发明内容:
本发明的目的在于提供一种治疗鸡新城疫的中兽药制剂及其制备方法,用于治疗病毒和细菌性传染病。
本发明是纯中药配方,无毒副作用,使用安全,治愈率达95%左右,不易复发,细菌难以产生耐药性,避免了兽药残留和社会公害的发生。
本发明是一种治疗鸡新城疫的中兽药口服液,其组成为:珍珠草15~45克,华荠苧20~60克,防腐剂苯甲酸重量比为0.1%~0.2%。
本发明的制备方法如下:
(1)将华荠苧加4~5倍蒸馏水浸泡24~30小时,使药材充分膨胀后蒸馏,收集蒸馏液(蒸馏液是药物重量的1倍),蒸馏液重蒸馏1次,收集蒸馏液(蒸馏液是药物重量的1/2)装瓶灭菌备用。
(2)将蒸馏后的残渣与残液加入珍珠草并添加适量蒸馏水,煎煮3次,煎液合并浓缩至稠状,加95%乙醇调至乙醇60%~70%,充分搅拌混匀,沉淀48小时以上,回收乙醇。回收乙醇后的药液再加95%乙醇至75%~80%,搅匀沉淀48小时,回收乙醇,再浓缩至无醇味。药液加2倍蒸馏水冷藏沉淀48小时,浓缩至所需浓度。达到去除药液中鞣质、蛋白、淀粉、树脂等。
(3)将华荠苧蒸馏液与珍珠草药液合并,达每毫升含生药2克浓度,加入防腐剂苯甲酸,无菌分装即得。
本发明吸取中兽医学的精髓,以珍珠草为主药;珍珠草具有清胆明目,利湿解毒作用,可用于湿热泻痢,病毒感染,对鸡新城疫等病毒有很强的抑制作用。华荠苧为辅药;华荠苧有发散风寒,退热止痢功效,能显著提高机体免疫功能,其挥发油不仅对细菌有较强抑制作用,而且有杀菌作用。对病毒也有一定的灭活能力。两药配伍,不但有抑抑病毒增殖的功能,对细菌也有很强的杀灭作用。通过多年的研究与反复实践,本发明不但对鸡新城疫有很好的治疗作用,对其它病毒和细菌感染也有很好的疗效。
上述药剂为口服液
本发明适应症还包括:鸡痘、流感、法氏囊炎、大肠杆菌病、禽霍乱、葡萄球菌病。
下面就本发明的临床效果进一步说明本发明的疗效。
一、本发明体外抗鸡新城疫病毒实验研究
1、药品:本试验以本发明为试验药品;以0.2毫克/毫升的金刚烷胺为西药对照。
2、鸡新城疫毒株:由本实验室保存,鸡胚尿囊液的HA效价6log2。
3、试验鸡胚:10日龄非免鸡胚,购自南京药械厂。
4、试验分组:10日龄鸡胚70个,随机分为5组,具体分组情况见表1。
表1 实验分组情况
编号 |
组别 |
数量(枚) |
处理 |
1 |
试验I组 |
14 |
给本发明药 |
2 |
试验II组 |
14 |
西药对照 |
3 |
感染对照组 |
14 |
接种病毒尿囊液,不给药 |
4 |
生理盐水对照组 |
14 |
接种病毒尿囊液,按试验量给生理盐水 |
5 |
空白对照组 |
14 |
不接种、不给药 |
5、试验方法:
(1)药物毒性实验将本发明药液用生理盐水稀释,将原液及不同浓度的药液分别接种于4只10日龄鸡胚的尿囊腔中,每只0.2毫升,置37℃温箱孵育72小时,每天观察存活情况,鸡胚全部存活的最高药液浓度为正式实验起始浓度,同时设生理盐水对照组,药物对鸡胚毒性实验结果见表2。
表2 中药对鸡胚毒性实验结果(=4)
药物浓度 | 接种量(毫升) |
存活情况 |
24小时 |
48小时 |
72小时 |
原液 | 0.2 |
*4/4 |
4/4 |
4/4 |
1∶1 |
4/4 |
4/4 |
