CN1961891A - 一种抗辐射组合物 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种抗辐射的组合物，该组合物含有下列重量百分比的组分：5′－核苷酸10－30％，维生素C5－15％，大豆低聚糖20－40％。受试者经口服施用不同剂量的本发明组合物后，其血清溶血素HC50和超氧化物歧化酶活性均有显著提高(p＜0.05)，另外，受试者的体重和其它各项指标无显著性差异p＞0.05。本发明的抗辐射组合物对辐射危害有辅助保护作用，且使用安全。

Description

一种抗辐射组合物

技术领域

本发明涉及保健食品领域，具体地说，涉及一种含有单核苷酸的抗辐射损伤的组合物。

背景技术

由于经济的发展和城市的现代化，我国城市电磁环境日趋复杂。有专家指出城市空间人为电磁能量将以每年7-14％的速度增长，到2000年城市环境电磁能量密度最高比上个世纪70年代增长26倍。对每个家庭来说，家用电器的种类和数量在不断增加，但是如电脑、电视、冰箱、微波炉、手机等家用电器在给人们带来方便的同时也带来大量的电磁辐射；另外，随着医疗卫生事业的发展，放疗治疗及大型检查仪器的频繁应用也给患者带来了电磁辐射。

电离辐射作用于细胞时，经过能量吸收与传递可由直接作用引起生物大分子的损伤。这些生物大分子与水分子同时存在于同一细胞环境中，故电离辐射也可引起水分子的电离与激发，水分子在电离和激发过程中均可产生自由基。自由基是在轨道外层具有不成对电子的不带电的原子或分子，如H·或OH·等。自由基可造成细胞严重损伤，因为它具有很强的破坏分子结构的反应活性，可造成大分子的损伤。大约二分之一的辐射生物效应是由水分子自由基引起的，其余一半的生物效应则来自生物大分子的直接电离。

自由基性质活泼，具有很强的氧化反应能力，很容易与其他物质生成新的自由基，自由基反应往往可以连锁方式进行下去。若反应体系中有自由基清除剂(亦称抗氧化剂)存在，它就能有效地阻挡自由基的连锁反应，从而起到清除自由基的作用。在正常情况下，人体内的自由基是处于不断产生与清除的动态平衡之中。如果自由基产生过多或清除过慢，它会对生物体产生一系列损害，加速机体的衰老过程并诱发各种疾病。据研究，氧自由基是基因突变、癌症生成的元凶，人体细胞核内有23对染色体，储存着所有的遗传基因。基因本身也是由分子组成，氧自由基也可能向它们借贷或夺取电子，从而使抗癌基因失去抗癌活性，潜伏的原癌基因被激活，成为癌基因，如此癌魔便乘机出笼。目前的研究结果表明，自由基几乎和人类常见的几种主要疾病都有关系：

1、自由基对核酸的损害

脱氧核糖核酸(DNA)是生物遗传信息的携带者，是生物的遗传物质，与生物的繁殖、遗传和变异密切相关。生物几乎所有的遗传信息都贮存在DNA中，这些信息通过信使RNA(mRNA)表达出来，合成蛋白质而显示出生物的特异性。如果DNA的结构或构象发生变化，其功能亦随之改变，这是造成癌症以及各种疾病的导火线。引起DNA异常的物质有多种，其中最主要的是氧自由基，特别是羟基自由基，香烟、致癌物质、放射线、紫外线等能损伤DNA也是由于它们都能产生活性氧自由基。

而氧自由基的危害就在于能与碱基或五碳糖发生反应，生成碱基自由基或在DNA的脱氧核糖部分形成自由基，最终使DNA链断裂或碱基破坏、缺失，造成遗传信息改变，使生物体发生突变或产生病变；严重损伤的DNA无法修复，以致造成细胞死亡。辐射作用于核酸环境中的水分子，使其电解产生羟基自由基和超氧化物自由基，大剂量的辐射可造成DNA断裂，小剂量辐射可使DNA主链断裂、碱基降解和氢键破坏。

