CN1978639A - 固定化菌体的制备方法及其应用 - Google Patents
固定化菌体的制备方法及其应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN1978639A CN1978639A CNA200510122787XA CN200510122787A CN1978639A CN 1978639 A CN1978639 A CN 1978639A CN A200510122787X A CNA200510122787X A CN A200510122787XA CN 200510122787 A CN200510122787 A CN 200510122787A CN 1978639 A CN1978639 A CN 1978639A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- preparation
- immobilized thallus
- water
- immobilized
- cavernous body
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Images
Classifications
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02W—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES RELATED TO WASTEWATER TREATMENT OR WASTE MANAGEMENT
- Y02W10/00—Technologies for wastewater treatment
- Y02W10/30—Wastewater or sewage treatment systems using renewable energies
- Y02W10/37—Wastewater or sewage treatment systems using renewable energies using solar energy
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
本发明公开了一种固定化菌体的制备方法。其步骤为:丝瓜海绵体的制备,即成熟丝瓜晒干后除去外皮得到丝瓜海绵体纤维,然后将其剪成圆盘,放入沸水中煮后,洗净、在蒸馏水中浸泡,将充分浸泡的海绵体圆盘干燥;孢子的制备,将木霉接种到斜面培养基上,在20~40℃培养3~5天,形成孢子备用;菌悬液的制备,将孢子用生理盐水配制成菌悬液;菌体的固定化,将菌悬液接种于装有利于菌丝体萌发的培养基和海绵体圆盘的锥形瓶中,20~30℃下100~200rpm培养2~3天得到固定化菌体。本发明的优点为:丝瓜海绵体孔隙率高,菌丝体固定其上不产生致密缠绕,能高效吸附废水中重金属;丝瓜海绵体是一种天然多孔状纤维,不含有害物质,不会对水体造成二次污染。
Description
一技术领域
本发明涉及重金属废水生物修复技术,特别是一种固定化菌体的制备方法及其应用。
二背景技术
传统的处理重金属的物理化学方法很多,如化学沉淀法、离子交换法、电解法、反渗透法、萃取法、活性炭吸附法、膜分离法等。它们各有优点,但不同程度地存在着投资大、能耗高、操作困难、易产生二次污染等缺点,特别是在处理低含量重金属污染时,其操作费用和原材料成本相对过高。随着生物技术的发展,20世纪80年代以来重金属废水的微生物去除研究受到越来越多的关注。由于生物吸附剂具有制作简单、可利用廉价的营养基质进行大量的生产、吸附量大、处理费用低、对环境友好、效率高等优点,越来越受到人们的广泛关注。其中选择高效的生物吸附剂是微生物修复重金属废水的关键。
然而吸附了大量金属的游离菌体很难从水溶液中分离出来,在实际应用中受到限制。而固定化菌体则将微生物固定在固体多孔状结构的材料上,使之具有适合在反应器中使用的一定直径、机械强度和必要的孔隙率,像离子交换树脂和活性炭一样可以重复使用。生物固定化材料在吸附和解吸的过程中重复使用可以极大的提高生物技术应用的经济价值。常用的固定化技术主要有吸附、包埋、交联等;固定剂有硅胶、戊二醛、明胶等。通常这类材料固定化后会使菌株的活性降低20~30%,且固定化成本高、工艺复杂。
三发明内容
本发明的目的在于提供一种能高效吸附废水中重金属的固定化菌体的制备方法。
实现本发明目的的技术解决方案:一种固定化菌体的制备方法,包括以下步骤:
1.1丝瓜海绵体的制备,即成熟丝瓜晒干后除去外皮得到丝瓜海绵体纤维,然后将丝瓜海绵体纤维剪成圆盘,放入沸水中煮后,洗净、在蒸馏水中浸泡,将充分浸泡的海绵体圆盘干燥,并保存在干燥器中;
1.2孢子的制备,将木霉接种到斜面培养基上,在20~40℃培养3~5天,形成孢子备用;
1.3菌悬液的制备,将孢子用尘理盐水配制成菌悬液;
1.4菌体的固定化,将菌悬液接种于锥形瓶中,锥形瓶中装有利于菌丝体萌发的培养基和1.1步骤制备的海绵体圆盘,20~30℃下100~200rpm培养2~3天得到固定化菌体。
本发明固定化菌体的制备方法中,将木霉接种到斜面培养基后,在28~30℃下培养。
本发明固定化菌体的制备方法中,木霉为绿色木霉。
