CN1965897B - 抗肝纤维化的中药组合物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

抗肝纤维化的中药组合物，原料组成是：蚂蚁500g～560g；丹参160g～200g；苦参320g～360g；黄芪240g～280g；土鳖虫160g～200g；或同比例扩大或缩小。优化方案的蚂蚁和土鳖虫采用其水匀浆法提取物：粉碎加水浸泡，搅拌至匀浆，恒温搅拌，离心，离心液先后经1μm孔径膜、0.2μm孔径膜滤过除菌，除菌滤液再经超滤器截留分子段3000-20000，超滤浓缩，干燥成粉；丹参、苦参和黄芪用乙醇回流提取，浓缩干燥成粉；或用乙醇分次沉淀法提取，干燥成粉。本发明既有滋补肝肾、益气养血之长，又有活血祛瘀、清热解毒之妙，完全针对病毒性肝纤维化的病机特点，对肝纤维化的治疗具有广阔的应用前景。

Description

抗肝纤维化的中药组合物及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种抗肝纤维化的中药组合物，以及这种中药组合物的制备方法。

背景技术

肝纤维化是各种慢性肝损伤(病毒、酒精、寄生虫感染、代谢性疾病等)共有的组织变化，是慢性肝病向肝硬化发展的必经之路。其中肝纤维化一般为乙型肝炎病毒(HBV)、丙型肝炎病毒(HCV)、丁型肝炎病毒(HDV)引起，尤以乙型肝炎病毒为主。我国系乙肝病毒感染高发区，成人乙肝病毒感染率为42.4％～80.77％，乙肝表面抗原(HBsAg)携带者为10.7％。国外报道，约5％～10％急性乙型肝炎发展为慢性肝炎，国内报道则高达24％～50％，而慢性肝炎罹患率每年都在100～200/10万人口以上，已占疾病死亡率的第六位。其流行范围之广，对人体健康损害程度之重，已引起世界各国卫生组织的高度重视。

自1963年Blumberg发现“澳抗”以来，肝炎病毒感染者和发病人数逐年增多，70年代末调查我国HBsAg携带者为10％，患者2800万，其中60％以上为慢性肝炎。90年代中期调查HBsAg的携带率仍高达9.87％，在这众多携带者中，又有大批感染者发展成慢性肝炎。加之，随着分子生物学技术的发展及对病毒性肝炎研究的深入，不断有新嗜肝病毒被发现，如丙型肝炎病毒感染，在我国约占3％～5％，且极易慢性化。肝纤维化是多种慢性肝脏疾病发展至肝硬化的必经阶段。是肝脏受到慢性损伤时，肝脏细胞外基质分泌与降解失衡，从而在肝细胞间隙可逆性沉积的结果。在西方国家，酒精性肝损害是造成肝纤维化的主要原因，而在东南亚和我国则以肝炎病毒尤其是乙型肝炎病毒的持续感染引起为主。

大量的有关临床研究已证实，肝纤维化、肝硬化、肝癌的发生率与慢性乙型肝炎、HBsAg携带者的发生率呈明显平行关系。据文献报道，80％肝癌由慢性乙型肝炎肝纤维化演变而来。因此，阻止肝纤维化的形成，对防治肝硬化具有十分重要的意义。对慢性肝炎肝纤维化的治疗，目前国内外仍无理想的治疗药物。根据报道的秋水仙碱等药物虽可抑制肝纤维化，但毒副作用较大，从而限制了其在临床上的广泛应用。近年来，广泛开展了中药抗肝纤维化的临床与实验研究工作，为临床治疗积累了许多宝贵经验。初步研究结果表明，中药抗肝纤维化具有广阔的前景，令人鼓舞。因此，积极寻求治疗肝炎性肝纤维化的有效中药制剂，阻止或逆转肝纤维化的病情进展，一直是当前卫生工作的重要课题之一。

祖国医学虽没有肝纤维化、肝硬化等病名，但根据其临床表现特征，基本可归属于中医“胁痛”、“黄疸”、“积聚”、“癥瘕”等病证的范畴。祖国医学对本病的认识具有十分悠久的历史，历代医家对本病的临床表现、病因、病机、治疗等方面的论述十分丰富，积累了极为宝贵的临床经验，至今仍具有重要的临床指导价值。

