CN1884548A

CN1884548A - Dna构建体以及其用途

Info

Publication number: CN1884548A
Application number: CN 200610087317
Authority: CN
Inventors: 谢旭亮; 文日升
Original assignee: XIE XULIANG WEN RISHENG
Current assignee: XIE XULIANG WEN RISHENG
Priority date: 2006-06-07
Filing date: 2006-06-07
Publication date: 2006-12-27

Abstract

本发明公开了一种DNA构建体以及其用途，包含一种可操作性地与核苷酸序列相连的第一特定启动子，其中该核苷酸序列编码选自SEQ IDNO：2、SEQ ID NO：4及其组合的氨基酸序列。该转基因植物以及植物组织中含有持续表达的高含量叶绿素。

Description

DNA构建体以及其用途

一、技术领域

本发明是关于一种能表达谷氨酰-tRNA合成酶(Glutamyl-tRNAsynthetase)的DNA建构体。此外，本发明是关于使用该DNA建构体生产转基因植物以及转基因植物组织的方法。

二、背景技术

叶绿素(Chlorophyll)是吸收阳光并且利用其能量将二氧化碳和水合成碳水化合物的物质。此过程便是公知的光合作用，并且其是维持所有植物生命的基础。由于动物以及人类通过食用植物而获得食物供给，因此光合作用也可说是我们生命的来源。通过经由光合作用的过程，植物可生产大量的必需元素，如葡萄糖、蔗糖、果糖以及纤维素。进一步，我们的皮肤以及消化系统可通过摄取含有叶绿素的食物而得到改善。

对于人类的研究发现，补充叶绿酸(Chlorophyllin)，一种叶绿素的衍生物，可将由黄曲霉毒素(Aflatoxin)所引起的DNA损伤降低至55％。研究也发现叶绿素具有抗发炎、抗氧化以及创伤复原的特性，进一步，其也可保护细胞，使细胞不会暴露于致癌物质、突变剂以及辐射线之下。

在地球上，有一半的人口以稻米为主食。在部分非洲以及亚洲的地区，许多穷人通过稻米获得日常生活中所需要的大部分热量。随着世界人口的增加，未来30年的稻米产量必须增加至少70％才足够。若稻米中的养分能增加，人们可能仅需食用稻米就可以变得更健康。通过基因工程增加稻米中养分的一个成功范例，便是公知的“黄金米”。1999年瑞士以及德国科学家宣布研发了一种基因工程改良的稻米，用以生产β-胡萝卜素，而人体可将β-胡萝卜素转化成维生素A。该新品种稻米很快地被宣告为针对维生素A缺乏症(Vitamin A deficiency，VAD)的一种奇迹似的对策。在发展中国家中，维生素A缺乏症已经造成数百万人民的困扰，特别是小孩以及孕妇。并且，严重的VAD可能造成患者部分或全盲；较轻微的VAD则会减弱免疫系统，增加受到感染，如麻疹以及疟疾的危险。患有VAD的女性似乎更容易在生产期间或生产后死亡。每年，估计约有35万名学龄前儿童因为患VAD而失明，并且VAD也造成超过百万人死亡。因此，“黄金米”的研发对于拯救患VAD的患者来说是非常重要的。

马铃薯是世界上第四重要的粮食作物，并且是最重要的蔬菜。在美国，几乎每个州皆种植马铃薯作为经济作物。此外，美国马铃薯的年产量已经超过1千8百万吨，而全世界的马铃薯年产量则约有3亿吨。马铃薯的普及主要是因为其用途广泛以及营养价值。马铃薯可以被使用，以新鲜的、冷冻的或是干燥的方式，或者可被加工成马铃薯粉、淀粉或酒精。其具有多种碳水化合物，并且富含钙、烟碱酸以及维生素C。进一步，虽然洋芋片以及薯条已经在许多报导中表示含有大量的有毒物质，丙烯酰胺，但是这些马铃薯的食品加工产品仍然非常受到欢迎。

鉴于叶绿素对人体健康的价值以及稻米、马铃薯等作物的普及，若能研发可持续表达高含量叶绿素的稻米以及马铃薯等作物是有其需求。此外，不喜欢吃蔬菜的儿童也可通过食用这些作物而获得叶绿素的补充。

三、发明内容

因此，本发明提供生产转基因植物以及转基因植物组织的方法，并且该转基因植物以及植物组织中含有持续表达的高含量叶绿素。特别地，本发明提供通过特定的DNA建构体生产转基因植物以及转基因植物组织的方法。

本发明目的之一是提供一种DNA建构体，其包含一种可操作性地与核苷酸序列连接的特定启动子，其中该核苷酸序列编码包含选自SEQ IDNO：2(细胞质型谷氨酰-tRNA合成酶)、SEQ ID NO：4(胞器型谷氨酰-tRNA合成酶)及其组合的氨基酸序列。

本发明的另一目的是提供一种植物细胞，该植物细胞包含一DNA建构体，其中该DNA建构体包含一种可操作性地与核苷酸序列连接的特定启动子，其中该核苷酸序列编码包含选自SEQ ID NO：2(细胞质型谷氨酰-tRNA合成酶)、SEQ ID NO：4(胞器型谷氨酰-tRNA合成酶)及其组合的氨基酸序列。

本发明的再一目的是提供一种转基因植物组织，该转基因植物组织包含一DNA建构体，其中该DNA建构体包含一种可操作性地与核苷酸序列连接的特定启动子，其中该核苷酸序列编码包含选自SEQ ID NO：2(细胞质型谷氨酰-tRNA合成酶)、SEQ ID NO：4(胞器型谷氨酰-tRNA合成酶)及其组合的氨基酸序列。

此外，本发明的另一个目的是提供一种生产转基因植物的方法。该方法包括：用DNA建构体转化植物细胞，该DNA建构体包含一种可操作性地与核苷酸序列连接的特定启动子，其中该核苷酸序列编码包含选自SEQ ID NO：2(细胞质型谷氨酰-tRNA合成酶)、SEQ ID NO：4(胞器型谷氨酰-tRNA合成酶)及其组合的氨基酸序列；以及从该转化的植物细胞产生完整的植物。

另外，本发明的另一个目的同样是提供一种生产转基因植物的方法。该方法包括：用DNA建构体转化植物组织，该DNA建构体包含一种可操作性地与核苷酸序列连接的特定启动子，其中该核苷酸序列编码包含选自SEQ I D NO：2(细胞质型谷氨酰-tRNA合成酶)、SEQ ID NO：4(胞器型谷氨酰-tRNA合成酶)及其组合的氨基酸序列；以及从该转化的植物组织产生完整的植物。