本发明固定化菌体的制备方法中,斜面培养基为马铃薯培养基。
本发明固定化菌体的制备方法中,利于菌丝体萌发的培养基为:葡萄糖5~15g,Na2HPO40.5~5g,KaH2PO40.1~2g,MgSO4·7H2O0.1~0.5g,CaCl2·2H2O0.1~0.5g,加水至1000mL,pH自然,灭菌。
按上述方法制备的固定化菌体的应用,固定化菌体去除废水中的重金属。
本发明与现有技术相比,其显著优点是:(1)丝瓜海绵体孔隙率高、表面积大,菌丝体固定其上不产生致密缠绕,因而体系不存在扩散的限制,不会造成固定化后菌体吸附重金属离子活性的大幅度下降,因此能高效吸附废水中的重金属;(2)丝瓜海绵体是一种天然多孔状纤维,不含有害物质,不会对水体造成二次污染;(3)选用丝瓜海绵体作为菌体固定化载体,原料来源丰富,容易加工,价格低廉,固定化工艺简单。
四附图说明
附图是本发明去除废水中重金属的固定化菌体的制备方法的流程图。
五具体实施方式
下面结合附图对本发明作进一步详细描述。
结合附图,本发明固定化菌体的制备方法,包括以下步骤:
(1)丝瓜海绵体制备:将成熟丝瓜晒干后除去外皮部分,即可得到丝瓜海绵体。然后将海绵体纤维剪成直径大约为2.5cm的圆盘,2~3mm厚,在沸水中煮30min,自来水冲干净后,在蒸馏水中浸泡24h,换蒸馏水3~4次。将充分浸泡的海绵体圆盘于70℃烘干,并保存于干燥器中。
(2)斜面培养:将绿色木霉接种到斜面培养基上,在28~30℃培养3~5天,待孢子形成备用。其中,斜面培养基为马铃薯培养基,用常规方法制备马铃薯培养基,即马铃薯去皮,切成小块,煮沸30min,然后用纱布过滤,在上清液中加20g蔗糖,加15g琼脂,加水至1000mL,pH自然,121℃下灭菌30min。
(3)菌悬液的制备:将孢子用生理盐水(蒸馏水或去离子水)配成孢子浓度约为106个/mL的菌悬液;
(4)菌体的固定化:菌悬液(5mL)接种于250mL的锥形瓶,锥形瓶中装有100mL利于菌丝体萌发的培养基和(1)步骤制备的4个预称重的海绵体圆盘。其中海绵体圆盘作为固定化的载体。接种后30℃,150rpm培养72h得到固定化菌体。收获菌体或圆盘后用蒸馏水洗涤两次,4℃保藏。将菌丝体生长后的海绵体圆盘于70℃烘干8h后称重,减去丝瓜海绵体圆盘的重量,即为固定化的菌体干重。其中,利于菌丝体萌发的培养基的制备(单位:g/L),即葡萄糖10,Na2HPO40.25,KaH2PO40.2,MgSO4·7H2O0.5,CaCl2·2H2O0.1,加水至1000mL,pH自然,115℃灭菌30min。
将制备的上述固定化菌体用于重金属吸附:取一个固定化圆盘接种于250mL的锥形瓶(含100mL生长培养基,培养基组成同上)中,添加重金属离子Pb2+、Cu2+、Zn2+、Ni2+使浓度达100mg/L,30℃、150rpm,振荡吸附6h,去除废水中的重金属;测定吸附后重金属离子浓度,得到吸附量分别为743、187、358、134mg/g。连续流反应器处理分别含100mg/L的Pb2+、Cu2+、Zn2+、Ni2+废水:反应器外径30mm,内径26mm,填料高度为60mm,有效容积31.83cm3,孔隙体积13.26cm3。其中,待处理废水为人工配制废水,水质特征如下(g/L):KH2PO41.0,Na2HPO40.50,MgSO4·7H2O0.01,CaCl20.002,Na2SO40.01,NaNO30.01,pH5.5~6.0。进水方式为升流式,流速约为3.2ml/h,运行1天后采样。运行温度为25℃左右。反应器运行16天,每隔24h采水样5mL,测定Pb2+、Cu2+、Zn2+、Ni2+浓度。
Claims (7)
1、一种固定化菌体的制备方法,其特征在于包括以下步骤:
1.1丝瓜海绵体的制备,即成熟丝瓜晒干后除去外皮得到丝瓜海绵体纤维,然后将丝瓜海绵体纤维剪成圆盘,放入沸水中煮后,洗净、在蒸馏水中浸泡,将充分浸泡的海绵体圆盘干燥,并保存在干燥器中;
1.2孢子的制备,将木霉接种到斜面培养基上,在20~40℃培养3~5天,形成孢子备用;
1.3菌悬液的制备,将孢子用生理盐水配制成菌悬液;
1.4菌体的固定化,将菌悬液接种于锥形瓶中,锥形瓶中装有利于菌丝体萌发的培养基和1.1步骤制备的海绵体圆盘,20~30℃下100~200rpm培养2~3天得到固定化菌体。
2、根据权利要求1所述的固定化菌体的制备方法,其特征在于将木霉接种到斜面培养基后,在28~30℃下培养。
3、根据权利要求1或2所述的固定化菌体的制备方法,其特征在于木霉为绿色木霉。
4、根据权利要求1所述的固定化菌体的制备方法,其特征在于斜面培养基为马铃薯培养基。
5、根据权利要求1所述的固定化菌体的制备方法,其特征在于利于菌丝体萌发的培养基为:葡萄糖5~15g,Na2HPO40.5~5g,KaH2PO40.1~2g,MgSO4·7H2O0.1~0.5g,CaCl2·2H2O0.1~0.5g,加水至1000mL,pH自然,灭菌。
6、一种固定化菌体的应用,其特征在于固定化菌体去除废水中的重金属。
