CN1939902A - 新型扁桃酸衍生物及其作为凝血酶抑制剂的用途 - Google Patents

Abstract

本发明提供式(I)化合物及其药学上可接受的衍生物(包括前体药物)，其中R^a、R¹、R²、Y和R³含义见说明书。所述化合物或衍生物用作胰蛋白酶样蛋白酶(例如凝血酶)的竞争性抑制剂或其前体药物，因此，它们特别用于治疗需要抑制凝血酶的疾病(例如血栓形成)或用作抗凝剂。

Description

新型扁桃酸衍生物及其作为凝血酶抑制剂的用途

本申请为一项发明专利申请的分案申请，其母案的申请日为2001年11月30日、申请号为01822316.8(PCT/SE01/02657)、发明名称为“新型扁桃酸衍生物及其作为凝血酶抑制剂的用途”。

技术领域

本发明涉及新型药学有效化合物，特别是胰蛋白酶样丝氨酸蛋白酶、尤其是凝血酶的竞争性抑制剂化合物和/或可代谢为这样的化合物的化合物、它们作为药物的用途、包含所述化合物的药用组合物以及其制备的合成路线。

背景技术

血液凝固是参与止血(即防止血液自损伤血管流失)和血栓形成(即在血管内形成血凝块，有时导致血管阻塞)的关键过程。

血液凝固是一系列复杂酶反应的结果。这一系列反应的最终步骤之一为凝血酶原转化为活化凝血酶。

已知凝血酶在血液凝固中起着重要的作用。它激活血小板，导致血小板聚集，使纤维蛋白原转化为纤维蛋白单体，纤维蛋白单体自发聚合成为纤维蛋白聚合物，而且凝血酶激活因子XIII，因子XIII再交联纤维蛋白聚合物形成不溶性纤维蛋白。此外，凝血酶激活因子V和因子VIII，导致由凝血酶原产生凝血酶的“正反馈”。

预期有效凝血酶抑制剂通过抑制血小板的聚集以及纤维蛋白的形成和交联而具有抗血栓形成活性。此外，预期通过有效抑制正反馈机制加强抗血栓形成活性。

现有技术

Claesson在Blood Coagul.Fibrinol.(1994)5，411中已经介绍了早期开发的低分子量凝血酶抑制剂。

Blomb_ck等(J.Clin.Lab.Invest.24，107增刊，59(1969))报道了基于纤维蛋白原Aα链裂解位点周围的氨基酸序列的凝血酶抑制剂。上述作者提出，在所述氨基酸序列中，三肽序列Phe-Val-Arg(P9-P2-P1，此后称为P3-P2-P1序列)是最有效的抑制剂。

从美国专利第4,346,078号和国际专利申请WO 93/11152中可知道基于在P1-位具有α，ω-氨基烷基胍的二肽基衍生物的凝血酶抑制剂。还有关于类似的结构相关性二肽基衍生物的报道。例如，国际专利申请WO 94/29336公开了在P1-位上具有例如氨基甲基苄脒、环状氨基烷基脒和环状氨基烷基胍的化合物(国际专利申请WO97/23499公开了某些这类化合物的前体药物)；欧洲专利申请0 648 780公开了在P1-位上具有例如环状氨基烷基胍的化合物。

从欧洲专利申请0 468 231、0 559 046和0 641 779中可知道基于肽基衍生物的凝血酶抑制剂，其在P1-位上也具有环状氨基烷基胍(例如3-或4-氨基甲基-1-脒基-哌啶)。

欧洲专利申请0 185 390首次公开了基于在P1-位上具有精氨酸醛的三肽基衍生物的凝血酶抑制剂。

最近，报道了P3位修饰的精氨酸醛型肽基衍生物。例如，国际专利申请WO 93/18060公开了在P3位的羟基酸，欧洲专利申请0 526877公开了在P3位的脱氨基酸以及欧洲专利申请0 542 525公开了在P3位的O-甲基扁桃酸的精氨酸醛型肽基衍生物。

还知道基于在P1位的亲电酮的丝氨酸蛋白酶(例如凝血酶)抑制剂。例如，欧洲专利申请0 195 212公开了P1位的肽基α-酮基酯和酰胺，欧洲专利申请0 362 002公开了P1位的氟代烷基酰胺酮，欧洲专利申请0 364 344公开了P1位的α，β，δ-三酮基化合物以及欧洲专利申请0 530 167公开了P1位精氨酸的α-烷氧基酮衍生物。

从欧洲专利申请0 293 881可知道胰蛋白酶样丝氨酸蛋白酶的其它基于精氨酸及其异硫脲_类似物的碳端硼酸衍生物的结构不同的抑制剂。

最近，欧洲专利申请0 669 317和国际专利申请WO 95/35309、WO 95/23609、WO 96/25426、WO 97/02284、WO 97/46577、WO96/32110、WO 96/31504、WO 96/03374、WO 98/06740、WO 97/49404、WO 98/57932、WO 99/29664和WO 00/35869公开了基于肽基衍生物的凝血酶抑制剂。

具体来说，WO 97/02284和WO 00/42059公开了在P3位具有取代扁桃酸的凝血酶抑制剂。

然而，仍然需要有效的胰蛋白酶样丝氨酸蛋白酶例如凝血酶的抑制剂。还需要具有有利的药物动力学特征并且相对于其它丝氨酸蛋白酶、尤其对参与止血的丝氨酸蛋白酶具有选择性抑制凝血酶的化合物。预期对凝血酶具有竞争性抑制活性的化合物尤其可以用作抗凝血剂，因此用于治疗血栓形成和相关疾病。

发明内容

根据本发明，提供式I化合物或其药学上可接受的衍生物。

其中

R^a为-OH或-CH₂OH；

R¹为至少一个任选卤基取代基；

R²为一个或两个C_1-3烷氧基取代基，该取代基的烷基部分为被一个或多个氟基取代的烷基(即R²为一个或两个氟代烷氧基(C_1-3)基团)；

Y为-CH₂-或-(CH₂)₂-；

R³为式I(i)或I(ii)的结构片段：

其中

R⁴为H或一个或多个氟基取代基；

X₁、X₂、X₃和X₄中的一个或两个为-N-，其余为-CH-。

具体实施方式

术语“药学上可接受的衍生物”包括药学上可接受的盐(例如酸加成盐)。

缩写词列于说明书末尾。式I(i)和I(ii)片段中各键上的波浪线表示该片段的键位。

R¹可能代表的卤基基团包括氟基、氯基、溴基和碘基。为了避免疑义，在表示至少一个任选卤基基团中，R¹可以为不存在(因此被H替代，这样遵守了化合价规则)或者可以表示一个或多个卤基原子。

当R³为其中R⁴为一个或多个氟基取代基的式I(i)的结构片段时，优选式I化合物包括其中R⁴为一个在2位或3位的氟基取代基，或两个在2位和5位、或更优选在2位和6位的氟基取代基的化合物(其中取代基位置由相对于式I(i)结构片段连接到分子其余部分(即连接到-NHCH₂-基团)的连接点来确定)。

当R³为式I(ii)结构片段时，优选式I化合物包括这样的化合物，其中：(a)X₁、X₂、X₃和X₄之一为-N-，其余为-CH-；或者(b)X₁和X₃，或者X₂和X₄都为-N-，其余两个(适当时)为-CH-。

优选式I化合物包括这样的化合物，其中：

R¹为一个氟基、氯基或溴基取代基；

R²为一个或多个氟基取代基取代的C_1-2烷氧基，例如-OCHF₂、-OCF₃-、-OCH₂CF₃、-OCH₂CHF₂、-OCH₂CH₂F或-OCH(CH₂F)₂；

R³为式I(i)结构片段；

R⁴为H。

更优选的式I化合物包括这样的化合物，其中：

R^a为OH；

R¹为一个氯基取代基；

R²为-OCF₃，优选-OCH₂CHF₂，或更优选-OCHF₂或-OCH₂CH₂F。

R¹和R²在式I化合物相应苯基上的优选取代位置包括相对于苯基与分子其余部分的连接点的两个间位(即相对于连接α-或β-羟酸基团的碳原子的3位和/或5位(优选3，5-取代))。

可以列举的式I化合物包括这样的化合物，其中：

R²为一个或两个C_1-2烷氧基取代基，该取代基烷基部分为一个或多个氟基取代基取代的烷基；或者

R²为一个或两个C₃烷氧基取代基，该取代基烷基部分为一个或多个氟基取代基取代的烷基。

式I化合物可以根据本领域众所周知的技术制备，例如下文中介绍的技术。

本发明再一方面提供制备式I化合物的方法，所述方法包括：

(i)使式II化合物，

其中R^a、R¹和R²定义同前，与式III化合物偶合，

其中Y和R³定义同前，例如在偶合剂(例如乙二酰氯的DMF、EDC、DCC、HBTU、HATU、PyBOP或TBTU溶液)、合适的碱(例如吡啶、DMAP、TEA、2，4，6-三甲吡啶或DIPEA)以及适当的有机溶剂(例如二氯甲烷、乙腈、EtOAc或DMF)存在下进行；

(ii)使式IV化合物，

其中R^a、R¹、R²和Y定义同前，与式V化合物偶合，

          R³CH₂NH₂                 V

其中R³定义同前，例如在以上方法(i)中介绍的条件下进行；

(iii)对于制备R¹不存在的式I化合物，还原相应的如下定义的式Ia化合物，其中R⁵为OR⁶，其中R⁵和R⁶如下文定义，例如在合适催化剂(例如承载金属的催化剂如Pd/C(例如10％(w/w)Pd/C))和适当溶剂(例如低级(例如C_1-6)烷醇如乙醇)存在下，并任选在合适酸(例如乙酸)存在下和/或按照Synth.Comm.(1998)4351介绍氢化；或者

(iv)在本领域熟练技术人员已知条件下，如下文定义的式XVIA或XVIB的相应化合物与适当的氨源(例如乙酸铵或氨气)反应，例如使亚氨酸乙酯中间体(由式XVIA或XVIB化合物与HCl(g)在乙醇中反应生成)与氨气在乙醇中反应，或者在Tetrahedron Lett.40，7067(1999)中介绍的条件下反应，因此将以上文献公开的内容通过引用结合到本文(例如对于制备R³为式I(ii)结构片段的式I化合物，其中X₂或X₄为N，使式XVIB的相应化合物与乙酸铵(例如1～30当量乙酸铵)在N-乙酰基半胱氨酸(例如1～30当量N-乙酰基半胱氨酸)和适当溶剂(例如低级烷基(例如C_1-6)醇如甲醇)存在下反应)。

式II化合物可以用已知技术和/或标准技术获得。

例如，R^a为OH的式II化合物可以如下制备：使式VI醛，

其中R¹和R²定义同前，与以下化合物反应：

(a)式VII化合物，

              R”CN              VII

其中R”为H或(CH₃)₃Si，例如在室温或高温(例如100℃以下)，在适当的有机溶剂(例如氯仿或二氯甲烷)存在下，并且如果需要在合适的碱(例如TEA)和/或合适的催化体系(例如苄基氯化铵或碘化锌，或者用手性催化剂，例如Chem.Rev.，(1999)99，3649中介绍的)存在下进行，接着在本领域熟练技术人员熟知的条件下水解(例如下文介绍的条件)；

(b)NaCN或KCN，例如在NaHSO₃和水存在下，接着水解；

(c)氯仿，例如在高温(例如室温以上但低于100℃)，在适当有机溶剂(例如氯仿)存在下，并且如果需要在合适的催化体系(例如苄基氯化铵)存在下进行，接着水解；

(d)式VIII化合物，

其中M为Mg或Li，接着在本领域熟练技术人员熟知的条件下氧化裂解(例如臭氧分解或者锇或钌催化)；或者

(e)三(甲硫基)甲烷，在本领域熟练技术人员熟知的条件下进行，接着在例如HgO和HBF₄存在下水解。

R^a为-CH₂OH的式II化合物可以如下制备：还原式IX化合物，

其中R为C_1-6烷基或C_1-3烷基苯基，R¹和R²定义同前，例如在室温或室温以下，在合适的还原剂(例如硼氢化钠)和适当有机溶剂(例如甲醇、乙醇、THF或其混合物)存在下进行，接着水解所得式IXA中间体托品酸酯，

其中R、R¹和R²定义同前，在本领域熟练技术人员熟知的条件下进行，例如下文的介绍。熟练技术人员理解所述还原和水解步骤可以用一锅法完成，例如下文的介绍。

或者，R^a为-OH的式II化合物可以如下制备：任选保护仲羟基下，对式IXB化合物或其衍生物氧化，

其中R¹和R²定义同前，在合适氧化剂(例如结合合适游离基氧化剂(例如TEMPO)和适当次氯酸盐(例如次氯酸钠))存在下，在本领域熟练技术人员熟知的条件下进行，例如在-10℃和室温之间，在合适溶剂(例如水、丙酮或其混合物)、适当盐(例如碱金属卤化物如溴化钾)和合适的碱(例如碱金属碳酸盐或碳酸氢盐如碳酸氢钠)存在下进行。

R^a为-OH的式II化合物的对映体形式(即对CO₂H基团的α位碳原子的取代基具有不同构型的化合物)可以通过对映体专一性衍生步骤分离。它可以通过例如酶法实现。这样的酶法包括，例如在室温和回流温度之间(例如在45～65℃)，在合适的酶(例如Lipase PSAmano)、合适的酯(例如乙酸乙酯)以及合适的溶剂(例如甲基叔丁醚)存在下，α-OH进行酯交换反应。然后可以用常规分离技术(例如色谱法)将衍生的异构体与未反应的异构体分离。

在所述衍生步骤加入到式II化合物的基团可以在任何进一步反应之前或合成式I化合物的任何阶段除去。附加的基团可以用常规技术除去(例如对于α-OH的酯，可在本领域熟练技术人员熟知的条件下水解(例如在室温和回流温度之间，在合适的碱(例如NaOH)和适当溶剂(例如MeOH、水或其混合物)存在下进行)))。

R^a为-CH₂OH的式II化合物的对映体形式可以用手性色谱技术分离(例如手性HPLC)。

式III化合物可以如下制备：使式X化合物，

其中Y定义同前，与上文定义的式V化合物偶合，例如在本文介绍的制备式I化合物的类似条件下进行。

式IV化合物可以如下制备：使上文定义的式II化合物与上文定义的式X化合物偶合，例如在本文介绍的制备式I化合物的类似条件下进行。

式VI化合物用已知技术和/或标准技术获得。例如它们可以如下制备：

(i)金属化(其中金属可以为例如碱金属，如Li或优选二价金属如Mg)式XI化合物，

其中Hal为选自Cl、Br和I的卤素原子，R¹和R²定义同前，接着进行与合适的甲酰基源(例如N，N-二甲基甲酰胺)反应，例如在下文中介绍的条件下进行；

(ii)在合适的还原剂(例如DIBAL-H)存在下还原式XII化合物，

其中R¹和R²定义同前；或者

(iii)氧化式XIII化合物，

其中R¹和R²定义同前，在合适氧化剂存在下(例如MnO₂、氯铬酸吡啶、DMSO和乙二酰氯的组合，或SO₃吡啶络合物的DMSO溶液)。

式IX化合物可以用相应的乙酸苯酯(例如它可以用相应苯乙酮按照J.Am.Chem.Soc.98，6750(1976)的介绍获得或用相应的苄基氰通过标准水解步骤获得)通过常规技术制备，例如类似于J.Org.Chem.54，3831(1989)介绍的技术和/或下文中介绍的技术。

式IXB化合物可以如下制备：二羟基化相应的式XIIIA化合物，

其中R¹和R²定义同前，在合适的二羟基化试剂(例如提供OsO₄的试剂或试剂混合物，例如AD-mix-α，优选AD-mix-β)存在下，例如在本领域熟练技术人员熟知的条件下，例如在-10℃和室温之间在适当溶剂(例如水、叔丁醇或其混合物)存在下进行。当使用不对称氧化剂例如AD-mix-α或AD-mix-β时，这种方法可用于制备连接伯羟基和仲羟基的两个碳原子的具有特定构型基团(即R或S)的式IXB化合物。

式XIIIA化合物可以如下制备：使上文定义的式XI相应化合物与合适的乙烯基阴离子源(例如三丁基(乙烯基)锡)反应，在本领域熟练技术人员熟知的条件下，例如在室温和回流温度之间(例如50℃)，在适当溶剂(例如甲苯)、适当偶联剂(例如钯(0)配位络合物如四(三苯基膦)钯(0))存在下，并任选在适当催化剂(例如2，6-二叔丁基-4-甲基苯酚)存在下进行。

文献已知的式V、VII、VIII、X、XI、XII和XIII的化合物可以由市售获得或者可以根据标准技术用容易获得的初始原料和适当的试剂及反应条件按本文介绍的类似方法获得或按常规合成步骤获得。式Ia、XVIA及XVIB的化合物可以用下文介绍的方法获得。

根据标准技术，用容易获得的初始原料和适当的试剂及反应条件，可以在式I、II、III、IV、V、VI、IX、IXA、IXB、XI、XII、XIII和XIIIA化合物的苯环上引入和/或用本领域熟练技术人员熟知的技术通过标准官能团相互转化得到取代基。

例如，式I、II、IV、VI、IXA、XI、XII和XIII的化合物可以分别用式XIVA、XIVB、XIVC、XIVD、XIVE、XIVF、XIVG和XIVH的相应化合物制备，

其中R^a、R、R¹、R³、Y和Hal(适当时)定义同前，例如：

(a)使其与相应的氟化卤代烷(例如氟化氯代烷)反应，例如在室温或以上(例如在回流温度)，在合适的碱(例如叔丁醇钾、KOH或NaOH，例如其水溶液)和适当有机溶剂(例如THF、氯仿或异丙醇)存在下进行；或

(b)使其与式XIVJ、R^xS(O)₂OR^yXIVJ的化合物反应，其中R^x为C_1-4烷基、C_1-4全氟烃基或苯基(任选被甲基、硝基或卤素取代)，R^y为CH₂CF₃、CH₂CHF₂、CH₂CH₂F或CH(CH₂F)₂，例如在合适的碱(例如K₂CO₃)和适当溶剂(例如DMF)存在下进行，

例如在下文所述的两种情况下。

熟练技术人员能够理解这些官能团转化也能够在式II、IV、VI、IXA、XI、XII和XIII化合物的整个合成法的早期阶段进行(即分别在式XIVB、XIVC、XIVD、XIVE、XIVF、XIVG和XIVH的适当前体上进行)。

文献中已知的式XIVA、XIVB、XIVC、XIVD、XIVE、XIVF、XIVG、XIVH和XIVJ的化合物也可由市售获得或者可以根据标准技术用容易获得的初始原料和适当的试剂及反应条件按本文介绍的类似方法获得或按常规步骤获得。例如可以在标准条件下脱去相应苯酚的保护获得式XIVA、XIVB、XIVC、XIVD、XIVE、XIVF、XIVG和XIVH的化合物(其中保护基团可以为例如甲基、烯丙基、苄基或叔丁基)。此外，R¹为一个氯基取代基的式XIVD化合物可以用二卤代或三卤代苯获得(例如1-Br、3-Cl、5-F-苯，用甲氧基取代氟原子(例如使其与NaOMe在1-甲基-2-吡咯烷酮/甲醇中于高温反应)，用甲酰基置换溴(例如按照下文中介绍的式VI化合物的制备方法)，然后脱甲基化(例如用PhSH的1-甲基-2-pyrollidinone在K₂CO₃存在下进行))。

同样，R¹不存在的式I化合物可以如下制备：用相应的R¹为卤基(例如氯代)的式I化合物(或其合适的前体化合物)，例如在本领域熟练技术人员熟知的条件下氢化。

可以用常规技术将式I化合物从它们的反应混合物中分离。

根据本发明，式I化合物的药学上可接受的衍生物也包括式I化合物的“被保护”的衍生物和/或作为前体药物的化合物。

可以列举可作为式I化合物的前体药物的化合物包括式Ia化合物及其药学上可接受的衍生物，

其中R^3a为式I(iii)或I(iv)的结构片段：

其中R⁵为OR⁶或C(O)OR⁷；

R⁶为H、C_1-10烷基、C_1-3烷基芳基或C_1-3烷氧基芳基(后两个基团的烷基部分任选被一个或多个氧原子隔断，后两个基团的芳基部分任选被一个或多个选自卤基、苯基、甲基或甲氧基的取代基取代，后三个基团也任选被一个或多个卤基取代基取代)；

R⁷为C_1-10烷基(后面的基团任选被一个或多个氧原子隔断)、C_1-3烷基芳基或C_1-3烷氧基芳基(后两个基团的烷基部分任选被一个或多个氧原子隔断，后两个基团的芳基部分任选被一个或多个选自卤基、苯基、甲基或甲氧基的取代基取代，后三个基团也任选被一个或多个卤基取代基取代)；

R^a、R¹、R²、Y、R⁴、X₁、X₂、X₃和X₄定义同前。

术语式Ia化合物的“药学上可接受的衍生物”包括药学上可接受的盐(例如酸加成盐)。

式I(iii)和I(iv)片段中各键上的波浪线表示该片段的键位。

R⁶和R⁷可能表示的烷氧基芳基包括由氧原子连接的烷基和芳基。烷基芳基和烷氧基芳基通过这些基团的烷基部分连接到分子的其余部分，该烷基部分可以(如果有足够数量(即3个)碳原子)为支链。R⁶和R⁷可能表示或被其取代的烷基芳基和烷氧基芳基的芳基部分包括碳环和杂环的芳族基团，例如苯基、萘基、吡啶基、_唑基、异_唑基、噻二唑基、吲哚基和苯并呋喃基等。

R⁶和R⁷可能表示的烷基可以为直链，或当有足够碳原子(即最少三个)时，可以为支链和/或环状。更进一步地讲，当有足够碳原子(即最少四个)时，所述烷基还可以为部分环状/开链。所述烷基还可以为饱和基团或当有足够碳原子(即最少两个)时为不饱和基团。

可能取代R⁶和R⁷的卤基基团包括氟基、氯基、溴基和碘基。

当R⁵为C(O)OR⁷时，优选的R⁷包括：

(a)直链、支链或环状C_3-6烷基，例如C_4-6环烷基；

(b)C_1-2烷基芳基，例如苄基，任选如前述被取代。

优选的式Ia化合物包括其中R⁵为OR⁶的化合物。

当R⁵为OR⁶时，优选的R⁶基团包括：

(a)H；

(b)未取代的直链、支链或环状C_1-8(例如C_1-6)烷基，例如直链C_1-3烷基(例如乙基，优选甲基)、支链C_3-8烷基(例如异丙基、异丁基或4-庚基)或环状C_4-7烷基(即C_4-7环烷基，例如环丁基或环己基)；

(c)C_1-3烷氧基苯基(例如C₂烷氧基苯基)，其中苯基任选被一个或多个上述取代基取代(例如三氟甲基)；

(d)C_1-2烷基芳基(例如甲基芳基)，其中芳基为苯基、吡啶基、_唑基或异_唑基，后三个基团任选被一个或多个上述取代基取代(例如甲氧基、甲基、溴基和/或氯基)。

优选的式Ia化合物包括R⁵为OR⁶的化合物，其中R⁶为直链、支链(适当时)或环状(适当时)、C_1-6(例如C_1-4)烷基，例如甲基、乙基、正丙基、异丙基或环丁基。

式Ia化合物可以用如下的一种或多种方法制备：

(a)使上文定义的相应式II化合物与式XV化合物反应，

其中Y和R^3a定义同前，例如在上文介绍的用于合成式I化合物的类似条件下进行；

(b)使上文定义的相应式IV化合物与式XVI化合物反应，

R^3aCH₂NH₂                        XVI

其中R^3a定义同前，例如在上文介绍的用于合成式I化合物的类似条件下进行；

(c)对于制备R⁵为OH的式Ia化合物，使相应的式XVIA或XVIB化合物与羟胺反应，

其中R^a、R¹、R²、R⁴、Y、X₁、X₂、X₃和X₄定义同前，例如在本领域熟练技术人员熟知的条件下进行；

(d)对于制备R⁵为OR⁶的式Ia化合物，使相应式I化合物的保护衍生物，衍生物是例如式XVII化合物，

其中R^3b为式I(v)或I(vi)的结构片段或其互变异构体：

其中R^b为例如-CH₂CH₂-Si(CH₃)₃或苄基，R^a、R¹、R²、Y、R⁴、X₁、X₂、X₃和X₄定义同前，与式XVIII化合物或其酸加成盐反应，

R⁶ONH₂             XVIII

其中R⁶定义同前，例如在室温和回流温度之间，在适当有机溶剂(例如THF、CH₃CN、DMF或DMSO)存在下进行，接着在本领域熟练技术人员熟知的条件下(例如使其与QF或TFA反应(例如按照下文所述))除去-C(O)OR^b；

(e)对于制备R⁵为OH的式Ia化合物，使上文定义的式XVII化合物，其中R^b为苄基，与羟胺或其酸加成盐反应，例如在本领域熟练技术人员熟知的条件下进行；

(f)对于制备R⁵为COOR⁷的式Ia化合物，使相应的上文定义的式I化合物与式XIX化合物反应，

L¹COOR⁷                XIX

其中L¹为合适的离去基团，例如卤代或硝基苯基(例如4-硝基苯基)，R⁷定义同前，例如在室温或室温附近，在合适的碱(例如NaOH，例如其水溶液)和适当有机溶剂(例如二氯甲烷)存在下进行；或者

(g)对于制备R⁵为OCH₃或OCH₂CH₃的式Ia化合物，使R⁵为OH的相应式Ia化合物分别与硫酸二甲酯或硫酸二乙酯反应，例如在合适碱(例如碱金属氢氧化物如KOH(例如其水溶液，例如为50wt.％))和合适的催化剂(例如季铵卤化物如苄基三甲基氯化铵(例如在CH₂Cl₂或THF溶液中，例如为10wt.％))存在下进行。

式I(v)和I(vi)片段中各键上的波浪线表示该片段的键位。

式XVIA和XVIB的化合物可以如下制备：使上文定义的相应式II化合物与式XIXA或XIXB化合物反应，

其中R⁴、Y、X₁、X₂、X₃和X₄定义同前，例如在上文介绍的用于合成式I化合物的类似条件下进行。

或者，式XVIA和XVIB的化合物可以如下制备：使上文定义的相应式IV化合物与式XIXC或XIXD化合物反应，

其中R⁴、X₁、X₂、X₃和X₄定义同前，例如在上文介绍的用于合成式I化合物的类似条件下进行。

式XVII化合物可以如下制备：使上文定义的式II化合物与式XX化合物反应，

其中Y和R^3b定义同前，例如在上文介绍的用于合成式I化合物的类似条件下进行。

或者，式XVII化合物可以如下制备：使相应的式I化合物与式XIX化合物的相应化合物(其中基团R^b替代了R⁷，R^b定义同前)反应，例如在上文介绍的有关合成式Ia化合物的条件下进行。

式XV和XX的化合物可以如下制备：上文定义的相应式X化合物分别与上文定义的式XVI化合物或式XXI化合物反应，

R^3bCH₂NH₂                      XXI

其中R^3b定义同前，例如在上文介绍的用于合成式I化合物的类似条件下进行。

文献已知的式XVI、XVIII、XIX、XIXA、XIXB、XIXC、XIXD和XXI化合物可以由市售获得或者可以根据标准技术用容易获得的初始原料和适当的试剂及反应条件按本文介绍的类似方法获得或按常规步骤获得。例如，式XIXA和XIXB的化合物可以如下制备：使相应的式XIXC或XIXD(适当时)化合物与式X化合物反应，例如在上文介绍的类似条件下进行。

如上定义的式I和Ia化合物以及它们的衍生物在下文称为“本发明化合物”。

因此，本发明优选的化合物包括下文介绍的实施例的化合物。在这方面，可以列举的本发明化合物包括：

1  Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab；

2  Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OMe)；

3  Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OEt)；

4  Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OnPr)；

5  Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OiPr)；

6  Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OcBu)；

7  Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OH)；

8  Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(COO环戊基)；

9  Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(Z)；

10 Ph(3-Cl)(5-OCF₃)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab；

11 Ph(3-Cl)(5-OCF₃)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OMe)；

12 Ph(3-Cl)(5-OCF₃)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OCH₂-3-(5-Me-异_

   唑))；

13 Ph(3-Cl)(5-OCF₃)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OCH₂-3-吡啶)；

14 Ph(3-Cl)(5-OCF₃)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OiBu)；

15 Ph(3-Cl)(5-OCF₃)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OEt)；

16Ph(3-Cl)(5-OCF₃)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OBn)；

17 Ph(3-Cl)(5-OCF₃)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(O环己基)；

18 Ph(3-Cl)(5-OCF₃)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OcBu)；

19 Ph(3-Cl)(5-OCF₃)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OCH₂CH₂OPh(3-CF₃))；

20 Ph(3-Cl)(5-OCF₃)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OBn(4-Cl))；

21 Ph(3-Cl)(5-OCF₃)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OBn(3-MeO))；

22 Ph(3-Cl)(5-OCF₃)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OBn(2-Br))；

23 Ph(3-Cl)(5-OCF₃)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OBn(4-Me))；

24 Ph(3-Cl)(5-OCF₃)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(O-4-庚基)；

25 Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(S)CH(CH₂OH)C(O)-Aze-Pab；

26 Ph(3-Cl)(5-OCF₃)-(S)CH(CH₂OH)C(O)-Aze-Pab；

27 Ph(3-Cl)(5-OCF₃)-(S)CH(CH₂OH)C(O)-Aze-Pab(OMe)；

28 Ph(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab；

29 Ph(5-OCF₃)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab；

3O Ph(3-Cl)(5-OCH₂CF₃)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab；

31 Ph(3-Cl)(5-OCH₂CF₃)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OMe)；

32 Ph(3-Cl)(5-OCH₂CHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab；

33 Ph(3-Cl)(5-OCH₂CHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OMe)；

34 Ph(3-Cl)(5-OCH₂F)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab；

35 Ph(3-Cl)(5-OCH₂F)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OMe)；

36 Ph(3-Cl)(5-OCH₂CH₂F)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab；

37 Ph(3-Cl)(5-OCH₂CH₂F)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OMe)；

38 Ph(3-Cl)(5-OCH(CH₂F)₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab；

39 Ph(3-Cl)(5-OCH(CH₂F)₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OMe)；

40 Ph(3-F)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab；

41 Ph(3-F)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OMe)；

42 Ph(3-Br)(5-OCH₂F)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab；

43 Ph(3-Br)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab；

44 Ph(3-Br)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OMe)；

45 Ph(3-Cl，5-OCH₂CHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OH)；

46 Ph(3-Cl，5-OCH₂CH₂F)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OH)；

47 Ph(3-Cl，5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Pro-Pab；

48 Ph(3-Cl，5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Pro-Pab(OMe)；

49 Ph(3-Cl，5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-NH-CH₂-((2-脒基)-5-吡啶

   基)；

50 Ph(3-Cl，5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-NH-CH₂-((2-甲氧基脒

   基)-5-吡啶基)；

51 Ph(3-Cl，5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-NH-CH₂-((5-脒基)-2-嘧啶

   基)；

52 Ph(3-Cl，5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-NH-CH₂-((5-甲氧基脒

   基)-2-嘧啶基)；

53 Ph(3-Cl，5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(3-F)；

54 Ph(3-Cl，5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(2，6-diF)；

55 Ph(3-Cl，5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(2，6-diF)(OMe)；

56 Ph(3-Cl，5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(2，5-diF)；

57 Ph(3-Cl，5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(2，5-diF)(OMe)。

本发明化合物可能具有互变异构现象。所有的互变异构形式及其混合物都包括在本发明范围内。可以列举的特别互变异构体形式包括与式Ia化合物中脒官能团的双键位置以及取代基R⁵的位置相关的互变异构体。

本发明化合物还包括两个或多个不对称碳原子。因此，可能具有旋光性和/或非对映异构体现象。非对映异构体可以用常规技术如色谱法分离。各种立体异构体可以用常规技术如HPLC技术分离所述化合物的外消旋混合物或其它混合物得到。或者所需要的旋光性异构体可以如下制备：用适当的旋光性初始原料在不引起外消旋作用或差相异构作用下反应获得，或者通过衍生作用获得，例如用纯手性酸衍生后用常规技术(例如HPLC、二氧化硅色谱法)分离非对映异构体衍生物。所有立体异构体都包括在本发明范围内。

本发明化合物优选其中以下片段

为S-构型的化合物。

优选的本发明化合物包括当R^a为-OH时，以下结构片段

为R-构型的化合物，或者当R^a为-CH₂OH时，该片段为S-构型的化合物。

以上两片段中各键上的波浪线表示该片段的键位。

可以列举的本发明化合物包括Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-CH(OH)C(O)-Aze-Pab(其中在这时候Aze表示氮杂环丁烷-2-羧酸酯(即为(R)-和/或(S)-构象)，以及等效化合物，其中Pab中脒基单元的氢原子由基团-OR⁶(如上文定义)替代，其中R⁶为C_1-3烷基(即Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OMe)、Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OEt)、Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OnPr)或Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OiPr))。还可以列举的本发明化合物包括不是前面句子中指出的具体化合物的那些化合物。

本领域熟练技术人员能够理解在上下文中介绍的方法中可能需要用保护基团保护中间体化合物的官能团。

需要保护的官能团包括羟基、氨基和羧酸。羟基的合适保护基团包括任选取代和/或不饱和的烷基(例如甲基、烯丙基、苄基或叔丁基)、三烷基甲硅烷基或二芳基烷基甲硅烷基(例如叔丁基二甲硅烷基、叔丁基二苯基甲硅烷基或三甲硅烷基)和四氢吡喃基。羧酸的合适保护基团包括C_1-6烷基酯或苄基酯。氨基和脒基的合适保护基团包括叔丁氧基羰基、苄氧基羰基或2-三甲硅烷基乙氧基羰基(Teoc)。脒基氮还可以用羟基或烷氧基保护，可以为单或双保护。

官能团保护作用和去保护作用可以在偶联前或偶联后进行，或者可以在上述反应流程的任何其它反应之前或之后进行。

保护基团可以根据本领域熟练技术人员熟知的技术或下文所述技术除去。

本领域熟练技术人员能够理解为了以替代的并且某些情况下更方便的方法获得本发明化合物，上述的各个加工步骤可以按不同秩序进行并且/或各个反应可以在整个合成路线的不同阶段进行(即结合特定反应在上述不同中间体上加入取代基和/或在上面进行化学转化)。这可能排除或增加对保护基团的需要。

涉及的化学过程类型将决定保护基团的需要和类型以及完成合成的顺序。

保护基团的使用在以下文献中有完整的介绍：“Protective Groupsin Organic Chemistry”，主编JWF McOmie，Plenum Press(1973)，“Protective Groups in Organic Synthesis”，第三版，T.W.Greene &P.G.M.Wutz，Wiley-Interscience(1999)。

本发明化合物的被保护衍生物可以用化学方法转化为本发明化合物，使用标准去保护技术(例如氢化)。本领域熟练技术人员也能够理解某些式Ia化合物也可以称为式I化合物的“被保护衍生物”。

医药用途

本发明化合物本身可具有药理活性。可具有所述活性的本发明化合物包括(但不限于)式I化合物。

然而，本发明其它化合物(包括式Ia化合物)可能不具有所述活性，但可以胃肠外或口服给予，此后在体内代谢形成药理活性化合物(包括但不限于相应的式I化合物)。这类化合物(也包括可能具有部分药理活性，但该活性明显低于它们代谢产生的“活性”化合物活性)因此可以称作所述活性化合物的“前体药物”。

因此，本发明化合物是有用的，因为它们具有药理活性和/或口服或胃肠外给药后在体内代谢形成具有药理活性的化合物。因此，本发明化合物适合用作药物。

因此，本发明再一方面提供用作药物的本发明化合物。

具体来说，本发明化合物本身是有效的凝血酶抑制剂和/或(例如在前体药物的情况下)在给药后代谢形成有效的凝血酶抑制剂，例如其可以在以下所述试验中得到证实。

所谓“凝血酶抑制剂的前体药物”包括在口服或胃肠外给药(参见例如下述试验E)后或其在存在肝微粒体下温育后(参见下述试验G)，在预定的时间(例如约1小时)内形成实验可检测量的凝血酶抑制剂的化合物。

因此，预期本发明化合物可用于需要抑制凝血酶的疾病和/或适合抗凝剂治疗的病症，包括：

治疗和/或预防动物包括人类的血液和/或组织中的血栓形成和高凝固性。已知高凝固性可以导致血栓栓塞性疾病。可以列举的高凝固性相关性病症和血栓栓塞性疾病包括遗传性或获得性激活蛋白C抗性例如因子V-突变(因子V Leiden)以及抗凝血酶III、蛋白C、蛋白S或肝素辅因子II遗传性或获得性缺陷。其它已知高凝固性相关性病症和血栓栓塞性疾病包括循环抗磷脂抗体(Lupus抗凝剂)、高半胱氨酸血症(homocysteinemi)、肝素性血小板减少症和纤维蛋白溶解缺陷以及凝固综合征(例如弥散性血管内凝血(DIC))和普通血管损伤(例如外科手术引起的血管损伤)。

治疗存在不需要的过量凝血酶而无高凝固性迹象的病症，例如神经变性疾病例如阿耳茨海默氏病存在的这种情况。

可以列举的具体病症包括治疗性和/或预防性治疗静脉血栓形成(例如DVT)和肺栓塞、动脉血栓形成(例如心肌梗塞、不稳定性心绞痛、血栓形成性中风和外周动脉血栓形成)以及通常房颤时缘自心房或跨壁心肌梗塞后缘自左心室或者充血性心力衰竭引起的系统性栓塞；预防血栓溶解、经皮经腔血管成形术(PTA)和冠脉旁路手术后的再阻塞(即血栓形成)；防止在显微手术和普通血管手术后再次血栓形成。