目前，抗纤维化的治疗主要包括两个方面的内容：一是针对原发病的病因治疗，如抗肝炎病毒、抗血吸虫病、戒酒、祛铁和祛铜等；二是针对抗肝纤维化本身的治疗，如抑制肝星状细胞(HSC)的激活、抑制胶原的增生、促进胶原的降解等。目前多数治疗仍处于实验研究阶段。生物制剂和化学药品已有产品。

1.干扰素：在动物模型中γ-干扰素能抑制星状细胞的激活、增殖及细胞外基质的表达，有临床报道，小剂量应用副作用轻微，治疗肝纤维化有一定效果.α-干扰素能对抗实验性肝纤维化，临床随访研究表明在产生持续病毒学应答的丙型肝炎患者中其肝组织纤维化可以减轻.

2.拉米夫定：拉米夫定能有效抑制HBVDNA的复制并在部分患者获得HBeAg/antiHBe的血清转换。治疗1年后肝组织纤维化有不同程度的减轻或延缓其进程，若治疗更长时间甚至可使已形成的肝硬化也可逆转。但是，YMDD变异及其所致的耐药性限制了它的长期应用，而停药后其对纤维化的疗效能持续多久尚需进一步研究。

3.秋水仙碱：能抑制微管蛋白聚合从而干扰细胞的胶原分泌。实验研究发现，它能刺激胶原酶的活性、增强胶原的降解，还能抑制巨噬细胞释放单核细胞因子等生长因子、减少白细胞介素I的分泌。有报道秋水仙碱治疗组肝硬化患者中存活时间、10年累积生存率均显著高于安慰剂对照组，而且肝组织学也有好转。后来临床试验及荟萃分析未能证明其疗效。

4.水飞蓟素：能活化肝细胞RNA聚合酶II，恢复ATP酶活性及谷胱甘肽含量，并能预防氧化应激所致的细胞膜损伤。有人用胆管堵塞性大鼠肝纤维化模型研究发现，水飞蓟素可以使肝脏胶原总量降低35％，同时明显抑制肝脏I型胶原、TIMP1及TGFβ1的mRNA水平，但有关其临床疗效报道不一。

总的来说，目前还没有有效的抗纤维化药物，其研究结果仍主要限于培养细胞和动物试验研究，临床研究资料还比较少。而近年来，抗肝纤维化的中医药研究一直比较活跃，已证实丹参、黄芪、柴胡、桃仁、当归、冬虫夏草、齐墩果酸、水飞蓟素、葫芦素B等有确切的抗肝纤维化作用。而根据中医理论、临床经验或动物实验研究结果拟定的抗肝纤维化中药方剂，如复方861合剂、319方及鳖甲软肝片等据报道均取得了较好的效果，但这些复方制剂大多数都没有进入中药新药研发程序，从而直接限制了其在临床上的推广应用。近年日本学者发现小柴胡汤能降低肝纤维化大鼠肝脏羟脯氨酸含量，抑制HSC的增殖、降低I型胶原mRNA的表达。其作用机理可能为，通过抗脂质过氧化抑制HSC的激活，抑制其表达SMA及I型胶原mRNA。另外，有关实验研究还证实大黄蟅虫丸可减少肝胶原蛋白的含量，减轻肝纤维组织的增生，具有抗肝纤维化作用，尤其对纤维组织的降解作用趋势较好，其疗效优于秋水仙碱对照组。因肝纤维化的发生主要与瘀血阻滞有关，而小柴胡汤活血化瘀力量不强，所以该制剂至今在临床上仍很少被用于本病的治疗。大黄蟅虫丸虽有较强的活血化瘀作用，但方中组成大多数为虫类破血药物，力量较为峻猛，同时抗病毒力量不强，所以对病毒性肝纤维化的治疗疗效有限。

