CN1679797A - 藤梨根抗肿瘤提取物及其制备方法和用途 - Google Patents

藤梨根抗肿瘤提取物及其制备方法和用途 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种藤梨根抗肿瘤提取物及其制备方法和用途。该藤梨根抗肿瘤提取物可通过水或有机溶剂在70～100℃温度下浸提、然后减压浓缩、调酸、萃取、聚酰胺层析、溶剂洗脱，浓缩干燥制得。该藤梨根抗肿瘤提取物可作为活性成分与可接受的药物载体制成用于治疗各种肿瘤的口服或注射单方以及复方制剂。本发明浸提效果好，原药材中抗肿瘤有效成分转移率高；采用调酸法除去酸不溶物，提高萃取效果，产品纯度高；采用聚酰胺精制提取活性成分的精制，有效纯化藤梨根抗肿瘤有效部位，便于工业化生产。

Description

藤梨根抗肿瘤提取物及其制备方法和用途
                            技术领域
本发明涉及医药领域，特别涉及一种藤梨根抗肿瘤提取物及其制备方法和用途。
                            背景技术
藤梨根为猕猴桃科落叶大藤本猕猴桃(Actinidia chinensis Planch.)的根，具有解毒活血、清热利湿之功效。陈贯诚等人在“猕猴桃”，中药材科技，1981，4(1)：30中指出，藤梨根含熊果酸、齐墩果酸、维生素C、糖类、色素及氨基酸。陈德轩等人在“抗肿瘤植物药藤梨根”，中药材，2004，27(2)：86～87中报道，藤梨根具有抗癌作用，其乙醇提取物的腹腔给药对S180的抑制率为30～40％。邹益友等人在“猕猴桃根抑制肿瘤细胞的实验研究”，湖南中医药导报，1999，5(4)：37～38中，对藤梨根的成分进行研究，发现其乙酸乙酯提取物对白血病细胞和结肠癌低分化腺癌细胞的抑制率分别达到54％和60％。李昊，杨慧萍，杨凡等人在“藤梨根对胃癌抑制的实验研究”，河北中医，2004，26(4)：314～315中研究报道，藤梨根的乙酸乙酯提取物在1.3mg/ml浓度时对胃癌细胞的抑瘤率达88.19％，但未对其抗肿瘤有效部位和成分分离方法作进一步的研究。
公开号为CN1478495A、CN1093594A的中国发明专利公开了藤梨根配伍其它中药用于抗癌症治疗，但其有效成分分离及肿瘤治疗应用未见相关专利，也没有关于藤梨根抗肿瘤有效部位和成分分离方法、制剂技术的报道。
                               发明内容
本发明的目的在于克服现有技术中存在的缺点，提供一种可有效地纯化中药藤梨根的有效部位、便于工业化生产的藤梨根抗肿瘤提取物制备方法。
本发明的另一目的在于提供一种由上述方法制备的藤梨根抗肿瘤提取物。
本发明的再一目的在于提供一种上述藤梨根抗肿瘤提取物的用途。
本发明的目的通过下述技术方案实现：本藤梨根抗肿瘤提取物的制备方法包括下述步骤：
(1)用水或有机溶剂在70～100℃温度下浸提藤梨根药材，得到浸出液；
(2)将浸出液减压浓缩至热比重1.03～1.1，也可以是常压浓缩。然后将pH值调节至2～5，静置、沉淀，取得上清液；
(3)用乙酸乙酯萃取上清液，回收溶剂，得到萃取物；
(4)将萃取物进行聚酰胺层析，再用溶剂洗脱，得到洗脱液；
(5)将洗脱液浓缩、回收溶剂、干燥，得到藤梨根抗肿瘤提取物。
步骤(1)中，所述有机溶剂为30～70％(V/V)乙醇；所述藤梨根药材可为藤梨根块状物或粉碎物；所述浸提温度优选70～80℃。
步骤(1)中，所述浸提次数为1～3次；每次浸提时间为1～2小时；第一次浸提的藤梨根与水或有机溶剂的重量比为1∶8～10；第二次和第三次浸提的藤梨根与水或有机溶剂的重量比为1∶4～5。
步骤(2)中，采用酸性试剂来调节浸出液的pH值，优选盐酸或醋酸；所述沉淀可采用过滤或离心分离沉淀。
步骤(3)中，所述乙酸乙酯的用量为上清液的1～3倍体积量。
步骤(4)中，可将萃取物水溶后再进行聚酰胺层析。
步骤(4)中，可将萃取物醇溶后再进行聚酰胺层析。
步骤(4)中，可将萃取物与少量聚酰胺混合，再进行聚酰胺层析。
步骤(4)中，可将萃取物醇溶后并与少量聚酰胺混合，再进行聚酰胺层析。
