CN1615958A - 用于治疗中风和胸痹的中药制剂及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种用于治疗中风和胸痹的中药制剂及其制备方法，它以黄芪、丹参、当归、川芎、赤芍等16味药材制备而成，具有益气活血、化淤通络之功效，主治气虚血滞、脉络淤阻所致中风中经络，半身不遂、肢体麻木、口眼歪斜、舌强语蹇及胸痹心痛、胸闷、心悸、气短；脑梗塞、冠心病心绞痛属于上述证候者；与现有技术相比，本发明具有剂量小、工艺精制，起效迅速、疗效显著的特点。

Description

用于治疗中风和胸痹的中药制剂及其制备方法

技术领域：本发明涉及一种中药制剂及其制备方法，特别是一种用于治疗中风和胸痹的中药制剂及其制备方法，属于中药的技术领域。

背景技术：中风和胸痹即心脑血管疾病，是严重危害人类健康特别是中老年人健康的常见病和多发病，目前尚无很好的根治性药物。本申请人于2001年8月20日向中国专利局提交了一份名称为“一种可用于治疗中风和胸弊的中药胶囊剂及其制法”的专利申请，并于2003年4月2日公开，公开号为1406609。它是由黄芪、丹参、当归、川芎、赤芍等16味中草药以原药材入药制备而成胶囊剂。但胶囊剂并不能完全满足医患双方的需求，特别是一些患者不愿意服用胶囊剂；另外胶囊剂的起效时间长，服用剂量大，也是现有技术存在的主要问题；另外，我们在实践中发现，由于该专利申请文件中提供的工艺比较粗，得到的产品疗效尚不够理想。因此，我们在原来的基础上，经反复研究，完成本发明。

发明内容：本发明的目的是提供一种剂量更小、工艺更精、起效更快、疗效更好的用于治疗中风和胸痹的中药制剂及其制备方法，特别是用于治疗中风和胸痹的软胶囊及滴丸制剂和它们的制备方法，以解决现有技术中存在的问题。

本发明是这样构成的：它主要是用如下重量份的原料药：黄芪40-90份、赤芍15-40份、丹参15-40份、当归15-40份、川芎15-40份、桃仁15-40份、红花8-20份、制乳香8-20份、制没药8-20份、鸡血藤10-30份、牛膝15-40份、桂枝10-30份、桑枝15-40份、地龙15-40份、全蝎8-20份和水蛭15-40份制备成软胶囊剂或滴丸剂。具体的，它主要是由如下重量份的原料药：黄芪66份、赤芍27份、丹参27份、当归27份、川芎27份、桃仁27份、红花13份、制乳香13份、制没药13份、鸡血藤20份、牛膝27份、桂枝20份、桑枝27份、地龙27份、全蝎13份和水蛭27份制备成软胶囊剂或滴丸剂。这种治疗中风和胸痹的中药制剂的制备方法是：采用超临界萃取法提取川芎、当归、桂枝、乳香、没药中的挥发油成分及丹参中丹参酮类脂溶性有效成分，地龙、全蝎、水蛭采取渗漉法提肽类等活性物质，然后将赤芍、黄芪、红花、桃仁、桑枝、牛膝、鸡血藤药材粗粉及超临界萃取后药渣和渗漉后药渣用水煎煮提取水溶性有效成分，再用醇沉法除去淀粉、粘液质、树胶类等水溶性杂质，最后分别加入不同的辅料制成软胶囊剂或滴丸剂。

本发明所述的软胶囊剂可以这样制备：取川芎、当归、桂枝、乳香、没药粗粉超临界萃取，取丹参粗粉超临界萃取，合并两个阶段萃取物备用；全蝎、水蛭、地龙加乙醇渗漉，收集渗漉液备用；取赤芍、黄芪、红花、桃仁、桑枝、牛膝、鸡血藤，与超临界萃取和渗漉后的药材合并，用水煎煮，滤液减压浓缩后醇沉，将上清液与渗漉液合并，减压浓缩，喷雾干燥，得干粉，加超临界萃取物、聚乙二醇400，胶体磨研磨，制胶，软胶囊机压丸，即得。具体地，取川芎、当归、桂枝、乳香、没药粗粉超临界萃取，萃取压力28Mpa，萃取温度40℃，萃取2小时，萃取物备用；取丹参粗粉超临界萃取，萃取压力30Mpa，萃取温度40℃，使用无水乙醇/药材，ml/g30％量的无水乙醇作为夹带剂，萃取2小时，回收溶剂后萃取物备用。合并两个阶段萃取物备用。取全蝎、水蛭、地龙药材，粉成粗粉，加一定量的乙醇/药材，g/g70％乙醇浸渍24小时后，进行渗漉，收集10倍渗漉液，渗漉液备用。取赤芍、黄芪、红花、桃仁、桑枝、牛膝、鸡血藤药材，粉成粗粉，与超临界萃取和渗漉后的药材合并，煎煮2次，每次加12倍量的水，每次2小时，纱布过滤，合并过滤液，减压浓缩至60℃相对密度为1.05，加95％乙醇至含醇65％后，静置24小时，将上清液与渗漉液合并，减压浓缩至60℃相对密度为1.1，喷雾干燥，即得干粉备用。取过140目筛的干粉及超临界萃取物，加入PEG-400，搅拌均匀后，胶体磨研磨，即得。按明胶∶甘油∶水为1∶0.3∶1的比例制胶，采用软胶囊机压丸，即得。