关于本发明的优点与精神可以通过以下的发明详述及附图得到进一步的了解。

四、附图说明

图1A-图1C是表示根据本发明的用于生产转基因水稻的DNA建构体。

图2A-图2C是表示根据本发明的用于生成转基因马铃薯的DNA建构体。

五、实施方式

以下将详述本发明的优选具体实施例以及实际应用案例，用以充分说明本发明的特征、精神及优点。

本发明提供一种特定的DNA建构体，其包含一特定的启动子以及一或多个特定基因。此外，该(多个)特定基因可帮助增加植物中的叶绿素含量。

首先，氨酰-tRNA合成酶(Aminoacyl-tRNA synthetase，ARS)在蛋白质合成反应中扮演着重要的角色，其通过催化氨基酸附加到同源tRNA以促进蛋白质合成。氨酰-tRNA合成的特性配合适当的tRNAs以及氨基酸致使基因信息能准确传播。植物中的蛋白质合成是在细胞质、粒线体以及叶绿体中进行，并且在上述各分区中，蛋白质合成不需要由各别细胞核基因所编码的全部独特氨酰-tRNA合成酶的参与。一般而言，植物的氨酰-tRNA合成酶可根据其基质被分为两个族群：细胞质型酶，其能最有效地氨酰化(Aminoacylate)植物或酵母菌的细胞质tRNAs；以及胞器型酶，其能氨酰化胞器或大肠杆菌(Escherichia coli)的tRNAs。

除了在蛋白质合成中扮演着重要的角色外，谷氨酰-tRNA合成酶，一种氨酰化-tRNA合成酶，也是与叶绿素合成有关的第一个酶。针对高等植物的相关研究已经报导，当胞器型谷氨酰-tRNA合成酶以及丝氨酰-tRNA合成酶(Seryl-tRNA synthetase)被去活性时，将导致叶绿体以及粒线体的发展停滞(Kim，Y.K.，et al.J.Biol.Chem.280：37098-37106 (2005))。此外，胞器型谷氨酰-tRNA合成酶以及丝氨酰-tRNA合成酶的去活性也导致叶绿素的含量减少。根据这些研究，显而易见地，谷氨酰-tRNA合成酶在叶绿素含量以及叶绿体的分化中扮演着重要的角色。

因此，本发明欲将该细胞质型谷氨酰-tRNA合成酵素和/或该胞器型谷氨酰-tRNA合成酶转移到植物以及植物组织，如水稻种子、小麦种子、大麦种子、玉米种子以及马铃薯块茎等。

在本发明的一个优选的具体实施例中，提供一种DNA建构体。该DNA建构体包含第一特定的启动子，其可操作性地与核苷酸序列连接，其中该核苷酸序列编码包含SEQ ID NO：2的氨基酸序列(细胞质型谷氨酰-tRNA合成酶)和/或SEQ ID NO：4的氨基酸序列(胞器型谷氨酰-tRNA合成酶)。

在本发明的一个具体实施例中，该DNA建构体进一步包含第二特定的启动子，如CaMV35S启动子。此外，在该实施例中，该DNA建构体也包含一种标记基因，如编码磷酸甘露糖异构酶(Phosphomannoseisomerase，PMI)的基因，可操作性地连接到该第二特定启动子上。因此，该第二特定的启动子可驱动该标记基因的表达。

参见图1A至图1C，图1A至图1C是表示根据本发明的供稻米转殖用的DNA建构体。在一具体的实施例中，第一特定的启动子是谷蛋白(glutelin)1启动子。此外，如图1A所示，DNA建构体也包含SEQ IDNO：1的核苷酸序列，其中核苷酸序列编码细胞质型谷氨酰-tRNA合成酶，并且核苷酸序列由第一特定的启动子驱动。DNA建构体也包含CaMV35S启动子，以及由CaMV35S启动子驱动的标记基因。

如图1B所示，在一具体的实施例中，第一特定的启动子同样是谷蛋白1启动子。并且，DNA建构体包含SEQ ID NO：3的核苷酸序列，其编码该胞器型谷氨酰-tRNA合成酶，并且核苷酸序列由第一特定的启动子驱动。该DNA建构体同样包含CaMV35S启动，以及由CaMV35S启动子驱动的标记基因。

进一步地，如图1C所示，在一具体的实施例中，DNA建构体可同时包含SEQ ID NO：1的核苷酸序列以及SEQ ID NO：3的核苷酸序列。在本发明的另一具体实施例中，第一特定的启动子可以是I型B33patatin启动子(图2A至图2C)。可利用图2A至图2C所示的DNA建构体转化马铃薯。应当注意的是，第一特定的启动子以及第二特定的启动子不限于上述的启动子，可以视情况需要而选择其它适当的启动子。

在本发明的另一个优选的具体实施例中，提供包含上述DNA建构体的植物细胞。进一步低，该植物细胞可以来自水稻、小麦、大麦、黑麦(Rye)、花生、谷物(Corn)、玉米(Maize)、马铃薯、甘薯、甜菜、萝卜、洋葱、大蒜、茄子、胡椒、胡萝卜、南瓜、小胡瓜(Zucchini)、黄瓜、苹果、梨、甜瓜、柑桔、草莓、葡萄、覆盆子(Raspberry)、菠萝、大豆、蕃茄、高梁以及甘蔗等植物。

在本发明的另一优选的具体实施例中，提供包含上述DNA建构体的转基因植物组织。在实际应用中，该植物组织可以是果实、茎、根、种子以及块茎等植物组织，如水稻种子、大麦种子、玉米种子以及马铃薯块茎。

此外，在本发明的一个优选的具体实施例中，提供生产转基因植物的方法，该方法包括二个主要步骤：

首先，用DNA建构体转化植物细胞，该DNA建构体包含一种可操作性地与核苷酸序列连接的特定启动子，其中该核苷酸序列编码包含选自SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：4及其组合的氨基酸序列；接着从该转化的植物细胞产生完整的植物。

在一个具体的实施例中，该方法可进一步包括从该完整植物或繁殖的完整植物中收获植物组织，如，果实、茎、根、种子以及块茎的步骤。在实际应用中，该植物可以是，但不限于水稻、小麦、大麦、黑麦、花生、谷物、玉米、马铃薯、甘薯、甜菜、萝卜、洋葱、大蒜、茄子、胡椒、胡萝卜、南瓜、小胡瓜、黄瓜、苹果、梨、甜瓜、柑桔、草莓、葡萄、覆盆子、菠萝、大豆、蕃茄、高梁以及甘蔗等。