步骤(4)中，所述溶剂的浓度为0～80％(V/V)；优选30～70％(V/V)乙醇；所述溶剂洗脱为乙醇或丙酮梯度洗脱，分部收集得到洗脱液。
步骤(5)中，所述干燥可为真空干燥、喷雾干燥或冷冻干燥。
采用上述方法制备得到藤梨根抗肿瘤提取物；所制备的藤梨根抗肿瘤提取物有效成分(蒽醌类)含量可达80～90％。
该藤梨根抗肿瘤提取物作为活性成分与可接受的药物载体结合制成可用于治疗各种肿瘤的口服或注射单方以及复方制剂。如以淀粉等为辅料制成的片剂、以微晶纤维素为辅料制成的胶囊剂、以甘露醇为支架制成的注射剂等。
本发明与现有技术相比具有如下优点和效果：
(1)本发明对原料药材采用高温、多次、长时间浸提，浸提效果好，原料药材中抗肿瘤有效成分转移率高；
(3)采用调酸法除去酸不溶物，提高萃取效果，产品纯度高；
(4)采用聚酰胺精制提取活性成分，有效纯化藤梨根抗肿瘤有效部位，便于工业化生产。
                     具体实施方式
下面结合实施例对本发明做进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。
实施例1
将1Kg的藤梨根药材，加入8L的水，保持在100℃温度下浸提60分钟，然后过滤得到第一次浸出液；再在滤渣中加入4L的水，保持在100℃温度下浸提60分钟，然后过滤得到第二次浸出液；合并两次浸出液。
将浸出液浓缩至热比重1.05(5L)，用10％盐酸将浸出液的pH值调至2，然后静置、离心去沉淀，取得上清液；用5L的乙酸乙酯萃取上清液2次，合并萃取液，回收乙酸乙酯，得到萃取物；将萃取物用等倍体积量水溶解，上样聚酰胺柱进行层析，再用30～70％乙醇进行梯度洗脱，分部收集洗脱液；最后将70％乙醇洗脱液减压浓缩、回收乙醇，再真空干燥，得到28g的藤梨根抗肿瘤提取物。其蒽醌类的含量为87％。
实施例2
将1Kg的藤梨根药材粉碎成粗粉，加入9L的水，保持在90℃温度下浸提90分钟，然后过滤得到第一次浸出液；再在滤渣中加入5L的水，保持在90℃温度下浸提90分钟，然后过滤得到第二次浸出液；合并两次浸出液。
将浸出液浓缩至热比重1.05(6L)，用5％盐酸将浸出液的pH值调至3，然后静置、离心去沉淀，取得上清液；用12L的乙酸乙酯萃取上清液2次，合并萃取液，回收乙酸乙酯，得到萃取物；将萃取物用等倍体积量乙醇溶解，与2倍重量聚酰胺拌样，上样聚酰胺柱进行层析，再用0～50％乙醇进行梯度洗脱，分部收集洗脱液；最后将50％乙醇洗脱液常压浓缩回收乙醇，再喷雾干燥，得到30g的藤梨根抗肿瘤提取物。其蒽醌类的含量为83％。
实施例3
将1Kg的藤梨根药材粉碎成粗粉，加入10L的水，保持在80℃温度下浸提120分钟，然后过滤得到第一次浸出液；再在滤渣中加入5L的水，保持在80℃温度下浸提120分钟，然后过滤得到第二次浸出液；再在滤渣中加入5L的水，保持在80℃温度下浸提120分钟，然后过滤得到第三次浸出液；合并三次浸出液。
将浸出液浓缩至热比重1.03(10L)，用20％醋酸将浸出液的pH值调至5，然后静置、离心去沉淀，取得上清液；用10L的乙酸乙酯萃取上清液1次，合并萃取液，回收乙酸乙酯，得到萃取物；将萃取物用等体积量水溶解，上样聚酰胺柱进行层析，再用30～80％乙醇进行梯度洗脱，分部收集洗脱液；最后将80％乙醇洗脱液减压浓缩回收乙醇，再冷冻干燥，得到35g的藤梨根抗肿瘤提取物。其蒽醌类的含量为90％。
实施例4
将1Kg的藤梨根药材粉碎成粗粉，加入10L的30％乙醇，保持在70℃温度下浸提120分钟，然后过滤得到第一次浸出液；再在滤渣中加入5L的30％乙醇，保持在70℃温度下浸提120分钟，然后过滤得到第二次浸出液；合并二次浸出液。
将浸出液浓缩至热比重1.03(8L)，用20％醋酸将浸出液的pH值调至5，然后静置、离心去沉淀，取得上清液；用24L的乙酸乙酯萃取上清液1次，合并萃取液，回收乙酸乙酯，得到萃取物；将萃取物用等体积量水溶解，上样聚酰胺柱进行层析，再用30～80％丙酮进行梯度洗脱，分部收集洗脱液；最后将80％丙酮洗脱液常压浓缩回收丙酮，再冷冻干燥，得到33g的藤梨根抗肿瘤提取物。其蒽醌类的含量为92％。