其它适应症包括治疗性/或预防性治疗细菌、多发性损伤、中毒或任何其它机制引起的弥散性血管内凝血；当血液与体内的外源性表面例如血管移植物、血管移植片固定膜(stent)、血管导管、机械和生物性修复瓣膜或任何其它医疗装置接触时的抗凝处理；当血液与体外医疗装置例如在心血管手术期间使用心-肺机或血液透析时的抗凝处理；治疗性和/或预防性治疗特发性成人呼吸窘迫综合征、放疗或化疗后的肺纤维化、败血症性休克、败血症、炎性反应(包括但不限于水肿)、急性或慢性动脉粥样硬化例如冠状动脉疾病及形成动脉硬化斑、脑动脉疾病、脑梗塞、脑血栓形成、脑栓塞、外周动脉疾病、局部缺血、心绞痛(包括不稳定性心绞痛)、再灌注损伤、经皮经腔血管成形术(PTA)和冠状动脉旁路搭桥术后再狭窄。

抑制胰蛋白酶和/或凝血酶的本发明化合物也可以用于治疗胰腺炎。

因此，本发明化合物适用于治疗性和/或预防性治疗上述病症。

本发明再一方面提供治疗需要抑制凝血酶的病症的方法，该方法包括给予患有或者易患所述病症的病人治疗有效量的本发明化合物。

本发明化合物一般以药用制剂通过口服、静脉内、皮下、口腔含化、直肠、经皮、鼻腔、气管、支气管、任何其它胃肠外途径或吸入给药，所述药用制剂包含本发明化合物游离碱或药学上可接受的无毒性有机酸或无机酸加成盐，所述药用制剂为药学上可接受的剂型。

本发明化合物的优选用药途径是口服。优选的药用制剂包括含本发明化合物的改进释放药用组合物。本领域熟练技术人员充分了解本文使用的术语“改进释放”药用组合物包括经过格林处理改变了药物(即本发明化合物)开始释放和/或释放速率的任何组合物，因此包括在美国药典(USP XXII)前言/引言部分第xliii和xliv页提供的定义，该文献中相关公开内容通过引用结合到本文。

因此，熟练技术人员可以根据标准药学技术制备适当的改进释放制剂(参见例如，Pharmaceutisch Weekblad Scientific Edition，6，57(1984)；Medical Applications of Controlled Release，Vol II，主编Langer和Wise(1984)Bocaraton，Florida，第1-34页；Industrial Aspectsof Pharmaceuticals，主编Sandel，Swedish Pharmaceutical Press(1993)，第93-104页；“Pharmaceutics：The Science of Dosage Form Design”，第191-211页，主编M.E.Aulton(1988)(Churchill Livingstone))。

因此优选的改进释放制剂包括合适的本发明化合物包含在聚合物基质中的改进释放制剂。在这方面，我们优选的含本发明化合物的制剂以所谓的“膨胀”改进释放体系或“凝胶基质”改进释放体系形式口服，改进释放体系中本发明化合物与在水溶液介质中膨胀的聚合物(即系水性凝胶组分)一起提供。

我们特别优选将本发明化合物与包含τ-角叉菜胶以及一种或多种中性凝胶聚合物的凝胶基质组合物一起配制。

所述优选制剂的τ-角叉菜胶含量优选15％(重量)以上。优选的τ-角叉菜胶等级包括药用等级τ-角叉菜胶(FMC Biopolymer)，其粘度不小于5厘泊(cps)、优选5-10cps(将1.5％的溶液加热至82℃，其后用配置#1转轴的Brookfield LV粘度计，以转速30rpm在75℃测定粘度)；工业级τ-角叉菜胶(Fluka Biochemica)，优选其粘度不小于14mPa.s，将0.3％水溶液加热至20℃，其后用Haake型落球粘度计测定粘度，同时使用Lauda恒温器C3和Hakke Mess-System III，镀金不锈钢球密度7.8g/cm³。

中性凝胶聚合物可以为单一中性可侵蚀聚合物或者一种以上中性可侵蚀聚合物的混合物，中性可侵蚀聚合物具有凝胶性质以及基本不依赖于pH的溶解性。制剂中中性凝胶聚合物含量优选为10％(重量)以上、更优选20％(重量)以上。

合适的中性凝胶聚合物包括聚氧化乙烯(PEO)，PEO系列衍生物以及组分(例如，适当分子量或粘度的聚乙二醇(PEG)，优选天然固体状态)。如果用单一中性凝胶聚合物，PEO优选MW≥4百万(4M)，等于水溶液粘度1650-5500mPa.s(或1650-5500cps；用Brookfield RVF粘度计，第2号转轴，2rpm，测试25℃的1％水溶液)。合适PEO的其它实例包括MW约5百万(5M)、相应水溶液粘度5500-7500mPa.s的PEO，或者MW约8百万(8M)、相应水溶液粘度10000-15000mPa.s的PEO。该范围值包括该聚合物在25℃检测的典型溶液粘度值(cps)，参见USP 24/NF 19，2000版，pp.2285-2286。如果PEG用作单一中性凝胶聚合物，优选具有高分量例如MW约20000，相应的粘度2700-3500mPa.s(或2700-3500cps)，用毛细管粘度计(Ubbelohde或等效设备在20℃用50％水溶液(w/w)测得)。[参考：EuropeanPharmacopoeia第三版，2000，Supplement，pp.908-909]。

其它合适凝胶聚合物包括具有适当的高粘度的纤维素衍生物例如羟基丙基甲基纤维素(HPMC)或羟基乙基纤维素(HEC)(例如“HPMC10000cps”、“HPMC 15000cps”、“HH型HEC”或“H型HEC”)。当用作单一中性聚合物时，羟基丙基甲基纤维素聚合物如“HPMC10000cps”和“HPMC 15000cps”分别具有表观粘度7500-14000mPa.s(或7500-14000cps)和11250-21000mPa.s(或11250-21000cps)，所得粘度在20℃用2％(w/w)水溶液测定，根据干物质计算，使用毛细管粘度计(Ubbelohde或等效设备)。一种类型的羟基乙基纤维素聚合物，例如“Natrosol 250 Pharma，HH型”，购自HerculesIncorporated(Aqualon)，通常具有Brookfield粘度约20,000mPa.s，检测使用Brookfield Synchro-Lectric Model LVF仪，检测条件为：1％溶液浓度，第4号转轴，转轴转速30rpm，系数200，25℃(参见NatrosolPhysical and Chemical Properties booklet，33.007-E6(1993)，p.21)。

可以列举的具体制剂包括将本发明化合物与50∶50(wt％)比例的τ-角叉菜胶和HPMC(10,000cps)配制的制剂，或者与50∶50(wt％)比例的τ-角叉菜胶和PEO 4M配制的制剂。

所述制剂中其它优选赋形剂包括润滑剂例如硬酯酰延胡索酸钠。

根据所治疗的疾病、患者和给药途径，可以给予不同剂量的所述组合物。

本发明化合物也可以与任何具有不同作用机制的抗血栓形成药物联合和/或同时给药，例如一种或多种以下药物：抗血小板药物乙酰水杨酸、噻氯匹定、氯吡格雷；血栓烷受体和/或合成酶抑制剂；纤维蛋白原受体拮抗剂；前列环素模拟物；磷酸二酯酶抑制剂；ADP-受体(P₂T)拮抗剂；羧肽酶U(CPU)抑制剂。

本发明化合物还可以与血栓溶解剂联合和/或同时给药，例如一种或多种组织纤溶酶原激活物(天然、重组或修饰组织纤溶酶原激活物)、链激酶、尿激酶、尿激酶原、茴香酰化纤溶酶原-链激酶激活物复合物(APSAC)、动物唾腺纤溶酶原激活物等，其目的是治疗血栓形成疾病、尤其是心肌梗塞。

因此，本发明再一方面提供包含本发明化合物和药学上可接受的辅助剂、稀释剂或载体的药用制剂。

本发明化合物治疗性治疗人的合适日剂量经口用药为约0.001-100mg/kg体重，经胃肠外用药为0.001-50mg/kg体重。

为了避免疑义，本文使用的术语“治疗”包括治疗性和/或预防性治疗。

本发明化合物与现有技术的已知化合物相比具有以下优点：更好效果、更小毒性、更长作用时间、更宽活性范围、更有效、产生更少副作用、更容易吸收和/或更佳的药动学特征(例如更高的口服生物利用率和/或较低的清除率)以及/或具有其它更有效的药理学性质、物理或化学性质。本发明化合物与现有技术的已知化合物相比可具有的进一步优势是它们的用药频率可以更低。

生物学试验

可以使用下列试验方法。

试验A

测定凝血酶凝固时间(TT)

将抑制剂溶液(25μl)与血浆(25μl)温育3分钟。然后，加入人凝血酶(T 6769；Sigma Chem.Co.或Hematologic Technologies)缓冲溶液，pH7.4(25μl，4.0NIH单位/ml)，用自动装置(KC 10；Amelung)测定凝固时间。

凝血酶凝固时间(TT)表示为绝对值(秒)以及不含有抑制剂的TT(TT₀)与含有抑制剂的TT(TT_i)的比值。将比值(范围1-0)对抑制剂浓度(log转换)作图，根据以下方程式拟合为S形剂量-反应曲线：

               y＝a/[1+(x/IC₅₀)^s]

其中：a＝最大范围，即1；s＝剂量-反应曲线的斜率；IC₅₀＝凝固时间倍增的抑制剂浓度。在PC上使用GraFit第3版的软件程序进行计算，设定方程等于：0开始，规定结束＝1(Erithacus Software，RobinLeatherbarrow，Imperial College of Science，London，UK)。

试验B

采用生色自动测试测定对凝血酶的抑制作用

采用生色底物方法，在Plato 3300自动微量滴定板处理器(RosysAG，CH-8634 Hombrechtikon，Switzerland)上，使用96孔半体积微量滴定板(Costar，Cambridge，MA，USA；目录号3690)测定凝血酶抑制剂的效能。采用DMSO以1∶3(24+48μl)系列稀释试验物质在DMSO(72μl)中的贮备液(0.1-1mmol/L)得到十种不同的浓度，其作为本测试中的分析样品。用124μl测试缓冲液稀释2μl的试验样品，加入12μl生色底物在测试缓冲液中的溶液(S-2366，Chromogenix，Mǒlndal，Sweden)和最后加入12μl α-凝血酶在测试缓冲液中的溶液(人α-凝血酶，Sigma Chemical Co.或Hematologic Techmologies)，混合样品。最终测试浓度为：试验物质0.00068-13.3μmol/L，S-2366 0.30mmol/L，α-凝血酶0.020NIHU/ml。使用在37℃的40分钟温育期间线性吸光度递增计算与无抑制剂的空白对比的试验样品的百分抑制率。根据log浓度与％抑制率曲线计算相当于引起凝血酶活性抑制50％的抑制剂浓度的IC₅₀-自动测定值。

试验C

测定对人凝血酶的抑制常数Ki

使用生色底物方法，于37℃在Cobas Bio离心分析仪(Roche，Basel，Switzerland)上完成Ki测定。三种不同底物浓度下，测定在人α-凝血酶与不同浓度试验化合物温育后残余酶活性，测定结果以405nm吸光度变化表示。

将试验化合物溶液(100μl；通常为含有BSA 10g/L的缓冲液或盐水)与200μl人α-凝血酶(Sigma Chemical Co)在含有BSA(10g/L)的测试缓冲液(0.05mol/L Tris-HCl pH7.4，用氯化钠调节离子强度为0.15)中混合，用Cobas Bio分析样品。将60μl样品以及20μl水加入到320μl的测试缓冲液中的底物S-2238(Chromogenix AB，Molndal，Sweden)中，监测吸光度变化(ΔA/分钟)。S-2238的最终浓度为16、24和50μmol/L，凝血酶的最终浓度为0.125NIHU/mL。

使用稳定态反应速率构建Dixon曲线即抑制剂浓度与1/(ΔA/分钟)的曲线图。对于可逆竞争性抑制剂而言，不同底物浓度的数据点一般形成直线，其在x处的截距为-Ki。

试验D

测定活化部分凝血活酶时间(APTT)

用Stago生产的试剂PTT Automated 5测定收集的正常人含枸缘盐血浆APTT。将所述抑制剂加入到血浆(10μl抑制剂溶液与90μl血浆)中，与APTT试剂温育3分钟，然后加入100μl氯化钙溶液(0.025M)，使用血液凝固分析仪KC10(Amelung)根据试剂制造商的说明测定APTT。

凝固时间表示为绝对值(秒)以及不加抑制剂的APTT(APTT₀)与加入抑制剂的APTT(APTT_i)的比值。将比值(范围1-0)对抑制剂的浓度(log转换)作图，根据以下方程拟合为S形剂量-反应曲线：

                 y＝a/[1+(x/IC₅₀)^s]

其中：a＝最大范围，即1；s＝剂量-反应曲线的斜率；IC₅₀＝凝固时间倍增的抑制剂浓度。使用GraFit第3版的软件程序在PC上进行计算，设定方程等于：0开始，规定结束＝1(Erithacus Software，RobinLeatherbarrow，Imperial College of Science，London，UK)。

IC₅₀APTT定义为活化部分凝血活酶时间倍增的人血浆抑制剂浓度。

试验E

测定活体外凝血酶时间

检测清醒大鼠在口服或胃肠外给予溶解在乙醇∶Solutol^TM∶水(5∶5∶90)中的本发明化合物后对凝血酶的抑制作用，大鼠在实验前一或两天安放导管，以便从颈动脉采血。在实验的当天，在给予化合物后的固定时间采取血样到含有1份柠檬酸钠溶液(0.13mol/L)和9份血的塑料试管中。将试管离心获得血小板极少的血浆。

50μL血浆样品用100μL冷乙腈沉淀。样品以4000rpm离心10分钟。75μL上清液用75μL 0.2％甲酸稀释。取10μL体积获得的溶液通过LC-MS/MS分析，利用标准曲线确定凝血酶抑制剂浓度。

试验F

测定大鼠血浆清除率

测定雄性Sprague Dawley大鼠的血浆清除率。将化合物溶于水中，以4μmol/kg剂量皮下快速注射给药。给药后频繁收集血样长达5小时。离心血样，分离血浆与血细胞，将血浆转移至含枸缘盐(终浓度10％)的小瓶中。用100μL冷乙腈沉淀50μL血浆样品。样品以4000rpm离心10分钟。用75μL 0.2％甲酸稀释75μL上清液。取10μL体积获得的溶液通过LC-MS/MS分析，利用标准曲线确定凝血酶抑制剂浓度。利用对数/线性梯形规则计算血浆浓度-时间曲线下面积，外推至无穷时间。然后如下计算化合物的血浆清除率(CL)：

CL＝剂量/AUC

数值报告为mL/min/kg。

试验G

测定体外稳定性

从Sprague-Dawley大鼠制备肝微粒体，按照内部SOP制备人肝样品。在辅助因子NADH(2.5mmol/L)和NADPH(0.8mmol/L)存在下，化合物在0.05mol/L TRIS缓冲液(pH7.4)中于37℃温育，微粒体蛋白总浓度为3mg/mL。化合物的初始浓度为5或10μmol/L。开始温育后取样品分析长达60分钟。加入相当于3.3％总样品体积量的20％肉豆蔻酸立即终止收集样品的酶活性。使用在0时间收集的样品作为对照(START CONC.)，利用LCMS测定60分钟样品保留的化合物浓度(FINAL CONC)。如下计算凝血酶降解抑制剂的％：

$100\%x\frac{\[\mathrm{START\; CONC}\]-\[\mathrm{FINAL\; CONC}\]}{\[\mathrm{START\; CONC}\]}$

试验H

动脉血栓形成模型

在颈动脉局部施用氯化铁(FeCl₃)诱发动脉损伤。腹膜内注射苯巴比妥钠(80mg/kg；Apoteksbolget；Umea，Sweden)麻醉大鼠，然后在整个试验中连续输注(12mg/kg/h)维持麻醉。在整个试验中通过外部加热使大鼠体温维持在38℃。试验开始时为5分钟控制期。5分钟后，腹膜内给予人¹²⁵I-纤维蛋白原(80kBq；IM53；AmershamInternational，Buckinghamshire，UK)，其用作随后纤维蛋白(原)掺入血栓的标记。将颈动脉段近端放入纵向开放的塑料管(6mm；Silastic_；Dow Corning，MI，USA)，其中含有氯化铁浸湿(2μL，55％w/w；Merck，Darmstadt，Germany)的滤纸(直径3mm；1F；Munktell，Grycksbo，Sweden)。左颈动脉暴露于氯化铁10分钟，然后从塑料试管取出浸入盐水中。50分钟后，取出颈动脉，用盐水冲洗。此外，注射¹²⁵I-纤维蛋白原后10分钟和试验结束时，取对照血样测定血液¹²⁵I-活度。对照血样和血管节段的¹²⁵I-活度在试验的同一天用γ计数仪(1282 Compugamma；LKB Wallac Oy，Turku，Finland)测定。血栓大小的检测为掺入血管节段的¹²⁵I-活度相对于血液¹²⁵I-活度(cpm/mg)的相对量。

一般实验细节

TLC在硅胶上进行。手性HPLC分析采用46mm×250mmChiralcel OD柱和5cm保护柱。柱温保持在35℃。流动速率为1.0mL/min。在228nm使用Gilson 115 UV检测器。列出了用于各化合物的由己烷、乙醇和三氟乙酸组成的流动相及其适当比例。通常，将产物溶于最小量乙醇，再将其用流动相稀释。

LC-MS/MS采用HP-1100完成，该仪器配置了CTC-PAL注射器和5μm，4×100mm ThermoQuest，Hypersil BDS-C18柱。使用API-3000(Sciex)MS检测器。流动速率1.2mL/min，流动相(梯度)由10-90％乙腈与90-10％ 4mM乙酸铵水溶液组成，两者都包含0.2％甲酸。

用四甲硅烷作内标记录¹H NMR谱。用列出的用列出的氘化溶剂作内标记录¹³C NMR谱。

实施例1

Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OcBu)

(i)3-氯-5-甲氧基苯甲醛

在25℃，将3，5-二氯苯甲醚(74.0g，419mmol)的THF(200mL)溶液滴加到含镁金属(14.2g，585mmol，预先用0.5N HCl冲洗)的THF(100mL)。加毕，滴加1，2-二溴乙烷(3.9g，20.8mmol)。将所得深褐色混合物加热回流3小时。混合物冷却至0℃，一次性加入N，N-二甲基甲酰胺(60mL)。混合物用乙醚(3×400mL)和6N HCl(500mL)分配。合并的有机萃取液用盐水(300mL)洗涤，用硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩获得油状物。硅胶快速色谱法(用Hex∶EtOAc(4∶1)洗提)(2×)处理获得黄色油状小标题化合物(38.9g，54％)。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ9.90(s，1H)，7.53(s，1H)，7.38(s，1H)，7.15(s，1H)，3.87(s，3H)。

(ii)3-氯-5-羟基苯甲醛

将3-氯-5-甲氧基苯甲醛(22.8g，134mmol；参见以上步骤(i))的二氯甲烷(250ml)溶液冷却至0℃。在15分钟内滴加三溴化硼(15.8mL，167mmol)。搅拌反应混合物2小时后，缓慢加入水(50ml)。然后将溶液用乙醚(2×100mL)萃取。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩。硅胶快速色谱法(用Hex∶EtOAc(4∶1)洗提)处理获得小标题化合物(5.2g，25％)。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ9.85(s，1H)，7.35(s，1H)，7.20(s，1H)，7.10(s，1H)，3.68(s，1H)

(iii)3-氯-5-二氟甲氧基苯甲醛

将3-氯-5-羟基苯甲醛(7.5g，48mmol；参见以上步骤(ii))的2-丙醇(250mL)和30％ KOH(100mL)溶液加热至回流。在搅拌同时，将CHClF₂通入反应混合物2小时。冷却反应混合物，用1N HCl酸化，用EtOAc(2×100mL)萃取。有机物用盐水(100mL)洗涤，用硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩。硅胶快速色谱法(用Hex∶EtOAc(4∶1)洗提)处理获得小标题化合物(4.6g，46％)。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ9.95(s，1H)，7.72(s，1H)，7.52(s，1H)，7.40(s，1H)，6.60(t，J_H-F＝71.1Hz，1H)

(iv)Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R，S)CH(OTMS)CN

将3-氯-5-二氟甲氧基苯甲醛(4.6g，22.3mmol；参见以上步骤(iii))的二氯甲烷(200mL)溶液冷却至0℃。加入ZnI₂(1.8g，5.6mmol)和三甲硅烷基氰(2.8g，27.9mmol)，反应混合物升至室温，搅拌15小时。将混合物不完全真空浓缩获得液体小标题化合物，将其直接用于以下步骤(v)无需进一步提纯或特征化。

(v)Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R，S)CH(OH)C(NH)OEt

将Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R，S)CH(OTMS)CN(6.82g，22.3mmol；参见以上步骤(iv))滴加到HCl/EtOH(500mL)。将反应混合物搅拌15h，然后在真空下部分浓缩获得液体小标题化合物，其直接用于步骤(vi)无需进一步提纯或特征化。

(vi)Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R，S)CH(OH)C(O)OEt

将Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R，S)-CH(OH)C(NH)OEt(6.24g，22.3mmol；参见以上步骤(v))溶于THF(250mL)，加入0.5M硫酸(400mL)，将反应物在40℃搅拌65小时，冷却，然后在真空下部分浓缩除去大部分THF。然后反应混合物用乙醚(3×100mL)萃取，用硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩获得固体小标题化合物，其直接用于步骤(vii)无需进一步提纯或特征化。

(vii)Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R，S)CH(OH)C(O)OH

将Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R，S)CH(OH)C(O)OEt(6.25g，22.3mmol；参见以上步骤(vi))的2-丙醇(175mL)和20％ KOH(350mL)溶液在室温下搅拌15小时。然后将反应物在真空下部分浓缩除去大部分2-丙醇。剩余混合物用1M硫酸酸化，用乙醚(3×100mL)萃取，用硫酸钠干燥，真空浓缩获得固体。用CHCl₃∶MeOH∶浓NH₄OH(6∶3∶1)洗提的硅胶快速色谱法获得小标题化合物的铵盐。然后将铵盐溶于EtOAc(75mL)和H₂O(75mL)的混合物，用2N HCl酸化。分离出有机层，用盐水(50mL)洗涤，用硫酸钠干燥，真空浓缩获得小标题化合物(3.2g，步骤(iv)至(vii)57％)。

¹H NMR(300MHz，CD₃OD)δ7.38(s，1H)，7.22(s，1H)，7.15(s，1H)，6.89(t，J_H-F＝71.1Hz，1H)，5.16(s，1H)

(viii)Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)OH(a)和Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(S)CH(OAc)C(O)OH(b)

将Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R，S)CH(OH)C(O)OH(3.2g，12.7mmol；参见以上步骤(vii))和Lipase PS“Amano”(～2.0g)在乙酸乙酯(125mL)和MTBE(125mL)中的混合物加热回流48小时。将反应混合物冷却，用Celite_过滤，滤饼用EtOAc洗涤。真空浓缩滤液，再用硅胶快速色谱法(CHCl₃∶MeOH∶浓NH₄OH(6∶3∶1))处理获得小标题化合物(a)和(b)的铵盐。将化合物(a)的盐溶于水，用2N HCl酸化，用EtOAc萃取。有机层用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩获得小标题化合物(a)(1.2g，37％)。

小标题化合物(a)

¹H NMR(300MHz，CD₃OD)δ7.38(s，1H)，7.22(s，1H)，7.15(s，1H)，6.89(t，J_H-F＝71.1Hz，1H)，5.17(s，1H)

(ix)Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(Teoc)

在0℃，Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)OH(1.1g，4.4mmol；参见以上步骤(viii))和H-Aze-Pab(Teoc)(参见国际专利申请WO00/42059，2.6g，5.7mmol)的DMF(50mL)溶液中加入PyBOP(2.8g，5.3mmol)和三甲基吡啶(1.3g，10.6mmol)。反应物在0℃搅拌2小时，然后在室温再搅拌15小时。真空浓缩反应混合物，采用硅胶快速色谱法(3x)(依次用CHCl₃∶EtOH(9∶1)、EtOAc∶EtOH(20∶1)和CH₂Cl₂∶CH₃OH(95∶5)洗提)处理获得白色固体小标题化合物(1.0g，37％)。

¹H NMR(300MHz，CD₃OD，旋转异构体混合物)δ7.79-7.85(d，J＝8.7Hz，2H)，7.15-7.48(m，5H)，6.89和6.91(t，J_H-F＝71.1Hz，1H)，5.12和5.20(s，1H)，4.75-4.85(m，1H)，3.97-4.55(m，6H)，2.10-2.75(m，2H)，1.05-1.15(m，2H)，0.09(s，9H)

MS(m/z)611(M+1)⁺

(x)Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OcBu，Teoc)

将Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(Teoc)(0.051g，0.08mmol；参见以上步骤(ix))溶于3mL乙腈，加入0.062g(0.5mmol)O-环丁基羟胺盐酸盐。混合物在70℃加热4.5小时。蒸去溶剂，残余物在水和乙酸乙酯间分配。水相用乙酸乙酯再萃取两次，合并的有机相用水、盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并蒸发。获得：0.054g(95％)。

¹H-NMR(400MHz；CD₃OD)：δ8.66-8.50(m，1H)，7.45(d，2H)，7.29(m，3H)，7.15(m，2H)，6.88(t，1H主要旋转异构体)，6.85(t，1H次要旋转异构体)，5.18(s，1H主要旋转异构体)，5.12(s，1H次要旋转异构体)，5.16(m，1H次要旋转异构体)，4.78(m，1H主要旋转异构体)，4.70(m，1H)，4.50-4.30(m，3H)，4.19-3.93(m，3H)，2.71-2.44(m，1H)，2.34-2.11(m，5H)，1.78(m，1H)，1.62(m，1H)，0.96(m，2H)，0.01(s，9H)

(xi)Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OcBu)

将Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OcBu，Teoc)(0.054g，0.08mmol；参见以上步骤(x))溶于0.5mL CH₂Cl₂和3mLTFA。反应进行60分钟。蒸去TFA，残余物用制备型HPLC提纯。合并需要部分，冷冻干燥(2×)获得标题化合物23mg(54％)。

MS(m/z)536(M-1)^-；538(M+1)⁺

¹H-NMR(400MHz；CD₃OD)：δ7.56(d，2H)，7.33(m，3H)，7.15(m，2H)，6.89(t，1H主要旋转异构体)，6.86(t，1H次要旋转异构体)，5.18(s，1H主要旋转异构体；m，1H次要旋转异构体)，5.11(s，1H次要旋转异构体)，4.77(m，1H主要旋转异构体)，4.58(m，1H)，4.42(m，2H)，4.34(m，1H主要旋转异构体)，4.15(m，1H主要旋转异构体)，4.06(m，1H次要旋转异构体)，3.97(m，1H次要旋转异构体)，2.66(m，1H次要旋转异构体)，2.52(m，1H主要旋转异构体)，2.33-2.25(m，3H)，2.01-2.20(m，2H)，1.75(m，1H)，1.59(m，1H)

¹³C-NMR(100MHz；CD₃OD)(羰基和/或脒碳，旋转异构体)δ172.4，172.3，171.9，171.4，152.3

实施例2

Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OH)

(i)Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OH，Teoc)

将Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(Teoc)(0.148g，0.24mmol；参见以上实施例1(ix))溶于9mL乙腈，加入0.101g(1.45mmol)羟胺盐酸盐。混合物在70℃加热2.5小时，用Celite_过滤，蒸发。粗制产物(0.145g；纯度75％)直接用于下一步骤无需再提纯。

(ii)Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OH)

将Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OH，Teoc)(0.145g，0.23mmol；参见以上步骤(i))溶于0.5mL二氯甲烷和9mL TFA。反应进行60分钟。蒸去TFA，残余物用制备型HPLC提纯。合并需要部分，冷冻干燥(2x)获得标题化合物72mg(经两个步骤收率62％)。

MS(m/z)482(M-1)^-；484(M+1)⁺

¹H-NMR(400MHz；CD₃OD)：δ7.58(d，2H)，7.33(m，3H)，7.15(m，2H)，6.89(t，1H主要旋转异构体)，6.86(t，1H次要旋转异构体)，5.18(s，1H主要旋转异构体；和m，1H次要旋转异构体)，5.12(s，1H次要旋转异构体)，4.77(m，1H主要旋转异构体)，4.42(m，2H)，4.34(m，1H主要旋转异构体)，4.14(m，1H主要旋转异构体)，4.06(m，1H次要旋转异构体)，3.95(m，1H次要旋转异构体)，2.66(m，1H次要旋转异构体)，2.50(m，1H主要旋转异构体)，2.27(m，1H主要旋转异构体)，2.14(m，1H次要旋转异构体)

¹³C-NMR(100MHz；CD₃OD)：(羰基和/或脒碳，旋转异构体)δ172.4，172.3，172.0，171.4 152.3，152.1

实施例3

Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab

将Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(Teoc)(0.045g，0.074mmol；参见以上实施例1(ix))溶于3mL TFA，让其反应1小时。蒸去TFA，残余物用水/乙腈冷冻干燥获得小标题化合物的TFA盐0.043g(100％)。

¹H-NMR(400MHz；CD₃OD)旋转异构体：δ7.8-7.75(m，2H)，7.55-7.5(m，2H)，7.35(m，1H，主要旋转异构体)，7.31(m，1H，次要旋转异构体)，7.19(m，1H，主要旋转异构体)，7.15(m，1H)，7.12(m，1H，次要旋转异构体)，6.89(t，1H，主要旋转异构体)，6.87(t，1H，次要旋转异构体)，5.22(m，1H，次要旋转异构体)，5.20(s，1H，主要旋转异构体)，5.13(s，1H，次要旋转异构体)，4.80(m，1H，主要旋转异构体)，4.6-4.4(m，2H)，4.37(m，1H，主要旋转异构体)，4.19(m，1H，主要旋转异构体)，4.07(m，1H，次要旋转异构体)，3.98(m，1H，次要旋转异构体)，2.70(m，1H，次要旋转异构体)，2.55(m，1H，主要旋转异构体)，2.29(m，1H，主要旋转异构体)，2.15(m，1H，次要旋转异构体)

¹³C-NMR(100MHz；CD₃OD)：(羰基和/或脒碳，旋转异构体)δ172.6，172.5，172.0，171.7，167.0

MS(m/z)465(M-1)^-，467(M+1)⁺

实施例4

Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(COO环戊基)

Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab×TFA(74mg，0.13mmol；参见以上实施例3)和氯甲酸环戊基酯(44mg，0.30mmol)的二氯甲烷(5mL)溶液中加入NaOH水溶液(0.5mL，2M，1mmol)。将混合物在室温下搅拌，反应用HPLC监测。2.5小时后，加入水，将液相分离。水相用二氯甲烷萃取两次。合并的有机相用硫酸镁干燥，用硅胶(首先用二氯甲烷，再用EtOAc)提纯。真空除去溶剂后，固体残余物溶于水/乙腈，冷冻干燥获得白色固体标题化合物。产量：33mg(44％)

MS(m/z)579(M+1)⁺

¹H NMR(400MHz；CD₃OD)：δ7.79(d，2H)，7.43-7.30(m，5H)，7.20-7.11(m，2H)，6.90(t，1H，主要旋转异构体)，6.87(t，1H，次要旋转异构体)，5.19(dd，1H，次要旋转异构体)，5.18(s，1H，主要旋转异构体)，5.13(m，1H)，5.11(s，1H，次要旋转异构体)，4.78(dd，1H，主要旋转异构体)，4.45(m，2H)，4.35(m，1H，主要旋转异构体)，4.16(s，1H，主要旋转异构体)，4.06(s，1H，次要旋转异构体)，3.97(s，1H，次要旋转异构体)，2.68(m，1H，次要旋转异构体)，2.52(s，1H，主要旋转异构体)，2.28(s，1H，主要旋转异构体)，2.16(s，1H，次要旋转异构体)，1.90(m，2H)，1.77(m，4H)，1.61(m，2H)

¹³C NMR(羰基和/或脒质子；100MHz)：δ173.6，173.1，172.6，170.3，165.6

实施例5

Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(Z)

开始用Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab×TFA(73mg，0.13mmol；参见以上实施例3)和氯甲酸苄基酯(35mg，0.21mmol)根据以上实施例4介绍的方法制备标题化合物。需要再用反相HPLC(0.1M乙酸铵/MeCN 40/60)提纯。真空浓缩合适的部分，用EtOAc萃取。产量：24mg(32％)。

MS(m/z)602(M+1)⁺

¹H NMR(400MHz；CD₃OD)：δ7.80(d，2H)，7.43-7.25(m，8H)，7.20-7.10(m，2H)，6.90(t，1H，主要旋转异构体)，6.88(t，1H，次要旋转异构体)，5.18(dd，1H，次要旋转异构体)，5.18(s，2H)，5.17(s，1H，旋转异构体)，5.11(s，1H，旋转异构体)，4.78(dd，1H，主要旋转异构体)，4.45(m，2H)，4.34(m，1H，主要旋转异构体)，4.15(s，1H，主要旋转异构体)，4.06(s，1H，次要旋转异构体)，3.97(s，1H，次要旋转异构体)，2.66(m，1H，次要旋转异构体)，2.51(s，1H，主要旋转异构体)，2.27(s，1H，主要旋转异构体)，2.15(s，1H，次要旋转异构体)

¹³C NMR(羰基和/或脒质子；100MHz)：δ173.6，173.1，172.6，170.5，164.9

实施例6

Ph(3-Cl)(5-OCF₃)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab×TFA

(i)2-硝基-5-三氟甲氧基苯甲酸

在低于0℃(冰-MeOH浴)，在20分钟向3-三氟甲氧基苯甲酸(49.0g，0.24mol)的硫酸(500mL)溶液中加入硝酸钾(31.3g，0.31mol)的硫酸(200mL)溶液。所得溶液在0℃搅拌2小时，然后升至室温，搅拌18小时。将反应物倾入冰中，所得酸性溶液用EtOAc(5×)萃取。合并的有机物用水(1×)、盐水(2×)、水(1×)和盐水(1×)洗涤，用硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩获得被HOAc污染的粗制固体小标题化合物(65.7g)。将粗制小标题化合物溶于EtOAc和甲苯，真空浓缩获得没有HOAc的固体(58.4g，97％)，它直接用于下一步骤无需再提纯。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ10.10(br s，1H)，8.02(d，1H，J＝8Hz)，7.69(d，1H，J＝2Hz)，7.54(dd，1H，J＝2Hz，J＝8Hz)

(ii)2-氨基-5-三氟甲氧基苯甲酸

2-硝基-5-三氟甲氧基苯甲酸(56.8g，0.23mol；参见以上步骤(i))的EtOH(1000mL)溶液中加入10％ Pd/C(5.7g)。所得溶液中通入H₂ 5小时，用Celite_过滤，真空浓缩获得固体粗制小标题化合物(49.7g，98％)，它直接用于下一步骤无需再提纯。

¹H NMR(300MHz，CD₃OD)：δ7.66(m，1H)，7.17(d，1H，J＝8Hz)，6.77(d，1H，J＝8Hz)

(iii)2-氨基-3-氯-5-三氟甲氧基苯甲酸

2-氨基-5-三氟甲氧基苯甲酸(49.0g，0.22mol；参见以上步骤(ii))的HOAc(1200mL)溶液中缓慢加入磺酰氯(41.8g，0.31mol)。观测到气体放出。将所得不均匀混合物在室温下搅拌1小时。再加入HOAc(300mL)以帮助搅拌，接着以每部分5mL加入磺酰氯直到根据TLC分析初始原料耗尽为止。真空浓缩反应物获得固体，将其在旋转蒸发器用EtOAc(2×)冲洗，接着用乙醚(1×)冲洗除去HOAc。所得固体进一步干燥获得粗制小标题化合物的盐酸盐(60.5g，94％)，它直接用于下一步骤无需再提纯。

¹H NMR(300MHz，CD₃OD)：δ7.72(s，1H)，7.44(s，1H)，7.22(s，可交换)

(iv)3-氯-5-三氟甲氧基苯甲酸

2-氨基-3-氯-5-三氟甲氧基苯甲酸(60.5g，0.22mol；参见以上步骤(iii))的1，4-二_烷(1000mL)溶液中加入6N HCl(750mL)。溶液中形成一些油状有机物。将二_烷溶液冷却至低于0℃(冰-MeOH浴)。通过加液漏斗在15分钟内加入亚硝酸钠(18.2g，0.26mol)的水(250mL)溶液。将所得溶液搅拌45分钟。通过加液漏斗缓慢加入次磷酸(221.5mL 50wt％的H₂O溶液，291.2g，2.20mol)。溶液在0℃搅拌1.5小时，然后升至室温(观测到气体放出)，搅拌18小时。将粗制溶液转入分液漏斗，用乙醚(4×)萃取。合并的有机物用NaHCO₃水溶液(3×)萃取。将碱性水层小心地用6N HCl酸化，用二氯甲烷(3×)萃取。二氯甲烷萃取液用硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩获得粗制固体小标题化合物(26.5g，从3-三氟甲氧基苯甲酸46％)，它直接用于下一步骤无需再提纯。

¹H NMR(300MHz，CD₃OD)：δ7.98(s，1H)，7.83(s，1H)，7.58(s，1H)

(v)3-氯-5-三氟甲氧基苄基醇

在氮气氛、室温下，3-氯-5-三氟甲氧基苯甲酸(22.5g，93.5mmol；参见以上步骤(iv))的无水THF(1200mL)溶液中加入BH₃·THF络合物溶液(140mL 1M的THF溶液；140.3mmol)。将溶液回流2小时，冷却至室温，搅拌18小时，小心地用水猝灭，真空浓缩除去大部分THF。残余物用EtOAc稀释，有机物用盐水(3×)洗涤，用硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩获得粗制油状小标题化合物(21.2g，100％)，它直接使用无需再提纯。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ7.33(s，1H)，7.17(s，1H)，7.14(s，1H)，4.72(s，2H)，2.05(br s，1H)

(vi)3-氯-5-三氟甲氧基苯甲醛

将DMSO(16.1g，205.9mmol)的无水二氯甲烷(300mL)溶液冷却至-78℃。通过注射器缓慢加入乙二酰氯(13.1g，103.0mmol)(观测到气体放出)。所得溶液在-78℃搅拌15分钟。通过加液漏斗在15分钟内加入3-氯-5-三氟甲氧基苄基醇(21.2g，93.6mmol；参见以上步骤(v))的二氯甲烷(200mL )溶液。混浊溶液在-78℃搅拌40分钟，在10分钟内通过加液漏斗加入DIPEA(60.5g，468.0mmol)。所得均匀溶液在-78℃搅拌1.5小时，然后升至室温，搅拌18小时。真空浓缩粗制溶液，残余物用EtOAc稀释，用水(1×)、2N HCl(1×)、盐水(1×)、NaHCO₃水溶液(1×)和盐水(1×)洗涤。有机物用硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩获得粗制小标题化合物(19.9g，95％)，它直接用于下一步骤无需再提纯。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ10.00(s，1H)，7.83(s，1H)，7.66(s，1H)，7.51(s，1H)

(vii)Ph(3-Cl)(5-OCF₃)-(R，S)CH(OTMS)CN

在0℃，3-氯-5-三氟甲氧基苯甲醛(19.9g，88.6mmol；参见以上步骤(vi))的二氯甲烷(600mL)溶液中加入ZnI₂(1.4g，4.4mmol)和三甲硅烷基氰(9.7g，97.5mmol)。在0℃搅拌1.5小时后，在室温搅拌2小时，TLC分析显示只有初始原料。分批加入碘化锌直到反应继续(加入的碘化锌总共超过30.0g)。在室温下搅拌18小时后，反应物用水猝灭，分离出有机物。有机物用硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩获得粗制液体小标题化合物(27.7g，96％)，直接使用无需再提纯。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ7.43(s，1H)，7.28(s，1H)，7.25(s，1H)，5.49(s，1H)，0.38(s，9H)

(viii)Ph(3-Cl)(5-OCF₃)-(R，S)CH(OH)C(O)OH

将Ph(3-Cl)(5-OCF₃)-(R，S)CH(OTMS)CN(27.7g，85.6mmol；参见以上步骤(vii))的浓盐酸(300mL)悬浮液回流3小时。所得褐色不均匀混合物冷却至室温，用乙醚(2×)萃取。初始有机物用2N NaOH(2×)萃取，将碱性层用2N HCl酸化，用乙醚萃取。乙醚溶液用硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩获得粗制小标题化合物(4.9g，21％)。对初始有机物的TLC分析显示仍然存在小标题化合物，因此用6N NaOH重复碱性萃取/酸化过程再获得粗制小标题化合物(2.8g，12％)。对初始有机物的TLC分析显示仍然存在小标题化合物，因此有机物用硫酸钠干燥，再真空浓缩获得油状的小标题化合物钠盐(18.3g)。然后将盐再溶于乙醚，有机物用2N HCl酸化，用盐水洗涤。所得有机物用硫酸钠干燥，用活性炭处理，用Celite_过滤，真空浓缩获得粗制固体小标题化合物(14.3g，62％)，它直接用于下一步骤无需再提纯。

¹H NMR(300MHz，CD₃OD)：δ7.53(s，1H)，7.38(s，1H)，7.29(s，1H)，5.23(s，1H)

(ix)Ph(3-Cl)(5-OCF₃)-(R)CH(OH)C(O)OH(a)和Ph(3-Cl)(5-OCF₃)-(S)CH(OAc)C(O)OH(b)

将Ph(3-Cl)(5-OCHF₃)-(R，S)CH(OH)C(O)OH(7.7g，28.5mmol；参见以上步骤(viii))和Lipase PS“Amano”(3.8g)在MTBE(100mL)和乙酸乙酯(50mL)的混合物在60℃搅拌26小时。将反应物冷却，用Celite_过滤，滤饼用EtOAc洗涤。真空浓缩合并的有机物，再用硅胶快速色谱法(CHCl₃∶MeOH∶浓NH₄OH(6∶3∶1))处理获得小标题化合物(a)和小标题化合物(b)的铵盐混合物(6.7g)以及e.e.小于95％的小标题化合物(a)铵盐的纯样品(1.2g)。将各部分溶于Et₂O，用2N HCl(1×)和盐水(1×)洗涤，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩获得相应羧酸(分别为6.7g和1.1g)。然后将这些部分单独再次置于拆分条件，根据需要通过硅胶色谱法(根据需要用CHCl₃∶MeOH∶浓NH₄OH(6∶3∶1或75∶20∶5或145∶45∶10)洗提)再提纯。纯化的小标题化合物(a)在进一步使用前用HCl水溶液或柠檬酸水溶液酸化。小标题化合物(b)的铵盐直接使用无需特征化。

小标题化合物(a)

¹H NMR(300MHz，CD₃OD)：δ7.53(s，1H)，7.38(s，1H)，7.29(s，1H)，5.23(s，1H)

¹³C NMR(75MHz，CD₃OD)：δ174.9，150.9，145.4，136.3，126.8，122.0，120.6，118.9，72.9

MS(m/z)269(M-1)^-

(x)Ph(3-Cl)(5-OCF₃)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(Teoc)

在氮气氛下，将Ph(3-Cl)(5-OCF₃)-(R)CH(OH)C(O)OH(0.73g，2.70mmol；参见以上步骤(ix))的DMF(40mL)溶液冷却至0℃。溶液中加入H-Aze-Pab(Teoc)(1.46g，3.24mmol)、三甲基吡啶(0.82g，6.75mmol)和PyBOP(1.83g，3.51mmol)。溶液在0℃搅拌2小时，升至室温，搅拌18小时，用水猝灭，真空浓缩。残余物用EtOAc稀释，用水(1×)、碳酸氢钠水溶液(1×)、柠檬酸水溶液(1×)和盐水(1×)洗涤，用硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩获得粗制小标题化合物。硅胶快速色谱法(2x)(依次用EtOAc∶MeOH(30∶1)、二氯甲烷∶MeOH(93∶7)洗涤)处理获得可破碎泡沫状小标题化合物(0.73g，43％)。

¹H NMR(300MHz，CD₃OD，旋转异构体的复合混合物)：δ7.78-7.82(d，2H，J＝8Hz)，7.25-7.54(m，5H)，5.25和5.16(s，1H)，5.22和4.79(m，1H)，3.92-4.58(m，6H)，2.20-2.76(m，2H)，1.04-1.13(m，2H)，0.08(s，9H)

MS(m/z)629(M+1)⁺

(xi)Ph(3-Cl)(5-OCF₃)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab

三氟乙酸(1.0mL)加入到搅拌下的冰/水冷却的Ph(3-Cl)(5-OCF₃)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(Teoc)(101mg；160μmol；参见以上步骤(x))的二氯甲烷(10mL)溶液。1小时后除去冷却浴。在室温下1.5小时后，加入乙腈(30mL)，减压小心除去溶剂。将残余物溶于水，冷冻干燥获得90mg(92％)标题化合物的TFA盐。

MS(m/z)483(M-1)^-；485(M+1)⁺

¹H NMR(300MHz；CD₃OD)：(非对映异构体/旋转异构体的复合物)：δ7.70-7.80(m，2H)，7.45-7.58(m，3H)，7.24-7.38(m，2H)，5.26(s，1H)，5.17(m，1H，次要旋转异构体)，4.82(m，1H，主要旋转异构体)，4.35-4.6(m，3H)，4.22(m，1H，主要旋转异构体)，3.92-4.12(m，2H，次要旋转异构体)，2.70(m，1H，次要旋转异构体)，2.55(m，1H，主要旋转异构体)，2.30(m，1H，主要旋转异构体)，2.16(m，1H，次要旋转异构体)

¹³C NMR(100MHz；CD₃OD)：(羰基和/或脒碳，旋转异构体)：δ173.7，173.4，173.0，172.8，168.1

实施例7

Ph(3-Cl)(5-OCF₃)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OMe)

HATU(71mg；0.19mmol)加入到搅拌下的冰/水冷却的Ph(3-Cl)(5-OCF₃)-(R)CH(OH)C(O)OH(39mg；0.14mmol；参见以上实施例6(ix))的DMF(3mL)溶液。30分钟后，加入H-Aze-Pab(OMe)×2HCl(69mg；0.21mmol；参见国际专利申请WO 00/42059)和2，4，6-三甲基吡啶(0.080mL；0.58mmol)的DMF(1.5mL)溶液。将反应混合物放置过夜，让温度缓慢升至室温。真空除去溶剂，粗制产物用反相HPLC(乙腈：0.1M乙酸铵水溶液)提纯，在冷冻干燥适当部分后获得无色固体标题化合物(61mg，97％)。

MS(m/z)513(M-1)^-，515(M+1)⁺

¹H NMR(500MHz；CD₃OD)：δ7.97(bt，1H)，7.53(d，2H)，7.27(t，1H)，7.22(d，2H)，7.19(t，1H)，7.11(t，2H)，6.77(s，1H)，4.92(s，1H)，4.9(bs，3H)，4.81(m，2H)，4.40(m，2H)，4.09(m，1H)3.87(s，3H)，2.58(m，1H)，2.37(m，1H)

¹³C NMR(125MHz；CD₃OD)：(羰基和/或脒碳)：δ171.8，169.9，156.8

实施例8

烷氧基脒类的平行合成法

本合成在96-孔Robbins板上进行。在包含适量的O-取代羟胺(下面具体说明；所有羟胺都可由市售获得或用众所周知的文献方法制备)的各孔中加入Ph(3-Cl)(5-OCF₃)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(Teoc)(10mg；17μmol；参见以上实施例6(x))的乙腈(1.0mL)溶液。将以上板密封，在烘箱中以60℃旋转反应混合物过夜。冷却并过滤后，固体用乙腈(3×0.3mL)洗涤。合并的液体部分在真空离心机浓缩。残余物在水(0.4mL)和乙酸乙酯(0.4ml)间分配。在液-液萃取完成后，全部用Hydromatrix^TM柱过滤。用乙酸乙酯洗涤三次后，合并的滤液在真空离心机中浓缩。加入二氯甲烷(0.1mL)和三氟乙酸(0.3mL)进行脱保护作用。在室温下搅拌3小时后，真空除去溶剂。残余物在饱和碳酸氢钠水溶液(0.5mL)和乙酸乙酯(0.5mL)间分配。在萃取、通过Hydromatrix^TM过滤以及浓缩(参见下文)后，将残余物溶于异丙醇/水(7/3)(1ml)。除去约2％的该溶液，用异丙醇/水(7/3)(1mL)稀释用于LC-MS分析。真空除去溶剂后，将固体残余物后转移到96-孔板，用乙腈和乙酸乙酯溶解。溶剂用真空离心机蒸去获得以下标题化合物：Ph(3-Cl)(5-OCF₃)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OCH₂-3-(5-Me-异_唑))(用3-[(氨基氧基)甲基]-5-甲基异_唑×HCl(18mg；0.11mmol))。产量：3.64mg(35％)(MS(m/z)596(M+1)⁺)；

Ph(3-Cl)(5-OCF₃)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OCH₂-3-吡啶)

(用3-(氨基氧基)甲基吡啶×2HCl(19mg；96μmol)。产量：5.14mg(50％)(MS(m/z)592(M+1)⁺)；

PH(3-Cl)(5-OCF₃)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OiBu)

(用O-异丁基羟胺×HCl(17mg；140μmol)。产量：4.4mg(45％)。MS(m/z)557(M+1)⁺)；

Ph(3-Cl)(5-OCF₃)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OEt)

(用O-乙基羟胺×HCl(14mg；140μmol)。产量：4.04mg(42％)。MS(m/z)529(M+1)⁺)；

Ph(3-Cl)(5-OCF₃)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OBn)

(用O-苄基羟胺×HCl(17mg；110μmol)。产量：3.22mg(29％)。MS(m/z)591(M+1)⁺)；

Ph(3-Cl)(5-OCF₃)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(O环己基)

(用O-环己基羟胺×HCl(15mg；99μmol)。产量：2.9mg(26％)。MS(m/z)583(M+1)⁺)；

Ph(3-Cl)(5-OCF₃)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OCBu)

(用O-环丁基羟胺×HCl(17mg；140μmol)。产量：3.3mg(30％)。MS(m/z)555(M+1)⁺)；

Ph(3-Cl)(5-OCF₃)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OCH₂CH₂OPh)(3-CF₃)

(用O-[2-[3-(三氟甲基)苯氧基]乙基]羟胺×HCl(24mg；93μmol)。产量：6.52mg(46％)。MS(m/z)689(M+1)⁺)；

Ph(3-Cl)(5-OCF₃)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OBn(4-Cl))

(用O-(4-氯代苄基)羟胺×HCl(16mg；82μmol)。产量：3.47mg(29％)。MS(m/z)625(M+1)⁺)；

Ph(3-Cl)(5-OCF₃)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OBn(3-MeO))

(用O-(3-甲氧基苄基)羟胺×HCl(18mg；94μmol)。产量：4.33mg(36％)。MS(m/z)621(M+1)⁺)；

Ph(3-Cl)(5-OCF₃)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OBn(2-Br))

(用O-(2-溴代苄基)羟胺×HCl(23mg；96μmol)。产量：3.87mg(30％)。MS(m/z)671(M+1)⁺)；

Ph(3-Cl)(5-OCF₃)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OBn(4-Me))

(用O-(4-甲基苄基)羟胺×HCl(14mg；81μmol)。产量：2.91mg(25％)。MS(m/z)605(M+1)⁺)；

Ph(3-Cl)(5-OCF₃)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(O-4-庚基)

(用O-(4-庚基)羟胺×HCl(15mg；89μmol)。产量：17mg(100％)。MS(m/z)599(M+1)⁺)。

实施例9

Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(S)CH(CH₂OH)C(O)-Aze-Pab×HOA

(i)3-氯-5-甲氧基苯甲酸

镁车屑(Fluka purum用于Grignard反应)用以下方式预处理：将车屑置于玻璃烧结漏斗，将0.1M盐酸倾在车屑上。将车屑用玻璃棒搅拌几秒钟，然后用3份水洗去盐酸。最后，车屑用2份丙酮洗涤后装入瓶中。四氢呋喃(100mL，99.95％)通过加入RedAl(1g，70％wt在甲苯中)干燥。预处理的镁车屑(5g，200mmol)置于圆底烧瓶中，通入氮3次。将二氯苯甲醚(26g，146mmol)溶于THF(100mL，RedAl干燥)，加入二溴乙烷(1.8g，10mmol)。反应混合物中通入氮气，然后回流2小时。中断加热，在2分钟内分批加入干冰(10g)。当所有的干冰溶解，将反应混合物倾入含盐酸(400mL，2M)的冰中。接着萃取(乙醚，300mL)获得小标题化合物11.2g，60.2mmol(收率：41％)。

¹H-NMR(500MHz；丙酮-d₆)：δ7.57(m，1H)，7.49(m，1H)，7.23(m，1H)，3.91(s，3H)

(ii)3-氯-5-羟基苯甲酸

氧化铝(1.65g，60mmol)和碘(21g，82mmol)在甲苯(200mL)中回流2小时。然后将溶于甲苯(50ml)的3-氯-5-甲氧基苯甲酸(11.2g，60.2mmol；参见以上步骤(i))与四丁基碘化铵(1.5g，4mmol)一起加入，将混合物再回流2小时。冷却至室温后，接着萃取获得小标题化合物8.7g，50mmol(收率：83％)。

¹H-NMR(300MHz；丙酮-d₆)：δ9.27(s，1H)，7.48(m，1H)，7.44(m，1H)，7.11(m，1H)

(iii)3-氯-5-二氟甲氧基苯甲酸

将溶于氯仿(200mL)的3-氯-5-羟基苯甲酸(6.4g，37.2mmol；参见以上步骤(ii))转移到配置了干冰冷凝器和进气管的500mL三颈圆底烧瓶中。加入氢氧化钠(100mL，5M)，同时剧烈搅拌。在室温通过进气管分批加入氯代二氟甲烷(氟利昂22；25g，290mmol)。2小时后，反应完成。接着萃取获得小标题化合物6.2g，28mmol(收率：75％)。

¹H-NMR(500MHz；丙酮-d₆)：δ7.87(m，1H)，7.74(m，1H)，7.54(m，1H)，7.19(t，1H，J_H-F73Hz)

(iv)3-氯-5-二氟甲氧基-N-甲氧基-N-甲基苯甲酰胺

将3-氯-5-二氟甲氧基苯甲酸(1.8g，8mmol；参见以上步骤(iii))和乙二酰氯(1.5g，11.8mmol)溶于二氯甲烷(50mL)。加入DMF(2滴)，反应混合物在室温下搅拌30分钟。然后加入N，O-二甲基羟胺(1g，10.2mmol)和三乙胺(3g，30mmol)，在室温下再搅拌10分钟后，减压浓缩反应混合物。将残余物溶于乙醚(100mL)和水(50mL)。分离后，有机相用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩。将残余物用二氧化硅色谱法(己烷/乙酸乙酯2∶1)处理获得小标题化合物2g，7.5mmol(93％)。

¹H-NMR(400MHz；CDCl₃)：δ7.54(m，1H)，7.37(m，1H)，7.27(m，1H)，6.53(t，1H，J_H-F73Hz)

(v)3-氯-5-二氟甲氧基乙酰苯

3-氯-5-二氟甲氧基-N-甲氧基-N-甲基苯甲酰胺(2g，7.5mmol；参见以上步骤(iv))溶于乙醚(100mL)，在氮气氛下冷却至-70℃。将甲基锂(7mL，11mmol，1.6M的乙醚溶液)用注射器在1分钟内滴加到搅拌下的混合物中。除去干冰浴，让混合物升至室温，然后将反应物用氯化铵溶液(50mL，5％ NH₄Cl的水溶液)猝灭。有机相用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物用二氧化硅色谱法(己烷∶乙酸乙酯2∶1)处理获得小标题化合物1.5g，6.8mmol(收率：90％)。

¹H-NMR(600MHz；CDCl₃)：δ7.77(m，1H)，7.59(m，1H)，7.35(m，1H)，6.56(t，1H，J_H-F73Hz)，2.60(s，3H)

(vi)3-氯-5-二氟甲氧基苯基乙酸甲酯

将3-氯-5-二氟甲氧基乙酰苯(1.5g，6.8mmol；参见以上步骤(v))溶于二氯甲烷(200mL)。加入载于K-10蒙脱石的硝酸铊(III)×3MeOH(6g，10mmol(约0.6mmol/g)；参见J.Am.Chem.Soc.，98，6750(1976))，将混合物在室温下搅拌20小时。过滤混合物，滤液用碳酸氢钠(100mL，0.5M)洗涤，用硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物用二氧化硅色谱法(己烷/乙酸乙酯2∶1)处理获得小标题化合物1g，4mmol(收率：56％)。

¹H-NMR(500MHz；CDCl₃)：δ7.14(m，1H)，7.06(m，1H)，6.96(m，1H)，6.50(t，1H，J_H-F73Hz)，3.72(s，3H)，3.60(s，1H)

(vii)α-甲酰基(3-氯-5-二氟甲氧基苯基)乙酸甲酯

将3-氯-5-二氟甲氧基苯基乙酸甲酯(1g，4mmol；参见以上步骤(vi))和甲酸甲酯(1g，16mmol)溶于乙醚(100mL)，在冰浴中冷却(约2℃)。然后加入切碎的钠(180mg，7.8mmol)和甲醇(1mL)，将混合物置于冰浴在搅拌下过夜。小心加入水(100mL)，分离出各相。含水相用盐酸(2M)酸化至pH1，用乙醚(2×100mL)萃取。萃取液用硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物用二氧化硅色谱法(己烷∶乙酸乙酯(1∶1))处理获得小标题化合物400mg，1.4mmol(收率：36％)。

¹H-NMR(400MHz)：δ12.10(d，1H)，7.32(d，1H)，7.11(m，1H)，7.07(m，1H)，6.94(m，1H)，6.51(t，1H，J_F-H73)，3.83(s，3H)

(viii)3-氯-5-二氟甲氧基托品酸

将α-甲酰基(3-氯-5-二氟甲氧基苯基)乙酸甲酯(400mg，1.4mmol；参见以上步骤(vii))溶于THF∶甲醇(50mL，9∶1)。加入硼氢化钠，将混合物在室温下搅拌30分钟。加入水，将混合物浓缩至产生含水悬浮液，将其溶于乙酸乙酯和水。分离出各相，有机相用氯化钠洗涤(15％水溶液)，用硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物溶于甲醇(30mL)，用氢氧化钠(1mL，10M)在室温下水解10分钟。接着萃取获得小标题化合物180mg，0.68mmol(收率：48％)。

¹H-NMR(500MHz；CDCl₃)：δ7.18(m，1H)，7.10(m，1H)，7.00(m，1H)，6.50(t，1H，J_F-H73)，4.11(m，1H)，3.90(m，1H)，3.84(m，1H)

(ix)Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(S)CH(CH₂OH)C(O)-Aze-Pab×HOAc

将3-氯-5-二氟甲氧基托品酸(180mg，0.7mmol；参见以上步骤(viii))、H-Aze-Pab(Teoc)×HCl(450mg，1mmol)和PyBOP(530mg，1mmol)溶于DMF(10mL)，随后加入DIPEA(550mg，3.9mmol)。将混合物在室温下搅拌1小时，然后将其用盐水(20mL，15％ NaCl)稀释，用乙酸乙酯(40mL)萃取。萃取液用硫酸钠干燥，过滤并蒸发至干。残余物溶于二氯甲烷(5mL)，加入三氟乙酸(5mL)。在室温下1小时后，将非对映异构体混合物蒸发至干，残余物用反相柱色谱法(乙腈∶水(30∶70)，缓冲液∶乙酸铵0.1M)处理。冷冻干燥获得标题化合物36mg，0.067mmol(收率：10.4％)。

MS(ES)481(M+1)⁺

¹H-NMR(400MHz；CDCl₃)：δ7.77(d，2H)，7.57(d，2H)，7.30(m，1H)，7.13(m，2H)，6.87(t，1H，J_F-H73Hz)，4.76(m，1H)，4.55(s，2H)，4.37(m，1H)，4.03(m，2H)，3.82(m，1H)，3.72(m，1H)，2.53(m，1H)，2.28(m，1H)，1.92(s，1,5H)

¹³C-NMR(100MHz；CD₃OD)：(羰基和/或脒碳)δ172.3，171.9，167.2

实施例10

Ph(3-Cl)(5-OCF₃)-(S)CH(CH₂OH)C(O)-Aze-Pab×TFA

(i)3-氯-5-三氟甲氧基苄基甲磺酸酯

在0℃、氮气氛下，3-氯-5-三氟甲氧基苄基醇(6.1g，26.9mmol；参见以上实施例6(v))的二氯甲烷(250ml)溶液中加入DIPEA(4.2g，32.3mmol)和甲磺酰氯(3.4g，29.6mmol)。溶液在0℃搅拌1.5小时，用水猝灭。分离出有机物，然后用水(1×)、1N HCl(1×)、水(1×)和碳酸氢钠水溶液(1×)洗涤，再用硫酸钠干燥，过滤，浓缩获得油状小标题化合物(8.2g，99％)。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ7.37(s，1H)，7.28(s，1H)，7.18(s，1H)5.23(s，2H)，3.07(s，3H)

(ii)3-氯-5-三氟甲氧基苄基氰

3-氯-5-三氟甲氧基苄基甲磺酸酯(8.2g，26.8mmol；参见以上步骤(i))的DMSO(50mL)溶液中加入氰化钠(2.6g，53.6mmol)。所得不均匀溶液加温至50℃，超声波处理1小时。将反应物冷却，在乙醚和水间分配。有机物用水(2×)和盐水(2×)洗涤。合并的水相用Et₂O(1×)萃取。合并的有机物用硫酸钠干燥，过滤，在低温加热和部分真空下浓缩获得微红色挥发性小标题化合物(6.3g，100％)，它直接用于下一步骤无需再提纯。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.32(s，1H)，7.24(s，1H)，7.12(s，1H)，3.78(s，2H)

(iii)3-氯-5-三氟甲氧基苯基乙酸

3-氯-5-三氟甲氧基苄基氰(6.3g，26.7mmol；参见以上步骤(ii))的2-丙醇(100mL)溶液中加入水(200mL)和氢氧化钾(7.5g，133.5mmol)。将溶液回流18小时，冷却至室温，然后真空除去2-丙醇。水相用二氯甲烷(2×)洗涤，丢弃洗涤液。碱性水相用2N HCl酸化，用二氯甲烷(3×)萃取。二氯甲烷萃取液用硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩获得油状小标题化合物(5.2g，76％)，它直接用于下一步骤无需再提纯。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ7.25(s，1H)，7.19(s，1H)，7.08(s，1H)，3.68(s，2H)

(iv)3-氯-5-三氟甲氧基苯基乙酸乙酯

3-氯-5-三氟甲氧基苯基乙酸(5.2g，20.4mmol；参见以上步骤(iii))的EtOH(600mL)溶液中加入硫酸(几滴)。将溶液回流18小时，冷却至室温，用固体碳酸氢钠中和，真空除去乙醇。残余物用EtOAc稀释，然后用水(1×)、碳酸氢钠水溶液(1×)和盐水(1×)洗涤。有机物用硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩获得油状小标题化合物(5.5g，96％)，它直接用于下一步骤无需再提纯。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.24(s，1H)，7.16(s，1H)，7.07(s，1H)，4.13-4.22(q，J＝8Hz，2H)，3.63(s，2H)，1.24-1.32(t，J＝8Hz，3H)

(v)Ph(3-Cl)(5-OCF₃)-(R，S)CH(CHO)C(O)OEt

在氮气氛、小于0℃(冰-MeOH浴)下，3-氯-5-三氟甲氧基苯基乙酸乙酯(4.5g，15.9mmol；参见以上步骤(iv))的无水THF(400mL)溶液中加入乙醇钠(4.5g，63.6mmol)。将冷溶液搅拌40分钟，加入甲酸乙酯(8.1g，111.3mmol)。溶液在0℃搅拌30分钟，升至室温后搅拌2小时。然后真空除去THF。残余物用乙醚稀释，用水(1×)和0.5MNaOH(3×)萃取。含水萃取液用2N HCl酸化，用二氯甲烷(3×)萃取。合并的有机物用硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩获得粗制小标题化合物(3.9g)。硅胶快速色谱法(用Hex∶EtOAc(4∶1)洗提)处理获得油状小标题化合物(3.0g，61％)。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃，异构体混合物)：δ12.30和12.25(s，1H)，7.39和7.34(s，1H)，7.21(s，1H)，7.17(s，1H)，7.08(s，1H)，4.27-4.37(q，J＝8Hz，2H)，1.28-1.38(t，J＝8Hz，3H)

(vi)Ph(3-Cl)(5-OCF₃)-(R，S)CH(CH₂OH)C(O)OEt

在-10℃(冰-MeOH浴)，在5分钟内分批向Ph(3-Cl)(5-OCF₃)-(R，S)CH(CHO)C(O)OEt(3.0g，9.66mmol；参见以上步骤(v))的MeOH(200mL)溶液中加入硼氢化钠(0.7g，19.32mmol)。将溶液在-10℃搅拌45分钟，再加入硼氢化钠(0.4g)。再经过15分钟后，反应物用氯化铵水溶液猝灭，用2N HCl使其变为弱酸性，真空除去MeOH。残余物用EtOAc稀释，用H₂O(1×)、碳酸氢钠水溶液(1×)和盐水(1×)洗涤。有机物用硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩获得粗制小标题化合物。硅胶快速色谱法(洗提：Hex∶EtOAc(5∶1))处理获得油状小标题化合物(2.0g，66％)。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ7.26(s，1H)，7.19(s，1H)，7.07(s，1H)，4.16-4.28(m，2H)，4.04-4.15(m，1H)，3.76-3.94(m，2H)，2.33(t，J＝6Hz，1H)，1.18-1.30(t，J＝8Hz，3H)

(vii)Ph(3-Cl)(5-OCF₃)-(R，S)CH(CH₂OH)C(O)OH

Ph(3-Cl)(5-OCF₃)-(R，S)CH(CH₂OH)C(O)OEt(2.0g，6.24mmol；参见以上步骤(vi))的THF(50mL)和H₂O(25ml)溶液中加入氢氧化锂一水合物(0.5g，12.48mmol)。溶液在室温下搅拌1小时，真空除去THF。残余物用水稀释，再用CHCl₃(2×)洗涤，丢弃洗涤液。碱性水层用2N HCl酸化，用CHCl₃(4×)萃取。三氯甲烷萃取液用硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩获得粗制油状小标题化合物(1.5g)。硅胶快速色谱法(洗提：CHCl₃∶MeOH∶浓NH₄OH(梯度：7.0∶2.5∶0.5～6∶3∶1))获得小标题化合物的铵盐(1.1g)。铵盐在1N HCl和CHCl₃间分配。有机物用硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩获得油状小标题化合物(也称为3-氯-5-三氟甲氧基托品酸)(1.1g，62％)。

¹H NMR(300MHz，CD₃OD)：δ7.41(s，1H)，7.27(s，1H)，7.24(s，1H)，4.03(m，1H)，3.75-3.87(m，2H)

(viii)Ph(3-Cl)(5-OCF₃)-(S)CH(CH₂OH)C(O)-Aze-Pab(Teoc)(a)和Ph(3-Cl)(5-OCF₃)-(R)CH(CH₂OH)C(O)-Aze-Pab(Teoc)(b)

在0℃以下(冰-MeOH浴)，Ph(3-Cl)(5-OCF₃)-(R，S)CH(CH₂OH)C(O)OH(0.65g，2.28mmol；参见以上步骤(vii))的DMF溶液中加入H-Aze-Pab(Teoc)(0.90g，2.39mmol)、三甲基吡啶(0.71g，5.70mmol)和PyBOP(1.31g，2.51mmol)。所得溶液在0℃以下搅拌1小时，升至室温，搅拌1小时。然后真空除去DMF。残余物用EtOAc稀释，用稀HCl水溶液(1×)、盐水(1×)、碳酸氢钠水溶液(1×)和盐水(1×)涤涤。有机物用硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩获得为非对映异构体混合物的粗制小标题化合物(2.1g)。硅胶快速色谱法(3×)(依次用EtOAc∶MeOH(95∶5)、CH₂Cl₂∶MeOH(97∶3)和CH₂Cl₂∶MeOH(95∶5)洗提)处理获得可压碎的泡沫状小标题化合物非对映异构体(a)(0.51g，35％)和非对映异构体(b)(0.45g，31％)。

小标题化合物非对映异构体(a)

¹H NMR(300MHz，CD₃OD，旋转异构体的复合混合物)δ7.79-7.85(d，J＝8Hz，2H)，7.22-7.49(m，5H)，5.17-4.77(m，1H)，4.53-4.18(m，4H)，3.58-4.11(m，5H)，2.47-2.73(m，1H)，2.11-2.34(m，1H)，1.08-1.12(m，2H)，0.07(s，9H)

MS(m/z)643(M+1)⁺

(ix)Ph(3-Cl)(5-OCF₃)-(S)CH(CH₂OH)C(O)-Aze-Pab×TFA

将Ph(3-Cl)(5-OCF₃)-(S)CH(CH₂OH)C(O)-Aze-Pab(Teoc)，(78mg，0.121mmol；参见以上步骤(viii)-非对映异构体(a))溶于5mL三氟乙酸。10分钟后，反应完成，蒸去溶剂。残余物用水和乙腈冷冻干燥获得所需产物。产量：70mg(94％)。

MS(m/z)483(M-1)^-；485(M+1)⁺

¹H-NMR(400MHz；D₂O)旋转异构体1∶1：δ8.83(bt，1H)，7.79(d，1H)，7.72(d，1H)，7.54(d，1H)，7.43(d，2H)，7.35(m，1H，旋转异构体)，7.28(m，1H，旋转异构体)，7.20(m，1H，旋转异构体)，7.05(m，1H，旋转异构体)，5.22(m，1H，旋转异构体)，4.83(m，1H，旋转异构体)，4.57(m，2H，旋转异构体)，4.38(m，2H，旋转异构体)，4.3-3.7(m，5H)，2.77(m，1H，旋转异构体)，2.55(m，1H，旋转异构体)，2.27(m，1H)

¹³C-NMR(100MHz；D₂O)：(羰基和/或脒碳，旋转异构体)δ172.9，172.2，172.0，171.8，166.9

实施例11

Ph(3-Cl)(5-OCF₃)-(S)CH(CH₂OH)C(O)-Aze-Pab(OMe)

(i)Ph(3-Cl)(5-OCF₃)-(S)CH(CH₂OH)C(O)-Aze-Pab(OMe，Teoc)

将Ph(3-Cl)(5-OCF₃)-(S)CH(CH₂OH)C(O)-Aze-Pab(Teoc)(100mg，0.155mmol；参见以上实施例10(viii))溶于12mL四氢呋喃。加入O-甲基羟胺盐酸盐(44mg，0.53mmol)，反应物在50℃加热过夜。蒸发反应混合物，残余物制备型HPLC(CH₃CN/0.1M NH₄OAc(70/30))提纯。蒸发相关部分，将残余物溶于少量乙腈和水，冷冻干燥。重复冷冻干燥一次。产量：80mg(76％)纯产物。

¹H-NMR(400MHz；CD₃OD)旋转异构体：δ7.5-7.4(m，3H)，7.35-7.2(m，4H)，5.15(m，1H，次要旋转异构体)，4.74(m，1H，主要旋转异构体)，4.5-4.25(m，3H)，4.2-3.95(m，4H)，3.91(b，3H)，3.9-3.6(m，2H)，2.63(m，1H，次要旋转异构体)，2.50(m，1H，主要旋转异构体)，2.3-2.1(m，1H)，0.95(m，2H)，0.02(s，9H，主要旋转异构体)，0.01(s，9H，次要旋转异构体)

(ii)Ph(3-Cl)(5-OCF₃)-(S)CH(CH₂OH)C(O)-Aze-Pab(OMe)

将Ph(3-Cl)(5-OCF₃)-(S)CH(CH₂OH)C(O)-Aze-Pab(OMe，Teoc)，(80mg，0.12mmol；参见以上步骤(i))溶于1mL二氯甲烷，在冰浴中冷却。加入三氟乙酸(3mL)，反应烧瓶在冰浴中保持2小时。蒸发混合物，溶于乙酸乙酯，用碳酸氢钠水溶液洗涤三次，然后用水和盐水洗涤。有机相用硫酸钠干燥，过滤并蒸发。残余物用少量乙腈和水冷冻干燥。产量：60mg(95％)纯标题产物。

MS(m/z)528(M-1)^-；531(M+1)⁺

¹H-NMR(500MHz；CD₃OD)旋转异构体：δ7.65-7.55(m，3H，旋转异构体)，7.45(m，1H，主要旋转异构体)，7.4-7.2(m，4H)，5.15(m，1H，次要旋转异构体)，4.74(m，1H，主要旋转异构体)，4.5-4.3(m，3H)，4.05-3.95(m，2H)，3.85(m，1H，主要旋转异构体)，3.82(s，3H，主要旋转异构体)，3.81(s，3H，次要旋转异构体)，3.73(m，1H，主要旋转异构体)，3.67(m，1H，次要旋转异构体)，3.62(m，1H，次要旋转异构体)，2.63(m，1H，次要旋转异构体)，2.50(m，1H，主要旋转异构体)，2.24(m，1H，主要旋转异构体)，2.16(m，1H，次要旋转异构体)

¹³C-NMR(125MHz；CD₃OD)：(羰基和/或脒碳，旋转异构体)δ174.0，173.2，172.7，172.6，155.1

实施例12

Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OMe)

(i)Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OMe，Teoc)

Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(Teoc)(0.40g，0.65mmol；参见以上实施例1(ix))溶于20mL乙腈，加入0.50g(6.0mmol)O-甲基羟胺盐酸盐。将混合物在70℃加热2小时。蒸去溶剂，残余物在水和乙酸乙酯间分配。水相用乙酸乙酯再萃取两次，合并的有机相用水、盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并蒸发。产量：0.41g(91％)。

¹H-NMR(400MHz；CDCl₃)：δ7.83(bt，1H)，7.57(bs，1H)，7.47(d，2H)，7.30(d，2H)，7.20(m，1H)，7.14(m，1H)，7.01(m，1H)，6.53(t，1H)，4.89(s，1H)，4.87(m，1H)，4.47(m，2H)，4.4-4.2(b，1H)，4.17-4.1(m，3H)，3.95(s，3H)，3.67(m，1H)，2.68(m，1H)，2.42(m，1H)0.97(m，2H)，0.01(s，9H)。

(ii)Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OMe)

将Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OMe，Teoc)(0.40g，0.62mmol；参见以上步骤(i))溶于5mL TFA，让其反应30分钟。蒸去TFA，残余物在乙酸乙酯和碳酸氢钠水溶液间分配。水相用乙酸乙酯再萃取两次，合并的有机相用水、盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并蒸发。将产物从水/乙腈冷冻干燥。不需要再提纯。产量：0.28g(85％)。

¹H-NMR(600MHz；CDCl₃)：δ7.89(bt，1H)，7.57(d，2H)，7.28(d，2H)，7.18(m，1H)，7.13(m，1H)，6.99(m，1H)，6.51(t，1H)，4.88(s，1H)，4.87(m，1H)，4.80(bs，2H)，4.48(dd，1H)，4.43(dd，1H)，4.10(m，1H)，3.89(s，3H)，3.68(m，1H)，2.68(m，1H)，2.40(m，1H)。

¹³C-NMR(125MHz；CDCl₃)：(羰基和/或脒碳，旋转异构体)δ172.9，170.8，152.7，152.6

MS(m/z)495(M-1)^-，497(M+1)⁺

实施例13

Ph(3-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab×HOAc

Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OMe)(13mg，0.026mmol；参见以上实施例12)溶于无水乙醇(5mL)，加入30mg 10％Pd/C。最后加入乙酸(5μL)，混合物在大气压下氢化20小时。将混合物用Celite_过滤，蒸发，然后用反相HPLC(0.1M aq.乙酸铵/MeCN)提纯。冷冻干燥合适的部分获得白色固体标题化合物：8.5mg(66％)。

