CN211558618U

CN211558618U - 细胞冻存容器

Info

Publication number: CN211558618U
Application number: CN201921957223.1U
Authority: CN
Inventors: 杨秋蕊
Original assignee: Shanghai Zhiquan Biotechnology Co ltd
Current assignee: Shanghai Zhiquan Biotechnology Co ltd
Priority date: 2019-11-13
Filing date: 2019-11-13
Publication date: 2020-09-25
Anticipated expiration: 2029-11-13

Abstract

本实用新型提供了一种细胞冻存容器，包括密封的容器本体，所述容器本体内设置有一容纳槽，所述容纳槽内容纳有一细胞爬片，所述细胞爬片上设置有经细胞克隆后形成的细胞群。通过在容器本体内设置一容纳细胞爬片的容纳槽，能够直接将所述细胞爬片与所述细胞爬片上的细胞群一起冻存，解决了使用细胞冻存管无法容纳细胞爬片的问题，而且由于不需要对细胞群进行酶解离，有效地保留了原有的细胞之间的连接关系和信号通路，使得细胞进行再培养时能够大大地提高细胞的存活率和增殖能力。

Description

细胞冻存容器

技术领域

本实用新型涉及生物技术领域，尤其涉及一种细胞冻存容器。

背景技术

细胞克隆也叫细胞培养，是指在体外模拟体内环境(无菌、适宜温度、酸碱度和一定营养条件等)，使之生存、生长、繁殖并维持主要结构和功能的一种方法。细胞经培养后，为了保存细胞，特别是不易获得的突变型细胞或细胞株，要将细胞冻存。

目前细胞冻存常用的方法是先将细胞用酶解离、消化成单细胞，再用冷冻保护剂重选细胞，然后利用移液枪从细胞爬片上将重选后的细胞吸取至细胞冻存管中进行冻存。但是，该方法对于一些用酶解离、消化易造成生物损伤，通常以克隆化的方式生长、增殖的细胞类型不是最合适的，例如ESC(胚胎干细胞)、iPS(诱导的多潜能干细胞)、神经细胞、心肌细胞等细胞，会影响其复苏后的存活率和增殖能力。因此，不使用酶解离、消化细胞克隆，直接将这样的细胞以克隆后细胞群的方式冷冻保存，可以避免酶损伤。复苏以后，也是直接将细胞以细胞群的形式再培养，保留原有的细胞间连接和信号通路，尽量提高复苏后的细胞存活和增殖能力。

如果要避免将细胞酶解离，就需要将细胞爬片及细胞爬片上的细胞群一起冷冻，常规的细胞冻存管细且长，无法容纳细胞爬片。因此，需要一种合适的冻存容器来容纳细胞爬片。

实用新型内容

本实用新型的目的在于提供一种细胞冻存容器，能够容纳细胞爬片，便于将细胞爬片及细胞爬片上的细胞群一起冷冻，避免了需要对细胞进行酶解离的问题。

为了达到上述目的，本实用新型提供了一种细胞冻存容器，包括密封的容器本体，所述容器本体内设置有一容纳槽，所述容纳槽内容纳有一细胞爬片，所述细胞爬片上设置有经细胞克隆后形成的细胞群。

可选的，所述细胞群的表面上覆盖有一保护层。

可选的，所述保护层包括基质胶、胶原及海藻糖酸钠凝胶中的一种或多种。

可选的，所述容纳槽内还填充有冷冻保护液，所述冷冻保护液包括甘油、DMSO、乙二醇及丙二醇中的一种或多种，且所述冷冻保护液的液面高于所述容纳槽的上表面。

可选的，所述容器本体包括腔体及腔盖，所述腔盖盖合于所述腔体上以密封所述腔体，所述腔体的底壁沿背离所述腔盖的方向凹陷以形成所述容纳槽。

可选的，所述容器本体包括腔体及腔盖，所述腔盖盖合于所述腔体上以密封所述腔体，所述腔体的底壁面向所述腔盖的方向上具有一凸起，所述凸起的上表面沿背离所述腔盖的方向凹陷以形成所述容纳槽。

可选的，所述容纳槽的槽壁与所述细胞爬片的侧壁接触。

可选的，所述容纳槽的深度大于所述细胞爬片的厚度。

可选的，所述腔盖的上表面具有一标识区。

可选的，所述腔盖及所述腔体的材质均为塑料材质。

本实用新型提供的细胞冻存容器中，包括密封的容器本体，所述容器本体内设置有一容纳槽，所述容纳槽内容纳有一细胞爬片，所述细胞爬片上设置有经细胞克隆后形成的细胞群。通过在容器本体内设置一容纳细胞爬片的容纳槽，能够直接将所述细胞爬片与所述细胞爬片上的细胞群一起冻存，解决了细胞冻存管无法容纳细胞爬片的问题，而且由于不需要对细胞群进行酶解离，有效地保留了原有的细胞之间的连接关系和信号通路，使得对细胞进行再培养时能够大大地提高细胞的存活率和增殖能力。

