CN219891081U - 一种天然活性胶原蛋白快速定性定量检测试剂管及试剂盒 - Google Patents
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Abstract
本实用新型涉及天然活性胶原蛋白检测技术领域，具体涉及一种天然活性胶原蛋白快速定性定量检测试剂管及试剂盒，所述试剂管包括用于盛放检测液的管体、用于将管体内的溶液排出的挤出部以及用于将管体内的天然活性胶原蛋白沉淀进行截留的过滤部。试剂盒包括至少一个上述所述的试剂管。本实用新型的试剂管通过采用挤出部，可以通过挤出、抽滤或者离心的方式将管体内的溶液排出，通过采用过滤部，可以将管体内的天然活性胶原蛋白沉淀进行截留，然后进行清洗，将截留的天然活性胶原蛋白沉淀进行结果比对，可以对天然活性胶原蛋白进行定量检测，结构简单，检测方便，特异性强，可有效区分明胶、水解胶原等胶原蛋白类似物。
Description
技术领域
本实用新型涉及天然活性胶原蛋白检测技术领域，具体涉及一种天然活性胶原蛋白快速定性定量检测试剂管及试剂盒。
背景技术
胶原蛋白是一类具有特殊三螺旋结构，且广泛分布于皮肤、骨头、肌腱等组织的生物高分子蛋白。这种具有独特三螺旋结构的蛋白由于其可以促进细胞增长和组织修复，并且具有高的生物相容性和生物可降解性等理化特性，被广泛应用于生物医学材料、药物输送载体、组织工程、化妆品和食品等领域。胶原蛋白的三螺旋结构是其生物活性和理化特性的基础。然而，胶原蛋白的三螺旋结构易受加工环境的影响(例如：辐照灭菌)而导致结构部分或完全破坏，失去生物学活性。因此本专利检测对象主要为具有完整三螺旋结构的活性胶原蛋白。
近年来，随着检验技术的快速发展，胶原蛋白的检测手段越来越多，例如SDS-PAGE凝胶电泳、紫外光谱、磷酸盐缓冲液等可以鉴定胶原蛋白种类及纯度，高效液相-质谱联用法、羟脯氨酸比色法、免疫学检测法等可以对胶原蛋白进行定量，傅里叶红外光谱、拉曼光谱、圆二色谱等可以对胶原蛋白的结构进行检测。虽然这些方法在一定领域内能够达到研究的目的，但是这些检测方法大多数依旧存在以下技术难点：1)存在耗时长、操作繁琐、依赖大型设备、成本高、需要专业人员操作等缺陷，因此难以用于目前市面上天然胶原及相关产品实时在线定性和定量检测；2)难以区分胶原蛋白和胶原蛋白类似物。
据检索，发现如下几篇与本申请相关的专利文献：
1、公开号为CN109991227B的中国发明专利公开了一种胶原蛋白检测方法，主要采用影像学对胶原蛋白进行检测，其准确度易受操作环境因素的影响。
2、公开号为CN106383232B的中国发明专利公开了一种利用二硫化物纳米材料检测胶原蛋白三重螺旋结构的方法，该方法一方面多肽探针的制备较复杂且及稳定性较差，另一方面检测对象并非样本中存在的三螺旋胶原蛋白。
3、公开号为CN108659117B的中国发明专利公开了一种定量检测胶原三股螺旋结构含量的方法和公开号为CN10988415B的中国发明专利公开了一种I型胶原蛋白三螺旋结构完整性的判定方法，两者均采用了特定生物酶对胶原蛋白进行降解，借助羟脯氨酸比色法和电泳分析法对降解产物进行分析，利用胶原蛋白降解前后肽链的差异，实现胶原蛋白的检测。该类方法能有效区分胶原蛋白类似物和具有完整三螺旋结构的活性胶原蛋白，但该方法依旧操作繁琐、耗时长。