2、自由基对蛋白质的损害

自由基可直接作用于蛋白质，或者通过脂质过氧化物间接作用于蛋白质，使蛋白质的多肽链断裂或个别氨基酸发生变化或使蛋白质交联而发生聚合作用，从而使蛋白质的结构发生变化，导致细胞功能紊乱。如老年人皮肤起皱、骨骼变脆等都与胶原蛋白破坏和功能改变有关。

3、自由基对碳水化合物的损害

碳水化合物(糖类)是动物体内的主要能源和碳源，在正常情况下，生物体内70％的能量主要来自碳水化合物的分解；同时它们也是一些重要结构的组成成分，如组成DNA及膜多糖，因此糖是生命活动所必须的。自由基可使组成核酸的核糖、脱氧核糖形成脱氢自由基，从而造成DNA主链断裂或碱基破坏；自由基可使细胞膜中的糖分子羟基化，破坏细胞膜上的多糖结构，影响细胞功能的发挥；还可通过氧化降解使多糖破坏，影响组织功能，譬如脑组织中的多糖遭到破坏就会影响大脑的正常功能。

4、自由基对脂类的损害

多不饱和脂肪酸最易受到自由基的破坏发生过氧化反应，生成脂质过氧化物，脂质过氧化物进一步分解产生醛类，尤其是丙二醛可与一些蛋白质、核酸等反应，导致分子间的交联聚合，结果生成大分子的难溶物(即脂褐素)沉积在细胞内，该色素在皮肤细胞堆积就形成老年斑，在脑组织中堆积会导致记忆力减退或智力障碍，因此，日本的著名医学博士丹羽靳负认为活性氧对生物体的真正危害可能并非活性氧本身，而是活性氧与脂质反应后生成的脂质过氧化物。另外，富含多不饱和脂肪酸的磷脂是构成多种生物膜的重要成分，如果这些膜脂发生过氧化反应，将导致膜中蛋白质及酶的交联和失活，使膜的通透性改变，从而影响细胞膜的生理功能，如线粒体膜受损将导致能量生成减少。

蛋白质、脂肪、碳水化合物和核酸是组成生物体的基本而重要的化合物，这些物质一旦受损，生命活动将受到威胁，自由基对生物体的危害就在于能破坏这些生物大分子，使生物体患病、加速衰老，这已被越来越多的研究所证实。

近几十年来，随着生活水平的提高，人们越来越关注健康，并逐渐认识到核苷酸在生命中的重要作用。众所周知，人体大约由60万亿个细胞组成，细胞中有细胞核和细胞质，细胞内的物质之一核酸，它由四种单核苷酸组成，核苷酸作为机体的必要营养素，它调控生命体的生长、发育、衰老，使机体不断地进行新陈代谢，维持生理状态的平衡。市场上以核苷酸为功效成分的保健品，例如武汉生科的核苷酸胶囊，主要具有调节免疫力和辅助肝损伤的功能。到目前为止，核苷酸的抗辐射作用机理及动物实验研究，在国内外报道并不多见^[1-4]，第四军医大学周元恺等作过核酸及其降解物的动物抗辐射实验^[1]。结果表明：单独一种嘌呤类或嘧啶类核苷酸、核苷和碱基，与小牛胸腺DNA一样，同样具有提高照射后肠腺存活率的作用。这一事实提示，外源核苷酸对辐射损伤细胞或机体的恢复效应，并非由于其高聚状态，而是其酶解产物作用所致。核苷酸是多不饱和脂肪酸合成的主要调节物。它可以提高血液中的多不饱和脂肪酸的含量，而长链不饱和脂肪酸就能够增强肌体的抗氧化能力。核苷酸、碱基的氮原子能捕获亚油酸氧化过程中形成的自由基。核苷酸及其相关物质均可以作为内源自由基清除剂和抗氧化剂。而腺苷酸和乌苷酸的代谢产物尿酸清除内源自由基和抗氧化能最强。