附图说明

图1为本实用新型实施例提供的细胞冻存容器的结构示意图；

图2为本实用新型实施例提供的腔盖的俯视图；

其中，附图标记为：

10-容器本体；100-容纳槽；110-腔体；120-腔盖；121-标志区。

具体实施方式

下面将结合示意图对本实用新型的具体实施方式进行更详细的描述。根据下列描述，本实用新型的优点和特征将更清楚。需说明的是，附图均采用非常简化的形式且均使用非精准的比例，仅用以方便、明晰地辅助说明本实用新型实施例的目的。

如图1所示，本实施例提供了一种细胞冻存容器，包括密封的容器本体10及细胞爬片，所述细胞爬片20上设置有经细胞克隆后形成的细胞群，所述容器本体内设置有一容纳槽100，所述细胞爬片20位于所述容纳槽100内。

具体的，所述细胞爬片20是一种玻片，该玻片表面具有永久的阳离子电荷，可以通过静电作用吸附冰冻切片组织或细胞，使之粘附在玻片上。细胞克隆时将所述细胞爬片20浸在细胞培养基内，细胞在细胞爬片20上生长繁殖。细胞克隆后形成细胞群，所述细胞群的细胞之间具有连接关系和信号通路。所述细胞爬片20一般为圆形，按照其直径可分为6孔细胞爬片、12孔细胞爬片、24孔细胞爬片及48孔细胞爬片。

所述细胞冻存容器主要用于容纳细胞爬片20，以便于后续将细胞爬片20及所述细胞爬片20上的细胞群一起转移到液氮环境中对所述细胞群进行冻存。

所述容器本体10包括腔体110及腔盖120，所述腔盖120盖合于所述腔体110上以密封所述腔体110，且所述腔体110与所述腔盖120可拆卸连接。

本实施例中，所述腔体110为圆柱形，用于存放细胞爬片20。当然，也可以是其它形状，例如是椭圆形，本申请对此不作任何限制。本实施例中，所述腔体110为耐超低温的塑料材质，例如聚丙烯材料，重量较轻且成本较低，比较适用。当然，也可以是其他的材质，例如为金属材质，所述金属材质可以是铝、铜、铁中的一种或多种，本申请对此亦不作任何限制。

所述腔盖120用于密封所述腔体110，其形状及大小与所述腔体110相匹配。本实施例中，所述腔盖120也为圆柱形，其材质也为耐超低温的塑料材质，也可以是其他的材质，本申请对此不作任何限制。

请继续参照图1及图2，所述腔盖120的上表面具有一标识区121。所述标识区用于标记所述细胞冻存容器内的细胞信息，以便于区分。所述标识区121例如为一毛面，可以直接用低温记号笔进行标记，或者为一用于标记的贴纸，本申请对此不做任何限制。本实施例中，所述标识区121为矩形区域，当然，也可以是其它的形状，本申请对此亦不作任何限制。

所述110腔体与所述腔盖120可拆卸连接。本实施例中，所述可拆卸连接为螺纹连接，例如，所述腔盖120具有一空腔，所述空腔具有一朝向所述腔体110的开口，所述空腔的内壁上设置有内螺纹，所述腔体110的上方设置有外螺纹，所述内螺纹与所述外螺纹相匹配。当然，也可以是其它的可拆卸连接方式，本申请对此不作任何限制。例如是卡扣连接，所述腔盖120的外壁上设置有卡扣，所述腔体110的外壁上设置有卡槽，所述卡扣能够进行旋转以卡入所述卡槽。

请继续参照图1，所述容器本体10内设置有一容纳槽100。本实施例中，所述腔体110的底壁沿背离所述腔盖120的方向凹陷以形成所述容纳槽100，可以理解为所述容纳槽100与所述腔体110为一体成型结构。

或者，所述腔体110的底壁面向所述腔盖120的方向上具有一凸起，所述凸起上具有一容纳槽100，所述凸起的上表面沿背离所述腔盖120的方向凹陷以形成所述容纳槽100。通过设置一凸起可以有效的减小所述腔体110底壁的厚度，同时便于放置所述细胞爬片20。

所述容纳槽100与所述细胞爬片20的形状相匹配。本实施例中，所述细胞爬片20的形状为圆形，故所述容纳槽100的形状也为圆形，以节省所述容纳槽100的占用空间。当然，所述容器本体10内可以设置一个容纳槽100，也可以设置多个容纳槽100，本申请对此不作任何限制。本实施例中，所述容纳槽100为一个。

可选的，所述容纳槽100的槽壁与所述细胞爬片20的侧壁接触。本实施例中，所述容纳槽100与所述细胞爬片20之间为间隙配合，且所述容纳槽100的直径略大于所述细胞爬片20的直径，以便于所述容纳槽100在容纳细胞爬片20的同时对所述细胞爬片20进行限位，防止所述细胞爬片20在运输过程中晃动或碰撞所述腔体110的内壁。由于所述细胞爬片20具有6孔、12孔、24孔及48孔多种型号，故所述容纳槽100可根据所述细胞爬片20的尺寸进行选择。