¹H-NMR(400MHz；CD₃OD)旋转异构体：δ7.73-7.78(m，2H)，7.55(d，2H)，7.19-7.43(m，3H)，7.06-7.13(m，1H)，6.83(t，1H，J_HF＝74Hz，主要旋转异构体)，6.81(t，1H，主要旋转异构体)，5.20(s，1H，主要旋转异构体)，5.19(m，1H，次要旋转异构体)，5.15(s，1H，次要旋转异构体)，4.78(m，1H，主要旋转异构体)，4.4-4.6(几个峰，2H)，4.35(m，1H，主要旋转异构体)，4.08(m，1H)，3.99(m，1H，次要旋转异构体)，2.70(m，1H，次要旋转异构体)，2.52(m，1H，主要旋转异构体)，2.30(m，1H，主要旋转异构体)，2.15(m，1H，次要旋转异构体)，1.89(s，3H)。

¹³C-NMR(100MHz；CD₃OD)：(羰基和/或脒碳，旋转异构体)δ173.7，172.9，168.3。

MS(m/z)433(M+1)⁺；431(M-1)^-

实施例14

Ph(3-OCF₃)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab×TFA

Ph(3-Cl)(5-OCF₃)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab×TFA(34mg，0.057mmol，实施例6)溶于5mL乙醇，加入20mg 10％ Pd/C。将混合物在大气压下氢化过夜。将混合物用Celite_过滤，蒸发，然后在水/乙腈中冷冻干燥。

¹H-NMR(400MHz；CD₃OD)旋转异构体：δ7.8-7.7(m，2H)，7.55(m，2H)，7.5-7.2(m，4H)，5.24(s，1H，主要旋转异构体)，5.23(m，1H，次要旋转异构体)，5.18(s，1H，次要旋转异构体)，4.77(m，1H，主要旋转异构体)，4.6-4.45(m，2H)，4.36(m，1H，主要旋转异构体)，4.08(m，1H)，3.99(m，1H，次要旋转异构体)，2.70(m，1H，次要旋转异构体)，2.52(m，1H，主要旋转异构体)，2.30(m，1H，主要旋转异构体)，2.15(m，1H，次要旋转异构体)。

¹³C-NMR(100MHz；CD₃OD)：(羰基和/或脒碳，旋转异构体)δ174.1，173.9，173.5，172.9，168.2。

¹⁹-F NMR(282MHz；CD₃OD)：-59.8和-59.9(3F，分别为次要和主要旋转异构体)，-77.4(3F)说明此盐为TFA盐。

MS(m/z)451.3(M+1)⁺

实施例15

Ph(3-Cl)(5-OCH₂CF₃)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab×TFA

(i)3-氯-5-三氟乙氧基苯甲醛

在氮气氛、室温下，向磁搅拌下的3-氯-5-羟基苯甲醛(2.0g，12.8mmol；参见以上实施例1(ii))和碳酸钾(2.3g，16.6mmol)的DMF(35mL)溶液中加入对甲苯磺酸2，2，2-三氟乙酯(4.2g，16.6mmol)。将混合物加热至110℃ 7小时，然后在室温下搅拌过夜。将反应物冷却至0℃，倾入冰冷的2N HCl(100mL)，用EtOAc(2×75mL)萃取。合并的有机萃取液用0.5N HCl(2×50ml)洗涤，用硫酸钠干燥，过滤，然后真空浓缩。褐色油状物用硅胶色谱法(洗提：Hex∶EtOAc(6∶1))处理获得黄色油状小标题化合物(1.9g，61％)。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ9.44(s，1H)，7.56(s，1H)，7.33(s，1H)，7.28(s，1H)，4.42(q，J＝8Hz，2H)

(ii)Ph(3-Cl)(5-OCH₂CF₃)-(R，S)CH(OTMS)CN在氮气氛、0℃下，向3-氯-5-三氟乙氧基苯甲醛(5.2g，21.7mmol；参见以上步骤(i))和碘化锌(1.7g，5.4mmol)的二氯甲烷(200mL)溶液中用注射器滴加三甲硅烷基氰(4.3g，43.3mmol)。将混合物在0℃搅拌3小时，然后用水(150mL)稀释。分离出有机层，用硫酸钠干燥，过滤，然后真空浓缩获得黄色油状小标题化合物(6.9g，95％)，它直接使用无需再提纯。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.27(s，1H)，6.98(s，2H)，5.44(s，1H)，4.38(q，J＝8Hz，2H)，0.30(s，9H)

(iii)Ph(3-Cl)(5-OCH₂CF₃)-(R，S)CH(OH)C(O)OH将浓盐酸(170mL)加入到Ph(3-Cl)(5-OCH₂CF₃)-(R，S)CH(OTMS)CN(6.9g，20.4mmol；参见以上步骤(ii))，在100℃搅拌1小时。冷却至室温后，反应物进一步冷却至0℃，用3N NaOH(300mL)缓慢碱化。将此混合物用乙醚(2×100mL)洗涤，水层用2N HCl(50mL)酸化。然后水层用EtOAc(2×100mL)萃取，用硫酸钠干燥，过滤，再真空浓缩获得浅黄色油状小标题化合物(5.3g，92％)，它直接使用无需再提纯。

¹H NMR(300MHz，CD₃OD)δ7.18(s，1H)，7.07(s，1H)，7.02(s，1H)，5.13(s，1H)，4.58(q，J＝8Hz，2H)

(iv)Ph(3-Cl)(5-OCH₂CF₃)(R)CH(OH)C(O)OH(a)和Ph(3-Cl)(5-OCH₂CF₃)-(S)CH(OAc)C(O)OH(b)

在氮气氛下，将Ph(3-Cl)(5-OCH₂CF₃)-(R，S)CH(OH)C(O)OH(7.06g，24.8mmol；参见以上步骤(iii))和Lipase PS“Amano”(4.30g)的乙酸乙酯(250mL)和MTBE(250mL)溶液在70℃加热40小时。反应物冷却至室温，过滤除去酶，用EtOAc洗涤，然后真空浓缩滤液。硅胶色谱法(洗提：CHCl₃∶MeOH∶Et₃N(92∶6∶2))处理获得黄色油状小标题化合物(a)的三乙胺盐(3.02g)。将小标题化合物(a)的盐溶于水(150ml)，用2N HCl酸化，用EtOAc(2×75mL)萃取。合并的有机萃取液用硫酸钠干燥，过滤，然后真空浓缩获得乳白色固体小标题化合物(a)(2.18g)。此外，用上述的柱色谱法获得小标题化合物(b)的三乙胺盐(4.73g)。

小标题化合物(a)的数据：

mp：98-103℃

¹H NMR(300MHz，CD₃OD)δ7.18(s，1H)，7.07(s，1H)，7.02(s，1H)，5.13(s，1H)，4.58(q，J＝8Hz，2H)。

¹³C NMR(75MHz，CD₃OD)δ175.4，159.6，144.6，136.2，125.0(q，J＝277Hz)，121.8，115.9，113.1，73.3，67.0(q，J＝35Hz)

HPLC分析：98.6％，＞99％ ee，Chiralcel OD柱(97∶3∶0.5Hex∶EtOH∶TFA流动相)

[α]²⁵ _D＝-81.5°(c＝1.0，MeOH)

APCI-MS：(M-1)＝283m/z

(v)Ph(3-Cl)(5-OCH₂CF₃)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(Teoc)

在氮气氛、0℃下，Ph(3-Cl)(5-OCH₂CF₃)-(R)CH(OH)C(O)OH(0.50g，1.8mmol；参见以上步骤(iv)(化合物(a)))的DMF(20mL)溶液中加入H-Aze-Pab(Teoc)×HCl(1.03g，2.3mmol)、PyBOP(1.01g，1.9mmol)和DIPEA(0.57g，4.4mmol)。反应物在0℃搅拌2小时，然后在室温下搅拌20小时。真空浓缩混合物，残余物用硅胶色谱法(依次用CHCl₃∶EtOH(10∶1)、EtOAc∶EtOH(10∶1)洗提)处理两次获得可压碎的白色泡沫状小标题化合物(0.55g，48％)。

mp：90-95℃

R_f＝0.42(10∶1 CHCl₃∶EtOH)

¹H NMR(300MHz，CD₃OD，旋转异构体的复合混合物)δ7.78-7.81(m，2H)，7.38-7.41(m，2H)，7.12-7.16(m，1H)，7.00-7.06(m，2H)，5.09-5.22和4.75-4.79(m，2H)，3.94-4.61(m，8H)，2.09-2.75(m，2H)，1.04-1.11(m，2H)，0.70(s，9H)

APCI-MS：(M+1)＝643m/z

(vi)Ph(3-Cl)(5-OCH₂CF₃)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab×TFA

Ph(3-Cl)(5-OCH₂CF₃)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(Teoc)(0.066g，0.103mmol；参见以上步骤(v))溶于3mLTFA，让其反应30分钟。蒸去TFA，残余物用水/乙腈冷冻干燥获得0.060g(94％)标题化合物的TFA盐。

¹H-NMR(400MHz；CD₃OD)旋转异构体：δ7.8-7.7(m，2H)，7.6-7.5(m，2H)，7.2-7.0(m，3H)，5.21(m，1H，次要旋转异构体)，5.17(s，1H，主要旋转异构体)，5.11(s，1H，次要旋转异构体)，4.81(m，1H，主要旋转异构体)，4.6-4.4(m，4H)，4.37(m，1H，主要旋转异构体)，4.16(m，1H，主要旋转异构体)，4.06(m，1H，次要旋转异构体)，3.99(m，1H，次要旋转异构体)，2.70(m，1H，次要旋转异构体)，2.54(m，1H，主要旋转异构体)，2.29(m，1H，主要旋转异构体)，2.15(m，1H，次要旋转异构体)

¹³C-NMR(100MHz；CD₃OD)：(羰基和/或脒碳，旋转异构体)δ172.2，171.8，171.7，167.0。

MS(m/z)499.3(M+1)⁺

实施例16

Ph(3-Cl)(5-OCH₂CF₃)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OMe)

在氮气氛、0℃下，Ph(3-Cl)(5-OCH₂CF₃)-(R)CH(OH)C(O)OH(0.48g，1.7mmol；参见以上实施例15(iv)(化合物(a))的DMF(20mL)溶液中加入H-Aze-Pab(OMe)×2HCl(0.74g，2.2mmol)、PyBOP(0.97g，1.9mmol和DIPEA(0.55g，4.2mmol)。将反应物在0℃搅拌2小时，然后在室温下搅拌20小时。真空浓缩混合物，残余物用硅胶色谱法(依次用CHCl₃∶EtOH(10∶1)和EtOAc∶EtOH(10∶1)洗涤)处理两次获得可压碎的白色泡沫状标题化合物(0.62g，69％)。

mp：75-80℃

R_f＝0.43(10∶1 CHCl₃∶EtOH)

¹H NMR(300MHz，CD₃OD，旋转异构体的复合混合物)δ7.57-7.60(m，2H)，7.32-7.36(m，2H)，7.13-7.17(m，1H)，7.00-7.06(m，2H)，5.09-5.19和4.74-4.80(m，2H)，3.93-4.62(m，6H)，3.81(s，3H)，2.10-2.73(m，2H)

APCI-MS：(M+1)＝529m/z

实施例17

Ph(3-Cl)(5-OCH₂CHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab×TFA

(i)甲磺酸2，2-二氟乙基酯

在氮气氛、0℃下，向磁搅拌下的2，2-二氟乙醇(1.52g，18.5mmol)的二氯甲烷(20mL)溶液中加入三乙胺(5.61g，55.5mmol)和甲磺酰氯(2.54g，22.2mmol)。将混合物在0℃搅拌1.5小时，用二氯甲烷(50mL)稀释，用2N HCl(50mL)洗涤。水层用二氯甲烷(30ml)萃取，合并的有机萃取液用盐水洗涤(30mL)，用硫酸钠干燥，过滤，然后真空浓缩获得黄色油状小标题化合物(2.52g，85％)，它直接使用无需再提纯。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ6.02(tt，J＝3Hz，J＝55Hz，1H)，4.39(dt，J＝3Hz，J＝13Hz，2H)，3.13(s，3H)

(ii)3-氯-5-二氟乙氧基苯甲醛

在氮气氛、室温下，向3-氯-5-羟基苯甲醛(1.50g，9.6mmol；参见以上实施例1(ii))和碳酸钾(1.72g，12.5mmol)的DMF(10mL)溶液中滴加甲磺酸2，2-二氟乙基酯(2.0g，12.5mmol；参见以上步骤(i))的DMF(10ml)溶液。将混合物加热至100℃ 6小时，然后在室温下搅拌过夜。反应物冷却至0℃，倾入冰冷的2N HCl(100mL)，用EtOAc萃取(2×75mL)。合并的有机萃取液用0.5N HCl(2×50mL)洗涤，用硫酸钠干燥，过滤，然后真空浓缩。褐色油状物用硅胶色谱法处理(洗提：Hex∶EtOAc(5∶1))获得黄色油状小标题化合物(1.35g，64％)。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ9.92(s，1H)，7.52(s，1H)，7.31(s，1H)，7.22(s，1H)，6.12(tt，J＝3Hz，J＝55Hz，1H)，4.26(dt，J＝3Hz，J＝15Hz，2H)

(iii)Ph(3-Cl)(5-OCH₂CHF₂)-(R，S)CH(OTMS)CN

在氮气氛、0℃下，向3-氯-5-二氟乙氧基苯甲醛(1.35g，6.1mmol；参见以上步骤(ii))和碘化锌(0.48g，1.5mmol)的二氯甲烷(50mL)溶液中滴加三甲硅烷基氰(1.21g，12.2mmol)。将混合物在0℃搅拌3小时，然后用水(50mL)稀释。分离出有机层，用硫酸钠干燥，过滤，然后真空浓缩获得褐色油状小标题化合物(1.85g，95％)，它直接使用无需再提纯。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.13(s，1H)，6.94(s，2H)，6.10(tt，J＝3Hz，J＝55Hz，1H)，5.43(s，1H)，4.20(dt，J＝3Hz，J＝15Hz，2H)，0.28(s，9H)

(iv)Ph(3-Cl)(5-OCH₂CHF₂)-(R，S)CH(OH)C(O)OH

将浓盐酸(60mL)加入到Ph(3-Cl)(5-OCH₂CHF₂)-(R，S)CH(OTMS)CN(1.85g，5.8mmol；参见以上步骤(iii)，在100℃搅拌1小时。冷却至室温后，反应物进一步冷却至0℃，用3N NaOH(～180mL)缓慢碱化，用乙醚(2×75mL)洗涤。水层用2N HCl(20mL)酸化，用EtOAc(2×75mL)萃取。合并的有机萃取液用硫酸钠干燥，过滤，然后真空浓缩获得浅黄色固体小标题化合物(1.50g，97％)，它直接使用无需再提纯。

¹H NMR(300MHz，CD₃OD)δ7.15(s，1H)，7.05(s，1H)，6.98(s，1H)，6.19(tt，J＝4Hz，J＝55Hz，1H)，5.12(s，1H)，4.25(dt，J＝4Hz，J＝17Hz，2H)

(v)Ph(3-Cl)(5-OCH₂CHF₂)-(S)CH(OAc)C(O)OH(a)和Ph(3-Cl)(5-OCH₂CHF₂)-(R)CH(OH)C(O)OH(b)

在氮气氛下将Ph(3-Cl)(5-OCH₂CHF₂)-(R，S)CH(OH)C(O)OH(3.90g，14.6mmol；参见以上步骤(iv))和Lipase PS“Amano”(2.50g)的乙酸乙酯(140mL)和MTBE(140mL)溶液在70℃加热40小时。将反应物冷却至室温，过滤除去酶，用EtOAc洗涤，真空浓缩滤液。硅胶色谱法(洗提：CHCl₃∶MeOH∶Et₃N(92∶6∶2))处理获得黄色油状小标题化合物(a)的三乙胺盐。此外，获得小标题化合物(b)的三乙胺盐(1.47g)，将此盐溶于水(100mL)，用2N HCl酸化，用EtOAc(2×75mL)萃取。合并的有机萃取液用硫酸钠干燥，过滤，然后真空浓缩获得乳白色固体小标题化合物(b)(1.00g)。

小标题化合物(b)数据：

mp：103-106℃

R_f＝0.39(90∶8∶2 CHCl₃∶MeOH∶Et₃N)

¹H NMR(300MHz，CD₃OD)δ7.13(s，1H)，7.04(s，1H)，6.97(s，1H)，6.17(tt，J＝4Hz，J＝55Hz，1H)，5.12(s，1H)，4.24(dt，J＝4Hz，J＝8Hz，2H)。

¹³C NMR(75MHz，CD₃OD)δ175.5，160.3，144.5，136.1，121.3，115.7，1153，(t，J＝240Hz)，112.9，73.4，68.6(t，J＝29Hz)

HPLC分析：96.2％，＞95.0％ ee，ChiralPak AD柱(95∶5∶0.5Hex∶EtOH∶TFA流动相)

[α]²⁵ _D＝-84.0°(c＝0.85 MeOH)

APCI-MS：(M-1)＝265m/z

(vi)Ph(3-Cl)(5-OCH₂CHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(Teoc)

在氮气氛、0℃下，Ph(3-Cl)(5-OCH₂CHF₂)-(R)CH(OH)C(O)OH(0.35g，1.3mmol；参见以上步骤(v)(化合物(b)))的DMF(18mL)溶液中加入H-Aze-Pab(Teoc)×HCl(0.76g，1.7mmol)、PyBOP(0.75g，1.4mmol)和DIPEA(0.43g，3.3mmol)。将反应物在0℃搅拌2小时，然后在室温搅拌20小时。真空浓缩混合物，残余物用硅胶色谱法(依次用CHCl₃∶EtOH(10∶1)、EtOAc∶EtOH(10∶1)洗提)处理两次获得可压碎的白色泡沫状小标题化合物(0.69g，84％)。

mp：108-118℃

R_f＝0.48(10∶1 CHCl₃∶EtOH)

¹H NMR(300MHz，CD₃OD，旋转异构体复合混合物)δ7.78-7.81(m，2H)，7.40-7.43(m，2H)，7.09-7.12(m，1H)，6.96-7.02(m，2H)，6.16(t，J＝57Hz，1H)，5.09-5.20和4.75-4.80(m，2H)，3.95-4.55(m，8H)，2.10-2.75(m，2H)，1.04-1.11(m，2H)，0.07(s，9H)

APCI-MS：(M+1)＝625m/z

(vii)Ph(3-Cl)(5-OCH₂CHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab×TFA

Ph(3-Cl)(5-OCH₂CHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(Teoc)(0.086g，0.138mmol；参见以上步骤(vi))溶于3mL TFA，让其反应1小时。蒸去TFA，残余物用水/乙腈冷冻干燥获得0.080g(98％)标题化合物的TFA盐。

¹H-NMR(300MHz；CD₃OD)旋转异构体：δ7.8-7.7(m，2H)，7.6-7.5(m，2H)，7.15-6.95(m，3H)，6.35-5.95(m，1H)，5.20(m，1H，次要旋转异构体)，5.14(s，1H，主要旋转异构体)，5.10(s，1H，次要旋转异构体)，4.80(m，1H，主要旋转异构体)，4.6-4.0(m，6H)，2.70(m，1H，次要旋转异构体)，2.53(m，1H，主要旋转异构体)，2.29(m，1H，主要旋转异构体)，2.15(m，1H，次要旋转异构体)。

¹³C-NMR(100MHz；CD₃OD)：(羰基和/或脒碳，旋转异构体)δ174.0，173.8，173.4，172.9，168.2

MS(m/z)481.2(M+1)⁺

实施例18

Ph(3-Cl)(5-OCH₂CHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OMe)

在氮气氛、0℃下，Ph(3-Cl)(5-OCH₂CHF₂)-(R)CH(OH)C(O)OH(0.30g，1.7mmol；参见以上实施例17(v)(化合物(b)))的DMF(15ml)溶液中加入H-Aze-Pab(OMe)×2HCl(0.49g，1.5mmol)、PyBOP(0.65g，1.2mmol)和DIPEA(0.36g，2.8mmol)。将反应物在0℃搅拌2小时，然后在室温下搅拌20小时。真空浓缩混合物，残余物用硅胶色谱法(依次用CHCl₃∶EtOH(10∶1)、EtOAc∶EtOH(10∶1)和CHCl₃∶MEOH(20∶1)洗提)处理三次获得可压碎的白色泡沫状标题化合物(0.47g，81％)。

mp：65-75℃

R_f＝0.37(10∶1 CHCl₃∶EtOH)

¹H NMR(300MHz，CD₃OD，旋转异构体复合混合物)δ7.58-7.60(m，2H)，7.32-7.35(m，2H)，7.09-7.12(m，1H)，6.96-7.02(m，2H)，6.16(t，J＝55Hz，1H)，5.08-5.18和4.74-4.80(m，2H)，3.96-4.50(m，6H)，3.80(s，3H)，2.10-2.75(m，2H)

APCI-MS：(M+1)＝511m/z。

实施例19

Ph(3-Cl)(5-OCH₂F)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab×TFA

(i)Ph(3-Cl)(5-TMSO)-(R，S)CH(OTMS)CN

在0℃，3-氯-5-羟基苯甲醛(9.8g，62.6mmol；参见以上实施例1(ii))和碘化锌(5.0g，15.7mmol)的无水二氯甲烷(500mL)溶液中加入三甲硅烷基氰(13.7g，138mmol)。反应混合物升至室温，搅拌过夜。加入水(250mL)，分离出各层。水层用二氯甲烷(2×300mL)萃取。合并的有机萃取液用硫酸钠干燥，过滤，然后真空浓缩获得黄色油状小标题化合物(16.9g，83％)，直接使用无需再提纯。

R_f＝0.42(3∶1 Hex∶EtOAc)

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.06(s，1H)，6.86(s，2H)，5.40(s，1H)，0.30(s，9H)，0.24(s，9H)。

(ii)Ph(3-Cl)(5-OH)-(R，S)CH(OH)C(O)OH

在氮气氛下，Ph(3-Cl)(5-OTMS)-(R，S)CH(OTMS)CN(22.6g，68.8mmol；参见以上步骤(i))的浓盐酸(200mL)溶液回流3小时。反应物冷却至0℃，用2N NaOH缓慢碱化。将混合物用乙醚(3×100ml)洗涤除去有机杂质。水层用2N HCl酸化，用EtOAc(3×200mL)萃取。合并的有机萃取液用硫酸钠干燥，过滤，然后真空浓缩获得褐色油状小标题化合物(9.3g，67％)，直接使用无需再提纯。

R_f＝0.23(6∶3∶1 CHCl₃∶MeOH∶浓NH₄OH)

¹H NMR(300MHz，CD₃OD)δ7.05(s，1H)，6.94(s，1H)，6.73(s，1H)，5.03(s，1H)。

(iii)Ph(3-Cl)(5-OH)-(R，S)CH(OH)C(O)OEt

Ph(3-Cl)(5-OH)-(R，S)CH(OH)C(O)OH(9.3g，46.0mmol；参见以上步骤(ii))的无水EtOH(200mL)溶液中加入浓硫酸(0.25mL)，反应物在氮气氛下回流4小时。反应物冷却至0℃，加入固体碳酸氢钠(0.2g)。将反应物真空浓缩，用饱和碳酸氢钠(100mL)和乙醚(3×50mL)分配。合并的有机萃取液用硫酸钠干燥，过滤，然后真空浓缩获得黄色油状小标题化合物(6.9g，65％)，它直接使用无需再提纯。

R_f＝0.62(6∶3∶1 CHCl₃∶MeOH∶浓NH₄OH)。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ6.99(s，1H)，6.81(s，2H)，5.07(s，1H)，4.16-4.32(m，2H)，1.23(t，J＝7Hz，3H)。

(iv)Ph(3-Cl)(5-OCH₂F)-(R，S)CH(OH)C(O)OEt

在密封烧瓶中，在氮气氛、0℃下，Ph(3-Cl)(5-OH)-(R，S)CH(OH)C(O)OEt(6.1g，26.8mmol；参见以上步骤(iii))的DMF(100mL)溶液中加入碳酸铯(13.1g，40.2mmol)。反应混合物在0℃搅拌15分钟，接着加入碘化钾(0.5g，2.7mmol)。反应物冷却至-78℃，将氯氟甲烷(18.4g，268mmol)通入容器中。然后将密封烧瓶加温至室温，搅拌18小时。反应混合物冷却至0℃，小心排气以除去过量氯氟甲烷，用水(20mL)和乙醚(3×50mL)分配。合并的有机物用盐水(2×50mL)洗涤，用硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩。硅胶快速色谱法(洗提：Hex∶EtOAc(梯度：9∶1至3∶1))处理获得浅黄色油状小标题化合物(2.4g，35％)。

注意：在紫外光下此化合物在TLC上微弱可见。用溴甲酚绿染色TLC可以使其显现。

R_f＝0.46(2∶1 Hex∶EtOAc)

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.21(s，1H)，7.08(s，1H)，7.05(s，1H)，5.70(d，J_H-F＝54Hz，2H)，5.12(d，J＝5Hz，1H)，3.80-4.35(m，2H)，3.50(d，J＝5Hz，1H)，1.26(t，J＝7Hz，3H)。

(v)Ph(3-Cl)(5-OCH₂F)-(R，S)CH(OH)C(O)OH

在氮气氛、0℃下，Ph(3-Cl)(5-OCH₂F)-(R，S)CH(OH)C(O)OEt(1.8g，6.8mmol；参见以上步骤(iv))的水∶THF(30mL，1∶2)溶液中加入氢氧化锂一水合物(0.40g，10.3mmol)。将混合物在0℃搅拌2小时。真空浓缩反应混合物，用水(5mL)和乙醚(2×20mL)分配。在0℃将水层小心地用0.2N HCl酸化，用EtOAc(3×30mL)萃取。合并的有机物用硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩获得无色油状小标题化合物(1.4g，87％)，它在静置时固化为白色固体。

R_f＝0.43(6∶2∶1 CHCl₃∶MeOH∶Et₃N)

¹H NMR(300MHz，CD₃OD)δ7.24(s，1H)，7.17(s，1H)，7.07(s，1H)，5.78(d，J_H-F＝54Hz，2H)，5.13(s，1H)。

(vi)Ph(3-Cl)(5-OCH₂F)-(R)CH(OH)C(O)OH(a)和Ph(3-Cl)(5-OCH₂F)-(S)CH(OAc)C(O)OH(b)

在氮气氛下，将Ph(3-Cl)(5-OCH₂F)-(R，S)CH(OH)C(O)OH(3.2g，13.9mmol；参见以上步骤(v))和Lipase PS“Amano”(1.9g)的乙酸乙酯(150mL)和MTBE(150mL)混合物在70℃加热3天。将反应混合物冷却，用Celite_过滤，滤饼用EtOAc洗涤。真空浓缩滤液，将其用硅胶快速色谱法(洗提：CHCl₃∶MeOH∶Et₃N(15∶1∶0.5))处理获得小标题化合物(a)的三乙胺盐(0.50g，21％)，无需中和直接使用。此外，获得小标题化合物(b)的三乙胺盐(0.46g，20％)。

小标题化合物(a)的数据：

R_f＝0.19(15∶1∶0.5 CHCl₃∶MeOH∶Et₃N)

¹H NMR(300MHz，CD₃OD)δ7.26(s，1H)，7.18(s，1H)，6.97(s，1H)，5.74(d，J_H-F＝54Hz，2H)，4.81(s，1H)，3.17(q，J＝7Hz，6H)，1.28(t，J＝7Hz，9H)。

小标题化合物(b)的数据

R_f＝0.33(15∶1∶0.5 CHCl₃∶MeOH∶Et₃N)

¹H NMR(300MHz，CD₃OD)δ7.28(s，1H)，7.19(s，1H)，7.09(s，1H)，5.76(d，J_H-F＝54Hz，2H)，5.75(s，1H)，3.17(q，J＝7Hz，6H)，2.16(s，3H)，1.28(t，J＝7Hz，9H)。

(vii)Ph(3-Cl)(5-OCH₂F)(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(Teoc)

在氮气氛、0℃下，Ph(3-Cl)(5-OCH₂F)-(R)CH(OH)C(O)OH的三乙胺盐(0.50g，1.50mmol；参见以上步骤(vi))和HAze-Pab(Teoc)·HCl(0.87g，1.90mmol)的无水DMF(15mL)溶液中加入PyBOP(0.85g，2.60mmol)和DIPEA(0.48g，3.70mmol)。将反应物升至室温，搅拌过夜。真空浓缩反应混合物，用硅胶快速色谱法(依次用CHCl₃∶EtOH(9∶1)和EtOAc∶EtOH(20∶1)洗提)处理两次获得可压碎的白色泡沫状小标题化合物(0.23g，26％)。

Mp：88-92℃

R_f＝0.61(9∶1 CHCl₃∶EtOH)

¹H NMR(300MHz，CD₃OD，旋转异构体的复合混合物)δ7.81(d，J＝8Hz，2H)，7.40-7.42(m，2H)，7.06-7.23(m，3H)，5.76(d，J_H-F＝51Hz，2H)，5.10-5.16和4.77-4.83(m，2H)，3.80-4.49(m，6H)，2.30-2.53(m，2H)，1.08(t，J＝7Hz，2H)，0.08(s，9H)。

APCI-MS(M+1)＝593m/z

(viii)Ph(3-Cl)(5-OCH₂F)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab×TFA

将Ph(3-Cl)(5-OCH₂F)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(Teoc)(0.051g，0.086mmol；参见以上步骤(vii))溶于3mL TFA，让其反应20分钟。蒸去TFA，残余物用水/乙腈冷冻干燥。产物纯度95％，含有5％脱氟甲基化产物。尝试用制备型RPLC(CH₃CN∶0.1M NH₄OAc)纯化失败，将部分为醋酸盐的产物溶于5mL TFA，蒸发，冷冻干燥获得26mg(51％)标题化合物的TFA盐。纯度：95％。

¹H-MR(600MHz；CD₃OD)旋转异构体：δ7.8-7.7(m，2H)，7.6-7.5(m，2H)，7.21(s，1H，主要旋转异构体)，7.17(s，1H，次要旋转异构体)，7.13(s，1H，主要旋转异构体)，7.09(s，1H，次要旋转异构体)，7.07(m，1H，主要旋转异构体)，7.04(m，1H，次要旋转异构体)，5.73(d，2H)，5.18(m，1H，次要旋转异构体)，5.16(s，1H，主要旋转异构体)，5.09(s，1H，次要旋转异构体)，4.78(m，1H，次要旋转异构体)，4.56(d，1H，主要旋转异构体)，4.50(d，1H，次要旋转异构体)，4.46(d，1H，次要旋转异构体)，4.45(d，1H，主要旋转异构体)，4.35(m，1H，主要旋转异构体)，4.14(m，1H，主要旋转异构体)，4.05(m，1H，次要旋转异构体)，3.97(m，1H，次要旋转异构体)，2.68(m，1H，次要旋转异构体)，2.52(m，1H，主要旋转异构体)，2.28(m，1H，主要旋转异构体)，2.19(m，1H，次要旋转异构体)。

¹³C-NMR(150MHz；CD₃OD)：(羰基和/或脒碳，旋转异构体)δ173.9，173.3，172.9，168.2。

ESI-MS+：(M+1)＝449(m/z)

实施例20

Ph(3-Cl)(5-OCH₂F)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OMe)

在氮气氛、0℃下，Ph(3-Cl)(5-OCH₂F)-(R)CH(OH)C(O)OH的三乙胺盐(0.60g，1.80mmol；参见以上实施例19(vi))和HAze-Pab(OMe)·2HCl(0.79g，2.30mmol)的DMF(15mL)溶液中加入PyBOP(1.04g，1.90mmol)和DIPEA(0.58g，4.50mmol)。将反应物升至室温，搅拌过夜。真空浓缩反应混合物，用硅胶快速色谱法(先用CHCl₃∶EtOH(9∶1)洗提，然后用EtOAc∶EtOH(20∶1)洗提两次)处理三次获得可压碎的白色泡沫状标题化合物(0.22g，26％)。

Mp：66-70℃

R_f＝0.45(9∶1 CHCl₃∶EtOH)

¹H NMR(300MHz，CD₃OD，旋转异构体复合混合物)δ7.59(d，J＝8Hz，2H)，7.32(d，J＝7Hz，2H)，7.06-7.23(m，3H)，5.75(s，J_H-F＝54Hz，1H)，5.10-5.16和4.78-4.84(m，2H)，4.11-4.45(m，4H)，3.80(s，3H)，2.10-2.75(m，2H)。

¹³C-NMR(150MHz；CD₃OD)：(羰基和/或脒碳，旋转异构体)δ173.0，170.8，170.7，152.5。

APCI-MS：(M+1)＝479m/z

实施例21

Ph(3-Cl)(5-OCH₂CH₂F)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab×TFA

(i)甲磺酸2-单氟代乙酯

在氮气氛、0℃下，向磁搅拌下的2-氟乙醇(5.0g，78.0mmol)的二氯甲烷(90mL)溶液中加入三乙胺(23.7g，234mmol)和甲磺酰氯(10.7g，93.7mmol)。将混合物在0℃搅拌1.5h，用二氯甲烷(100mL)稀释，用2N HCl(100mL)洗涤。水层用二氯甲烷(50ml)萃取，合并的有机萃取液用盐水(75mL)洗涤，用硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩获得黄色油状小标题化合物(9.7g，88％)，它直接使用无需再提纯。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ4.76(t，J＝4Hz，1H)，4.64(t，J＝4Hz，1H)，4.52(t，J＝4Hz，1H)，4.43(t，J＝4Hz，1H)，3.09(s，3H)。

(ii)3-氯-5-单氟代乙氧基苯甲醛

在氮气氛、室温下，向3-氯-5-羟基苯甲醛(8.2g，52.5mmol，参见以上实施例1(ii))和碳酸钾(9.4g，68.2mmol)的DMF(10mL)溶液滴加甲磺酸2-单氟代乙酯(9.7g，68.2mmol；参见以上步骤(i))的DMF(120mL)溶液。将混合物加热至100℃ 5小时，然后在室温下搅拌过夜。反应物冷却至0℃，倾入冰冷的2N HCl，用EtOAc萃取。合并的有机萃取液用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩。褐色油状物用硅胶色谱法(用Hex∶EtOAc(4∶1)洗提)处理获得黄色油状小标题化合物(7.6g，71％)。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ9.92(s，1H)，7.48(s，1H)，7.32(s，1H)，7.21(s，1H)，4.87(t，J＝4Hz，1H)，4.71(t，J＝3Hz，1H)，4.33(t，J＝3Hz，1H)，4.24(t，J＝3Hz，1H)。

(iii)Ph(3-Cl)(5-OCH₂CH₂F)-(R，S)CH(OTMS)CN

在氮气氛、0℃下，向3-氯-5-单氟代乙氧基苯甲醛(7.6g，37.5mmol；参见以上步骤(ii))和碘化锌(3.0g，9.38mmol)的二氯甲烷(310mL)溶液滴加三甲硅烷基氰(7.4g，75.0mmol)。将混合物在0℃搅拌3小时，然后在室温搅拌过夜。反应物用水(300mL)稀释，分离出有机层，用硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩获得褐色油状小标题化合物(10.6g，94％)，直接使用无需再提纯或特征化。

(iv)Ph(3-Cl)(5-OCH₂CH₂F)-(R，S)CH(OH)C(O)OH

将浓盐酸(100mL)加入到Ph(3-Cl)(5-OCH₂CH₂F)-(R，S)CH(OTMS)CN(10.6g，5.8mmol；参见以上步骤(iii))，将溶液在100℃搅拌3小时。冷却至室温后，反应物进一步冷却至0℃，用3N NaOH(～300mL)缓慢碱化，用乙醚(3×200mL)洗涤。水层用2N HCl(80mL)酸化，用EtOAc萃取(3×300mL)。合并的EtOAc萃取液用硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩获得浅黄色固体小标题化合物(8.6g，98％)，直接使用无需再提纯。

R_f＝0.28(90∶8∶2 CHCl₃∶MeOH浓NH₄OH)

¹H NMR(300MHz，CD₃OD)δ7.09(s，1H)，7.02(s，1H)，6.93(s，1H)，5.11(s，1H)，4.77-4.81(m，1H)，4.62-4.65(m，1H)，4.25-4.28(m，1H)，4.15-4.18(m，1H)。

(v)Ph(3-Cl)(5-OCH₂CH₂F)-(S)CH(OAc)C(O)OH(a)和Ph(3-Cl)(5-OCH₂CH₂F)-(R)CH(OH)C(O)OH(b)

在氮气氛下，将Ph(3-Cl)(5-OCH₂CH₂F)-(R，S)CH(OH)C(O)OH(8.6g，34.5mmol；参见以上步骤(iv))和Lipase PS“Amano”(4.0g)的乙酸乙酯(250mL)和MTBE(250mL)溶液在70℃加热3天。反应物冷却至室温，用Celite_过滤除去酶。滤饼用EtOAc洗涤，真空浓缩滤液。用硅胶色谱法(洗提：CHCl₃∶MeOH∶Et₃N(90∶8∶2))处理获得黄色油状小标题化合物(a)的三乙胺盐。此外，获得小标题化合物(b)的三乙胺盐(4.0g)。将小标题化合物(b)的盐溶于H₂O(250mL)，用2N HCl酸化，用EtOAc(3×200mL)萃取。合并的有机萃取液用硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩获得黄色油状小标题化合物(b)(2.8g，32％)。

小标题化合物(b)的数据：

R_f＝0.28(90∶8∶2 CHCl₃∶MeOH∶浓NH₄OH)

¹H NMR(300MHz，CD₃OD)δ7.09(s，1H)，7.02(s，1H)，6.93(s，1H)，5.11(s，1H)，4.77-4.81(m，1H)，4.62-4.65(m，1H)，4.25-4.28(m，1H)，4.15-4.18(m，1H)。

(vi)Ph(3-Cl)(5-OCH₂CH₂F)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(Teoc)

