tablety o váhe 0,6 gpri tlaku 98 MPa. Tablety je možné sterilizo-vat gama žiarením o celkovej dávke 2,5Mrad. Jedna sterilná tableta o váhe 0,6 g sapřed použitím rozpustí v 50 ml sterilnej re-destilovanej vody. Příklad 2 Vo íluidnom zariadení sa zmieša 340 gchloridu sodného p. a., 20 g chloridu dra-selného p. a., 54,75 g glukózy, 110 g kyslé-ho uhličitanu sodného p. a. a prevlhčí saroztokom o složení; 49 g 95% etanolu, 0,25 gfenolovej červena a 10 g polyetyléngiykoluo m. v. 6000. Vzniknutý granulát sa suší priteplote do 150 °C. Suchý granulát sa zmiešas 12,5 g trypsinu a 12,5 g chymotrypsinu ovelkosti častíc 0,125 mm. Z vysušenej zmesisa lisujú tablety o váhe 0,56 g pri tlaku 40MPa. Tablety sa sterilizujú gama žiarenímcelkovou dávkou 2,5 Mrad. Jedna sterilnátableta sa před použitím rozpustí v 50 ml <J -.Vi iliiw j vú/ijluó V j V (jtí y . Příklad 3 V planetárnej rniešačke sa zmieša 125 gtris-hydroxyinethylaminomethanu . HO), s 25gramy tris-hydroxymethylaminomethanem a 377,5 g chloridu sodného p. a. a prevlhčí sazmesou o zložení 50 g 96% etanolu, 0,25 gfenolovej červene a 7,25 g polyvinylpyroli-dónu. Vzniknutý granulát sa suší pri teplo-te do 139 °C. Po vysušení sa ku granulátupřidá 12,5 g trypsinu o velkosti čiastic 0,100mm. Po homogenizácií sa lisujú tablety o vá-he 0,55 g a priemsre 12 mm pri tlaku 60MPa. Jedna tableta sa před použitím rozpus-tí v 50ml redestilovanej vody a roztok sapřed použitím sterilizuje ultrafiltráciou cez filter Milipor 0,22 ,um. Pochopitelně je mož-né použit na sterilizáciu aj gama žiarenieako v predchádzajúcom příklade. Příklad 4 Vo fluidnom zariadení sa zmieša 400 gchloridu sodného p. a., 10 g chloridu drasel-ného p. a., 144,5 g stredného fosforečnanusodného s 12 H2O p. a. a 5 g chloridu horeč-natého s 6 H2O p. a. V 50 ml redestilovanejvody sa rozpustí 12,5 g trypsinu pre tkáňovékultury, 10 g kyslého fosforečnanu drasel-ného p. a. a 8 g polyethylénglykolu o m. v.6000. Roztok sa zfiltruje cez skleněný slinu-tý filter S 3. Potom sa postupné tento roztoknastrekuje do fluidnej vrstvy. Vzniknutýgranulát sa suší do 100 °C. Vysušený granu-lát sa lisuje na brikety o váhe 2,4 g pri tla-ku 200 MPa. Tablety sa ožiaria gama lúčmio celkovej dávke 2,5 Mrad. Jedna sterilnátableta sa před použitím rozpustí v 200 mlsterilnej redestilovanej vody. Příklad 5 Vo fluidnom zariadení sa zmieša 340 gchloridu sodného p. a., 20 g chloridu dra-selného p. a., 54,75 g glukózy, 100 g kysléhouhličitanu sodného p. a. a 10,0 g dvojsodnejsoli kyseliny etyléndiamínotetraoctovej p. a.a prevlhčí sa roztokom o zložení 0,25 g fe-nolová červeň, 10 g kyslého uhličitanu sod-ného v 30 ml redestilovanej vody. Vzniknutýgranulát sa suší pri teplote do 130 °C. Vysu-šený granulát sa premíešá s 10 g trypsinu a10 g chymotrypsínu o velkosti častíc 0,125mm. Suchá práškovaná homogenizovanázmes sa rozplní po 0,56 g do flaštičiek a ste-rilizuje sa celkovou dávkou gama žiarenia 2,5 Mrad. PREDMET
    1. Přípravky pre uvolňovanie buniek z tka-niv alebo povrchu kultivačných nádob voformě prášku, granulátu alebo vo formě vý-liskov najma tabhet a hrikíet vyznačujúci satým, že obsahujú 1 až 40 hmotných '% pro-teolytických enzýmov najma trypsinu, chy-motrypsínu, pankreatínu, pronázy, elastázy,kolagenázy alebo cheiátotvornej látky na-jma dvojsodnej soli kyseliny etyléndiamíno-tetraoctovej jednotlivo alebo v zmesiach a60 až 99 hmotných % pomocných látok, kto-ré pozostávajú z látok upravujúcich iontovúsilu na izotonický roztok najma chlorid sod-ný, chlorid draselný, glukóza v množstve 0,5až 99 hmotných °/o a z pufrujúcich látoknajma kyslý fosforečnan sodný, stredný fosforečnan sodný, kyslý fosforečnan draselný, stredný fosforečnan draselný, kyslý uhličitan sodný, VYNÁLEZU tris-hydroxymethyl-aminomethan . HC1,tris-hydroxymethylaminomethan,N-2-hydroxyethylpiperazin-N‘-2-etán-sulfonová kyselina, N-tris-hydroxymethylglycin,2-(N-morfolino)ethan sulfonová kyselina,piperazin-N-N‘- (bis j -2-etán sulfonovákyselina, N,N‘-bis-l- [ 2-hydroxyethyl) glycin,N-triis(hydroxymethylj methyl 2-amino-methan sulfonová kyselina, 2-bis- (hydroxyethyl j -imino-2-hydroxy-methyl-l,3-propándiol,hydroxyethyl piperazín-N‘-3-propánsulfonová kyselina v množstve 1 až 99,5hmotných percent.