发明内容

本发明将提供一种抗肝纤维化的中药组合物，以及这种中药组合物的制备方法。

抗肝纤维化的中药组合物，其原料组成是：

蚂蚁500g～560g    丹参160g～200g    苦参320g～360g

黄芪240g～280g    土鳖虫160g～200g；

以上原料或同比例扩大或缩小，可以制成胶囊或其他所有口服剂型。

以上方案的优化比例为：

蚂蚁530g  丹参180g    苦参340g

黄芪260g  土鳖虫180g；

(或同比例扩大或缩小)。

进一步优化，所述的抗肝纤维化的中药组合物中的各组分分别是：

所述的蚂蚁和土鳖虫采用其水匀浆法提取物：所述的蚂蚁和土鳖虫粉碎，加水浸泡，搅拌至匀浆，37℃恒温搅拌，离心，取离心液先后经1μm孔径膜、0.2μm孔径膜滤过除菌，除菌滤液再经超滤器(截留分子段3000-20000)，超滤浓缩，浓缩液冷冻干燥成粉；

所述的丹参、苦参和黄芪，用乙醇回流提取，减压回收乙醇至相对密度1.3(50℃测定)，浓缩液减压干燥成粉；或用乙醇分次沉淀法提取(乙醇浓度从50％～85％)，干燥成粉；

然后加入辅料。例如按制药的常规要求加入适量淀粉和硬脂酸镁。

上述抗肝纤维化的中药组合物的制备方法是：

取原料，

蚂蚁500g～560g    丹参160g～200g  苦参320g～360g

黄芪240g～280g    土鳖虫160g～200g(或同比例扩大或缩小)；

所述的蚂蚁和土鳖虫粉碎，加水浸泡，搅拌至匀浆，37℃恒温搅拌，离心，取离心液先后经1μm孔径膜、0.2μm孔径膜滤过除菌，除菌滤液再经超滤器(截留分子段3000-20000)，超滤浓缩，浓缩液冷冻干燥成粉；

所述的丹参、苦参和黄芪，用乙醇回流提取，减压回收乙醇至相对密度1.3(50℃测定)，浓缩液减压干燥成粉；或用乙醇分次沉淀法提取，干燥成粉；

然后加入辅料；

共制成1000粒胶囊或其他口服剂型，(例如：0.3g/粒)。

更优化和更具体的说，本发明抗肝纤维化的中药组合物制备方法的具体步骤是，

取原料：蚂蚁530g、丹参180g、苦参340g、黄芪260g、土鳖虫180g；

其中的蚂蚁、土鳖虫，粉碎成粗粉，加6～12倍量水(可以含少量防腐剂，例如0.1％左右苯甲酸钠或山梨醇)浸泡，搅拌至匀浆，取匀浆液置恒温水浴(35～37℃)、搅拌(80～150转/分)8～16小时，离心，弃去沉淀，取离心液先经1μm孔径膜预滤，滤液经0.2μm孔径膜滤过除菌，除菌滤液再经超滤器(截留分子段6000-10000)，超滤浓缩约呈1∶0.5～1.5(即药材与药液体积比)，浓缩液冷冻干燥成粉，备用。取丹参、苦参、黄芪，用7～9倍量60～80％乙醇回流提取2～3次，每次1.5～2小时合并回流液，减压回收乙醇至相对密度1.2～1.3(50℃测定)，干燥成粉(浓缩液减压干燥或喷雾干燥)；或对丹参、苦参和黄芪分别用30％、50％、80％的乙醇分次沉淀，分离、合并各次的沉淀，干燥成粉；加入适量淀粉混匀，制粒，干燥，再加入冷冻干燥粉和3g硬脂酸镁，混匀，灌装胶囊。共制成1000粒胶囊，(0.3g/粒)。

本发明的抗肝纤维化的中药组合物在药物试验中称为“抗肝纤胶囊”

上述抗肝纤胶囊的制备工艺是根据药物性质、临床、生产等多方面的因素，经反复实验研究、分析、比较而确定的。

根据文献，对处方中所用的各药材的有效成分及溶解性能进行了分析.并以总提取物、苦参碱和氧化苦参碱的总含量为考核指标，比较了水煎煮、醇回流、醇渗漉三种提取方法.实验结果表明：水煎煮法总提取物较高，但苦参碱和氧化苦参碱总含量均低于醇回流法和醇渗漉法.故选择以醇为制备工艺的基本溶媒；醇回流法与醇渗漉法相比较，苦参碱和氧化苦参碱总含量相近，但总提取物高于醇渗漉法，故确定醇回流法为处方中丹参、苦参、黄芪的制备工艺路线.