此外，在本发明的另一个优选的具体实施例中同样提供一种生产转基因植物的方法，该方法包括下列步骤：

首先，用DNA建构体转化植物组织，该DNA建构体包含一种可操作性地与核苷酸序列连接的特定启动子，其中该核苷酸序列编码包含选自SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：4及其组合的氨基酸序列；接着从该转化的植物细胞产生完整的植物。

在实际应用中，该植物同样可以是，但不限于水稻、小麦、大麦、黑麦、花生、谷物、玉米、马铃薯、甘薯、甜菜、萝卜、洋葱、大蒜、茄子、胡椒、胡萝卜、南瓜、小胡瓜、黄瓜、苹果、梨、甜瓜、柑桔、草莓、葡萄、覆盆子、菠萝、大豆、蕃茄、高梁以及甘蔗。并且，在实际应用中，该植物组织可以是，但不限于果实、茎、根、种子以及块茎，如水稻种子、大麦种子、小麦种子以及马铃薯块茎。

在一个具体的实施例中，该方法可进一步包括从该完整植物或繁殖的完整植物中收获一特定的植物组织，如，果实、茎、根、种子以及块茎的步骤。

关于上述的方法将在以下几个实施例中进行更详细的阐述。应当注意的是，在实施例1中描述DNA建构体的构建；在实施例2中描述水稻的转基因；在实施例3中描述马铃薯的转基因。

具体实施例

实施例1

DNA建构体的构建：

分别自拟南芥(Arabidopsis thaliana)中分离出2760bp的DNA片段(SEQ ID NO：1)，该片段编码细胞质型谷氨酰-tRNA合成酶(SEQ ID NO：2)；以及2055bp的DNA片段(SEQ ID NO：3)，该片段编码胞器型谷氨酰-tRNA合成酶(SEQ ID NO：4)。(SEQ ID NO：1-4的具体序列见序列表)

拟南芥GluRS(谷氨酰-tRNA合成酶)基因选择：GluRS是合成叶绿素的第一个基因，拟南芥有细胞质型和胞器型两种形式，利用拟南芥mRNA反转录的cDNA当模板(反转录的具体过程为：在微量离心管中，加入阿拉伯芥total RNA 1μg、500μg/ml oligo(dT)1μl、10mM dNTPmix 1μl，用水补到12μl，65℃处理5分钟，然后冰入冰块中。再加入5μl缓冲液、2μl 0.1M DTT、1μl RNase inhibitor及1μl(200U)反转录酵素，42℃处理50分钟，即得到阿拉伯芥cDNA)，利用AtGluRScF(5’-gc tctagaatggatgggatgaagct t-3’(含XbaI切位))与AtGluRScR(5’-tcc cccgggtgagttagcggctcttcc-3’(含SmaI切位))、或AtGluRSoF(5’-gc tctagaatggcgagccttgtctac-3’(含XbaI切位))与AtGluRSoR(5’-tcc cccgggtcaggttgatactgtggc-3’(含SmaI切位))做引物，以PCR方式复制拟南芥GluRS基因，细胞质型GluRS全长2160bp(具体序列见序列表)，胞器型GluRS全长1713bp(具体序列见序列表)。(两个PCR反应的具体反应条件为：利用上述的cDNA当模板，利用AtGluRScF与AtGluRScR或AtGluRSoF与AtGluRSoR当引子，35次PCR循环中，72℃反应时间2分10秒或1分45秒，其他PCR条件同下列质粒构建项目1所述，即得阿拉伯芥GluRS基因。)

质粒构建：

1.pCambia1390-PMI：以XhoI将pCambia1390载体(可以是市售)上的潮霉素抗性基因切除，换上PMI基因(基因的来源为：抽取大肠杆菌genomic DNA，利用PMI5’390引子5’- ccatggtcatgcaaaaactcattaac-3’(含NcoI切位)与PMI3’1574引子5'-taagctcttacagcttgttg-3’，以PCR方式复制大肠杆菌PMI基因全共1176bp，以TA cloning插入pPICT-1质体，定序确定序列无错误。PCR条件如下：在薄壁微量离心管中，加入最浓度dNTP 0.2mM、Mg²⁺2mM、正反引子各0.2μM、Taq DNApolymerase 1U、1倍PCR反应缓冲液、大肠杆菌genomic DNA当模版，用菌水补至总体积50μl，整个管子先94℃处理5分钟，再做94℃ 30秒、52℃ 30秒、72℃ 70秒共35次循环，最后72℃ 8分钟结束，跑0.8％ agarose电泳确定大小无误。利用限制酵素酶XhoI将PMI基因片段从pPICT-1质体中切出，然后接入pCambia1390中的XhoI site，以取代原先该位置上的抗生素基因)。

2.pBluescript II SK(pBS)中的基因盒：将大小约0.3kb NOS终止子以BamHI/EcoRI从pPZPY122载体中切下，接入pBS中；将水稻glutelin 1基因启动子从TA cloning pPICT-1质体以NotI/XbaI切下，接入pBS中；拟南芥GluRS基因从TA cloning pPICT-1质体以XbaI/SmaI切下，接入pBS中，此质粒即分含有GluRS启动子、基因与终止子。3.以NotI/ApaI切下pBS质粒整个基因盒，用Klenow酶补平；用SmaI切pCambia1390-PMI，两者进行连接反应，即可得到可将拟南芥细胞质型与胞器型GluRS基因大量表达的转基因质粒。

4.以NotI/ApaI切下pBS质粒含有整个细胞质型GluRS基因盒，用Klenow酶补平；用PmlI切已接入胞器型GluRS的pCambia1390-PMI质粒，两者进行连接反应，即可得到可同时表达拟南芥细胞质型与胞器型GluRS的转基因质粒。

请参阅图1以及图2，以了解于此所建立的DNA建构体的部分实例。这些DNA建构体包含上述的DNA片段中的至少一DNA片段。这些DNA建构体并且进一步包含至少一第一特定启动子，如glutelin 1启动子以及class I B33 patatin启动子，以及一第二特定启动子，如CaMV35S启动子。并且，这些DNA建构体可包含一标记基因，如一磷酸甘露糖异构酶基因。此外，这些DNA建构体以农杆菌(Agrobacterium)为媒介分别传递进入稻米或马铃薯的基因组，分别如实施例2以及实施例3所描述。