  2. 2. Přípravky podlá bodu 1 vo formě práš- ku granulátu alebo vo formě výlisk-ov, vy- značujúce sa tým, že obsahujú ako pomocné látky navýše látky, upravujúce onkotický tlak najma polyethylénglykol, polyvinylpy- 203207 rolidon, methylcelulózu, hydroxyethylcelu-lózu a iné rozpustné deriváty celulózy vovodě v množstve od 0,01 do 2 hmotných per-cent.
  3. 3. Přípravky podlá bodu 1 a 2 vo forměprášku, granulátu alebo vo formě výliskov,vyznačujúce sa tým, že obsahujú ako po-mocné látky navýše látky indikujúce pHnajma fenolovú červeň v množstve od 0,02do 0,1 hmotných percent.
  4. 4. Přípravky podlá bodu 1 až 3 vo forměprášku, granulátu alebo vo formě výliskov,vyznačujúce sa tým, že obsahuji! ako pomoc-né látky navýše látky aktivujúce enzyma-tická aktivitu proteolytických enzýmov na-jma chlorid vápenatý, chlorid horečnatý od1 do 5 hmotných percent.
  5. 5. Sposob přípravy prípravkov pře uvol-ňovanie buniek z tkaniv alebo povrchu kul-tivačných nádob podlá bodu 1 až 4 vyznaču-júci sa tým, že 60 až 99 hmotných percentpomocných látok, vztiahnutých na hmotnostvýsledného produktu, sa homogenizuje s vý-hodou vo fluidnom zariadení do homogeni-zátu a s výhodou do fluidnej vrstvy sa při-dává vodný alebo alkoholový roztok obsahu-júci aspoň jednu pomocnú látku ako aj lát-ku indikujúcu pH a 1 až 40 hmotných per-cent proteolytických enzýmov alebo chelá-totvornej látky, vztiahnuté na hmotnost vý-sledného produktu, o pH 3 až 6, pričom sazískaná zmes suší plynom, s výhodou vzdu-chom, o teplote do 100 °C, najprv sa granu-luje a potom suší. Θ. Sposob přípravy prípravkov pre uvol-ňovanie buniek z tkaniv alebo z povrchukultivačných nádob podlá bodu 1 až 4 vy-značujúci sa tým, že 60 až 99 hmotných per-cent pomocných látok sa homogenizuje, gra-nuluje a suší a potom sa k suchému granu-látu přidá 1 až 40 hmotných percent, vztia-hnutých na hmotnost výsledného produktu,proteolytických enzýmov a alebo cheláto-tvorných látok alebo ich zmesi.
  6. 7. Sposob přípravy prípravkov pre uvol-ňovanie buniek z tkaniv alebo povrchu kul-tivačných nádob podlá bodu 1 až 4 vyzna-čujúci sa tým, že sa homogenizuje 1 až 40hmotných percent proteolytických enzýmovalebo chelátotvorných látok a 60 až 99 hmot-ných percent pomocných látok, vzniknutázmes sa zvlhčí s výhodou acetónom, etano-lom, izopropanolom, vodou alebo ich zme-sou a následné sa granuluje a suší plynoms výhodou vzduchem pri teplote do 100 °C.
  7. 8. Sposob přípravy prípravkov podlá bo-du 5 až 7 vyznačujúci sa tým, že sa práško-vaný produkt alebo granulát lisuje na výlis-ky s výhodou na tablety alebo brikety pritlaku od 40 MPa do 200 MPa.
  8. 9. Spósob přípravy prípravkov podlá bo-du 5 až 8 vyznačujúci sa tým, že sa práško-vaný produkt, granulát alebo výlisky sterili-zujú gama žiarením s výhodou celkovou dáv-kou 2,5 Mrad. 3everogr»[la, n. p., závod 7, Most
CS52178A 1978-01-26 1978-01-26 Agents for evolving cells from tissues or from cultivating vessels surface in the form of powder granulate or mouldings and method of producing them CS203207B1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CS52178A CS203207B1 (en) 1978-01-26 1978-01-26 Agents for evolving cells from tissues or from cultivating vessels surface in the form of powder granulate or mouldings and method of producing them

