EB病毒EA-IgG、VCA-IgA抗体联检免疫层析试剂盒
技术领域
本实用新型涉及生物技术领域,尤其是涉及一种EB病毒EA-IgG、VCA-IgA抗体免疫层析联检试剂盒。
背景技术
鼻咽癌(NPC)是上皮细胞来源地恶性肿瘤,在世界各地广泛存在。在我国南方,特别是珠江三角洲及香港地区,是世界上鼻咽癌的高发区。我国约有80%以上的健康成人是EB病毒携带者。在东南亚和北非也有较高的发病率。早期鼻咽癌放疗后5年生存率可达80-90%,而晚期鼻咽癌的生存率仅为20%。因此加强鼻咽癌的二级预防,即早发现、早诊断和早治疗是提高鼻咽癌患者存活率的关键。
鼻咽癌的发生与EB病毒(Epstein-Barr,EBV)感染密切相关,通过检测EBV的抗体早期诊断NPC是提高NPC患者存活率的一个重要手段。
研究表明,鼻咽癌病人在临床症状出现平均前三年时,就可观察到其血清中多种抗EB病毒抗原抗体的含量显著升高,因而目前临床上筛查鼻咽癌患者最常用的手段即免疫血清学检测EB病毒感染。其中临床上普遍使用的检测指标有EA-IgG、VCA-IgA等。由于不同鼻咽癌病人的抗体谱不完全相同,因此多种抗原抗体的联合检测可进一步提高其诊断性能。有实验表明,多种抗体联检的敏感度和特异性均较抗体单检有所提高,而且可以用于鼻咽癌高发区健康人群筛查的风险评估。
目前在临床上应用的对血清EB病毒抗体的检测方法常为免疫荧光法和免疫酶标法。免疫荧光法检测EB抗体虽灵敏度和特异性较好,但是其结果判断带有主观性,不易标准化。ELISA与荧光法比较更快速方便,且易于标准化,但是耗时较长。
如何高效快速的对多种EB病毒的抗体进行检测,是目前研究的一个热点。胶体金免疫层析法在ELISA基础上应运而生,其原理是以硝酸纤维素膜为载体,利用毛细管作用及吸水作用,使抗原和抗体的反应在一个特殊的层析装置上,以标本通过层析方式在膜上前进的方式快速的完成检测过程。此方法检测抗体简单快速,不需其他仪器设备,几分钟即可用肉眼观察检测结果,目前已在临床检测中取得了广泛的应用,且在整个免疫学检测范围内也有广泛的应用。采用胶体金免疫层析技术联合检测EB病毒EA-IgG、VCA-IgA抗体,虽在临床上有很高的实用检测意义,但目前尚未有将胶体金免疫层析技术应用于EB病毒抗体的联合检测。
发明内容
本实用新型的目的在于提供一种EB病毒EA-IgG、VCA-IgA抗体联检免疫层析试剂盒。
为实现上述目的,本发明可采取下述技术方案:
本实用新型所述的EB病毒EA-IgG、VCA-IgA抗体免疫层析联检试剂盒,包括联检反应试纸条,所述试纸条包括PVC基板,贴覆在PVC基板中部的硝酸纤维素膜,以及划于硝酸纤维素膜上的包被有EB病毒的EA纯化抗原蛋白、VCA纯化抗原蛋白和质控物羊抗鼠IgG抗体的点样线,在所述硝酸纤维素膜(2)下端粘贴有胶体金垫,胶体金垫下端粘贴有样品垫;在所述PVC基板的吸水端粘贴有棉浆板.
