CN209854173U - 一种用于六孔板的细胞圆形伤痕愈合实验装置 - Google Patents

Abstract

本实用新型提供了一种适用于六孔板的细胞伤痕愈合实验装置，包括片状物(1)，片状物底部设置有十字交叉结构(2)；在十字交叉结构的十字端底部设置有圆柱体结构(3)。本实用新型提供一种适用于六孔板的圆形细胞伤痕愈合实验装置，方便观察整个视野中的伤痕愈合，避免目前细胞划痕实验只能观察划痕局部区域愈合的情况。

Description

一种用于六孔板的细胞圆形伤痕愈合实验装置

技术领域

本实用新型涉及细胞生物学领域，公开了一种制备圆形伤痕的细胞伤痕愈合实验装置。

技术背景

细胞伤口愈合实验是目前最常用的一种研究细胞迁移能力的体外实验方法。其基本原理是：当细胞生长融合至单层状态时，在单层培养细胞上人为制造一个“伤痕”，边缘的细胞会逐渐进入空白区域使“划痕”愈合。通过计算细胞伤痕的愈合率，评估细胞的迁移能力，在一定程度上模拟了体内细胞迁移的过程。体外改变细胞迁移和/或生长的因素可以增加或降低伤口愈合率，因此，本实验常用于研究各种实验条件比如基因调控和药物在细胞迁移中的作用。本实验操作简单，费用廉价。

传统的细胞伤口愈合实验方法是用枪头轻轻在单层细胞上间划痕，划痕横穿过孔板，枪头尽量与孔板的底部垂直，划痕的距离可以选用不同型号的枪头调节。划痕在同一方向成一条直线。首先：人工制造的“划痕”很难保证一致性，实验误差大，干扰因素多，且手动划痕可能会划伤培养器皿表面的包被，进而影响实验结果。其次，细胞伤痕愈合实验需要连续观察以评估处理因素对细胞迁移的作用，传统方法是在培养板背面预先划线标记观察位置，但是在实验前无法预知细胞生长情况，在显微镜下每次的观测点也不可能做到完全一致，且传统方法计算的是某一个部位的迁移距离，只能获得局部细胞迁移的数据。

实用新型内容：

本实用新型针对现有细胞划痕实验技术的不足，设计了一种适用于六孔板的细胞伤痕愈合实验装置，可获得圆形的细胞伤痕，从二维角度评估细胞的整体迁移情况。

实现本实用新型的技术方案如下：

一种适用于六孔板的细胞伤痕愈合实验装置，包括片状物(1)，片状物顶面设置有十字交叉结构(2)，片状物(1)底面设置有圆柱体(3)，圆柱体(3)对应设置于十字交叉结构的4个十字端(6)下方。

上述片状物为圆形，十字交叉结构(2)的交叉点(5)位于圆形片状物的圆心位置。

上述十字交叉结构为长度(L)3.48cm，高度(H)1.0cm，厚度(T)0.2cm；圆形片状物的直径(D)1.88cm，厚度(T)0.1cm。

上述圆柱体(3)高度(H)0.3cm，底面直径(D)0.2cm。

上述圆片状物(1)固定于十字交叉结构(2)，圆柱体(3)固定于圆片状物(1)；圆柱体结构(3)为4个，分别对应位于交叉结构(2)的4个十字端(6)中点下方。

上述片状物(1)和十字交叉结构(2)、圆柱形结构(3)为不锈钢材质。

有益效果

1.本装置提供一种适用于六孔板的细胞伤痕愈合实验，在一个6孔板中获得4个底部直径为0.2cm的圆形细胞伤痕，在显微镜下方便观察整个视野中的细胞伤痕愈合情况，可以通过计算伤痕的总面积，获得细胞伤痕愈合率。避免细胞目前细胞划痕实验只能观察划痕局部区域的愈合情况。(0.2cm为在显微镜40×视野下可观察到的最大直径)。

2.本装置对细胞培养无毒性作用，可高温高压反复消毒，重复使用，经济实用环保。

3.本装置提供的装置适用于6孔板，细胞培养前放置在6孔板中，加入细胞，待细胞贴壁后，取下装置后，能见到边缘整齐的圆形细胞伤痕，可在显微镜下动态观察细胞愈合的整体情况，通过一次实验即可在六孔板中制造4个圆形细胞伤痕，可获得多个实验重复数据，有助于评估实验结果，大大节约实验成本，节省实验时间。

