CS203159B2 - Process for preparing antibiotic l 13 365 - Google Patents
Process for preparing antibiotic l 13 365 Download PDFInfo
- Publication number
- CS203159B2 CS203159B2 CS774233A CS423377A CS203159B2 CS 203159 B2 CS203159 B2 CS 203159B2 CS 774233 A CS774233 A CS 774233A CS 423377 A CS423377 A CS 423377A CS 203159 B2 CS203159 B2 CS 203159B2
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- antibiotic
- sharp
- agar
- culture medium
- orange
- Prior art date
Links
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 title claims description 42
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims description 8
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims description 13
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims description 7
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 241000187844 Actinoplanes Species 0.000 claims description 5
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 claims description 5
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims description 4
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 4
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 150000008282 halocarbons Chemical class 0.000 claims description 3
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 3
- 125000005907 alkyl ester group Chemical group 0.000 claims description 2
- 241000950168 Actinoplanes sarveparensis Species 0.000 abstract description 5
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 39
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 20
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 20
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 12
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 10
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 241000191967 Staphylococcus aureus Species 0.000 description 9
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 9
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 8
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 8
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 7
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 6
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 5
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 5
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 5
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 5
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 5
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- ULGZDMOVFRHVEP-RWJQBGPGSA-N Erythromycin Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](C)C(=O)O[C@@H]([C@@]([C@H](O)[C@@H](C)C(=O)[C@H](C)C[C@@](C)(O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@H](C[C@@H](C)O2)N(C)C)O)[C@H]1C)(C)O)CC)[C@H]1C[C@@](C)(OC)[C@@H](O)[C@H](C)O1 ULGZDMOVFRHVEP-RWJQBGPGSA-N 0.000 description 4
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 4
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 4
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 3
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 3
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 3
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 3
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 3
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 3
- 239000006877 oatmeal agar Substances 0.000 description 3
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 3
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonia chloride Chemical compound [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N D-xylopyranose Chemical compound O[C@@H]1COC(O)[C@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N 0.000 description 2
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 2
- OJMMVQQUTAEWLP-UHFFFAOYSA-N Lincomycin Natural products CN1CC(CCC)CC1C(=O)NC(C(C)O)C1C(O)C(O)C(O)C(SC)O1 OJMMVQQUTAEWLP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XUMBMVFBXHLACL-UHFFFAOYSA-N Melanin Chemical compound O=C1C(=O)C(C2=CNC3=C(C(C(=O)C4=C32)=O)C)=C2C4=CNC2=C1C XUMBMVFBXHLACL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 2
- 229930193140 Neomycin Natural products 0.000 description 2
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 2
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 2
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 2
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 244000061456 Solanum tuberosum Species 0.000 description 2
- 235000002595 Solanum tuberosum Nutrition 0.000 description 2
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 2
- ZCCIPPOKBCJFDN-UHFFFAOYSA-N calcium nitrate Chemical compound [Ca+2].[O-][N+]([O-])=O.[O-][N+]([O-])=O ZCCIPPOKBCJFDN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 2
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 2
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- WIIZWVCIJKGZOK-RKDXNWHRSA-N chloramphenicol Chemical compound ClC(Cl)C(=O)N[C@H](CO)[C@H](O)C1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 WIIZWVCIJKGZOK-RKDXNWHRSA-N 0.000 description 2
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 2
- 229960003276 erythromycin Drugs 0.000 description 2
- 238000002189 fluorescence spectrum Methods 0.000 description 2
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 2
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 2
- 238000000703 high-speed centrifugation Methods 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 238000002329 infrared spectrum Methods 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- 229960000318 kanamycin Drugs 0.000 description 2
- 229930027917 kanamycin Natural products 0.000 description 2
- SBUJHOSQTJFQJX-NOAMYHISSA-N kanamycin Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CN)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N SBUJHOSQTJFQJX-NOAMYHISSA-N 0.000 description 2
- 229930182823 kanamycin A Natural products 0.000 description 2
- 239000003350 kerosene Substances 0.000 description 2
- OJMMVQQUTAEWLP-KIDUDLJLSA-N lincomycin Chemical compound CN1C[C@H](CCC)C[C@H]1C(=O)N[C@H]([C@@H](C)O)[C@@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](SC)O1 OJMMVQQUTAEWLP-KIDUDLJLSA-N 0.000 description 2
- 229960005287 lincomycin Drugs 0.000 description 2
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 2
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 2
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 2
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 2
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 2
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 2
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 2
- 229960004927 neomycin Drugs 0.000 description 2
- 239000006916 nutrient agar Substances 0.000 description 2
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 2
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 2
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 2
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 2
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 2
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 2
- JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N toluene-4-sulfonic acid Chemical compound CC1=CC=C(S(O)(=O)=O)C=C1 JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 2
- UQZSVIGPZAULMV-DKWTVANSSA-N (2s)-2,4-diamino-4-oxobutanoic acid;propane-1,2,3-triol Chemical compound OCC(O)CO.OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O UQZSVIGPZAULMV-DKWTVANSSA-N 0.000 description 1
- 125000004169 (C1-C6) alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 241000186361 Actinobacteria <class> Species 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010001478 Bacitracin Proteins 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N Chlorine atom Chemical compound [Cl] ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000193468 Clostridium perfringens Species 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- JPIJQSOTBSSVTP-GBXIJSLDSA-N D-threonic acid Chemical compound OC[C@@H](O)[C@H](O)C(O)=O JPIJQSOTBSSVTP-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 1
- 241000192125 Firmicutes Species 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 239000001828 Gelatine Substances 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N Hexa-Ac-myo-Inositol Natural products CC(=O)OC1C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C1OC(C)=O SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910021578 Iron(III) chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 241000204022 Mycoplasma gallisepticum Species 0.000 description 1
- OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N Propanedioic acid Natural products OC(=O)CC(O)=O OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-RMMQSMQOSA-N Raffinose Natural products O(C[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O[C@@]2(CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O1)[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-RMMQSMQOSA-N 0.000 description 1
- NGFMICBWJRZIBI-JZRPKSSGSA-N Salicin Natural products O([C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O1)c1c(CO)cccc1 NGFMICBWJRZIBI-JZRPKSSGSA-N 0.000 description 1
- 241000194017 Streptococcus Species 0.000 description 1
- 241000193998 Streptococcus pneumoniae Species 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004098 Tetracycline Substances 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-UHFFFAOYSA-N UNPD196149 Natural products OC1C(O)C(CO)OC1(CO)OC1C(O)C(O)C(O)C(COC2C(C(O)C(O)C(CO)O2)O)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LGDAGYXJBDILKZ-UHFFFAOYSA-N [2-methyl-1,1-dioxo-3-(pyridin-2-ylcarbamoyl)-1$l^{6},2-benzothiazin-4-yl] 2,2-dimethylpropanoate Chemical compound CC(C)(C)C(=O)OC=1C2=CC=CC=C2S(=O)(=O)N(C)C=1C(=O)NC1=CC=CC=N1 LGDAGYXJBDILKZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000862 absorption spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 229960000583 acetic acid Drugs 0.000 description 1
- 238000013019 agitation Methods 0.000 description 1
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- NGFMICBWJRZIBI-UHFFFAOYSA-N alpha-salicin Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1=CC=CC=C1CO NGFMICBWJRZIBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 1
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019270 ammonium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000000845 anti-microbial effect Effects 0.000 description 1
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N arabinose Natural products OCC(O)C(O)C(O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 1
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229960003071 bacitracin Drugs 0.000 description 1
- 229930184125 bacitracin Natural products 0.000 description 1
- CLKOFPXJLQSYAH-ABRJDSQDSA-N bacitracin A Chemical compound C1SC([C@@H](N)[C@@H](C)CC)=N[C@@H]1C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]1C(=O)N[C@H](CCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CC=2N=CNC=2)C(=O)N[C@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)NCCCC1 CLKOFPXJLQSYAH-ABRJDSQDSA-N 0.000 description 1
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Natural products OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- HDRTWMBOUSPQON-ODZAUARKSA-L calcium;(z)-but-2-enedioate Chemical compound [Ca+2].[O-]C(=O)\C=C/C([O-])=O HDRTWMBOUSPQON-ODZAUARKSA-L 0.000 description 1
- 150000001722 carbon compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 1
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 1
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 229960005091 chloramphenicol Drugs 0.000 description 1
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 description 1
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 description 1
- WORJEOGGNQDSOE-UHFFFAOYSA-N chloroform;methanol Chemical compound OC.ClC(Cl)Cl WORJEOGGNQDSOE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 1
- 230000015271 coagulation Effects 0.000 description 1
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 description 1
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 1
- -1 dimethylformmiamide Chemical compound 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 238000000295 emission spectrum Methods 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 1
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 1
- 239000010200 folin Substances 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 239000012362 glacial acetic acid Substances 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 1
- 229910017053 inorganic salt Inorganic materials 0.000 description 1
- CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N inositol Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N 0.000 description 1
- 229960000367 inositol Drugs 0.000 description 1
- 239000002198 insoluble material Substances 0.000 description 1
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N iron Substances [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- RBTARNINKXHZNM-UHFFFAOYSA-K iron trichloride Chemical compound Cl[Fe](Cl)Cl RBTARNINKXHZNM-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 230000001788 irregular Effects 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 231100000636 lethal dose Toxicity 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N maleic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N 0.000 description 1
- 239000011976 maleic acid Substances 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 238000012009 microbiological test Methods 0.000 description 1
- FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N ninhydrin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)C(O)(O)C(=O)C2=C1 FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012454 non-polar solvent Substances 0.000 description 1
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 1
- 238000004816 paper chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000000704 physical effect Effects 0.000 description 1
- 239000012286 potassium permanganate Substances 0.000 description 1
- 235000012015 potatoes Nutrition 0.000 description 1
- 238000003918 potentiometric titration Methods 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-ZQSKZDJDSA-N raffinose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-ZQSKZDJDSA-N 0.000 description 1
- JQXXHWHPUNPDRT-WLSIYKJHSA-N rifampicin Chemical compound O([C@](C1=O)(C)O/C=C/[C@@H]([C@H]([C@@H](OC(C)=O)[C@H](C)[C@H](O)[C@H](C)[C@@H](O)[C@@H](C)\C=C\C=C(C)/C(=O)NC=2C(O)=C3C([O-])=C4C)C)OC)C4=C1C3=C(O)C=2\C=N\N1CC[NH+](C)CC1 JQXXHWHPUNPDRT-WLSIYKJHSA-N 0.000 description 1
- 229960001225 rifampicin Drugs 0.000 description 1
- NGFMICBWJRZIBI-UJPOAAIJSA-N salicin Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=CC=CC=C1CO NGFMICBWJRZIBI-UJPOAAIJSA-N 0.000 description 1
- 229940120668 salicin Drugs 0.000 description 1
- CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N scyllo-inosotol Natural products OC1C(O)C(O)C(O)C(O)C1O CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 238000012807 shake-flask culturing Methods 0.000 description 1
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 1
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 1
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000010802 sludge Substances 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 235000011149 sulphuric acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000008399 tap water Substances 0.000 description 1
- 235000020679 tap water Nutrition 0.000 description 1
- 229960002180 tetracycline Drugs 0.000 description 1
- 229930101283 tetracycline Natural products 0.000 description 1
- 235000019364 tetracycline Nutrition 0.000 description 1
- 150000003522 tetracyclines Chemical class 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
- A61K35/74—Bacteria
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P1/00—Preparation of compounds or compositions, not provided for in groups C12P3/00 - C12P39/00, by using microorganisms or enzymes
- C12P1/06—Preparation of compounds or compositions, not provided for in groups C12P3/00 - C12P39/00, by using microorganisms or enzymes by using actinomycetales
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P17/00—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms
- C12P17/18—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms containing at least two hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring system, e.g. rifamycin
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/045—Actinoplanes
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
- Y10S435/827—Actinoplanes
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Mycology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Virology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Compounds Of Unknown Constitution (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Mushroom Cultivation (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Description
Vynález se týká způsobu výroby nového antibiotika získaného fermentací kmene patřícího do rodů Actinoplanes jménem Actinoplanes sarveparensis. Nové antibiotikum, o němž se zde referuje jako o antibiotiku L 13 365, je světle žlutá krystalická látka, imajcí charakteristické vlastnosti jako teplotu tání, infračervená a ultrafialová absorpční maxima.