4/4 |
1∶2 |
4/4 |
4/4 |
4/4 |
1∶4 |
4/4 |
4/4 |
4/4 |
*分母为接种胚数,分子为存活胚数。
(2)具体方法
试验I组 每个鸡胚尿囊腔同时接种中药0.2毫升,病毒0.1毫升。
试验II组 每个鸡胚尿囊腔同时接种西药0.2毫升,病毒0.1毫升。
感染对照组 每个鸡胚尿囊腔接种病毒0.1毫升。
生理盐水对照组 每个鸡胚尿囊腔同时接种生理盐水0.2毫升,病毒0.1毫升。
空白对照组 不接种病毒,不给药。
上述鸡胚在37℃恒温箱中继续孵化,每天照蛋2~3次,弃去24小时内死胚,收取72小时内活胚和24~72小时死胚的尿囊液,低温保存备用。以血凝(HA)实验检测鸡胚尿囊液的病毒效价。
(3)中药对鸡新城疫病毒增殖的影响,结果见表3。
表3 中药对鸡新城疫病毒增殖的抑制作用测定结果
分组 |
24小时~72小时死胚数数(×) |
72小时活胚 |
HA效价 |
试验I组试验II组感染对照组生理盐水对照组空白对照组 |
3**7*12130 |
11**5*0014 |
0**4log2*8log27.5log20 |
与感染组比较:*p<0.05,**p<0.01
二、本发明对实验性鸡新城疫的治疗试验
1、试验动物:本试验取35日龄艾维菌肉鸡180只,随机分为6组,每组30只,即发明预防组与治疗组,西药预防组与治疗组,感染对照组,空白对照组。
2、鸡新城疫毒株:由本实验室提供,鸡胚尿囊液的HA效价为9log2。
3、试验方法:
(1)先测定尿囊液最大致死量,通过测定,尿囊液的最大致死量为100倍稀释。
(2)操作空白对照组的鸡不用药,不接种尿囊液,其余5组的鸡在同一时间里每只滴鼻点眼稀释后的尿囊液0.2毫升。
(3)用药时间发明预防组在接种尿囊液的同时,开始用本发明中药口服,每只鸡每次1毫升,每天用药2次,连用5天。发明治疗组在接种尿囊液4天后(出现病状)用药,每只鸡每次1毫升每天用药2次,连用5天。西药预防组在接种尿囊液的同时,开始用0.2毫克/毫升的金刚烷胺口服,每只鸡1毫升,每日2次,连用5天。西药治疗组用0.2毫克/毫升金刚烷胺,在接种尿囊液4天后(出现症状)用药,每只鸡每次1毫升口服,每天2次,连用5天。感染对照组的鸡只接种尿囊液,不用任何药物,结果见表4。
表4 鸡新城疫预防与治疗结果 单位:只·%
编号 |
组别 |
接种数 |
发病数 |
康复数 |
死亡数 |
治愈率 |
1 |
中药预防组 |
30 |
0 |
30 |
0 |
100 |
2 |
中药治疗组 |
30 |
30 |
29 |
1 |
96.6 |
3 |
西药预防组 |
30 |
7 |
21 |
9 |
70 |
4 |
西药治疗组 |
30 |
30 |
19 |
11 |
63.3 |
5 |
感染对照组 |
30 |
30 |
0 |
30 |
/ |
6 |
空白对照组 |
30 |
/ |
30 |
/ |
/ |
三、本发明对鸡新城疫治疗的临床观察
鸡新城疫由新城疫病毒引起的一种急性高度接触性传染病,各种日龄的鸡均可发病,常呈败血症经过,主要特征是呼吸困难、下痢、神经机能紊乱、粘膜和浆膜出血,死亡率高,可造成很大经济损失。用本发明在江苏的徐州市、宿迁市、南通市、盐城市对发病鸡进行药物治疗试验,共治疗病鸡3187只,治愈3077只,死亡110只,治愈率为96.5%。用本发明对鸡新城疫的疗效结果见表5。