4、1985年，Martino等人根据苦味酸-天狼星红-偏振光法改进了一种用于胶原蛋白含量测定的方法——天狼星红比色法。中国专利CN110095421B、美国专利US20030004315A1以及Biocolor公司开的商业化试剂盒(以下简称Sircol试剂盒)，均沿用了该方法。其技术核心依旧是利用天狼星红在酸中与胶原蛋白特异性结合生成红色沉淀，沉淀经离心，洗涤，碱复溶后，在特定波长540nm条件下通过测定吸光度确定胶原蛋白含量。该方法操作简单，且整个检测流程可在1小时内完成。该方法整体所涉及的试剂成分简单，染料水溶性好，结构稳定，试剂成本非常低且不需低温保存，利于后期产品的推广使用。但由于染料与明胶、水解胶原等胶原蛋白类似物结合的产物在离心和洗涤过程中难以去除，因此该检测方法的检测对象为总胶原蛋白，无法有效区分明胶、水解胶原等胶原蛋白类似物。
5、公开号为CN115586340A的中国发明专利公开了一种天然活性胶原蛋白快速鉴定试剂盒、鉴定方法及其用途。该快速鉴定方法和试剂盒采用特异性染色剂对具有完整三螺旋结构的活性胶原蛋白特异性染色，并生成可视化的染料-胶原蛋白复合物沉淀，通过观察沉淀颜色、状态及沉淀量，能够快速定性检测具有完整三螺旋结构的活性胶原蛋白。该快速鉴定方法与现有检测方法相比，简化了流程，可以对活性胶原蛋白进行快速定性，但该快速鉴定方法也存在无法定量分析以及无法有效区分明胶、水解胶原等胶原蛋白类似物的缺陷。
发明内容
为了克服现有技术中存在的缺点和不足，本实用新型的目的在于提供一种天然活性胶原蛋白快速定性定量检测试剂管及试剂盒。
本实用新型的目的通过下述技术方案实现：一种天然活性胶原蛋白快速定性定量检测试剂管，包括用于盛放检测液的管体、用于将管体内的溶液排出的挤出部以及用于将管体内的天然活性胶原蛋白沉淀进行截留的过滤部。
进一步的，所述过滤部为多孔滤膜或多孔滤芯，其材质为聚乙烯、聚丙烯、聚醚醚酮、尼龙或玻璃纤维。
进一步的，所述多孔滤膜或多孔滤芯的孔径为1-20微米。
进一步的，所述管体的内表面经低吸附表面处理。
进一步的，所述管体的顶部可拆卸连接有盖体。
进一步的，所述挤出部固定于所述盖体的顶部，挤出部的底部与所述管体的顶部连通，所述过滤部可拆卸安装于盖体内。
进一步的，所述挤出部固定于所述管体的底部，挤出部的顶部与管体的底部连通，所述过滤部可拆卸安装于管体的底部内侧壁。
进一步的，所述管体的外侧套设有用于盛放排出溶液的套管，套管的顶部内侧壁可拆卸连接于管体的顶部外侧壁。
进一步的，所述管体的底部可拆卸连接有端盖，所述盖体的顶部固定有用于将管体内的溶液排出的排出部，排出部的底部与盖体的顶部连通。
本实用新型的另一目的通过下述技术方案实现：一种天然活性胶原蛋白快速定性定量检测试剂盒，包括至少一个上述所述的试剂管。
本实用新型的有益效果在于：本实用新型的试剂管通过采用挤出部，可以通过挤出、抽滤或者离心的方式将管体内的溶液排出，通过采用过滤部，可以将管体内的天然活性胶原蛋白沉淀(具体为染料-天然活性胶原蛋白复合物沉淀)进行截留，将截留的天然活性胶原蛋白沉淀进行结果比对，可以对天然活性胶原蛋白进行定量检测，结构简单，检测方便，耗时短，特异性强，可有效区分明胶、水解胶原等胶原蛋白类似物。
本实用新型的试剂盒可通过肉眼观察待测样本加入后是否有沉淀生成可有效鉴定活性胶原蛋白；实现定量检测时，胶原蛋白类似物(明胶、水解胶原蛋白)对结果无干扰；15分钟内可完成检测，便于实时在线检测。
附图说明
图1是本实用新型实施例一所述试剂管的结构示意图。
图2是本实用新型实施例一所述试剂管另一种实施方式的结构示意图。
图3是本实用新型实施例二所述试剂管的结构示意图。
图4是本实用新型实施例三所述试剂管的结构示意图。