可选的，所述容纳槽100的深度大于所述细胞爬片20的厚度。由于后续细胞爬片20上会添加冷冻保护液等液体物质，通过使所述容纳槽100的深度大于所述细胞爬片20的厚度使得冷冻保护液不会流向所述容纳槽100外，以便于更好的保护细胞免受冷冻损伤。

可选的，所述容纳槽100内还填充有冷冻保护液。由于冷冻保护液同细胞溶液中的水分子结合，发生水合作用，弱化水的结晶过程使溶液的粘性增加从而减少冰晶的形成，同时冷冻保护液可以通过在细胞内外维持一定的摩尔浓度，降低细胞内外未结冰溶液中电解质的浓度，使细胞免受损伤。本实施例中，所述冷冻保护液包括甘油、DMSO、乙二醇、丙二醇中的一种或多种，本申请对此不作任何限制限制。

可选的，所述冷冻保护液的液面高于所述容纳槽100的上表面以更好地覆盖所述细胞群。

可选的，所述细胞群的表面上覆盖有一保护层。本实施例中，所述保护层为胶状物质，用于保护细胞免受冷冻损伤以及保留原有的细胞之间的连接和信号通路，进而提高细胞复苏后的存活率和增殖能力。本实施例中，所述保护层包括基质胶、胶原及海藻糖酸钠凝胶中的一种或多种。当然，还可以是其它的可成凝胶状的化合物或者生物大分子复合物，本申请对此不作任何限制。

基于此，本实施例还提供了一种将克隆后的细胞转存进行冻存的方法：

通过镊子夹取细胞爬片并放入所述细胞冻存容器的容纳槽内，所述细胞爬片上设置有克隆后的细胞群；

准备2℃～8℃预冷的枪头和1.5ml离心管，吸取150微升ECM基质胶溶液和150微升PBS溶液，充分混匀；

向细胞爬片上的细胞群滴加所述混匀后的溶液；

将细胞冻存容器在室温放置5分钟，直到所述混匀后的溶液凝固成胶状；

向细胞爬片20上滴加1ml体积的与细胞对应的冷冻保护液，然后转入液氮环境降温即可。

综上，本实用新型实施例提供了一种细胞冻存容器，包括密封的容器本体，所述容器本体内设置有一容纳槽，所述容纳槽内容纳有一细胞爬片，所述细胞爬片上设置有经细胞克隆后形成的细胞群。通过在容器本体内设置一容纳细胞爬片的容纳槽，能够直接将所述细胞爬片与所述细胞爬片上的细胞群一起冻存，解决了使用细胞冻存管无法容纳细胞爬片的问题，而且由于不需要对细胞群进行酶解离，有效地保留了原有的细胞之间的连接关系和信号通路，使得细胞进行再培养时能够大大地提高细胞的存活率和增殖能力。

上述仅为本实用新型的优选实施例而已，并不对本实用新型起到任何限制作用。任何所属技术领域的技术人员，在不脱离本实用新型的技术方案的范围内，对本实用新型揭露的技术方案和技术内容做任何形式的等同替换或修改等变动，均属未脱离本实用新型的技术方案的内容，仍属于本实用新型的保护范围之内。

Claims

1.一种细胞冻存容器，其特征在于，包括密封的容器本体，所述容器本体内设置有一容纳槽，所述容纳槽用于容纳一细胞爬片，所述细胞爬片上设置有经细胞克隆后形成的细胞群。

2.如权利要求1所述的细胞冻存容器，其特征在于，所述细胞群的表面上覆盖有一保护层。

3.如权利要求2所述的细胞冻存容器，其特征在于，所述保护层为基质胶、胶原或海藻糖酸钠凝胶。

4.如权利要求1所述的细胞冻存容器，其特征在于，所述容纳槽内还填充有冷冻保护液，所述冷冻保护液为甘油、DMSO、乙二醇或丙二醇，且所述冷冻保护液的液面高于所述容纳槽的上表面。

5.如权利要求1所述的细胞冻存容器，其特征在于，所述容器本体包括腔体及腔盖，所述腔盖盖合于所述腔体上以密封所述腔体，所述腔体的底壁沿背离所述腔盖的方向凹陷以形成所述容纳槽。

6.如权利要求1所述的细胞冻存容器，其特征在于，所述容器本体包括腔体及腔盖，所述腔盖盖合于所述腔体上以密封所述腔体，所述腔体的底壁面向所述腔盖的方向上具有一凸起，所述凸起的上表面沿背离所述腔盖的方向凹陷以形成所述容纳槽。

7.如权利要求5或6所述的细胞冻存容器，其特征在于，所述容纳槽的槽壁与所述细胞爬片的侧壁接触。

8.如权利要求5或6所述的细胞冻存容器，其特征在于，所述容纳槽的深度大于所述细胞爬片的厚度。

9.如权利要求5或6所述的细胞冻存容器，其特征在于，所述腔盖的上表面具有一标识区。

10.如权利要求5或6所述的细胞冻存容器，其特征在于，所述腔盖及所述腔体的材质均为塑料材质。