CN1552215A - 一种消毒凝胶及其制备方法和应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种消毒凝胶及其制备方法和应用。本发明的消毒凝胶，包括溶葡萄球菌酶0.0001－0.01wt％，溶菌酶0.01－1wt％，增稠剂1～20wt％，润肤剂0.1～15wt％，水余量。本发明的免洗手部消毒清洁剂通过体外杀菌试验，对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌的杀菌效果十分理想，杀灭率均超过99％；对SD大鼠阴道黏膜刺激试验结果表明，无刺激性；对不同样本消毒6小时后，经过检测，对细菌的杀灭率均达90％以上，故对手消毒效果方面是非常有效的。本发明的消毒凝胶可用于手部皮肤黏膜的清洁和消毒，保持皮肤滋润，又能防止细菌和真菌的感染。
Description
技术领域
本发明涉及一种消毒制剂，尤其涉及一种含有杀菌作用的酶类的消毒凝胶。
背景技术
常规的洗手方法用肥皂和水，可以去除皮肤表面的污垢和有害的微生物，然而如果手部的水没有完全干透的话，残留的水可能成为细菌的藏匿之处。这种情况对一般人群不会造成严重的威胁，但对在医院里的人群产生感染的的可能性就大多了，这就非常需要将污染的危险降低到最小的程度。
在过去的几年中，一直有人在研究液体的清洁产品能有效的对皮肤进行消毒同时又可以不用水。但这些产品大都含有相对高浓度的醇类，这些醇类使皮肤可以很快就干，但同时也使皮肤脱水到人无法接受的程度，同时刺激皮肤，使之开裂。
发明内容
本发明需要解决的技术问题是提供一种消毒凝胶，以克服现有技术的不足。
本发明需要解决的另一个技术问题是提供一种消毒凝胶的制备方法。
本发明需要解决的第三个技术问题是提供一种消毒凝胶的应用。
本发明的发明构思是这样的：
溶葡萄球菌酶(lysostaphin)是一种含锌的金属蛋白酶，专一降解细胞壁的甘氨酸肽键，能裂解金黄色葡萄球菌等革兰氏阳性菌的细胞壁，从而起到彻底杀死细菌的目的，不易产生耐药性，尤其对耐药性金黄色葡萄球菌等难以根除的致病菌的效果非常好。但溶葡萄球菌酶只对革兰氏阳性菌有效，而引起奶牛乳腺感染的细菌除革兰氏阳性菌外，革兰氏阴性菌也占了一定的比例，如大肠杆菌等，所以发明人将溶菌酶和溶葡萄球菌酶进行复配，溶菌酶能裂解细菌胞壁的β-1，4糖苷键，对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌都有杀灭作用，同时溶菌酶除了拓宽了杀菌谱之外，还能加强溶葡球菌酶的杀菌作用。两种酶都属于蛋白质，由于蛋白酶是一种生物制品，在用量非常小的时候，也能产生很强的杀菌活性，对人体的皮肤黏膜刺激和毒副作用，对环境也不会造成任何影响，故而是制备消毒产品的非常好的成分。没有刺激也不会产生任何毒副作用，同时由于生产成本低，价格不贵。
本发明的技术方案如下：
一种消毒凝胶，包括溶葡萄球菌酶0.0001-0.01wt％，溶菌酶0.01-1wt％，增稠剂1～20wt％，润肤剂0.1～15wt％，水余量。
所述及的增稠剂为瓜尔豆胶、刺槐豆胶、达拉胶、罗望子、琼脂(洋菜)、卡拉胶、海藻酸钠、丙烯二醇藻、蛋白酸盐、阿拉伯胶、黄蓍胶、卡拉亚胶、果胶、黄原胶、布绿能胶、克能胶、羧甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、魔芋胶、变性淀粉、壳多糖中的一种或一种以上，其主要作用是使抗菌成分在其中均匀分散，使用后能在皮肤表面平缓稳定释放，长时间维持杀菌效果，有效防护细菌和真菌的侵蚀感染。
