CN1686118A

CN1686118A - 替莫唑胺脑部缓释植入剂及其制备方法

Info

Publication number: CN1686118A
Application number: CN 200510024953
Authority: CN
Inventors: 高申; 张翮; 丁雪鹰; 管斐; 俞媛; 陈建明; 李国栋; 邹豪
Original assignee: Second Military Medical University SMMU
Current assignee: Second Military Medical University SMMU
Priority date: 2005-04-07
Filing date: 2005-04-07
Publication date: 2005-10-26

Abstract

一种替莫唑胺脑部缓释植入剂，由替莫唑胺和聚乳酸－羟基乙酸共聚物(PLGA)组成，替莫唑胺与PLGA的重量比例为1∶100至40∶100，采用乳化－溶剂挥发法，制成替莫唑胺缓释微球，将缓释微球压片，灭菌得尼莫司汀脑部缓释植入剂，通过病变部位局部植入，发挥长期高效的脑胶质瘤抑制作用，解决了传统的全身化疗药物具有难以通过血脑屏障、药物局部浓度低、全身反应严重、作用肿瘤时间短而影响疗效等缺点和不足，它避开血脑屏障，直接增加局部药物浓度，同时延长了化疗药物的作用时间，亦减少了药物的全身毒副作用，用于恶性脑胶质瘤及其他脑部肿瘤的治疗。

Description

替莫唑胺脑部缓释植入剂及其制备方法

技术领域

本发明涉及新型药物剂型，尤其是一种治疗恶性脑胶质瘤的替莫唑胺脑部缓释植入剂及其制备方法。

背景技术

成人原发性脑肿瘤中有60％以上为脑胶质瘤，这是一类危害性极大的恶性肿瘤，发病率高、死亡率也高，从最初开始诊断开始计算的存活期仅为9-12个月。它使病人丧失多种功能，如运动障碍、癫痫、视觉障碍、语言障碍等，生活质量极差。病人尽管经手术、放疗和化疗治疗，但病人几乎无一例外地出现肿瘤复发。在过去的20多年中，脑胶质瘤的治疗一直无明显进展。

恶性脑胶质瘤综合治疗方法为手术十全身化疗十放疗。有报道根据实验发现测算，认为即使手术和放射治疗杀死了99.9％的胶质瘤细胞，残余肿瘤也可以在78天恢复到原有肿瘤大小。因此，在肿瘤缓解期采用维持治疗以巩固疗效是极为重要的。维持治疗的方法，如化疗、放疗及免疫治疗等有许多种，其中，化学药物治疗已成为恶性脑胶质瘤综合治疗的重要环节。

已有的化疗药物是亚硝脲类烷化剂BCNU和CCNU，或者用PVC方案(甲基卞肼+长春新碱+CCNU)，虽有一定疗效，但副作用大，有延迟和累积骨髓抑制及肺毒性等，而且常易产生耐药性，在初次治疗复发后再次治疗便无效。替莫唑胺(Temozolomide)是咪唑四嗪类新型物质的第一个化合物，由于其毒性小、耐受性好而在胶质细胞瘤治疗中迈出重要一步。由于其毒副作用低，也就可以较长时间用药，提高了长期疗效，病人的身体和精神状态均得到明显改善，提高了病人的生活质量。常规化疗耐药后用替莫唑胺仍然有效，因此，替莫唑胺是目前相对最好的治疗脑胶质瘤的药物。

血脑屏障的存在，使很多药物不能进入脑部，限制了脑部疾病的治疗，为此研究了许多脑给药系统的技术。20世纪90年代以来，药物剂型和制剂研究已进入药物释放系统时代，新型药物释放系统已成为药学领域的重要发展方向。新型给药系统中脑给药的一些新方法也已形成，其中脑内植入：将全合成的、生的相容性好、可生物降解的高分子材料与药物制成小丸，圆片，微球植入脑内。使脑瘤局部控缓释药物间质化疗成为可能。