附图标记为：管体1、柔性连接部11、防滑纹12、手持部13、防滑颗粒14、挤出部2、过滤部3、盖体4、插接部41、圆形挡片42、拔出部43、套管5。
具体实施方式
为了便于本领域技术人员的理解，下面结合实施例及附图1-4对本实用新型作进一步的说明，实施方式提及的内容并非对本实用新型的限定。
实施例一
见图1-2，一种天然活性胶原蛋白快速定性定量检测试剂管，包括用于盛放检测液的管体1、用于将管体1内的溶液排出的挤出部2以及用于将管体1内的天然活性胶原蛋白沉淀进行截留的过滤部3。
本实用新型的试剂管通过采用挤出部2，可以通过挤出、抽滤或者离心的方式将管体1内的溶液排出，通过采用过滤部3，可以将管体1内的天然活性胶原蛋白沉淀(具体为染料-天然活性胶原蛋白复合物沉淀)进行截留，将截留的天然活性胶原蛋白沉淀进行结果比对，可以对天然活性胶原蛋白进行定量检测，结构简单，检测方便，耗时短，特异性强，可有效区分明胶、水解胶原等胶原蛋白类似物。
本实施例中，所述过滤部3为多孔滤膜或多孔滤芯，其材质为聚乙烯、聚丙烯、聚醚醚酮、尼龙或玻璃纤维。通过采用上述材质的多孔滤膜或多孔滤芯，使得过滤部3仅截留天然活性胶原蛋白沉淀，可以有效区分明胶、水解胶原等胶原蛋白类似物。
本实施例中，所述多孔滤膜或多孔滤芯的孔径为1-20微米。通过控制多孔滤膜或多孔滤芯的孔径，使得过滤部3仅截留天然活性胶原蛋白沉淀，可以有效区分明胶、水解胶原等胶原蛋白类似物。
本实施例中，所述管体1的内表面经低吸附表面处理。管体1的内表面经低吸附表面处理可以使试剂管的内表面不出现粘壁现象，有利于沉淀的收集。低吸附表面处理为本领域公知常识，在此不再赘述。
本实施例中，所述管体1的顶部可拆卸连接有盖体4。盖体4用于防止检测液流出管体1，盖体4可以通过插接、卡接或螺接等方式可拆卸连接于管体1的顶部，为了方便操作，本实施例采用插接的方式，具体的，所述盖体4包括用于插入管体1顶部内侧壁的插接部41以及固定于插接部41顶部外侧的圆形挡片42。
本实施例中，所述挤出部2固定于所述盖体4的顶部，挤出部2的底部与所述管体1的顶部连通，所述过滤部3可拆卸安装于盖体4内。具体的，所述过滤部3可拆卸安装于插接部41内，圆形挡片42对应挤出部2的位置开设有通孔，使得挤出部2的底部与管体1的顶部连通。可以采用一密封膜将管体1的顶部进行密封，防止检测液溢出和被污染，检测时撕去密封膜，加入胶原蛋白样品检测后盖上盖体4挤出即可。上述结构的设置便于操作，通过挤出的方式将管体1内的溶液排出，将管体1内的天然活性胶原蛋白沉淀截留在过滤部3，清洗后进行结果比对。
可选择的是，如图1所示，所述盖体4与所述管体1之间固定有柔性连接部11，可以防止盖体4遗失或被污染。盖体4可以与管体1相连，也可以独立设计。可选择的是，所述管体1的外侧壁设置有防滑纹12，便于操作者用手捏住试剂管。
本实用新型的另一种实施方式如图2所示，所述盖体4的一侧固定有拔出部43，便于将盖体4拔出。可选择的是，所述管体1的底部设置有手持部13，手持部13的外表面设置有防滑颗粒14，便于操作者用手拿住试剂管。
实施例二
见图3，本实施例与上述实施例一的不同之处在于：所述挤出部2固定于所述管体1的底部，挤出部2的顶部与管体1的底部连通，所述过滤部3可拆卸安装于管体1的底部内侧壁。所述管体1的底部可拆卸连接有端盖6。具体的，可以在管体1内位于过滤部3的上方贴覆一密封膜，将过滤部3进行保护，密封膜上盛放检测液，管体1的顶部和底部分别用盖体4和端盖6盖住，防止检测液溢出和被污染，打开盖体4和端盖6，加入胶原蛋白样品检测后戳破密封膜即可进行离心并截留沉淀；也可以将检测液盛放于另一可密封的EP管中，加入胶原蛋白样品检测后再转入管体1内进行离心并截留沉淀。上述结构的设置便于操作，通过离心的方式将管体1内的溶液排出，将管体1内的天然活性胶原蛋白沉淀截留在过滤部3，清洗后进行结果比对。