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CS52178A CS203207B1 (en) 1978-01-26 1978-01-26 Agents for evolving cells from tissues or from cultivating vessels surface in the form of powder granulate or mouldings and method of producing them

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CS203207B1 true CS203207B1 (en) 1981-02-27

Family

ID=5337435

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CS52178A CS203207B1 (en) 1978-01-26 1978-01-26 Agents for evolving cells from tissues or from cultivating vessels surface in the form of powder granulate or mouldings and method of producing them

Country Status (1)

Country Link
CS (1) CS203207B1 (cs)

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US3873694A (en) Direct compression tabletting composition and pharmaceutical tablets produced therefrom
US5762961A (en) Rapidly soluble oral solid dosage forms, methods of making same, and compositions thereof
DK167171B1 (da) Fremgangsmaade til fremstilling af et stabilt nicorandilholdigt farmaceutisk praeparat
US5958455A (en) Oral solid dosage forms, methods of making same and compositions thereof
EP0578823A1 (en) Porous solid preparation containing physiologically active protein substance
CA2045680C (en) High ibuprofen content granulations
US4315002A (en) Solid pharmaceutical or diagnostic agent containing dextran and its preparation
JPS62250364A (ja) 改良された錠剤化血漿マイクロ濃縮トロンボプラスチン凝固試薬及びその製法
JPS591413A (ja) 加水分解しやすい活性物質を含有する長貯蔵寿命の錠剤およびその製造方法
US6646007B1 (en) Process for preparing a pharmaceutical formulation containing levothyroxine sodium
JP3574691B2 (ja) 錠剤形のチオクト酸含有医薬品処方物
JPH05320045A (ja) 錠剤に直接圧縮可能な医薬粉末組成物を製造するための噴霧乾燥法
IL99237A (en) Preparation of a tablet or dragee composition containing a moisture-heat- and light-sensitive compounds having monoclinic crystalline structure
CS203207B1 (en) Agents for evolving cells from tissues or from cultivating vessels surface in the form of powder granulate or mouldings and method of producing them
GB2064543A (en) An Agent for the Release of Cells From Tissues or From the Surface of a Cultivation Vessel
JPH044297B2 (cs)
ES2373492T3 (es) Composición farmacéutica con ingrediente activo atorvastatina.
JPH0344052B2 (cs)
CN118845682A (zh) 一种甲氨蝶呤片剂的干法制粒方法
CZ286197B6 (cs) Příprava tablet kyseliny fusidové
JPS6412248B2 (cs)
RU2083222C1 (ru) Способ получения энтерального препарата, содержащего интерферон-альфа и энтеральный препарат, содержащий интерферон-альфа в виде таблеток
DE2947046A1 (de) Mittel zum loesen von zellen aus geweben oder von der oberflaeche von kultivationsbehaeltern in form von pulver, granulat oder von presslingen
WO2006057194A1 (ja) 固形剤およびその製造方法
Cole Evaluating development and production costs: Tablets