在蚂蚁、土鳖虫制备工艺的考察中，以总提取物及平皿法抗凝纤溶的溶圈面积为考核指标。比较了水煎煮法、醇回流法和水匀浆法三种提取方法，最后确定以水匀浆法为蚂蚁、土鳖虫的制备工艺路线。

处方中蚂蚁为君药，对疗效的充分发挥有至关重要的作用。根据文献报道，蚂蚁具滋补肝肾、强筋健骨、祛风通络之效。根据药效试验，蚂蚁活性蛋白提取物及土鳖虫提取物均具有抗凝溶栓作用，故制备工艺选用水匀浆超滤提取、冷冻干燥方法。

根据中医药学基本理论及长期临床实践，认为肝纤维化的主要病机特点是湿热瘀毒内结，耗气伤阴，阻碍气血运行，久必肝肾两伤，所以肝肾不足、热毒瘀血交加当是该病的基本病机表现。在此基础上，经临床实践总结以及药理学研究，制成具有养气养血，活血化瘀，舒肝健脾之功——抗肝纤胶囊。并于2002年，在江苏省宿迁市人民医院和泗阳县人民医院传染科应用该制剂共对33例病毒性肝纤维化患者进行了有关临床验证，结果发现服用该药2个月后，95％以上的患者自觉症状明显好转，尤其是乏力、纳差、肝区疼痛等症最为明显。同时，ALT复常率为45％，AST为48％，胆红素复常率为60％；治疗后血清白蛋白上升13例，球蛋白下降15例，13例患者A/G比例好转；r-GTP复常率为47％，AKP复常率为50％，肝纤四项的好转率均超过70％，临床总有效率达63.3％，而且无毒副反应发生。进而，我们又对该制剂进行了有关动物实验研究，结果显示抗肝纤胶囊对四氯化碳(CCl₄)、二甲基亚硝胺(DMN)所致大鼠慢性肝损伤及肝纤维化具有明显的保护和治疗作用，特别是在改善肝功能及肝脏病理组织学改变、降低大鼠肝组织羟脯氨酸及血清HA、LN含量方面作用显著。而且，该制剂急性毒性试验未发现毒性反应，长期毒性试验提示临床用药量是安全有效的。

1.抗肝纤胶囊处方组成，符合中医传统理论认识，并经临床试验观察，对肝纤维化肝肾不足、毒瘀交加证疗效显著。

2.抗肝纤胶囊的药物组成，从文献和药理研究资料上来看，具有抗病毒、抗凝血、抗肝纤维化、改善肝功能及微循环、提高机体免疫功能等作用，与肝纤维化的主要病理改变相吻合。

3，抗肝纤胶囊制剂工艺采用中药提取与生化技术相结合的工艺制备方法，有利于活性成分的提高，疗效显著，质量稳定。

4.由于疗效确切，而且患者较多，估计能获得较理想的经济效益和起到明显的社会效益。

综上所述，本发明的抗肝纤胶囊系多年临床经验方，该方既有滋补肝肾、益气养血之长，又有活血祛瘀、清热解毒之妙，在补肾益精，养血柔肝的同时，祛瘀生新，清热解毒，先后天并调，攻补兼施，标本同治，完全针对病毒性肝纤维化的病机特点，同时，在制备技术上通过多方位系统组合试验，采用中药提取技术与生物制药技术相结合的制备工艺，保留高浓度的中药有效成分及生物活性物质，充分发挥各类有效物质的作用，从而对肝纤维化患者的治疗具有广阔的应用前景。

该抗肝纤胶囊治疗肝纤维化不仅符合中医药理论，而且已具有较好地前期临床及实验工作基础，依据充分，疗效确切，具备充分的新药研制开发的科学性和可行性.