Jak byla svrchu uvedeno, antibiotikum L 13 365 se vyrábí fermentací kmene Actinoplaines sarveparensis. Tento kmen je identifikovaný sbírkovým číslem A/13 826 a byl izolován z půdního vzorku odebraného ve vesnici Servepar (Indie). Kmen byl uložen a stal se částí zásobní sbírky kultur CBS (Centrál Bureau Voor Schimmelcultures — Oosterstraat 1 — Baarn —- Nizozemí), kde byl označen číslem 350.76.
Při přípravě antibiotika L 13 365 se mikroorganismus kultivuje za aerobních podmínek ve vodém živném prostředí obsahujícím assmilovatelné zdroje uhlíku, asitmilovatelné zdroje dusíku a anorganické soli.
Obvykle je kmen vyrábějící antibiotikum nejprve kultivován v třepací láhvi, dokud není přítomna dostatečná antibiotická aktivita, potom je kultura užita k inokulaci průmyslových fermentorů obsahujících živné fermentační prostředí.
Předmětem vynálezu je způsob výroby antibiotika L 13 '365, vyznačující se tím, že se pěstuje kmen Actinoplanes serveparensis C. B. S. č. 305,76 v živném prostředí, obsahujícím využitelný zdroj uhlíku, využitelný zdroj dusíku a anorganické soli, v suibmerzní kultuře za aerobních podmínek při teplotě 25 až 35 QC, při pM 6 až 10, po dobu 72 až 96 hodin, do nahromadění uvedeného antibiotika v živném prcistředí, načež se antibiotikum ze zfiltrovaného živného prostředí izoluje organickým rozpouštědlem, a to alkanolem o 1 až 6 atomech uhlíku, alkylesterem nižších alifatických kyselin o 1 až 4 atomech uhlíku v alkylesterové Části nebo nižšími halogenovanými uhlovodíky. Během kultivace se provádějí mikrobiologické zkoušky metodou difúze na agaru, aby se zjistila· koncentrace vyrobeného antibiotika.
Po odstranění · mycelicivého kaláče fUtiací se z profitroovaného fermentačního roztoku získá antibiotikum obvyklými postupy, jako· je například extrakce organickým rozpouštědlem, ve kterém je antibiotikum rozpustné a jež je nemísitelné s vodným· prostředím. Extrakce· se provádí po úpravě pH filtrátu na 2 až 4. Vhodné organické rozpouštědla pro extrakci se s výhodou volí z alkanolů obsahu jících 1 až 6 atomů uhlíku, · (Ci — CJ-alkylesterů nižších alifatických kyselin, nebo ' nižších halogenovaných uhlovodíků. Rozpouštědlo se pak oddělí od fermentačního roztoku centrifugací s vysokou rychlostí, koncentruje se na 1/200 až 1/400 svého, původního objemu, chladí se a nechá se stát dokud se nevytvoří prepicitát, který se oddělí filtrací. Získaný precipitát sestává z poměrně čistého antibiotika L 13 365.
Matečné roztoky se shromáždí a vlijí se v přebytku do inertního nepolárního rozpouštědla jako je lehký petrolej a· poskytnou tak další množství surového antibiotika L 13 365. Takto získaný surový produkt se rozpustí ve směsi methanolu a acetonu a precipituje se z roztoku přidáním ' okyselené vody.
Dva díly se smísí a dále čistí sloupcovou chromatografií s použitím směsi chloroformu a methanolu jako eluční soustavy.
Antibiotikum L 13 365 je nakonec krystalizováno· ze směsi methanolu a ethylacetátu 1 : 1.