所述及的润肤剂是选自甘油、羊毛酯、二甲基硅油、凡士林、乳酸月桂酯、橄榄油、十四酸异丙酯、油脂蜡中的一种或一种以上，其主要作用是在清洁和消毒完之后，保持手部皮肤的润泽。
所述及的消毒凝胶的制备方法包括如下步骤：
按上述比例称取溶葡萄球菌酶、溶菌酶、润肤剂，增稠剂与水，混合均匀。
本发明的消毒凝胶可用于手部皮肤黏膜的清洁和消毒，保持皮肤滋润，又能防止细菌的生长，克用于手部皮肤的日常护肤保健，也可用于特殊用途的手部防护，如医生手术前的手消毒。
本发明的消毒凝胶无须水洗，一般每天使用1-2次，每次用量根据用途而定，以能涂遍皮肤表面为准。
本发明的消毒凝胶经过体外杀菌试验，发现对金黄色葡萄球菌、枯草杆菌DB430、大肠杆菌、绿脓杆菌、白色念珠菌、肺炎克雷伯氏菌均有很好的杀灭效果。
本发明的消毒凝胶经过对试验动物阴道黏膜刺激试验，参照消毒技术规范(第三版)1999.11中皮肤刺激反应强度的评分标准评分及皮肤刺激强度分级，进行对阴道黏膜刺激强度的评定。结果表明消毒凝胶对大鼠阴道黏膜刺激反应最高总积分均值为0，属无刺激性。
用消毒凝胶，对手分别消毒1，2，3，4，5，6小时后，经过检测，杀灭率均达90％以上，故判定消毒凝胶在对手消毒效果方面是很好的。
具体实施方式
实施例1 消毒凝胶的制备
制备100g消毒凝胶。首先称取溶葡萄球菌酶的含量0.01g(0.01wt％)，溶菌酶的含量0.3g(0.3wt％)，羟丙基甲基纤维素的含量3g(3wt％)，甘油5g(5wt％)，余量为水，混合均匀，即得到所需的消毒凝胶。
实施例2 体外杀菌试验
1、试验样品的制备：
(1)消毒凝胶样品：按实施例1的方法制备，溶葡萄球菌酶的含量0.01g(0.01wt％)，溶菌酶的含量0.3g(0.3wt％)，羟丙基甲基纤维素的含量5g(5wt％)，甘油8g(8wt％)，余量为水。
(2)对照样品：羟丙基甲基纤维素的含量5g(5wt％)，甘油8g(8wt％)，余量为水。
2、试验菌株：金黄色葡萄球菌CMCC26003，枯草杆菌DB430，大肠杆菌ATCC8099，肺炎克雷伯氏菌CMCC46117，绿脓杆菌CMCC10104，白色念珠菌ATCC10231。(以上菌株购自于中国生物制品检定所)。
3、试验步骤：
(1)将培养好的试验菌株用1％蛋白胨PBS洗下新鲜斜面，并稀释到适宜浓度，在107～108cfu/ml。
(2)将消毒凝胶样品和对照样品滴加在1×3cm大小的纱布上，使之充分浸透，并放置在无菌平皿中。
(3)取20ul菌液滴加到纱布上，涂抹均匀同时开始计时。
(4)作用到预定时间后用无菌镊子将纱布投入含5ml中和剂的试管中，充分振荡混匀。
(5)对照样品投入中和剂试管，充分振荡后做适当稀释。
(6)取终液0.5ml进行倾注平板，37恒温倒置培养48小时。
(7)计算对照回收菌量及样品回收菌量，得出杀灭率。
4、试验结果
表1：手部清洁剂体外杀菌试验杀灭率结果
试验菌株 消毒凝胶 对照样品
金黄色葡萄球菌 99.82％ 0
CMCC26003，，，
枯草杆菌DB430 99.88％ 0
大肠杆菌ATCC8099 99.90％ 0
绿脓杆菌CMCC10104 99.91％ 0
白色念珠菌ATCC102319 9.56％ 0
肺炎克雷伯氏菌 99.46％ 0
CMCC46117
实施例3消毒凝胶对试验动物阴道黏膜刺激试验
1、样品制备：按实施例1的方法制备，溶葡萄球菌酶的含量0.01g(0.01wt％)，溶菌酶的含量0.3g(0.3wt％)，羟丙基甲基纤维素的含量3g(3wt％)，甘油5g(5wt％)，余量为水。