根据中医理论及经验对处方的论述

抗肝纤胶囊是由蚂蚁、丹参、苦参、黄芪、土鳖虫组成。方中蚂蚁味成酸性平，入肝肾二经，既有补肾益精、滋养肝血之力，又有通经活络、解毒散结之功，在养血柔肝的基础上，通肝络、解热毒，在肝纤维化治疗中一举多得，标本兼顾，故用为君药。丹参味苦性微寒，入心、心包、肝经，活血行血，祛瘀通络，内之达脏腑而化瘀滞，外之利关节而通血络，且祛瘀生新，以通为补，重在加强蚂蚁活血祛瘀之力；苦参味苦性寒，清热燥湿，杀虫，利尿，近年来从本品中提取有效成分生物碱对慢性活动性肝炎疗效确切，方中伍用重在加强蚂蚁清热解毒之力，故皆用为臣药。黄芪大补后天，畅脾胃化源，益气生血，养血柔肝，且气行则血行，在推动血行的同时，又因其味甘性温，而对丹参、苦参苦寒之性有兼制作用；土鳖虫咸寒，破血逐瘀、散结消癥，与黄芪一补一攻，一升一降，攻补兼施，升降互用，破瘀而不伤正，扶正而不留邪，故均用为佐药。又土鳖虫专入肝经，活血通络的同时，又引诸药归经于肝，故又兼用为使药。诸药相伍，立法严谨，遣药精当，在补肾益精，养血柔肝的同时，祛瘀生新，清热解毒，先后天并调，攻补兼施，标本同治，从而对肝纤维化肝肾不足、毒瘀交结证患者能发挥很好的治疗作用。

可见，该方既有滋补肝肾、益气养血之长，又有活血祛瘀、清热解毒之妙，攻补兼施，标本同治，具备八法中之清、消、补三法，完全针对肝纤维化的病机特点。全方药味成、酸、苦、甘相合，补肾、益气、活血、解毒并进，药性有平、微寒、寒、温之异，诸药相伍，无温燥、苦寒之弊，不损脾胃，不耗津液，安全有效。上述诸端，正是本方的特色所在，符合继承创新之旨。

从现代药理研究结果来看，蚂蚁能对抗四氯化碳所致大鼠血清丙氨酸转氨酶(ALT)的升高，具有保肝作用。临床上还能使部分患者乙型肝炎病毒血清标志物(HBV-M)转换，并可使部分乙型肝炎表面抗原(HBsAg)转阴。蚂蚁还能显著提高机体免疫功能，并可通过免疫调节，协助T细胞与抑制T细胞的平衡，而起免疫抑制剂的作用，从而对免疫具有良好的双向调节作用。同时本品还能提高耐力，延缓衰老，并有抗炎、镇痛、镇静等作用。丹参、土鳖虫均有抗凝、促进纤维蛋白溶解，抑制血小板聚集，抑制血栓形成的作用；并可缩短红细胞及血色素恢复期，使网织红细胞增多；同时还能够改善微循环，使流动缓慢及瘀滞的血细胞流速加快，聚集的血细胞有不同程度的解聚，血粘度降低，红细胞电泳率加快，毛细血管网开放增多。丹参还有降糖降脂，提高体液免疫功能的作用。土鳖虫还可使D-半乳糖氨所致肝损伤程度明显减轻。由于丹参的主要成分丹参酮II A可提高纤维蛋白溶解活性，调节血液流变性，改善血液的“浓、粘、凝、聚”倾向，目前已被广泛用于心脑血管疾病及各种脏器纤维化的治疗。现代临床研究报道，从苦参中提取的有效成分苦参碱对巨噬细胞、肝枯否细胞分泌的IL-1、IL-6、TNF-α有明显抑制作用，氧化苦参碱对大鼠贮脂细胞增殖和胶原合成有抑制作用。他们对肝细胞的保护作用，表现在丙氨酸转氨酶降低，肝脏病理变化明显减轻，抑制了巨噬细胞释放肿瘤坏死因子。苦参碱和氧化苦参碱的抗炎、免疫抑制、清除自由基、利尿和解毒等作用，是治疗各种肝损害、自身免疫性疾病及变态反应性疾病的药理学基础。经实验研究发现苦参碱能抑制NIH₃T₃成纤维细胞的增殖，同时抑制MH₃T₃细胞胞体减少，处于核分裂期细胞减少，NIH₃T₃细胞表达TGF-β1减少.提示苦参碱可通过抑制肝纤维化细胞外基质的主要来源细胞(成纤维细胞)的增殖、生长及TGF-β1的表达，而起抗肝纤维化作用.黄芪的主要成分为多糖类和皂甙类物质，现代药理研究证实其能使老年大鼠全血还原粘度、血清比粘度增加，红细胞压积下降，并能抑制血小板聚集；其有明显的增强机体免疫功能，并能改善肝脏微循环，增加肝血流量的作用.

