CN213275624U - 一种尿转铁、尿免疫球蛋白、尿白蛋白、尿肌酐联合检测试剂盒 - Google Patents
一种尿转铁、尿免疫球蛋白、尿白蛋白、尿肌酐联合检测试剂盒 Download PDFInfo
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Abstract
本实用新型提供了一种尿转铁、尿免疫球蛋白、尿白蛋白、尿肌酐联合检测试剂盒,包括卡壳、十字形测试卡;所述十字形测试卡包括设置在中间的加样垫区域和分别设置在四端的尿转铁测试区域、尿免疫球蛋白测试区域、尿白蛋白测试区域和尿肌酐测试区域;所述卡壳包括底板和上盖,底板上设置有与十字形测试卡相对应的卡槽,十字形测试卡设置在卡槽内;所述卡槽的中间对应于加样垫区域的位置设置有凹槽;所述上盖的中间设置有加样孔,加样孔与凹槽位置相对应。本实用新型首次通过一次加样操作就能将尿液中的TF,IGG,MALB,UCR同时进行检测,简化了操作过程;且每条测试片之间的间距足够,大大的降低甚至杜绝了样本交叉的问题。
Description
技术领域
本实用新型涉及试剂盒技术领域,具体地,涉及一种尿转铁、尿免疫球蛋白、尿白蛋白、尿肌酐联合检测试剂盒,可同时检测尿转铁、尿免疫球蛋白、尿白蛋白、尿肌酐。
背景技术
尿液转铁检测的临床意义:是早期肾小球损伤的指标之一,主要反映肾小球滤过膜电荷选择屏障受损,尿免疫球蛋白g在临床上主要代表肾脏的功能。反应肾小球和肾小管的浓缩功能,当肾功能下降或者肾脏有炎症的时候,就会出现免疫球蛋白增加的现象. 尿微量白蛋白测定反映早期肾病、肾损伤情况。病理性增高见于糖尿病肾病、高血压、妊娠子痫前期。在早期尿微量白蛋白阶段是肾病发生的早期信号和预兆,此时肾脏损害处在尚可逆转的时期,如能及时治疗,可以终止或逆转肾病的发展进程。尿肌酐水平与糖尿病患者的肾脏损伤程度密切相关,其与其他尿液指标联合检测能显著提高检测的阳性率,对糖尿病肾脏疾病的早期诊断具有重要的临床价值。
由于慢性肾脏病患者多伴有某些并发证,故极易出现误诊或漏诊情况。此外,慢性肾脏病患者也极易因其他因素而引发急性肾损伤,这样便会进一步加大患者的死亡风险。所以,为了更好地对患者进行治疗,改善患者地预后,对患者的肾功能进行正确、全面的判定,提高上述疾病诊断准确率显得尤为重要。
研究显示,尿微量蛋白指标联合检测的诊断效能优于单项指标,并联模式的关联度和一致性均优于串联模式。说明尿微量蛋白各有生物学特点,在评估慢性肾病早期肾损伤时各具优势。尿微量蛋白联合检测具有较高的诊断效能,可显著提高诊断效率,对慢性肾病肾损伤的早期诊断、病理分型、分期监测、预后评估具有较高的临床实用价值。
新冠疫情下,为保障实验室生物安全,对仪器自动化要求进一步提高:减少或避免检测前和检测后处理,反应过程密闭化,满足随来随检,减少实验污染;对检测器件的小型化、集成化、便携式、可抛弃等提出需求。
而现有的检测试剂盒中,仅有对单独的尿转铁、尿免疫球蛋白、尿白蛋白、尿肌酐检测的试剂盒,而并未有可同时检测这四种指标的联合检测试剂盒。
而且现有的包含多条试纸条的检测试剂盒中,如专利文献CN208420950U中采用每个试纸条设置一个加样口,导致加样的过程繁琐负载,且样品量较大;又如专利文献CN210665768U中采用一个加样口,然后经过导流玻璃纤维的分离从人分至各个试纸条中进行检测,但该试剂盒存在宏观结构不合理,容易导致样本易交叉的问题。
实用新型内容
针对现有技术中的缺陷,本实用新型的目的是提供一种尿转铁、尿免疫球蛋白、尿白蛋白、尿肌酐联合检测试剂盒。