2、试验动物：SD大鼠，雌性，普通级，18只，体重230克-250克，随机分三组，消毒凝胶组、赋形剂组和空白对照组，每组6只，由复旦大学实验动物部提供。
3、试验方法：参照消毒技术规范(第三版)1999.11中的3.8条。将纱布在消毒凝胶中充分浸透后，取出置动物阴道内，与阴道黏膜接触4小时。赋形剂组用棉条0.01克浸以灭菌生理盐水作同样的试验。空白对照组不做任何处理。于24小时处死动物，取出局部阴道组织，观察有无充血、水肿现象。参照消毒技术规范(第三版)1999.11中皮肤刺激反应强度的评分标准评分及皮肤刺激强度分级，进行对阴道黏膜刺激强度的评定。
4、试验结果：
表3：消毒凝胶对试验动物阴道黏膜刺激试验
动物数 刺激反应评分
组别
(只) 红斑 水肿 总分
消毒凝胶组 6 0 0 0
赋形剂组 6 0 0 0
空白对照组 6 0 0 0
消毒凝胶对大鼠阴道黏膜刺激反应最高总积分均值为0，属无刺激性。
实施例4 对手部的消毒试验
1、试验准备：
(1)0.03mol/l PH7.2的PBS缓冲液
(2)采样液；采样液配方：SDS 0.02％，加0.03mol/l PH7.2的PBS缓冲
液100ml。
(3)稀释液(0.03mol/l PH7.2的PBS缓冲液)
(4)固体培养基3升；培养基配方：蛋白胨1％，小牛肉膏粉0.3％，NaCl
0.5％，琼脂2％，PH7.4_7.6
(5)无菌棉拭
(6)无菌纱布
(7)无菌平皿
(8)无菌枪尖
(9)无菌剪刀
2、自愿受试人员6名
3、试验程序：
(1)消毒前，在受试者双手充分搓擦后，对其左手上的自然菌采样一次。采样时，
让受试者五指并拢，用无菌棉拭在含10ml无菌采样液试管中浸湿，按干。顺受试者曲面指尖到指根擦拭两遍，每擦拭一遍棉拭旋转180度。将采样后的棉拭用无菌剪刀剪入无菌采样液试管中，将试管敲打80次，作为阳性对照组样本，共6组.。
(2)用无菌纱布蘸取配好的达到使用浓度的消毒凝胶涂于受试者右手曲面指 尖到指根。
(3)隔1、2、3、4、5、6小时，对不同受试者右手采样，采样方法同(1)，作为待测样本，共6组。
(4)将12组样本都进行3个稀释度的稀释，每一稀释度取0.5ml进行倾注培养，一式三皿，进行活菌培养计数。
(5)将未用过的同批培养基、采样液、无菌棉拭、稀释液，按活菌计数法进行培养，作为阴性对照。
3、计算公式：
(1)每只手样本生长菌落数(cfu/手)＝平板上平均菌落数*检测时样本稀释倍数
(2)
4、结果记录：
表4：12组样本培养48小时后的菌落计数结果(cfu/皿)
| 消毒前(cfu/皿) | 消毒后(cfu/皿) | |||||
| 编号 | 采样液 | 10倍稀释液 | 100倍稀释液 | 采样液 | 10倍稀释液 | 100倍稀释液 |
| 1 | 181 | 3 | 1 | 3 | 1 | 4 |
| 211 | 5 | 0 | 3 | 0 | 0 | |
| 202 | 0 | 0 | 7 | 1 | 0 | |
| 2 | 385 | 4 | 4 | 14 | 0 | 0 |
| 64 | 0 | 15 | 0 | 0 | ||
| 414 | 53 | 2 | 7 | 0 | 0 | |
| 3 | 42 | 3 | 0 | 3 | 0 | 0 |
| 59 | 0 | 0 | 0 | 2 | 0 | |
| 69 | 0 | 2 | 3 | 0 | 0 | |
| 4 | 112 | 4 | 0 | 0 | 0 | 1 |
| 135 | 2 | 0 | 2 | 0 | 0 | |
| 142 | 0 | 0 | 2 | 0 | 1 | |
