CN209327158U - 一种药敏试验采样器 - Google Patents

Abstract

本实用新型公开一种药敏试验采样器，滴管两端分别连通针座接头和盲管，盲管外依附有盖体，针座接头与采样针插拔连接，采样针包括针梗、及针栓，针栓呈帽状，针梗嵌入于针栓并向内腔延伸，针座接头表面覆盖薄膜，所述针栓套入所述针座接头时，针梗刺穿所述针座接头表面的薄膜，所述针梗尖端为实心体，远离针梗尖端，针梗侧面设有与空腔连通的豁口，豁口内缘打磨成刃部，采样针内设有自针栓延伸至豁口的空腔，滴管采用透明的弹性塑料制成，针座接头采用塑料材质，盲管采用脆性塑料或有机玻璃。本实用新型的简化了药敏试验操作过程和步骤，可在24小时内完成对细菌的抗菌药物筛选。更为重要的是降低了药敏试验对试验环境和操作人员的要求。

Description

一种药敏试验采样器

技术领域

本实用新型涉及细菌采集技术领域，尤其涉及药敏试验采样器。

背景技术

在动物养殖产业中，尤其是随着集约化养殖程度的提高，各种细菌性疾病给养殖业造成的经济损失备受重视，因此使用抗生素防治细菌性疾病成为常态。但由于从业者的素质参差不齐，在养殖过程中存在大量不科学、盲目滥用抗生素的现象。造成很多致病性细菌产生了耐药性，导致抗菌药对细菌性疾病的控制效果越来越差，结果造成药物浪费，而且还延误病情，使死亡率升高，给养殖户带来很大的经济损失。同时，大量使用抗生素产生的耐药菌株还可能将耐药性基因由动物转移给人类，对人类健康造成潜在威胁，而抗生素药物在动物体内的蓄积与残留，导致食品安全问题，直接威胁到人类健康。

为了保证动物性食品安全，国内外提倡无抗养殖。如何避免滥用抗生素，科学地使用药物，药敏试验在临床诊断中的应用就显得非常重要。药敏试验旨在了解病原微生物对各种抗生素的敏感(或耐受)程度，以指导临床合理选用抗生素药物的微生物学试验。利用药敏实验不仅可以相对快速有效地检测病原菌对各种抗菌药的敏感性，及时了解养殖场内病原微生物的耐药情况，更重要的是指导临床科学合理用药，避免盲目用药，养殖户可根据药敏试验结果自主的灵活选药，可以就地选出最经济有效的敏感药物，既能缩短病程，又能减少费用。

药敏实验有多种方法，其中纸片扩散法在临床上最常用。纸片扩散法是将含有定量抗菌药物的滤纸片贴在已接种了测试菌的固体培养基表面上，纸片中的药物在琼脂中扩散，在纸片的周围形成一种浓度梯度。而测试菌在纸片周围抑菌浓度范围内的培养基上不生长，在抑菌范围外的生长，从而在纸片的周围形成透明的抑菌圈。抑菌圈的大小可反映测试菌对测定药物的敏感程度，抑菌圈越大说明测试菌对该药越敏感，该药对测试菌的最低抑菌浓度越小，临床上使用该药的效果可能更好。

目前，药敏实验需要专门的实验环境、专业的设备和专业的技术培训。且存在以下三个缺点：1，周期长，药敏试验前必须完成病原微生物的分离鉴定，至少需要2天甚至数周；2.试验条件苛刻，一般要在“超净台”中用接种环进行划线接种。一般的养殖场和普通养殖户无法完成药敏实验，必须由专业人士实施。从采集样品到完成药敏实验至少需要2天，饲养员不能第一时间获得病原微生物对药物敏感性的结果，处于被动状态。3.试验对象种类非常有限，基本上是实验人员主观判断和挑选的微生物菌落，往往是病料中数量最多微生物种类，这可能会导致忽视病料中其他的微生物，尤其是在存在混合感染的病例中，而其他被忽视的微生物有可能疾病的原因所在。实际操作中即使省去鉴定病原微生物，从病原微生物分离到获得药敏试验结果也需要2～4天，且必须具备严苛的试验条件。而定期进行药敏试验有助于了解当地细菌对抗菌药的敏感性情况，现急需步骤简单，试验条件简单的药敏试验方法。专利CN1556217A虽然建立了一种“快速筛选病原微生物敏感药物的方法”，但不能避免“少量杂菌”污染，同时该方法提及的样本采取时需要一定的专业培训，如简单的无菌操作技术。

实用新型内容

为了克服现有的药敏试验对实验条件的限制，本实用新型的目的在于提供一种药敏试验采样器，改进药敏试验的取样方法，简化药敏试验的苛刻操作条件，提高药敏试验选药的准确性。