Antibiotikum L 13 365 vykazuje značnou antibákteriální účinnost jak in vitro, tak in vivo. Zejména antibiotikum L 13 365 vykazuje vynikající antimikrobiální působení· in vitro speciálně proti grampozitivním bakteriím, jak je uvedeno v následující tabulce:
Tabulka
Kmen Minimální inhibiční koncentrace [jg/ml)
Staphylococcus aureus
ATCC 65138 0,025
Staphylococus aurees Tour 0,005'
Stre,ptococcus haemolyticus
C 203 0,0062
Kmen Minimální inhibiční koncentrace (jíg/jnl)
Diplococcus pneumoniae
UC 41 0,00078
Clostridium perfringens
ISS 30543 0,012
Mycoplasma gallisepticum
H21 C.Z.B. 0,2
Nadto jak se svrchu uvádí, vykazuje antibiotikum L 13 365 také vynikající účinnost in vivo proti experimentálním infekcím u myší. V níže uvedené tabulce jsou uvedeny střední účinné dávky (EDsoj antibiotika L 13 365 proti experimentálním infekcím vyvolanými Staphylococcus aureus, Streptocoocu® haemolyticus a D^iplococcus pneumoniae.
Tabulka
Infekční kmen ED50 mg/kg s. c.
Streptococcus ιhaemuly't'i'Cus0,2
Stapihylococcus aureus10,0
Dljplococeus pneumuniae0,4
Nové antibiotikum je také účinné proti kmenům mikroorganismů, které jsou odolné proti běžně užívaným antibiotikům. Jako vybrané příklady jsou v následující tabulce I uvedeny minimální inhibiční koncentrace (Μ. I. C.J antibiotika· L 13 365 proti kmenům Staphyl^^^us aureus eesistentním k některým antibiotikům.
| Tabulka I | ||
| Kmen | Minimální inhibiční koncentrace jiných antibiotik | Minimální inhibiční koncentrace antibiotika L 13 365 |
| Staphyloeeueus aureus ATCC 6538 odolný vůči penicilinu | penicilín > 100 | 0,4 . |
| Stiaph^ylococcus aureus Tour odolný vůči streptomycinu | streptomycin > 100 | 0,078 |
| Staphyloeoecss aureus ATCC 6538 odolný vůči teteaeykiins | tetracyklin > 1-00 | 0,15 |
| Staphylococcus aureus ATCC 6538 odolný vůči rifampicinu | firampicin > 100 | 0?01 |
| Staphyloeoecss aureus ATCC 6538 odolný vůči neomycinu | neomycin > 100 | 0,005 |
| Stapnylococcus aureus ATCC 6538 odolný vůči erythromycinu | erythromycin > 100 | 0,04 |
Minimální inhibiční koncentrace antibiotika
L 13 365
Kmen
Minimální inhibiční koncentrace jiných antibiotik
Staphylococcus aureus ATCIC 6538 odolný vůči chlor amphe-nikolu
Staphylococcus aureus
ATOC 6538 odolný vůči cephalo!ridinu
Staphylococcus aureus
ATOC 6538 odolný vůči kanamycinu
Staphylococcus aureus
ATOC 6538 odolný vůči bacitracinu
Staphylococcus aureus ATOC 6538 odolný vůči lincomycinu chloramphenikol > 1000,02 ceiplialoridiin > 1000,078 kanamycin > 1000,04 ba-citiraioin > 1000,02 lincomycin > 1000,15
Toxicita antibiotika L 13 365 při perorální nebo intraperitoneální aplikaci u myší je velmi nízká, protože hodnoty střední smrtné dávky .(LDso) jsou výší než 1000 mg/kg.
Popis Actinoplanes sarveparensis ' A/13 826
Makroskopické vyšetření kolonií
Kmen roste dobře na různých živných agarech. Na agaru s ovesnou moukou mají kolonie průměr 3 až 4 mm, nepravidelné okiraje a drsný povrch. Vzdušné mycelium vždy chybí.
Mikroskopické vyšetření
Sporangia jsou vytvářena v několika, agarových živných prostředích. Mají pravidelný kulový tvar s průměrem od 13 do 20 μ. Zoospory, vysoce pohyblivé, jsou kulovité, ale občas lehce prodloužené o průměru
1,5 až 2 μ.
Na základě těchto vlastností je kmen A/13 826. přiřazován k rodu Actinoplanes a pojmenován Actionplanes sarveparensis C. B. S. 305.76. Tabulka ÍI udává kultur Actinoplanes serveparensis C. B. S. 305.76 kultivovaného na různých standardních prostředcích navržených Shirlingem a Gottliegem [Intern. J. Syst. Bact. 16, 313— 340, 1966) a v dalších prostředích navržených Waksmanem [The Actinomycetes, sv. II, The Williams and Wilkins Co, 1961). Vlastnosti kultur byly stanoveny po 6 až 14 dnech inkubace při 30 °C.
Tabulka III uvádí využití uhlíkových zdrojů vyšetřených podle metody Pridha.mia a G-ottlieiba (Intern. J. Syst. Bact., 56, 107, 1948).
Tabulka IV uvádí fyziologické vlastnosti kmene.
Actinoplanes sarveparensis C. B. S. 305.76
Kultivační prostředí
Živné prostředí č. 2 (kvasnicový extrakt— —maltózový agar)
Živné prostředí č. 3 (agar s ovesnou moukou)
Živné prostředí č. 4 (anorganické soli — — škrobový agar)
Živné prostředí č. 5 (glycerol — asparaginový agar)
Živné prostředí č. 6 (pepton-kvasnicový extrakt — agar se železem)
Živné prostředí č. 7 (tyrosinový agar)
Agar s ovesnou moukou (podle Waksmana)
Hyckneyův a· Tresnerův agar
Czapkův glukózový agar
Agar s glukózou a asparaginem
Živný agar
Bramborový agar
Bennetův agar
Agar s maleátem ' vápenatým
Skimův mléčný agar
Czapkův agar
Vaječný agar
Agar s peptonem a glukózou
Agar
Loefflerovo sérum
Brambory
Želatina
Celulóza
Tabulka II Vlastnosti kultur
Vlastnosti kultur
Bohatý vzrůst, zvrásněný povrch, oranžový až hnědý (centrální Část kolonie je hmavší).
Mírný vzrůst, tenké, sklovité až · světle oranžové. Produkce sporangií.
Střední vzrůst, škraloupovitý povrch, světle oranžový (9/G/7).
Bohatý vzrůst, škraloupovitý povrch, zářivě oranžová (9/1/11).
Mírný vzrůst, škraloupovitý povrch hnědý (13/C/7).
Střední vzrůst, škraloupovitý povrch, oranžový (ll/F/8).
Bohatý vzrůst, drsný povrch, oranžový (9/ /H/12), centrální . část kolonie je tmavší.
Střední vzrůst, zvrásněný povrch, hnědý (18/A/12).
Bohatý vzrůst, zvrásněný povrch, oranžový (11/G/H).
Bohatý vzrůst, drsný povrch, zářivě oranžový (9/1/11).
Střední vzrůst, drsný povrch, oranžový (ll/F/8).
Střední vzrůst, zvrásněný povrch, oranžový až hnědý, produkce sporangií.
Střední vzrůst, zvrásněný povrch, světle oranžový (9/D/9).
Mírný vzrůst, mírná sklovitý ' až světle oranžový, produkce sporangií.
Bohatý vzrůst, zvrásněný povrch, oranžový až světle hnědý, skvrnité stíny.
Bohatý vzrůst, zvrásněný povrch, oranžový (11/G/H).
Mírný vzrůst, drsný povrch, sklovitý.
Střední vzrůst, zvrásněný povrch, tmavě oranžový (11-/B/12).
Velmi mírný vzrůst, tenký, sklovitý.
Velmi- mírný vzrůst, oranžový.
Mírný vzrůst, zvrásněný povrch, tmavě oranžový.
Mírný vzrůst, světle oranžový.
Žádný růst.
Barvy byly určeny podle metody Maerze a Paula (Maerz A. a Paul M. R., 1950). A dictionary of color, 2nd ed. M. Grow—Hill Book Company, lne., New York).
Čísla některých živných prostředí odpovídají číslům uvedeným v práci Shirlinga a Gottlieba · (Intern. J. Syst. Bact., 16, 313— —340, 1966).
Tabulka III
Využívání uhlíkových sloučenin
Zdroj uhlíku
Využívání
| C5 | á'rabinčza | + |
| xylóza | + | |
| c6 | glukóza | + |
| frúktóza | + | |
| mannóza | + | |
| mannitol | ||
| inositol | ||
| rhamnóza | + | |
| (C6)2 | sacharóza | + |
| laktóza | + | |
| ' (Ce)3 | rafinóza | — |
| (C6)4 | celulóza | — |
| Speciální salicin |
+ značí využívání — značí nevyužívání
Tabulka IV
Fyziologické vlastnosti
| Test | Výsledky |
| hydrolýza škrobu | pozitivní |
| tvorba H2S | pozitivní |
| vytváření melaninu | negativní |
| tyrosinová reakce | negativní |
| hydrolýza kaseinu | pozitivní |
| hydrolýza maleinanu | pozitivní |
| vápenatého | |
| redukce dusičnanu | pozitivní |
| koagulace lakmusového | negativní |
| mléka | |
| peptonizace lakmusového | pozitivní |
| mléka | |
| zkapalnění želatiny | pozitivní |
Výroba a izolace antibiotika
K výrobě antibiotika se kmen Actinoplanes sarveparensis C. B. S. 305.76 za aerobních podmínek překultivuje v živném prostředí dokud se nezjistí dostatečná antibiotická aktivita při hodnotách pH pohybujících se od 6 do 10. Například může mít kultura v třepací láhvi následující složení v g/litr:
masový extrakt3,0 trypton5,0 kvasnicový extrakt5,0 glukóza1,0 rozpustný škrob24,0 uhličitan· vápenatý4,0 destilovaná voda q. s. do 1000,0ml až 30 °C a prekultury (jeden litr) se užijí k inokulaci průmyslových fermentorů obsahujících 10 litrů následujícího· živného prostředí:
masový extrakt 40,0 0 pepton 40,0 ό kvasnicový extrakt 10,0 g chlorid sodný 25,5 0 sójová mouka 101,0 0 glukóza 500,0 0 uhličitan vápenatý 50,0 0 voda z vodovodu q. s. do· 10 litrů
Fermentační vsázky se inkubují za aerobních' podmínek a míchání při 28 až 30 stupních Celsia. V pravidelných intervalech se určuje antibiotická aktivita mikrobiologicky agarovou difúzí metodou s použitím jako testovního organismu Staphylococcus aureus. Maximální účinnost se dosáhne po 72 až 96 hodinách fermentace.
Izolace a čištění antibiotika L 13 365.
Obsah fermentačních tanků (80 litrů) se filtruje s použitím1 pomocného: filtračního prostředku „1 % (hmotnost/objem) clarcel”. Mycellový koláč se odstraní a profiltrovaný roztok okyselený na pH 2,5 10% HC1 se dvakrát extrahuje ethylacetátem v množství odpovídajícím 50 % svého objemu.