7、根据权利要求6所述的固定化菌体的应用,其特征在于固定化菌体吸附废水中的重金属离子pb2+、Cu2+、Zn2+、Ni2+。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CNA200510122787XA CN1978639A (zh) | 2005-12-02 | 2005-12-02 | 固定化菌体的制备方法及其应用 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CNA200510122787XA CN1978639A (zh) | 2005-12-02 | 2005-12-02 | 固定化菌体的制备方法及其应用 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN1978639A true CN1978639A (zh) | 2007-06-13 |
Family
ID=38129946
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CNA200510122787XA Pending CN1978639A (zh) | 2005-12-02 | 2005-12-02 | 固定化菌体的制备方法及其应用 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN1978639A (zh) |
Cited By (10)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN103058388A (zh) * | 2012-12-28 | 2013-04-24 | 武汉工业学院 | 一种丝瓜络固载光合细菌或复合微生物治理湖泊蓝藻的方法 |
CN103131688A (zh) * | 2013-01-05 | 2013-06-05 | 武汉工业学院 | 一种附载光合细菌的玉米芯和/或秸秆的制备方法及其应用 |
CN103949224A (zh) * | 2014-04-24 | 2014-07-30 | 东华理工大学 | 一种处理含铀废水的黄绿木霉颗粒吸附剂及其制备与应用 |
CN104098189A (zh) * | 2014-07-02 | 2014-10-15 | 西南科技大学 | 一种培养紫纹羽卷担菌菌皮去除水体中重金属的方法 |
CN104556407A (zh) * | 2014-12-31 | 2015-04-29 | 深圳市鸿鹄科技发展有限公司 | 剑麻丝固载微生物治理污水的方法 |
CN105585132A (zh) * | 2016-03-11 | 2016-05-18 | 中国科学院水生生物研究所 | 巢式固定好氧反硝化菌耦合沉水植物在湖泊修复中的应用及装置 |
CN105695518A (zh) * | 2016-04-21 | 2016-06-22 | 贵州大学 | 一种固定化菌体生物法转化单宁酸重复制备没食子酸的方法 |
CN106345417A (zh) * | 2016-11-03 | 2017-01-25 | 张静 | 一种用于去除废水重金属铅吸附材料的制备方法 |
CN108529760A (zh) * | 2018-04-26 | 2018-09-14 | 东北农业大学 | 易降解有机废水与重金属污染废水耦合的微生物修复方法 |
CN112868801A (zh) * | 2021-01-29 | 2021-06-01 | 陕西科技大学 | 一种多菌群益生菌奶粉及其生产方法 |
-
2005
- 2005-12-02 CN CNA200510122787XA patent/CN1978639A/zh active Pending
Cited By (14)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN103058388A (zh) * | 2012-12-28 | 2013-04-24 | 武汉工业学院 | 一种丝瓜络固载光合细菌或复合微生物治理湖泊蓝藻的方法 |
CN103058388B (zh) * | 2012-12-28 | 2014-12-17 | 武汉工业学院 | 一种丝瓜络固载光合细菌或复合微生物治理湖泊蓝藻的方法 |
CN103131688A (zh) * | 2013-01-05 | 2013-06-05 | 武汉工业学院 | 一种附载光合细菌的玉米芯和/或秸秆的制备方法及其应用 |
CN103131688B (zh) * | 2013-01-05 | 2015-04-01 | 武汉工业学院 | 一种附载光合细菌的玉米芯和/或秸秆的制备方法及其应用 |
CN103949224A (zh) * | 2014-04-24 | 2014-07-30 | 东华理工大学 | 一种处理含铀废水的黄绿木霉颗粒吸附剂及其制备与应用 |
CN104098189A (zh) * | 2014-07-02 | 2014-10-15 | 西南科技大学 | 一种培养紫纹羽卷担菌菌皮去除水体中重金属的方法 |
CN104556407A (zh) * | 2014-12-31 | 2015-04-29 | 深圳市鸿鹄科技发展有限公司 | 剑麻丝固载微生物治理污水的方法 |
CN105585132A (zh) * | 2016-03-11 | 2016-05-18 | 中国科学院水生生物研究所 | 巢式固定好氧反硝化菌耦合沉水植物在湖泊修复中的应用及装置 |
