CN209957776U - 用于围产期干细胞分离的套件 - Google Patents

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刘必佐
陈应炉
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Abstract

本实用新型提供了一种用于围产期干细胞分离的套件,具体地,所述的套件包括:组织消化瓶、废液瓶、细胞收获瓶,以及细胞筛网柱。所述的细胞筛网柱具有第一滤膜组件和第二滤膜组件。所述装置可以方便快速地得到间充质干细胞含量较高的单细胞悬液,进而用于后续培养。

Description

用于围产期干细胞分离的套件
技术领域
本实用新型涉及干细胞技术领域,具体地,本实用新型提供了一种用于围产期干细胞分离的套件。
背景技术
干细胞是胚胎或成体个体中存在的可以持续自我更新,并具有多向分化能力的细胞,其中,间充质干细胞由于其免疫调节能力,以及对组织的修复功能,体现出重要的医疗潜力,备受关注。成人间充质干细胞广泛存在于骨髓,脂肪,肌肉及骨骼等组织中,然而取材困难,含量较少,对这些组织来源间充质干细胞的应用造成了限制。围产期干细胞,如羊膜,胎盘及脐带干细胞等,取材来源广泛,对供者影响较小且没有较大的伦理问题,是具有广阔发展前景的一类干细胞。
目前围产干细胞的分离较多采用酶解消化,由于没有简便可用的消化设备,分离产量和纯度(特别是红细胞及细胞碎片的含量)对操作者的水平和所采用的设备有着严重的依赖。
因此,本领域迫切需要提供一种可用于酶解分离围产期干细胞(包括脐带,胎盘和羊膜干细胞)的设备组件。
实用新型内容
本实用新型的目的是提供一种可用于酶解分离围产期干细胞(包括脐带,胎盘和羊膜干细胞)的设备组件。
本实用新型的第一方面,提供了一种用于围产期干细胞分离的套件,所述的套件包括:
组织消化瓶,所述的组织消化瓶包括瓶身,以及瓶盖,所述的瓶盖和瓶身通过第一封装部可拆卸连接;
废液瓶,所述的废液瓶包括瓶身,以及瓶盖,所述的瓶盖和瓶身通过第二封装部可拆卸连接;
细胞收获瓶,所述的细胞收获瓶包括瓶身,以及瓶盖,所述的瓶盖和瓶身通过第三封装部可拆卸连接;和
细胞筛网柱,所述的细胞筛网柱具有:
第一滤膜组件,所述的第一滤膜组件具有第一滤膜,且所述组件顶端具有可以与第一封装部相连接的第一连接部,底端具有可以与第二封装部相连接的第二连接部;
第二滤膜组件,所述的第二滤膜组件具有第二滤膜,且所述组件顶端具有可以与第三封装部相连接的第二连接部,底端具有可以与第二封装部相连接的第三连接部。
在另一优选例中,所述的细胞筛网柱还具有第一封装盖,所述的第一封装盖通过第一连接部与细胞筛网柱可拆卸连接。
在另一优选例中,所述的细胞筛网柱还具有第二封装盖,所述的第二封装盖通过第三连接部与细胞筛网柱可拆卸连接。
在另一优选例中,所述的细胞筛网柱中,所述的第一滤膜组件与所述的第二滤膜组件具有不同的孔径。
在另一优选例中,所述的第一封装部、第二封装部和第三封装部为螺纹结构。
本发明的第二方面,提供了一种细胞筛网柱,所述的细胞筛网柱具有:
第一滤膜组件,所述的第一滤膜组件具有第一滤膜,且所述组件顶端具有可以与第一封装部相连接的第一连接部,底端具有可以与第二封装部相连接的第二连接部;
第二滤膜组件,所述的第二滤膜组件具有第二滤膜,且所述组件顶端具有可以与第三封装部相连接的第二连接部,底端具有可以与第二封装部相连接的第三连接部。
在另一优选例中,所述的细胞筛网柱还具有第一封装盖,所述的第一封装盖通过第一连接部与细胞筛网柱可拆卸连接。
在另一优选例中,所述的细胞筛网柱还具有第二封装盖,所述的第二封装盖通过第二连接部与细胞筛网柱可拆卸连接。
在另一优选例中,所述的细胞筛网柱中,所述的第一滤膜组件与所述的第二滤膜组件具有不同的孔径。
在另一优选例中,所述的第一封装部、第二封装部和第三封装部为螺纹结构。
应理解,在本实用新型范围内中,本实用新型的上述各技术特征和在下文(如实施例)中具体描述的各技术特征之间都可以互相组合,从而构成新的或优选的技术方案。限于篇幅,在此不再一一累述。
附图说明
图1为本实用新型的组织消化瓶示意图;其中,101为瓶盖,102为瓶身;
图2为本实用新型的细胞筛网柱示意图;其中,201为第一封装盖、202为第一连接部、203为第一滤膜组件、204为第二连接部、205为第二滤膜组件、206为第三连接部、207为第二封装盖。
图3为本实用新型的废液瓶示意图;其中,301为瓶盖,302为瓶身;
图4为本实用新型的细胞收获瓶示意图;其中,401为瓶盖,402为瓶身。
具体实施方式
本发明人经过长期的研究,设计了一种适用于围产干细胞分离的消化和分离装置,该装置简便易用,普通操作者亦可高效率地以较高的纯度分离得到围产期干细胞。基于上述发现,发明人完成了本实用新型。
下面结合附图,进一步阐述本实用新型。
本实用新型的套件包括组织消化瓶,参见附图1,所述的组织消化瓶包括瓶身102,以及瓶盖101,所述的瓶盖和瓶身通过第一封装部可拆卸连接;上述的第一封装部可以是任何密封结构,在一个优选的实施方式中,为螺纹结构。
所述的套件还包括废液瓶,参见附图3,所述的废液瓶包括瓶身302,以及瓶盖301,所述的瓶盖和瓶身通过第二封装部可拆卸连接;上述的第二封装部可以是任何密封结构,在一个优选的实施方式中,为螺纹结构。
所述的套件还包括细胞收获瓶,参见附图4,所述的细胞收获瓶包括瓶身402,以及瓶盖401,所述的瓶盖和瓶身通过第三封装部可拆卸连接;上述的第三封装部可以是任何密封结构,在一个优选的实施方式中,为螺纹结构。
本实用新型通过细胞筛网柱实现围产期干细胞的分离。请参见附图2,所述的细胞筛网柱具有以下组件:
第一滤膜组件,所述的第一滤膜组件具有第一滤膜203,且所述组件顶端具有可以与第一封装部相连接的第一连接部202,底端具有可以与第二封装部相连接的第二连接部204;
第二滤膜组件,所述的第二滤膜组件具有第二滤膜205,且所述组件顶端具有可以与第三封装部相连接的第二连接部204,底端具有可以与第二封装部相连接的第三连接部206。
所述的第二连接部位于第一滤膜组件底端和第二滤膜组件顶端,通过第二连接部,所述的第一滤膜组件和第二滤膜组件可以互相连接。
所述的第一滤膜组件可以通过第一连接部与组织消化瓶瓶身相连。
所述的第二滤膜组件可以通过第三连接部与废液瓶瓶身相连,也可通过第二连接部与细胞收获瓶相连。
在另一种优选的实施方式中,所述的第一连接部和第二连接部可以采用相同的螺纹结构。
在优选的实施方式中,所述的细胞筛网柱还具有第一封装盖和第二封装盖,用于在细胞转移过程中封装细胞筛网柱。所述的第一封装盖通过第一连接部与细胞筛网柱可拆卸连接,所述的第二封装盖通过第三连接部与细胞筛网柱可拆卸连接。
优选的实施方式中,所述的细胞筛网柱中,所述的第一滤膜组件与所述的第二滤膜组件具有不同的孔径。在本实用新型的一个实施例中,所述的第一滤膜组件孔径为100μm,所述的第二滤膜组件孔径为15μm。
一个优选的实施方式中,所述的细胞筛网横截面为3-5cm,优选4cm。所述的第一、第二滤膜组件高度为4-8cm,优选6cm,其中滤网位于滤膜组件中部。
一个优选的实施方式中,所述的组织消化瓶、废液瓶和细胞收获瓶的瓶身高度为8-12cm,瓶身直径为4-8cm,且开口处具有能够与瓶盖/细胞筛网柱相连的窄口。优选地,所述的窄口部分具有封装部(如螺纹结构)。
以下以本实用新型的一个应用实例,进一步说明本实用新型。应理解,这些实施例仅用于说明本实用新型而不用于限制本实用新型的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法,通常按照常规条件,或按照制造厂商所建议的条件。
实施例1围产期干细胞的分离
以胎盘间充质干细胞为例,将胎盘表面的羊膜剥除废弃,剪取胎儿面的绒毛板组织,用5-10ml PBS缓冲液漂洗3-6次,至漂洗液清亮后弃漂洗液。将5-10ml大小体积的组织放入50ml离心管中,用无菌医用剪刀将组织块剪成3mm3左右大小的碎块。
将组织块转移至组织消化瓶,加入15ml 0.2%胶原酶,盖紧瓶盖后,放入摇床中,37℃,250rpm消化1.5小时。加入组织块洗脱液至50ml,组织消化瓶正置,将细胞筛网柱倒置,并将其第一连接部与组织消化瓶的第一封装部连接起来后拧紧,将废液瓶倒置,将废液瓶的第二封装部和细胞筛网柱的第三连接部连接后拧紧,旋转倒置已经组装好的设备,让组织消化液缓慢流经筛网后进入废液瓶,可适当震动防止筛网堵塞。
待组织消化液过滤完全后,断开细胞筛网柱的第一连接部和组织消化瓶的第一封装部,用滴管逐次吸取50ml组织块洗脱液,缓慢冲洗第一滤膜上的组织块,此时,未被消化的组织块留在第一滤膜上,消化下的间充质干细胞和部分红细胞将留在第二滤膜上。
将第二连接部拧松断开,用滴管逐次吸取50ml组织块洗脱液,进一步清洗第二滤膜上的细胞。此时间充质干细胞仍留在第二滤膜上,而比第二滤膜孔径小的红细胞被清洗进入废液瓶。
将废液瓶的第二封装部与细胞筛网柱的第三连接部断开,拧上细胞筛网柱的瓶盖,将细胞收获瓶的瓶盖打开倒置,将细胞筛网柱的第二连接部与细胞收获瓶的第三封装部连接,旋转倒置,悬下瓶盖。用50ml组织洗脱液冲洗第二滤膜,将贴于滤膜下表面的间充质干细胞冲洗入细胞收获瓶。至此,将得到间充质干细胞含量较高的单细胞悬液,将得到的悬液离心后用完全培养基重悬,进行贴壁培养和扩增。
在本实用新型提及的所有文献都在本申请中引用作为参考,就如同每一篇文献被单独引用作为参考那样。此外应理解,在阅读了本实用新型的上述讲授内容之后,本领域技术人员可以对本实用新型作各种改动或修改,这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。

Claims (10)

1.一种用于围产期干细胞分离的套件,其特征在于,包括:
组织消化瓶,所述的组织消化瓶包括瓶身,以及瓶盖,所述的瓶盖和瓶身通过第一封装部可拆卸连接;
废液瓶,所述的废液瓶包括瓶身,以及瓶盖,所述的瓶盖和瓶身通过第二封装部可拆卸连接;
细胞收获瓶,所述的细胞收获瓶包括瓶身,以及瓶盖,所述的瓶盖和瓶身通过第三封装部可拆卸连接;和
细胞筛网柱,所述的细胞筛网柱具有:
第一滤膜组件,所述的第一滤膜组件具有第一滤膜,且所述组件顶端具有可以与第一封装部相连接的第一连接部,底端具有可以与第二封装部相连接的第二连接部;
第二滤膜组件,所述的第二滤膜组件具有第二滤膜,且所述组件顶端具有可以与第三封装部相连接的第二连接部,底端具有可以与第二封装部相连接的第三连接部。
2.如权利要求1所述的套件,其特征在于,所述的细胞筛网柱还具有第一封装盖,所述的第一封装盖通过第一连接部与细胞筛网柱可拆卸连接。
3.如权利要求1所述的套件,其特征在于,所述的细胞筛网柱还具有第二封装盖,所述的第二封装盖通过第三连接部与细胞筛网柱可拆卸连接。
4.如权利要求1所述的套件,其特征在于,所述的细胞筛网柱中,所述的第一滤膜组件与所述的第二滤膜组件具有不同的孔径。
5.如权利要求1所述的套件,其特征在于,所述的第一封装部、第二封装部和第三封装部为螺纹结构。
6.一种细胞筛网柱,其特征在于,所述细胞筛网柱,所述的细胞筛网柱具有:
第一滤膜组件,所述的第一滤膜组件具有第一滤膜,且所述组件顶端具有可以与第一封装部相连接的第一连接部,底端具有可以与第二封装部相连接的第二连接部;
第二滤膜组件,所述的第二滤膜组件具有第二滤膜,且所述组件顶端具有可以与第三封装部相连接的第二连接部,底端具有可以与第二封装部相连接的第三连接部。
7.如权利要求6所述的细胞筛网柱,其特征在于,所述的细胞筛网柱还具有第一封装盖,所述的第一封装盖通过第一连接部与细胞筛网柱可拆卸连接。
8.如权利要求6所述的细胞筛网柱,其特征在于,所述的细胞筛网柱还具有第二封装盖,所述的第二封装盖通过第二连接部与细胞筛网柱可拆卸连接。
9.如权利要求6所述的细胞筛网柱,其特征在于,所述的细胞筛网柱中,所述的第一滤膜组件与所述的第二滤膜组件具有不同的孔径。
10.如权利要求6所述的细胞筛网柱,其特征在于,所述的第一封装部、第二封装部和第三封装部为螺纹结构。
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