实施例5
将1Kg的藤梨根药材，加入9L的50％乙醇，保持在80℃温度下浸提90分钟，然后过滤得到第一次浸出液；再在滤渣中加入5L的50％乙醇，保持在80℃温度下浸提90分钟，然后过滤得到第二次浸出液；合并二次浸出液。
将浸出液浓缩至热比重1.03(6L)，用5％盐酸将浸出液的pH值调至3，然后静置、离心去沉淀，取得上清液；用12L的乙酸乙酯萃取上清液2次，合并萃取液，回收乙酸乙酯，得到萃取物；将萃取物用等体积量乙醇溶解，上样聚酰胺柱进行层析，再用0～70％乙醇进行梯度洗脱，分部收集洗脱液；最后将洗70％乙醇脱液减压浓缩回收乙醇，再喷雾干燥，得到30g的藤梨根抗肿瘤提取物。其蒽醌类的含量为89％。
实施例6
将1Kg的藤梨根药材，加入8L的70％乙醇，保持在70℃温度下浸提60分钟，然后过滤得到第一次浸出液；再在滤渣中加入4L的70％乙醇，保持在70℃温度下浸提60分钟，然后过滤得到第二次浸出液；再在滤渣中加入4L的70％乙醇，保持在70℃温度下浸提60分钟，然后过滤得到第三次浸出液；合并三次浸出液。
将浸出液浓缩至热比重1.05(6L)，用10％盐酸将浸出液的pH值调至2，然后静置、离心去沉淀，取得上清液；用6L的乙酸乙酯萃取上清液3次，合并萃取液，回收乙酸乙酯，得到萃取物；将萃取物用等重量聚酰胺拌样，上样聚酰胺柱进行层析，再用0～70％丙酮进行梯度洗脱，分部收集洗脱液；最后将70％丙酮洗脱液常压浓缩回收丙酮，再真空干燥，得到36g的藤梨根抗肿瘤提取物。其蒽醌类的含量为94％。
实施例7
藤梨根有效部位抑制肿瘤的细胞实验
方法：将肿瘤细胞(2×106/ml)，放入无菌的96孔培养平板，每孔加肿瘤细胞悬液50μl，加含15％小牛血清的1640培养液50μl，加入实施例1～3制备的藤梨根抗肿瘤提取物的水溶液10μl，每组3孔，孔内加等量的生理盐水振荡混匀，然后放入5％的CO2培养箱(37℃)培养24h，加入四唑盐(MTT)磷酸缓冲液，每孔10μl(每ml含MTT5mg)继续培养4h，然后加二甲砜100ml，终止反应，用酶胶免疫检测仪，分别于波长570nm，630nm处测定光密度OD值，计算结果。
计算公式：
结果：在胃癌RF细胞株和直肠癌LS174T细胞株肿瘤细胞培养实验中发现，藤梨根抗肿瘤提取物对两种肿瘤的抑制率显著高于其药材的水提取物(未经过调酸、萃取和聚酰胺层析的水提浓缩液)，随着剂量递增，抑瘤效果提高。结果见附表1。
附表1藤梨根有效部位对胃癌和直肠癌细胞的抑制实验
处理 浓度(mg/ml)  对胃癌抑制率％( x±SD) 对直肠癌抑制率％( x±SD)
  藤梨根药材的水提取物实施例1的水溶液实施例2的水溶液实施例3的水溶液     5125     25.3±2.756.5±4.581.5±7.293.6±6.8     27.1±2.253.2±4.684.9±6.392.4±7.1
实施例8
藤梨根有效部位抑制肿瘤的动物实验
方法：取小鼠S180瘤块，匀浆后稀释并调整细胞数(1×107/ml)，以0.2ml注入小鼠右腋皮下，24小时后随机分组给药，其中，将生理盐水作为对照组灌胃给药；CTX(环磷酰胺)组腹腔给药；藤梨根药材的水提取物(未经过调酸、萃取和聚酰胺层析的水提浓缩液)和实施例3、6制备的藤梨根抗肿瘤提取物均为灌胃给药，于第11天称重处死小鼠取瘤块，称瘤重和测瘤体积，计算抑瘤率。
结果：藤梨根药材的水提取物对S180抑瘤率为33.6％，而等剂量的本发明制备的藤梨根抗肿瘤提取物的抑瘤率为64.6％，与对照组有显著差异，而与CTX的差异不显著，提示它具有良好的抗肿瘤作用。结果见附表2。
附表2藤梨根有效部位对S180肉瘤的抑制动物实验
分组   剂量(g/Kg) 瘤重(g)( x±SD)   瘤体积(cm3)( x±SD) 抑瘤率(％)
    对照组CTX组藤梨根药材的水提取物实施例3实施例6 25201020     3.42±0.461.12±0.262.27±0.151.63±0.241.21±0.31   2.85±0.730.81±0.372.12±0.181.42±0.430.92±0.38 67.233.652.364.6