在氮气氛、0℃下，Ph(3-Cl)(5-OCH₂CH₂F)-(R)CH(OH)C(O)OH(940mg，3.78mmol；参见以上步骤(v))的DMF(30ml)溶液中加入HAze-Pab(Teoc)·HCl(2.21g，4.91mmol)、PyBOP(2.16g，4.15mmol)和DIPEA(1.22g，9.45mmol)。反应物在0℃搅拌2小时，然后在室温下搅拌4小时。真空浓缩混合物，残余物用硅胶色谱法(依次用CHCl₃∶EtOH(15∶1)和EtOAc∶EtOH(20∶1)洗提)处理两次获得可压碎的白色泡沫状小标题化合物(450mg，20％)。

Mp：80-88℃

R_f＝0.60(10∶1 CHCl₃∶EtOH)

¹H NMR(300MHz，CD₃OD，旋转异构体复合混合物)δ7.79(d，J＝8Hz，2H)，7.42(d，J＝8Hz，2H)，7.05-7.08(m，1H)，6.93-6.99(m，2H)，5.08-5.13(m，1H)，4.75-4.80(m，2H)，4.60-4.68(m，1H)，3.95-4.55(m，8H)，2.10-2.75(m，2H)，1.05-1.11(m，2H)，0.08(s，9H)。

APCI-MS：(M+1＝607)m/z。

(vii)Ph(3-Cl)(5-OCH₂CH₂F)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab×TFA

将Ph(3-Cl)(5-OCH₂CH₂F)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(Teoc)(0.357g，0.589mmol；参见以上步骤(vi))溶于10mL TFA，让其反应40分钟。蒸去TFA，残余物用水/乙腈冷冻干燥获得0.33g(93％)标题化合物的TFA盐。

¹H-NMR(600MHz；CD₃OD)旋转异构体：δ7.8-7.7(m，2H)，7.54(d，2H)，7.08(s，1H，主要旋转异构体)，7.04(s，1H，次要旋转异构体)，6.99(s，1H，主要旋转异构体)，6.95(s，1H)，6.92(s，1H，次要旋转异构体)，5.18(m，1H，次要旋转异构体)，5.14(s，1H，主要旋转异构体)，5.08(s，1H，次要旋转异构体)，4.80(m，1H，主要旋转异构体)，4.73(m，1H)，4.65(m，1H)，4.6-4.4(m，2H)，4.35(m，1H，主要旋转异构体)，4.21(多重峰型双峰；2H)，4.12(m，1H，主要旋转异构体)，4.06(m，1H，次要旋转异构体)，3.99(m，1H，次要旋转异构体)，2.69(m，1H，次要旋转异构体)，2.53(m，1H，主要旋转异构体)，2.29(m，1H，主要旋转异构体)，2.14(m，1H，次要旋转异构体)。

¹³C-NMR(150MHz；CD₃OD)：(羰基和/或脒碳)δ172.8，172.1，167.4。

ESI-MS+：(M+1)＝463(m/z)

实施例22

Ph(3-Cl)(5-OCH₂CH₂F)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OMe)

在氮气氛、0℃下，Ph(3-Cl)(5-OCH₂CH₂F)-(R)CH(OH)C(O)OH(818mg，3.29mmol；参见以上实施例21(v))的DMF(30ml)溶液中加入HAze-Pab(OMe)·2HCl(1.43g，4.27mmol)、PyBOP(1.89g，3.68mmol)和DIPEA(1.06g，8.23mmol)。反应物在0℃搅拌2小时，然后在室温搅拌过夜。真空浓缩混合物，残余物用硅胶色谱法处理(依次用CHCl₃∶EtOH(15∶1)和EtOAc∶EtOH(20∶1))两次获得可压碎的白色泡沫状标题化合物(880mg，54％)。

Mp：65-72℃

R_f＝0.60(10∶1 CHCl₃∶EtOH)

¹H NMR(300MHz，CD₃OD，旋转异构体复合混合物)δ7.58-7.60(d，J＝8Hz，2H)，7.34(d，J＝7Hz，2H)，7.05-7.08(m，2H)，6.95-6.99(m，1H)，5.08-5.13(m，1H)，4.77-4.82(m，1H)，4.60-4.68(m，1H)，3.99-4.51(m，7H)，3.82(s，3H)，2.10-2.75(m，2H)。

¹³C-NMR(150MHz；CD₃OD)：(羰基和/或脒碳)δ173.3，170.8，152.5。

APCI-MS：(M+1)＝493m/z。

实施例23

Ph(3-Cl)(5-OCH(CH₂F)₂-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab×TFA

(i)甲磺酸1，3-二氟异丙酯

在氮气氛、0℃下，向磁搅拌下的1，3-二氟-2-丙醇(7.0g，72.8mmol)的二氯甲烷(100mL)溶液加入三乙胺(22.1g，219mmol)和甲磺酰氯(10.0g，87.4mmol)。将混合物在0℃搅拌3小时。将混合物用2NHCl(150mL)洗涤，分离出各层。水层用二氯甲烷(200mL)萃取，合并的有机萃取液用盐水(100mL)洗涤，用硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩获得黄色油状小标题化合物(11.5g，91％)，它直接使用无需再提纯。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ4.97-5.08(m，1H)，4.75-4.77(m，2H)，4.59-4.61(m，2H)，3.12(s，3H)。

(ii)Ph(3-Cl)(5-OCH(CH₂F)₂)CHO

在氮气氛、室温下，3-氯-5-羟基苯甲醛(8.0g，50.7mmol；参见以上实施例1(ii))和碳酸钾(9.1g，66.0mmol)的DMF(75mL)溶液中滴加甲磺酸1，3-二氟异丙酯(11.5g，66.0mmol；参见以上步骤(i))的DMF(75mL)溶液。将混合物加热至110℃18小时。将反应物冷却至0℃，倾入冰冷的2N HCl(200mL)，用EtOAc(3×250mL)萃取。合并的有机萃取液用硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩。褐色油状物用硅胶色谱法(用Hex∶EtOAc(4∶1)洗提)处理获得黄色油状小标题化合物(4.4g，37％)。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ9.92(s，1H)，7.51(s，1H)，7.36(s，1H)，7.26(s，1H)，4.70-4.89(m，3H)，4.63-4.68(m，2H)。

(iii)Ph(3-Cl)(5-OCH(CH₂F)₂)-(R，S)CH(OTMS)CN

在氮气氛、0℃下，向Ph(3-Cl)(5-OCH(CH₂F)₂)CHO(4.4g，18.7mmol；参见以上步骤(ii))和碘化锌(1.5g，4.67mmol)的二氯甲烷(200mL)溶液中滴加三甲硅烷基氰(3.7g，37.3mmol)。将混合物在0℃搅拌3小时，在室温搅拌过夜，然后用水(200mL)稀释。分离出有机层，用硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩获得褐色油状小标题化合物(5.5g，87％)，直接使用无需再提纯。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.12(s，1H)，7.00(s，2H)，5.42(s，1H)，4.70-4.80(m，3H)，4.59-4.64(m，2H)，0.26(s，9H)。

(iv)Ph(3-Cl)(5-OCH(CH₂F₂)-(R，S)CH(OH)C(O)OH

将浓盐酸(50mL)加入到Ph(3-Cl)(5-OCH(CH₂F)₂)(R，S)CH(OTMS)CN(5.5g，16.3mmol；参见以上步骤(iii))，将溶液在100℃搅拌1.5小时。冷却至室温后，反应物进一步冷却至0℃，用3NNaOH(～200mL)缓慢碱化，用乙醚(3×200mL)洗涤。水层用2N HCl(75mL)酸化，用EtOAc(3×200mL)萃取。合并的EtOAc萃取液用硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩获得褐色油状小标题化合物(4.6g，100％)，直接使用无需再提纯。

¹H NMR(300MHz，CD₃OD)δ7.14(s，1H)，7.08(s，1H)，7.02(s，1H)，5.12(s，1H)，4.70-4.90(m，3H)，4.52-4.67(m，2H)。

(v)Ph(3-Cl)(5-OCH(CH₂F)₂)-(S)CH(OAc)C(O)OH(a)和Ph(3-Cl)(5-OCH(CH₂F₂)-(R)CH(OH)C(O)OH(b)

在氮气氛下，将Ph(3-Cl)(5-OCH(CH₂F)₂)-(R，S)CH(OH)C(O)OH(4.6g，16.4mmol；参见以上步骤(iv))和Lipase PS“Amano”(3.0g)的乙酸乙酯(150mL)和MTBE(150mL)溶液在70℃加热2.5天。反应物冷却至室温，用Celite_过滤除去酶。滤饼用EtOAc洗涤，真空浓缩滤液。硅胶色谱法(洗提：CHCl₃∶MeOH∶Et₃N(90∶8∶2))处理获得黄色油状小标题化合物(a)的三乙胺盐。此外，获得小标题化合物(b)的三乙胺盐(2.2g)，将此盐溶于水(100mL)，用2N HCl酸化，用EtOAc(3×200mL)萃取。合并的有机萃取液用硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩获得黄色油状小标题化合物(b)(1.4g，29％)。

小标题化合物(b)的数据：

¹H NMR(300MHz，CD₃OD)δ7.14(s，1H)，7.08(s，1H)，7.02(s，1H)，5.12(s，1H)，4.70-4.90(m，3H)，4.52-4.67(m，2H)。

(vi)Ph(3-Cl)(5-OCH(CH₂F)₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(Teoc)

在氮气氛、0℃下，Ph(3-Cl)(5-OCH(CH₂F)₂)-(R)CH(OH)C(O)OH(824mg，2.94mmol；参见以上步骤(v))的DMF(30mL)溶液中加入HAze-Pab(Teoc)·HCl(1.71g，3.81mmol)、PyBOP(1.68g，3.23mmol)和DIPEA(949mg，7.34mmol)。将反应物在0℃搅拌2小时，然后在室温搅拌过夜。真空浓缩混合物，残余物用硅胶色谱法(依次用CHCl₃∶EtOH(15∶1)、EtOAc∶EtOH(20∶1)洗提)处理两次获得可压碎的白色泡沫状小标题化合物(720mg，38％)。

Mp：78-84℃

R_f＝0.62(10∶1 CHCl₃∶EtOH)

¹H NMR(300MHz，CD₃OD，旋转异构体复合混合物)δ7.79(d，J＝8Hz，2H)，7.42(d，J＝8Hz，2H)，7.00-7.12(m，3H)，5.08-5.20(m，1H)，3.97-4.80(m，12H)，2.10-2.75(m，2H)，1.05-1.11(m，2H)，0.08(s，9H)。

APCI-MS：(M+1)＝639m/z。

(vii)Ph(3-Cl)(5-OCH(CH₂F)₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab×TFA

Ph(3-Cl)(5-OCH(CH₂F)₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(Teoc)(0.129g，0.202mmol；参见以上步骤(vi))溶于3mL TFA，让其反应20分钟。蒸去TFA，残余物用水/乙腈冷冻干燥获得0.123g(100％)标题化合物的TFA盐。

¹H-NMR(400MHz；CD₃OD)旋转异构体：δ7.8-7.7(m，2H)，7.55(d，2H)，7.2-7.0(m，3H)，5.18(m，1H，次要旋转异构体)，5.15(s，1H，主要旋转异构体)，5.08(s，1H，次要旋转异构体)，4.80(m，1H，主要旋转异构体，部分被CD₃OH的峰屏蔽)，4.75-4.4(m，7H)，4.38(m，1H，主要旋转异构体)，4.15(m，1H，主要旋转异构体)，4.1-3.9(m，2H，2个信号来自次要旋转异构体)，2.70(m，1H，次要旋转异构体)，2.53(m，1H，主要旋转异构体)，2.30(m，1H，主要旋转异构体)，2.15(m，1H，次要旋转异构体)。

¹³C-NMR(100MHz；CD₃OD)：(羰基和/或脒碳，旋转异构体)δ172.9，172.6，172.2，171.7，167.1。

ESI-MS+：(M+1)＝495(m/z)

实施例24

Ph(3-Cl)(5-OCH(CH₂F)₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OMe)

在氮气氛、0℃下，Ph(3-Cl)(5-OCH(CH₂F)₂)-(R)CH(OH)C(O)OH(513mg，1.83mmol；参见以上实施例23(v)的DMF(30ml)溶液中加入HAze-Pab(OMe)·2HCl(797mg，2.38mmol)、PyBOP(1.04g，2.01mmol)和DIPEA(591mg，4.57mmol)。将反应物在0℃搅拌2小时，然后在室温搅拌过夜。真空浓缩混合物，残余物用硅胶色谱法(依次用CHCl₃∶EtOH(15∶1)、EtOAc∶EtOH(20∶1)洗提)处理两次获得可压碎的白色泡沫状标题化合物(370mg，39％)。

Mp：58-63℃

R_f＝0.66(10∶1 CHCl₃∶EtOH)

¹H NMR(300MHz，CD₃OD，旋转异构体复合混合物)δ7.58-7.60(d，J＝8Hz，2H)，7.34(d，J＝8Hz，2H)，7.00-7.12(m，3H)，5.08-5.20(m，1H)，4.65-4.82(m，3H)，4.28-4.65(m，5H)，3.92-4.18(m，2H)，3.82(s，3H)，2.10-2.75(m，2H)。

¹³C-NMR(150MHz；CD₃OD)：(羰基和/或脒碳)δ173.2，170.8，152.5。

APCI-MS：(M+1)＝525m/z。

实施例25

Ph(3-F)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab×TFA

(i)1-溴-3-氟-5-苄氧基苯

将氢化钠(60％分散于油中，24.0g，0.48mol)分批加入搅拌下的无水苄基醇(64.5g，0.60mol)的THF(1.0L)溶液。将混合物搅拌1小时后，在1小时内滴加1-溴-3，5-二氟苯(76.8g，0.40mmol)的THF(100ml)溶液。反应物在室温下搅拌2天。加入水(400ml)，真空除去THF。水层用己烷(3×150mL)萃取。合并的有机萃取液用2N NaOH(2×100mL)洗涤，然后用硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩获得浅黄色油状小标题化合物(110.7g，98％)，直接使用无需再提纯。

R_f＝0.47(Hex)

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.36-7.41(m，5H)，6.94(bs，1H)，6.87(d，J_H-F＝8Hz，1H)，6.63(d，J_H-F＝10Hz，1H)，5.03(s，2H)。

(ii)3-溴-5-氟苯酚

在0℃，1-溴-3-氟-5-苄氧基苯(110.0g，0.39mol；参见以上步骤(i))和N，N-二甲基苯胺(474.0g，3.92mol)的无水二氯甲烷(1.0L)溶液中加入氯化铝(156.0g，1.17mol)。10分钟后，除去冰浴，继续搅拌2小时。小心加入3N HCl(600mL)猝灭反应。分离出各层，水层用CH₂Cl₂(2×150mL)萃取。合并的有机萃取液用2N HCl(250ml)和水(3×250mL)洗涤。有机层中加入15％ KOH(500mL)，分离出水层。有机层再用2N KOH(2×70mL)萃取。合并的水层用二氯甲烷(3×100ml)洗涤，然后用4N HCl酸化。水层用乙醚(3×125mL)萃取，合并的乙醚萃取液用硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩获得褐色油状小标题化合物(69.0g，92％)，直接使用无需再提纯。

Mp：33-35℃

R_f＝0.25(CHCl₃)

¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ10.38(s，1H)，6.90(dd，J_H-F＝11Hz，J＝2Hz，1H)，6.81(s，1H)，6.59(dt，J_H-F＝11Hz，J＝2Hz，1H)。

APCI-MS：(M-1)＝189m/z

(iii)1-溴-3-氟-5-二氟甲氧基苯

将3-溴-5-氟苯酚(6.1g，31.0mmol；参见以上步骤(ii))和氯代二氟甲烷(13.0g，150.0mmol)的i-PrOH(100mL)和30％ KOH(80mL)混合物在密闭烧瓶中于80-85℃加热18小时。将反应混合物冷却至室温，分离出各层。真空浓缩有机层获得无色油状物。水层用乙醚(3×30mL)萃取。粗制油状物以及合并的有机萃取液用2N NaOH(3×30mL)和水(3×30mL)洗涤。然后有机物用硫酸钠干燥，通过小硅胶填料过滤，然后真空浓缩获得无色油状小标题化合物(6.1g，79％)，直接使用无需再提纯。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.11-7.14(m，2H)，6.84(dt，J＝9Hz，J＝2Hz，1H)，6.50(t，J_H-F＝72Hz，1H)。

(iv)1-氟-3-二氟甲氧基-5-乙烯苯

在氮气氛、65℃下，将三(丁基)乙烯基锡(7.0g，22.2mmol)加入1-溴-3-氟-5-二氟甲氧基苯(4.9g，20.2mmol；参见以上步骤(iii))、双(三苯基膦)二氯化钯(II)(1.42g，2.02mmol)和无水氯化锂(0.90g，20.2mmol)的THF(40mL)悬浮液，混合物搅拌5小时。反应混合物冷却至0℃，加入1N NaOH(90mL)。将两相性混合物剧烈搅拌1小时，然后分离出各层。水层用乙醚(3×70mL)萃取。合并的有机层用2NNaOH(2×40mL)和水(40mL)洗涤，然后用硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩。硅胶快速色谱法(洗提：己烷)处理获得无色油状小标题化合物(2.2g，57％)。

R_f＝0.47(Hex)

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ6.93-6.99(m，2H)，6.73-6.78(m，1H)，6.67(dd，J＝18Hz，J＝11Hz，1H)，6.51(t，J_H-F＝73Hz，1H)，5.77(d，J＝18Hz，1H)，5.36(d，J＝11Hz，1H)。

(v)Ph(3-F)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)CH₂OH

将2-甲基-2-丙醇(140mL)、水(140mL)和AD-mix-β(39.2g)混合在一起，冷却至0℃。一次性加入溶于少量2-甲基-2-丙醇的1-氟-3-二氟甲氧基-5-乙烯苯(5.0g，26.4mmol；参见以上步骤(iv))，将此不均匀浆状物在0℃剧烈搅拌直到TLC显示不存在初始原料为止。在0℃加入亚硫酸钠(42.0g)猝灭反应，然后升至室温，搅拌60分钟。反应混合物用乙醚(3×120mL)萃取。合并的有机萃取液用硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩。硅胶快速色谱法(洗提：CHCl₃∶EtOAc(3∶2))处理获得无色油状小标题化合物(5.8g，98％)。

R_f＝0.41(3∶2 CHCl₃∶EtOAc)

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ6.96-6.99(m，2H)，6.77-6.82(m，1H)，6.51(t，J_H-F＝73Hz，1H)，4.79-4.85(m，1H)，3.76-3.84(m，1H)，3.58-3.66(m，1H)，2.66(d，J＝3Hz，1H)，2.00(t，J＝6Hz，1H)。

HPLC分析：89.2％，＞99％ee，ChiralPak AD柱(95∶5 Hex∶EtOH流动相)。

(vi)Ph(3-F)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)CH₂OTBS

将Ph(3-F)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)CH₂OH(5.5g，24.7mmol；参见以上步骤(v))、4-(二甲基氨基)吡啶(121mg，1.0mmol)和三乙胺(3.0g，29.6mmol)的无水二氯甲烷(100mL)溶液冷却至0℃。滴加1.0M叔丁基二甲硅烷基氯的二氯甲烷(26.0mL，26.0mmol)溶液，将反应混合物升至室温，搅拌过夜。加入饱和氯化铵溶液(60mL)，分离出各层。有机层用饱和氯化铵溶液(60mL)和水(2×35mL)洗涤，然后用硫酸钠干燥，过滤，然后真空浓缩。硅胶快速色谱法(洗提：CHCl₃∶Hex(3∶1))处理获得黄色油状小标题化合物(7.9g，85％)。

R_f＝0.47(3∶1 CHCl₃∶Hex)

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ6.95-6.98(m，2H)，6.76-6.79(m，1H)，6.51(t，J_H-F＝73Hz，1H)，4.71-4.74(m，1H)，3.75-3.80(m，1H)，3.48-3.54(m，1H)，2.99(bs，1H)，0.91(s，9H)，0.05(s，3H)，0.00(s，3H)。

(vii)Ph(3-F)(5-OCHF₂)-(R)CH(OMEM)CH₂OTBS

在氮气氛、0℃下，向Ph(3-F)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)CH₂OTBS(7.9g，0.51mmol；参见以上步骤(vi))和DIPEA(4.9g，48.1mmol)的无水二氯甲烷(50mL)溶液滴加2-甲氧基乙氧基甲基氯(6.6g，48.1mmol)。将混合物搅拌24小时。加入饱和氯化铵溶液(70mL)，分离出各层。有机层用饱和氯化铵溶液(70mL)和水(3×60mL)洗涤，然后用硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩获得黄色油状小标题化合物(8.8g，99％)，直接使用无需再提纯。

R_f＝0.41(4∶1 CHCl₃∶EtOAc)

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.20(s，1H)，7.06(s，1H)，7.02(s，1H)，6.50(t，J_H-F＝73Hz，1H)，4.79-4.81(m，1H)，4.66-4.68(m，2H)，3.47-3.82(m，6H)，3.36(s，3H)，0.85(s，9H)，0.01(s，3H)，0.00(s，3H)。

(viii)Ph(3-F)(5-OCHF₂)-(R)CH(OMEM)CH₂OH

在室温下，Ph(3-F)(5-OCHF₂)-(R)CH(OMEM)CH₂OTBS(9.3g，21.9mmol；参见以上步骤(vii))的THF(60mL)溶液中加入1.0M四丁基氟化铵的THF(70.0mL，70.0mmol)溶液，在氮气氛下将混合物搅拌过夜。真空浓缩反应物。将黄色残余物溶于乙醚(100mL)和己烷(100mL)，依次用饱和氯化铵溶液(2×150mL)和水(3×70mL)洗涤。有机层用硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩。硅胶快速色谱法(洗提：Hex∶EtOAc(1∶1))处理获得黄色油状小标题化合物(4.2g，62％)。

R_f＝0.42(1∶1 Hex∶EtOAc)

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ6.91-6.95(m，2H)，6.75-6.81(m，1H)，6.51(t，J_H-F＝73Hz，1H)，4.80-4.82(m，1H)，4.70-4.74(m，2H)，3.88-3.93(m，1H)，3.67-3.71(m，3H)，3.53-3.56(m，2H)，3.39(s，3H)，2.96-2.99(m，1H)。

(ix)Ph(3-F)(5-OCHF₂)-(R)CH(OMEM)C(O)OH

将Ph(3-F)(5-OCHF₂)-(R)CH(OMEM)CH₂OH(4.2g，13.4mmol；参见以上步骤(viii))的丙酮(100mL)溶液加入5％ NaHCO₃水溶液(35mL)。将磁搅拌下的不均匀混合物冷却至0℃，加入溴化钾(159mg，1.3mmol)和2，2，6，6-四甲基-1-哌啶氧基，游离基(2.2g，14.1mmol)。然后在20分钟内滴加次氯酸钠(5.25％，30mL)，同时剧烈搅拌混合物并保持在0℃。1小时后，再加入次氯酸钠(30mL)和5％ NaHCO₃溶液(35mL)，继续在0℃搅拌2小时。真空除去丙酮。水层用乙醚(4×40mL)洗涤。用10％柠檬酸将水层酸化至pH3.5，用EtOAc(4×50mL)萃取。合并的EtOAc萃取液依次用水(4×30ml)和盐水(60mL)洗涤，然后用硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩获得无色油状小标题化合物(4.3g，98％)，它直接使用无需再提纯。

R_f＝0.74(8.0∶1.5∶0.5 CHCl₃∶MeOH∶Et₃N)

¹H NMR(300MHz，丙酮-d₆)δ7.16-7.18(m，2H)，7.16(t，J_H-F＝89Hz，1H)，7.00-7.03(m，1H)，5.30(s，1H)，4.88(d，J＝7Hz，1H)，4.80(d，J＝7Hz，1H)，3.54-3.75(m，2H)，3.46-3.49(m，2H)，3.28(s，3H)。

(x)Ph(3-F)(5-OCHF₂)-(R)CH(OMEM)C(O)-Aze-Pab(Teoc)

在氮气氛、0℃下，Ph(3-F)(5-OCHF₂)-(R)CH(OMEM)C(O)OH(1.1g，3.4mmol；参见以上步骤(ix))的DMF(20mL)溶液中加入HAze-Pab(Teoc)·HCl(2.0g，4.4mmol)、PyBOP(1.9g，3.7mmol)和DIPEA(1.1g，8.4mmol)。将反应物在0℃搅拌2小时，然后在室温搅拌过夜。真空浓缩混合物，残余物用硅胶色谱法(依次用CHCl₃∶EtOH(15∶1)、EtOAc∶EtOH(20∶1)洗提)处理两次获得可压碎的白色泡沫状小标题化合物(1.3g，56％)。

R_f＝0.65(15∶1 CHCl₃∶EtOH)

¹H NMR(300MHz，CD₃OD，旋转异构体的复合混合物)δ7.80-7.84(m，2H)，7.40-7.46(m，2H)，6.95-7.16(m，3H)，6.92和6.88(t，J_H-F＝73Hz，1H)，5.28和5.08(s，1H)，5.18-5.22和4.70-4.78(m，1H)，4.50-4.75(m，1H)，4.30-4.49(m，2H)，4.21-4.26(m，3H)，3.97-4.08(m，1H)，3.35-3.72(m，6H)，3.30(s，3H)，2.10-2.75(m，2H)，1.05-1.11(m，2H)，0.08(s，9H)。

(xi)Ph(3-F)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(Teoc)

将Ph(3-F)(5-OCHF₂)-(R)CH(OMEM)C(O)-Aze-Pab(Teoc)(590mg，0.87mmol；参见以上步骤(x))和四溴化碳(287mg，0.87mmol)的2-丙醇(20mL)混合物回流1.5小时。真空浓缩混合物，然后用水(50mL)和EtOAc(3×50mL)分配。水层再用EtOAc(2×10mL)萃取。合并的有机萃取液用盐水(30mL)洗涤，然后用硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩。硅胶快速色谱法(洗提：CHCl₃∶EtOH(15∶1))处理获得可压碎的白色泡沫状小标题化合物(60mg，12％)。

R_f＝0.46(15∶1 CHCl₃∶EtOH)

¹H NMR(300MHz，CD₃OD，旋转异构体复合混合物)δ7.74(d，J＝8Hz，2H)，7.35-7.37(m，2H)，6.97-7.07(m，2H)，6.80-6.84(m，1H)，6.82和6.80(t，J_H-F＝73Hz，1H)，5.10和5.06(s，1H)，4.68-4.70(m，1H)，3.97-4.60(m，6H)，2.10-2.75(m，2H)，1.05-1.11(m，2H)，0.08(s，9H)。

APCI-MS：(M+1)＝595m/z

(xii)Ph(3-F)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab×TFA

将Ph(3-F)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(Teoc)(0.053g，0.089mmol；参见以上步骤(xi))溶于3mL TFA，让其反应80分钟，同时用冰浴冷却。蒸去TFA，残余物用水/乙腈冷冻干燥获得0.042g(80％)标题化合物的TFA盐。

¹H-NMR(300MHz；CD₃OD)旋转异构体∶δ7.7-7.6(m，2H)，7.5-7.4(m，2H)，7.1-6.6(m，4H)，5.2-5.0(m，1H和1H的次要旋转异构体)，约4.8(前一信号被CD₃OH信号屏蔽的主要旋转异构体)，4.6-4.3(m，2H)，4.26(m，1H，主要旋转异构体)，4.10(m，1H，主要旋转异构体)，3.96(m，1H，次要旋转异构体)，3.89(m，1H，次要旋转异构体)，2.60(m，1H，次要旋转异构体)，2.44(m，1H，主要旋转异构体)，2.19(m，1H，主要旋转异构体)，2.05(m，1H，次要旋转异构体)。

¹³C-NMR(100MHz；CD₃OD)：(羰基和/或脒碳)δ172.8，172.0，167.0。

ESI-MS+：(M+1)＝451(m/z)

实施例26

Ph(3-F)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OMe)

(i)Ph(3-F)(5-OCHF₂)-(R)CH(OMEM)C(O)-Aze-Pab(OMe)

在氮气氛、0℃下，Ph(3-F)(5-OCHF₂)-(R)CH(OMEM)C(O)OH(1.0g，3.1mmol；参见以上实施例25(ix))的DMF(30mL)溶液中加入HAze-Pab(OMe)·2HCl(1.4g，4.1mmol)、PyBOP(1.8g，3.4mmol)和DIPEA(1.0g，7.8mmol)。反应物在0℃搅拌2小时，然后在室温搅拌过夜。真空浓缩混合物，残余物用硅胶色谱法处理两次(依次用CHCl₃∶EtOH(15∶1)、'EtOAc洗提)获得可压碎的白色泡沫状小标题化合物(1.5g，79％)。

R_f＝0.24(EtOAc)

¹H NMR(300MHz，CD₃OD，旋转异构体的复合混合物)δ7.58-7.62(m，2H)，7.32-7.38(m，2H)，7.03-7.16(m，3H)，6.92和6.88(d，J_H-F＝73Hz，1H)，5.27和5.08(s，1H)，5.22-5.15和4.75-4.80(m，1H)，4.38-4.65(m，5H)，3.92-4.27(m，1H)，3.82(s，3H)，3.43-3.68(m，4H)，3.29(s，3H)，2.28-2.85(m，2H)。

(ii)Ph(3-F)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OMe)

将Ph(3-F)(5-OCHF₂)-(R)CH(OMEM)C(O)-Aze-Pab(OMe)(828mg，2.33mmol；参见以上步骤(i))和四溴化碳(525mg，2.33mmol)的2-丙醇(20ml)混合物回流8小时，然后在室温下搅拌过夜。真空浓缩混合物，残余物用H₂O(70ml)和EtOAc(50ml)分配。水层用EtOAc(2×25mL)萃取。合并的有机萃取液用盐水(35mL)洗涤，然后用硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩。硅胶快速色谱法(洗提：CHCl₃∶EtOH(15∶1))处理获得可压碎的白色泡沫状标题化合物(520mg，74％)。

Mp：73-81℃

R_f＝0.43(15∶1 CHCl₃∶EtOH)

¹H NMR(300MHz，CD₃OD，旋转异构体的复合混合物)δ7.59(d，J＝8Hz，2H)，7.32-7.37(m，2H)，7.05-7.14(m，2H)，6.87-6.92(m，1H)，6.90和6.86(t，J_H-F＝73Hz，1H)，5.13-5.18和4.75-4.85(m，2H)，4.15-4.45(m，4H)，3.81(s，3H)，2.10-2.75(m，2H)。

¹³C-NMR(100MHz；CD₃OD)：(羰基和/或脒碳)δ172.0，171.4，153.9。

APCI-MS：(M+1)＝481m/z

实施例27

Ph(3-Br)(5-OCH₂F)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab×TFA

(i)1，3-二溴-5-苄氧基苯

在氮气氛、室温下，分批将氢化钠(9.9g，0.414mol，95％干燥的)加入搅拌下的苄基醇(41.0g，0.394mol)的THF(1.0L)溶液，搅拌1小时。在此溶液中滴加1，3-二溴-5-氟苯(100.0g，0.394mol)。搅拌过夜后，混合物用水(600mL)和EtOAc(4×600mL)分配。合并的有机萃取液用硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩。硅胶快速色谱法(洗提：己烷)处理获得黄色油状小标题化合物(101.3g，75％)。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.30-7.48(m，5H)，7.18(s，1H)，7.06(s，2H)，4.99(s，2H)。

(ii)3，5-二溴苯酚

在氮气氛、室温下，分批将氯化铝(11.7g，87.6mmol)加入1，3-二溴-5-苄氧基苯(10.0g，29.2mmol；参见以上步骤(i))和N，N-二甲基苯胺(35.4g，292mmol)的二氯甲烷(100mL)溶液中。30分钟后，混合物用1N HCl(300mL)和EtOAc(5×150mL)分配。合并的有机萃取液用饱和NaHCO₃(150mL)和盐水(150mL)洗涤，然后用硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩。硅胶快速色谱法(洗提：Hex∶EtOAc(9∶1))处理获得白色固体小标题化合物(6.1g，82％)。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.21(s，1H)，6.97(s，2H)，5.88(bs，1H)。

(iii)1，3-二溴-5-单氟代甲氧基苯

在一个测定了皮重、密封的350ml圆底压力烧瓶中包含3，5-二溴苯酚(10.0g，39.7mmol；参见以上步骤(ii))和Cs₂CO₃(20.7g，63.5mmol)的DMF(150ml)悬浮液，在-78℃穿过隔板向其中通入氯氟甲烷5分钟。将隔板用Teflon塞子替代，然后密封烧瓶，让其升至室温，称量烧瓶，计算出包含9.0g(131mmol)氯氟甲烷。溶液用油浴装置在70℃加热过夜。将烧瓶冷却至室温，小心地释放压力，将内含物用水(100mL)稀释。水层用乙醚(3×200mL)萃取，然后合并的有机物用硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩。硅胶快速色谱法(洗提：己烷)处理获得白色固体小标题化合物(7.9g，71％)。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.40(s，1H)，7.18(s，2H)，5.67(d，J_H-F＝53Hz，2H)。

(iv)1-溴-3-单氟代甲氧基-5-乙烯苯

在氮气氛下，将三(丁基)乙烯基锡(10.0g，31.4mmol)滴加到1，3-二溴-5-单氟代甲氧基苯(8.5g，29.9mmol；参见以上步骤(iii))、四(三苯基膦)钯(0)(690mg，0.599mmol)和2，6-二叔丁基-4-甲基苯酚(刮勺端量(spatula tip))的甲苯(100mL)溶液。将混合物在70℃搅拌8小时。混合物冷却至0℃，加入1N NaOH(70mL)。1小时后，将混合物用CH₂Cl₂(3×300mL)萃取，然后合并的有机物用硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩。硅胶快速色谱法(洗提：己烷)处理获得无色油状小标题化合物(4.3g，57％)。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.30(s，1H)，7.16(s，1H)，7.01(s，1H)，6.60(dd，J＝6Hz，J＝11Hz，1H)，5.74(d，J＝16Hz，1H)，5.67(d，J_H-F＝53Hz，2H)，5.32(d，J＝8Hz，1H.)