实施例2

转基因水稻

发芽：将约50粒台农67号的水稻种子(市售产品)，以30％的漂白溶液(次氯酸钠)消毒7分钟，用灭菌水洗涤后，将经过消毒的水稻种子散布于MS培养基(MS+维生素为基础培养基；30g/L的蔗糖；0.7％的洋菜；pH 5.8)上。在黑暗中使上述的水稻种子在30℃生长约3-5天。

愈合组织的诱导：将发芽的水稻种子转移至CIM培养基(N6+维生素为基础培养基；0.3g/L酪蛋白氨基酸(Casamino acid)；2.8g/L raline；2mg/L 2，4-D；100mg/L肌醇；30g/L蔗糖；0.7％洋菜；pH 5.7)，进行愈合组织的诱导，接着在30℃持续光照培养，每隔2周进行传代培养(Subculture)。

感染：1周后，用含有上述DNA建构体的农杆菌GV3101(指的是图1A、1B与1C的DNA建构体)悬浮液感染传代培养的愈合组织细胞。将农杆菌悬浮液用AAM培养液稀释至OD_600nm＝0.6-0.8，并将该农杆菌悬浮液倾注至含有愈合组织细胞的培养皿，培养15分钟。其中AAM培养溶的配方为：CaCl₂·2H₂O 440mg/L、MgSO₄·7H₂O 370mg/L、KH₂PO₄ 170mg/L、Fe-EDTA 37.5mg/L、H₃BO₃ 6.2mg/L、MnSO₄·4H₂O 22.3mg/L、ZnSO₄·7H₂O 8.6mg/L、KI 0.83mg/L、Na₂MoO₄·2H₂O 0.25mg/L、CuSO₄·5H₂O0.025mg/L、CoCl₂·6H₂O 0.02mg/L；维生素(盐酸胸腺嘧啶1mg/L、盐酸吡哆醇1mg/L、烟碱酸10mg/L)；氨基酸(甘氨酸75mg/L、L-谷氨酰胺877mg/L、L-天门冬氨酸266mg/L、L-精氨酸228mg/L)；蔗糖68.5g/L、酪蛋白氨基酸500mg/L、葡萄糖36g/L、乙酰丁香酮(Acetosyringone)100μM；pH 5.2)。

共培养：将接种的愈合组织细胞取出并以吸水纸移除过剩的农杆菌，接着将愈合组织细胞在2N6I-AS培养基(N6+维生素为基础的培养基；酪蛋白胺基酸1g/L；2，4-D 2mg/L；菜豆醣100mg/L；乙酰丁香酮100M；30g/L的蔗糖；葡萄糖10g/L；洋菜0.7％；pH 5.2)上，在28℃在黑暗中培养3天。

筛选：在共培养后，用AA2培养液洗涤愈合组织细胞30分钟，重复该洗涤步骤2次，并且移除过剩的培养溶液，其中AA2培养液的配方为：CaCl₂·2H₂O 440mg/L、MgSO₄·7H₂O 370mg/L、KH₂PO₄ 170mg/L、Fe-EDTA37.5mg/L、H₃BO₃ 6.2mg/L、MnSO₄·4H₂O 22.3mg/L、ZnSO₄·7H₂O 8.6mg/L、KI 0.83mg/L、Na₂MoO₄·2H₂O 0.25mg/L、CuSO₄·5H₂O 0.025mg/L、CoCl₂·6H₂O0.02mg/L；维生素(盐酸胸腺嘧啶1mg/L、盐酸吡哆醇1mg/L、烟碱酸10mg/L)；氨基酸(甘氨酸75mg/L、L-谷氨酰胺877mg/L、L-天门冬氨酸266mg/L、L-精氨酸228mg/L；蔗糖30g/L、2，4-D 2mg/L；pH 5.7)。接着将愈合组织细胞转移到筛选培养基2N6I-CH(N6+维生素为基础的培养基；酪蛋白胺基酸1g/L；2，4-D 2mg/L；菜豆醣100mg/L；蔗糖30g/L；0.7％洋菜；pH 5.2)上，在30℃持续光照的环境下进行筛选。

再生：将小于3mm的新生愈合组织转移至筛选培养基RM中，在26.5℃持续光照条件下继续培养，其中RM培养基的配方是：KH₂PO₄ 400mg/L；KNO₃ 2830mg/L；(NH₄)₂SO₄ 463mg/L；MgSO₄·7H₂O 185mg/L；CaCl₂·2H₂O 166mg/L；FeSO₄·7H₂O 27.85mg/L；Na-EDTA 37.25mg/L；ZnSO₄·7H₂O 1.8mg/L；MnSO₄·4H₂O 2.5mg/L；H₃BO₃ 1.6mg/L；KI 0.83mg/L；N6维生素(商品化的化学制剂，包含甘氨酸、烟酸、盐酸吡哆醇、盐酸硫胺素)；NAA 0.5mg/L；细胞分裂素5mg/L；蔗糖30g/L；葡萄糖5g/L；菜豆醣100mg/L；0.7％洋菜；pH 5.7)。

生根诱导：将3-5厘米的幼芽转移至筛选培养基MS+2，4-D，进一步培养至10-15厘米，并将其转移至土壤中，使其进一步生长。

实施例3

转基因马铃薯

幼苗消毒：将马铃薯块根以30％的漂白溶液(次氯酸钠)消毒，并且以灭菌水洗涤后，将其在MS培养基中培养，使其发芽。

预培养：使用消毒后幼苗的幼叶进行预培养。将幼叶剪成5mm宽度的片段，将带有幼叶上表面的片段转移至HH培养基(MS+维生素为基础的培养基；3％蔗糖；NAA 10mg/L；玉米素核苷10mg/L；0.7％洋菜；pH 5.6-5.8)中进行预培养，接着在20-22℃，光照周期为16小时光照/8小时黑暗，光强度为60μE/m²s下培养。

感染：用COD培养液(MS+维生素为基础的培养基；3％的蔗糖；200μM的乙酰丁香酮)将含有上述DNA建构体的农杆菌细胞悬浮液稀释至OD_600nm＝0.6-0.8，将稀释后的农杆菌细胞悬浮液与上述预培养幼叶片段共同培养10分钟。

共培养：将感染后带有幼叶上表面的片段转移至LSR1培养基(含有乙酰丁香酮200μM；MS+维生素为基础之培养基；3％蔗糖；NAA 0.2mg/L；玉米素核苷2mg/L；GA₃ 0.02mg/L；0.7％洋菜；pH 5.6-5.8)中，在20-22℃，光照周期为16小时光照/8小时黑暗，光强度为60μE/m²s的条件下共同培养。