本发明所述的滴丸剂可以这样制备：取川芎、当归、桂枝、乳香、没药粗粉超临界萃取，取丹参粗粉超临界萃取，合并两个阶段萃取物备用；全蝎、水蛭、地龙加乙醇渗漉，收集渗漉液备用；取赤芍、黄芪、红花、桃仁、桑枝、牛膝、鸡血藤，与超临界萃取和渗漉后的药材合并，用水煎煮，滤液减压浓缩后醇沉，将上清液与渗漉液合并，减压浓缩，喷雾干燥，得干粉，过筛后，加入己熔融的聚乙二醇4000中，搅拌，再加入超临界萃取物，搅拌后加入滴丸机中，滴制成丸，即得。具体地，取川芎、当归、桂枝、乳香、没药粗粉超临界萃取，萃取压力28Mpa，萃取温度40℃，萃取2小时，萃取物备用；取丹参粗粉超临界萃取，萃取压力30Mpa，萃取温度40℃，使用无水乙醇/药材，ml/g30％量的无水乙醇作为夹带剂，萃取2小时，回收溶剂后萃取物备用。取全蝎、水蛭、地龙粗粉加乙醇/药材，ml/g70％乙醇浸渍24小时后，以5ml/min/kg的速度进行渗漉，收集10倍量渗漉液备用。取赤芍、黄芪、红花、桃仁、桑枝、牛膝、鸡血藤药材粗粉与超临界萃取后药渣和渗漉后药渣合并，浸泡3小时后，加12倍量的水，煎煮两次，每次2小时，合并煎液，减压浓缩至60℃相对密度为1.05，加95％乙醇至含醇量为65％，静置24小时，吸取上层清液，下层液离心，将离心后上清液与上层清液及渗漉液合并，减压浓缩至60℃相对密度为1.1，喷雾干燥，即得固形物。过120目筛后，加入3倍量已熔融的聚乙二醇4000中，搅拌，使分散均匀，再加入超临界萃取物，搅拌后加入滴丸机贮料罐中，保持药液温度80℃，滴头温度60℃，调节滴速，滴制成丸。

超临界法提取当归、川芎、乳香、没药、桂枝中挥发油，这类成分具有镇痛、调节心血管功能、抗凝血等作用。再用水提如川芎中的吡嗪类生物碱川芎嗪，具有调节心血管功能，改善血液流变性及微循环，抑制血小板聚集及血栓形成；如当归及川芎中的阿魏酸，具有抗血小板聚集作用。丹参含结晶性呋喃并菲醌类色素脂溶性成分，如丹参酮类，选用超临界法提取，并用水提取丹参水溶性成分丹参素、原儿茶醛等酚性成分及水提红花中的黄酮类成分，这些成分可扩张冠状动脉，增加血流量，改善微循环、抗血小板聚集和血栓的形成。另外用水煎煮提取一些苷类活性成分，如赤芍中的芍药苷、黄芪中的黄芪甲苷、牛膝中的牛膝皂苷，桃仁的氰苷；这些成分已证实有较好的生理活性。地龙、全蝎、水蛭选用渗漉法，再用水提取多肽类活性成分，这类成分具有溶栓作用，可改善血液循环的功能。本发明将现有技术以原药材直接入药改成用提取物入药，通过提取有效成分，除去其中大量非活性成分，疗效大大提高，所以可以在保证疗效的基础上达到减少临床服用剂量的目的。

采用水溶性聚乙二醇固体分散技术，改善了药物的溶解性能，加快溶出速度，提高生物利用度，提高了临床疗效，并达到速效目的。

现以软胶囊剂为例，说明其主要药效学：

一、对大鼠局部脑缺血损伤的影响

1、大鼠50只随机分为假手术组(PEG400)，模型对照组(PEG400)，本发明胶囊组(280mg/kg)，本发明软胶囊小剂量组(30mg/kg)、中剂量组(60mg/kg)、大剂量组(120mg/kg)，每组10只。连续灌胃给药3天，第2天给药后禁食16小时，末次给药90分钟后，水合氯醛(360mg/kg，ip)麻醉，分离右侧颈总动脉，夹闭颈内、颈总动脉，颈外动脉近心端及远心端结扎，中间剪断。将颈外动脉游离端拉至与颈内动脉成一条直线，将栓线(选用直径0.24mm尼龙线，长度5.0cm)由颈外动脉插入至颅内，遇轻微阻力时停止，插入深度约为2cm。结扎颈外动脉开口，并打开颈总动脉动脉夹，消毒缝合伤口，造成右侧大脑中动脉缺血模型；假手术组仅进行右侧颈总动脉、颈内动脉、颈外动脉的分离(以上实验均在23℃～25℃进行)。24小时后按如下方法及标准观察并记录大鼠的行为障碍：(1)提鼠尾观察前肢屈曲情况，如双前肢对称伸向地面，计为0分，如手术对侧前肢出现腕屈曲计为1分，肘屈曲计为2分，肩内旋计为3分，既有腕屈曲和/或肘屈曲，又有肩内旋者，计为4分。(2)将动物置于平地面上，分别推双肩向对侧移动，检查阻力。如双侧阻力对等且有力，计为0分，如向手术对侧推动时阻力下降者，根据下降程度不同分为轻、中、重三度，分别计为1，2和3分。(3)将动物双前肢置一金属网上，观察双前肢的肌张力。双前肢肌张力对等且有力者计为0分。同样根据手术对侧肌张力下降程度不同计为1，2和3分。(4)动物有不停地向一侧转圈者，计为1分。根据标准评分，满分为11分，分数越高，表示动物行为障碍越严重。数据用 x±SD表示，以参比差值法进行统计学检验。