脑瘤局部控缓释药物间质化疗解决了传统的全身化疗药物具有难以通过血脑屏障、药物局部浓度低、全身反应严重、作用肿瘤时间短而影响疗效等缺点和不足，它避开血脑屏障，直接增加局部药物浓度，同时延长了化疗药物的作用时间，亦减少了药物的全身毒副作用，且这种给药方法也符合脑胶质瘤几乎无转移，局部复发多在原肿瘤2cm范围内的特点。

发明内容

本发明的目的在于提供一种治疗恶性脑胶质瘤的替莫唑胺脑部缓释植入剂，它由替莫唑胺和聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)组成，通过病变部位局部植入，发挥长期高效的脑胶质瘤抑制作用。

本发明的另一目的在于提供该替莫唑胺脑部缓释植入剂的制备方法。

本发明的技术方案为一种替莫唑胺脑部缓释植入剂，由替莫唑胺和聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)组成，其特征在于尼莫司汀与聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)的重量比例为1∶100至40∶100，采用乳化-溶剂挥发法制成替莫唑胺缓释微球，将缓释微球压片，制成替莫唑胺脑部缓释植入剂，用于治疗恶性脑胶质瘤及其他脑部肿瘤。

替莫唑胺脑部缓释植入剂的制备，在于替莫唑胺与聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)的重量比例为1∶100至40∶100，最佳重量比例为5∶100至20∶100，采用乳化-溶剂挥发法，将PLGA用二氯甲烷完全溶解，加入替莫唑胺，涡旋混匀后滴加到聚乙烯醇(PVA)水溶液中，搅拌乳化，后低速搅拌挥干有机溶剂，离心收集微球，用蒸馏水洗涤，冷冻干燥后真空干燥制成替莫唑胺缓释微球，将缓释微球压片，灭菌得成品替莫唑胺脑部缓释植入剂。

上述的替莫唑胺脑部缓释植入剂，其水相是浓度为2％的聚乙烯醇水溶液。

该替莫唑胺脑部缓释植入剂用于恶性脑胶质瘤及其他脑部肿瘤的治疗，通过植入患者脑部肿瘤切除后的残腔内，发挥长期高效抑制脑胶质瘤的作用。

附图说明

图1.替莫唑胺脑部缓释植入剂体内释放曲线

图2.荷瘤大鼠存活时间

具体实施方式

以下通过试验例来进一步阐明本发明所述药物的有益效果。

试验例1.体内药物释放测定：

体内药物释放测定方法：

实验动物：Wistar大鼠，雌雄各半，鼠龄4-6周，体重175-200g，数量36只，由第二军医大学实验动物中心提供

测定方法：36只大鼠随机分成6组，每组6只。戊巴比妥钠腹腔注射麻醉后，将大鼠头部固定，碘酒、乙醇消毒，于矢状缝左2mm、冠状缝后3mm处切开皮肤，钻孔，将剂量为10mg的替莫唑胺脑部缓释植入剂植于额叶脑皮质下1mm处，骨蜡封闭骨孔，缝合皮肤。分别于术后1、7、14、21、28、35天6个时间点处死动物，取大脑植入部位组织制成匀浆，测定其中替莫唑胺含量，结果见图1。体内实验表明，该替莫唑胺脑部缓释植入剂具有明显的缓释作用，体内作用可达到一个月。

试验例2.荷瘤大鼠存活时间观察

实验动物：Wistar大鼠，雌雄各半，鼠龄4-6周，体重175-200g，数量40只，由第二军医大学实验动物中心提供

实验方法：1、选大鼠右侧脑尾状核为靶点，坐标为前囱前1.0mm，矢状缝右旁开3.0-3.5mm，硬膜下6.0mm。2、接种方法：大鼠经2％戊巴比妥钠腹腔注射麻醉后固定，手术暴露颅骨标志，按坐标定位牙钻钻孔，孔径1.2mm暴露硬膜。将微量注射器固定于立体定向仪，进针深度为硬膜下6.0mm。将C6细胞悬液注入靶区，缓慢拔针后以骨蜡封闭骨孔缝合皮肤。一周后将大鼠分两组，一组植入剂量为10mg的替莫唑胺脑部缓释植入剂，另一组口服剂量为10mg的替莫唑胺普通胶囊。观察大鼠存活时间，记录如图2，实验结果表明，替莫唑胺脑部缓释植入剂较普通胶囊可明显延长大鼠存活时间。