愈合组织诱导：将上述共同培养的幼叶片段转移至LSR1T筛选培养基(LSR1培养基+200mg/L Timentin)，在20-22℃，光照周期为16小时光照/8小时黑暗，光强度为100μE/m²s的条件下培养。

再生诱导：将带有包含上述DNA建构体的愈合组织的幼叶片段转移至LSR2培养基(MS+维生素为基础的培养基；3％蔗糖；玉米素核苷2mg/L；GA₃ 0.02mg/L；0.7％洋菜；pH 5.6-5.8)上，供外殖体诱导，每2周更换新鲜培养基。当外殖体生长到1-2厘米时，将外殖体转移至CM培养基(MS+维生素为基础的培养基；2％蔗糖；0.7％洋菜；pH 5.6-5.8)，该培养基也可包含乙烯基抑制剂(1mg/L硫代硫酸银)，以抑制过度发芽。

生根诱导：将幼芽转移至RT培养基(MS+维生素为基础的培养基；2.5％蔗糖；0.2mg/L吲哚乙酸；0.7％洋菜；pH 5.6-5.8)上，进行生根诱导。

以上优选具体实施例的详述，是希望能更加清楚描述本发明的特征与精神，而并非用上述所公开的优选具体实施例来对本发明的范围加以限制。相反地，其目的是希望能在本发明所申请的权利要求的范畴内涵盖各种改变及具相等性的安排。

初步实验结果：

水稻与马铃薯的转植正在进行中，第一期计获得10个水稻转植品系与15个马铃薯转植品系，经PCR分析发现有6水稻转植品系具有转植基因的表现，而马铃薯则有10个转植品系具有转植基因的表现。