本实施例中，所述管体1的外侧套设有用于盛放排出溶液的套管5，套管5的顶部内侧壁可拆卸连接于管体1的顶部外侧壁。管体1可以通过插接、卡接或螺接等方式可拆卸连接于套管5内，套管5用于盛放离心时甩出的溶液。具体的，如需采用UV检测读取信号，沉淀经清洗后，可将端盖6盖住挤出部2，加碱液复溶，打开端盖6，离心排出溶液至套管5，最后采用紫外分光光度计进行检测。
实施例三
见图4，本实施例与上述实施例二的不同之处在于：所述盖体4的顶部固定有用于将管体1内的溶液排出的排出部7，排出部7的底部与盖体4的顶部连通。盖体4可以为独立设计，盖体4的顶部连接有排出部7，排出部7的中部开设有通孔。可以采用一密封膜将管体1的顶部进行密封，盖上端盖6，防止检测液溢出和被污染，检测时撕去密封膜，加入胶原蛋白样品检测后盖上盖体4，打开端盖6，排出部7连接注射器(或者其他便携式工具)挤出或者通过离心将溶液排出实现沉淀截流。
实施例四
一种天然活性胶原蛋白快速定性定量检测试剂盒，包括至少一个实施例一或实施例二或实施例三所述的试剂管。管体1内盛放的检测液为含有20-500μM特异性染料的酸性溶液或醇溶液。
本实用新型的试剂盒的检测方法包括如下步骤：取出试剂管；吸取待测样品，滴加至试剂管中；将加入待测样品的试剂管摇匀；将试剂管内的溶液排出，天然活性胶原蛋白沉淀截留在过滤部3；清洗试剂管，将试剂管内的清洗溶液排出；将截留的天然活性胶原蛋白沉淀进行结果比对。
本实用新型的试剂盒结果比对包括如下方式：A、色卡比对：将截留的天然活性胶原蛋白沉淀的颜色与比色卡上的颜色进行比对；B、AI识别：将截留的天然活性胶原蛋白沉淀拍照后，通过软件对截留的沉淀颜色深浅进行智能识别；C、简易光谱仪检测：将截留的天然活性胶原蛋白沉淀的颜色采用简易光谱仪检测。另外，为了更精确的检测天然活性胶原蛋白的含量，还可以采用D、UV检测：将截留的天然活性胶原蛋白沉淀用酸液洗涤后再用碱液复溶，然后采用紫外分光光度计进行检测。
本实用新型的试剂管及试剂盒的检测原理为：利用染料对活性胶原蛋白的特异性染色，促进具有完整三螺旋结构的胶原蛋白自组装，并生成絮状的染料-胶原蛋白复合物沉淀这一特性，通过观察是否有沉淀生成以及沉淀的状态实现活性胶原蛋白的鉴定，并进一步用过滤的方式收集沉淀，直接或间接测定被滤膜滤芯截留的沉淀量，实现定量检测。由于染料-胶原蛋白复合物沉淀较粗，而染料-胶原蛋白类似物复合物沉淀极细，因此可以通过选用合适的滤膜滤芯孔径，实现染料-胶原蛋白复合物沉淀与染料-胶原蛋白类似物的有效分离，从而避开胶原蛋白类似物的干扰。
本实用新型的试剂盒可通过肉眼观察待测样本加入后是否有沉淀生成可有效鉴定活性胶原蛋白；实现定量检测时，胶原蛋白类似物(明胶、水解胶原蛋白)对结果无干扰；15分钟内可完成检测，便于实时在线检测。
上述实施例为本实用新型较佳的实现方案，除此之外，本实用新型还可以其它方式实现，在不脱离本实用新型构思的前提下任何显而易见的替换均在本实用新型的保护范围之内。
Claims (10)
1.一种天然活性胶原蛋白快速定性定量检测试剂管，其特征在于：所述试剂管包括用于盛放检测液的管体、用于将管体内的溶液排出的挤出部以及用于将管体内的天然活性胶原蛋白沉淀进行截留的过滤部。
