CN1778303A - 知母总皂苷在制备治疗高血脂和动脉硬化的药物中的应用 - Google Patents

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本发明提供了知母总皂苷在制备治疗高血脂的药物中的应用，并提供了知母总皂苷在制备治疗动脉硬化的药物中的应用。

Description

知母总皂苷在制备治疗高血脂和动脉硬化的药物中的应用
技术领域
本发明涉及知母总皂苷在制备治疗高血脂和动脉硬化的药物中的应用。
背景技术
知母是百禾科(liliaceae)植物知母(Anemarrhena asphodeloides Bge.)的干燥根茎。知母总皂苷是知母药材经水解提取的总皂苷精制而成，具有清热泻火，生津润燥，止渴除烦作用，但尚未见有关知母总皂苷降血脂和抗动脉粥样硬化作用的报道。
发明内容
本发明提供了知母总皂苷在制备治疗高血脂的药物中的应用。
本发明提供了知母总皂苷在制备治疗动脉硬化的药物中的应用。
本发明所述的知母总皂苷可以按文献[苏子仁等.知母皂甙的提取精制，中国实验方剂学杂志，2001，2，7(1)]中的方法制备，即知母500g，加75％乙醇4倍，加热回流提取3次，每次40min，滤过，合并滤液，浓缩至1000ml，摇匀，置已处理的D101大孔树脂柱上，浸泡15min后，分别以1000ml水、0.5％NaOH溶液和20％乙醇先后依次洗涤，最后用95％乙醇60ml洗脱，收集洗脱液，回收乙醇，冷冻干燥即得，皂苷元SAR含量为26.7，总皂苷预计为70％以上。
本发明所述的知母总皂苷还可以按下述方法制备：知母粉碎后，按知母药材与乙醇份数比为1∶5浸泡知母，超声提取4小时后，提取液过滤，滤渣和滤液备用；按知母药材与乙醇份数比为1∶3向滤渣中加入乙醇，并将两者混合物超声提取4小时后，过滤去滤渣，滤液备用；合并两次所得滤液，将滤液过AB-8大孔吸附树脂柱，先用纯水洗脱3个柱体积，弃去洗脱液，再用30％乙醇洗脱3～5个柱体积，弃去洗脱液，最后用70％乙醇洗脱，收集洗脱液；将洗脱液减压浓缩得浸膏，减压干燥得黄棕色粉末即得，总皂苷含量≥50％。
具体实施方式
实施例1：知母总皂苷对实验性高血脂鹌鹑的降脂及抗动脉粥样硬化作用
1.材料：
♂鹌鹑：山东烟台南贺家秀京鹌鹑养殖场。
洛伐他汀：江苏扬子江药业集团有限公司，批号国药准字H10980272。
知母总皂苷：500g知母粉碎后，按1∶5浸泡在乙醇中，超声提取4小时后，提取液过滤，按1∶3向滤渣中加入乙醇，并将两者混合物超声提取4小时后，过滤去滤渣，合并两次所得滤液，将滤液过AB-8大孔吸附树脂柱，先用纯水洗脱3个柱体积，弃去洗脱液，再用30％乙醇洗脱3～5个柱体积，弃去洗脱液，最后用70％乙醇洗脱，收集洗脱液；将洗脱液减压浓缩得浸膏，减压干燥得黄棕色粉末即得，总皂苷含量52.8％。
2.方法：取经普通饲料喂养1wk的健康♂鹌鹑84只，随机分为6组：正常对照组；高脂模型组；知母总皂苷高、中、低剂量组，洛伐他汀组。除正常对照组喂普通饲料外，各组鹌鹑每天喂高脂饲料(高脂饲料配方：普通饲料78.5％+胆固醇1.5％+猪油20％)，4wk后各组鹌鹑翅下静脉采血，测定血清CHO、TG、HDL-C和LDL-C(AUTOLAB全自动生化分析仪，AMS，意大利)，确定高血脂模型成立。之后开始给药，知母总皂苷组每天灌胃(高、中、低剂量组给药剂量分别为：120mg/kg、60mg/kg和30mg/kg)，洛伐他汀组灌胃给药(6mg/kg，)。正常对照组和高脂模型组均给等体积的生理盐水溶液。4wk后，开始测定实验指标。禁食12h，称重，颈静脉取血，分离血清用以测定CHO、TG、HDL-C和LDL-C，并计算HDL-C/CHO值；处死鹌鹑，取肝脏、称重并计算肝脏指数；分离主动脉及左右头臂动脉，沿前壁中线纵行切开，Sudan IV染色。观察动脉病变程度。
3结果：结果表明，知母总皂苷120mg/kg、60mg/kg灌胃给药4wk，可以显著或极显著降低血清CHO、TG和LDL-C(p＜0.05，p＜0.01)，并极显著升高HDL-C/CHO值(p＜0.01)(表1)。120mg/kg、60mg/kg均可极显著降低肝脏重量(p＜0.01)，可以显著降低肝脏指数(p＜0.05)，但对实验动物的体重没有明显影响(表2)。苏丹染色结果显示，知母总皂苷120mg/kg、60mg/kg灌胃给药4wk可极显著减少实验动物动脉内膜粥样硬化斑块面积(p＜0.01)(表3)。
                                       表1 知母总皂苷对高血脂鹌鹑血生化指标的影响( X±SD)