本实用新型提供了一种尿转铁、尿免疫球蛋白、尿白蛋白、尿肌酐联合检测试剂盒,包括卡壳、十字形测试卡;所述十字形测试卡包括设置在中间的加样垫区域和分别设置在四端的尿转铁测试区域、尿免疫球蛋白测试区域、尿白蛋白测试区域和尿肌酐测试区域;
所述卡壳包括底板和上盖,底板上设置有与十字形测试卡相对应的卡槽,十字形测试卡设置在卡槽内;所述卡槽的中间对应于加样垫区域的位置设置有凹槽;所述上盖的中间设置有加样孔,加样孔与凹槽位置相对应。
优选地,所述尿转铁测试区域、尿免疫球蛋白测试区域、尿白蛋白测试区域和尿肌酐检测试区域均各包括测试卡底板、以及位于测试卡底板表面的从加样垫区域端开始依次排列的硝酸纤维素膜、胶体金结合垫和吸水纸。
优选地,所述测试卡底板为PVC底板。
优选地,各所述胶体金结合垫上的相对应的抗体均采用荧光微球标记,所述荧光微球的直径为120nm,ex/em=485/535nm,具有信号受背景干扰小,检测灵敏度高,结果重复性好的优点。
更优选地,所述胶体金结合垫还经过聚酯膜浸润预处理,其中所使用的预处理缓冲液包括下列组分:Triton-x100,BSA,Na2HPO4,PVA.缓冲液的pH值为7.2-7.6;进一步地,各组分在1L缓冲液中的浓度为:Triton-x100 1.25-2.5g.BSA 5.5-7g,Na2HPO4 6.4-8.5g,PVA 4.5-8g;所述缓冲液的溶剂为纯化水,缓冲液可使用本领域各种常用的pH 调节剂进行pH值的调节。所述预处理可使得试剂盒具有更佳的灵敏度和显色效果。
所述预处理的具体步骤为:将胶体金结合垫在预处理液中浸泡1.5-2.5h,取出放于 36-38℃烘干。
优选地,所述硝酸纤维素膜上依次设置有质控线、T2线和T1线,所述质控线靠近加样垫区域。所述T1线和T2线为检测线。
优选地,各所述T1线和T2线上包被有与各检测对象相对应的抗体,各所述质控线上包被羊抗鼠抗体。
优选地,所述底板和上盖的形状均为圆形。所述底板为PVC底板。
优选地,所述上盖上设置有四个观察口,所述四个观察口的位置设置在各测试区域的T1线、T2线和质控线的上方。
优选地,所述观察口为密封结构,由透明材料制备,镶嵌于上盖中。其可防止包装人员和使用人员操作不当刮花NC膜;还可有效的提高试剂卡的干燥度,防止外露时湿度增加,影响其准确性。
优选地,所述上盖上标有与各测试对象对应的标识。
优选地,所述底板上卡槽以外的部分通过塑胶密封条与上盖进行密封。
本实用新型所提供的定量检测尿转铁蛋白,尿免疫球蛋白,尿白蛋白,尿肌酐蛋白检测试剂盒在检测尿转铁蛋白,尿免疫球蛋白,尿白蛋白,尿肌酐蛋白时采用双抗体夹心免疫层析法,在检测时配套免疫定量分析仪器使用。免疫分析仪器通过采集检测线(T) 和质控线(C)条带荧光信号,计算T/C信号值。使用前先将不同标准品滴加到试纸卡上,分析处理建立定标曲线(T/C信号值与标准品真实值的关系),再将检测样品时获得的T/C 值与标准曲线比较,即可获得检测样品中的尿转铁蛋白,尿免疫球蛋白,尿白蛋白,尿肌酐蛋白的含量。
所述定量检测尿转铁蛋白,尿免疫球蛋白,尿白蛋白,尿肌酐蛋白的检测试剂盒的制备方法,包括如下步骤:
1)用荧光微球标记的转铁蛋白抗体,人变性IGG,尿微量白蛋白抗体,尿肌酐蛋白抗体溶液分别喷涂胶体金结合垫,形成含有所述相应抗体的胶体金结合垫。