发明内容

本发明的目的在于，提供一种含有单核苷酸的抗辐射组合物，用于清除体内自由基，从而降低辐射对人体的损伤。

本发明所述的组合物含有下列重量百分比的组分：5’-核苷酸10-30％，维生素c5-15％，大豆低聚糖20-40％。

优选为，5’-核苷酸15-20％，维生素c5-10％，大豆低聚糖30-40％。

进一步优选的为，5’-核苷酸17％，维生素c8％，大豆低聚糖35％。

本发明所述的主要原料为5’-核苷酸，它可以作为内源自由基清除剂和抗氧化剂，它也是合成生命大分子核酸的基本原料。本发明所述的5’-核苷酸可以是5’-腺嘌呤核苷一磷酸，5’-鸟嘌呤核苷一磷酸，5’-胞嘧啶核苷一磷酸，5’-尿嘧啶核苷一磷酸；或它们的任意组合，也可以为，5’-腺嘌呤核苷一磷酸和/或5’-乌嘌呤核苷一磷酸。

维生素c作为功效成分也是人们熟悉的一种强抗氧化剂，试验证明，添加了维生素c的DNA经紫外辐射后几乎没有受到损伤^[5]。维生素c能有效的捕获单氧、超氧化物、过氧化氢和水溶性过氧化自由基，清除自由基并阻断了自由基对DNA的损伤，起到了抗辐射的作用。

辐射对机体的损伤主要由于在照射过程中产生自由基，而服用大豆低聚糖可提高肠双歧杆菌的数量。双歧杆菌能明显增加血中SOD活性和含量，SOD是抗氧化剂，自由基的清除主要靠抗氧化剂完成^[6]。

还可以在本发明组合物中添加辅料，辅料可以是医学上或者是食品中可接受的载体物质。通过它们可以将本发明组合物制备成不同的剂型。

本发明组合物中含有的5’-核苷酸与维生素c、大豆低聚糖等组分，具有良好的互相促进和协同作用，对机体发挥出抗辐射的功能。

经口给予小鼠不同剂量的本发明组合物，喂养30天后，Co₆₀-γ1Gy照射后经过一定的时间测定血清溶血素HC50提高20-50％(p＜0.05)，Co₆₀-γ7Gy照射后经过一定的时间测定超氧化物歧化酶活性提高10-30％(p＜0.05)。小鼠体重无显著性差异p＞0.05，其它各项指标无显著性差异p＞0.05，按照《保健食品的功能检验与评价技术规范》规定，判定本发明组合物对辐射危害有辅助保护作用，使用安全。

具体实施方式

下面实施例用于对本发明的进一步说明，但不用于限制本发明。

实施例1本发明组合物的组成

表1是本发明组合物按重量百分比的配方，其中5’-核苷酸为可以为5’-腺嘌呤核苷一磷酸，5’-鸟嘌呤核苷一磷酸，5’-胞嘧啶核苷一磷酸，5’-尿嘧啶核苷一磷酸，或它们的任意组合。

表1本发明组合物的配方

配方	5’-核苷酸	维生素c	大豆低聚糖
				配方1	10％	5％	20％
配方2	20％	10％	30％
				配方3	30％	15％	40％
配方4	30％	5％	20％
				配方5	10％	15％	40％
配方6	30％	5％	40％
				配方7	30％	15％	20％
配方8	10％	5％	40％
				配方9	10％	15％	20％
配方10	15％	10％	30％
				配方11	25％	13％	35％
配方12	17％	8％	35％
				配方13	23％	12％	25％
配方14	28％	10％	32％