根据本品的立题依据和适应症，申请人进行了以下试验。

药效学试验

(1)抗肝纤胶囊对四氯化碳(CCL₄)所致大鼠慢性肝损伤及肝纤维化保护作用的实验结果显示：抗肝纤胶囊的三个剂量组功能指标均有不同的改善，其中对ALT、AST、ALP的抑制作用尤为明显；抗肝纤胶囊1.5，3.0g/kg可使肝组织羟脯氨酸含量明显降低；抗肝纤胶囊0.75g/kg可使肝组织血清HA显著降低；病理组织学检查结果表明抗肝纤胶囊三个剂量组均可明显减轻肝脏病变程度。

(2)抗肝纤胶囊对二甲基亚硝胺(DMN)所致大鼠慢性肝损伤及肝纤维化的保护作用实验结果显示：肝纤胶囊的三个剂量组明显抑制慢性肝损伤大鼠血清ALT、AST、ALP、TP、ALB的改变；明显降低大鼠肝组织羟脯氨酸含量；肝纤胶囊3.0g/kg可明显降低血清HA、LN的含量；病理组织学检查结果表明肝纤胶囊三个剂量组大鼠肝脏病变程度均显减轻。

(3)抗肝纤胶囊对四氯化碳(CCL₄)所致大鼠慢性肝损伤及纤维化的治疗作用的实验结果显示：抗肝纤胶囊的三个剂量组肝功能指标(ALT、AST、ALP、TbiLi)与模型组相比均有不同程度的改善，其中对ALT、AST、ALP的作用明显；肝纤胶囊0.75，1.Sg/kg剂量组可明显降低肝纤维化大鼠的肝组织羟脯氨酸及血清HA、LN含量，与模型组比较差异显著；病理组织学检查结果表明肝纤胶囊三个剂量组大鼠肝脏病变程并均明显减轻。

(4)抗肝纤胶囊对大鼠急性血瘀症模型血液流变学的影响的实验结果显示：抗肝纤胶囊可以不同程度的降低红细胞聚集能力、降低血液粘度(低切、中切)、血沉，抑制血小板聚集增加FIB时间，与模型组比较，差异显著(p＜0.05)。

2002年，在江苏省宿迁市人民医院和泗阳县人民医院传染科应用该制剂共对33例病毒性肝纤维化患者进行了有关临床验证，结果发现服用该药2个月后，95％以上的患者自觉症状明显好转，尤其是乏力、纳差、肝区疼痛等症最为明显。同时，ALT复常率为45％，AST为48％，胆红素复常率为60％；治疗后血清白蛋白上升13例，球蛋白下降15例，13例患者A/G比例好转；r-GTP复常率为47％，AKP复常率为50％，肝纤四项的好转率均超过70％，临床总有效率达63.3％，而且无毒副反应发生。进而，我们又对该制剂进行了有关动物实验研究，结果显示抗肝纤胶囊对四氯化碳(CCl₄)、二甲基亚硝胺(DMN)所致大鼠慢性肝损伤及肝纤维化具有明显的保护和治疗作用，特别是在改善肝功能及肝脏病理组织学改变、降低大鼠肝组织羟脯氨酸及血清HA、LN含量方面作用显著。而且，该制剂急性毒性试验未发现毒性反应，长期毒性试验提示临床用药量是安全有效的。

临床研究资料综述

一般情况：

33例患者中男性31例、女性2例；年龄14岁1例、20-30岁3例、31-40岁16例、41-50岁9例、50岁以上4例；职业：工人3例、农民18例、其他(教师、干部、司机)12例；按1995年全国肝病会议制订的肝炎诊断标准，慢性乙型肝炎22例(其中有部分属早期肝硬化)、肝炎肝硬化11例(其中有3例已过失代偿期)；病程5年以下10例、其余23例均在5-10年以上，注各种治疗疗效欠佳的病人。

治疗：

入选的33例患者均服用由南京曌元药业有限公司和江苏天照药业有限公司研制的抗肝纤胶囊，一次4粒，一日3次，疗程2个月。服药期间每月检查一次肝功能，服药前后各查一次肝纤四项，定期到医院复查症状和体征。验证过程中仅单服抗肝纤胶囊，不服用其他药物。