行为评分后处死大鼠，取脑，去掉嗅球、小脑和低位脑干，冠状切成5片，脑片用红四氮唑(TTC)染色，正常组织经染色后呈红色，梗塞组织呈白色，染色后照相，用中国航空航天大学病理图像分析软件求梗塞面积比。数据以 x±SD表示，并与空白对照组比较，T-test检验。

表1本发明软胶囊对大鼠局部脑缺血损伤的影响( x±SD，n＝10)

组别                        行为障碍              缺血面积(％)

假手术组                    0                     0

模型对照组                  9.7±1.1              23.9±4.5

本发明胶囊组                7.0±2.3*             18.9±4.2*

本发明软胶囊大剂量组        6.1±3.0**            15.3±4.6**

本发明软胶囊中剂量组        7.4±2.2*^#           18.1±3.3*^#

本发明软胶囊小剂量组        8.5±1.8              21.1±5.1

与模型对照组比较*P＜0.05，**P＜0.01；与本发明胶囊比较^#P＞0.05

结果如表1所示，缺血24小时后，模型大鼠表现出明显的行为障碍，大鼠脑组织也出现明显的灶状缺血区，坏死面积达到全脑的25％左右；给予不同剂量的本发明软胶囊，动物行为障碍有不同程度的减轻，大鼠脑缺血区坏死面积也有明显降低，且呈剂量依赖性；该结果表明：相同原料药的本发明软胶囊与胶囊作用强度相当(P＞0.05)。

2、动物随机分为假手术组(医用豆油)，模型对照组(医用豆油)，本发明胶囊组(280mg/kg)，本发明软胶囊组(60mg/kg)、每组90只。连续灌胃给药3天，并于第1次灌胃给药后每隔8小时，各给分批取10只大鼠，水合氯醛(360mg/kg，ip)麻醉，分离右侧颈总动脉，夹闭颈内、颈总动脉，颈外动脉近心端及远心端结扎，中间剪断。将颈外动脉游离端拉至与颈内动脉成一条直线，将栓线(选用直径0.24mm尼龙线，长度5.0cm)由颈外动脉插入至颅内，遇轻微阻力时停止，插入深度约为2cm。结扎颈外动脉开口，并打开颈总动脉动脉夹，消毒缝合伤口，造成右侧大脑中动脉缺血模型；假手术组仅进行右侧颈总动脉、颈内动脉、颈外动脉的分离(以上实验均在23℃～25℃进行)。并于术后24小时按如下方法及标准观察并记录大鼠的行为障碍：(1)提鼠尾观察前肢屈曲情况，如双前肢对称伸向地面，计为0分，如手术对侧前肢出现腕屈曲计为1分，肘屈曲计为2分，肩内旋计为3分，既有腕屈曲和/或肘屈曲，又有肩内旋者，计为4分。(2)将动物置于平地面上，分别推双肩向对侧移动，检查阻力。如双侧阻力对等且有力，计为0分，如向手术对侧推动时阻力下降者，根据下降程度不同分为轻、中、重三度，分别计为1，2和3分。(3)将动物双前肢置一金属网上，观察双前肢的肌张力。双前肢肌张力对等且有力者计为0分。同样根据手术对侧肌张力下降程度不同计为1，2和3分。(4)动物有不停地向一侧转圈者，计为1分。根据标准评分，满分为11分，分数越高，表示动物行为障碍越严重。数据用 x±SD表示，以参比差值法进行统计学检验。

行为评分后处死大鼠，取脑，去掉嗅球、小脑和低位脑干，冠状切成5片，脑片用红四氮唑(TTC)染色，正常组织经染色后呈红色，梗塞组织呈白色，染色后照相，用中国航空航天大学病理图像分析软件求梗塞面积比。并分别观察给药后8h、16h、24h、32h、40h、48h、56h、64h、72h后，血栓的湿重，观察本发明胶囊及软胶囊的起效时间及速度。

数据以 x±SD表示，并与空白对照组比较，T-test检验。

表2对脑缺血大鼠行为障碍的影响( x±SD，n＝10)

组别	8h	16h	24h	32h	40h	48h	56h	64h	72h
										假手术组	0	0	0	0	0	0	0	0	0
模型对照组	9.6±1.9	9.7±1.3	9.6±1.7	9.7±1.2	9.6±1.5	9.7±1.7	9.7±1.4	9.8±1.1	9.7±1.1
										本发明胶囊组	9.5±1.8	9.4±2.0	9.4±1.9	9.4±1.8	9.0±1.6	8.5±1.9	8.2±1.4*	7.5±2.2**	7.0±2.3**
本发明软胶囊组	9.5±1.7	9.4±2.1	9.3±1.7	9.3±2.2	8.5±1.4	8.2±1.3*	8.0±1.7*	7.4±2.1**	7.1±2.5**

表3对脑缺血大鼠缺血面积的影响( x±SD，n＝10)