2)在尿转铁硝酸纤维素膜的检测线和质控线上分别喷涂转铁蛋白及羊抗鼠抗体,在尿免疫球蛋白硝酸纤维素膜的检测线和质控线上分别喷涂人变性IgG及羊抗鼠抗体,在尿白蛋白硝酸纤维素膜的检测线和质控线上分别喷涂尿微量白蛋白及羊抗鼠抗体;在尿肌酐硝酸纤维素膜的检测线和质控线上分别喷涂尿肌酐及羊抗鼠抗体;
3)将四套样品垫、步骤1制备的胶体金结合垫、步骤2制备的硝酸纤维素膜、吸水垫依次粘贴在各自的底板上,切裁制得检测试纸卡;最后将检测试纸卡装入卡壳制得检测试剂盒。
与现有技术相比,本实用新型具有如下的有益效果:
(1)本实用新型通过将四种测试卡组合为十字形结构,由此提供了一种宏观结构合理的联合检测试剂盒,该试剂盒的每条测试片之间的间距足够,大大的降低甚至杜绝了样本交叉的问题。
(2)本实用新型提供的定量检测尿转铁蛋白,尿免疫球蛋白,尿白蛋白,尿肌酐蛋白的检测试剂盒,首次将尿液中的TF,IGG,MALB,UCR同时进行检测(通过荧光微球免疫层析技术),通过一次加样操作就能同时检测出样本中尿转铁蛋白,尿免疫球蛋白,尿白蛋白,尿肌酐蛋白的含量,简化了操作过程,兼具灵敏性和特异性,快速准确评估类风湿关节炎临床症状。
(3)本实用新型的检测试剂盒还进一步具有操作快速简便、结果准确、经济适用等优点。随机尿标本容易收集、可减轻患者负担,方法简便易行。
(4)本实用新型进一步通过同时检测尿转铁蛋白,尿免疫球蛋白,尿白蛋白与尿肌酐,可建立尿转铁蛋白,尿免疫球蛋白,尿白蛋白与尿肌酐比值的参考区间。尿肌酐比值的引入较单纯尿免疫球蛋白、尿转铁蛋白,尿免疫球蛋白的检测更能反映患者的肾功能状态。建立的关于尿Ig、TRF、MA三项与尿Cr比值的参考区间的特异性很高,因此可用于临床肾功能肾损害的早期诊断。
附图说明
通过阅读参照以下附图对非限制性实施例所作的详细描述,本实用新型的其它特征、目的和优点将会变得更明显:
图1为本实用新型的检测试剂盒的底板结构示意图;
图2为本实用新型的检测试剂盒的上盖结构示意图;
图3为本实用新型的检测试剂盒的十字形测试卡的结构示意图;
图4为本实用新型的十字形测试卡的各测试区域的结构示意图;
其中:1-底板;2-卡槽;3-凹槽;4-加样垫区域;5-尿转铁测试区域;6-尿免疫球蛋白测试区域;7-尿白蛋白测试区域;8-尿肌酐测试区域;9-上盖;10-加样孔; 11-观察口;12-硝酸纤维素膜;13-胶体金结合垫;14-吸水纸;15-质控线;16-T2线; 17-T1线。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本实用新型进行详细说明。以下实施例将有助于本领域的技术人员进一步理解本实用新型,但不以任何形式限制本实用新型。应当指出的是,对本领域的普通技术人员来说,在不脱离本实用新型构思的前提下,还可以做出若干变化和改进。这些都属于本实用新型的保护范围。
实施例1
本实施例提供了一种尿转铁、尿免疫球蛋白、尿白蛋白、尿肌酐联合检测试剂盒,包括卡壳、十字形测试卡;所述十字形测试卡包括设置在中间的加样垫区域4和分别设置在四端的尿转铁测试区域5、尿免疫球蛋白测试区域6、尿白蛋白测试区域7和尿肌酐测试区域8;
所述卡壳包括底板1和上盖9,底板1上设置有与十字形测试卡相对应的卡槽2,十字形测试卡设置在卡槽2内;所述卡槽2的中间对应于加样垫区域4的位置设置有凹槽3;所述上盖9的中间设置有加样孔10,加样孔10与凹槽3位置相对应。
所述尿转铁测试区域5、尿免疫球蛋白测试区域6、尿白蛋白测试区域7和尿肌酐检测试区域8均各包括测试卡底板、以及位于测试卡底板表面的从加样垫区域4端开始依次排列的硝酸纤维素膜12、胶体金结合垫13和吸水纸14。