结果：

1.症状服用该药2个月后，自觉症状95％以上好转。尤其乏力、纳差、肝区疼痛症状明显好转。

2.改善肝功能：见下表1。

表1治疗前后肝功能

ALT异常前后	AST前后	II前后	A/G好转	A好转	G下降	r-GT前后	AKP前后
								2011	2111	104	13	13	15	179	63

从上表可以看出注抗肝纤胶囊治疗后，ALT复常率45％，AST为48％，胆红素复常率60％；治疗后A上升13例，G(球蛋白)下降15例，使13例患者A/G比例好转；r-GTP复常率为47％，AKP为50％。说明抗肝纤胶囊有一定保肝、降酶、退黄、改善肝功能的作用。

3.肝纤四项：见下表2。

表2治疗前后肝纤四项

LN前后好转	HA前后好转	IV前后好转	III前后好转
				17例14例	21例15例	5例16例	18例13例

上表提示注抗肝纤胶囊治疗后肝纤四项的好转率均超过70-80％。

4.疗效：按肝功及肝纤四项治疗后好转50％以上为显效、好转50％以下为有效、无改变或变差者为无效。见下表3

表3临床试验结果

	显效	有效	无效
				宿迁(16例)	8例	5例	3例
泗阳(17例)	3例	5例	9例
				总有例数	11例	10例	12例
总有效率	33.3％	30％	36.7％

5.副作用：

仅有一例服用后上腹不适，余无副作用。

抗肝纤胶囊是由中药蚂蚁、丹参、苦参、黄芪、土鳖虫等药物组成的复方制剂，具有养气养血，活血化瘀，舒肝健脾之功。主治慢性肝炎、肝纤维化及肝硬化等症。从本文临床验证结果可以看出抗肝纤胶囊改善症状、保肝、降酶、退黄、改善肝纤维化的作用，疗效达63.3％，而且无毒副反应，是一个疗效好，副作用小，有前途的抗肝纤维化的复方中药制剂，值得进一步研制和推广。

具体实施方式

实施例1，抗肝纤维化的中药组合物及其制备方法：

取原料，蚂蚁530g、丹参180g、苦参340g、黄芪260g、土鳖虫180g(或同比例扩大)；

其中的蚂蚁、土鳖虫，粉碎成粗粉，加6～12倍量水(含0.1％苯甲酸钠)浸泡，搅拌至匀浆，取匀浆液置恒温水浴(35～37℃)、搅拌(80～150转/分)8～16小时，离心，弃去沉淀，取离心液先经1μm孔径膜预滤，滤液经0.2μm孔径膜滤过除菌，除菌滤液再经超滤器(截留分子段6000-10000)，超滤浓缩约呈1∶0.5～1.5(即药材与药液体积比)，浓缩液冷冻干燥成粉，备用。取丹参、苦参、黄芪，用7～9倍量70％乙醇回流提取2～3次，每次1.5～2小时合并回流液，减压回收乙醇至相对密度1.2～1.3(50℃测定)，浓缩液减压干燥或喷雾干燥成粉，加入适量淀粉混匀，制粒，干燥，再加入冷冻干燥粉和3g硬脂酸镁，混匀，灌装胶囊。共制成1000粒胶囊，(0.3g/粒)。

实施例2，与实施例1基本相同，但其原料各组分比例为：

蚂蚁500g    丹参160g    苦参320g    

黄芪240g    土鳖虫160g。

同时有如下改变：

蚂蚁、土鳖虫的除菌滤液再经超滤器时，截留分子段为3000-10000；

防腐剂改为山梨醇；

丹参、苦参和黄芪的提取工艺是：分几次分别用30％、50％、80％的乙醇分级沉淀，分离、合并各次的沉淀，干燥成粉；干燥方法改为喷雾干燥。

实施例3，与实施例1或2基本相同，但其原料各组分比例为：

蚂蚁560g    丹参200g    苦参360g

黄芪280g    土鳖虫200g。

同时有如下改变：

蚂蚁、土鳖虫的除菌滤液再经超滤器时，截留分子段为6000-20000。

实施例4，与实施例1或2基本相同，但其原料各组分比例为：

蚂蚁550g    丹参200g    苦参320g

黄芪260g    土鳖虫180g。

实施例5，与实施例1或2基本相同，但其原料各组分比例为：

蚂蚁530g    丹参160g    苦参340g

黄芪280g    土鳖虫200g；

实施例6，与实施例1或2基本相同，但其原料各组分比例为：

蚂蚁500g    丹参200g    苦参330g

黄芪260g    土鳖虫180g。

Claims (6)