组别	8h	16h	24h	32h	40h	48h	56h	64h	72h
										假手术组	0	0	0	0	0	0	0	0	0
模型对照组	22.7±5.1	23.5±4.7	24.3±4.8	23.4±4.5	23.4±4.7	23.8±5.0	24.1±5.1	23.1±4.6	22.7±5.2
										本发明胶囊组	22.1±4.8	22.4±4.5	23.1±4.9	22.1±4.8	21.8±4.3	20.9±5.4	20.1±3.7	19.4±5.0*	18.9±4.2*
本发明软胶囊组	22.5±5.0	22.1±3.9	22.9±5.1	21.7±3.8	21.5±4.4	20.1±5.0	20.1±3.3*	18.7±4.8*	18.1±3.3*

与模型对照组比较*P＜0.05，**P＜0.01。

结果如表2及表3所示，缺血24小时后，模型大鼠表现出明显的行为障碍，大鼠脑组织也出现明显的灶状缺血区，坏死面积达到全脑的25％左右；给予本发明胶囊及本发明软胶囊，动物行为障碍有不同程度的减轻，大鼠脑缺血区坏死面积也有明显降低，但相同原料药的本发明软胶囊在起效时间上早于本发明胶囊(本发明软胶囊于给药后48h起效，而胶囊组则于56h起效)。

二、对大鼠心肌缺血损伤的影响

取大鼠50只，随机分为空白对照组(PEG400)、本发明胶囊(280mg/kg)、本发明软胶囊小剂量组(30mg/kg)、中剂量组(60mg/kg)、大剂量组(120mg/kg)，每组10只。连续灌胃给药3天，第2天给药后禁食16小时，末次给药90分钟后，以20％乌拉旦1.2g/kg麻醉，记录正常心电图，随即自左侧3～4肋间开胸，暴露心脏，于肺动脉圆锥及左房间找出冠脉左前降支(LAD)，在距起点2～3mm处穿一“0”号线结扎，将心脏送回胸腔，挤出胸腔内血液和气体，立即缝合胸壁。整个手术在30秒内完成。记录手术后5、15、30、45、60、90、120、150、180、210、240分钟心电图。

手术360分钟后，腹主动脉采血，分离血清，按照检测试剂盒说明书所述方法测定血清肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)活性。开胸取心脏，除去心房，将心室横切成3～4片，置入pH7.4的0.25％氯化硝基四氮唑蓝(NBT)溶液，37℃染色，待梗死心肌界线清楚时立即取出，分离梗死心肌与正常心肌，分别称重，计算心肌梗死百分比(梗死心肌占全心室肌湿重的百分比)。

数据以 x±SD表示，并与空白对照组比较，T-test检验。

表4本发明软胶囊对心肌缺血大鼠心电图J点的影响( x±SD，n＝10)

                                            冠状动脉结扎后各时间点心电图J点值(mv)

组别

                        5min            15min          30min             60min           90min           120min          180min          240min

空白对照组              0.45±0.18      0.44±0.13     0.45±0.1         0.39±0.08      0.36±0.08      0.35±0.06      0.33±0.06      0.31±0.08

本发明胶囊组            0.34±0.07      0.40±0.13     0.35±0.06^*      0.32±0.04^*    0.3±0.04^*    0.29±0.06^*    0.25±0.09^*   0.29±0.07

本发明软胶囊大剂量组    0.31±0.09^*    0.32±0.06^*   0.35±0.08^*      0.30±0.07^*   0.24±0.07^**   0.27±.09^*     0.27±0.09^*   0.25±0.08

本发明软胶囊中剂量组    0.33±0.12^#    0.31±0.1^*#   0.30±0.08^**#     0.29±0.08^*#   0.30±0.07^#   0.30±0.07^#    0.26±0.06^*#   0.28±0.06^#

本发明软胶囊小剂量组    0.34±0.14      0.38±0.16     0.37±0.14         0.34±0.18      0.33±0.14      0.32±0.15      0.32±0.14      0.31±0.14

与空白对照组对应时间点J点值比较^*P＜0.05，^**P＜0.01；与本发明胶囊对应时间点J点值比较^#P＞0.05。

表5本发明软胶囊对心肌缺血大鼠血清CK、LDH、AST活性以及心肌梗死百分比的影响( x±SD，n＝10)

                        CK                LDH               AST               心肌梗死百分比

组别

                        (U·L^-1)          (U·L^-1)         (U·L^-1)          (％)

空白对照组              958.4±254.9      871.4±321.9      179.8±45         25.3±3.1

本发明胶囊组            703.1±179^*      471.1±144.1^**   126.8±48.1^*     21.2±4.2^*

本发明软胶囊大剂量组    663.4±269.5^**   436.7±177.4^**   123.2±19^**      20.5±3.3^**

本发明软胶囊中剂量组    652.5±263.3^*#   502.3±242.2^*#   126.7±24.5^*#    21.0±4.6^*#

本发明软胶囊小剂量组    773.9±188.2      746.4±237.0      152.9±34.0       24.4±4.9

与空白对照组比较^*P＜0.05，^**P＜0.01；与本发明胶囊比较^#P＞0.05。

结果如表4及表5所示，结扎大鼠冠状动脉左前降支可以导致大鼠急性心肌缺血，表现为心电图J点明显抬高，血清肌酸激酶、乳酸脱氢酶、天冬氨酸氨基转移酶活性(含量)明显升高，心肌梗死百分比明显增加。本发明软胶囊60mg/kg、120mg/kg与本发明胶囊280mg/kg均可在冠状动脉结扎后一定时间范围内抑制心电图J点的抬高；明显抑制血清肌酸激酶、乳酸脱氢酶、天冬氨酸氨基转移酶活性(含量)的升高；降低心肌梗死百分比。相同原料药的本发明软胶囊与胶囊作用强度相当(P＞0.05)。