Organická fáze se oddělí od vodné s použitím vysokorychlostní centrifugace, pak se suší NazSOí, koncentruje při 45 až 50 stupních Celsia ve vakuu na 1/300 svého původního objemu a nakonec vychladí na až 10 °C. Vytvoří se surový precipitát, který se získá filtrací, promyje se malým
Láhve se třepají asi 24 hodin, při asi 28 množstvím ethylacetátu a suší při 45 °C ve vakuu. Získá se . 1,140 g antibiotika asi Í70 proč, čistoty určené spektrofotometricky.
Matečné likvory vznikájící za svrchu uvedené filtrace se vlijí do' 20 objemů lehkého petroleje a získá se další množství 2,250 g antibiotika o čistotě 20 až 25 % (určeno spektrofotometricky). Tato substance se suspenduje v malém množství směsi methanolu a acetonu · (9:1), odfiltruje od ' nerozpustného podílu a rozpustí ve vodě: roztok se uvede na hodnotu pH
2,5 pomocí 10% HC1 za míchání a získaný precipitát se shromáždí centrifugací a dále rozpustí v minimálním množství butanolu při 45 až 50 '°C. Roztok se koncentruje ve vakuu ha· 1/5 původního objemu a vychladí se na 4 °C; získaný precipitát se shromáždí a usuší ve vakuu a jde o antibiotikum L 13 365· (0,450 g) mající stupeň čistoty 80 proč, (určeno· spektrofotometricky). Získané výtěžky se pak podrobí obvyklým čisticím postupům. K tomuto účelu se rozpustí v minimálním množství směsi chloroformu a methanolu (85 : 15) a chromatografují na směsi kysličníku křemičitého a celitu v objemovém poměru 1 : 1. Sloupec se předem aktivuje· při 100 °C a promývá se svrchu uvedenou směsí chloroformu a methanolu.
Eluční a tenkovrstvená chromatografická kontrola frakcí se provádí se stejnou směsí. Frakce se shromažďují podle údajů tenkovrstevně chromatografické analýzy a koncentrují ve vakuu na malý objem. Po přidání diethyletheru se vytvoří precipitát sestávající z antibiotika L 13 365 se stupněm čistoty 95 % (stanoveno spektrofotometricky). Uvedený precipitát se rozpustí ve směsi methanolu a ethylacetátu (1 : 1), zahřeje na 45 °C, odfiltruje od nerozpustného! podílu, po chlazení n'a 4 °C a stání přes noc při této teplotě se získá čisté antibiotikum L 13 365 jako světle žluté jehličky.
Chemickofyzikální vlastnosti antibiotika L 13 365.
Antibiotikum L 13 365 je světle žlutý krystalický prášek kyselého charakteru. Analýzou kyselého hydrolyzátu antibiotika L 13 365 v 6 N kyselině chlorovodíkové v zatavené trubici při 110 °C se odhalí čtyři aminokyseliny. Tři z nich byly identifikovány přístrojem pro automatickou analýzu jakoi kyselina asparagová, threoninová a glycin. Nadto, je antibiotikum L 13 365 charakterizováno následujícími vlastnostmi:
1) Teplota tání 210 °C.
2) Elementární analýza:
51,35 %· C, 5,05 ·% H, 10,50 % N,
11,05 % S.
O (z rozdílu): 22,05
3) Ultrafialové a viditelné absorpční , spektrum rozpouštědlo Amax (nm) 1 %
E 1 cm
| kyselina chlorovodíková 0,1 N | 360 250 (hrb) | 103 |
| 237 | 326 | |
| pufr 0,15 M | 408 (hrb) | |
| pH 7,5 | 378 | 67 |
| 250 (hrb) 237 | 326 | |
| pufr 0,15 M | 408 | 5Θ |
| pH 8,8 | 250 (hrb) 238 | 336 |
Ultrafialová absorpční spektra byla určena ultrafialovým spektrofotometrem UNICAM Sp 800 s použitím roztoku L 13 365 v methylcellosolvových · (MCS)-pufrech při různém . pH v· poměru 1 : 1.
Kompletní průběh · spektra je uveden na obrázku č. 1.
4) · Fluorescenční spektrum
Antibiotikum obsahuje silně fluorescenční chromofor a roztok produktu v 0,1 N hydroxidu sodném vybuzený při 240 nm vykazuje emisní spektrum s maximy při 355 a ·490 nm.
Fluorescenční spektrum · ' bylo stanoveno s · fluorescenčním spektrofotometrem Perkin
Elmer Mod MPF—44.
5) Infračervené spektrum
Charakteristické absorpční svazky v nujolu byly pozorovány při následujících frekvencích (cm'1): 3400· (hrb), 3350 (ostrý), 3200 (hrb), 3100 (ostrý), 2930 a 2870 (nujol), 2800—2400, 2380 (atmosférický kysličník uhličitý), 1750 (ostrý), 1670 (ostrý), 1620 (ostrý), .1540 (ostrý) , 1480 (ostrý,,
1460 a 1380 (nujol), 1420 (ostrý), 1340 (ostrý), 1320 (ostrý), 1280 o^ísú^^.) , 1240
(.ostrý), 1195 (ostrý), 1170 (ostrý,, 1145 (ostrý), 1120 (.ostrý)» 1075 (široký), 1015 (ostrý), 550 (ostrý), 535 (ostrý), 520 (široký), 500 · (ostrý), 865 (ostrý), 840 (-ostrý),
800 (ostrý), 770 (ostrý), 755 (ostrý), 740 (ostrý), 720 (nujol).
Infračervené spektrum bylo stanoveno na spektrofotometru Perkin—Elmer Mod 157.
Kompletní obraz spektra je uveden na obrázku č. 2.