所述测试卡底板为PVC底板。
各所述胶体金结合垫13上的相对应结合的抗体均采用荧光微球标记,所述荧光微球的直径为120nm,ex/em=485/535nm,具有信号受背景干扰小,检测灵敏度高,结果重复性好的优点。
所述胶体金结合垫13还经过聚酯膜浸润预处理,其中所使用的预处理缓冲液包括下列组分:Triton-x100,BSA,Na2HPO4,PVA.缓冲液的pH值为7.2-7.6;各组分在1L 缓冲液中的浓度为:Triton-x100 1.25-2.5g.BSA 5.5-7g,Na2HPO4 6.4-8.5g,PVA 4.5-8g;所述缓冲液的溶剂为纯化水,缓冲液可使用本领域各种常用的pH调节剂进行pH值的调节。所述预处理可使得试剂盒具有更佳的灵敏度和显色效果。
所述预处理的具体步骤为:将胶体金结合垫在预处理液中浸泡1.5-2.5h,取出放于 36-38℃烘干。
所述硝酸纤维素膜12上依次设置有质控线15、T2线16和T1线17,所述质控线15 靠近加样垫区域4。所述T1线17和T2线16为检测线。
各所述T1线17和T2线16上包被有与各检测对象(尿转铁、尿免疫球蛋白、尿白蛋白、尿肌酐)相对应的抗体,各所述质控线15上包被羊抗鼠抗体。
所述底板1和上盖9的形状均为圆形。所述底板1为PVC底板。
所述上盖9上设置有四个观察口11,所述四个观察口11的位置设置在各测试区域的T1线17、T2线16和质控线15的上方。
所述观察口11为密封结构,由透明材料制备,镶嵌于上盖9中。其可防止包装人员和使用人员操作不当刮花NC膜;还可有效的提高试剂卡的干燥度,防止外露时湿度增加,影响其准确性。
所述上盖9上标有与各测试对象对应的标识。
所述底板1上卡槽2以外的部分通过塑胶密封条与上盖9进行密封。
本实用新型所提供的定量检测尿转铁蛋白,尿免疫球蛋白,尿白蛋白,尿肌酐蛋白检测试剂盒在检测尿转铁蛋白,尿免疫球蛋白,尿白蛋白,尿肌酐蛋白时采用双抗体夹心免疫层析法,在检测时配套免疫定量分析仪器使用。免疫分析仪器通过采集检测线(T) 和质控线(C)条带荧光信号,计算T/C信号值。使用前先将不同标准品滴加到试纸卡上,分析处理建立定标曲线(T/C信号值与标准品真实值的关系),再将检测样品时获得的T/C 值与标准曲线比较,即可获得检测样品中的尿转铁蛋白,尿免疫球蛋白,尿白蛋白,尿肌酐蛋白的含量。
所述定量检测尿转铁蛋白,尿免疫球蛋白,尿白蛋白,尿肌酐蛋白的检测试剂盒的制备方法,包括如下步骤:
1)用荧光微球标记的转铁蛋白抗体,人变性IGG,尿微量白蛋白抗体,尿肌酐蛋白抗体溶液分别喷涂胶体金结合垫,形成含有所述相应抗体的胶体金结合垫。
2)在尿转铁硝酸纤维素膜的检测线和质控线上分别喷涂转铁蛋白及羊抗鼠抗体,在尿免疫球蛋白硝酸纤维素膜的检测线和质控线上分别喷涂人变性IgG及羊抗鼠抗体,在尿白蛋白硝酸纤维素膜的检测线和质控线上分别喷涂尿微量白蛋白及羊抗鼠抗体;在尿肌酐硝酸纤维素膜的检测线和质控线上分别喷涂尿肌酐及羊抗鼠抗体;
3)将四套样品垫、步骤1制备的胶体金结合垫、步骤2制备的硝酸纤维素膜、吸水垫依次粘贴在各自的底板上,切裁制得检测试纸卡;最后将检测试纸卡装入卡壳制得检测试剂盒。
效果验证实施例
将实施例1制备的一种尿转铁、尿免疫球蛋白、尿白蛋白、尿肌酐联合检测试剂盒进行测试,具体方法如下:
1、绘制标准线曲线:
1.1取转铁标准品,用样本稀释液对倍稀释至浓度分别为200ng/mL、100ng/mL、50ng/mL、25ng/mL、12.5ng/mL、6.25ng/mL、3.125ng/mL、1.56ng/mL、0.8ng/mL和 0.4ng/mL。取20个制备好的试剂卡,分别加入100ul校准品,每一份校准品平行测定两次,在室温条件下,3分钟反应后用荧光免疫层析分析仪检测。每一份校准品平行测定两次取得标准曲线。
1.2取免疫球蛋白标准品,用样本稀释液对倍稀释至浓度分别为200ng/mL、100ng/mL、50ng/mL、25ng/mL、12.5ng/mL、6.25ng/mL、3.125ng/mL、1.56ng/mL、 0.8ng/mL和0.4ng/mL。取20个制备好的试剂卡,分别加入100ul校准品,每一份校准品平行测定两次,在室温条件下,3分钟反应后用荧光免疫层析分析仪检测。每一份校准品平行测定两次取得标准曲线。
1.3取尿微量白蛋白标准品,用样本稀释液对倍稀释至浓度分别为200ng/mL、100ng/mL、50ng/mL、25ng/mL、12.5ng/mL、6.25ng/mL、3.125ng/mL、1.56ng/mL、 0.8ng/mL和0.4ng/mL。取20个制备好的试剂卡,分别加入100ul校准品,每一份校准品平行测定两次,在室温条件下,3分钟反应后用荧光免疫层析分析仪检测。每一份校准品平行测定两次取得标准曲线。
1.4取尿肌酐标准品,用样本稀释液对倍稀释至浓度分别为200ng/mL、100ng/mL、50ng/mL、25ng/mL、12.5ng/mL、6.25ng/mL、3.125ng/mL、1.56ng/mL、0.8ng/mL和 0.4ng/mL。取20个制备好的试剂卡,分别加入100ul校准品,每一份校准品平行测定两次,在室温条件下,3分钟反应后用荧光免疫层析分析仪检测。每一份校准品平行测定两次取得标准曲线。
2、特异性验证:
取尿转铁(200ng/mL)和尿免疫球蛋白(50ng/mL)标准品,尿白蛋白(50ng/mL),尿肌酐(50ng/mL)等体积混合,并将混合液用样本稀释液倍比稀释。取相应数量的制备好的试剂卡,分别加入100ul待检样本,在室温条件下,3分钟反应后用荧光免疫层析分析仪检测。重复检测两次,所得检测结果取均值后与标本的实际浓度进行比较,分析的尿转铁,尿免疫球蛋白,尿白蛋白,尿肌酐检测是否存在相互干扰。
用上海市闵行中心医院收集的正常人早晨体检尿样本126例样本,进行平行检测,结合标本评价其特异性。结果如下:
组别 | 特异度 | 敏感度 | 正确度 |
尿转铁 | 88.71(72/84) | 83.33(35/42) | 86.51(109/126) |
尿微量 | 95.24(80/84) | 69.05(29/42) | 87.30(110/126) |
尿免疫球蛋白 | 92.86(78/84) | 85.71(36/42) | 88.89(112/126) |
尿肌酐 | 94.43(81/84) | 88.10(37/42) | 90.48(114/126) |
四项联合检测 | 98.81(83/84) | 95.24(40/42) | 97.62(123/126) |
综上所述,本实用新型所提供的检测试剂盒能够同时检测尿转铁、尿免疫球蛋白、尿白蛋白、尿肌酐,且具有良好的抗干扰性和特异性,且具有很好的灵敏性,有效提高了现有在技术在肾病中提前预判能力,具有高度产业利用价值。