所述组合物含上述重量百分比的三种成分，余下的为可以与医学上或者是食品中可接受的载体物质，并可混合在一起制备成各种剂型，如加入适量淀粉充分混合，制备成干粉剂。

实施例2功能鉴定

1实验操作步骤

①抗辐射组合物配方为实施例1中的配方1。小鼠的使用低剂量组为200mg/kg.bw组合物，高剂量组为400mg/kg.bw。

②实验动物：选用中国军事科学院实验动物中心提供的昆明种1月龄二级雌性小鼠(SCXK(京)2002-001)体重18-22g共分二批，小鼠随机分组。进行血清溶血素和超氧化物歧化酶活性两项指标的实验。

③试剂：绵羊红细胞(SRBC)，豚鼠血清，生理盐水，SA缓冲液，乙醇，三氯甲烷，都氏试剂，超氧化物歧化酶试剂盒。

④辐射动物模型：受试小鼠灌胃30天后，进行血清溶血素试验的小鼠经Co₆₀-γ1Gy辐射，进行超氧化物歧化酶活性试验的小鼠经Co₆₀-γ7Gy辐射。

⑤血清溶血素的测定：

按照《保健食品的功能检验与评价技术规范》规定的方法进行：辐照后14天腹腔注射0.2ml 2％(v/v)SRBC免疫每只小鼠。4d后，眼眶取血于离心管内，放置1h，3000r/min离心10min，收集血清。小鼠血清用SA液稀释200倍，依次加入稀释的小鼠血清1.00ml、10％(v/v)的SRBC 0.50ml，补体(用SA液1∶10稀释)1.00ml。另设不加血清的对照管(用SA液替代)。置37.0℃水浴20min后冰水浴终止反应。3000r/min离心10min，取上清液1.00ml，都氏试剂3.00ml于试管内，同时取10％(v/v)的SRBC 0.25ml加都氏试剂4.00ml作为半数溶血管。放置10min后，540nm波长处测定光密度值。试验结果以半数溶血值(HC50)表示。

⑥小鼠超氧化物歧化酶活性实验：

按照《保健食品的功能检验与评价技术规范》规定的方法进行：辐照后7天后，眼眶取血20μl抽提红细胞中的超氧化物岐化酶，眼眶取血10μl测定血红蛋白。超氧化物岐化酶测定使用市售的南京建成生物技术有限公司生产的超氧化物岐化酶试剂盒(产品型号A001，采用亚硝酸盐形成法)测定。各试剂及用量如表2所示

表2超氧化物歧化酶活力测定所用试剂及用量

试剂	测定管	对照管
			试剂一(ml)	1.0	1.0

样品(ml)	0.01	——
			蒸馏水(ml)	——	0.01
试剂二(ml)	0.1	0.1
			试剂三(ml)	0.1	0.1
试剂四(ml)	0.1	0.1
			涡旋混匀器充分混匀，置37.0℃恒温水浴40min。
显色剂(ml)	2	2

混匀，室温放置10分钟，于波长550nm处，1cm光径比色杯，蒸馏水调零，比色。

血红蛋白测定眼眶取血10μl加入到2.5ml都氏试剂，充分混合，静置15分钟。选用0.5cm光径比色杯，于540nm波长下，用空白试剂调零点进行测定。

血红蛋白浓度(g/100ml)＝A_样品*0.736

^*注：实验数据用微软公司的Excel软件进行方差分析统计。

2实验结果：

①受试物对小鼠体重的影响

表3受试物对小鼠体重的影响(X±SD)

组别	剂量(g/kg.bw)	动物数(只)	实验前体重(g)	P值	实验后体重(g)	P值
							正常对照组阴性对照组高剂量组低剂量组	000.40.2	30303030	22.6±1.222.6±1.622.6±1.422.6±1.2	0.9656——0.93950.9933	32.6±2.432.4±2.632.1±2.732.7±2.6	0.7298——0.28040.9197

由表3可见，经口给予小鼠不同剂量本发明组合物，喂养30天后，与阴性对照组比较，各剂量组体重均无显著性差异p＞0.05。

②受试物对小鼠血清溶血素的影响

表4受试物对小鼠血清溶血素的影响(X±SD)

