CN203101398U - 一种使用拭子采集体液检测甲型肝炎的检测试剂盒 - Google Patents
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Abstract
本实用新型是涉及生物应用技术领域，特别是涉及一种使用拭子采集体液检测甲型肝炎的检测试剂盒，采用拭子采集口腔液，用胶体金标记甲型肝炎病毒特异性重组抗原，包被抗人IgG抗体实现对口腔液中抗甲型肝炎病毒IgG抗体的检测。具有操作简便、反应快速、敏感性高、特异性强、适合现场检测和经济实用等优点。
Description
技术领域
本实用新型是涉及生物应用技术领域，特别是涉及一种使用拭子采集体液检测甲型肝炎的检测试剂盒。
背景技术
甲型病毒性肝炎，简称甲型肝炎、甲肝，是由甲型肝炎病毒(HAV)引起的，以肝脏炎症病变为主的传染病，主要通过粪-口途径传播，临床上以疲乏，食欲减退，肝肿大，肝功能异常为主要表现，部分病例出现黄疸，主要表现为急性肝炎，无症状感染者常见。任何年龄均可患本病，但主要为儿童和青少年。成人甲肝的临床症状一般较儿童为重。冬春季节常是甲肝发病的高峰期。本病病程呈自限性，无慢性化，引起急性重型肝炎者极为少见。
目前对甲型肝炎病毒检测的主要方法是对血液样本进行采集检测抗体，在胶体金的检测方法中，有检测甲型肝炎病毒IgG的报道，但使用口腔液拭子进行IgG检测尚未有相关报道。和传统试剂相比，使用口腔液拭子进行IgG检测具有采样容易，减少患者的痛苦，减少检测人员的工作量的优点。
发明内容
本实用新型的目的是提供一种使用拭子采集体液检测甲型肝炎的检测试剂盒，具有采样容易、操作简便、反应快速、敏感性高、特异性强、适合现场检测等优点。
本实用新型提供一种使用拭子采集体液检测甲型肝炎的检测试剂盒，其特征在于塑料支撑板(7)一端连接上样垫(1)，上样垫(1)的一端紧密压接含有标记甲型肝炎病毒特异性的抗原VP1的胶体金垫(2)，胶体金垫(2)一端紧密压接硝酸纤维素(NC)膜(3)，硝酸纤维素膜包被有相互分离的检测线T线(5)和质控C线(6)，检测线T(5)为包被在NC膜上的抗人IgG抗体，质控(C)线(6)为包被在NC膜上的抗甲型肝炎病毒特异性的抗原VP1的抗体，硝酸纤维素膜的另一端连接吸样垫(4)形成试纸。
所述的一种使用拭子采集体液检测甲型肝炎的检测试剂盒，其特征在于其抗体的包被方法为：以0.01M pH7.2磷酸盐缓冲液(PBS)将抗人IgG抗体配制成5mg/ml的溶液，用喷膜仪在NC膜下部以1-1.5ul/cm的参数进行划线，包被T线，同时在NC膜上部包被甲型肝炎病毒特异性蛋白VP1抗体作为C线，划线后将NC膜在干燥间，温度20-25℃，湿度小于30％，干燥2-5小时。
将标记好甲型病毒特异性抗原VP1的胶体金颗粒制成胶体金垫，与包被抗体的硝酸纤维素膜和其他辅料制备成试纸条。
所述的一种使用拭子采集体液检测甲型肝炎的检测试剂盒，其特征在于其检测方法为：用口腔拭子尼龙垫端从嘴的上牙龈一角开始，从左慢慢压拭到右，用时5到6秒，然后，从右慢慢压拭到左，用时5到6秒，反复3次，然后反转口腔拭子，从嘴的下牙龈一角开始，重复上述过程，压拭力度，以受检者有酸胀感，且无明显不适为准；压拭后，立即将口腔拭子浸入样本缓冲液中，先后让拭子的两面紧贴试管壁，上下刮擦6-8次，管内液体即为口腔液样本，将试纸条平放，在上样垫上加入100ul样品，使胶体金溶解并在NC膜上层析，然后用肉眼直接观察在15分钟内C、T线的出现情况，并判定检测结果。
本实用新型的有益效果是：提供一种使用拭子采集体液检测甲型肝炎的检测试剂盒。和传统试剂相比，使用口腔液拭子进行IgG检测具有采样容易，减少患者的痛苦，减少检测人员的工作量的优点。
附图说明：
图1使用拭子采集体液检测甲型肝炎的检测试剂盒试纸结构示意图。
附图符号说明：1：上样垫；2：胶体金垫；3：NC膜；4：吸样垫5：检测线T1；6：质控(C)线；7：塑料支撑板。
图2采集口腔液拭子结构示意图
附图符号说明：1：尼龙垫端；2：手持端。
具体实施方式
实施例：
制备甲型肝炎的检测试剂盒试纸
将甲型肝炎病毒特异性抗原VP1使用胶体金标记，制成胶体金垫，以 0.01M pH7.2磷酸盐缓冲液(PBS)将抗人IgG抗体配制成5mg/ml的溶液，用喷膜仪在NC膜下部以1-1.5ul/cm的参数进行划线，包被T线，同时在NC膜上部包被甲型肝炎病毒特异性蛋白VP1抗体作为C线，划线后将NC膜在干燥间，温度20-25℃，湿度小于30％，干燥2-5小时。将胶体金垫和包被好的NC膜和其他辅料装配成试纸条。
将50例已确诊甲肝病毒IgG抗体阳性的病人作为待检者，将50例已确诊甲肝病毒IgG抗体阴性的健康人作为对照组待检者。用口腔拭子尼龙垫端从嘴的上牙龈一角开始，从左慢慢压拭到右，用时5到6秒，然后，从右慢慢压拭到左，用时5到6秒，反复3次，然后反转口腔拭子，从嘴的下牙龈一角开始，重复上述过程，压拭力度，以受检者有酸胀感，且无明显不适为准；压拭后，立即将口腔拭子浸入样本缓冲液中，先后让拭子的两面紧贴试管壁，上下刮擦6-8次，管内液体即为口腔液样本，将试纸条平放，在上样垫上加入100ul样品，使胶体金溶解并在NC膜上层析，然后用肉眼直接观察在15分钟内C、T线的出现情况，并判定检测结果。
检测结果的解释：
如果对照区内的对照线没有出现，检测结果无效，如果仅在对照区出现一条线对照线，结果为阴性。如果检测线和对照线都出现，即试纸上出现两条线，则检测结果为阳性。
通过临床血清检测，IgG为阳性的样本和IgG为阴性的样本，本试剂检测和临床诊断结果完全一致。临床检测表明本试剂的性能和现有诊断手段相比无显著性差异，适合用于临床检测。
Claims (1)
1.一种使用拭子采集体液检测甲型肝炎的检测试剂盒，其特征在于塑料支撑板(7)一端连接上样垫(1)，上样垫(1)的一端紧密压接含有标记甲型肝炎病毒特异性的抗原的胶体金垫(2)，胶体金垫(2)一端紧密压接硝酸纤维素膜(3)，硝酸纤维素膜包被有相互分离的检测线T线(5)和质控C线(6)，检测线T(5)为包被在硝酸纤维素膜上的抗人IgG抗体，质控(C)线(6)为包被在硝酸纤维素膜上的甲型肝炎病毒特异性抗原VP1的抗体，硝酸纤维素膜的另一端连接吸样垫(4)形成试纸。
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2012
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