CN85102590A - 一种分离纯化制备神经节苷脂工艺 - Google Patents

一种分离纯化制备神经节苷脂工艺 Download PDF

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商宗一
张金红
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Abstract

一般分离纯化制备神经节苷脂工艺是将细胞 匀浆清液浓缩后透析,再用无机吸附或离子交换 树脂柱分离纯化。本工艺使用新型大孔吸附树脂 直接及附匀浆清液中的全部神经节苷脂成分,可 在层析柱上完成浓缩、脱盐、纯化全部过程。大 大节省时间和有机溶剂用量,并简化中间处理程 序。产品纯度高。实收率高。

Description

本发明属于制备具有生物活性物质的工艺。
神经节苷脂有重要生物功能和活性,它主要存在于动物脑细胞膜,现有一般制备方法〔1-3〕,是将脑组织匀浆后的提取液浓缩、透析再经过无机吸附柱或离子交换树脂柱分离纯化,用有机溶剂洗脱,再浓缩、冷冻干燥而得。该工艺周期长,有机溶剂耗量大,神经节苷脂部分有效组分损失,产品实收率较低。
本发明的特点主要是利用中等极性的大孔径吸附树脂层析柱,当含有机溶剂(氯仿和甲醇)的脑组织匀浆清液(有机溶剂与水之比为3∶2~4∶3,PH为2-6)通过层析柱时,神经节苷脂的有效组分全部吸附于柱上,杂质(有机的和无机的)可洗去,再改变有机溶剂与水的配比即8∶1-9∶1,进行洗脱,可将神经节苷脂洗脱下来。从而省去了提取浓缩及透析等过程。将洗脱液浓缩、冷冻干燥即可得纯品。这大大简化了现有生产工艺过程。同时可避免有效组分在透析和离子交换柱中的丢失和破坏。本工艺处理过程周期短,条件温和,可保持有效组分的生物活性,全过程所需时间只相当现有生产工艺的五分之一,产品纯度高,组分全。
实例:将鲜脑组织5Kg匀浆,同时加入有机溶剂和水(3∶2)。弃渣,得提取清液约40立升。将清液通过大孔树脂柱,流出液可回收有机溶剂,再用有机溶剂(与水之比8∶1)洗脱。
a.收集全部洗脱液,经浓缩、干燥,得粗制品15g。粗制品中唾液酸含量20%,粗制品实收率为~3g/Kg鲜组织。
b.如将收集的洗脱液,再上一次树脂柱,经洗脱、干燥,得精制品8g,实收率为~1.6g/Kg鲜组织。精制品含唾液酸为30%。
参考文献
1.Biochem.Biophys.Acta.617:97-109    (1980)
2.Biochem.Biophys.Acta.60:350    (1962)
3.Biochem.J.    88:373(1963)

Claims (4)

1、一种分离纯化制备神经节苷脂工艺,其特征在于将细胞匀浆提取清液直接通过大孔吸附树脂层析柱,再用有机溶剂(氯仿和甲醇)与水的混合液洗脱,得纯神经节苷脂。
2、按照权利要求1所说的分离纯化制备神经节苷脂工艺,其特征在于细胞匀浆提取清液中含有机溶剂(氯仿和甲醇)和水,其有机溶剂与水之比为3∶2~4∶3,PH为2-6。
3、按照权利要求1所说的分离纯化制备神经节苷脂工艺,其特征在于所用大孔吸附树脂为中等极性的吸附树脂。
4、按照权利要求1所说的分离纯化制备神经节苷脂工艺,其特征在于洗脱用的有机溶剂与水之比为8∶1~9∶1。
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Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP3095451A1 (en) 2015-05-22 2016-11-23 Bioiberica, S.A. Process for preparing an animal brain extract
WO2018020326A3 (ru) * 2016-07-27 2018-04-26 Лонг Шенг Фарма Лимитед Нейропротекторный агент из свиного мозга на основе моносиалового ганглиозида

Cited By (3)

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