CN1706497A - 猪细小病毒病油乳剂灭活疫苗 - Google Patents

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Abstract

本发明属兽医生物新医药技术领域，是一种猪细小病毒病油乳剂灭活疫苗，能预防由猪细小病毒(PPV)引起的母猪繁殖障碍病。它是通过猪细小病毒接种细胞培养，获得的病毒液用烷化剂灭活后加入油佐剂经乳化配制而成。油佐剂按容量计，由94％白油和6％司本－80混合后加入2％硬脂酸铝，即100毫升混合液加入2克硬脂酸铝。本发明通过改变油佐剂的配方，解决原有产品疫苗的稳定性较差、分层快和保质期等技术问题，通过技术研究减少疫苗的使用剂量和使用次数，解决原有疫苗使用手续麻烦和某些不足之处。

Description

猪细小病毒病油乳剂灭活疫苗
技术领域：
本发明属兽医生物新医药技术领域，是一种猪细小病毒病油乳剂灭活疫苗，能预防由猪细小病毒(PPV)引起的母猪繁殖障碍病。
背景技术：
原有的猪细小病毒AEI灭活疫苗是将猪细小病毒(PPV)接种细胞培养，获得的病毒液经AEI灭活后加入油佐剂经乳化配制而成的双相油乳剂疫苗。该疫苗免疫效果好，但存在以下不足和问题：
1、疫苗的稳定性较差、分层快，经贮藏后乳剂苗很快分为乳白色和淡红色二层，在乳液面上层可以折出少量油层，外观物理性状欠佳，在保质期内有时发生破乳，影响了疫苗质量。其中的主要原因是油佐剂的问题，配制疫苗的油佐剂由石腊油和羊毛脂组成(石腊油∶羊毛脂＝9∶1)。
2、猪体注射疫苗后有时会出现食欲不振，精神欠佳，有的还会发热、过敏等不良反应，接种部位红肿明显。引起的主要原因与油佐剂有关，也与疫苗使用的剂量大有关。
3、该疫苗使用的剂量是1头猪要注射2次，每次5毫升，间隔二周，总剂量10毫升。为此，用户反映疫苗使用的手续麻烦，增加防疫的劳动强度。
发明内容：
本发明提供一种优化后的猪细小病毒病灭活疫苗——猪细小病毒病油乳剂灭活疫苗。通过改变油佐剂的配方，解决原有产品疫苗的稳定性较差、分层快和保质期等技术问题，在保持疫苗免疫效果可靠前提下，减少疫苗的使用剂量和减少使用次数，解决使用手续麻烦等不足之处。
为解决上述技术问题，本发明是这样实现的：
一种猪细小病毒病油乳剂灭活疫苗，其特征在于：是将用烷化剂灭活的猪细小病毒(PPV)加入油佐剂经乳化配制而成，油佐剂配制是按容量计，94％白油和6％司本-80混合后加入2％硬脂酸铝，即100毫升混合液加入2克硬脂酸铝。
采用一步法乳化。
采用二步法乳化。
将该疫苗确定的免疫剂量和免疫次数为2毫升1次免疫。
本发明具有如下技术效果：
1、改善疫苗的物理性状，提高疫苗质量。采用新的油佐剂配制疫苗，使得疫苗的外观和物理性状得到明显改善，以白油、司本-80和硬脂酸铝组成的油佐剂为油相，病毒中加2％吐温为水相，按二步乳化法能配制出粘度＜2”，稳定性较好，在4℃保存不破乳的双相(W/O/W)油乳剂灭活疫苗。从而建立了检验疫苗物理性状的方法和标准。
2、使用的剂量和次数减少。原有疫苗的用法用量是肌肉注射2次，每次5毫升，间隔两周；优化疫苗的用法用量是2毫升1次肌肉注射。
具体实施方式：
一种猪细小病毒病油乳剂灭活疫苗，是将猪细小病毒(PPV)接种细胞培养，获得的病毒液经烷化剂灭活后加入油佐剂经乳化配制而成。油乳剂配制按容量计，94％白油和6％司本-80混合后加入2％硬脂酸铝，即100毫升混合液加入2克硬脂酸铝。
油佐剂中含硬脂酸铝的量与疫苗的稳定性有关，进行多次乳化试验证明，当油佐剂中含1-1.5％硬脂酸铝时，配制的疫苗经3000r.p.m离心15分钟后，可分二层，上层乳白色，下层淡红色容量占2/5-3/5；当含2％硬脂酸铝时，经3000r.p.m 15分钟离心后分二层，下层占1/5-1/6；当含4％时，疫苗的粘度明显增加，而且会出现少量的白色沉淀。
将原来使用的油佐剂(由9份石腊油和1份羊毛脂组成)改用白油为主组成的油佐剂。对这二种油佐剂配制的疫苗经多次比较，在物理性状方面(外观、粘度、稳定性、剂型等)有明显的差异，即使采用不同的乳化方法也是如此。用新的油佐剂无论采用一步法乳化还是二步法乳化，疫苗在常温下放置1-2天，5000毫升疫苗装量的瓶底仅出现很少量的淡红色乳液，用旧的油佐剂配制的疫苗稳定性较差，分层快，配好的疫苗不久就可分成二层。
经优化的猪细小病毒病油乳剂灭活疫苗接种2-3日龄乳鼠，安全通过。接种豚鼠四周后全部产生抗体反应，HI：128～1024。接种6批敏感猪无明显不良反应，体温、食欲正常，接种部无明显红肿块。
通过本动物的安全性和免疫力试验，免疫持续期和保存期试验，证实了减少疫苗用量和次数的效果。
原有疫苗用法用量是肌肉注射2次，每次5毫升，间隔两周。通过试验，优化疫苗的用法用量确定为2毫升1次肌肉注射。
本发明的具体使用效果，请参阅下表：
疫苗名称 类型   免疫剂量   免疫次数 使用 安全性*   物理性状   免疫力   保存期(4℃-12℃)   免疫期
  猪细小病毒病油乳剂灭活疫苗   优化后疫苗   2ml/次   1次   方便   较好   较好   94％   至少7个月   6个月
  猪细小病毒AEI灭活疫苗   原有疫苗(未优化)   5ml/次   2次   麻烦   有不足之处   欠佳   94.1％   至少7个月   6个月
*安全性：指有否非特异性不良反应：接种部位有无明显红肿块，食欲、精神、体温是否正常。
综合上所述，经改造和优化后的猪细小病毒病油乳剂灭活疫苗不仅在外观和物理性状、疫苗的稳定性和安全性明显优于原来的疫苗，而且免疫剂量减少5倍，免疫次数减为1次，疫苗的免疫效果确实，各项免疫力指标不变，从而大大降低了成本，方便了用户。

Claims (4)

1、一种猪细小病毒病油乳剂灭活疫苗，其特征在于：是将用烷化剂灭活的猪细小病毒(PPV)加入油佐剂经乳化配制而成，油佐剂配制是按容量计，94％白油和6％司本-80混合后加入2％硬脂酸铝，即100毫升混合液加入2克硬脂酸铝。
2、根据权利要求1所述的猪细小病毒病油乳剂灭活疫苗，其特征在于：采用一步乳化。
3、根据权利要1所述的猪细小病毒病油乳剂灭活疫苗，其特征在于：采用二步法乳化。
4、根据权利要求1所述的猪细小病毒病油乳剂灭活疫苗，其特征在于：免疫剂量是每头猪肌肉注射2毫升。
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