Claims (10)

1、一种藤梨根抗肿瘤提取物的制备方法，其特征在于包括下述步骤：
(1)用水或有机溶剂在70～100℃温度下浸提藤梨根药材，得到浸出液；
(2)将浸出液减压浓缩至热比重1.03～1.1，也可以是常压浓缩；然后将pH值调节至2～5，静置、沉淀，取得上清液；
(3)用乙酸乙酯萃取上清液，回收溶剂，得到萃取物；
(4)将萃取物进行聚酰胺层析，再用溶剂洗脱，得到洗脱液；
(5)将洗脱液浓缩、回收溶剂、干燥，得到藤梨根抗肿瘤提取物。
2、根据权利要求1所述的藤梨根抗肿瘤提取物的制备方法，其特征在于：步骤(1)中，所述有机溶剂为30～70％乙醇。
3、根据权利要求1所述的藤梨根抗肿瘤提取物的制备方法，其特征在于：步骤(1)中，所述浸提温度为70～80℃。
4、根据权利要求1所述的藤梨根抗肿瘤提取物的制备方法，其特征在于：步骤(1)中，所述浸提次数为1～3次；每次浸提时间为1～2小时；第一次浸提的藤梨根与水或有机溶剂的重量比为1∶8～10；第二次和第三次浸提的藤梨根与水或有机溶剂的重量比为1∶4～5。
5、根据权利要求1所述的藤梨根抗肿瘤提取物的制备方法，其特征在于：步骤(2)中，采用盐酸或醋酸调节浸出液的pH值。
6、根据权利要求1所述的藤梨根抗肿瘤提取物的制备方法，其特征在于：步骤(3)中，所述乙酸乙酯的用量为上清液的1～3倍体积量。
7、根据权利要求1所述的藤梨根抗肿瘤提取物的制备方法，其特征在于：步骤(4)中，先将萃取物水溶、或醇溶、或与少量聚酰胺混合、或醇溶后再与少量聚酰胺混合，然后再进行聚酰胺层析。
8、根据权利要求1所述的藤梨根抗肿瘤提取物的制备方法，其特征在于：步骤(4)中，采用溶剂梯度洗脱，分部收集得到洗脱液；所述溶剂为30～70％乙醇或丙酮。
9、一种根据权利要求1～8任一项所述方法制备的藤梨根抗肿瘤提取物。
10、根据权利要求9所述的藤梨根抗肿瘤提取物的应用，其特征在于：将藤梨根抗肿瘤提取物作为活性成分与可接受的药物载体结合制成用于治疗各种肿瘤的口服或注射单方以及复方制剂。
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Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN100506233C (zh) * 2005-12-09 2009-07-01 中国科学院化学研究所 一种藤梨根提取物及其抗癌用途
CN101518556B (zh) * 2009-04-07 2012-06-20 浙江大学 具有抗肿瘤和免疫佐剂作用的多糖及其制备方法和用途
CN102526140A (zh) * 2012-02-28 2012-07-04 陕西中医学院 藤梨根提取物及其制备方法
CN104825507A (zh) * 2015-05-07 2015-08-12 中国医科大学附属盛京医院 一种藤梨根提取物及其在制备治疗胆管癌药物中的应用
CN113583080A (zh) * 2021-08-13 2021-11-02 中南大学 一种化合物及其制备方法和应用

Cited By (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN100506233C (zh) * 2005-12-09 2009-07-01 中国科学院化学研究所 一种藤梨根提取物及其抗癌用途
CN101518556B (zh) * 2009-04-07 2012-06-20 浙江大学 具有抗肿瘤和免疫佐剂作用的多糖及其制备方法和用途
CN102526140A (zh) * 2012-02-28 2012-07-04 陕西中医学院 藤梨根提取物及其制备方法
CN104825507A (zh) * 2015-05-07 2015-08-12 中国医科大学附属盛京医院 一种藤梨根提取物及其在制备治疗胆管癌药物中的应用
CN104825507B (zh) * 2015-05-07 2018-03-20 中国医科大学附属盛京医院 一种藤梨根提取物及其在制备治疗胆管癌药物中的应用
CN113583080A (zh) * 2021-08-13 2021-11-02 中南大学 一种化合物及其制备方法和应用
CN113583080B (zh) * 2021-08-13 2022-09-30 中南大学 一种化合物及其制备方法和应用

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