序列表

<160>NUMBER OF SEQ ID NOS：4

<210>SEQ ID NO 1

<211>LENGTH：2760

<212>TYPE：DNA

<213>ORGANISM：Arabidopsis thaliana

<400>SEQUENCE：1

agggttctgt ttctcgtctc tctctcaaac ccacattgca caatccattt ctcgtttctc 60

tgatttagat ccaaagatgg atgggatgaa gctttcgttc ccaccggaaa gtccaccact 120

ttcagtcatc gttgctcttt ctctctcagc ttctccggtg acgattgatt cttccgccgc 180

tgcaacaacc gtcccttctt ttgtcttctc cgacgggagg aaattgaatg gagccaccgt 240

tcttcttcgc tatgttggtc gatcagcgaa aaagcttcct gatttctatg gcaacaatgc 300

ttttgattct tctcagattg atgagtgggt agattacgca tctgtcttct cttctggttc 360

agagtttgag aatgcttgtg gtcgtgttga taagtatctc gagagtagca cgtttcttgt 420

tggccattct ctttccattg ctgatgtcgc tatttggtca gctcttgctg gaactggtca 480

aagatgggaa agtttgagga aatctaaaaa gtatcagagt cttgttagat ggttcaattc 540

gatattagac gagtacagtg aggtgcttaa caaggttcta gcaacttatg ttaagaaagg 600

atcagggaag cctgttgctg cacctaagtc taaagatagc caacaagctg tgaaaggaga 660

tggtcaggat aaaggtaagc ctgaagtgga cttgccggaa gcggagattg gaaaggttaa 720

actccggttt gctccagagc caagtggtta tcttcacata ggacatgcta aggctgcgtt 780

gctgaacaag tatttcgctg agcgttacca aggggaagtg attgtgcgtt ttgatgatac 840

taaccctgct aaagaaagca atgagtttgt ggataatctt gtgaaggata ttgggacctt 900

ggggatcaag tatgagaaag tgacatacac ttcggactat tttcctgaat tgatggatat 960

ggcggaaaaa ctgatgcgtg agggtaaggc atatgttgat gacacaccga gggagcagat 1020

gcagaaagag aggatggatg ggattgattc gaaatgtagg aatcatagcg tcgaggagaa 1080

tttgaagcta tggaaggaaa tgattgcagg aagtgagaga ggattacagt gctgtgttcg 1140

tgggaaattc aacatgcaag atcccaacaa agccatgcgt gacccggttt attaccgatg 1200

caatcctatg tctcaccacc gtatcgggga taagtataag atatatccaa catatgactt 1260

tgcttgcccg tttgttgatt cccttgaagg tataacgcat gctcttcggt ctagtgagta 1320

tcatgaccga aatgctcagt actttaaagt tctggaggat atgggactgc gacaggttca 1380

gctttacgaa ttcagccggt taaacctagt ttttacactt ctcagtaagc gcaagcttct 1440

ctggtttgtc caaactggat tggttgacgg gtgggatgat ccacgtttcc cgacagtcca 1500

aggaattgtt cgtagaggtt tgaaaatcga ggctctgatt caattcattc tcgagcaggg 1560

ggcttcgaag aatctaaatt tgatggaatg ggacaaactt tggtctataa ataagagaat 1620

aattgatcct gtgtgcccta gacacactgc tgtggttgca gaacgtcgtg tactatttac 1680

cttaacggat ggtcctgatg agccgtttgt tcgcatgata ccaaagcaca agaaattcga 1740

aggtgctgga gaaaaggcga ccactttcac taagagcatt tggctcgagg aagctgatgc 1800

gagtgccata tccgttggtg aggaagtaac tttgatggat tggggaaatg ctatcgtaaa 1860

ggaaatcaca aaggacgagg agggtcgtgt cactgcctta tctggtgtct tgaatctcca 1920

aggttctgta aagactacaa agctgaagct gacatggctt cctgatacta atgaattggt 1980

caatctcaca ttaacagagt ttgattatct aatcaccaag aagaagctgg aagatgatga 2040

tgaagttgct gattttgtga atcctaacac aaagaaggaa acattggcac ttggtgattc 2100

gaatatgagg aatctgaaat gtggagatgt gattcagctt gagaggaaag gctatttcag 2160

atgtgatgtg ccttttgtca aatcttcaaa gcccattgtc ttattctcca ttccagatgg 2220

aagagccgct aagtgatcaa tgaactattt ttgagtttcc cattttatga acattgtgtt 2280

gagaaatttg ctctttaggt tttaaaacaa tgaaaacaaa gctttttatc agttctttag 2340

tttcatctca taatagtttt aaagttgcaa actttatatt gattcattct tctttgctta 2400

gtgtttacaa tataaacaaa aacaaactca tttcttgggt gcgtatctca gtttgatctt 2460

cttaacctgt ttgtgtttga gctggaatga cttggccaga atgtcatcgg gaagagctcc 2520

aaagagagag gcgacaagtg attgtgttcc gggcaattgg ctatcgaagg ctgcgagtac 2580

agatgctgga ctgttggcaa tgttcttctg gaaatggatg agtcccttgg ggaaggtgaa 2640

aacgtctccc ttgttaaggt tcttggcgat gagttttcca gcggttgtta caaagccaac 2700

atagagctga ccttcaagga cgaaaatgat ctcggaggca cgtgggtgga catggggtgg 2760

<210>SEQ ID NO 2

<211>LENGTH：719

<212>TYPE：PRT

<213>ORGANISM：Arabidopsis thaliana

<400>SEQUENCE：2

Met Asp Gly Met Lys Leu Ser Phe Pro Pro Glu Ser Pro Pro Leu Ser

1 5 10 15

Val Ile Val Ala Leu Ser Leu Ser Ala Ser Pro Val Thr Ile Asp Ser

20 25 30

Ser Ala Ala Ala Thr Thr Val Pro Ser Phe Val Phe Ser Asp Gly Arg

35 40 45

Lys Leu Asn Gly Ala Thr Val Leu Leu Arg Tyr Val Gly Arg Ser Ala

50 55 60

Lys Lys Leu Pro Asp Phe Tyr Gly Asn Asn Ala Phe Asp Ser Ser Gln

65 70 75 80

Ile Asp Glu Trp Val Asp Tyr Ala Ser Val Phe Ser Ser Gly Ser Glu

85 90 95

Phe Glu Asn Ala Cys Gly Arg Val Asp Lys Tyr Leu Glu Ser Ser Thr

100 105 110

Phe Leu Val Gly His Ser Leu Ser Ile Ala Asp Val Ala Ile Trp Ser

115 120 125

Ala Leu Ala Gly Thr Gly Gln Arg Trp Glu Ser Leu Arg Lys Ser Lys

130 135 140

Lys Tyr Gln Ser Leu Val Arg Trp Phe Asr Ser Ile Leu Asp Glu Tyr

145 150 155 160

Ser Glu Val Leu Asn Lys Val Leu Ala Thr Tyr Val Lys Lys Gly Ser

165 170 175

Gly Lys Pro Val Ala Ala Pro Lys Ser Lys Asp Ser Gln Gln Ala Val

180 185 190

Lys Gly Asp Gly Gln Asp Lys Gly Lys Pro Glu Val Asp Leu Pro Glu

195 200 205

Ala Glu Ile Gly Lys Val Lys Leu Arg Phe Ala Pro Glu Pro Ser Gly

210 215 220

Tyr Leu His Ile Gly His Ala Lys Ala Ala Leu Leu Asn Lys Tyr Phe

225 230 235 240