(v)Ph(3-Br)(5-OCH₂F)-(R)CH(OH)CH₂OH

将2-甲基-2-丙醇(100mL)、H₂O(100mL)和AD-mix-β(27.5g)混合在一起，冷却至0℃。一次性加入1-溴-3-单氟代甲氧基-5-乙烯苯(4.3g，17.3mmol；参见以上步骤(iv))，将此不均匀浆状物在0℃剧烈搅拌直到TLC显示不存在初始原料为止。在0℃加入饱和亚硫酸钠(200mL)猝灭反应，然后升至室温，搅拌60分钟。反应混合物用EtOAc(3×150mL)萃取。合并的有机萃取液用硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩获得无色油状小标题化合物(4.9g，100％)，直接使用无需再提纯。

¹H NMR(300MHz，CD₃OD)δ7.30(s，1H)，7.15(s，1H)，7.11(s，1H)，5.70(d，J_H-F＝53Hz，2H)，4.62-4.70(m，1H)，3.52-3.70(m，2H)。

HPLC分析：92.1％，96.9％ ee，ChiralPak AD柱(95∶5 Hex∶EtOH流动相)。

(vi)Ph(3-Br)(5-OCH₂F)-(R)CH(OMEM)CH₂OTBS

Ph(3-Br)(5-OCH₂F)-(R)CH(OH)CH₂OH(4.9g，18.6mmol；参见以上步骤(v))、4-(二甲基氨基)吡啶(453mg，3.71mmol)和DIPEA(8.9g，93.0mmol)的无水二氯甲烷(200mL)溶液中滴加1.0M叔丁基二甲硅烷基氯的二氯甲烷(22.3mL，22.3mmol)溶液。反应混合物在室温搅拌10小时。在混合物中滴加DIPEA(8.9g，93.0mmol)和2-甲氧基乙氧基甲基氯(13.9g，111mmol)。16小时后，再加入2-甲氧基乙氧基甲基氯(2.2g)，将反应物搅拌过夜。混合物用H₂O(100mL)稀释，分离出各层。水层用二氯甲烷(3×200mL)萃取，然后合并的有机层用硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩。硅胶快速色谱法(洗提：Hex∶EtOAc(5∶1))处理获得无色油状小标题化合物(4.8g，55％)。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.29(s，1H)，7.22(s，1H)，7.05(s，1H)，5.74(d，J_H-F＝53Hz，2H)，4.84(d，J＝7Hz，1H)，4.70-4.74(m，2H)，3.50-3.91(m，6H)，3.42(s，3H)，0.90(s，9H)，0.05(s，3H)，0.01(s，3H)。

(vii)Ph(3-Br)(5-OCH₂F)-(R)CH(OMEM)CH₂OH

在室温下，Ph(3-Br)(5-OCH₂F)-(R)CH(OMEM)CH₂OTBS(4.7g，10.1mmol；参见以上步骤(vi))的THF(100mL)溶液中加入1.0M四丁基氟化铵的THF(13.1ml，13.1mmol)溶液，将混合物搅拌1小时。混合物用水(100mL)和EtOAc(3×100mL)分配，然后合并的有机物用硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩获得无色油状小标题化合物(3.3g，92％)，直接使用无需再提纯。

¹H NMR(300MHz，CD₃OD)δ7.22(s，1H)，7.14(s，1H)，7.03(s，1H)，5.71(d，J_H-F＝53Hz，2H)，4.80-4.82(m，1H)，4.58-4.66(m，2H)，3.71-3.77(m，1H)，3.39-3.65(m，5H)，3.27(s，3H)。

(viii)Ph(3-Br)(5-OCH₂F)-(R)CH(OMEM)C(O)OH

将Ph(3-Br)(5-OCH₂F)-(R)CH(OMEM)CH₂OH(2.1g，6.0mmol；参见以上步骤(vii))的丙酮(40mL)溶液加入5％ NaHCO₃水溶液(15mL)。将磁搅拌下的不均匀混合物冷却至0℃，加入溴化钾(70mg，0.60mmol)和2，2，6，6-四甲基-1-哌啶氧基，游离基(976mg，5.8mmol)。然后在10分钟内滴加次氯酸钠(5.25％，15mL)，同时将混合物剧烈搅拌并保持在0℃。1小时后，再加入次氯酸钠(10mL)和NaHCO₃溶液(20mL)，继续在0℃搅拌4小时。用旋转蒸发器除去丙酮。水层用10％NaHCO₃溶液(30mL)稀释，用乙醚(3×20mL)洗涤。用10％柠檬酸将水层酸化至pH3.5，用EtOAc(3×40mL)萃取。合并的EtOAc萃取液用水(3×50mL)和盐水(50mL)洗涤，然后用硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩获得无色油状小标题化合物(1.7g，78％)，它直接使用无需再提纯。

¹H NMR(300MHz，CD₃OD)δ7.38(s，1H)，7.25(s，1H)，7.18(s，1H)，5.76(d，J_H-F＝53Hz，2H)，5.21(s，1H)，4.83(d，J＝7Hz，1H)，4.75(d，J＝7Hz，1H)，3.62-3.78(m，2H)，3.48-3.52(m，2H)，3.32(s，3H)。

(ix)Ph(3-Br)(5-OCH₂F)-(R)CH(OMEM)C(O)-Aze-Pab(Teoc)

在氮气氛、0℃下，Ph(3-Br)(5-OCH₂F)-(R)CH(OMEM)C(O)OH(1.0g，2.72mmol；参见以上步骤(viii))的DMF(20mL)溶液中加入HAze-Pab(Teoc)·HCl(1.6g，3.5mmol)、PyBOP(1.6g，3.0mmol)和DIPEA(880mg，6.81mmol)。反应物在0℃搅拌2小时，然后在室温搅拌过夜。真空浓缩混合物，残余物用硅胶色谱法处理两次(依次用CHCl₃∶EtOH(15∶1)、EtOAc∶EtOH(20∶1)洗提)获得可压碎的白色泡沫状小标题化合物(1.2g，62％)。

¹H NMR(300MHz，CD₃OD，旋转异构体复合混合物)δ7.80-7.84(m，2H)，7.40-7.46(m，2H)，7.13-7.32(m，3H)，5.84-5.87(m，1H)，5.67-5.69(m，1H)，5.25和5.07(s，1H)，5.18-5.23和4.80-4.88(m，1H)，3.97-4.79(m，8H)，3.60-3.71(m，2H)，3.40-3.53(m，2H)，3.32(s，3H)，2.10-2.75(m，2H)，1.05-1.11(m，2H)，0.08(s，9H)。

(x)Ph(3-Br)(5-OCH₂F)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(Teoc)

将Ph(3-Br)(5-OCH₂F)-(R)CH(OMEM)C(O)-Aze-Pab(Teoc)(347mg，0.478mmol；参见以上步骤(ix))和四溴化碳(159mg，0.478mmol)的2-丙醇(10mL)混合物回流1.5小时。真空浓缩混合物，然后用水(20mL)和EtOAc(3×30mL)分配。合并的有机物用硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩。硅胶快速色谱法(洗提：CHCl₃∶EtOH(15∶1))处理获得可压碎的白色泡沫状小标题化合物(59mg，19％)。

Mp：81-87℃

R_f＝0.58(9∶1 CHCl₃∶EtOH)

¹H NMR(300MHz，CD₃OD，旋转异构体复合混合物δ7.84(d，J＝8Hz，2H)，7.40-7.48(m，2H)7.18-7.30(m，3H)，5.80(d，J_H-F＝53Hz，2H)，5.21和5.15(s，1H)，5.18-5.24和4.80-4.88(m，1H)，3.98-4.54(m，6H)，2.10-2.70(m，2H)，1.05-1.11(m，2H)，0.08(s，9H)。

APCI-MS：(M+1)＝637m/z

(xi)Ph(3-Br)(5-OCH₂F)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab×TFA

将Ph(3-Br)(5-OCH₂F)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(Teoc)(0.073g，0.11mmol；参见以上步骤(x))溶于5mL TFA，让其反应90分钟，同时用冰浴冷却。蒸去TFA，残余物用制备型RPLC(CH₃CN∶0.1MNH₄OAc(30∶70))提纯。蒸发相关部分，从水/乙腈冷冻干燥获得49mg(77％)标题化合物的醋酸盐。

¹H-NMR(300MHz；CD₃OD)旋转异构体：δ7.8-7.7(m，2H)，7.54(m，2H)，7.37(s，1H，主要旋转异构体)，7.33(s，1H，次要旋转异构体)，7.25-7.1(m，2H)，5.75(d，2H)，5.22(m，1H，次要旋转异构体)，5.18(s，1H，主要旋转异构体)，5.11(s，1H，次要旋转异构体)，4.80(m，1H，主要旋转异构体)，4.6-4.4(m，2H)，4.37(m，1H，主要旋转异构体)，4.16(m，1H，主要旋转异构体)，4.1-3.9(m，2H，2个信号来自次要旋转异构体)，2.70(m，1H，次要旋转异构体)，2.52(m，1H，主要旋转异构体)，2.30(m，1H，主要旋转异构体)，2.15(m，1H，次要旋转异构体)，1.89(s，3H)。

ESI-MS+：(M+1)＝493/495(m/z)

实施例28

Ph(3-Br)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab×TFA

(i)1，3-二溴-5-二氟甲氧基苯

在一个测定了皮重、密封的350ml圆底压力烧瓶中包含3，5-二溴苯酚(10.0g，39.7mmol；参见以上实施例27(ii))的2-丙醇(100mL)和30％ KOH(80mL)溶液，在-78℃穿过隔板向其中通入氯代二氟甲烷15分钟。将隔板用Teflon塞子替代，然后密封烧瓶，让其升至室温，称量烧瓶，计算出包含12.0g(138mmol)氯代二氟甲烷。溶液用油浴装置在80℃回流过夜。将烧瓶冷却至室温，小心地释放压力，将内含物用水(200mL)稀释。水层用CHCl₃(2×150mL)萃取，然后合并的有机物用硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩。残余物用Kugelrohr蒸馏法在80℃、0.2mmHg下提纯获得澄清液态小标题化合物(9.6g，80％)。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.55(s，1H)，7.26(s，2H)，6.52(t，J_H-F＝68Hz，1H)。

(ii)1-溴-3-二氟甲氧基-5-乙烯苯

在氮气氛下，将三(丁基)乙烯基锡(10.5g，33.1mmol)滴加到1，3-二溴-5-二氟甲氧基苯(9.1g，30.1mmol；参见以上步骤(i))、四(三苯基膦)钯(0)(700mg，0.60mmol)和2，6-二叔丁基-4-甲基苯酚(刮勺端量)的甲苯(125mL)溶液。混合物在50℃搅拌过夜。混合物冷却至0℃，加入1N NaOH(70mL)。1小时后，将混合物用二氯甲烷(3×300mL)萃取，然后合并的有机物用硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩。硅胶快速色谱法(洗提：己烷)处理获得无色油状小标题化合物(5.1g，68％)。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.53(s，1H)，7.18(s，1H)，7.08(s，1H)，6.60(dd，J＝6Hz，J＝11Hz，1H)，6.57(t，J_H-F＝68Hz，1H)，5.77(d，J＝11Hz，1H)，5.36(d，J＝8Hz，1H)。

(iii)Ph(3-Br)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)CH₂OH

将2-甲基-2-丙醇(150mL)、水(150mL)和AD-mix-β(27.8g)混合在一起，冷却至0℃。一次性加入1-溴-3-二氟甲氧基-5-乙烯苯(4.6g，18.6mmol；参见以上步骤(ii))，将此不均匀浆状物在0℃剧烈搅拌直到TLC显示不存在初始原料为止，然后将溶液升至室温，搅拌过夜。在0℃加入饱和亚硫酸钠(300mL)猝灭反应，然后升至室温，搅拌60分钟。反应混合物用EtOAc(3×200mL)萃取。合并的有机萃取液用硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩获得无色油状小标题化合物(5.0g，95％)，直接使用无需再提纯。

¹H NMR(300MHz，CD₃OD)δ7.43(s，1H)，7.23(s，1H)，7.16(s，1H)，6.86(t，J_H-F＝75Hz，1H)，4.64-4.67(m，1H)，3.54-3.59(m，2H)。

HPLC分析：88.6％，96.3％ ee，ChiralPak AD柱(95∶5 Hex∶EtOH流动相)。

(iv)Ph(3-Br)(5-OCHF₂)-(R)CH(OMEM)CH₂OTBS

向Ph(3-Br)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)CH₂OH(4.9g，17.3mmol；参见以上步骤(iii))、4-(二甲基氨基)吡啶(420mg，3.5mmol)和DIPEA(11.2g，86.3mmol)的无水二氯甲烷(250mL)溶液中滴加1.0M叔丁基二甲硅烷基氯的二氯甲烷(20.7mL，20.7mmol)溶液。将反应混合物在室温下搅拌过夜。在混合物中滴加DIPEA(11.2g，86.3mmol)和2-甲氧基乙氧基甲基氯(12.9g，104mmol)。3天后，再加入2-甲氧基乙氧基甲基氯(3.3g)，将反应物搅拌过夜。混合物用水(250mL)稀释，分离出各层。水层用二氯甲烷(2×250mL)萃取，然后将合并的有机物用硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩。硅胶快速色谱法(用Hex∶EtOAc(4∶1)洗提)处理获得无色油状小标题化合物(4.3g，51％)。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.40(s，1H)，7.25(s，1H)，7.08(s，1H)，6.58(t，J_H-F＝75Hz，1H)，4.84(d，J＝7Hz，1H)，4.70-4.74(m，2H)，3.50-3.91(m，6H)，3.42(s，3H)，0.90(s，9H)，0.12(s，3H)，0.05(s，3H)。

(v)PH(3-Br)(5-OCHF₂)-(R)CH(OMEM)CH₂OH

在室温下，Ph(3-Br)(5-OCHF₂)-(R)CH(OMEM)CH₂OTBS(3.3g，6.9mmol；参见以上步骤(iv))的THF(60mL)溶液中加入1.0M四丁基氟化铵的THF(9.0mL，9.0mmol)溶液。将反应物搅拌45分钟，然后混合物用水(150mL)和EtOAc(2×120mL)分配。合并的有机物用硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩获得黄色油状小标题化合物(2.5g，98％)，直接使用无需再提纯。

¹H NMR(300MHz，CD₃OD)δ7.35(s，1H)，7.21(s，1H)，7.08(s，1H)，6.83(t，J_H-F＝73Hz，1H)，4.73(d，J＝7Hz，1H)，4.59-4.68(m，2H)，3.40-380(m，6H)，3.26(s，3H)。

(vi)Ph(3-Br)(5-OCHF₂)-(R)CH(OMEM)C(O)OH

将Ph(3-Br)(5-OCHF₂)-(R)CH(OMEM)CH₂OH(3.0g，8.1mmol；参见以上步骤(v))的丙酮(60mL)溶液加入到5％ NaHCO₃水溶液(25mL)。将磁搅拌下的不均匀混合物冷却至0℃，然后加入溴化钾(100mg，0.81mmol)和2，2，6，6-四甲基-1-哌啶氧基，游离基(1.3g，8.5mmol)。然后在10分钟内滴加次氯酸钠(5.25％，19mL)，同时将混合物剧烈搅拌并保持在0℃。1小时后，再加入次氯酸钠(17mL)和NaHCO₃溶液(34mL)，继续在0℃搅拌4小时。用旋转蒸发器除去丙酮。水层用10％ NaHCO₃溶液(30mL)稀释，用乙醚(3×20mL)洗涤。用10％柠檬酸将水层酸化至pH3.5，用EtOAc(3×40ml)萃取。合并的EtOAc层用水(3×50mL)和盐水(50mL)洗涤，然后用硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩获得无色油状小标题化合物(2.1g，66％)，它直接使用无需再提纯。

¹H NMR(300MHz，CD₃OD)δ7.51(s，1H)，7.32(s，1H)，7.24(s，1H)，6.88(t，J_H-F＝73Hz，1H)，5.21(s，1H)，4.84(d，J＝7Hz，1H)，4.76(d，J＝7Hz，1H)，3.62-3.80(m，2H)，3.48-3.52(m，2H)，3.32(s，3H)。

(vii)Ph(3-Br)(5-OCHF₂)-(R)CH(OMEM)C(O)-Aze-Pab(Teoc)

在氮气氛、0℃下，Ph(3-Br)(5-OCHF₂)-(R)CH(OMEM)C(O)OH(1.0g，2.62mmol；参见以上步骤(vi))的DMF(50mL)溶液中加入HAze-Pab(Teoc)·HCl(1.5g，3.38mmol)、PyBOP(1.5g，2.9mmol)和DIPEA(840mg，6.50mmol)。将反应物在0℃搅拌2小时，然后在室温搅拌过夜。真空浓缩混合物，残余物用硅胶色谱法(洗提：CHCl₃∶EtOH(15∶1))处理获得可压碎的白色泡沫状小标题化合物(1.1g，59％)。

¹H NMR(300MHz，CD₃OD，旋转异构体复合混合物)δ7.79-7.83(m，2H)，7.26-7.52(m，5H)，6.94和6.91(t，J_H-F＝73Hz，1H)，5.27和5.07(s，1H)，5.20-5.23和4.80-4.88(m，1H)，4.01-4.79(m，8H)，3.60-3.71(m，2H)，3.40-3.53(m，2H)，3.32(s，3H)，2.10-2.75(m，2H)，1.05-1.11(m，2H)，0.08(s，9H)。

(viii)Ph(3-Br)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(Teoc)

将Ph(3-Br)(5-OCHF₂)-(R)CH(OMEM)C(O)-Aze-Pab(Teoc)(369mg，0.496mmol；参见以上步骤(vii))和四溴化碳(165mg，0.496mmol)的2-丙醇(10mL)混合物回流12小时。真空浓缩混合物，然后用水(15mL)和EtOAc(5×20mL)分配。合并的有机物用硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩。硅胶快速色谱法(洗提：CHCl₃∶EtOH(15∶1))处理获得可压碎的白色泡沫状小标题化合物(134mg，41％)。

Mp：92-98℃

R_f＝0.37(9∶1 CHCl₃∶EtOH)

¹H NMR(300MHz，CD₃OD，旋转异构体的复合混合物)δ7.80-7.86(m，2H)，7.40-7.48(m，2H)7.10-7.33(m，3H)，6.92和6.88(t，J_H-F＝73Hz，1H)，5.18和5.11(s，1H)，5.18-5.24和4.76-4.80(m，1H)，3.98-4.54(m，6H)，2.10-2.70(m，2H)，1.05-1.11(m，2H)，0.08(s，9H)。

APCI-MS：(M+1)＝655m/z

(ix)Ph(3-Br)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab×TFA

将Ph(3-Br)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(Teoc)(0.081g，0.124mmol；参见以上步骤(viii))溶于5mL TFA，让其反应80分钟，同时用冰浴冷却。蒸去TFA，残余物制备型RPLC(CH₃CN∶0.1MNH₄OAc(30∶70))提纯。蒸发相关部分，从水/乙腈冷冻干燥获得59mg(83％)标题化合物的醋酸盐。

¹H-NMR(300MHz；CD₃OD)旋转异构体：δ7.8-7.7(m，2H)，7.6-7.4(m，3H)，7.3-7.2(m，2H)，6.89(t，1H，主要旋转异构体)，6.87(t，1H，次要旋转异构体)，5.23(m，1H，次要旋转异构体)，5.21(s，1H，主要旋转异构体)，5.13(s，1H，次要旋转异构体)，4.80(m，1H，主要旋转异构体)，4.6-4.4(m，2H)，4.38(m，1H，主要旋转异构体)，4.20(m，1H，主要旋转异构体)，4.1-3.9(m，2H，2个信号来自次要旋转异构体)，2.70(m，1H，次要旋转异构体)，2.54(m，1H，主要旋转异构体)，2.29(m，1H，主要旋转异构体)，2.15(m，1H，次要旋转异构体)，1.89(s，3H)。

¹³C-NMR(75MHz；CD₃OD)：(羰基和/或脒碳)δ172.0，171.7，167.0。

MS(m/z)511/513(M+1)+

实施例29

Ph(3-Br)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OMe)

(i)Ph(3-Br)(5-OCHF₂)-(R)CH(OMEM)C(O)-Aze-Pab(OMe)

在氮气氛、0℃下，Ph(3-Br)(5-OCHF₂)-(R)CH(OMEM)C(O)OH(957mg，2.48mmol；参见以上实施例28(vi))的DMF(30mL)溶液中加入HAze-Pab(OMe)·2HCl(1.1g，3.2mmol)、PyBOP(1.4g，2.7mmol)和DIPEA(804mg，6.2mmol)。将反应物在0℃搅拌2小时，然后在室温搅拌过夜。真空浓缩混合物，残余物用硅胶色谱法处理两次(依次用CHCl₃∶EtOH(9∶1)、EtOAc∶EtOH(15∶1)洗提)获得可压碎的白色泡沫状小标题化合物(1.1g，72％)。

¹H NMR(300MHz，CD₃OD，旋转异构体的复合混合物)δ7.59-7.65(m，2H)，7.20-7.55(m，5H)，6.95和6.91(t，J_H-F＝73Hz，1H)，5.27和5.07(s，1H)，5.18-5.23和4.75-4.84(m，1H)，3.87-4.89(m，6H)，3.84(s，3H)，3.60-3.71(m，2H)，3.40-3.53(m，2H)，3.32(s，3H)，2.10-2.75(m，2H)。

(ii)Ph(3-Br)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OMe)

将Ph(3-Br)(5-OCHF₂)-(R)CH(OMEM)C(O)-Aze-Pab(OMe)(1.1g，1.8mmol；参见以上步骤(i))和四溴化碳(583mg，1.8mmol)的2-丙醇(30mL)混合物回流2.5天。在此期间，再加入四溴化碳(0.90mmol分为5份，每隔一定时间加入一份50mg)以确保反应完成。真空浓缩混合物，然后用H₂O(50mL)和EtOAc(5×25mL)分配。合并的有机物用硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩。硅胶快速色谱法(洗提：CHCl₃∶EtOH(15∶1))处理获得可压碎的白色泡沫状标题化合物(460mg，50％)。

Mp：71-75℃

R_f＝0.63(9∶1 CHCl₃∶EtOH)

¹H NMR(300MHz，CD₃OD，旋转异构体的复合混合物)δ7.59(d，J＝8Hz，2H)，7.20-7.54(m，5H)，6.90和6.87(t，J_H-F＝73Hz，1H)，5.18和5.11(s，1H)，4.76-4.80(m，1H)，3.98-4.54(m，4H)，3.82(s，3H)，2.10-2.70(m，2H)。

¹³C-NMR(100MHz；CD₃OD)：(羰基和/或脒碳，旋转异构体)δ172.5，172.1，171.6，154.1。

APCI-MS：(M+1)＝542m/z

实施例30

Ph(3-Cl)(5-OCH₂CHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OH)

(i)Ph(3-Cl)(5-OCH₂CHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(Z)

将Boc-Aze-Pab(Z)(参见国际专利申请WO 97/02284，92mg，0.197mmol)溶于10mL饱和HCl(g)的EtOAc溶液，让其反应10分钟。蒸去溶剂，残余物与Ph(3-Cl)(5-OCH₂CHF₂)-(R)CH(OH)C(O)OH(50mg，0.188mmol；参见以上实施例17(v))、PyBOP(109mg，0.209mmol)混合，最后与二异丙基乙胺(96mg，0.75mmol)的2mL DMF溶液混合。将混合物搅拌2小时，然后倾入50mL水中，用EtOAc萃取三次。合并的有机相用水洗涤，用硫酸钠干燥，蒸发。粗制产物用硅胶快速色谱法(EtOAc∶MeOH(9∶1))处理。产量：100mg(87％)。

¹H NMR(300MHz，CD₃OD，旋转异构体混合物)δ7.85-7.75(m，2H)，7.45-7.25(m，7H)，7.11(m，1H，主要旋转异构体)，7.08(m，1H，次要旋转异构体)，7.05-6.9(m，2H)，6.13(bt，1H)，5.25-5.05(m，3H)，4.77(m，1H，部分信号被CD₃OH信号屏蔽)，4.5-3.9(m，7H)，2.64(m，1H，次要旋转异构体)，2.47(m，1H，主要旋转异构体)，2.25(m，1H，主要旋转异构体)，2.13(m，1H，次要旋转异构体)

(ii)Ph(3-Cl)(5-OCH₂CHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OH)

将羟胺盐酸盐(65mg，0.94mmol)和三乙胺(0.319g，3.16mmol)在8mL THF中混合，在40℃用超声波处理1小时。加入Ph(3-Cl)(5-OCH₂CHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(Z)(96mg，0.156mmol；参见以上步骤(i))以及8mL THF。将混合物在40℃搅拌4.5天。蒸去溶剂，粗制产物用制备型RPLC(CH₃CN∶0.1M NH₄OAc(40∶60))提纯。产量：30mg(38％)。纯度：99％。

¹H NMR(300MHz，CD₃OD，旋转异构体混合物)δ7.6-7.55(m，2H)，7.35-7.3(m，2H)，7.12(m，1H，主要旋转异构体)，7.09(m，1H，次要旋转异构体)，7.05-6.9(m，2H)，6.15(多重峰的三重峰，1H)，5.15(m，1H，次要旋转异构体)，5.13(s，1H，主要旋转异构体)，5.08(s，1H，次要旋转异构体)，4.77(m，1H，主要旋转异构体)，4.5-4.2(m，SH)，4.08(m，1H，主要旋转异构体)，3.97(m，1H，次要旋转异构体)，2.66(m，1H，次要旋转异构体)，2.50(m，1H主要旋转异构体)，2.27(m，1H，主要旋转异构体)，2.14(m，1H，次要旋转异构体)。

¹³C-NMR(100MHz；CD₃OD)：(羰基和/或脒碳，旋转异构体混合物)δ172.8，172.2，171.4，159.1，158.9，154.2。

APCI-MS：(M+1)＝497/499m/z

实施例31

Ph(3-Cl)(5-OCH₂CH₂F)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OH)

(i)Ph(3-Cl)(5-OCH₂CH₂F)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(Z)

将Boc-Aze-Pab(Z)(130mg，0.279mmol)溶于15ml饱和HCl(g)的EtOAc溶液，让其反应10分钟。蒸去溶剂，残余物与Ph(3-Cl)(5-OCH₂CH₂F)-(R)CH(OH)-C(O)OH(63mg，0.188mmol；参见以上实施例21(v))的3mL DMF溶液、PyBOP(147mg，0.279mmol)混合，最后与二异丙基乙胺(134mg，1.03mmol)混合。将混合物搅拌130分钟，然后倾入75mL水中，用EtOAc萃取三次。合并的有机相用水洗涤，用硫酸钠干燥，蒸发。粗制产物用硅胶快速色谱法(EtOAc/MeOH＝95/5)处理。产量：119mg(79％)。

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.06(bt，1H)，7.67(d，2H)，7.45-7.25(m，5H)，7.18(d，2H)，6.89(m，1H)，6.84(m，1H)，6.76(m，1H)，5.16(s，2H)，4.84(s，1H)，4.79(m，1H)，4.66(多重峰型双峰，2H)，4.4-4.3(m，2H)，4.10(多重峰型双峰，2H)，4.02(m，1H)，3.67(m，1H)，2.46(m，1H)，2.28(m，1H)。

(ii)Ph(3-Cl)(5-OCH₂CH₂F)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OH)

将羟胺盐酸盐(80mg，1.16mmol)和三乙胺(0.392g，3.87mmol)在9mL THF中混合，在40℃用超声波处理1小时。加入Ph(3-Cl)(5-OCH₂CH₂F)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(Z)(96mg，0.156mmol；参见以上步骤(i))和9mL THF。将混合物在40℃搅拌48小时，在室温搅拌3天。蒸去溶剂，粗制产物用制备型RPLC(CH₃CN∶0.1M NH₄OAc(30∶70))提纯。产量：72mg(78％)。纯度：100％。

¹H NMR(400MHz，CD₃OD，旋转异构体混合物)δ7.6-7.55(m，2H)，7.35-7.25(m，4H)，7.07(m，1H，主要旋转异构体)，7.04(m，1H，次要旋转异构体)，7.0-6.9(m，2h)，5.12(m，1H，次要旋转异构体)，5.08(s，1H，次要旋转异构体)，5.04(s，1H)，4.78(m，1H，主要旋转异构体)，4.68(多重峰型双峰，2H)，4.5-4.25(m，3H)，4.20(多重峰型双峰，2H)4.06(m，1H，主要旋转异构体)，3.97(m，1H，次要旋转异构体)，2.65(m，1H，次要旋转异构体)，2.48(m，1H主要旋转异构体)，2.27(m，1H，主要旋转异构体)，2.14(m，1H，次要旋转异构体)

¹³C-NMR(100MHz；CD₃OD)：(羰基和/或脒碳，旋转异构体混合物δ172.3，171.5，159.8，154.3

APCI-MS：(M+1)＝479/481m/z

实施例32

Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab

(i)Boc-Pro-Pab(Teoc)

将Boc-Pro-Pab(Z)(参见国际专利申请WO 97/02284，15.0g，0.0321mol)溶于150ml乙醇，加入200mg 10％ Pd/C(50％水分)。将混合物在大气压下搅拌并氢化2小时，通过Hyflo过滤，浓缩。产物直接使用无需再提纯。从此产物中取10g(0.029mol)，将其溶于300mlTHF。加入Teoc-p-硝基苯基碳酸酯(10g，0.035mol)。在3分钟内加入碳酸钾(5.2g，0.038mol)的50mL水溶液，将所得溶液搅拌3天，浓缩，剩余物用EtOAc萃取三次。合并的有机层用水洗涤，用硫酸钠干燥，蒸发。粗制产物用硅胶快速色谱法(二氯甲烷∶丙酮(4∶1))处理。产量：9.8g(69％)。

(ii)Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab(Teoc)

将Boc-Pro-Pab(Teoc)(107mg，0.218mmol；参见以上步骤(i))溶于10mL 饱和HCl(g)的EtOAc溶液，让其反应10分钟。蒸去溶剂，残余物与Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)OH(50mg，0.198mmol；参见以上实施例1(viii))的3mL DMF溶液、PyBOP(115mg，0.218mmol)混合，最后与二异丙基乙胺(104mg，0.80mmol)混合。将混合物搅拌2小时，然后倾入75mL水中，用EtOAc萃取三次。合并的有机相用水洗涤，用硫酸钠干燥，蒸发。粗制产物用硅胶快速色谱法(EtOAc∶MeOH(95∶5))处理。产量：89mg(72％)。

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.54(bt，1H)，7.47(d，2H)，7.12(m，1H)，7.08(d，2H)，7.02(m，1H)，6.95(m，1H)，6.50(t，1H)，5.21(s，1H)，4.42(m，1H)，4.35-4.15(m，3H)，3.59(m，1H)，2.94(m，1H)，2.1-1.7(m，4H)，1.06(m，2H)，0.04(s，9H)。

(iii)Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab×TFA

将Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Pro-Pab(Teoc)(85mg，0.136mmol；参见以上步骤(ii))溶于1mL二氯甲烷，用冰浴冷却。加入TFA(4mL)，将反应物搅拌90分钟。蒸去TFA，残余物从水和乙腈冷冻干燥。产量：79mg(92％)。纯度：94％。

¹H NMR(400MHz，CD₃OD，旋转异构体混合物)δ7.85-7.7(m，2H)，7.58(d，2H，主要旋转异构体)，7.47(d，2H，次要旋转异构体)，7.35(m，1H，主要旋转异构体)，7.27(m，1H，次要旋转异构体)，7.2.7.1(m，2H)，6.88(t，1H)，5.38(s，1H，主要旋转异构体)，5.22(s，1H，次要旋转异构体)，4.58(d，1H)，4.5-4.2(m，2H)，3.8-3.5(m，1H)，3.35(m，1H)，2.2-1.8(m，4H)。

¹³C-NMR(100MHz；CD₃OD)：(羰基和/或脒碳)δ173.6，171.1，167.0。

APCI-MS：(M+1)＝481/483m/z

实施例33

Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab(OMe)

(i)4-叠氮基甲基-N-甲氧基-苯甲脒

将4-叠氮基甲基苯甲腈(17.3g，0.109mol；Nishiyama等；Chem.Lett.(1982)1477)溶于500mL甲苯和200mL无水乙醇。将溶液冷却至-10℃，通入HCl(g)直到饱和。当蒸去大部分溶剂后，将混合物保存于冰箱2天。加入乙醚后倾析出去。将产物重新溶于O-甲基羟胺(10.5g，0.125mol)和三乙胺(56mL)的200mL甲醇溶液。将混合物静置3天，由此蒸去甲醇而加入EtOAc。有机相用水、稀HOAc和碳酸氢钠水溶液洗涤，用硫酸钠干燥，再用EtOAc稀释至总体积500mL。将25mL样品蒸发至干。剩余物932mg。总产量：18.6g(83％)。

(ii)4-氨基甲基-N-甲氧基-苯甲脒

4-叠氮基甲基-N-甲氧基-苯甲脒(11.3g，0.055mol；参见以上步骤(i))的200mL乙醇溶液中加入200mg PtO₂。恒定通入氢气将混合物氢化4小时，接着用Celite_过滤，蒸发。产量：7.34g(74％)。

(iii)Boc-Pro-Pab(OMe)

Boc-Pro-OH(9.7g，0.045mol)、4-氨基甲基-N-甲氧基-苯甲脒(7.34g，0.041mol；参见以上步骤(ii))和二甲基氨基吡啶(7.8g，0.064mol)的300mL乙腈悬浮液中加入EDC碱(11.7mL，0.068mol)。将混合物搅拌18小时，浓缩，在水和EtOAc间分配。有机层用水、碳酸氢钠水溶液洗涤，用硫酸镁干燥，蒸发。粗制产物用硅胶快速色谱法(EtOAc)处理。产量：9.73g(63％)。

(iv)H-Pro-Pab(OMe)×2HCl

将Boc-Pro-Pab(OMe)(9.7g，0.026mol；参见以上步骤(iii))溶于250mL EtOAc。冰冷却的溶液中通入HCl(g)5分钟使其饱和。立即沉淀出产物，加入125mL无水乙醇。将混合物用超声波处理直到大部分材料固化。加入乙醚(200mL)，过滤悬浮液。几块没有固化的材料再次用无水乙醇和乙醚处理。干燥固体。产量：7.57g(86％)。

¹H NMR(400MHz，CD₃OD)δ7.74(d，2H)，7.58(d，2H)，4.55(s，2H)，4.38(m，1H)，3.98(s，3H)，3.45-3.3(m，2H)，2.50(m，1H)，2.15-2.0(m，3H)

(v)Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab(OMe)

将Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)OH(50mg，0.198mmol；参见以上实施例1(viii))、H-PRO-Pab(OMe)(76mg，0.218mmol，参见以上步骤(iv))和PyBOP(115mg，0.218mmol)溶于2mL DMF。加入二异丙基乙胺(104mg，0.80mmol)，将混合物搅拌2.5小时。将混合物倾入50mL水中，用EtOAc萃取三次，合并的有机相用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，蒸发。残余物用硅胶快速色谱法(EtOAc∶MeOH(95∶5))处理。产量：37mg(36％)。纯度：98％。

¹H NMR(400MHz，CD₃OD，旋转异构体混合物)δ7.60(d，2H，主要旋转异构体)，7.57(d，2H，次要旋转异构体)，7.4-7.1(m，5H)，6.89(t，1H，主要旋转异构体)，6.87(t，1H，次要旋转异构体)，5.35(s，1H，主要旋转异构体)，5.21(s，1H，次要旋转异构体)，4.72(m，1H，次要旋转异构体)，4.5-4.35(m，1H和2H，主要旋转异构体)，4.3-4.25(m，2H，次要旋转异构体)，3.814(s，3H，主要旋转异构体)，3.807(s，3H，次要旋转异构体)，3.75-3.5(m，1H)，3.35(m，1H)，2.2-1.8(m，4H)

¹³C-NMR(100MHz；CD₃OD)：(羰基和/或脒碳，旋转异构体混合物)δ173.3，173.2，171.3，171.0，153.9，152.4

APCI-MS：(M+1)＝511/513m/z

实施例34

Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-NH-CH₂-((2-脒基)-5-吡啶基)

(i)6-氰基烟酸

烟酸N-氧化物(51g，0.37mol)的1.2L DMF溶液中加入NaCN(54g，1.1mol)，接着加入三乙胺(255mL，1.83mol)和TMSCl(185mL)。将反应混合物在110℃搅拌10小时，过滤，浓缩滤液。将残余物溶于100mL 2N HCl，用二氯甲烷萃取。合并有机层，浓缩，用水重结晶获得12g(22％)产物。

(ii)5-(羟基甲基)吡啶-2-腈

在0℃，6-氰基烟酸(12g，0.081mol；参见以上步骤(i))的THF溶液中加入Et₃N(12.4mL，0.0892mol)，接着加入氯甲酸乙酯(8.53mL，0.0892mol)。将反应混合物搅拌15分钟，加入NaBH₄(6.14g，0.162mol)。然后将混合物在室温搅拌过夜，用水猝灭，用二氯甲烷萃取。浓缩有机层，用柱色谱法提纯获得4g(20％)上述醇。

(iii)5-(叠氮基甲基)吡啶-2-腈

将5-(羟基甲基)吡啶-2-腈(4g，0.03mol；参见以上步骤(ii))溶于25mL二氯甲烷，在冰浴中冷却。先滴加甲磺酰氯(2.32mL，0.0300mol)，再滴加三乙胺(4.6ml，0.033mol)。将反应混合物搅拌，在反应逐步完成后，粗制甲磺酸酯用NaN₃(7.35g，0.113mol)的20mL DMF溶液处理。反应混合物在40℃搅拌2小时，用水稀释，用乙酸乙酯萃取。浓缩有机层获得3.95g(83％)粗制叠氮化物。

(iv)5-(叔丁氧基羰基氨基甲基)吡啶-2-腈

5-(叠氮基甲基)吡啶-2-腈(3.95g，0.0248mol；参见以上步骤(iii))的30mL THF和10mL水溶液中加入三苯基膦(7.8g，0.0298mol)，将所得溶液搅拌24小时。然后加入三乙胺(3.8mL，0.027mol)，接着加入Boc酸酐(5.4g，0.025mol)，搅拌2小时。反应混合物在水和乙酸乙酯间分配。浓缩有机层，用柱色谱法提纯获得2.1g(36％)小标题化合物。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ8.6(s，1H)，8.0(d，1H)，8.9(d，1H)，4.1(m，2H)，1.4(s，9H)

(v)5-(氨基甲基)吡啶-2-腈×2HCl

将5-(叔丁氧基羰基氨基甲基)吡啶-2-腈(0.200g，0.86mmol，参见以上步骤(iv))溶于10mL饱和HCl(g)的EtOAc溶液，搅拌30分钟。蒸去溶剂获得0.175g(99％)小标题化合物的二盐酸盐。

¹H NMR(500MHz，D₂O)δ8.79(s，1H)，8.17(d，1H)，8.05(d，1H)，4.38(s，2H)

(vi)Boc-Aze-NH-CH₂-5-Py(2-CN)

5-(氨基甲基)吡啶-2-腈×2HCl(0.175g，0.85mmol；参见以上步骤(v))、Boc-Aze-OH(0.201g，1.00mmol)和TBTU(0.321g，1.00mmol)的5mL DMF混合物中加入二甲基氨基吡啶(0.367g，3.00mmol)。将混合物搅拌过夜，随后倾入水中，用EtOAc萃取三次。合并的有机相用碳酸氢钠水溶液洗涤，用硫酸钠干燥，蒸发。粗制产物开始结晶，将其直接用于下一步骤。产量：0.23g(73％)。

¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δ8.66(s，1H)，8.2-7.8(宽峰，1H)，7.79(d，1H)，7.67(d，1H)，4.73(m，1H)，4.65-4.5(m，2H)，3.94(m，1H)，3.81(m，1H)，2.6.2.35(m，2H)，1.8(宽峰，1H)，1.45(s，9H)

(vii)H-Aze-NH-CH₂-5-Py(2-CN)×2HCl

将Boc-Aze-NH-CH₂-5-Py(2-CN)(0.23g，0.73mmol；参见以上步骤(vi))溶于10mL饱和HCl(g)的EtOAc溶液，搅拌30分钟。蒸去溶剂获得0.21g(100％)小标题化合物的二盐酸盐。

¹H NMR(500MHz，D₂O)δ8.64(s，1H)，8.0-7.9(m，2H)，5.19(m，1H)，4.65-4.55(m，2H)，4.20(m，1H)，4.03(m，1H)，2.88(m，1H)，2.64(m，1H)

(viii)Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)-C(O)-Aze-NH-CH₂-5-Py(2-CN)

H-Aze-NH-CH₂-5-Py(2-CN)×2 HCl(0.206g，0.713mmol；参见以上步骤(vii))、Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)OH(0.180g，0.713mmol；参见以上实施例1(viii))和PyBOP(0.408g，0.784mmol)的5mLDMF混合物中加入二甲基氨基吡啶(0.367g，3.00mmol)。将混合物搅拌过夜，随后倾入水中，用EtOAc萃取三次。合并的有机相用碳酸氢钠水溶液洗涤，用硫酸钠干燥，蒸发。粗制产物用硅胶快速色谱法(EtOAc)处理获得纯产物。产量：0.197g(61％)。

¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δ8.63(m，1H)，8.22(bt，1H)，7.78(m，1H)，7.67(m，1H)，7.21(m，1H)，7.16(m，1H)，7.04(m，1H)，6.56(t，1H)，4.97(bd，1H)，4.92(m，1H)，4.6-4.5(m，2H)，4.40(bd，1H)，4.18(m，1H)，3.80(m，1H)，2.69(m，1H)，2.46(m，1H)，1.92(s，1H)

APCI-MS：(M+1)＝451/453m/z

(ix)Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)-C(O)-Aze-NH-CH₂-((2-脒基)-5-吡啶基)×HOAc

将Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)-C(O)-Aze-NH-CH₂-5-Py(2-CN)(0.200g，0.444mmol；参见以上步骤(viii))、乙酸铵(1.00g，0.0130mol)和N-乙酰基半胱氨酸(2.00g，0.0122mol)的10mL甲醇在50℃加热2天。用制备型RPLC(CH₃CN∶0.1M NH₄OAc(30∶79))处理并将合适部分用(CH₃CN∶0.1M NH₄OAc(5∶95-40∶60)再次处理，用水和乙腈冷冻干燥后获得60mg(26％)标题化合物的纯净醋酸盐。纯度：100％。

¹H NMR(500MHz，D₂O，旋转异构体混合物)δ8.68(s，1H，主要旋转异构体)，8.62(s，1H，次要旋转异构体)，8.05-7.9(m，2H)，7.33(m，1H，旋转异构体)，7.27(m，1H，旋转异构体)，7.22(m，1H，旋转异构体)，7.17(m，1H，旋转异构体)，7.01(m，1H，旋转异构体)，6.84(t，1H)，5.32(s，1H，主要旋转异构体)，5.20(m，1H，次要旋转异构体)，5.13(s，1H，次要旋转异构体)，4.88(m，1H，主要旋转异构体)，4.65-4.55(m，2H，主要旋转异构体)，4.45-4.35(m，1H，旋转异构体加上1H，次要旋转异构体)，4.31(d，1H，次要旋转异构体)，4.2-4.05(m，1H加上1H，旋转异构体)，2.80(m，1H，次要旋转异构体)，2.61(m，1H，主要旋转异构体)，2.33(m，1H，主要旋转异构体)，2.24(m，1H，次要旋转异构体)，1.93(s，3H)

¹³C-NMR(100MHz；D₂O)：(羰基和/或脒碳，旋转异构体混合物)δ181.6，173.3，172.7，172.6，172.3，162.6，162.3

APCI-MS：(M+1)＝468/470m/z

实施例35

Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-NH-CH₂-((2-甲氧基脒基)-5-吡啶基)

(i)Boc-NH-CH₂-[(2-(氨基(羟基亚氨基)甲基))-5-吡啶基]

将5-(叔丁氧基羰基氨基甲基)吡啶-2-腈(1.00g，4.29mmol；参见以上实施例34(iv))溶于10mL乙醇，加入羟胺盐酸盐(0.894g，0.0129mol)和三乙胺(1.30g，0.0129mol)。将混合物在室温下搅拌6天。混合物在水和二氯甲烷间分配。水层用二氯甲烷萃取，合并的有机相用水洗涤，用硫酸钠干燥，蒸发。产量：0.96g(84％)。

¹H NMR(400MHz，丙酮-d₆)δ9.01(bs，1H)，8.50(bs，1H)，7.87(m，1H)，7.70(m，1H)，6.58(宽峰，1H)，5.70(宽峰，2H)，4.31(d，2H)，1.41(s，9H)

(ii)Boc-Aze-NH-CH₂-(2-(脒基)-5-吡啶基)×HOAc

本反应根据Judkins等，Synth.Comm.(1998)4351中介绍的方法进行。Boc-NH-CH₂-[(2-(氨基(羟基亚氨基)甲基))-5-吡啶基](0.910g，3.42mmol；参见以上步骤(i))、醋酸酐(0.35mL，3.7mmol)和0.35g 10％Pd/C(50％水分)的100mL乙酸悬浮液在5atm压力下氢化5小时。混合物用Celite_过滤，浓缩。残余物用水和乙腈冷冻干燥获得0.97g(92％)小标题化合物。

¹H NMR(500MHz，CD₃OD)δ8.74(s，1H)，8.12(d，1H)，7.98(d，1H)，4.38(s，2H)，1.92(s，3H)，1.46(s，9H)

(iii)Boc-NH-CH₂-(2-(氨基(三甲硅烷基乙基亚氨基)甲基)-5-吡啶基)

Boc-NH-CH₂-(2-(脒基)-5-吡啶基)×HOAc(0.96g，3.1mmol；参见以上步骤(ii))的75mL THF悬浮液中加入碳酸钾(1.07g，7.7mmol)和Teoc-p-硝基苯基碳酸酯(1.14g，4.02mmol)的15mL水溶液。将混合物搅拌过夜。加入过量的甘氨酸和碳酸钾，反应继续进行2小时。蒸去THF，剩余物用EtOAc萃取三次。合并的有机相用水洗涤，用硫酸钠干燥，蒸发。产物可以直接使用无需再提纯。

¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δ9.31(宽峰，1H)，8.52(s，1H)，8.41(d，1H)，8.35(宽峰，1H)，7.74(d，1H)，4.97(宽峰，1H)，4.39(m，2H)，4.26(m，2H)，1.46(s，9H)，1.14(m，2H)，0.07(s，9H)

(iv)H₂N-CH₂-(2-(氨基(三甲硅烷基乙基亚氨基)甲基)-5-吡啶基)×2HCl

将Boc-NH-CH₂-(2-(氨基(三甲硅烷基乙基亚氨基)甲基)-5-吡啶基)(0.23g，0.58mmol；参见以上步骤(iii))溶于25mL饱和HCl(g)的EtOAc溶液，搅拌30分钟。蒸去溶剂，产物直接使用无需再提纯。产量：0.21g(98％)。

¹H NMR(500MHz，D₂O)δ8.89(s，1H)，8.25(s，2H)，4.55(m，2H)，4.42(s，2H)，1.20(m，2H)，0.09(s，9H)

(v)Boc-Aze-NH-CH₂-(2-(氨基(三甲硅烷基乙基亚氨基)甲基)-5-吡啶基)

H₂N-CH₂-(2-(氨基(三甲硅烷基乙基亚氨基)甲基)-5-吡啶基)×2HCl(0.21g，0.57mmol；参见以上步骤(iv))、Boc-Aze-OH(0.127g，0.631mmol)和TBTU(233mg，0.726mmol)的5mL DMF溶液中加入二甲基氨基吡啶(269mg，2.20mmol)。将混合物搅拌过夜，倾入100mL水中，用EtOAc萃取三次。合并的有机相用碳酸氢钠水溶液和水洗涤，用硫酸钠干燥，蒸发。粗制产物用硅胶快速色谱法(EtOAc)处理获得170mg(56％)所需产物。

¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δ9.33(宽峰，1H)，8.54(s，1H)，8.41(d，1H)，8.36(宽峰，1H)，7.75(m，1H)，4.72(m，1H)，4.56(m，2H)，4.26(m，2H)，3.93(m，1H)，3.80(m，1H)，2.6-2.4(m，2H)，1.42(s，9H)，1.14(m，2H)，0.07(s，9H)

(vi)H-Aze-NH-CH₂-(2-(氨基(三甲硅烷基乙基亚氨基)甲基)-5-吡啶基)×2HCl

将Boc-Aze-NH-CH₂-(2-(氨基(三甲硅烷基乙基亚氨基)甲基)-5-吡啶基)(170mg，0.356mmol；参见以上步骤(v))溶于25mL饱和HCl(g)的EtOAc溶液，搅拌30分钟。蒸去溶剂，产物直接使用无需再提纯。产量：160mg(100％)。

¹H NMR(500MHz，CD₃OD)δ9.00(m，1H)，8.84(m，1H)，8.23(d，2H)，8.10(m，1H)，5.09(m，1H)，4.7-4.6(m，2H)，4.51(m，2H)，4.14(m，1H)，3.97(m，1H)，2.86(m，1H)，2.58(m，1H)，1.22(m，2H)，0.11(s，9H)

(vii)Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-NH-CH₂-(2-(氨基)(三甲基甲硅烷基乙基亚氨基)甲基)-5-吡啶基)

H-Aze-NH-CH₂-(2-(氨基(三甲硅烷基乙基亚氨基)-甲基)-5-吡啶基)×2HCl(160mg，0.462mmol；参见以上步骤(vi))、Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)OH(131mg，0.462mmol；参见以上实施例1(viii))和PyBOP(263mg，0.505mmol)的5mL DMF溶液中加入二异丙基乙胺(0.30mL，1.71mmol)。将混合物搅拌过夜，倾入100mL水中，用EtOAc萃取三次。合并的有机相用碳酸氢钠水溶液和水洗涤，用硫酸钠干燥，蒸发。粗制产物用硅胶快速色谱法(EtOAc∶MeOH(95∶5))处理获得148mg(52％)所需产物。

(viii)Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-NH-CH₂-(2-(甲氧基-氨基(三甲硅烷基乙基亚氨基)甲基)-5-吡啶基)

将Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)-C(O)-Aze-NH-CH₂-(2-(甲氧基氨基(三甲硅烷基乙基亚氨基)甲基)-5-吡啶基)(148mg，0.242mmol；参见以上步骤(vii))和O-甲基羟胺(202mg，2.42mmol)的10mL乙腈悬浮液在70℃加热3小时。混合物在水和EtOAc间分配。水层用EtOAc萃取两次，合并的有机相用水洗涤，用硫酸钠干燥，蒸发。粗制产物用硅胶快速色谱法(EtOAc∶MeOH(95∶5))处理获得44mg(28％)纯产物。

¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δ8.55(m，1H)，8.05(bt，1H)，7.70(m，1H)，7.58(s，1H)，7.56(d，1H)，7.22(m，1H)，7.16(m，1H)，7.03(m，1H)，6.50(t，1H)，4.92(s，1H)，4.89(m，1H)，4.55-4.45(m，2H)，4.38(宽峰，1H)，4.2-4.1(m，3H)，4.00(s，3H)，3.73(m，1H)，2.69(m，1H)，2.44(m，1H)，0.97(m，2H)，0.02(s，9H)

(ix)Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-NH-CH₂-((2-甲氧基-脒基)-5-吡啶基)

将Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-NH-CH₂-(2-(甲氧基氨基(三甲基甲硅烷基乙基亚氨基)甲基)-5-吡啶基)(44mg，0.069mmol；参见以上步骤(viii))溶于2mL TFA，让其反应1小时。蒸去TFA，残余物在EtOAc和碳酸氢钠水溶液间分配。水层用EtOAc萃取，合并的有机相用水洗涤，用硫酸钠干燥，蒸发。产量：30mg(88％)。纯度：＞95％。

¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δ8.44(m，1H)，8.03(bt，1H)，7.91(m，1H)，7.60(m，1H)，7.19(m，1H)，7.13(m，1H)，7.00(m，1H)，6.52(t，1H)，5.6-5.45(宽峰，2H)，4.90(s，1H)，4.89(m，1H)，4.55-4.4(m，2H)，4.27(宽峰，1H)，4.12(m，1H)，3.92(s，3H)，2.68(m，1H)，2.41(m，1H)

¹³C-NMR(100MHz；CDCl₃)：(羰基和/或脒碳)δ173.0，170.9，152.6

APCI-MS：(M+1)＝498/500m/z

实施例36

Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-NH-CH₂-((5-脒基)-2-嘧啶基)

(i)2-氨基-2-亚氨基乙基氨基甲酸酯·AcOH

将N-Boc-氨基乙腈(40.2g，257.4mmol)和N-乙酰基半胱氨酸(42.0g，257.4mmol)在60℃溶于甲醇(300mL)，通入氨气18小时。真空除去溶剂。在离子交换色谱法(Amberlite IRA-400(AcOH))和用丙酮重结晶后，获得28.4g(53％)白色固体小标题化合物。

¹H NMR(300MHz，CD₃OD)δ4.41(t，J＝4.9Hz，1H)，4.01(s，2H)，2.91(d，J＝5.0Hz，2H)，2.01(s，3H)，1.46(s，9H)

(ii)1，3-双(二甲基氨基)-2-氰基三次甲基高氯酸盐(trimethiniumperchlorate)

在0℃，将3-二甲基氨基丙烯腈(25.0g，260.0mmol)的氯仿(75mL)溶液滴加到(氯代亚甲基)二甲基氯化铵(50.0g，390.1mmol)的氯仿(175mL)溶液。将反应混合物在0℃再搅拌2小时，然后让其升至室温过夜，随后回流加热8小时。真空除去溶剂。将残余物加入到在水(150mL)和乙醇(300mL)中的高氯酸钠(110g，0.898mmol)混合物。将混合物加热回流15分钟，然后冷却，让其在冰箱中静置过夜。收集沉淀，用乙醇重结晶获得23.8g(52％)无色针状小标题化合物。

mp：140-141℃

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ8.24(s，2H)，3.59(s，6H)，3.51(s，6H)

(iii)Boc-NH-CH₂-(5-氰基)-2-嘧啶

在氮气氛、70-75℃下，将2-氨基-2-亚氨基乙基氨基甲酸叔丁酯·AcOH(5.0g，23.8mmol；参见以上步骤(i))和1，3-双(二甲基氨基)-2-氰基三次甲基高氯酸盐(6.0g，23.8mmol；参见以上步骤(ii))的吡啶(300ml)混合物搅拌16小时，然后加热回流6小时。混合物冷却至室温，真空除去溶剂。残余物用热的1∶1乙酸乙酯和氯仿混合物萃取，用小二氧化硅垫过滤，浓缩获得粗制产物。二氧化硅快速色谱法(洗提：氯仿)处理获得4.0g(71％)无色油状标题化合物，它在静置时固化。

mp：86-87℃

R_f＝0.77(二氧化硅，3∶2乙酸乙酯/氯仿)

¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ9.25(s，2H)，7.39(bt，1H)，4.39(d，J＝6Hz，2H)，1.38(s，9H)。

¹³C NMR(750MHz，DMSO-d₆)δ170.4，160.3，155.8，115.2，106.9，80.0，46.3，28.1

APCI-MS：(M+1)＝235m/z

(iv)Boc-Aze-NH-CH₂-((5-氰基)-2-嘧啶基)

将Boc-NH-CH₂-(5-氰基)-2-嘧啶(1.14g，4.87mmol；参见以上步骤(iii))溶于50mL饱和HCl(g)的EtOAc溶液，让其反应1小时，浓缩。将残余物溶于20mL DMF，在冰浴中冷却。加入二异丙基乙胺(3.5mL，0.020mol)、Boc-Aze-OH(1.08g，5.37mmol)和HATU(2.80g，5.38mmol)，反应混合物在室温下搅拌过夜。蒸去溶剂，将产物用制备型RPLC(CH₃CN∶0.1M NH₄OAc(40∶60))提纯。蒸去乙腈，水层用EtOAc萃取三次。合并的有机层用硫酸镁干燥，蒸发。产量：1.12g(72％)。

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.95(s，2H)，4.82(d，2H)，4.74(m，1H)，3.95(m，1H)，3.84(m，1H)，2.6-2.4(m，2H)，1.47(s，9H)

(v)Boc-Aze-NH-CH₂-((5-脒基)-2-嘧啶基)×HOAc

在氮气氛下，将Boc-Aze-NH-CH₂-((5-氰基)-2-嘧啶基)(0.83g，2.6mmol；参见以上步骤(iv))、N-乙酰基半胱氨酸(0.43g，2.6mmol)和乙酸铵(0.60g，7.8mmol)的10mL甲醇溶液在60℃加热2天。蒸去溶剂，粗制产物用制备型RPLC(梯度CH₃CN∶0.1M NH₄OAc(5∶95至100∶0))提纯。将需要部分冷冻干燥获得1.0g(93％)所需产物。

¹H NMR(300MHz，D₂O，信号被HDO的信号屏蔽)δ9.17(s，2H)，4.1-3.9(m，2H)，2.60(m，1H)，2.29(m，1H)，1.93(s，3H)，1.44(s，9H)

(vi)Boc-Aze-NH-CH₂-[(5-(氨基(三甲硅烷基乙基亚氨基)甲基))-2-嘧啶基]

Boc-Aze-NH-CH₂-((5-脒基)-2-嘧啶基)×HOAc(0.95g，2.41mmol；参见以上步骤(v))的50ml THF悬浮液中加入Teoc-p-硝基苯基碳酸酯(0.85g，3.0mmol)和碳酸钾(1.0g，7.2mmol)的10mL水溶液。将混合物搅拌24小时，浓缩后在水和二氯甲烷间分配。有机层用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤两次，用硫酸钠干燥，蒸发。粗制产物用硅胶快速色谱法(庚烷∶EtOAc(1∶1))处理。产量：1.04g(90％)。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ9.16(s，2H)，4.80(d，2H)，4.73(m，1H)，4.26(m，2H)，4.0-3.8(m，2H)，2.6-2.4(m，2H)，1.47(s，9H)，1.12(m，2H)，0.07(s，9H)

(vii)Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O-)-Aze-NH-CH₂-[(5-(氨基(三甲硅烷基乙基亚氨基)甲基))-2-嘧啶基]

将Boc-Aze-NH-CH₂-[(5-(氨基(三甲硅烷基乙基亚氨基)甲基))-2-嘧啶基](0.209g，0.437mmol；参见以上步骤(vi))溶于25mL饱和HCl(g)的EtOAc溶液，让其反应15分钟。蒸去溶剂，将剩余物溶于4mLDMF。加入Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)OH(0.100g，0.396mmol；参见以上实施例1(viii))、PyBOP(0.231g，0.444mmol)和二异丙基乙胺(0.208g，1.61mmol)，将混合物搅拌80分钟。反应混合物倾入100mL水中，用EtOAc萃取三次。合并的有机层用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，蒸发。粗制产物用制备型RPLC(CH₃CN∶0.1MNH₄OAc(1∶1))提纯。产量：63mg(26％)。

¹H NMR(400MHz，CDCl₃，旋转异构体混合物)δ9.3(宽峰，1H)，9.03(s，2H，次要旋转异构体)，9.00(s，2H，主要旋转异构体)，8.25(m，1H，主要旋转异构体)，7.9(宽峰，1H)，7.80(m，1H，次要旋转异构体)，7.2-6.9(m，3H)，6.50(t，1H)，5.14(s，1H，次要旋转异构体)，5.08(m，1H，次要旋转异构体)，4.94(s，1H，主要旋转异构体)，4.80(m，1H，主要旋转异构体)，4.7-4.4(m，2H)，4.3-3.9(m，3H)，3.74(m，1H，主要旋转异构体)，2.7-2.1(m，2H)，1.03(m，2H)，0.01(s，9H)

(viii)Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-NH-CH₂-((5-脒基)-2-嘧啶基)×TFA

将Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-NH-CH₂-[(5-(氨基(三甲硅烷基乙基亚氨基)甲基))-2-嘧啶基](21mg，0.034mmol；参见以上步骤(vii))溶于0.5mL二氯甲烷，在冰浴中冷却。加入TFA(2mL)，将混合物搅拌60分钟，然后浓缩。将产物用水和乙腈冷冻干燥。产量：20mg(100％)。纯度：100％。

¹H NMR(400MHz，CD₃OD，旋转异构体的混合物，信号被HDO的信号屏蔽)δ9.08(s，2H)，7.4-7.1(m，3H)，6.88(t，1H，主要旋转异构体)，6.85(t，1H，次要旋转异构体)，5.30(m，1H，次要旋转异构体)，5.22(s，1H，次要旋转异构体)，5.20(s，1H，主要旋转异构体)，4.73(m，1H，主要旋转异构体)，4.34(m，1H，旋转异构体)，4.21(m，1H，旋转异构体)，4.15-3.95(m，2H，旋转异构体)，2.73(m，1H，旋转异构体)，2.57(m，1H，旋转异构体)，2.45-2.25(m，2H，旋转异构体)

¹³C-NMR(100MHz；CD₃OD)：(羰基和/或脒碳，旋转异构体混合物)δ173.0，172.6，172.1，171.0，163.4。

APCI-MS：(M+1)＝469/471m/z

实施例37

Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-NH-CH₂-((5-甲氧基脒基)-2-嘧啶基)

(i)Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-NH-CH₂-[(5-(甲氧基氨基-(三甲硅烷基乙基亚氨基)甲基))-2-嘧啶基]

将Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-NH-CH₂-[(5-(氨基(三甲硅烷基乙基亚氨基)甲基))-2-嘧啶基](40mg，0.065mmol；参见以上实施例36(vii))和O-甲基羟胺(33mg，0.40mmol)的3mL乙腈悬浮液在70℃加热3小时。混合物在水和EtOAc间分配。水层用EtOAc萃取两次，合并的有机相用水洗涤，用硫酸钠干燥，蒸发。产量：33mg(79％)。

¹H NMR(400MHz，CDCl₃，旋转异构体混合物)δ8.76(s 2H，主要旋转异构体)，8.70(s，2H，旋转异构体)，8.18(m，1H)，7.62(s，1H)，7.4-6.9(m，4H)，6.50(bt，1H)，5.3-4.5(m，4H)，4.2-4.05(m，3H)，3.96(s，3H)，3.68(m，1H)，2.8-2.2(m，2H)，2.1(宽峰，1H)，0.96(m，2H)，0.01(s，9H)

(ii)Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-NH-CH₂-((5-甲氧基-脒基)-2-嘧啶基)

将Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-NH-CH₂-[(5-(甲氧基氨基-(三甲硅烷基乙基亚氨基)甲基))-2-嘧啶基](33mg，0.052mmol；参见以上步骤(i))溶于0.5ml二氯甲烷，在冰浴中冷却。加入TFA(2mL)，将混合物搅拌2小时，然后浓缩。将产物用水和乙腈冷冻干燥。产量：31mg(81％)。纯度：100％。

¹H NMR(400MHz，CD₃OD，旋转异构体的混合物，信号被HDO的信号屏蔽)δ8.96(s，2H，旋转异构体)，8.94(s，2H，旋转异构体)，7.4-7.3(m，1H)，7.2-7.1(m，2H，6.88(t，1H，旋转异构体)，6.85(t，1H，旋转异构体)，5.29(m，1H，旋转异构体)，5.24(s，1H，旋转异构体)，5.20(s，1H，旋转异构体)，4.75-4.55(m，2H)，4.33(m，1H，旋转异构体)，4.19(m，1H，旋转异构体)，4.15-3.95(m，2H，旋转异构体)，3.88(s，3H，旋转异构体)，3.86(s，3H，旋转异构体)，2.72(m，1H，旋转异构体)，2.56(m，1H，旋转异构体)，2.45-2.25(m，2H，旋转异构体)

¹³C-NMR(100MHz；CD₃OD)：(羰基和/或脒碳，旋转异构体混合物)δ172.8，172.6，172.1，171.8，167.8，167.7，155.1，152.3，152.1

APCI-MS：(M+1)＝499/501m/z

实施例38

Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(3-F)

(i)2-氟-4-乙烯苯甲腈

在氮气氛下，将4-溴-2-氟苯甲腈(4.92g，0.0246mol)、乙烯基三丁基锡(0.78g，0.246mol)和四三苯基膦(0.67g，0.58mmol)的250mL甲苯溶液回流过夜。蒸去溶剂，残余物用硅胶快速色谱法(庚烷∶二氯甲烷(1∶1)至纯二氯甲烷)处理。使获得的无色油状物结晶。产量：3.0g(82％)。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.56(m，1H)，7.3-7.2(m，2H)，6.69(m，1H)，5.89(d，1H)，5.51(d，1H)

(ii)2-氟-4-羟基甲基苯甲腈

向2-氟-4-乙烯苯甲腈(1.3g，8.8mmol；参见以上步骤(i))的40mL二氯甲烷和5mL甲醇冷溶液(-78℃)中通入臭氧(50L/h，29g/m³)30分钟。随后通入氩气以除去过量臭氧。加入硼氢化钠(0.67g，0.018mol)，除去冷却浴。搅拌混合物，让其反应1小时。蒸发混合物，加入2M HCl。将混合物用乙醚萃取两次，合并的乙醚部分用硫酸钠干燥，蒸发。使粗制产物结晶。产量：1.1g(81％)。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.59(m，1H)，7.3-7.2(m，2H)，4.79(d，2H)，2.26(t，1H)

(iii)甲磺酸4-氰基-3-氟苄基酯

将2-氟-4-羟基甲基苯甲腈(1.3g，8.6mmol；参见以上步骤(ii))溶于50mL CH₂Cl₂，用冰浴冷却。加入三乙胺(0.87g，8.6mmol)和甲磺酰氯(0.99g，8.7mmol)。搅拌1.5小时后，反应混合物用1M HCl洗涤。有机相用硫酸钠干燥，蒸发。产物可以无需提纯直接使用。获得无色油状物：1.8g(92％)。

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.66(m，1H)，7.35-7.3(m，2H)，5.26(s，2H)，3.07(s，3H)

(iv)4-叠氮基甲基-2-氟苯甲腈

甲磺酸4-氰基-3-氟苄基酯(1.8g，7.9mmol；参见以上步骤(iii))的冰冷溶液中加入叠氮化钠(0.80g，0.012mol)。将混合物搅拌过夜，然后倾入200mL水中，用乙醚萃取三次。合并的乙醚相用水洗涤5次，用硫酸钠干燥，蒸发。粗制无色油状物可以直接使用无需再提纯。产量：1.2g(87％)。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.64(m，1H)，7.25-7.18(m，2H)，4.47(s，2H)

(v)4-氨基甲基-2-氟苯甲腈

向搅拌下的二氯化锡二水合物(0.45g，2.4mmol)的20mL乙腈悬浮液中加入苯硫酚(1.07g，9.7mmol)和三乙胺(0.726g，7.17mmol)。其后，加入4-叠氮基甲基-2-氟苯甲腈(0.279g，1.58mmol；参见以上步骤(iv))的几毫升乙腈溶液。1.5小时后，叠氮化物耗尽，蒸去溶剂。将残余物溶于二氯甲烷，用2M NaOH洗涤三次。有机相用1M HCl萃取两次。合并的酸性水相用二氯甲烷洗涤，然后用2M NaOH碱化，用二氯甲烷萃取三次。有机相用硫酸钠干燥，蒸发获得0.172g(72％)所需的小标题化合物，它可以无需提纯直接使用。

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.58(m，1H)，7.3-7.2(m，2H)，3.98(s，2H)，1.55-1.35(宽峰，2H)

(vi)Boc-Aze-NHCH₂-Ph(3-F，4-CN)

Boc-Aze-OH(0.194g，0.96mmol)的5mL DMF冰冷溶液中加入TBTU(0.50g，9.6mmol)。30分钟后加入一种包括4-氨基甲基-2-氟苯甲腈(0.17g，0.81mmol；参见以上步骤(v))和二异丙基乙胺(0.326g，2.53mmol)的7mL DMF溶液。所得溶液在室温下搅拌过夜。蒸去溶剂，将产物用制备型RPLC(CH₃CN∶0.1M NH₄OAc(50∶50))提纯。冷冻干燥获得0.237g(74％)所需的小标题化合物。

¹H NMR(300MHz，CD₃OD)δ7.70(m，1H)，7.35-7.25(m，2H)，4.65-4.35(m，3H)，4.0-3.85(m，2H)，2.51(m，1H)，2.19(m，1H)，1.40(s，9H)

(vii)Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-NHCH₂-Ph(3-F，4-CN)

将Boc-Aze-NHCH₂-Ph(3-F，4-CN)(0.118g，0.354mmol；得自步骤(vi))溶于30mL饱和HCl(g)的EtOAc溶液。将反应物搅拌20分钟，蒸发。将所得二盐酸盐和HATU(0.152g，0.400mmol)溶于5mLDMF。将该溶液加入Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)OH(0.101g，0.400mmol；参见以上实施例1(viii))的5mL DMF冰冷溶液。反应物在室温下搅拌过夜。蒸去溶剂，将产物用制备型RPLC(CH₃CN∶0.1MNH₄OAc(50∶50))提纯。冷冻干燥获得0.130g(77％)所需的小标题化合物。

¹H NMR(500MHz，CD₃OD旋转异构体混合物)δ7.7-7.6(m，1H)，7.35-7.1(m，5H)，6.88(t，1H，旋转异构体)，6.86(t，1H，旋转异构体)，5.25-5.1(m，1H加上下一质子的次要旋转异构体)，4.80(m，1H，主要旋转异构体)，4.6-4.4(m，2H)，4.36(m，1H，主要旋转异构体)，4.18(m，1H，主要旋转异构体)，4.07(m，1H，次要旋转异构体)，3.98(m，1H，次要旋转异构体)，2.70(m，1H，次要旋转异构体)，2.53(m，1H，主要旋转异构体)，2.29(m，1H，主要旋转异构体)，2.16(m，1H，次要旋转异构体)

(viii)Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(3-F)

将Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-NHCH₂-Ph(3-F，4-CN)(0.130g，0.278mmol；参见以上步骤(vii))溶于80ml饱和HCl(g)的乙醇溶液。将混合物在室温反应过夜。蒸去溶剂，将残余物重新溶于100mL饱和NH₃(g)的乙醇溶液。反应在室温下缓慢进行2天。温度升至50℃，反应再继续进行3天。初始原料耗尽，蒸去溶剂。将产物用制备型RPLC提纯，冷冻干燥获得17mg(13％)标题化合物的HOAc盐。

¹H NMR(600MHz，CD₃OD旋转异构体混合物)δ7.65-7.6(m，1H)，7.4-7.3(m，3H)，7.25-7.1(m，2H)，7.15-6.7(m，1H)，5.25-5.1(m，1H加上下一质子的次要旋转异构体)，4.8(m，1H，主要旋转异构体部分被CD₃OH屏蔽)，4.6-3.95(m，4H)，2.69(m，1H，次要旋转异构体)，2.56(m，1H，主要旋转异构体)，2.28(m，1H，主要旋转异构体)，2.14(m，1H，次要旋转异构体)，1.90(s，3H)

¹³C-NMR(100MHz；CD₃OD)：(羰基和/或脒碳，旋转异构体混合物)δ180.6，173.4，173.1，172.9，164.5，162.3，159.8

APCI-MS：(M+1)＝485/487m/z

实施例39

Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(2，6-diF)

(i)2，6-二氟-4[(甲基亚磺酰基)(甲硫基)甲基]苯甲腈

在氩气氛下，将(甲基亚磺酰基)(甲硫基)甲烷(7.26g，0.0584mol)溶于100mL无水THF，冷却至-78℃。在搅拌下滴加丁基锂的己烷溶液(16mL 1.6M，0.0256mol)。将混合物搅拌15分钟。同时，在氩气氛下，将3，4，5-三氟苯甲腈(4.0g，0.025mmol)的100mL无水THF溶液冷却至-78℃，在35分钟内将前一溶液用套管加入后一溶液。30分钟后，除去冷却浴，当反应物达到室温后，将其倾入400mL水中。蒸去THF，剩余的水层用乙醚萃取三次。合并的乙醚相用水洗涤，用硫酸钠干燥，蒸发。产量：2.0g(30％)。

¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δ7.4-7.25(m，2H)，5.01(s，1H，非对映体(diasteromer))，4.91(s，1H，非对映体)，2.88(s，3H，非对映体)，2.52(s，3H，非对映体)，2.49(s，3H，非对映体)，2.34(s，3H，非对映体)，1.72(宽峰，1H)

(ii)2，6-二氟-4-甲酰基苯甲腈

将2，6-二氟-4[(甲基亚磺酰基)(甲硫基)甲基]苯甲腈(2.17g，8.32mmol；参见以上步骤(i))溶于90mL THF，加入3.5mL浓硫酸。将混合物置于室温3天，随后倾入450mL水中。用EtOAc萃取三次，接着合并的乙醚相用碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤两次，用硫酸钠干燥，蒸发。产量：1.36g(98％)。甲酰基的位置由¹³C NMR确定。在162.7ppm，氟化碳原子的信号具有预期偶合形式，分别为约260Hz和6.3Hz的偶合常数，对应于氟原子的同碳偶合和间位偶合。

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ10.35(s，1H)，7.33(m，2H)

(iii)2，6-二氟-4-羟基甲基苯甲腈

将2，6-二氟-4-甲酰基苯甲腈(1.36g，8.13mmol；参见以上步骤(ii))溶于25mL甲醇，用冰浴冷却。在搅拌下分批加入硼氢化钠(0.307g，8.12mmol)，将反应物放置65分钟。蒸去溶剂，残余物在乙醚和碳酸氢钠水溶液间分配。乙醚层再用碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤，用硫酸钠干燥，蒸发。粗制产物很快结晶，可以直接使用无需再提纯。产量：1.24g(90％)。

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.24(m，2H)，4.81(s，2H)，2.10(宽峰，1H)

(iv)甲磺酸4-氰基-2，6-二氟苄基酯

向搅拌下的2，6-二氟-4-羟基甲基苯甲腈(1.24g，7.32mmol；参见以上步骤(iii))和甲磺酰氯(0.93g，8.1mmol)的60mL二氯甲烷冰冷溶液加入三乙胺(0.81g，8.1mmol)。在0℃ 3小时后，将混合物用1M HCl洗涤两次，用水洗涤一次，用硫酸钠干燥，蒸发。产物可以直接使用无需再提纯。产量：1.61g(89％)。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.29(m，2H)，5.33(s，2H)，3.07(s，3H)

(v)4-叠氮基甲基-2，6-二氟苯甲腈

将甲磺酸4-氰基-2，6-二氟苄基酯(1.61g，6.51mmol；参见以上步骤(iv))和叠氮化钠(0.72g，0.0111mol)在10mL水和20mL DMF中的混合物在室温下搅拌过夜。接着将其倾入200mL水中，用乙醚萃取三次。合并的乙醚相用水洗涤5次，用硫酸钠干燥，蒸发。蒸发少量样品用于NMR，产物结晶。小心蒸发其余部分，但不要完全蒸干。基于NMR和分析型HPLC，认为产量(理论产量1.26g)几乎为定量的。

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.29(m，2H)，4.46(s，2H)

(vi)4-氨基甲基-2，6-二氟苯甲腈

本反应根据J.Chem.Res.(M)(1992)3128介绍的方法进行。520mg 10％ Pd/C(50％水分)的20mL水悬浮液中加入硼氢化钠(0.834g，0.0221mol)的20mL水溶液。结果产生一些气体。将4-叠氮基甲基-2，6-二氟苯甲腈(1.26g，6.49mmol；参见以上步骤(v))溶于50mL THF，在15分钟内，将其加入冰浴冷却的以上含水混合物。将混合物搅拌4小时，随后加入20mL 2M HCl，混合物用Celite过滤。Celite再用水冲洗，合并的水相用EtOAc洗涤，随后用2M NaOH碱化。接着用二氯甲烷萃取三次，合并的有机相用水洗涤，用硫酸钠干燥，蒸发。产量：0.87g(80％)。

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.20(m，2H)，3.96(s，2H)，1.51(宽峰，2H)

(vii)2，6-二氟-4-叔丁氧基羰基氨基甲基苯甲腈

将4-氨基甲基-2，6-二氟苯甲腈溶液(0.876g，5.21mmol；参见以上步骤(vi))溶于50mL THF，加入二碳酸二叔丁酯(1.14g，5.22mmol)的10mL THF溶液。将混合物搅拌3.5小时。蒸去THF，残余物在水和EtOAc间分配。有机层用0.5M HCl和水洗涤三次，用硫酸钠干燥，蒸发。产物可以直接使用无需再提纯。产量：1.38g(99％)。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.21(m，2H)，4.95(宽峰，1H)，4.43(宽峰，2H)，1.52(s，9H)

(viii)Boc-Pab(2，6-diF)(OH)

将2，6-二氟-4-叔丁氧基羰基氨基甲基苯甲腈(1.38g，5.16mmol；参见以上步骤(vii))、羟胺盐酸盐(1.08g，0.0155mol)和三乙胺(1.57g，0.0155mol)的20mL乙醇混合物在室温下搅拌36小时。蒸去溶剂，残余物在水和二氯甲烷间分配。有机层用水洗涤，用硫酸钠干燥，蒸发。产物可以直接使用无需再提纯。产量：1.43g(92％)。

¹H NMR(500MHz，CD₃OD)δ7.14(m，2H)，4.97(宽峰，1H)，4.84(宽峰，2H)，4.40(宽峰，2H)，1.43(s，9H)

(ix)Boc-Pab(2，6-diF)×HOAc

本反应根据Judkins等，Synth.Comm.(1998)4351介绍的方法进行。Boc-Pab(2，6-diF)(OH)(1.32g，4.37mmol；参见以上步骤(viii))，醋酸酐(0.477g，4.68mmol)和442mg 10％ Pd/C(50％水分)的100mL乙酸溶液在5atm压力下氢化3.5小时。将混合物用Celite过滤，用乙醇冲洗，蒸发。残余物用乙腈、水以及几滴乙醇冷冻干燥。小标题产物可以直接使用无需再提纯。产量：0.1.49g(99％)。

¹H NMR(400MHz，CD₃OD)δ7.45(m，2H)，4.34(s，2H)，1.90(s，3H)，1.40(s，9H)

(x)Boc-Pab(2，6-diF)(Teoc)

Boc-Pab(2，6-diF)×HOAc(1.56g，5.49mmol；参见以上步骤(ix))的100mL THF和1mL水溶液中加入2-(三甲硅烷基)乙基对硝基苯基碳酸酯(1.67g，5.89mmol)。在5分钟内滴加碳酸钾(1.57g，0.0114mol)的20mL水溶液。将混合物搅拌过夜。蒸去THF，残余物在水和二氯甲烷间分配。水层用二氯甲烷萃取，合并的有机相用碳酸氢钠水溶液洗涤两次，用硫酸钠干燥，蒸发。硅胶快速色谱法(庚烷/EtOAc＝2/1)处理获得1.71g(73％)纯化合物。

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.43(m，2H)，4.97(宽峰，1H)，4.41(宽峰，2H)，4.24(m，2H)，1.41(s，9H)，1.11(m，2H)，0.06(s，9H)

(xi)Boc-Aze-Pab(2，6-diF)(Teoc)

将Boc-Pab(2，6-diF)(Teoc)(1.009g，2.35mmol；参见以上步骤(x))溶于50mL饱和HCl(g)的EtOAc溶液。将混合物放置10分钟，蒸发后溶于18mL DMF，然后用冰浴冷却。加入Boc-Aze-OH(0.450g，2.24mmol)、PyBOP(1.24g，2.35mmol)，最后加入二异丙基乙胺(1.158g，8.96mmol)。将反应混合物搅拌2小时，然后倾入350mL水中，用EtOAc萃取三次。合并的有机相用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，蒸发。硅胶快速色谱法(庚烷∶EtOAc(1∶3))处理获得1.097g(96％)所需化合物。

¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δ7.46(m，2H)，4.65-4.5(m，3H)，4.23(m，2H)，3.87(m，1H)，3.74(m，1H)，2.45-2.3(m，2H)，1.40(s，9H)，1.10(m，2H)，0.05(s，9H)

(xii)Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(2，6-diF)(Teoc)

将Boc-Aze-Pab(2，6-diF)(Teoc)(0.256g，0.500mmol；参见以上步骤(xi))溶于20mL饱和HCl(g)的EtOAc溶液。将混合物放置10分钟，蒸发后溶于5mL DMF。加入Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)OH(0.120g，0.475mmol；参见以上实施例1(viii))、PyBOP(0.263g，0.498mmol)，最后加入二异丙基乙胺(0.245g，1.89mmol)。将反应混合物搅拌2小时，然后倾入350mL水中，用EtOAc萃取三次。合并的有机相用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，蒸发。硅胶快速色谱法(EtOAc)处理获得0.184g(60％)所需的小标题化合物。

¹H NMR(400MHz，CD₃OD，旋转异构体混合物)δ7.55-7.45(m，2H)，7.32(m，1H，主要旋转异构体)，7.27(m，1H，次要旋转异构体)，7.2-7.1(m，2H)，6.90(t，1H，主要旋转异构体)，6.86(t，1H，次要旋转异构体)，5.15(s，LH，主要旋转异构体)，5.12(m，1H，次要旋转异构体)，5.06(s，1H，次要旋转异构体)，4.72(m，1H，主要旋转异构体)，4.6-4.45(m，2H)，4.30(m，1H，主要旋转异构体)，4.24(m，2H)，4.13(m，1H，主要旋转异构体)，4.04(m，1H，次要旋转异构体)，3.95(m，1H，次要旋转异构体)，2.62(m，1H，次要旋转异构体)，2.48(m，1H，主要旋转异构体)，2.22(m，1H，主要旋转异构体)，2.10(m，1H，次要旋转异构体)，1.07(m，2H)，0.07(m，9H)

(xiii)Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(2，6-diF)

将Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(2，6-diF)(Teoc)(81mg，0.127mmol；参见以上步骤(xii))溶于0.5mL二氯甲烷，用冰浴冷却。加入TFA(3mL)，将反应物放置75分钟。蒸去TFA，残余物用水和乙腈冷冻干燥。粗制产物用制备型RPLC(CH₃CN∶0.1MNH₄OAc(35∶65))提纯获得39mg(55％)标题化合物的HOAc盐，纯度：99％。

¹H NMR(400MHz，CD₃OD旋转异构体混合物)δ7.5-7.4(m，2H)，7.32(m，1H，主要旋转异构体)，7.28(m，1H，次要旋转异构体)，7.2-7.1(m，3H)6.90(t，1H，主要旋转异构体)，6.86(t，次要旋转异构体)，5.15(s，1H，主要旋转异构体)，5.14(m，1H，次要旋转异构体)，5.07(s，1H，次要旋转异构体)，4.72(m，1H，主要旋转异构体)，4.65-4.45(m，2H)，4.30(m，1H，主要旋转异构体)，4.16(m，1H，主要旋转异构体)，4.03(m，1H，次要旋转异构体)，3.95(m，1H，次要旋转异构体)，2.63(m，1H，次要旋转异构体)，2.48(m，1H，主要旋转异构体)，2.21(m，1H，主要旋转异构体)，2.07(m，1H，次要旋转异构体)，1.89(s，3H)

¹³C-NMR(75MHz；CD₃OD)：(羰基和/或脒碳，旋转异构体混合物)δ171.9，171.2，165.0，162.8，160.4

APCI-MS：(M+1)＝503/505m/z。

实施例40

Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(2，6-diF)(OMe)

(i)Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(2，6-diF)(OMe，Teoc)

将Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(2，6-diF)(Teoc)(64mg，0.099mmol；参见以上实施例39(xii))和O-甲基羟胺盐酸盐(50mg，0.60mmol)的4mL乙腈混合物在70℃加热3小时。蒸去溶剂，残余物在水和EtOAc间分配。水层用EtOAc萃取两次，合并的有机相用水洗涤，用硫酸钠干燥，蒸发。产物可以直接使用无需再提纯。产量：58mg(87％)。

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.90(bt，1H)，7.46(m，1H)，7.25-6.95(m，5H)，6.51，t，1H)，4.88(s，1H)，4.83(m，1H)，4.6-4.5(m，2H)，4.4-3.9(m，4H)，3.95(s，3H)，3.63(m，1H)，2.67(m，1H)，2.38(m，1H)，1.87(宽峰，1H)，0.98(m，2H)，0.01，s，9H)

(ii)Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(2，6-diF)(OMe)

将Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(2，6-diF)(OMe，Teoc)

(58mg，0.086mmol；参见以上步骤(i))溶于3mL TFA，用冰浴冷却，让其反应2小时。蒸去TFA，将残余物溶于EtOAc。有机层用碳酸钠水溶液和水洗涤两次，用硫酸钠干燥，蒸发。残余物用水和乙腈冷冻干燥获得42mg(92％)标题化合物。纯度：94％。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.95(bt，1H)，7.2-7.1(m，4H)，6.99(m，1H)，6.52(t，1H)，4.88(s，1H)，4.85-4.75(m，3H)，4.6-4.45(m，2H)，4.29(宽峰，1H)，4.09(m，1H)，3.89(s，3H)，3.69(m，1H)，2.64(m，1H)，2.38(m，1H)，1.85(宽峰，1H)

¹³C-NMR(100MHz；CDCl₃)：(羰基和/或脒碳)δ172.1，169.8，151.9

APCI-MS：(M+1)＝533/535m/z

实施例41

Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(2，5-diF)

(i)2，5-二氟-4[(甲基亚磺酰基)(甲硫基)甲基]苯甲腈

在氩气氛下，将(甲基亚磺酰基)(甲硫基)甲烷(3.16g，0.0255mol)溶于50mL无水THF，然后冷却至-78℃。在搅拌下滴加丁基锂的己烷溶液(16mL 1.6M，0.0256mol)。将混合物搅拌15分钟。其间，在氩气氛下将2，4，5-三氟苯甲腈(2.0g；0.013mol)的50mL无水THF溶液冷却至-78℃，在3-5分钟内将前一溶液用套管加入后一溶液。30分钟后，除去冷却浴，当反应物达到室温后，将其倾入200mL水中。蒸去THF，剩余的水层用乙醚萃取三次。合并的乙醚相用水洗涤，用硫酸钠干燥，蒸发。粗制产物开始结晶，它也可以直接在下一步使用。产量：2.8g(84％)。

¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δ7.51-7.44(m，2H，主要非对映异构体)，7.39(dd，1H，次要非对映异构体)，5.00(s，1H，次要非对映异构体)，4.92(s，1H，主要非对映异构体)，2.59(s，3H，次要非对映异构体)，2.56(s，1H，主要非对映异构体)，2.46(s，1H，次要非对映异构体)，2.40(s，1H，主要非对映异构体)

(ii)2，5-二氟-4-甲酰基苯甲腈

将2，5-二氟-4[(甲基亚磺酰基)(甲硫基)甲基]苯甲腈(2.8g，0.0107mol；参见以上步骤(i))溶于100mL THF，加入6.5g浓硫酸。将混合物置于室温6天，随后倾入500ml水中。接着用乙醚萃取三次，合并的乙醚相用水洗涤几次，用硫酸钠干燥，蒸发。粗制产物用硅胶快速色谱法(庚烷∶EtOAc(8∶2))处理。产量：1.2g(67％)。用¹³C NMR确定甲酰基位置。如果甲酰基在2位则会出现以下情况，在160.1和158.4的氟化碳的碳信号分别为双峰和非四重峰。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ10.36(d，1H)，7.72(dd，1H)，7.54(dd，1H)

(iii)2，5-二氟-4-羟基甲基苯甲腈

将2，5-二氟-4-甲酰基苯甲腈(3.60g，0.0215mol；参见以上步骤(ii))溶于50mL甲醇，用冰浴冷却。在搅拌下分批加入硼氢化钠(0.815g，0.0215mol)，将反应物放置45分钟。加入水(300ml)，然后小心加入2M HCl直到获得酸性pH。将混合物用乙醚萃取三次，合并的乙醚相用水洗涤，用硫酸钠干燥，蒸发。粗制产物很快结晶，并可以直接使用无需再提纯。产量：3.1g(85％)。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.45(dd，1H)，7.30(dd，1H)，4.85(s，2H)，2.10(宽峰，1H)

(iv)甲磺酸4-氰基-2，5-二氟苄基酯

在搅拌下，向2，5-二氟-4-羟基甲基苯甲腈(3.10g，0.0183mol；参见以上步骤(iii))和甲磺酰氯(2.21g，0.0192mol)的60mL二氯甲烷冰冷溶液中加入三乙胺(1.95g，0.0192mol)。在0℃1.5小时后，混合物用水洗涤，用硫酸钠干燥，蒸发。产物可以直接使用无需再提纯。产量：4.5g(99％)。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.45-7.35(m，2H)，5.32(s，2H)，3.13(s，3H)

(v)4-叠氮基甲基-2，5-二氟苯甲腈

在室温下，将甲磺酸4-氰基-2，5-二氟苄基酯(4.5g，0.0182mol；参见以上步骤(iv))和叠氮化钠(2.0g，0.031mol)的20mL水和40mLDMF混合物搅拌2小时。随后将其倾入300mL水中，用乙醚萃取三次。合并的乙醚相用水洗涤几次，用硫酸钠干燥，蒸发。蒸发少量样品用于NMR，产物结晶。小心蒸发其余部分，但不要完全蒸干。基于NMR和分析型HPLC，认为产量(理论3.5g)几乎为定性。

¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δ.38(dd，1H)，7.32(dd，1H)，4.54(s，2H)

(vi)4-氨基甲基-2，5-二氟苯甲腈

本反应根据J.Chem.Res.(M)(1992)3128介绍的方法进行。300mg 10％ Pd/C(50％水分)的20mL水悬浮液中加入硼氢化钠(0.779g，0.0206mol)的20mL水溶液。结果产生一些气体。将4-叠氮基甲基-2，5-二氟苯甲腈(1.00g，5.15mmol；得自步骤(v))溶于60mL THF，将其加入到在冰浴冷却的以上水溶液混合物。将混合物搅拌1.5小时，然后加入10mL 2M HCl，将混合物用Celite过滤。Celite再用水冲洗，合并的水相用EtOAc洗涤，随后用2M NaOH碱化。接着用二氯甲烷萃取三次，合并的有机相用水洗涤，用硫酸钠干燥，蒸发。产量：0.47g(54％)。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.39(dd，1H)，7.29(dd，1H)，3.99(s，2H)，1.45(宽峰，2H)

(vii)2，5-二氟-4-叔丁氧基羰基氨基甲基苯甲腈

将4-氨基甲基-2，5-二氟苯甲腈(0.46g，2.7mmol；参见以上步骤(vi))和二碳酸二叔丁酯(0.60g，2.7mmol)的10mL THF溶液搅拌过夜。蒸去THF，残余物在水和EtOAc间分配。有机层用水洗涤，用硫酸钠干燥，蒸发。产物可以直接使用无需再提纯。产量：0.71g(97％)。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.35-7.2(m，2H)，5.11(宽峰三峰，1H)，4.38(d，2H)，1.45(s，9H)

(viii)Boc-Pab(2，5-diF)(OH)

在室温下，将2，5-二氟-4-叔丁氧基羰基氨基甲基苯甲腈(0.70g，2.6mmol；参见以上步骤(vii))、羟胺盐酸盐(0.54g，7.8mmol)和三乙胺(0.79g，7.8mmol)的10mL乙醇混合物搅拌6天。然后它在水和二氯甲烷间分配。水层用二氯甲烷萃取，合并的有机相用水洗涤，用硫酸钠干燥，蒸发。产物可以直接使用无需再提纯。产量：0.72g(92％)。

¹H NMR(500MHz，CD₃OD)δ7.27(dd，1H)，7.12(dd，1H)，4.29(s，2H)，1.47(s，9H)

(ix)Boc-Pab(2，5-diF)×HOAc

本反应根据Judkins等，Synth.Comm.(1998)4351介绍的方法进行。Boc-Pab(2，5-diF)(OH)(0.70g，2.3mmol；参见以上步骤(viii))，醋酸酐(0.25g，2.4mmol)和230mg of 10％ Pd/C(50％水分)的70mL乙酸溶液在5atm压力下氢化2.5小时。将混合物用Celite过滤，蒸发。残余物用乙腈和水冷冻干燥。产物可以在下一步直接使用无需再提纯。产量：0.80g(100％)。

¹H NMR(500MHz，CD₃OD)δ7.49(dd，1H)，7.31(dd，1H)，4.33(s，2H)，1.91(s，3H)，1.46(s，9H)

(x)Boc-Pab(2，5-diF)(Teoc)

Boc-Pab(2，5-diF)×HOAc(0.80g，2.3mmol；参见以上步骤(ix))的50mL THF悬浮液中加入2-(三甲硅烷基)乙基对硝基苯基碳酸酯(0.85g，3.0mmol)。滴加碳酸钾(0.80g，5.8mmol)的10mL水溶液。将混合物搅拌过夜。在溶液中加入甘氨酸(0.100g)和碳酸钾(0.75g)破坏过量的Teoc试剂，让其再反应2小时。蒸去THF，残余物在水和二氯甲烷间分配。水层用二氯甲烷萃取，合并的有机相用水洗涤，用硫酸钠干燥，蒸发。硅胶快速色谱法(庚烷∶EtOAc(2∶1))处理获得0.72g(72％)纯化合物。

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.00(dd，1H)，7.15(dd，1H)，4.98(宽峰，1H)，4.36(bd，2H)，4.24(m，2H)，1.45(s，9H)，1.12(m，2H)，0.07(s，9H)

(xi)H-Pab(2，5-diF)(Teoc)×2HCl

将Boc-Pab(2，5-diF)(Teoc)(0.38g，0.88mmol；参见以上步骤(x))溶于50mL饱和HCl(g)的EtOAc溶液。将混合物放置30分钟，蒸发。

¹H NMR(500MHz，CD₃OD)δ7.75-7.6(m，2H)，4.46(m，2H)，4.3(s，2H)，1.15(m，2H)，0.07(s，9H)

(xii)Boc-Aze-Pab(2，5-diF)(Teoc)

在搅拌下的Boc-Aze-OH(0.189g，0.94mmol)、H-Pab(2，5-diF)(Teoc)×2HCl(0.36g，0.89mmol；参见以上步骤(xi))和PyBOP(0.54g，1.03mmol)的5mL DMF溶液中加入二异丙基乙胺(0.49g，3.8mmol)，让混合物反应过夜。然后将其倾入碳酸氢钠水溶液中，用EtOAc萃取三次。合并的有机相用水洗涤，用硫酸钠干燥，蒸发。硅胶快速色谱法(庚烷∶EtOAc(3∶7))处理获得足够纯度的化合物。产量：0.25g(48％)。

¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δ7.98(dd，1H)，7.13(dd，1H)，4.69(m，1H)，4.53(m，2H)，4.22(m，2H)，3.92(m，1H)，3.79(m，1H)，2.55-2.35(m，2H)，1.44(s，9H)，1.11(m，2H)，0.06(s，9H)

(xiii)H-Aze-Pab(2，5-diF)(Teoc)×2HCl

将Boc-Aze-Pab(2，5-diF)(Teoc)(0.25g，0.49mmol；参见以上步骤(xii))溶于50mL饱和HCl(g)的EtOAc溶液。将混合物放置30分钟，蒸发。产物直接用于下一步骤无需再提纯。产量：0.23g(97％)。

¹H NMR(400MHz，CD₃OD)δ7.59(dd，1H)，7.47(dd，1H)，05.14(m，1H)，4.54(m，2H)，4.48(m，2H)，4.15(m，1H)，3.96(m，1H)，2.87(m，1H)，2.56(m，1H)，1.17(m，2H)，0.05(s，9H)

(xiv)Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(2，5-diF)(Teoc)

Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)OH(0.12g，0.47mmol；参见以上实施例1(viii))、H-Aze-Pab(2，5-diF)(Teoc)×2HCl(0.23g，0.47mmol；参见以上步骤(xiii))和PyBOP(0.27g，0.52mmol)的10mL DMF溶液中加入二异丙基乙胺(0.245g，1.90mmol)，将混合物搅拌过夜。将其倾入水中，用EtOAc萃取三次。合并的有机相用水洗涤，用硫酸钠干燥，蒸发。硅胶快速色谱法(EtOAc)处理获得100mg纯净部分和30mg 90％纯净部分。总产量：0.13g(41％)。

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ9.80(宽峰，1H)，8.05(bt，1H)，7.94(dd，1H)，7.20(m，1H)，7.2-7.1(m，2H)，7.02(m，1H)，6.54(t，1H)，4.93(s，1H)，4.91(m，1H)，4.51(m，2H)，4.28(宽峰，1H)，4.23(m，2H)，4.13(m，1H)，3.74(m，1H)，2.69(m，1H)，2.43(m，1H)，1.73(宽峰，1H)，1.11(m，2H)，1.11(s，9H)

(xv)Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(2，5-diF)

将Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(2，5-diF)(Teoc)(60mg(0.093mmol)的纯净部分，得自步骤(xiv))溶于3mL TFA，置于室温1小时。蒸去TFA，残余物用水和乙腈冷冻干燥获得55mg(96％)标题化合物的TFA盐，纯度：＞99％。

¹H NMR(500MHz，CD₃OD旋转异构体混合物)δ7.55-7.3(m，3H)，7.2-7.1(m，2H)，6.88(t，1H，主要旋转异构体)，6.86(t，1H，次要旋转异构体)，5.22(m，1H，次要旋转异构体)，5.20(s，1H，主要旋转异构体)，5.13(s，1H，次要旋转异构体)，4.80(m，1H，主要旋转异构体)，4.6-4.45(m，2H)，4.36(m，1H，主要旋转异构体)，4.19(m，1H，主要旋转异构体)，4.07(m，1H，次要旋转异构体)，3.98(m，1H，次要旋转异构体)，2.70(m，1H，次要旋转异构体)，2.54(m，1H，主要旋转异构体)，2.28(m，1H，主要旋转异构体)，2.14(m，1H，次要旋转异构体)

¹³C-NMR(75MHz；CD₃OD)：(羰基和/或脒碳，旋转异构体混合物)δ173.0，172.6，172.1，172.0，162.4

APCI-MS：(M+1)＝503/505m/z。

实施例42

Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(2，5-diF)(OMe)

(i)Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze Pab(2，5-diF)(OMe，Teoc)

将Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(2，5-diF)(Teoc)(40mg，0.062mmol；参见以上实施例41(xiv))和O-甲基羟胺盐酸盐(58mg，0.70mmol)的5mL乙腈混合物在70℃加热2小时。蒸去溶剂，残余物在水和EtOAc间分配。水层用EtOAc萃取，合并的有机相用水洗涤，用硫酸钠干燥，蒸发。产物可以直接使用无需再提纯。产量：35mg(84％)。

¹H NMR(600MHz，CDCl₃)δ7.99(bt，1H)，7.72(s，1H)，7.20(m，1H)7.15-7.1(m，1H)，7.07(dd，1H)，7.01(m，1H)，6.53(t，1H)，4.90(s，1H)，4.88(m，1H)，4.48(m，2H)，4.2-4.1(m，3H)，3.95(s，3H)，3.67(m，1H)，2.68(m，1H)，2.41(m，1H)，0.97(m，2H)，0.07(s，9H)

(ii)Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(2，5-diF)(OMe)

将Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(2，5-diF)(OMe，Teoc)(35mg，0.052mmol；参见以上步骤(i))溶于3mL TFA，让其反应30分钟。蒸去TFA，残余物用水和乙腈冷冻干燥获得29mg(99％)标题化合物。纯度：97％。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ8.01(bt，1H)，7.45(dd，1H)，7.20(m，1H)，7.15(m，1H)，7.09(dd，1H)，7.02(m，1H)，6.54(t，1H)，5.2-5.0(m，2H)，4.95-4.85(m，2H)，4.6-4.4(m，2H)，4.25(宽峰，1H)，4.13(m，1H)，3.90(s，3H)，3.71(m，1H)，2.69(m，1H)，2.43(m，1H)

¹³C-NMR(75MHz；CDCl₃)：(羰基和/或脒碳)δ173.0，170.9，152.6

APCI-MS：(M+1)＝533/535m/z。

实施例43

Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OEt)

(i)Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OEt，Teoc)

将Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(Teoc)(55mg，0.090mmol；参见以上实施例1(ix))和O-乙基羟胺盐酸盐(53mg，0.54mmol)溶于4mL THF。将混合物在60℃搅拌5小时。蒸去溶剂。残余物用硅胶色谱法(洗提：二氯甲烷∶甲醇(95∶5))处理获得55mg(93％)小标题化合物。

¹H NMR(400MHz；CDCl₃)：δ7.84(bt，1H)，7.59(bs，1H)，7.47(bd，1H)，7.29(bd，1H)，7.21(m，1H)，7.14(m，1H)，7.02(m，1H)，6.53(t，1H)，4.90(s，1H)，4.86(m，1H)，4.55-4.4(m，2H)，4.25-4.1(m，5H)，3.69(m，1H)，2.66(m，1H)，2.41(m，1H)，1.33(t，3H)，0.98(m，2H)，0.02(s，9H)

(ii)Ph(3-Cl，5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OEt)

将Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OEt，Teoc)(55mg，0.084mmol；参见以上步骤(i))的0.5mL二氯甲烷冰冷溶液中加入3mL TFA。将混合物搅拌(冰浴)160分钟。产物用制备型HPLC提纯。合并需要部分，冷冻干燥(2×)获得20mg(47％)标题化合物。

¹H-NMR(400MHz；CD₃OD)旋转异构体：δ7.59(bd，2H)，7.35(m，1H)，7.32(bd，2H)，7.25-7.1(m，2H)，6.89(t，1H，主要旋转异构体)，6.86(t，1H，次要旋转异构体)，5.18(s，1H，主要旋转异构体)，5.18(m，1H，次要旋转异构体)，5.11(s，1H，次要旋转异构体)，4.77(m，1H)，4.5-4.3(m，3H)，4.2-3.9(m，3H)，2.67(m，1H，次要旋转异构体)，2.52(m，1H，主要旋转异构体)，2.28(m，1H，主要旋转异构体)，2.15(m，1H，次要旋转异构体)，1.28(t，3H)

¹³C-NMR(100MHz；CD₃OD)：(羰基和/或脒碳，旋转异构体)δ172.4，171.9，171.4，153.8，152.3

MS(m/z)509(M-1)-，511(M+1)⁺

实施例44

Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OnPr)

(i)Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R))CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OnPr，Teoc)

将Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(Teoc)(53mg，0.087mmol；参见实施例1(ix))和O-正丙基羟胺盐酸盐58mg(0.52mmol)溶于4mL THF。将混合物在60℃搅拌5小时。蒸去溶剂。残余物用硅胶色谱法(洗提：二氯甲烷∶甲醇(95∶5))处理获得51mg(88％)小标题化合物。

¹H-NMR(400MHz；CDCl₃)：δ7.84(m，1H)，7.59(bs，1H)，7.47(bd，2H)，7.28(bd，2H)，7.21(m，1H)，7.14(m，1H)，7.02(m，1H)，6.53(t，1H)，4.90(s，1H)，4.85(m，1H)，4.55-4.4(m，2H)，4.2-4.05(m，5H)，3.69(m，1H)，2.65(m，1H)，2.41(m，1H)，1.74(m，2H)，1.05-0.95(m，5H)，0.03(s，9H)

(ii)Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OnPr)

Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OnPr，Teoc)(51mg，0.078mmol；参见以上步骤(i))的0.5mL二氯甲烷冰冷溶液中加入3mL TFA。将混合物搅拌(冰浴)110分钟。产物用制备型HPLC提纯。蒸发需要部分，冷冻干燥获得20mg(47％)标题化合物。

¹H-NMR(500MHz；CD₃OD)旋转异构体：δ7.61(bd，2H)，7.38(m，1H)，7.35(bd，2H)，7.22(m，1H，主要旋转异构体)，7.18(m，1H)，7.15(m，1H，次要旋转异构体)，6.92(t，1H，主要旋转异构体)，6.89(t，1H，次要旋转异构体)，5.20(s，1H，主要旋转异构体)，5.20(m，1H，次要旋转异构体)，4.80(m，1H，主要旋转异构体)，4.5-4.4(m，2H，包括对应于在4.37的主要旋转异构体的次要旋转异构体)，4.37(m，1H，主要旋转异构体)，4.18(m，1H，主要旋转异构体)，4.09(m，1H，次要旋转异构体)，3.99(m，2H)，2.70(m，1H，次要旋转异构体)，2.54(m，1H，主要旋转异构体)，2.30(m，1H，主要旋转异构体)，2.18(m，1H，次要旋转异构体)，1.73(m，2H)，1.01(t，3H)

¹³C-NMR(125MHz；CD₃OD)：(羰基和/或脒碳，旋转异构体)δ171.4，153.8，152.3

MS(m/z)523(M-1)^-，525(M+1)⁺

实施例45

Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OiPr)

(i)Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OiPr，Teoc)

将Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(Teoc)(50mg，0.082mmol；参见以上实施例1(ix))和O-异丙基羟胺盐酸盐55mg(0.49mmol)溶于4mL THF。将混合物在60℃搅拌5小时。蒸去溶剂。残余物用硅胶色谱法(洗提：二氯甲烷∶甲醇(95∶5))处理获得46mg(84％)小标题化合物。

¹H-NMR(400MHz；CDCl₃)：δ7.84(m，1H)，7.57(bs，1H)，7.48(bd，2H)，7.29(bd，2H)，7.21(m，1H)，7.14(m，1H)，7.02(m，1H)，6.53(t，1H)，4.91(s，1H)，4.87(m，1H)，4.55-4.45(m，2H)，4.42(m，1H)，4.2-4.1(m，3H)，3.69(m，1H)，2.66(m，1H)，2.42(m，1H)，1.30(d，6H)，0.98(m，2H)，0.02(s，9H)

(ii)Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OiPr)

Ph(3-Cl)(5-OCHF₂)-(R)CH(OH)C(O)-Aze-Pab(OiPr，Teoc)(46mg，0.069mmol；参见以上步骤(i))的0.5mL二氯甲烷冰冷溶液中加入3mL TFA。将混合物搅拌(冰浴)150分钟。产物用制备型HPLC提纯。蒸发需要部分，冷冻干燥(2×)，获得22mg(58％)标题化合物。

¹H-NMR(400MHz；CD₃OD)旋转异构体：δ7.59(d，2H)，7.35(m，1H)，7.32(d，2H)，7.19(m，1H，主要旋转异构体)，7.15(m，1H)，7.12(m，1H，次要旋转异构体)，6.89(t，1H，主要旋转异构体)，6.86(t，1H，次要旋转异构体)，5.18(s，1H，主要旋转异构体)，5.18(m，1H，次要旋转异构体)，5.12(s，1H，次要旋转异构体)，4.78(m，1H，主要旋转异构体)，4.5-3.9(m，5H)，2.67(m，1H，次要旋转异构体)，2.52(m，1H，主要旋转异构体)，2.28(m，1H，主要旋转异构体)，2.15(m，1H，次要旋转异构体)，1.26(d，6H)

¹³C-NMR(100MHz；CD₃OD)：(羰基和/或脒碳，旋转异构体)δ171.9，171.4，153.6。

MS(m/z)523(M-1)^-，525(M+1)⁺

实施例46

实施例3、6、9、10、13-15、17、19、21、23、25、27、28、32、34、36、38、39和41的标题化合物按照以上试验A进行测试，发现IC₅₀TT值小于3.5μM。发现实施例3、6、9、10、13、15、17、19、21、23、27、32、34和39的IC₅₀TT值小于0.02μM；发现实施例25和28的IC₅₀TT值小于0.03μM，发现实施例14的IC₅₀TT值小于0.04μM；发现实施例38和41的IC₅₀TT值小于0.15μM。

实施例47

实施例3、6、13、15、17、19、21、23、25、27、28、32和34的标题化合物按照以上试验D进行测试，发现IC₅₀APTT值小于1μM。

实施例48

实施例1、2、4、5、7、12、16、18、20、22、24、26、29、30、33以及43-45的标题化合物按照以上试验E进行测试，发现其相应活性抑制剂(游离脒)在大鼠具有口服和/或胃肠外生物利用性。

实施例49

实施例1、2、7、8、11、12、16、18、20、22、24、26、29、33、37、40、43和45的标题化合物按照以上试验G进行测试，发现以上化合物在人和大鼠的肝微粒体转化为相应的活性抑制剂(游离脒)。

缩写

Ac＝乙酰基

AcOH＝乙酸

APCI＝常压化学电离作用(与MS相关)

API＝常压电离作用(与MS相关)

aq.＝含水的

AUC＝曲线以下区域

Aze＝(S)-氮杂环丁烷-2-羧酸盐(除非另有说明)

AzeOH＝氮杂环丁烷-2-羧酸

Bn＝苄基

Boc＝叔丁氧基羰基

BSA＝牛血清白蛋白

Bu＝丁基

Bzl＝苄基

CI＝化学电离作用(与MS相关)

d＝天

DCC＝二环己基碳化二亚胺

DIBAL-H＝二异丁基氢化铝

DIPEA＝二异丙基乙胺

DMAP＝4-(N，N-二甲基氨基)吡啶

DMF＝二甲甲酰胺

DMSO＝二甲基亚砜

DVT＝深静脉血栓形成

EDC＝1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺盐酸盐

e.e.＝对映体过量

Et＝乙基

ether＝乙醚

EtOAc＝乙酸乙酯

EtOH＝乙醇

Et₂O＝乙醚

h＝小时

HATU＝邻(氮杂苯并三唑-1-基)-N，N，N’，N’-四甲基脲_六氟磷酸盐

HBTU＝[N，N，N’，N’-四甲基-邻-(苯并三唑-1-基)脲_六氟磷酸盐]

HCl＝盐酸、氯化氢气体或盐酸盐(取决于上下文)

Hex＝己烷

HOAc＝乙酸

HPLC＝高效液相色谱法

LC＝液相色谱

Me＝甲基

MEM＝甲氧基乙氧基甲基

MeOH＝甲醇

min＝分钟

MS＝质谱法

MTBE＝甲基叔丁基醚

NADH＝烟酰胺腺嘌呤二核甙酸，还原形式

NADPH＝烟酰胺腺嘌呤二核甙酸磷酸盐，还原形式

NIH＝国家卫生研究院(美国)

NIHU＝国家卫生研究院单位

NMR＝核磁共振

OAc＝醋酸根

Pab＝对脒基苄基氨基

H-Pab＝对脒基苄基胺

Ph＝苯基

Pr＝丙基

Pro＝(S)-脯氨酸基

PyBOP＝(苯并三唑-1-基氧基)三吡咯烷基_六氟磷酸盐

QF＝四丁基氟化铵

RedAl＝双(2-甲氧基乙氧基)氢化铝钠

RPLC＝反相高效液相色谱法

rt/RT＝室温

SOPs＝标准操作步骤

TBTU＝[N，N，N’，N’-四甲基-邻-(苯并三唑-1-基)脲_四氟硼酸盐]

TEA＝三乙胺

Teoc＝2-(三甲硅烷基)乙氧基羰基

TEMPO＝2，2，6，6-四甲基-1-哌啶氧基游离基

TFA＝三氟乙酸

THF＝四氢呋喃

THP＝四氢吡喃基

TLC＝薄层色谱法

TMSCl＝三甲硅烷基氯

TMSCN＝三甲硅烷基氰

UV＝紫外线

Z＝苄氧基羰基

前缀n，s，i和t具有它们的通常含义：正、仲、异和叔。前缀c是指环状。

Claims (9)

1.一种制备式I化合物的方法，所述化合物为式I化合物或其药学上可接受的衍生物

其中

R^a为-OH或-CH₂OH；

R¹为一个或多个任选卤基取代基；

R²为一个或两个C_1-3烷氧基取代基，该取代基的烷基部分为被一个或多个氟基取代的烷基；

Y为-CH₂-或-(CH₂)₂-；

R³为式I(i)或I(ii)的结构片段：

其中

R⁴为H或一个或多个氟基取代基；和

X₁、X₂、X₃和X₄中的一个或两个为-N-，其余为-CH-，

所述方法包括：

(i)使式II化合物，

其中R^a、R¹和R²同以上定义，与式III化合物偶合，

其中Y和R³同以上定义；

(ii)使式IV化合物，

其中R^a、R¹、R²和Y同以上定义，与式V化合物偶合，

            R³CH₂NH₂                  V

其中R³同以上定义；

(iii)对于制备R¹不为一个或多个卤基基团的式I化合物，还原相应的式Ia化合物

其中R^3a为式I(iii)或I(iv)的结构片段：

其中R⁵为OR⁶或C(O)OR⁷；

R⁶为H、C_1-10烷基、C_1-3烷基芳基或C_1-3烷氧基芳基，其中后两个基团的烷基部分任选被一个或多个氧原子隔断，后两个基团的芳基部分任选被一个或多个选自卤基、苯基、甲基或甲氧基的取代基取代，后三个基团也任选被一个或多个卤基取代基取代；

R⁷为C_1-10烷基，其中后一基团任选被一个或多个氧原子隔断、C_1-3烷基芳基或C_1-3烷氧基芳基，其中后两个基团的烷基部分任选被一个或多个氧原子隔断，后两个基团的芳基部分任选被一个或多个选自卤基、苯基、甲基或甲氧基的取代基取代，后三个基团也任选被一个或多个卤基取代基取代；并且

R^a、R¹、R²、Y、R⁴、X₁、X₂、X₃和X₄同以上定义；

(iv)使式XVIA或XVIB相应化合物与氨源反应

其中R^a、R¹、R²、Y、R⁴、X₁、X₂、X₃和X₄同以上定义；

(v)使式XIVA化合物

其中R^a、R¹、R³和Y同以上定义，与以下化合物反应：

(a)相应的氟化卤代链烷；或

(b)对于制备其中R²为-OCH₂CF₃、-OCH₂CHF₂、-OCH₂CH₂F或-OCH(CH₂F)₂的式I化合物，与式XIVJ化合物反应，

          R^xS(O)₂OR^y                      XIVJ

其中R^x为C_1-4烷基、C_1-4全氟代烷基或苯基，所述苯基任选被甲基、硝基或卤基取代，R^y为-CH₂CF₃、-CH₂CHF₂、-CH₂CH₂F或-CH(CH₂F)₂；

(vi)对于制备R¹不为一个或多个卤基基团的式I化合物，氢化其中R¹为一个或多个卤基基团的相应式I化合物；或

(vii)使以上定义的化合物的保护衍生物去保护。

2.权利要求1定义的式II化合物或其被保护的衍生物。

3.权利要求2要求保护的化合物，其中当R^a为-OH时，该化合物关于R^a连接的碳原子为R-构型，或者当R^a为-CH₂OH时，该化合物为S-构型。

4.权利要求1定义的式IV化合物或其被保护的衍生物。

5.一种式IX^a化合物或其被保护的衍生物，

其中R为C_1-6烷基或C_1-3烷基苯基，R¹为卤基，R²同权利要求1定义。

6.一种式XIVB^a化合物或其苯酚O-保护的衍生物，所述化合物不是甲基保护的，

其中R¹为卤基，R^a同权利要求1定义。

7.一种制备式Ia化合物的方法，所述化合物为式Ia化合物或其药学上可接受的衍生物

其中R^3a为式I(iii)或I(iv)的结构片段：

其中R⁵为OR⁶或C(O)OR⁷；

R⁶为H、C_1-10烷基、C_1-3烷基芳基或C_1-3烷氧基芳基，其中后两个基团的烷基部分任选被一个或多个氧原子隔断，后两个基团的芳基部分任选被一个或多个选自卤基、苯基、甲基或甲氧基的取代基取代，后三个基团也任选被一个或多个卤基取代基取代；

R⁷为C_1-10烷基，其中后一基团任选被一个或多个氧原子隔断、C_1-3烷基芳基或C_1-3烷氧基芳基，其中后两个基团的烷基部分任选被一个或多个氧原子隔断，后两个基团的芳基部分任选被一个或多个选自卤基、苯基、甲基或甲氧基的取代基取代，后三个基团也任选被一个或多个卤基取代基取代；并且

R^a、R¹、R²、Y、R⁴、X₁、X₂、X₃和X₄同以上定义；

所述方法包括：

(a)使如权利要求1定义的相应式II化合物与式XV化合物反应，

其中Y同权利要求1定义，R^3a同以上定义；

(b)使权利要求1定义的相应式IV化合物与式XVI化合物反应，

R^3aCH₂NH₂                        XVI

其中R^3a同以上定义；

(c)对于制备R⁵为OH的式Ia化合物，使相应的式XVIA或XVIB化合物与羟胺反应，

其中R^a、R¹、R²、R⁴、Y、X₁、X₂、X₃和X₄同权利要求1定义；

(d)对于制备R⁵为OR⁶的式Ia化合物，使式XVII化合物，

其中R^3b为式I(v)或I(vi)的结构片段或其互变异构体：

其中R^b为-CH₂CH₂-Si(CH₃)₃或苄基，R^a、R¹、R²、Y、R⁴、X₁、X₂、X₃和X₄同权利要求1定义，与式XVIII化合物或其酸加成盐反应，

R⁶ONH₂              XVIII

其中R⁶同以上定义，接着除去-C(O)OR^b基团；

(e)对于制备R⁵为OH的式Ia化合物，使以上定义的式XVII化合物，其中R^b为苄基，与羟胺或其酸加成盐反应；

(f)对于制备R⁵为COOR⁷的式Ia化合物，使权利要求1定义的相应式I化合物与式XIX化合物反应，

L¹COOR⁷               XIX

其中L¹为离去基团，R⁷同以上定义；或者

(g)对于制备R⁵为OCH₃或OCH₂CH₃的式Ia化合物，使R⁵为OH的相应式Ia化合物分别与硫酸二甲酯或硫酸二乙酯反应。

8.权利要求7定义的式XVIA或XVIB化合物或其被保护的衍生物。

9.权利要求7定义的式XVII化合物或其被保护的衍生物。