在本申请的描述中,需要理解的是,术语“上”、“下”、“前”、“后”、“左”、“右”、“竖直”、“水平”、“顶”、“底”、“内”、“外”等指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系,仅是为了便于描述本申请和简化描述,而不是指示或暗示所指的装置或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作,因此不能理解为对本申请的限制。
以上对本实用新型的具体实施例进行了描述。需要理解的是,本实用新型并不局限于上述特定实施方式,本领域技术人员可以在权利要求的范围内做出各种变化或修改,这并不影响本实用新型的实质内容。在不冲突的情况下,本申请的实施例和实施例中的特征可以任意相互组合。
Claims (10)
1.一种尿转铁、尿免疫球蛋白、尿白蛋白、尿肌酐联合检测试剂盒,其特征在于,包括卡壳、十字形测试卡;所述十字形测试卡包括设置在中间的加样垫区域和分别设置在四端的尿转铁测试区域、尿免疫球蛋白测试区域、尿白蛋白测试区域和尿肌酐测试区域;
所述卡壳包括底板和上盖,底板上设置有与十字形测试卡相对应的卡槽,十字形测试卡设置在卡槽内;所述卡槽的中间对应于加样垫区域的位置设置有凹槽;所述上盖的中间设置有加样孔,加样孔与凹槽位置相对应。
2.根据权利要求1所述的尿转铁、尿免疫球蛋白、尿白蛋白、尿肌酐联合检测试剂盒,其特征在于,所述尿转铁测试区域、尿免疫球蛋白测试区域、尿白蛋白测试区域和尿肌酐检测试区域均各包括底板、以及位于底板表面的从加样垫区域端开始依次排列的硝酸纤维素膜、胶体金结合垫和吸水纸。
3.根据权利要求2所述的尿转铁、尿免疫球蛋白、尿白蛋白、尿肌酐联合检测试剂盒,其特征在于,各所述胶体金结合垫上的与检测对象相对应的抗体均采用荧光微球标记。
4.根据权利要求2所述的尿转铁、尿免疫球蛋白、尿白蛋白、尿肌酐联合检测试剂盒,其特征在于,所述硝酸纤维素膜上依次设置有质控线、T2线和T1线,所述质控线靠近加样垫区域。
5.根据权利要求4所述的尿转铁、尿免疫球蛋白、尿白蛋白、尿肌酐联合检测试剂盒,其特征在于,各所述T1线和T2线上包被有与各检测对象相对应的抗体,各所述质控线上包被羊抗鼠抗体。
6.根据权利要求1所述的尿转铁、尿免疫球蛋白、尿白蛋白、尿肌酐联合检测试剂盒,其特征在于,所述底板和上盖的形状均为圆形。
7.根据权利要求1所述的尿转铁、尿免疫球蛋白、尿白蛋白、尿肌酐联合检测试剂盒,其特征在于,所述上盖上设置有四个观察口,所述四个观察口的位置设置在各测试区域的T1线、T2线和质控线的上方。
8.根据权利要求7所述的尿转铁、尿免疫球蛋白、尿白蛋白、尿肌酐联合检测试剂盒,其特征在于,所述观察口为密封结构,由透明材料制备,镶嵌于上盖中。
9.根据权利要求1所述的尿转铁、尿免疫球蛋白、尿白蛋白、尿肌酐联合检测试剂盒,其特征在于,所述上盖上标有与各测试对象对应的标识。
10.根据权利要求1所述的尿转铁、尿免疫球蛋白、尿白蛋白、尿肌酐联合检测试剂盒,其特征在于,所述底板上卡槽以外的部分通过塑胶密封条与上盖进行密封。
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CN116087500A (zh) * | 2022-12-26 | 2023-05-09 | 科赫生物科技(北京)有限公司 | 一种多联检测装置及其使用方法 |
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GR01 | Patent grant | ||
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