Ala Glu Arg Tyr Gln Gly Glu Val Ile Val Arg Phe Asp Asp Thr Asn

245 250 255

Pro Ala Lys Glu Ser Asn Glu Phe Val Asp Asn Leu Val Lys Asp Ile

260 265 270

Gly Thr Leu Gly Ile Lys Tyr Glu Lys Val Thr Tyr Thr Ser Asp Tyr

275 280 285

Phe Pro Glu Leu Met Asp Met Ala Glu Lys Leu Met Arg Glu Gly Lys

290 295 300

Ala Tyr Val Asp Asp Thr Pro Arg Glu Gln Met Gln Lys Glu Arg Met

305 310 315 320

Asp Gly Ile Asp Ser Lys Cys Arg Asn His Ser Val Glu Glu Asn Leu

325 330 335

Lys Leu Trp Lys Glu Met Ile Ala Gly Ser Glu Arg Gly Leu Gln Cys

340 345 350

Cys Val Arg Gly Lys Phe Asn Met Gln Asp Pro Asn Lys Ala Met Arg

355 360 365

Asp Pro Val Tyr Tyr Arg Cys Asn Pro Met Ser His His Arg Ile Gly

370 375 380

Asp Lys Tyr Lys Ile Tyr Pro Thr Tyr Asp Phe Ala Cys Pro Phe Val

385 390 395 400

Asp Ser Leu Glu Gly Ile Thr His Ala Leu Arg Ser Ser Glu Tyr His

405 410 415

Asp Arg Asn Ala Gln Tyr Phe Lys Val Leu Glu Asp Met Gly Leu Arg

420 425 430

Gln Val Gln Leu Tyr Glu Phe Ser Arg Leu Asn Leu Val Phe Thr Leu

435 440 445

Leu Ser Lys Arg Lys Leu Leu Trp Phe Val Gln Thr Gly Leu Val Asp

450 455 460

Gly Trp Asp Asp Pro Arg Phe Pro Thr Val Gln Gly Ile Val Arg Arg

465 470 475 480

Gly Leu Lys Ile Glu Ala Leu Ile Gln Phe Ile Leu Glu Gln Gly Ala

485 490 495

Ser Lys Asn Leu Asn Leu Met Glu Trp Asp Lys Leu Trp Ser Ile Asn

500 505 510

Lys Arg Ile Ile Asp Pro Val Cys Pro Arg His Thr Ala Val Val Ala

515 520 525

Glu Arg Arg Val Leu Phe Thr Leu Thr Asp Gly Pro Asp Glu Pro Phe

530 535 540

Val Arg Met Ile Pro Lys His Lys Lys Phe Glu Gly Ala Gly Glu Lys

545 550 555 560

Ala Thr Thr Phe Thr Lys Ser Ile Trp Leu Glu Glu Ala Asp Ala Ser

565 570 575

Ala Ile Ser Val Gly Glu Glu Val Thr Leu Met Asp Trp Gly Asn Ala

580 585 590

Ile Val Lys Glu Ile Thr Lys Asp Glu Glu Gly Arg Val Thr Ala Leu

595 600 605

Ser Gly Val Leu Asn Leu Gln Gly Ser Val Lys Thr Thr Lys Leu Lys

610 615 620

Leu Thr Trp Leu Pro Asp Thr Asn Glu Leu Val Asn Leu Thr Leu Thr

625 630 635 640

Glu Phe Asp Tyr Leu Ile Thr Lys Lys Lys Leu Glu Asp Asp Asp Glu

645 650 655

Val Ala Asp Phe Val Asn Pro Asn Thr Lys Lys Glu Thr Leu Ala Leu

660 665 670

Gly Asp Ser Asn Met Arg Asn Leu Lys Cys Gly Asp Val Ile Gln Leu

675 680 685

Glu Arg Lys Gly Tyr Phe Arg Cys Asp Val Pro Phe Val Lys Ser Ser

690 695 700

Lys Pro Ile Val Leu Phe Ser Ile Pro Asp Gly Arg Ala Ala Lys

705 710 715

<210>SEQ ID NO 3

<211>LENGTH：2055

<212>TYPE：DNA

<213>ORGANISM：Arabidopsis thaliaha

<400>SEQUENCE：3

agttatgagg ctttaatcga atttgttgct ttgctttgcg actttcatct ttccgattaa 60

tcaaatcctt ttatcctctg aaaaatctca actttcgaag aaaacgaaaa tggcgagcct 120

tgtctacggg acgccgtggc ttagggttag atctttaccg gagcttgctc cagcttttct 180

cagacggcgt caatcttctt tattttactg ttctcggcga agcttcgcgg tggttgcgtg 240

ttccactcca gtcaacaatg gtgggtctgt cagagttcgt ttcgcgcctt ctcctactgg 300

taatctccat gtaggtggag caaggactgc tcttttcaac tacttgttcg cgaggtctaa 360

aggagggaaa tttgtgctga gaattgaaga tacagatttg gagagatcaa cacgtgaatc 420

tgaagcagct gttcttcagg atctctcatg gcttggtctt gattgggatg aaggtcctgg 480

ggttagtgga gactttggtc cttatcggca atctgaaaga aatgctttgt ataaacaata 540

tgcagagaag cttttagagt caggtcatgt ctatcgatgc ttttgctcaa gtgaggaact 600

tgtaaagatg aaggagaatg caaagttgaa acagttgcct ccagtatata ccgggaaatg 660

ggcaacagct tctgatgctg aaatagagca agagttagaa aagggaacac cttttactta 720

ccggtttcgt gtgccaaagg aaggctcttt gaaaattaat gacctgattc gtggcgaggt 780

ctgttggaac ttggatactc ttggggattt tgtggtaatg agaagtaatg gccaacccgt 840

ttacaacttt tgtgttacgg tagatgatgc taccatggct atatcacatg ttataagggc 900

tgaagaacac ttgcctaata ctttgaggca ggctctaatt tacaaggctc ttaagttccc 960

gatgcctcaa tttgcacatg tttctttaat tttagctccg gatagaagta aattatcaaa 1020

gcgacatggg gcaacttctg taggccagta cagagagatg ggatatctac ctcagggaat 1080

ggttaactat ttggcactct taggttgggg agacgggact gaaaatgaat tcttcacact 1140

cgaggatctt gttgaaaaat tctcgattga acgtgtcaac aaaagtggcg cgatttttga 1200

ttcaacaaag ttaagatgga tgaatggtca acatctgagg gcacttccaa atgagaaact 1260

aacaaaactt gttggtgagc gatggaagag cgctggtatc ttaacagaat ccgaggggag 1320

ttttgtaaat gaagctgtcg agcttctcaa ggatgggatt gagttggtga cagattcaga 1380

caaagtactt ttgaacttgc tttcatatcc tctacacgct acattggcta gccctgaagc 1440

taagcctgct gtggaagaca aacttcatga agtagcagcc agcctcatag ctgcttatga 1500

cagcggagag attccaagcg ctttagaaga aggacaaggt gcttggcaga aatgggtgaa 1560

agcctttggc aaatccttga aacgcaaagg taaatcactt ttcatgccac tacgagtgtt 1620

gttaacggga aaactccatg gtcctgagat gggcaccagt attgttctga tttacaaagc 1680

tggaagtcct ggtatagtgg ttcctcaagc tgggtttgtg tccatggagg aacggtttaa 1740

gattcttagg gagatagact gggaagcttt gaacaaagat gagagtgtgc ctcttgaatc 1800

tacagccaca gtatcaacct gagaaaactc cccttttttt tttttttttt ttttccttca 1860

atatttggtt agttggtgag agaaagacag cccagagatt ttgattcctc gtgcatttct 1920