4.采用本装置能很好的用于各种细胞的伤痕愈合实验，并能很好的保持细胞活性。

附图说明

图1本装置侧面图(1-片状物，2-十字交叉结构，3-圆柱体结构)

图2本装置放置于六孔板中俯视图(1-圆片状物，2-十字交叉结构，3-圆柱体结构，4-六孔板，5-十字交叉结构交叉点，6-十字交叉结构十字端)

图3.本装置放置于六孔板中仰视图(1-圆片状物，2-十字交叉结构，3-圆柱体结构，4-六孔板，6-十字交叉结构十字端)

图4.本装置取出后示意图(3-圆形细胞伤痕，4-六孔板)

图5枪头划痕与本细胞伤痕愈合装置的圆形伤痕比较

图6ATRA处理后1、3、5天圆形伤痕的愈合情况

图7细胞伤痕愈合率(*：p＜0.05)

具体实施方式

下面通过实施例对本实用新型进行具体描述，有必要在此指出的是，以下实施例只用于对本实用新型进行进一步的说明，不能理解为对本实用新型保护范围的限制，该领域的技术熟练人员可以根据上述实用新型内容对本实用新型做出一些非本质的改进和调整。

实施例1

一种适用于六孔板的细胞伤痕愈合实验装置，包括片状物(1)，片状物顶面设置有十字交叉结构(2)，片状物(1)底面设置有圆柱体(3)，圆柱体(3)对应设置于十字交叉结构的十字端(6)下方；所述片状物为圆形，十字交叉结构(2)的交叉点(5)位于圆形片状物的圆心位置；所述十字交叉结构为长度(L)3.48cm，高度(H)1.0cm，厚度(T)0.2cm；圆形片状物的直径(D)1.88cm，厚度(T)0.1cm；所述圆柱体(3)高度(H)0.3cm，底面直径(D)0.2cm；所述圆片状物(1)固定于十字交叉结构(2)，圆柱体(3)固定于圆片状物(1)；圆柱体结构(3)为4个，分别对应位于交叉结构(2)的4个十字端(6)下方；所述片状物(1)和十字交叉结构(2)、圆柱形结构(3)为不锈钢材质。

将此装置用于细胞伤痕愈合实验检测全反式维甲酸(ATRA)对小鼠肝肿瘤细胞Hepa1-6的作用：

(1)将本装置高温高压消毒后放入6孔板中。

(2)将Hepa1-6细胞以2×10⁶/孔接种至6孔板，10μmol/L浓度ATRA处理3d后，细胞汇合度接近100％，取出细胞伤痕装置，获得四个直径为0.2cm的圆形细胞伤痕，与手动枪头划痕比较，装置下获得的细胞伤痕整齐，边缘均一(图1)。

(3)分别于0、1、3、5天在同一部位观察细胞伤痕的愈合情况，测量不同部位伤痕宽度计算愈合率，伤痕愈合率(％)＝(0h伤痕面积-X h伤痕面积)/0h划痕面积×100％，实验重复3次，结果提示ATRA能有效抑制小鼠肝肿瘤细胞Hepa1-6的迁移，且本方法计算的伤痕愈合率标准差小，实验重复率高。

Claims (5)

1.一种用于六孔板的细胞圆形伤痕愈合实验装置，其特征在于：包括片状物（1），片状物顶面设置有十字交叉结构（2），片状物（1）底面设置有圆柱体（3），圆柱体（3）对应设置于十字交叉结构的十字端（6）下方。

2.如权利要求1所述的用于六孔板的细胞圆形伤痕愈合实验装置，其特征在于：所述片状物为圆形，十字交叉结构（2）的交叉点（5）位于圆形片状物的圆心位置。

3.如权利要求2所述的用于六孔板的细胞圆形伤痕愈合实验装置，其特征在于：所述十字交叉结构为长度（L）3.48cm，高度（H）1.0cm，厚度（T）0.2cm；圆形片状物的直径（D）1.88cm，厚度（T）0.1cm。

4.如权利要求1所述的用于六孔板的细胞圆形伤痕愈合实验装置，其特征在于：所述圆柱体（3）高度（H）0.3cm，底面直径（D）0.2cm。

5.如权利要求1所述的用于六孔板的细胞圆形伤痕愈合实验装置，其特征在于：所述片状物（1）固定于十字交叉结构（2），圆柱体（3）固定于片状物（1）；圆柱体（3）为4个，分别对应位于交叉结构（2）的4个十字端（6）中点下方。