6) Specifická rotace [w]43625 — +125° (C — 0,8 % ve směsi methanolu a chloroformu 1:1]
7) Rozpustnost
Sloučenina je rozpustná v dimethylsulfoixidu, dimethylformiamid-, a v chloroform-methanolových směsích, lehce rozpustná v chloroformu, methanolu, methanol/ethylacetátových směsích, v roztocích hydrogenuhličitanu sodného a ledové kyselině octové, nerozpustné ve vodě a v ostatních běžných organických rozpouštědlech.
8) Charakteristické reakce
Fehling
Tollens
KMnO4 H2SO4 konc. ninhydrinová
FeC13
Milloinova
Schiffova
Anthroinová
Folin Ciocalteauova Elson Morganova pozitivní pozitivní pozitivní tmavě hnědá barva negativní pozitivní negativní negativní pozitivní negativní negativní
9) Kyselost
Ionizovatelná funkce s pKa 7,8 se prokáže při potenciometrické titraci s 0,1 N hydroxidem sodným antibiotika L 13 365 v roztoku methylcellosolvu : vodě 4 :1. Ekvivalentní určená odpovídajícím způsobem je 1400.
10) Chromatograf ické vlastnosti
Systém rozpouštědel
Pufr pH 6,0 nasycený n-butanolem 0,75 Voda nasycená n-butanolem a 2% p-toluensulfonová kyselina0,80
Voda nasycená n-butanolem a 2% koncentrovaný amoniak0,70
Chlorid amonný (20 °/o hmot/objem ve vodě0,0
Butanolový nasycený pufr pH 6,00,0 n-butanol: methanol: voda 40 :10 : 20 s obsahem 0,75 g methyloranže0,90 n-butanol: methanol: voda 40 :10 : 300,90 voda : aceton 1: :10,35 voda nasycená ethylacetátem 0,0—0,31 chloroform : methanol 85:15 (xx)0,51 <x> Papírová chromatografie na Whatmanově č. 1. Antibiotikum vizuallzována na agarových plotnách inokulovaných S. aureus.
(xx) Tenkovrstvená chromatografie na silikagelových plotnách MF/UV254. Fluorescenční skvrna pod ultrafialovým světlem.
Claims (1)
- PŘEDMĚT VYNALEZUZpůsob výroby antibiotika L 13 365, vyznačující se tím, že se pěstuje kmen Actinoplanes serveparensis C. B.S. č. 305,76 v živném prostředí, obsahujícím využitelný zdroj uhlíku, využitelný zdroj dusíku a anorganické soli v submerzní kultuře za aerobních; podmínek při teplotě 25 až 35 °C při pM 6 až 10 po dobu 72 až 96 h do nahromadě ní uvedeného antibiotika v živném prostředí, načež se antibiotikum ze zfiltrovaného živného prostředí izoluje organickým rozpouštědlem, a to alkanolem o 1 až 6 atomech uhlíku, alkylesterem alifatických kyselin o 1 až 4 atomech uhlíku v alkylesterové části, nebo halogenovanými uhlovodíky.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| GB26934/76A GB1533677A (en) | 1976-06-29 | 1976-06-29 | Antibiotic |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS203159B2 true CS203159B2 (en) | 1981-02-27 |
Family
ID=10251519
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS774233A CS203159B2 (en) | 1976-06-29 | 1977-06-27 | Process for preparing antibiotic l 13 365 |
Country Status (32)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US4100273A (cs) |
| JP (1) | JPS532402A (cs) |
| AR (1) | AR212652A1 (cs) |
| AT (1) | AT352271B (cs) |
| AU (1) | AU514594B2 (cs) |
| BE (1) | BE856273A (cs) |
| CA (1) | CA1086669A (cs) |
| CH (1) | CH624992A5 (cs) |
| CS (1) | CS203159B2 (cs) |
| DD (1) | DD133573A5 (cs) |
| DE (1) | DE2724090A1 (cs) |
| DK (1) | DK278577A (cs) |
| ES (1) | ES460248A1 (cs) |
| FI (1) | FI56697C (cs) |
| FR (1) | FR2356666A1 (cs) |
| GB (1) | GB1533677A (cs) |
| GR (1) | GR63764B (cs) |
| HK (1) | HK39979A (cs) |
| HU (1) | HU174186B (cs) |
| IE (1) | IE45445B1 (cs) |
| IL (1) | IL52063A (cs) |
| LU (1) | LU77623A1 (cs) |
| NL (1) | NL7705490A (cs) |
| NO (1) | NO146873C (cs) |
| NZ (1) | NZ184053A (cs) |
| PH (1) | PH12811A (cs) |
| PL (1) | PL105792B1 (cs) |
| PT (1) | PT66730B (cs) |
| SE (1) | SE7707467L (cs) |
| SU (1) | SU680657A3 (cs) |
| YU (1) | YU159277A (cs) |
| ZA (1) | ZA772862B (cs) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS6024717B2 (ja) * | 1978-05-24 | 1985-06-14 | 三共株式会社 | 抗生物質マイコプラネシン |
| GB8624806D0 (en) * | 1986-10-16 | 1986-11-19 | Pfizer Ltd | Glycopeptide antibiotic |
Family Cites Families (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB1455128A (en) * | 1973-03-19 | 1976-11-10 | Lepetit Spa | Purpuromycin and its derivatives |
| GB1458512A (en) * | 1973-11-22 | 1976-12-15 | Lepetit Spa | Antibiotic substance |
| DE2510160A1 (de) * | 1975-03-08 | 1976-09-16 | Bayer Ag | Antibioticum, ein verfahren zu seiner herstellung sowie seine verwendung als arzneimittel |