tgtttcccga aacaaatggc acaaagaaat ttgtagatta taatgtatca gcaaagcaaa 1980

cttaggaaca aaccagagag cttgtaacat tatcaggcca gttttaattt gctttcaatg 2040

ctctgttttc ttaac 2055

<210>SEQIDNO4

<211>LENGTH：570

<212>TYPE：PRT

<213>ORGANISM：Arabidopsis thaliana

<400>SEQUENCE：4

Met Ala Ser Leu Val Tyr Gly Thr Pro Trp Leu Arg Val Arg Ser Leu

1 5 10 15

Pro Glu Leu Ala Pro Ala Phe Leu Arg Arg Arg Gln Ser Ser Leu Phe

20 25 30

Tyr Cys Ser Arg Arg Ser Phe Ala Val Val Ala Cys Ser Thr Pro Val

35 40 45

Asn Asn Gly Gly Ser Val Arg Val Arg Phe Ala Pro Ser Pro Thr Gly

50 55 60

Asn Leu His Val Gly Gly Ala Arg Thr Ala Leu Phe Asn Tyr Leu Phe

65 70 75 80

Ala Arg Ser Lys Gly Gly Lys Phe Val Leu Arg Ile Glu Asp Thr Asp

85 90 95

Leu Glu Arg Ser Thr Arg Glu Ser Glu Ala Ala Val Leu Gln Asp Leu

100 105 110

Ser Trp Leu Gly Leu Asp Trp Asp Glu Gly Pro Gly Val Ser Gly Asp

115 120 125

Phe Gly Pro Tyr Arg Gln Ser Glu Arg Asn Ala Leu Tyr Lys Gln Tyr

130 135 140

Ala Glu Lys Leu Leu Glu Ser Gly His Val Tyr Arg Cys Phe Cys Ser

145 150 155 160

Ser Glu Glu Leu Val Lys Met Lys Glu Asn Ala Lys Leu Lys Gln Leu

165 170 175

Pro Pro Val Tyr Thr Gly Lys Trp Ala Thr Ala Ser Asp Ala Glu Ile

180 185 190

Glu Gln Glu Leu Glu Lys Gly Thr Pro Phe Thr Tyr Arg Phe Arg Val

195 200 205

Pro Lys Glu Gly Ser Leu Lys Ile Asn Asp Leu Ile Arg Gly Glu Val

210 215 220

Cys Trp Asn Leu Asp Thr Leu Gly Asp Phe Val Val Met Arg Ser Asn

225 230 235 240

Gly Gln Pro Val Tyr Asn Phe Cys Val Thr Val Asp Asp Ala Thr Met

245 250 255

Ala Ile Ser His Val Ile Arg Ala Glu Glu His Leu Pro Asn Thr Leu

260 265 270

Arg Gln Ala Leu Ile Tyr Lys Ala Leu Lys Phe Pro Met Pro Gln Phe

275 280 285

Ala His Val Ser Leu Ile Leu Ala Pro Asp Arg Ser Lys Leu Ser Lys

290 295 300

Arg His Gly Ala Thr Ser Val Gly Gln Tyr Arg Glu Met Gly Tyr Leu

305 310 315 320

Pro Gln Gly Met Val Asn Tyr Leu Ala Leu Leu Gly Trp Gly Asp Gly

325 330 335

Thr Glu Asn Glu Phe Phe Thr Leu Glu Asp Leu Val Glu Lys Phe Ser

340 345 350

Ile Glu Arg Val Asn Lys Ser Gly Ala Ile Phe Asp Ser Thr Lys Leu

355 360 365

Arg Trp Met Asn Gly Gln His Leu Arg Ala Leu Pro Asn Glu Lys Leu

370 375 380

Thr Lys Leu Val Gly Glu Arg Trp Lys Ser Ala Gly Ile Leu Thr Glu

385 390 395 400

Ser Glu Gly Ser Phe Val Asn Glu Ala Val Glu Leu Leu Lys Asp Gly

405 410 415

Ile Glu Leu Val Thr Asp Ser Asp Lys Val Leu Leu Asn Leu Leu Ser

420 425 430

Tyr Pro Leu His Ala Thr Leu Ala Ser Pro Glu Ala Lys Pro Ala Val

435 440 445

Glu Asp Lys Leu His Glu Val Ala Ala Ser Leu Ile Ala Ala Tyr Asp

450 455 460

Ser Gly Glu Ile Pro Ser Ala Leu Glu Glu Gly Gln Gly Ala Trp Gln

465 470 475 480

Lys Trp Val Lys Ala Phe Gly Lys Ser Leu Lys Arg Lys Gly Lys Ser

485 490 495

Leu Phe Met Pro Leu Arg Val Leu Leu Thr Gly Lys Leu His Gly Pro

500 505 510

Glu Met Gly Thr Ser Ile Val Leu Ile Tyr Lys Ala Gly Ser Pro Gly

515 520 525

Ile Val Val Pro Gln Ala Gly Phe Val Ser Met Glu Glu Arg Phe Lys

530 535 540

Ile Leu Arg Glu Ile Asp Trp Glu Ala Leu Asn Lys Asp Glu Ser Val

545 550 555 560

Pro Leu Glu Ser Thr Ala Thr Val Ser Thr

565 570

Claims

1、一种DNA建构体，其包含一种可操作性地与核苷酸序列相连的第一特定启动子，其中该核苷酸序列编码选自SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：4及其组合的氨基酸序列。

2、权利要求1所述的DNA建构体，进一步包含第二特定的启动子。

3、权利要求2所述的DNA建构体，其中该第二特定的启动子是CaMV35S启动子。

4、权利要求3所述的DNA建构体，进一步包含一种标记基因，该标记基因是可操作性地与第二特定的启动子相连。

5、权利要求4所述的DNA建构体，其中该标记基因编码磷酸甘露糖异构酶。

6、如权利要求1所述的DNA建构体，其中第一特定的启动子是谷蛋白1启动子。

7、权利要求1所述的DNA建构体，其中第一特定的启动子是I型B33patatin启动子。

8、一种植物细胞，包含一DNA建构体，该DNA建构体包含一种可操作性与核苷酸序列相连的特定启动子，其中该核苷酸序列编码选自SEQ IDNO：2、SEQ ID NO：4及其组合的氨基酸序列。

9、权利要求8所述的植物细胞，其中该植物选自水稻、小麦、大麦、黑麦、花生、谷物、玉米、马铃薯、甘薯、甜菜、萝卜、洋葱、大蒜、茄子、胡椒、胡萝卜、南瓜、小胡瓜、黄瓜、苹果、梨、甜瓜、柑桔、草莓、葡萄、覆盆子、菠萝、大豆、蕃茄、高梁以及甘蔗。

10、权利要求9所述的植物细胞，其中该植物是水稻。

11、权利要求9所述的植物细胞，其中该植物是马铃薯。

12、一种转基因植物组织，其包含一DNA建构体，该DNA建构体包含一种可操作性地与核苷酸序列相连的特定启动子，其中该核苷酸序列编码选自SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：4及其组合的氨基酸序列。

13、权利要求12所述的转基因植物组织，其中该植物组织选自果实、茎、根、种子以及块茎。

14、权利要求13所述的转基因植物组织，其中该植物组织是水稻种子或马铃薯块茎。

15、一种生产转基因植物的方法，包括下列步骤：用DNA建构体转化植物细胞，该DNA建构体包含可操作性地与核苷酸序列相连的特定的启动子，其中该核苷酸序列编码选自SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：4及其组合的氨基酸序列；以及从该转基因植物细胞中产生完整的植物。

16、权利要求15所述的方法，其中该植物选自水稻、小麦、大麦、黑麦、花生、谷物、玉米、马铃薯、甘薯、甜菜、萝卜、洋葱、大蒜、茄子、胡椒、胡萝卜、南瓜、小胡瓜、黄瓜、苹果、梨、甜瓜、柑桔、草莓、葡萄、覆盆子、菠萝、大豆、蕃茄、高梁以及甘蔗。

17、权利要求15所述的方法，进一步包括下列步骤：从该完整植物或繁殖的完整植物中收获植物组织。

18、权利要求17所述的方法，其中该植物组织选自果实、茎、根、种子以及块茎。

19、一种生产转基因植物的方法，包括下列步骤：用DNA建构体转化植物组织，该DNA建构体包含一种可操作性地与核苷酸序列相连的特定启动子，其中该核苷酸序列编码选自SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：4及其组合的氨基酸序列；以及从该转基因植物组织产生完整的植物。

20、权利要求19所述的方法，其中该植物选自水稻、小麦、大麦、黑麦、花生、谷物、玉米、马铃薯、甘薯、甜菜、萝卜、洋葱、大蒜、茄子、胡椒、胡萝卜、南瓜、小胡瓜、黄瓜、苹果、梨、甜瓜、柑桔、草莓、葡萄、覆盆子、菠萝、大豆、蕃茄、高梁以及甘蔗。

21、权利要求19所述的方法，进一步包括下列步骤：自从该完整的植物或繁殖的完整植物中收获特定的植物组织。

22、权利要求19或21所述的方法，其中该特定植物组织选自果实、茎、根、种子以及块茎。