CN203324273U - 高通量筛查过敏原特异性IgE抗体的反应槽 - Google Patents
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Abstract
本实用新型公开了一种高通量筛查过敏原特异性IgE抗体的反应槽,包括硬质塑料底槽、共价结合有过敏原蛋白的扁圆柱形纤维素膜以及与底槽密合的光滑塑料压盖,所述的底槽的內表面设置有若干光滑圆柱形小孔,所述的纤维素膜固设在所述的圆柱形小孔内,所述的塑料压盖上设置有与底槽上圆柱形孔的孔径大小、数量及位罝均相同的光滑开孔;所述的压盖上方设置有用于防止反应槽污染的塑料盖膜。本实用新型用于过敏原特异性IgE抗体的检测,一份少量血液样本一次同时可筛査数十种致敏过敏原,操作更简便、成本更低廉、样本用量少。
Description
技术领域
本实用新型涉及一种高通量筛查过敏原特异性IgE抗体的反应槽。
背景技术
2011-2012年世界变态反应组织(WAO)关于变态反应(也称过敏反应,Allergy)的白皮书指出,“过敏性疾病的流行在发达国家和发展中国家全世界范围内正戏剧性地上升。”过敏性疾病的临床诊断是根据患者病史结合点刺或血液检测过敏原特异性IgE(sIgE)抗体浓度,筛查致病过敏原。检测血液中过敏原特异性IgE(sIgE)抗体浓度,筛查致病过敏原商业化产品的发展趋势是:自动化、快速、准确、样品用量少,一次筛查几十种过敏原。市场上有瑞典Pharmacia公司产品用胶体金侧流层析技术的ImmunoCAP Rapid及用蛋白芯片技术的ImmunoCAP ISAC和德国Mediwiss-analytic公司的产品AllergyScreen使用免疫印迹技术。上述几种技术检测方法存在着成本较高且筛查相同数目的过敏原特异性IgE抗体所需样本用量较多的缺点。
发明内容
为了克服现有筛查过敏原特异性IgE抗体的方法中存在的上述缺点,本实用新型提供一种一次可筛査数十种过敏原特异性IgE抗体、使用简单方便、灵敏度较高、配合阅读仪可定性或半定量地快速检测人血清或血浆中的过敏原特异性抗体IgE浓度的高通量筛查过敏原特异性IgE抗体的反应槽。
本实用新型采用的技术方案是:
高通量筛查过敏原特异性IgE抗体的反应槽,包括硬质塑料底槽、共价结合有过敏原蛋白的扁圆柱形纤维素膜以及与底槽密合的光滑塑料压盖,其特征在于:所述的底槽的內表面设置有若干光滑圆柱形孔,所述的纤维素膜固设在所述的圆柱形孔内,所述的塑料压盖上设置有与底槽上圆柱形孔的孔径大小、数量及位罝均相同的光滑开孔。
进一步,所述的压盖上方设置有用于防止反应槽污染的塑料盖膜。
进一步,所述的底槽的內表面上的圆柱形孔的数目为30-60个。
进一步,所述的底槽的厚度为3.5-4.0mm,所述的圆柱形孔的直径为3.0-4.5mm,深2.0-2.5mm。
进一步,所述的纤维素膜的厚度为2.0-2.5mm。
进一步,所述的纤维素膜为脱酯纤维素膜、硝酸纤维素膜或多孔聚氟乙烯纤维素膜。
进一步,所述的反应槽为长方形。
本实用新型所述的纤维素膜结合的过敏原蛋白有:植物花粉类(包括树花粉类、草花粉类及野草花粉类)过敏原;霉菌类过敏原;动物皮屑类过敏原;昆虫类过敏原;植物食物类(包括水果类、蔬菜类、坚果类、食用菌类及谷物类)过敏原和动物食物类(包括肉类、禽蛋类、魚和甲壳类及奶类)过敏原。