  CHO(mg/dl) TG(mg/dl)   HDL-C(mg/dl)   LDL-C(mg/dl)   HDL-C/CHO
  正常对照组高脂模型组高剂量组中剂量组低剂量组洛伐他汀组   223.46±5.45982.75±334.56△△488.90±99.89**，△△512.25±98.08**，△△627.20±265.47*，△△379.55±94.20**，△ 201.96±71.86440.75±170.19△△295.05±82.15**，△362.50±156.26*，，△△407.00±90.03△△298.10±72.43**，△   51.21±5.9872.20±12.50△△77.90±15.44△△66.20±18.8762.05±11.4868.45±13.23   111.88±34.29331.60±114.39△△177.70±43.49**183.50±83.30**238.65±81.82△△143.90±69.15**   0.24±0.060.08±0.03△△0.20±0.08**0.17±0.08**，△0.12±0.06△△0.22±0.05**
与正常对照组比较△p＜0.05，△△p＜0.01；与高脂模型组比较*p＜0.05，**p＜0.01
                       表2 知母总皂苷对高血脂鹌鹑体重及肝脏指数的影响( X±SD)
 体重(g)  肝脏重量(g)  肝脏指数(％)
正常对照组高脂模型组高剂量组中剂量组低剂量组洛伐他汀组  151.75±16.40172.25±17.81△△163.09±9.07160.62±16.49162.00±24.06163.92±17.43  3.84±0.785.55±0.87△△4.51±0.78**4.52±0.69**，△5.12±1.204.52±0.63**，△  2.59±0.773.23±0.46△2.76±0.42*2.81±0.30*3.17±0.61△△2.78±0.42*
与正常对照组比较△p＜0.05，△△p＜0.01；与高脂模型组比较*p＜0.05，**p＜0.01
                                   表3 知母总皂苷对高血脂鹌鹑动脉内膜斑块的影响
N(只)               内膜斑块程度分级 X±SD
0级 I级 II级 III级 IV级
正常对照组高脂模型组高剂量组中剂量组低剂量组洛伐他汀组 121212121212    7     4545     113455 54442 63  0.50±0.673.42±0.67△△1.92±0.90**，△△2.00±0.85**，△△2.83±0.83△△1.75±0.75**，△△
斑块分级标准：0级：内膜表面光滑，无病变；I级：病变(眼观为奶油状红色变化)占1％~25％；II级：病变占26％~50％：III级：病变占51％~75％；IV级病变占76％~100％与正常对照组比较△p＜0.05，△△p＜0.01；与高脂模型组比较*p＜0.05，**p＜0.01
4结论：知母总皂苷能很好的调节血脂平衡，明显减轻动脉粥样硬化程度。
实施例2：知母总皂苷的安全性、急毒实验
1.材料：二级昆明种小白鼠，体重19-21g，山东省天然药物工程技术研究中心实验动物中心提供，动物合格证：鲁动(质)字20010603。
知母总皂苷：按实施例1制备，制成100mg/mL。
2.方法：
取小白鼠20只(雌雄各半)每只按体重剂量5000mg/kg灌胃给药，连续7天，动物健康存活，剖解观察内脏器官，未发现异常。
3.结论：对小鼠的最大耐受量在5000mg/kg以上，相当于其有效剂量(78mg/kg)的64倍。

Claims (3)

1.知母总皂苷在制备治疗高血脂的药物中的应用。
2.知母总皂苷在制备治疗动脉硬化的药物中的应用。
3.权利要求1或2所述的知母总皂苷可以按下述方法制备：知母粉碎后，按知母药材与乙醇份数比为1∶5浸泡知母，超声提取4小时后，提取液过滤，滤渣和滤液备用；按知母药材与乙醇份数比为1∶3向滤渣中加入乙醇，并将两者混合物超声提取4小时后，过滤去滤渣，滤液备用；合并两次所得滤液，将滤液过AB-8大孔吸附树脂柱，先用纯水洗脱3个柱体积，弃去洗脱液，再用30％乙醇洗脱3～5个柱体积，弃去洗脱液，最后用70％乙醇洗脱，收集洗脱液；将洗脱液减压浓缩得浸膏，减压干燥得黄棕色粉末即得，100％＞总皂苷含量≥50％。
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