三、对大鼠体内血栓形成的影响

1、取大鼠50只，随机分为空白对照组(PEG400)，本发明胶囊组(280mg/kg)，本发明软胶囊小剂量组(30mg/kg)、中剂量组(60mg/kg)、大剂量组(120mg/kg)，每组10只。连续灌胃给药3天，第2天给药后禁食16小时，末次给药90分钟后，水合氯醛麻醉(360mg/kg，i.p.)，分离右侧颈总动脉及左颈外静脉，在聚乙烯管中放入一根长5cm已称重的七号丝线。以含肝素钠(50U/ml)的生理盐水溶液充满聚乙烯管，聚乙烯管的一端插入左颈外静脉，另一端插入右颈总动脉。打开夹闭血管的动脉夹，使血流从右总颈动脉流经聚乙烯管后，返回左颈外静脉。开放血流15min后立即取出棉线称重，减去丝线重量即得血栓湿重。

数据以 x±SD表示，并与空白对照组比较，T-test检验。

表6本发明软胶囊对大鼠动—静脉旁路血栓形成的影响( x±s，n＝10)

组别                      血栓湿重(mg)          抑制率(％)

空白对照组                32.8±9.4

本发明胶囊组              21.2±11.8**              35

本发明软胶囊大剂量组      21.3±10.2**              35

本发明软胶囊中剂量组      22.3±12.2*^#             32

本发明软胶囊小剂量组      26.9±12.2                18

与空白对照组比较*P＜0.05，**P＜0.01；与本发明胶囊比较^#P＞0.05。

结果如表6所示，开放血流15min后丝线上有明显的血栓黏附，本发明软胶囊60mg/kg、120mg/kg、本发明胶囊280mg/kg均可明显抑制血栓的形成，与空白对照组比较有显著性差异(P＜0.05或P＜0.01)；相同原料药的本发明软胶囊与胶囊作用强度相当(P＞0.05)。

四、对小鼠凝血时间的影响

昆明种小鼠50只，随机分为空白组(PEG400)，本发明胶囊组(560mg/kg)，本发明软胶囊小剂量组(60mg/kg)、中剂量组(120mg/kg)、大剂量组(240mg/kg)，每组10只。连续灌胃给药3天，第2天给药后禁食16小时，末次给药90分钟后，眼眶取血，用玻片法测定凝血时间(实验在22℃下进行)。

数据以 x±SD表示，并与空白对照组比较，T-test检验。

表7本发明软胶囊对小鼠凝血时间的影响( x±SD，n＝10)

组别                     凝血时间(s)          延长率(％)

空白对照组               78.3±16.7

本发明胶囊组             98.3±17.9*              26

本发明软胶囊大剂量组     106.7±23.4**            36

本发明软胶囊中剂量组     98.4±20.5*^#            26

本发明软胶囊小剂量组     85.0±22.9               9

与空白对照组比较*P＜0.05，**P＜0.01；与本发明胶囊比较^#P＞0.05

结果如表7所示，本发明软胶囊120mg/kg、240mg/kg、本发明胶囊560mg/kg剂量组凝血时间明显长于空白对照组(P＜0.05或P＜0.01)；相同原料药的本发明软胶囊与胶囊作用强度相当(P＞0.05)。

2、动物随机分为空白对照组(医用豆油)，本发明胶囊组(280mg/kg)，本发明软胶囊组(60mg/kg)、每组90只。连续灌胃给药3天，并于第1次灌胃给药后第隔8小时，各给分批取10只大鼠，水合氯醛麻醉(360mg/kg，ip.)，分离右侧颈总动脉及左颈外静脉，在聚乙烯管中放入一根长5cm已称重的七号丝线。以含肝素钠(50U/ml)的生理盐水溶液充满聚乙烯管，聚乙烯管的一端插入左颈外静脉，另一端插入右颈总动脉。打开夹闭血管的动脉夹，使血流从右总颈动脉流经聚乙烯管后，返回左颈外静脉。开放血流15min后立即取出棉线称重，减去丝线重量即得血栓湿重，并分别观察给药后8h、16h、24h、32h、40h、48h、56h、64h、72h后，血栓的湿重，观察本发明胶囊及软胶囊的起效时间及速度。

数据以 x±SD表示，并与空白对照组比较，T-test检验。

表8对大鼠动—静脉旁路血栓形成的影响( x±s，n＝10)

组别	8h	16h	24h	32h	40h	48h	56h	64h	72h
										空白对照组	33.1±10.2	32.5±9.6	32.7±11.5	32.1±9.1	34.2±11.9	33.4±10.5	33.5±9.1	32.4±9.9	32.8±9.4
本发明胶囊组	32.7±9.8	32.1±10.2	31.8±9.4	31.0±10.4	29.6±11.3	28.8±9.3	26.4±10.8	24.6±9.5	22.3±12.2*
										本发明软胶囊组	32.8±10.5	31.5±9.7	30.1±9.6	29.7±8.8	29.2±10.7	25.1±8.4	24.3±9.7*	23.9±9.2*	21.2±11.8*

与空白对照组比较^*P＜0.05。

结果如表8所示，开放血流15min后丝线上有明显的血栓黏附，本发明软胶囊60mg/kg、本发明胶囊280mg/kg均可明显抑制血栓的形成，与空白对照组比较有显著性差异(P＜0.05或P＜0.01)；相同原料药的本发明软胶囊与胶囊作用强度相当(P＞0.05)。但本发明软胶囊的起效速度快于本发明胶囊(56h开始起效，与空白对照组比较有显著性差异，P＜0.05。)

以上实验说明与胶囊剂相比，软胶囊剂在保证疗效的基础上，减少了临床服用剂量。胶囊剂每粒0.4g，每日3次，每次2-4粒。软胶囊剂每粒0.4g，每日3次，每次1-2粒，剂量减少了一半。另外，起效速度也快于胶囊剂。

滴丸剂主要药效学结论与软胶囊剂相同。

与现有技术相比，本发明明显具有剂量小、工艺精制，起效快，疗效显著的特点，达到了发明的目的。

对于两种剂型制备需要选用的辅料及工艺，我们作了实验选择：

对于软胶囊剂：

1、囊材配比关系的确定

软胶囊囊材的主要成分为基质和增塑剂组成。其中基质常用物质为明胶，起到软胶囊骨架的作用；增塑剂常用物质为甘油，填充于骨架中的间隙，可增加胶皮的可塑性。在熬胶过程中，为了保持胶液的稳定性，还须加入适量的水，水不宜太多。水过量，胶液的冻力升高，给制胶带来困难，同时也将延长定型及干燥的时间。

为考察不同配比的关系对囊壳的崩解时间的影响，我们固定明胶及水的量，而加入不同比例的甘油进行考察：

               表9囊材的不同配比对崩解时间的影响

                              配比

                                                       崩解时间(分

组(n＝4)

                明胶(份)       甘油(份)      水(份)       钟)

1               1              0             1            26

2               1              0.1           1            18

3               1              0.3           1            13

4               1              0.6           1            10

通过试验可知，随着甘油量的增加，崩解时间逐渐缩短。但另一方面甘油量的过多，制备的软胶囊较软，成形性差。我们经反复试验，选择明胶∶甘油∶水为1∶0.3∶1的比例制胶。

2、内容物处方研究

内容物处方研究主要是进行稀释剂的选择，理论上软胶囊中可作为稀释剂的辅料有多种，如聚乙二醇400，植物油等。我们选择三种不同的处方系统进行了研究和比较，处方中药物成分与各辅料的配比见表7。

                   表10三种不同处方

处方1                 处方2               处方3

本发明提取物          本发明提取物        本发明提取物

(43.0g)               (43.0g)             (43.0g)

                      蜂蜡(2.0g)

豆油(57.0g)           豆油(55.0g)         PEG400(57.0g)

制法：

处方1取处方量的本发明提取物，加入处方量的豆油研磨均匀即可。

处方2  取处方量蜂蜡融解于加热的豆油中，将此溶液与处方量的本发明提取物研磨均匀即可。

处方3  取处方量的本发明提取物，加入处方量的PEG-400研磨均匀即可。

结果：由处方1所制得软胶囊内容物静置后快速分层，部分不溶性成分聚集成团，难于再次分散，可见药物中含有的水溶性成分与豆油的相容性较差，不利于其在豆油中的均匀分散；处方2中添加蜂蜡后，明显提高了提取物的分散效果，但内容物的粘稠度也相应增大，流动性降低。同时，静置较长时间后仍出现明显的聚集和分层，不适于制作软胶囊；由处方3所制得软胶囊内容物细腻、均匀，长时间室温放置后仍未见分层或聚集现象，且流动性较好，适于制作软胶囊。

对于滴丸剂：

滴丸剂常用的基质有聚乙二醇6000、聚乙二醇4000、聚乙二醇400、聚乙二醇10000、明胶、硬脂酸、单硬脂酸甘油酯、氢化植物油等，本发明选用熔点低同时具有良好分散力和较大内聚力的聚乙二醇4000和用于调整滴丸硬度、耐热性及流动性的PEG6000进行滴丸成型处方的设计和筛选。

滴丸剂常用的冷却剂有液体石蜡、植物油、甲基硅油等。冷却剂与药液间的密度差是影响滴丸的重要因素。在一定密度差范围内，密度越接近，滴丸的形状越圆。而滴丸熔融物的相对密度一般都大于1，与甲基硅油的相对密度(0.970-0.980)较接近，通过多次预试，我们选用比重较大且冷却效果较好的甲基硅油为冷却剂

处方设计：先以PEG4000作基质，将其熔融后与药物混合均匀，80℃保温。以10-15℃的甲基硅油为冷却剂，加入滴丸机中滴制成丸，以滴丸基本能成型为依据，筛选出药物与基质的最低配比为1∶3，在此基础上，以PEG6000替换PEG4000，设计出一系列不同配比的基质处方，见下表。

                     成型处方组成

处方号           药物           PEG4000         PEG6000

  1                1                3               0

  2                1                2               1

  3                1                1               2

  4                1                0               3

按表8取各处方的药物和基质，制成滴丸，以丸的圆整度、溶散时限、硬度为考察指标。实验结果表明，当混合基质中PEG6000比例增大时，料液的粘度较高，易拖尾，圆整度差。而采用PEG4000为基质制成的滴丸，其圆整度、硬度、溶散时限均符合滴丸剂的要求，故本试验筛选本发明滴丸最佳成型处方是药物∶PEG4000为1∶3。

具体实施方式

本发明的实施例1：取川芎15份、当归15份、桂枝10份、乳香8份、没药8份粗粉超临界萃取，取丹参粗粉15份超临界萃取，合并两个阶段萃取物备用；全蝎8份、水蛭15份、地龙15份粗粉加乙醇渗漉，收集渗漉液备用；取赤芍15份、黄芪40份、红花8份、桃仁15份、桑枝15份、牛膝15份、鸡血藤10份与超临界萃取和渗漉后的药材合并，用水煎煮，滤液减压浓缩后醇沉，将上清液与渗漉液合并，减压浓缩，喷雾干燥，得干粉备用；取上述干粉及超临界萃取物，加分散剂，制成软胶囊或滴丸。

本发明的实施例2：取川芎20份、当归35份、桂枝15份、制乳香18份、制没药10份粗粉超临界萃取，取丹参粗粉35份超临界萃取，合并两个阶段萃取物备用；全蝎10份、水蛭35份、地龙20份加乙醇渗漉，收集渗漉液备用；取赤芍35份、黄芪50份、红花18份、桃仁20份、桑枝35份、牛膝20份、鸡血藤25份，与超临界萃取和渗漉后的药材合并，用水煎煮，滤液减压浓缩后醇沉，将上清液与渗漉液合并，减压浓缩，喷雾干燥，得干粉，加超临界萃取物、聚乙二醇400，胶体磨研磨，制胶，软胶囊机压丸，即得。

本发明的实施例3：取川芎35份、当归20份、桂枝25份、乳香10份、没药18份粗粉超临界萃取，取丹参20份粗粉超临界萃取，合并两个阶段萃取物备用；全蝎18份、水蛭10份、地龙35份加乙醇渗漉，收集渗漉液备用；取赤芍20份、黄芪80份、红花10份、桃仁35份、桑枝15份、牛膝35份、鸡血藤15份，与超临界萃取和渗漉后的药材合并，用水煎煮，滤液减压浓缩后醇沉，将上清液与渗漉液合并，减压浓缩，喷雾干燥，得干粉，过筛后，加入已熔融的聚乙二醇4000中，搅拌，再加入超临界萃取物，搅拌后加入滴丸机中，滴制成丸，即得。

本发明的实施例4：取药材粗粉川芎15份、当归15份、桂枝10份、乳香8份、没药8份超临界萃取，萃取压力28Mpa，萃取温度40℃，萃取2小时，萃取物备用；取丹参粗粉15份超临界萃取，萃取压力30Mpa，萃取温度40℃，使用30％量(无水乙醇/药材，ml/g)的无水乙醇作为夹带剂，萃取2小时，回收溶剂后萃取物备用。合并两个阶段萃取物备用。取药材粗粉全蝎20份、水蛭15份、地龙15份，加70％乙醇(70％乙醇/药材，g/g)渗漉，收集10倍渗漉液备用。取药材粗粉赤芍15份、黄芪40份、红花8份、桃仁15份、桑枝15份、牛膝15份、鸡血藤10份药材，与超临界萃取和渗漉后的药材合并，煎煮2次，每次加12倍量的水，每次2小时，合并过滤液，减压浓缩至相对密度为1.05(60℃)，加95％乙醇至含醇65％后，将上清液与渗漉液合并，减压浓缩至相对密度为1.1(60℃)，喷雾干燥，即得干粉，过140目筛，加超临界萃取物，加入PEG-400至250份，胶体磨研磨，按明胶∶甘油∶水为1∶0.3∶1的比例制胶，软胶囊机压丸。

本发明的实施例5：取药物粗粉川芎27份、当归27份、桂枝20份、乳香(制)13份、没药(制)13份超临界萃取，萃取压力28Mpa，萃取温度40℃，萃取2小时，萃取物备用；取丹参粗粉27份超临界萃取，萃取压力30Mpa，萃取温度40℃，使用30％量(无水乙醇/药材，ml/g)的无水乙醇作为夹带剂，萃取2小时，回收溶剂后萃取物备用。取药材粗粉全蝎13份、水蛭27份、地龙27份，加70％乙醇渗漉，收集10倍量(70％乙醇/药材，ml/g)渗漉液备用。取药材粗粉赤芍27份、黄芪66份、红花13份、桃仁27份、桑枝27份、牛膝27份、鸡血藤20份，与超临界萃取后药渣和渗漉后药渣合并，加12倍量的水，煎煮2次，每次2小时，合并煎液，减压浓缩至相对密度为1.05(60℃)，加95％乙醇至含醇量为65％，吸取上层清液，下层液离心，将离心后上清液与上层清液及渗漉液合并，减压浓缩至相对密度为1.1(60℃)，喷雾干燥，得固形物，过120目筛后，加入3倍量已熔融的聚乙二醇4000中，搅拌，再加入超临界萃取物，搅拌后加入滴丸机贮料罐中，保持药液温度80℃，滴头温度60℃，调节滴速，滴制成丸。

Claims (7)

1、一种用于治疗中风和胸痹的中药制剂，其特征在于：它主要是用如下重量份的原料药：黄芪40-90份、赤芍15-40份、丹参15-40份、当归15-40份、川芎15-40份、桃仁15-40份、红花8-20份、制乳香8-20份、制没药8-20份、鸡血藤10-30份、牛膝15-40份、桂枝10-30份、桑枝15-40份、地龙15-40份、全蝎8-20份和水蛭15-40份制备成软胶囊剂或滴丸剂。

2、根据权利要求1所述的用于治疗中风和胸痹的中药制剂，其特征在于：准确的说，它主要是用如下重量份的原料药：黄芪66份、赤芍27份、丹参27份、当归27份、川芎27份、桃仁27份、红花13份、制乳香13份、制没药13份、鸡血藤20份、牛膝27份、桂枝20份、桑枝27份、地龙27份、全蝎13份和水蛭27份制备成软胶囊剂或滴丸剂。

3、如权利要求1或2所述的用于治疗中风和胸痹的中药制剂的制备方法，其特征在于：采用超临界萃取法提取川芎、当归、桂枝、乳香、没药中的挥发油成分及丹参中丹参酮类脂溶性有效成分，地龙、全蝎、水蛭采取渗漉法提肽类等活性物质，然后将赤芍、黄芪、红花、桃仁、桑枝、牛膝、鸡血藤几味药材粗粉及超临界萃取后药渣和渗漉后药渣用水煎煮提取水溶性有效成分，再用醇沉法除去淀粉、粘液质、树胶类等水溶性杂质，最后分别加入不同的辅料制成软胶囊剂或滴丸剂。

4、根据权利要求3所述的用于治疗中风和胸痹的中药制剂的制备方法，其特征在于：所述软胶囊剂可以这样制备：取川芎、当归、桂枝、乳香、没药粗粉超临界萃取，取丹参粗粉超临界萃取，合并两个阶段萃取物备用；全蝎、水蛭、地龙加乙醇渗漉，收集渗漉液备用；取赤芍、黄芪、红花、桃仁、桑枝、牛膝、鸡血藤，与超临界萃取和渗漉后的药材合并，用水煎煮，滤液减压浓缩后醇沉，将上清液与渗漉液合并，减压浓缩，喷雾干燥，得干粉备用；取上述干粉及超临界萃取物，加聚乙二醇400，胶体磨研磨，制胶，软胶囊机压丸，即得。

5、根据权利要求3或4所述的用于治疗中风和胸痹的中药制剂的制备方法，其特征在于：所述软胶囊剂可以这样制备：取川芎、当归、桂枝、乳香、没药粗粉超临界萃取，萃取压力28Mpa，萃取温度40℃，萃取2小时，萃取物备用；取丹参粗粉超临界萃取，萃取压力30Mpa，萃取温度40℃，使用无水乙醇/药材，ml/g30％量的无水乙醇作为夹带剂，萃取2小时，回收溶剂后萃取物备用。合并两个阶段萃取物备用。取全蝎、水蛭、地龙药材，粉成粗粉，加一定量的乙醇/药材，g/g70％乙醇浸渍24小时后，进行渗漉，收集10倍渗漉液，渗漉液备用。取赤芍、黄芪、红花、桃仁、桑枝、牛膝、鸡血藤药材，粉成粗粉，与超临界萃取和渗漉后的药材合并，煎煮2次，每次加12倍量的水，每次2小时，纱布过滤，合并过滤液，减压浓缩至60℃相对密度为1.05，加95％乙醇至含醇65％后，静置24小时，将上清液与渗漉液合并，减压浓缩至60℃相对密度为1.1，喷雾干燥，即得干粉备用。取过140目筛的干粉及超临界萃取物，加入PEG-400，搅拌均匀后，胶体磨研磨，即得；按明胶∶甘油∶水为1∶0.3∶1的比例制胶，采用软胶囊机压丸，即得。

6、根据权利要求3所述的用于治疗中风和胸痹的中药制剂的制备方法，其特征在于：所述滴丸剂这样制备：取川芎、当归、桂枝、乳香、没药粗粉超临界萃取，取丹参粗粉超临界萃取，合并两个阶段萃取物备用；全蝎、水蛭、地龙加乙醇渗漉，收集渗漉液备用；取赤芍、黄芪、红花、桃仁、桑枝、牛膝、鸡血藤，与超临界萃取和渗漉后的药材合并，用水煎煮，滤液减压浓缩后醇沉，将上清液与渗漉液合并，减压浓缩，喷雾干燥，得干粉，过筛后，加入已熔融的聚乙二醇4000中，搅拌，再加入超临界萃取物，搅拌后加入滴丸机中，滴制成丸，即得。

7、根据权利要求3或6所述的用于治疗中风和胸痹的中药制剂的制备方法，其特征在于：所述滴丸剂可以这样制备：取川芎、当归、桂枝、乳香、没药粗粉超临界萃取，萃取压力28Mpa，萃取温度40℃，萃取2小时，萃取物备用；取丹参粗粉超临界萃取，萃取压力30Mpa，萃取温度40℃，使用无水乙醇/药材，ml/g30％量的无水乙醇作为夹带剂，萃取2小时，回收溶剂后萃取物备用。取全蝎、水蛭、地龙粗粉加乙醇/药材，ml/g70％乙醇浸渍24小时后，以5ml/min/kg的速度进行渗漉，收集10倍量渗漉液备用。取赤芍、黄芪、红花、桃仁、桑枝、牛膝、鸡血藤药材粗粉与超临界萃取后药渣和渗漉后药渣合并，浸泡3小时后，加12倍量的水，煎煮两次，每次2小时，合并煎液，减压浓缩至60℃相对密度为1.05，加95％乙醇至含醇量为65％，静置24小时，吸取上层清液，下层液离心，将离心后上清液与上层清液及渗漉液合并，减压浓缩至60℃相对密度为1.1，喷雾干燥，即得固形物。过120目筛后，加入3倍量已熔融的聚乙二醇4000中，搅拌，使分散均匀，再加入超临界萃取物，搅拌后加入滴丸机贮料罐中，保持药液温度80℃，滴头温度60℃，调节滴速，滴制成丸。