本实用新型解决其技术问题所采用的技术方案是：一种药敏试验采样器，滴管两端分别连通针座接头和盲管，盲管外依附有盖体，针座接头与采样针插拔连接，采样针包括针梗、及针栓，针栓呈帽状，针梗嵌入于针栓并向内腔延伸，针座接头表面覆盖薄膜，所述针栓套入所述针座接头时，针梗刺穿所述针座接头表面的薄膜，所述针梗尖端为实心体，远离针梗尖端，针梗侧面设有与空腔连通的豁口，豁口内缘打磨成刃部，采样针内设有自针栓延伸至豁口的空腔，滴管采用透明的弹性塑料制成，针座接头采用塑料材质，盲管采用脆性塑料或有机玻璃。

优选地，所述针座接头与所述针栓螺纹连接。

本实用新型的优点是1.药敏片实验前采用采样器采集样品，可在采样器内进行增菌培养，然后经盲管将细菌培养物滴加到琼脂固体培养基表面，避免了细菌分离培养和纯培养等专业操作，减少了病料污染环节，而现有技术是必须经历分离细菌这一环节，挑取细菌培养物，以划线方式将细菌涂布在平皿培养基上，再逐一贴加药物试纸片进行药敏试验。本实用新型与现有的技术所采用的接种工具，接种的计量不同,接种后恒温培养的时间不同，实验不需要无菌环境，但采用了一次性实验工具，相当于将实验条件简化，将原本需要专业无菌操作的技术和实验环境才能进行的实验挪到了现场实施，节约了实验过程的时间，将样本采集和接种工具改为采样器，更易操作，消毒过程简化了。

CN1556217A需要较专业的采样技术，需要必要的专业培训，如手术器械的消毒和无菌采集病料，而本实用新型中利用采样器可避开病料表面易受到污染的组织，采集切割深部组织，直接将组织与培养液进行增菌培养，保证采样的准确性，保证样品不受外界的污染，然后用采集器的盲管将液体滴加在固体培养基上，利用玻璃珠滚动均匀的涂布液体培养基，使用多个药敏试纸片同时检测病原菌对不同药物的耐药性。

2.本实用新型通过液体培养基增殖患病动物的脏器中的病原，减少了人为挑取可疑病原的环节，保持了病原所处的环境的稳定性和病原的多样性，因此增菌后的培养物中包含患病动物体内的各种病原，其中的各种病原之间的比例将接近患病动物体内的实际情况。药敏试验的结果更能全面的反映动物病原对药物的敏感性，对临床指导用药更具有针对性。患病动物体内可能会存在多种病原微生物，传统的技术进行分离培养后，一般只会挑选其中的有1-2种可疑的病原进行药敏试验。选取的病原种类有限，试验结果存在一定的局限性和人为误差因素。

3.传统试验方法采用手术直接从动物肝脏组织中取样，或破碎小型动物的尸体，势必会在手术过程和破碎动物尸体时引入杂菌，故需借助严苛的试验室环境，消除污染的影响，而本实用新型采用一次性消毒工具采集病料的深部组织，避免取样污染的因素，采样针针梗尖端为实心体，这样采样针在刺入动物活体或尸体时，能防止表面被污染的组织被挤入针梗尖端，采样器在采完样品后可以通过加热密封针座接头，隔绝外界含有杂菌的空气，经增菌培养后通过盲管转接到固体培养基，减少取样环节，避免样本受环境中的杂菌污染，取样方式具有普适性，便于对非专业检测员培训操作。

本实用新型新型的有益效果是：技术简单、实验装置简单、齐全、可操作性强，无需系统的专业培训，实现现场实地及时观察判断药敏试验结果。根据抑菌圈的大小判断微生物样品对药物的敏感性，指导药物选择和用药。