| US4031206A (en) * | 1976-02-04 | 1977-06-21 | Pfizer Inc. | Antibiotics produced by species of pseudonocardia |
| US4174390A (en) * | 1977-02-07 | 1979-11-13 | Eli Lilly And Company | Antibiotic A-7413 and process for preparation thereof |
| US4169887A (en) * | 1978-02-21 | 1979-10-02 | Pfizer Inc. | Antibiotics produced by species of actinoplanes |
-
1976
- 1976-06-29 GB GB26934/76A patent/GB1533677A/en not_active Expired
-
1977
- 1977-05-05 GR GR53381A patent/GR63764B/el unknown
- 1977-05-09 NZ NZ184053A patent/NZ184053A/xx unknown
- 1977-05-09 AU AU24991/77A patent/AU514594B2/en not_active Expired
- 1977-05-11 IL IL52063A patent/IL52063A/xx unknown
- 1977-05-13 ZA ZA00772862A patent/ZA772862B/xx unknown
- 1977-05-16 PH PH19779A patent/PH12811A/en unknown
- 1977-05-18 NL NL7705490A patent/NL7705490A/xx not_active Application Discontinuation
- 1977-05-23 AR AR267740A patent/AR212652A1/es active
- 1977-05-27 DE DE19772724090 patent/DE2724090A1/de not_active Withdrawn
- 1977-05-31 FI FI771721A patent/FI56697C/fi not_active IP Right Cessation
- 1977-05-31 US US05/802,215 patent/US4100273A/en not_active Expired - Lifetime
- 1977-06-23 NO NO772225A patent/NO146873C/no unknown
- 1977-06-23 DK DK278577A patent/DK278577A/da not_active Application Discontinuation
- 1977-06-27 PT PT66730A patent/PT66730B/pt unknown
- 1977-06-27 LU LU77623A patent/LU77623A1/xx unknown
- 1977-06-27 DD DD7700199717A patent/DD133573A5/xx unknown
- 1977-06-27 CS CS774233A patent/CS203159B2/cs unknown
- 1977-06-28 FR FR7719871A patent/FR2356666A1/fr active Granted
- 1977-06-28 CH CH792977A patent/CH624992A5/fr not_active IP Right Cessation
- 1977-06-28 SU SU772497858A patent/SU680657A3/ru active
- 1977-06-28 IE IE1327/77A patent/IE45445B1/en unknown
- 1977-06-28 CA CA281,602A patent/CA1086669A/en not_active Expired
- 1977-06-28 HU HU77LE807A patent/HU174186B/hu unknown
- 1977-06-28 AT AT458377A patent/AT352271B/de not_active IP Right Cessation
- 1977-06-28 JP JP7710377A patent/JPS532402A/ja active Pending
- 1977-06-28 SE SE7707467A patent/SE7707467L/xx not_active Application Discontinuation
- 1977-06-28 YU YU01592/77A patent/YU159277A/xx unknown
- 1977-06-29 BE BE178912A patent/BE856273A/xx unknown
- 1977-06-29 PL PL1977199238A patent/PL105792B1/pl unknown
- 1977-06-29 ES ES460248A patent/ES460248A1/es not_active Expired
-
1978
- 1978-04-07 US US05/894,221 patent/US4280001A/en not_active Expired - Lifetime
-
1979
- 1979-06-21 HK HK399/79A patent/HK39979A/xx unknown
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US4918174A (en) | Tiacumicin compounds | |
| US4375464A (en) | Antibiotic AY24,668 and process of preparation | |
| US4148883A (en) | Antibiotics produced by new species of nocardia | |
| US4187292A (en) | Antibiotics produced from the microorganism nocardice | |
| KR960013432B1 (ko) | 항균제 fr109615 및 이의 제조방법 | |
| HU182267B (en) | Process for preparing the antibiotic c-15003 p-3 | |
| US4313935A (en) | Antibiotic FR-900129 substance, a process for the preparation thereof and pharmaceutical compositions containing the same | |
| US4384043A (en) | Process for producing the antibiotic nosiheptide | |
| CA1092999A (en) | Method for producing maytansinol and its derivatives | |
| US6395711B1 (en) | Macrolides with antitumor activity | |
| US4764602A (en) | Antibiotics, and their production | |
| CS203159B2 (en) | Process for preparing antibiotic l 13 365 | |
| US4373028A (en) | Culture of Nocardia ATCC 31309 | |
| US4550021A (en) | Antitumor antibiotic 81-484 and process for its production | |
| CA1152915A (en) | Antibiotics c-14482 b.sub.1, b.sub.2 and b.sub.3 | |
| EP0109750B1 (en) | Nargenicin c1 | |
| US4022884A (en) | Gardimycin and process for producing same | |
| US4734492A (en) | Macrolide antibiotic M 119 | |
| US4605624A (en) | Nocardia species capable of producing nargenicin C1 | |
| CA1220746A (en) | Luzopeptin e.sub.2 | |
| US6838268B2 (en) | Process for the preparation of β-keto aliphatic acid ester | |
| CA1104078A (en) | Antibiotics c-14919 e-1 and e-2 | |
| JPH05310766A (ja) | 新規抗生物質ｍｉ４８１−４２ｆ４−ａ及びその製造方法 | |
| US4276382A (en) | Antibiotic substances | |
| JPH05207894A (ja) | マクロライド系抗生物質の製造法 |