将试纸条置于带有卡盖的卡体内,在所述卡盖上对应于点样线的位置处开设有观察窗口,对应于棉浆板位置处开设有加样孔,就变成了卡式试剂盒。
卡式试剂盒的卡体可以为条形卡体、方形卡体或扇形卡体。
当为条形卡体时,包被有EB病毒的EA纯化抗原蛋白、VCA纯化抗原蛋白和质控物羊抗鼠I gG抗体的三条平行点样线位于同一硝酸纤维素膜上。
当为方形卡体或扇形卡体时,包被有EB病毒的EA纯化抗原蛋白、VCA纯化抗原蛋白点样线分别与质控物羊抗鼠IgG抗体的点样线组合,在两个硝酸纤维素膜上划平行线。
本实用新型中的试剂盒利用了胶体金免疫层析的原理,使EA病毒的两种抗原、抗体在同一层析装置(硝酸纤维素膜)上进行反应,并通过肉眼观查各条线的显色情况,从而对EA病毒的EA-IgG、VCA-IgA抗体进行检测。
本实用新型所述的试剂盒同ELISA试剂盒相比,其优点在于:
1、同时检测多种抗体:EB病毒两种抗体的联合检测提高了检测的灵敏度和特异性,对鼻咽癌的诊断有很好的临床意义。
2、反应时间短:整个实验可在3-5分钟内即可完成,适合大规模的快速血检。该试剂盒仅有两步检测步骤,但敏感度却与需1-2小时完成的ELISA接近。
3、检测过程中不需其他仪器设备,因此检测结果也不受仪器的影响,同时不受反应环境的影响,加入胶体金标记物即可显色,操作简便。
本实用新型试剂盒与传统胶体金试剂盒相比,其优点在于:
1、同时检测EB病毒的两种抗原,灵敏度和特异性均较单检高。
2、外形多变且美观,使用方便,适合家庭自助检测,有利于鼻咽癌病症的早发现和早诊断。
本实用新型中试剂盒利用胶体金免疫层析技术的原理,在同一装置上实现了对两种EB病毒抗体的同时检测,操作简便、迅速、准确,可适用于大规模血液检查,更有利于鼻咽癌患者的早期发现和诊断。
附图说明
图1是本实用新型条式试剂盒的结构示意图。
图2、图3、图4是本实用新型卡式试剂盒的结构示意图。
具体实施方式
实施例1:
如图1所示,本实用新型EB病毒EA-IgG、VCA-IgA抗体免疫层析联检试剂盒,包括联检反应试纸条,所述试纸条包括PVC基板1,贴覆在PVC基板1中部的硝酸纤维素膜2,以及划于硝酸纤维素膜上的包被有EB病毒的EA纯化抗原蛋白、VCA纯化抗原蛋白和质控物羊抗鼠IgG抗体的点样线3,在所述硝酸纤维素膜(2)下端粘贴有胶体金垫,胶体金垫下端粘贴有样品垫;在所述PVC基板1的吸水端粘贴有棉浆板,在其上、下端贴色标膜和Mark线;使用时,将试纸条标志线一端插入待检标本中(浸入时标本液面不要超过箭头指示线);20min后肉眼观察结果,质控线无论EB病毒抗体阳性或阴性均显色,若质控线不显色说明本检测试纸失效;观察相应检测线位置有无红色线条,检测线呈红色或浅红色证明EB病毒抗体在体内呈阳性,检测线不显色判为阴性.
实施例2:
本实用新型EB病毒EA-IgG、VCA-IgA抗体免疫层析联检试剂盒,包括置于卡体内的试纸条,所述试纸条包括PVC基板1,贴覆在PVC基板1中部的硝酸纤维素膜2,以及划于硝酸纤维素膜上的包被有EB病毒的EA纯化抗原蛋白、VCA纯化抗原蛋白和质控物羊抗鼠IgG抗体的点样线3,在所述硝酸纤维素膜(2)下端粘贴有胶体金垫,胶体金垫下端粘贴有样品垫;在所述PVC基板1的吸水端粘贴有棉浆板;在所述卡体的卡盖4上对应于点样线3的位置处开设有观察窗口5,对应于棉浆板位置处开设有加样孔6,根据实际情况,所述卡体可以为条形、方形、扇形或其他几何形状。
当为条形卡体时,如图2所示,包被有EB病毒的EA纯化抗原蛋白、VCA纯化抗原蛋白和质控物羊抗鼠IgG抗体的三条平行点样线位于同一硝酸纤维素膜上。
当为方形卡体或扇形卡体时,如图3、4所示,包被有EB病毒的EA纯化抗原蛋白、VCA纯化抗原蛋白点样线分别与质控物羊抗鼠IgG抗体的点样线组合,在两个硝酸纤维素膜上划平行线。
使用时,取出试剂盒,平放于操作台上,用一次性塑料滴管在加样端加入待测标本(血清、血浆或全血)80μl;20min后肉眼观察结果,质控线无论EB病毒抗体阳性或阴性均显色,若质控线不显色说明本检测试纸失效;观察相应检测线位置有无红色线条,检测线呈红色或浅红色证明EB病毒抗体在体内呈阳性,检测线不显色判为阴性。