试验例3.替莫唑胺脑部缓释植入剂对C6细胞的抑制作用

采用细胞计数法检测细胞增殖，流式细胞仪分析细胞周期和凋亡，观察替莫唑胺脑部缓释植入剂及胶囊对C6细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用，结果见表1，实验结果表明，替莫唑胺脑部缓释植入剂对C6细胞的抑制作用较普通胶囊更为明显。

表1替莫唑胺脑部缓释植入剂对C6细胞的抑制作用(n＝3)

组别	抑瘤率(％)
	抑瘤率(％)			1	2	3
	替莫唑胺胶囊替莫唑胺脑部缓释植入剂	29.166.2	23.772.7	1	2	3	21.470.3

试验例4.替莫唑胺脑部缓释植入剂对脑胶质瘤的抑制作用

比较替莫唑胺脑部缓释植入剂及替莫唑胺胶囊对脑胶质瘤的抑制作用，将荷瘤大鼠分为两组，一组植入替莫唑胺脑部缓释植入剂，另一组口服替莫唑胺胶囊，一定时间后处死大鼠，获取脑肿瘤标本，称重，结果如表2所示：

表2替莫唑胺脑部缓释植入剂对脑胶质瘤的抑制作用(n＝3)

组别	动物数(只)	瘤重(g)
		瘤重(g)			1	2	3
		替莫唑胺胶囊替莫唑胺脑部缓释植入剂	2020	0.7721±0.20180.4789±0.2141	1	2	3	0.7517±0.21430.4717±0.2293	0.7416±0.18940.5150±0.2470

实验结果表明，替莫唑胺脑部缓释植入剂对脑脑胶质瘤的抑制作用较普通胶囊更为明显。

通过上述试验可得如下结论：替莫唑胺脑部缓释植入剂能够有效释放达一个月，直接延长了药物的作用时间，使荷瘤大鼠存活时间得以有效延长，表现了更好的对C6细胞及脑胶质瘤的抑制作用，具有广阔的治疗前景。

下面通过实施例进一步说明本发明。应该理解的是，本发明的实施例是用于说明本发明而不是对本发明的限制。根据本发明的实质对本发明进行的简单改进都属于本发明要求保护的范围。

采用乳化-溶剂挥发法，将PLGA用一定量的二氯甲烷完全溶解，加入替莫唑胺，涡旋混匀后滴加到浓度为2％聚乙烯醇水溶液中，一定速度下搅拌乳化5分钟，后低速搅拌3小时挥干有机溶剂，离心收集微球，用蒸馏水洗涤；冷冻干燥后真空干燥制成替莫唑胺缓释微球，将缓释微球压片，灭菌得成品替莫唑胺脑部缓释植入剂。

现结合实施例，对本发明替莫唑胺脑部缓释植入剂制备作详细描述。

实施例1.

替莫唑胺与PLGA重量比为10∶100。

缓释聚合物采用浓度为10％的PLGA(75∶25)与二氯甲烷溶液的混合物。

制备步骤：

采用O/W乳化-溶剂挥发法

(1)精密称取PLGA0.2g置5ml塑料离心管中，加入2ml二氯甲烷，使PLGA溶解完全，精密称取替莫唑胺20mg加入上述溶液，旋涡使药物分散均匀，作为油相。

(2)将油相加至40ml 2％聚乙烯醇1788水溶液中，600转/分钟搅拌5分钟。

(3)降低搅拌速度至300转/分钟，继续搅拌3小时，挥干有机溶剂，2500转/分钟离心收集微球，蒸馏水洗涤3次，加水混悬为2ml，冷冻干燥得微球。

(4)取微球100mg压片得替莫唑胺脑部缓释植入剂。

实施例2.