附图说明

图1是本实用新型的结构示意图；

图2是本实用新型的针栓和针座接头一种连接方式的示意图。

具体实施方式

下面结合附图对本实用新型做进一步描述：本实用新型进行药敏试验包括3个基本过程，即动物肝脏组织采集、液体培养基增菌和药敏试验。

实施例1

所述采样器1如附图1所示，包括滴管1.1,滴管内可容纳液体培养基2mL，滴管两端分别连接针座接头2和盲管3，滴管1.1形状为圆柱体或直四棱柱，采用透明的弹性塑料制成，盲管3可用带橡胶垫3.2的盖体6.3密封，针座接头2采用塑料材质，针座接头与采样针插拔连接，用于连接采样针4或注射器针头，采样针4针梗4.1材质为金属或硬质塑料，长3-5cm，包括针梗4.1、及针栓4.2，针栓呈帽状，针梗4.1嵌入于针栓并向内腔4.4延伸，针座接头2表面覆盖薄膜2.1，所述针栓4.2套入所述针座接头2时，针梗4.1刺穿所述针座接头表面的薄膜2.1，针梗4.1尖端为实心体，针梗侧面设有长0.05cm×0.2-0.5cm豁口5，采样针4内设有自针栓4.2延伸至豁口5的空腔4.3，豁口5内缘设有刃部5.1，在采集组织样品过程中转动采样针4时可以切割组织，保证采样顺畅起到重要作用；盲管3长0.5-2cm，采用脆性塑料或有机玻璃，折断盲管3后可用于滴加滴管1.1内采集的样品；盲管3外依附有盖体6.3，保证盲管3在使用前保持无菌，盖体6.3内可垫一个胶垫3.2，用于密封盲管3。

如图2，针座接头2和针座4.2还可螺纹连接。

2017年7月，在湖北恩施某蛋鸡场发生产蛋率下降和腹膜炎等症状，初步诊断与细菌感染有关。

首先用采样针4抽取鸡的肝脏组织，先组装完整采样针4，用手指捏压滴管1.1，排除部分空气，将采样针4深入肝脏内部，放松手指同时转动采样针3-5次并适当改变针梗4.1在组织中的深度，直至滴管1.1回复原来的形状或者观察到滴管1.1中出现少量肝脏组织，滴管1.1中液体培养基颜色变红。从针座接头2向滴管1.1内注入液体培养基，再用加热的金属将针座接头2密封。将采集的组织与液体培养基混匀。液体培养基由5g牛肉粉、5g氯化钠、20g蛋白胨、100mL牛血清，900ml蒸馏水、配置的pH为7.4-7.6的营养液。然后放于37℃恒温培养箱中培养8h。拔掉采样器盲管3处的盖体6.3，掰断盲管3末端，将采样器中的液体逐滴均匀滴加在琼脂固体培养基表面。静置3-5min，将玻璃珠晃动至平皿边缘，再将自制药敏试纸板铺在培养基表面。将贴有药敏贴片的固体培养基放于37℃恒温培养箱中静置培养12h(过夜培养)。肉眼观察药物抑菌圈大小，选择恩诺沙星、氟苯尼考作为抗感染口服药物，投喂氟苯尼考3天后产蛋量稳定，死亡情况得到有效控制。

对比例1

用酒精灯灭菌接种环后，挑取肝脏组织，或用灭菌的手术剪刀或刀片移除部分肝脏组织，涂布到麦康凯培养基表面，然后将培养基放于37℃培养箱培养12小时以上，便可观察到适当大小的菌落，但对于混合感染，还需延长培养时间至16-24h，以便挑取混合菌落中数量最多的菌落。在麦康凯培养基表面有多种颜色不同的菌落，数量最多的呈红色，另一种呈灰白色。分别挑取2种不同的菌落涂布新的TSA培养基，再逐一贴放8-9种药敏试纸片，再将培养基放于37℃培养箱培养16-24h；2种细菌对同一种药物的敏感程度存在一定的差异，9种受试药物中对恩诺沙星、氟苯尼考比较敏感。

实施例中用采样器取样可以取病料组织深部的组织样本，减少样本污染的环节和机会，也可以实现活体取样。而对比例中用非采样器取样，如对病灶组织进行破碎，或棉签蘸取液体后进行培养，样本暴露空气中易受到环境污染，切取样过程若选用活体动物则需手术过程，非专业人士难以操作，在细菌分离后形成的菌落若受取样环节的污染，导致选错菌落，增加认为误差，则显著影响药敏试验结果；另外，在取样增菌过程中手续相对专业和繁琐，需要无菌的操作环境和专业技能训练。在试验周期上。

该实用新型阐述了一种在极端简陋与落后的条件下有效的完成药敏试验，技术简单，对人员素质和实验条件和设备要求低，非常适合临床基层的养殖单位。利用该实用新型，养殖者自己可以合理地选择并科学使用药物。

Claims (2)

1.一种药敏试验采样器，包括滴管,其特征在于，滴管两端分别连通针座接头和盲管，盲管外依附有盖体，针座接头与采样针插拔连接，采样针包括针梗、及针栓，针栓呈帽状，针梗嵌入于针栓并向内腔延伸，针座接头表面覆盖薄膜，所述针栓套入所述针座接头时，针梗刺穿所述针座接头表面的薄膜，所述针梗尖端为实心体，远离针梗尖端，针梗侧面设有与空腔连通的豁口，豁口内缘打磨成刃部，采样针内设有自针栓延伸至豁口的空腔，滴管采用透明的弹性塑料制成，针座接头采用塑料材质，盲管采用脆性塑料或有机玻璃。

2.根据权利要求1所述的药敏试验采样器，其特征在于：所述针座接头与所述针栓螺纹连接。