2.根据权利要求1所述的一种天然活性胶原蛋白快速定性定量检测试剂管，其特征在于：所述过滤部为多孔滤膜或多孔滤芯，其材质为聚乙烯、聚丙烯、聚醚醚酮、尼龙或玻璃纤维。
3.根据权利要求2所述的一种天然活性胶原蛋白快速定性定量检测试剂管，其特征在于：所述多孔滤膜或多孔滤芯的孔径为1-20微米。
4.根据权利要求1所述的一种天然活性胶原蛋白快速定性定量检测试剂管，其特征在于：所述管体的内表面经低吸附表面处理。
5.根据权利要求1所述的一种天然活性胶原蛋白快速定性定量检测试剂管，其特征在于：所述管体的顶部可拆卸连接有盖体。
6.根据权利要求5所述的一种天然活性胶原蛋白快速定性定量检测试剂管，其特征在于：所述挤出部固定于所述盖体的顶部，挤出部的底部与所述管体的顶部连通，所述过滤部可拆卸安装于盖体内。
7.根据权利要求5所述的一种天然活性胶原蛋白快速定性定量检测试剂管，其特征在于：所述挤出部固定于所述管体的底部，挤出部的顶部与管体的底部连通，所述过滤部可拆卸安装于管体的底部内侧壁。
8.根据权利要求7所述的一种天然活性胶原蛋白快速定性定量检测试剂管，其特征在于：所述管体的外侧套设有用于盛放排出溶液的套管，套管的顶部内侧壁可拆卸连接于管体的顶部外侧壁。
9.根据权利要求7所述的一种天然活性胶原蛋白快速定性定量检测试剂管，其特征在于：所述管体的底部可拆卸连接有端盖，所述盖体的顶部固定有用于将管体内的溶液排出的排出部，排出部的底部与盖体的顶部连通。
10.一种天然活性胶原蛋白快速定性定量检测试剂盒，其特征在于：包括至少一个权利要求1-9任一项所述的试剂管。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202321272602.3U CN219891081U (zh) | 2023-05-24 | 2023-05-24 | 一种天然活性胶原蛋白快速定性定量检测试剂管及试剂盒 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202321272602.3U CN219891081U (zh) | 2023-05-24 | 2023-05-24 | 一种天然活性胶原蛋白快速定性定量检测试剂管及试剂盒 |
Publications (1)
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| CN219891081U true CN219891081U (zh) | 2023-10-24 |
Family
ID=88410043
Family Applications (1)
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|---|---|---|---|
| CN202321272602.3U Active CN219891081U (zh) | 2023-05-24 | 2023-05-24 | 一种天然活性胶原蛋白快速定性定量检测试剂管及试剂盒 |
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-
2023
- 2023-05-24 CN CN202321272602.3U patent/CN219891081U/zh active Active
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