替莫唑胺与PLGA重量比为15∶100，缓释聚合物采用浓度为5％的PLGA(75∶25)与二氯甲烷溶液的混合物。制备步骤如实施例1，制得莫唑胺脑部缓释植入剂。

实施例3.

替莫唑胺与PLGA重量比为30∶100，缓释聚合物采用浓度为10％的PLGA(75∶25)与二氯甲烷溶液的混合物。制备步骤如实施例1，制得莫唑胺脑部缓释植入剂。

实施例4.

替莫唑胺与PLGA重量比为20∶100，缓释聚合物采用浓度为15％的PLGA(75∶25)与二氯甲烷溶液的混合物。制备步骤如实施例1，制得莫唑胺脑部缓释植入剂。

实施例5.

替莫唑胺与PLGA重量比为40∶100，缓释聚合物采用浓度为5％的PLGA(75∶25)与二氯甲烷溶液的混合物。制备步骤如实施例1，制得莫唑胺脑部缓释植入剂。

实施例6.

替莫唑胺与PLGA重量比为5∶100，缓释聚合物采用浓度为5％的PLGA(75∶25)与二氯甲烷溶液的混合物。制备步骤如实施例1，制得替莫唑胺脑部缓释植入剂。

临床有效的抗癌药必须在肿瘤内达到足够的药物浓度而对身体其它系统无或仅有可以耐受的毒性作用。系统给药化疗使全身所有组织器官都暴露于抗癌药，特别是治疗脑肿瘤，往往需要加大剂量才能在中枢神经系统达到有效药物浓度。因此，使得治疗剂量接近甚至超过病人的最大耐受剂量，有些病人因严重全身毒副作用而无法接受化疗。局部给药可以用较小的剂量达到最大治疗浓度，而身体其它部位的抗癌药物浓度极低，可以明显提高局部药物浓度而减少全身毒副作用。直接作用于肿瘤部位，避开了血脑屏障，大大增加了脑瘤化疗药物选择范围。胶质瘤几乎没有转移，向颅外的远方转移更是罕见。胶质瘤常为局部复发，且80％均在原发肿瘤的2cm范围内，这就使莫唑胺脑部缓释植入剂非常适合进行局部缓释化疗。

Claims

1.一种替莫唑胺脑部缓释植入剂，由替莫唑胺和聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)组成，其特征在于替莫唑胺与聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)的重量比例为1∶100至40∶100，采用乳化-溶剂挥发法制成替莫唑胺缓释微球，将缓释微球压片，制成替莫唑胺脑部缓释植入剂，用于治疗恶性脑胶质瘤及其他脑部肿瘤，通过病变部位局部植入，发挥长期高效抑制脑胶质瘤的作用。

2.一种按照权利要求1所述的替莫唑胺脑部缓释植入剂的制备方法，其特征在于替莫唑胺与聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)的重量比例为1∶100至40∶100，采用乳化-溶剂挥发法，将PLGA用二氯甲烷完全溶解，加入替莫唑胺，涡旋混匀后滴加到聚乙烯醇水溶液中，搅拌乳化，低速搅拌挥干有机溶剂，离心收集微球，用蒸馏水洗涤；冷冻干燥后真空干燥制成替莫唑胺缓释微球，将缓释微球压片，灭菌得成品替莫唑胺脑部缓释植入剂。

3.一种按照权利要求1或2所述的替莫唑胺脑部缓释植入剂，其特征在于替莫唑胺与聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)的最佳重量比例为5∶100至20∶100。

4.一种按照权利要求1或2所述的替莫唑胺脑部缓释植入剂，其特征在于水相是浓度为2％的聚乙烯醇水溶液。