本实用新型的有益效果体现在:可应用于配检测过敏原特异性IgE抗体的阅读仪设计;一次可筛査数十种过敏原特异性IgE抗体、使用简单方便、灵敏度较高、配合阅读仪可定性或半定量地快速检测人血清或血浆中的过敏原特异性抗体IgE浓度;操作更简便、成本更低廉、样本用量更少;与胶体金侧流层析技术和免疫印迹技术检测相比,生产成本更低廉,供可筛查的过敏原蛋白数目更多;与蛋白芯片技术检测相比,生成本更低廉,生产无需专用点膜仪。
附图说明
图1是本实用新型整体结构示意图。
图2是本实用新型横切面示意图。
具体实施方式
参照图1和图2,高通量筛查过敏原特异性IgE抗体的反应槽,包括硬质塑料底槽1、共价结合有过敏原蛋白的扁圆柱形纤维素膜2以及与底槽1密合的光滑塑料压盖3,所述的底槽1的內表面设置有若干光滑圆柱形孔11,所述的纤维素膜2固设在所述的圆柱形孔11内,所述的塑料压盖3上设置有与底槽1上圆柱形孔11的孔径大小、数量及位罝均相同的光滑开孔。
进一步,所述的压盖3上方设置有用于防止反应槽污染的塑料盖膜。
进一步,所述的底槽1的內表面上的圆柱形孔的数目为30-60个。
进一步,所述的底槽1的厚度为3.5-4.0mm,所述的圆柱形孔的直径为3.0-4.5mm,深2.0-2.5mm。
进一步,所述的纤维素膜2的厚度为2.0-2.5mm。
进一步,所述的纤维素膜2为脱酯纤维素膜、硝酸纤维素膜或多孔聚氟乙烯纤维素膜。
进一步,所述的反应槽为长方形。
本实用新型所述的纤维素膜结合的过敏原蛋白有:植物花粉类(包括树花粉类、草花粉类及野草花粉类)过敏原;霉菌类过敏原;动物皮屑类过敏原;昆虫类过敏原;植物食物类(包括水果类、蔬菜类、坚果类、食用菌类及谷物类)过敏原和动物食物类(包括肉类、禽蛋类、魚和甲壳类及奶类)过敏原。
本实用新型所述的高通量筛查过敏原特异性IgE抗体的反应槽按下列步骤操作:
步骤1.将所需的结合了不同过敏原蛋白和质控蛋白的纤维素膜分别固置于底槽不同位置的圆柱形孔内,并作相应的记录,紧压上开孔的塑料压盖,构成反应槽;
步骤2.反应槽内加入足量已适度稀释的血清样本溶液后,缓缓滾摇,确保所有的小孔内均注满有样本溶液;
步骤3.避光室温平置反应槽60分钟;
步骤4.倒空反应槽内溶液,加入足量洗涤液使反应槽内漫布洗涤液后,抽吸数次,再倒空洗涤液;重复洗涤3次;
步骤5.加足量的二抗溶液于反应槽内,缓缓滚摇,确保所有的圆柱形孔内均注满有二抗溶液,盖上塑料盖膜;避光室温平置反应槽孵育60分钟,或37℃孵育45分钟;
步骤6.倒空反应槽内溶液,如步骤4重复洗涤3次;
步骤7.加足量的酶工作液于反应槽内,缓缓滚摇,确保所有的圆柱形孔内均注满有溶液,盖上塑料盖膜;避光室温平置反应槽孵育20分钟;
步骤8.倒空反应槽内溶液,如步骤4重复洗涤3次;
步骤9.加足量的底物/显色剂溶液于反应槽内,缓缓滚摇,确保所有的圆柱形孔内均注满有溶液,盖上塑料盖膜;避光室温平置反应槽孵育20分钟;
步骤10.倒空反应槽内溶液,流水清洗反应槽,终止酶反应;
步骤11.甩干反应槽,目测或用阅读仪判定检测结果。
检测结果有如下几种情况:
1、所述的高通量筛查过敏原特异性IgE抗体的反应槽按上述步骤操作检测阳性质控后的检测结果,肉眼可见阳性质控孔显蓝色(或阅读仪显示IgE抗体浓度≥4.0IU/ml);阴性质控孔不显色(或阅读仪显示IgE抗体浓度<0.35IU/ml);说明该反应槽质量保证和操作正确。