1.一种抗肝纤维化的中药组合物，其原料组成是：

蚂蚁500g～560g    丹参160g～00g    苦参320g～360g

黄芪240g～280g    土鳖虫160g～200g；或同比例扩大或缩小。

2.按照权利要求1所述的抗肝纤维化的中药组合物，其特征在于，原料药各组分比例为：

蚂蚁530g  丹参180g    苦参340g

黄芪260g  土鳖虫180g；或同比例扩大或缩小。

3.按照权利要求1或2所述的抗肝纤维化的中药组合物，其特征在于，

其中所述的蚂蚁和土鳖虫采用其水匀浆法提取物：所述的蚂蚁和土鳖虫粉碎，加水浸泡，搅拌至匀浆，35～37℃恒温搅拌，离心，取离心液先后经1μm孔径膜、0.2μm孔径膜滤过除菌，除菌滤液再经超滤器截留分子段3000-20000，超滤浓缩，浓缩液冷冻干燥成粉；

所述的丹参、苦参和黄芪，用乙醇回流提取，减压回收乙醇至50℃相对密度1.2～1.3，浓缩液干燥成粉；或用乙醇分次沉淀法提取，干燥成粉；

同时加有辅料。

4.一种权利要求1所述的抗肝纤维化的中药组合物的制备方法，步骤如下：

取原料，

蚂蚁500g～560g    丹参160g～200g  苦参320g～60g

黄芪240g～280g    土鳖虫160g～200g；

或同比例扩大或缩小；

所述的蚂蚁和土鳖虫粉碎，加水浸泡，搅拌至匀浆，35～37℃恒温搅拌，离心，取离心液先后经1μm孔径膜、0.2μm孔径膜滤过除菌，除菌滤液再经超滤器截留分子段3000-20000，超滤浓缩，浓缩液冷冻干燥成粉；

所述的丹参、苦参和黄芪，用乙醇回流提取，减压回收乙醇至50℃相对密度1.2～1.3，浓缩液减压干燥成粉；

或对丹参、苦参和黄芪分几次分别用30％、50％、80％的乙醇分次沉淀，分离、合并各次的沉淀，干燥成粉；

然后加入辅料。

5.按照权利要求4所述的抗肝纤维化的中药组合物的制备方法，其特征在于，具体的操作步骤是，

取原料：蚂蚁530g、丹参180g、苦参340g、黄芪260g、土鳖虫180g；或同比例扩大或缩小；

其中的蚂蚁、土鳖虫，粉碎成粗粉，加6～12倍量含防腐剂的水浸泡，搅拌至匀浆，取匀浆液置35～37℃恒温水浴、80～150转/分搅拌8～16小时，离心，弃去沉淀，取离心液先经1μm孔径膜预滤，滤液经0.2μm孔径膜滤过除菌，除菌滤液再经超滤器截留分子段6000-10000，超滤浓缩至药材与药液体积比呈1∶0.5～1.5，浓缩液冷冻干燥成粉，备用；

取丹参、苦参、黄芪，用7～9倍量60～80％乙醇回流提取2～3次，每次1.5～2小时合并回流液，减压回收乙醇至50℃相对密度1.2～1.3，浓缩液干燥成粉，或对丹参、苦参和黄芪分几次分别用30％、50％、80％的乙醇分次沉淀，分离、合并各次的沉淀，干燥成粉；加入适量淀粉混匀，制粒，干燥，再加入冷冻干燥粉和3g硬脂酸镁，混匀，制成口服制剂。

6.按照权利要求5所述的抗肝纤维化的中药组合物的制备方法，其特征在于，

所述的丹参、苦参、黄芪醇提浓缩液的干燥方法是，减压干燥或喷雾干燥；

所述的制成口服制剂为灌装胶囊。