表5 鸡新城疫临床疗效结果
单位 |
例数 |
治愈数 |
死亡数 |
治愈率(%) |
墨河乡新段鸡场 |
721 |
685 |
36 |
95 |
刘集乡胡湾鸡场 |
394 |
379 |
15 |
96.2 |
双甸镇东大鸡场 |
453 |
437 |
16 |
96.5 |
三灶镇昌兴鸡场 |
645 |
628 |
17 |
97.4 |
其他养鸡专业户 |
974 |
948 |
26 |
97.3 |
合计 |
3187 |
3077 |
110 |
96.5 |
本发明治疗鸡新城疫数千例,均取得较好疗效,一般治疗2天后停止死亡,3~4天后可治愈,治愈后一般不复发,表明本发明有甚高疗效。
四、鸡痘的治疗
海安县隆政镇德兴鸡场饲养的一群21日龄,体重约450克肉鸡515只,突然发病后用抗生素治疗无效已死亡35只,全群发病率91%。较重病例85只,轻者348只。病鸡食欲减退,精神沉郁,羽毛松乱,皮肤有痘疹,咽喉部有纤维素性坏死性炎症,呼吸困难,死后剖检气管、食道粘膜坏死,肠粘膜有出血点,肝、脾、肾肿大。
治疗方法:重病鸡用本发明每次喂服1毫升,每日2次,连用4天。轻症病鸡用本发明饮水,每公斤水加中药20毫升,连续用药3天,结果见表6。
表6 鸡痘的治疗结果
|
重症病例 |
轻症病例 |
合计 |
治疗数 |
85 |
348 |
433 |
治愈数 |
85 |
348 |
433 |
死亡数 |
0 |
0 |
0 |
治愈率 |
100 |
100 |
100 |
五、纸片法体外抑菌试验
1、药品:取本发明口服液0.5毫升加灭菌生理盐水至10毫升,用直径6毫米的试纸片,浸满药液烘干备用。诺氟沙星、痢菌净、林可霉素、黄连素药敏片购自杭州天和微生物试剂有限公司。
2、菌种:大肠杆菌、巴氏杆菌、金黄色葡萄球菌、链球菌等4种菌种,由本实验室提供。
3、试验方法:将细菌在血清肉汤中培养24小时,取出培养物均匀涂布于血琼脂培养基,将上述纸片分别置于各平皿培养基中,每个样品贴4个,取其平均值,将平皿置于37℃恒温培养箱内培养24小时,取出观察记录各药对细菌的抑菌圈直径(毫米)。其结果见表7。
表7 药敏试验结果单位:毫米
由上表可知,本发明的抑菌效果与诺氟沙星,痢菌净相似,明显高于林可霉素和黄霉素。
六、本发明对其它传染病的疗效见表8。
表8 对其它传染病的疗效统计
病种 |
禽霍乱 |
禽大肠杆菌病 |
鸡法氏囊炎 |
流感 |
葡萄球菌病 |
治疗数 |
1245 |
863 |
945 |
314 |
236 |
治愈 |
1157 |
827 |
884 |
303 |
224 |
未愈数 |
88 |
36 |
61 |
11 |
12 |
治愈数 |
92.9 |
95.8 |
93.5 |
96.4 |
94.9 |
本发明对仔猪白痢,猪肺疫,仔猪水肿病,鸡传染性支气管炎、鸡喉气管炎等均有很好的疗效。
本发明的积极效果是一种纯中药制剂,副作用小,使用安全又方便。使用后不易复发,细菌难以产生耐药性。对病毒与细菌性传染病的治愈率在95%左右,避免了兽药残留和社会无害的发生。