2、所述的高通量筛查过敏原特异性IgE抗体的反应槽按上述步骤操作检测阳性质控后的检测结果,肉眼未见阳性质控孔显蓝色(或阅读仪显示IgE抗体浓度<4.0IU/ml);阴性质控孔不显色(或阅读仪显示IgE抗体浓度<0.35IU/ml);说明该反应槽质量或操作有问题。
3、所述的高通量筛查过敏原特异性IgE抗体的反应槽按上述步骤操作检测阳性质控后的检测结果,肉眼未见阳性质控孔显蓝色(或阅读仪显示IgE抗体浓度<4.0IU/ml);阴性质控孔显色(或阅读仪显示IgE抗体浓度>0.35IU/ml);说明该反应槽质量或操作有问题。
所述的高通量筛查过敏原特异性IgE抗体的反应槽按上述步骤操作后的检测结果,除上述正确的阳性质控和阴性质控结果外,过敏性疾病患者血清样本也将在某个或某几个特定的过敏原孔显蓝色(或阅读仪显示sIgE抗体浓度≥0.35IU/ml)。
本说明书实施例所述的内容仅仅是对发明构思的实现形式的列举,本实用新型的保护范围不应当被视为仅限于实施例所陈述的具体形式,本实用新型的保护范围也及于本领域技术人员根据本实用新型构思所能够想到的等同技术手段。
Claims (7)
1.高通量筛查过敏原特异性IgE抗体的反应槽,包括硬质塑料底槽、共价结合有过敏原蛋白的扁圆柱形纤维素膜以及与底槽密合的光滑塑料压盖,其特征在于:所述的底槽的內表面设置有若干光滑圆柱形孔,所述的纤维素膜固设在所述的圆柱形孔内,所述的塑料压盖上设置有与底槽上圆柱形孔的孔径大小、数量及位罝均相同的光滑开孔。
2.如权利要求1所述的高通量筛查过敏原特异性IgE抗体的反应槽,其特征在于:所述的压盖上方设置有用于防止反应槽污染的塑料盖膜。
3.如权利要求1或2所述的高通量筛查过敏原特异性IgE抗体的反应槽,其特征在于:所述的底槽的內表面上的圆柱形孔的数目为30-60个。
4.如权利要求3所述的高通量筛查过敏原特异性IgE抗体的反应槽,其特征在于:所述的底槽的厚度为3.5-4.0mm,所述的圆柱形孔的直径为3.0-4.5mm,深2.0-2.5mm。
5.如权利要求4所述的高通量筛查过敏原特异性IgE抗体的反应槽,其特征在于:所述的纤维素膜的厚度为2.0-2.5mm。
6.如权利要求5所述的高通量筛查过敏原特异性IgE抗体的反应槽,其特征在于:所述的纤维素膜为脱酯纤维素膜、硝酸纤维素膜或多孔聚氟乙烯纤维素膜。
7.如权利要求1~6之一所述的高通量筛查过敏原特异性IgE抗体的反应槽,其特征在于:所述的反应槽为长方形。
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Cited By (2)
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CN104237527A (zh) * | 2014-03-18 | 2014-12-24 | 杭州浙大迪迅生物基因工程有限公司 | 高灵敏检测过敏原特异性抗体IgE的试剂盒及方法 |
CN113418833A (zh) * | 2021-06-22 | 2021-09-21 | 杭州兴浩晖生物科技有限公司 | 超快反应板及其表面处理工艺和样本检测系统 |
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