CN1884562A - 一种发酵生产辅酶q10的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及微生物发酵领域，具体涉及一种发酵生产辅酶Q10的方法。现有发酵方法采用红假单胞菌，发酵生产时必须使用光照，培养时间较长，生产成本高。本发明采用农杆菌LQ10用于发酵生长辅酶Q10，其生长过程不需要光照，并能高密度发酵，发酵成本低。
Description
技术领域
本发明涉及微生物发酵领域，具体涉及一种发酵生产辅酶Q10的方法。
背景技术
辅酶Q10的生产方法有动植物组织提取法、化学合成法和微生物发酵法三种。其中动植物提取法成本高，不适合现代工业生产；化学合成法反应复杂，副产物多，成本也较高。微生物发酵法目前只有日本采用，但是，日本企业使用的菌种是红假单胞菌(Rhodopseudomonassp.)，发酵生产时必须使用光照，培养时间较长，因此增加了生产成本。
发明内容
本发明的目的是克服现有辅酶Q10生长方法存在的问题，提供一种不需要光照且能高密度发酵生产辅酶Q10的方法。
为了实现上述目的，本发明技术人员经过长期的研究，发现农杆菌LQ10(Agrobacterium sp.)能用于发酵生长辅酶Q10，且其生长过程不需要光照，并能高密度发酵，具体发酵方法如下所示：
(1)种子培养：农杆菌LQ10在进入发酵罐前先进行两级种子培养，种子培养基为：葡萄糖5g，蛋白胨5g，牛肉膏5g，酵母粉1g，MgSO4·7H2O 0.49g，琼脂20g，121℃灭菌15min；培养温度均为30℃，培养时间均为12小时；
(2)发酵培养：经过两级种子培养后的农杆菌LQ 10培养液进入发酵罐发酵，发酵培养基为：葡萄糖28g，蔗糖糖蜜50g，酵母粉5g，玉米浆28g，(NH4)2SO47g，KH2PO40.4g，Na2HPO4·12H2O 1.5g，MgSO4·7H2O 0.3g，pH7.2，121℃灭菌15min；发酵温度过高或过低不仅对发酵速度有影响，也影响辅酶Q10的积累，以30～32℃为宜，溶氧30％，辅酶Q10产量在pH6.0时最高，但此pH值不利于菌体生长，适合的pH值应在7.0～7.2之间，48小时后，可用硝酸或盐酸将pH值调至6.5左右，以利于辅酶Q10的积累。搅拌速度控制在200～1000rpm。发酵培养基在灭菌时还加入0.01％的消泡剂。
(3)发酵终止：当发酵时间72小时左右且发酵液颜色为黑褐色时，即可终止发酵，提取辅酶Q10。
与现有辅酶Q10生产方法相比，本发明具有如下有益效果：
(1)所用发酵菌株农杆菌LQ10为安全性菌株；
(2)所用发酵培养基价廉易得，可降低发酵成本；
(3)发酵时不需要光照，可降低发酵成本；
(4)发酵温度适中，发酵条件要求低；
(5)可进行高密度发酵，从而提高单位产量
具体实施方式
实施例1：
将石蜡油保存的斜面农杆菌LQ10(Agrobacterium sp.)接种至5ml试管培养基中，30℃培养12小时，再接入400ml培养基三角瓶中30℃培养12小时。两级种子培养的培养基组成(g/L)：葡萄糖5g，蛋白胨5g，牛肉膏5g，酵母粉1g，MgSO4·7H2O 0.49g，琼脂20g，121℃灭菌15min。
然后将4升培养液接入5升全自动发酵罐发酵，培养基g/L)：葡萄糖28g，蔗糖糖蜜50g，酵母粉5g，玉米浆28g，(NH4)2sO4 7g，KH2PO40.4g，Na2HPO4·12H2O 1.5g，MgSO4·7H2O 0.3g，121℃加入0.01％消泡剂灭菌15min。发酵培养温度为30℃，溶氧量为30％搅拌速度为400rpm，pH值为7.2，培养48小时后将pH值调为6.5，以利于辅酶Q10的积累。
当发酵时间为72小时左右，发酵液颜色为黑褐色时即可终止发酵，提取辅酶Q10。
Claims (3)
1、一种生产辅酶Q10的方法，采用发酵方法生产，其特征在于发酵所采用的菌种为农杆菌LQ10。
2、根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述发酵方法具体包括如下步骤：
(1)种子培养：农杆菌LQ10在进入发酵罐前先进行两级种子培养，种子培养基为：葡萄糖5g，蛋白胨5g，牛肉膏5g，酵母粉1g，MgSO4·7H2O 0.49g，琼脂20g，121℃灭菌15min；培养温度均为30℃，培养时间均为12小时；
(2)发酵培养：经过两级种子培养后的农杆菌LQ10培养液进入发酵罐发酵，发酵培养基为：葡萄糖28g，蔗糖糖蜜50g，酵母粉5g，玉米浆28g，(NH4)2SO47g，KH2PO40.4g，Na2HPO4·12H2O1.5g，MgSO4·7H2O0.3g，pH7.2，121℃灭菌15min；发酵温度为30～32℃，溶氧30％，发酵时间48小时以前的pH值为7.0～7.2，发酵时间48小时以后pH值为6.5，搅拌速度控制在200～1000rpm；
(3)发酵终止：当发酵时间72小时左右且发酵液颜色为黑褐色时，即可终止发酵，提取辅酶Q10。
3、根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述发酵培养基在灭菌时还加入0.01％的消泡剂。
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Cited By (2)
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|---|---|---|---|---|
| CN101177670B (zh) * | 2007-08-16 | 2011-05-25 | 浙江工业大学 | 产辅酶q10新菌株-鞘氨醇单胞菌zute03及其应用 |
| CN102154182A (zh) * | 2011-03-02 | 2011-08-17 | 厦门金达威集团股份有限公司 | 一种辅酶q10生产的固料母种发酵培养的方法 |
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