CN105585132B (zh) * | 2016-03-11 | 2018-06-22 | 中国科学院水生生物研究所 | 巢式固定好氧反硝化菌耦合沉水植物在湖泊修复中的应用及装置 |
CN105695518A (zh) * | 2016-04-21 | 2016-06-22 | 贵州大学 | 一种固定化菌体生物法转化单宁酸重复制备没食子酸的方法 |
CN106345417A (zh) * | 2016-11-03 | 2017-01-25 | 张静 | 一种用于去除废水重金属铅吸附材料的制备方法 |
CN108529760A (zh) * | 2018-04-26 | 2018-09-14 | 东北农业大学 | 易降解有机废水与重金属污染废水耦合的微生物修复方法 |
CN108529760B (zh) * | 2018-04-26 | 2022-03-04 | 东北农业大学 | 易降解有机废水与重金属污染废水耦合的微生物修复方法 |
CN112868801A (zh) * | 2021-01-29 | 2021-06-01 | 陕西科技大学 | 一种多菌群益生菌奶粉及其生产方法 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN1978639A (zh) | 固定化菌体的制备方法及其应用 | |
Chen et al. | Fixed-bed biosorption of cadmium using immobilized Scenedesmus obliquus CNW-N cells on loofa (Luffa cylindrica) sponge | |
CN102757951B (zh) | 一种海洋双菌共固定化体系的构建和造纸废水处理的方法 | |
CN103436518B (zh) | 一种固定化藻毒素降解菌的制备方法及其应用 | |
CN108546649B (zh) | 能去除高重金属含量水体中的重金属的小球藻w2及应用 | |
CN110172456A (zh) | 一种具有溶藻、降解藻毒素及除氮磷作用的生物材料及其制备方法和应用 | |
WO2019137122A1 (zh) | 一株富集镉促生长的杂交狼尾草内生巨大芽胞杆菌bm18-2及其应用 | |
CN100580078C (zh) | 环状芽孢杆菌wz-12及其在微生物分解处理二氯甲烷中的应用 | |
Wang et al. | Low-temperature straw biochar: Sustainable approach for sustaining higher survival of B. megaterium and managing phosphorus deficiency in the soil | |
CN1982447B (zh) | 一种以蛭石为载体的真菌和细菌联合固定化方法 | |
CN102168038B (zh) | 能够降解二噁烷的黄色杆菌d7及其应用 | |
CN110745957A (zh) | 一种强化amf净化重金属废水的垂直流人工湿地系统 | |
Xiao et al. | Fast-growing cyanobacteria bio-embedded into bacterial cellulose for toxic metal bioremediation | |
CN110117545B (zh) | 一种具有Cr(VI)耐性及还原能力的外生菌根真菌及其应用 | |
CN113862191A (zh) | 一种利用改性生物炭固定化四环素降解菌去除水中四环素的方法 | |
CN107030104A (zh) | 一种利用绿木霉和碱蓬联合修复重金属污染土壤的方法 | |
CN101760455B (zh) | 以芦苇地表根须为载体的石油降解菌固定化方法 | |
CN108543526B (zh) | 一种污水治理用的生态基及其制备方法 | |
CN110814019A (zh) | 一种利用螯合剂edta强化芦苇修复铜污染的方法 | |
CN110026060A (zh) | 一种降解甲醛的生物材料及其制作和使用方法 | |
CN113044990B (zh) | 一种污水处理用生物膜的制备方法 | |
CN112391375B (zh) | 快速去除水体中硝酸盐的生物炭固定化反硝化菌的制备方法及应用 | |
Sati et al. | Diversity of aquatic hyphomycetes as root endophytes on pteridophytic plants in Kumaun Himalaya | |
CN102676403B (zh) | 一种具有诱导抗性的木霉菌株及其应用 | |
CN104388417A (zh) | 一种硅化固定化菌剂及其制备方法和应用 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C02 | Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001) | ||
WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |