CN1557489A

CN1557489A - 从乳清中制备口服免疫球蛋白

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Publication number: CN1557489A
Application number: CNA2004100158469A
Authority: CN
Inventors: 高春平
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 2004-01-15
Filing date: 2004-01-15
Publication date: 2004-12-29

Abstract

本发明涉及一种口服免疫球蛋白制剂的制备方法及其应用，尤其涉及一种从牛奶的乳清中制备具有生物活性免疫球蛋白制剂的制备方法及其应用，其特征是，以乳清为原料，通过单次或多次超微滤膜分离、过滤、浓缩等程序，分离过滤乳清中其他成分，制备高纯度免疫球蛋白制剂，在制备工艺中严格控制温度，防止免疫球蛋白生物活性成分的丧失，保持其高生物活性特征，制备多种形式制剂，帮助人体对抗微生物侵害。

Description

从乳清中制备口服免疫球旦白

所属技术领域

本发明涉及一种口服免疫球旦白制剂的制备方法及其应用，尤其涉及一种从牛奶的乳清中制备具有生物活性免疫球旦白制剂的制备方法及其应用。

发明技术背景

乳清是指牛奶去除酪旦白后的液体，通常是制备奶酪过程中的副产品，目前用牛奶中的酪旦白制备磷酸多肽时，乳清也是其副产品。据国外资料统计，每年约有8500万吨乳清作为生产奶酪的副产品，其中有3400万吨不能得到有效利用而被废弃。

现代研究证明，乳清内含用含量较低，但仍具有生物活性的免疫球旦白，这种具有生物活性的免疫球旦白能有效对抗各种常见的细菌，如大肠杆菌、肠道沙门氏杆菌等，以口服形式施用较高纯度的这种免疫球旦白制剂，能够帮助对抗胃肠道多种微生物感染，尤其对非母乳喂养的婴儿、体质虚弱的老年人、免疫功能低下的各类人群，用于预防和治疗消化道感染有很好的临床疗效。

如上所述，乳清是来源丰富、价格低廉的天然原料，其中又含有生物活性免疫球旦白，如能有效地加以利用，不仅避免原料浪费，又能帮助所需要的人群，是一个很好的资源。

目前已有工厂用乳清作为原料加工成乳清粉，主要应用在食品工业，用于提高食品的质量，增加食品香味等，但由于加工过程中反复高温，已经破坏了大多数免疫球旦白的生物活性。

目前已经有多项从牛初乳中制备免疫球旦白，或者从免疫接种的牛奶中制备免疫球旦白的技术，美国专利(5106618)介绍了从免疫乳牛的牛奶中制备免疫球旦白，治疗胃肠道感染等的方法。

本发明所要解决的技术问题是，从来源丰富的乳清中制备具有生物活性的免疫球旦白，以帮助人体对抗各种微生物侵袭。

发明内容

本发明解决上述技术问题所采用的技术方案，其特征是，以乳清为原料，通过单次或多次超微滤膜分离、过滤、浓缩等程序，分离过滤乳清中其他成份，制备高纯度免疫球旦白制剂，在制备工艺中严格控制温度，防止免疫球旦白生物活性成份的丧失，保持其高生物活性特征，制备多种形式制剂，帮助人体对抗微生物侵害。

在乳清原料中主要含有小分子量的乳糖、微量元素、乳清旦白和部份多肽，以及较大分子量的免疫球旦白，可能还会有部份未去除干净的酪旦白。乳清旦白分子量通常小于60,000，酪旦白分子量小于50,000～60,000，其余乳糖及微量元素的分子量均小于上述旦白质，而免疫球旦白的分子量大于150,000。

乳清中含有各种营养物质，包括多种维生素，如维生素A、D、E、C、B₁、B₂、B₆、B₁₂和尼克酸，多种微量元素如钙、铁、磷、锌、镁，多种氨基酸如赖氨酸、牛磺酸等，多种生长因子如神经生长因子、表皮生长因子、类胰岛素生长因子等，还含有多种活性肽和酶如免疫调节肽、脑肽、溶菌酶、黄嘌呤氧化酶等，而乳铁旦白、糖旦白、乳清旦白都具有一定营养作用。

通过多种不同分子量超微滤膜的联合应用，可以有效地从乳清中提取高纯度的各种物质，尤其能提取高纯度的、有生物活性的免疫球旦白。

本发明的技术特征是，制备高纯度的免疫球旦白可以采用下列方法：收集乳清，进行巴氏消毒(140°F15秒)，乳清直接用分子量为10,000D的超微滤膜进行浓缩，先去除乳清小分子物质及水，收集浓缩物，再次用分子量为100,000D的超微滤膜浓缩，浓缩物直接冷冻干燥成粉或喷雾干燥制粉，其温度控制在140°F以下。

本发明的技术特征是，制备高纯度的免疫球旦白也可以采用另一方法，收集乳清，进行巴氏消毒(140°F15秒)，乳清直接用120,000D分子量的超微滤膜过滤，收集浓缩物进行冷冻干燥或喷雾干燥(温度低于140°F)制备干粉。

本发明的技术特征是，可以在制备高纯度免疫球旦白的同时，制备乳清中上述其他营养成份的浓缩物，其方法是，收集的乳清，经140°F巴氏消毒15秒后，迅速冷却至室温，泵入分子量为1,000D～6,000D超微滤膜的过滤设备进行浓缩，去除乳清中水份，浓缩物再送至分子量为100,000D的超微滤膜的过滤设备进行过滤分离，上清液直接进行喷雾干燥，制备的干粉含有乳清旦白、乳糖、多肽、多糖、维生素、微量元素等营养成份。超滤浓缩物内含有高纯度免疫球旦白，采用冷冻干燥或喷雾干燥方式制粉。

本发明的技术特征是，为了保持免疫球旦白的生物活性，所有的工艺均需严格控制温度，牛奶原料和乳清原料进行巴氏消毒时，温度不能超过140°F，时间不能超过15秒，在整个制备过程中，都要注意控制温度，在喷雾干燥时，温度也不能超过140°F。

本发明的技术特征是，本发明制备的免疫球旦白干粉中，免疫球旦白含量约为8％，其中免疫球旦白G(IgG)是主要成份，具有生物活性，可以采用多种已知的方法进行测定，抗体凝集试验是一种简单有效的方法。

本发明的技术特征是，本发明制备的免疫球旦白可以制备成多种形式制剂使用，可以直接应用干粉制剂，或加溶液配制成口服液应用，或者与其他药物辅料混合制备成片剂、胶囊剂、散剂、冲剂、颗粒剂、油剂、乳剂等服用，还可以作为食品添加剂制备成食品使用，如牛奶、奶粉、速溶咖啡、速溶茶、饼干、糕点、冰琪淋等，还可以制备成口香糖、含片形式，以对抗口腔中微生物，或制备成气雾剂以对抗咽喉或呼吸道微生物，还可以制备成水溶性溶液与超声雾化装置共同应用以对抗上呼吸道微生物。

本发明的技术特征是，本发明制备的免疫球旦白制剂，适用于婴幼儿，尤其适用于未采用母乳喂养的婴儿预防和治疗胃肠道微生物感染；适用于体质虚弱、抵抗力低下、免疫功能低下的人群用来预防和治疗胃肠道微生物感染、呼吸道微生物感染、口腔、咽喉部微生物感染；适用于免疫功能低下或免疫功能缺乏的患者用来预防和治疗各类微生物感染，尤其是爱滋病病人的胃肠道感染；还适用于长期服用肾上腺皮质激素类药物的病人所发生的各类空腔器官感染。

本发明的技术特征是，本发明方法制备的免疫球旦白制剂用于预防和治疗各类微生物感染的剂量是0.1～20g/天，较好的范围是1～10g/天，最好是2～5g/天，取决于感染类型和患者状态，长期服用无毒付作用，可以与任何其他药物或营养成分共同使用。

本发明的技术特征是，采用本方法从乳清中制备其他营养物质内含有丰富的乳糖、乳清旦白、乳铁旦白、维生素、微量元素和部份多肽等成份，可以用作食品添加剂、调味剂、或营养补充剂单独使用，或与其他成份联合应用。

本发明的有益效果是，从低廉价格得到的原材料中制备出有生物活性的免疫球旦白，能帮助人体对抗各种微生物感染，从而创造了较高的附加价值。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作进一步说明：

实例1

从乳清中制备免疫球旦白

收集制备奶酪的付产品乳清20升，直接用真空泵输入装有分子量为10,000D超微滤膜的交错切面流体超滤装置(TFF)，输入压为3Bar，输出压为2Bar，弃去上清液，收集的浓缩液直接输送至装有分子量为100,000D超微滤膜的上述同样设备，收集浓缩物直接进行冷冻干燥，得到高纯度免疫球旦白干粉。

实施例2

从乳清中制备免疫球旦白

收集乳清，进行巴氏消毒(温度为140°F、持续15秒)，乳清直接被泵入交错切面流体超滤装置(TFF)(美国Pall公司产品)，选择超微滤膜的分子量为120,000D，浓缩至原容积的20％，收集浓缩物直接以140°F的温度喷雾干燥，得到高纯度的免疫球旦白干粉。

实施例3

同时制备免疫球旦白和其他营养成份

收集乳清，进行巴氏消毒(140°F，15秒)，乳清泵入双层交错切面流体超滤装置，第一层过滤超微滤膜分子量为1,000D，进行浓缩至原体积30％，浓缩物再送到第二层超微滤膜分子量为100,000D，超滤上清液直接进行喷雾干燥，获得乳糖和乳清旦白，并包含多种维生素、微量元素和多肽的干粉，而超滤浓缩物直接进行冷冻干燥，制备高纯度的免疫球旦白干粉。

实施例4

测定免疫球旦白的生物活性

用大肠杆菌制备抗原，用该抗原与实施例1中制备的免疫球旦白进行粘集反应，测试反应中免疫球旦白与抗原特异性结合，抗体滴度达3400，证明免疫球旦白具有生物活性。

实施例5

随机选择免疫力低下的腹泻病人8名，服用实施例1制备的免疫球旦白，每人每天服用剂量5g，第二天起7名病人腹泻次数明显减少，第四天起腹泻停止，无其他任何付反应。

Claims

1.本发明涉及一种口服免疫球旦白制剂的制备方法及其应用，尤其涉及一种从牛奶的乳清中制备具有生物活性免疫球旦白制剂的制备方法及其应用，其特征是，以乳清为原料，通过单次或多次超微滤膜分离、过滤、浓缩等程序，分离过滤乳清中其他成份，制备高纯度免疫球旦白制剂，在制备工艺中严格控制温度，防止免疫球旦白生物活性成份的丧失，保持其高生物活性特征，制备多种形式制剂，帮助人体对抗微生物侵害。

2.按照权利要求1所述的方法，本发明的技术特征是，制备高纯度的免疫球旦白可以采用下列方法：收集乳清，进行巴氏消毒(140°F15秒)，乳清直接用分子量为10,000D的超微滤膜进行浓缩，先去除乳清小分子物质及水，收集浓缩物，再次用分子量为100,000D的超微滤膜浓缩，浓缩物直接冷冻干燥成粉或喷雾干燥制粉，其温度控制在140°F以下。

3.按照权利要求1所述的方法，本发明的技术特征是，制备高纯度的免疫球旦白也可以采用另一方法，收集乳清，进行巴氏消毒(140°F15秒)，乳清直接用120,000D分子量的超微滤膜过滤，收集浓缩物进行冷冻干燥或喷雾干燥(温度低于140°F)制备干粉。

4.按照权利要求1所述的方法，本发明的技术特征是，可以在制备高纯度免疫球旦白的同时，制备乳清中上述其他营养成份的浓缩物，其方法是，收集的乳清，经140°F巴氏消毒15秒后，迅速冷却至室温，泵入分子量为1,000D～6,000D超微滤膜的过滤设备进行浓缩，去除乳清中水份，浓缩物再送至分子量为100,000D的超微滤膜的过滤设备进行过滤分离，上清液直接进行喷雾干燥，制备的干粉含有乳清旦白、乳糖、多肽、多糖、维生素、微量元素等营养成份，超滤浓缩物内含有高纯度免疫球旦白，采用冷冻干燥或喷雾干燥方式制粉。

5.按照权利要求1所述的方法，本发明的技术特征是，本发明制备的免疫球旦白干粉中，免疫球旦白含量约为8％，其中免疫球旦白G(IgG)是主要成份，具有生物活性，可以采用多种已知的方法进行测定，抗体凝集试验是一种简单有效的方法。

6.按照权利要求1所述的方法，本发明的技术特征是，为了保持免疫球旦白的生物活性，所有的工艺均需严格控制温度，牛奶原料和乳清原料进行巴氏消毒时，温度不能超过140°F，时间不能超过15秒，在整个制备过程中，都要注意控制温度，在喷雾干燥时，温度也不能超过140°F。

7.按照权利要求1所述的方法，本发明的技术特征是，本发明制备的免疫球旦白可以制备成多种形式制剂使用，可以直接应用干粉制剂，或加溶液配制成口服液应用，或者与其他药物辅料混合制备成片剂、胶囊剂、散剂、冲剂、颗粒剂、油剂、乳剂等服用，还可以作为食品添加剂制备成食品使用，如牛奶、奶粉、速溶咖啡、速溶茶、饼干、糕点、冰琪淋等，还可以制备成口香糖、含片形式，以对抗口腔中微生物，或制备成气雾剂以对抗咽喉或呼吸道微生物，还可以制备成水溶性溶液与超声雾化装置共同应用以对抗上呼吸道微生物。

8.按照权利要求1所述的方法，本发明的技术特征是，本发明制备的免疫球旦白制剂，适用于婴幼儿，尤其适用于未采用母乳喂养的婴儿预防和治疗胃肠道微生物感染；适用于体质虚弱、抵抗力低下、免疫功能低下的人群用来预防和治疗胃肠道微生物感染、呼吸道微生物感染、口腔、咽喉部微生物感染；适用于免疫功能低下或免疫功能缺乏的患者用来预防和治疗各类微生物感染，尤其是爱滋病病人的胃肠道感染；还适用于长期服用肾上腺皮质激素类药物的病人所发生的各类空腔器官感染。

9.按照权利要求1所述的方法，本发明的技术特征是，本发明方法制备的免疫球旦白制剂用于预防和治疗各类微生物感染的剂量是0.1～20g/天，较好的范围是1～10g/天，最好是2～5g/天，取决于感染类型和患者状态，长期服用无毒付作用，可以与任何其他药物或营养成分共同使用。

10.按照权利要求1所述的方法，本发明的技术特征是，采用本方法从乳清中制备其他营养物质内含有丰富的乳糖、乳清旦白、乳铁旦白、维生素、微量元素和部份多肽等成份，可以用作食品添加剂、调味剂、或营养补充剂单独使用，或与其他成份联合应用。