组别	剂量(g/kg.bw)	动物数(只)	HC50	P值
					正常对照组阴性对照组高剂量组低剂量组	000.40.2	10101010	130±29101±30118±22132±22*	0.0408*——0.16390.0169*

注：^*表不与阴性对照组比较，有显著性差异p＜0.05。

由表4可见，经口给予小鼠不同剂量本发明组合物，喂养30天，辐射14天后与阴性对照组比较，低剂量组的HC50有显著性差异p＜0.05。

③受试物对小鼠超氧化物歧化酶活性的影响

表5受试物对小鼠超氧化物歧化酶活性的影响(X±SD)

组别	剂量(g/kg.bw)	动物数(只)	SOD活力(U/gHb)	P值
					正常对照组阴性对照组高剂量组低剂量组	000.40.2	10101010	11865±36313099±442015271±29615305±951*	0.8694——0.13840.0401*

注：^*表不与阴性对照组比较，有显著性差异p＜0.05。

由表5可见，经口给予小鼠不同剂量本发明组合物，喂养30天后，与阴性对照组比较，低剂量组的小鼠超氧化物歧化酶活性有显著性差异p＜0.05。

结论：经口给予小鼠不同剂量本发明组合物，喂养30天后，与阴性对照组比较，低剂量组血清溶血素HC50提高30.69％(p＜0.05)，低剂量组超氧化物歧化酶活性提高16.84％(p＜0.05)。其它各项指标无显著性差异p＞0.05，实验前后小鼠体重无显著性差异p＞0.05。依据《保健食品的功能检验与评价技术规范》规定，可判定本发明组合物对辐射危害有显著的保护功能。

参考文献：

1.周元恺等，核酸前体对小鼠肠腺辐射损伤的恢复作用，辐射研究与辐射工艺学报，1994，(2)：96～99

2.Sulabha S.Kulkarni，Functional Impairment of T-lymphocytes inMouse Radiation Chimeras by a Nucleotide-free Diet Exp.Hematol，1984，(12)694～699

3蔡文杰等，外源核苷酸的营养作用及其研究进展，养殖与饲料，2005，(4)：20～40

4.曾桂英等，四种核酸前体对小鼠小肠辐射损伤的恢复作用，辐射研究与辐射工艺学报，1998，16(4)：231-233

5.周殿风等，维生素c对紫外线诱发DNA损伤的保护作用，光学学报，2005，(5)：643～646

6.崔洪斌，大豆生物活性物质的开发与应用，中国轻工业出版社，2001，86～87.

Claims (8)

1、一种抗辐射组合物，其含有下列重量百分比的组分：

5’-核苷酸          10～30％

维生素c             5～15％

大豆低聚糖          20～40％

2、如权利要求1所述的组合物，其含有下列重量百分比的组分：

5’-核苷酸          15-20％

维生素c             5-10％

大豆低聚糖          30-40％

3、如权利要求1或2所述的组合物，其含有下列重量百分比的组分：

5’-核苷酸          17％

维生素c             8％

大豆低聚糖          35％

4、如权利要求1、2或3所述的组合物，其还含有按重量百分比为15～65％的辅料。

5、如权利要求4所述的组合物，其特征在于所述辅料按重量百分比为40％。

6、如权利要求1、2或5任一项所述的组合物，其特征在于所述的5’-核苷酸为5’-腺嘌呤核苷一磷酸，5’-鸟嘌呤核苷一磷酸，5’-胞嘧啶核苷一磷酸，5’-尿嘧啶核苷一磷酸，或它们的任意组合。

7、如权利要求6所述的组合物，其特征在于所述5’-核苷酸为任意两种或三种5’-核苷酸的组合。

8、如权利要求1～7任一项所述的组合物，其为干粉剂、片剂、胶囊或口服液。