| 5 | 89 | 3 | 0 | 0 | 1 | 0 |
| 82 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | |
| 83 | 1 | 0 | 0 | 0 | 0 | |
| 6 | 48 | 3 | 1 | 0 | 0 | 0 |
| 45 | 2 | 2 | 0 | 0 | 0 | |
| 32 | 1 | 0 | 0 | 0 | 2 | |
表5：空白对照的菌落计数结果(cfu/皿)
| 培养基 | 采样液 | 稀释液 | |
| 皿1 | 0 | 0 | 0 |
| 皿2 | 0 | 0 | 0 |
| 皿3 | 0 | 0 | 0 |
5、数据处理：
1号样本 消毒前菌落数＝(181+211+202)*2*10/3＝3960(cfu/手)
消毒后样本菌落数＝(3+3+7)*2*10/3＝87(cfu/手)
杀灭率＝(3960-87)/3960*100％＝97.80％
2号样本 消毒前菌落数＝(64+53)*2*10/2＝11700(cfu/手)
消毒后样本菌落数＝(14+15+7)*2*10/3＝240(cfu/手)
杀灭率＝(11700-240)/11700*100％＝97.95％
3号样本 消毒前菌落数＝(42+59+69)*2*10/3＝1133(cfu/手)
消毒后样本菌落数＝(3+3)*2*10/3＝40(cfu/手)
杀灭率＝(1133-40)/1133*100％＝96.47％
4号样本 消毒前菌落数＝(112+135+142)*2*10/3＝2593(cfu/手)
消毒后样本菌落数＝(2+2)*2*10/3＝27(cfu/手)
杀灭率＝(2593-27)/2593*100％＝98.96％
5号样本 消毒前菌落数＝(89+82+83)*2*10/3＝1700(cfu/手)
消毒后样本菌落数＝0(cfu/手)
杀灭率＝(1700-0)/1700*100％＝100.00％
6号样本 消毒前菌落数＝(48+45+32)*2*10/3＝840(cfu/手)
消毒后样本菌落数＝0(cfu/手)
杀灭率＝(840-0)/840*100％＝100.00％
表6消毒凝胶对不同样本的细菌杀灭率
| 人员编号 | 作用时间(小时) | 杀灭率(％) |
| 1 | 1 | 97.80 |
| 2 | 2 | 97.95 |
| 3 | 3 | 96.47 |
| 4 | 4 | 98.96 |
| 5 | 5 | 100.00 |
| 6 | 6 | 100.00 |
6、结论与分析：
用消毒凝胶，对手分别消毒1，2，3，4，5，6小时后，杀灭率均达90％
以上，故判定消毒凝胶在对手消毒效果方面是很好的。
Claims (7)
1.一种消毒凝胶，其特征在于包括溶葡萄球菌酶0.0001-0.01wt％，溶菌酶0.01-1wt％，增稠剂1～20wt％，润肤剂0.1～15wt％，水余量。
2.根据权利要求1所述的消毒凝胶，其特征在于所述及的增稠剂为瓜尔豆胶、刺槐豆胶、达拉胶、罗望子、琼脂(洋菜)、卡拉胶、海藻酸钠、丙烯二醇藻、蛋白酸盐、阿拉伯胶、黄蓍胶、卡拉亚胶、果胶、黄原胶、布绿能胶、克能胶、羧甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、魔芋胶、变性淀粉、壳多糖中的一种或一种以上。
3.根据权利要求2所述的消毒凝胶，其特征在于所述及的增稠剂为羟丙基甲基纤维素。
4.根据权利要求1所述的消毒凝胶，其特征在于所述及的润肤剂是甘油、羊毛酯、二甲基硅油、凡士林、乳酸月桂酯、橄榄油、十四酸异丙酯、油脂蜡中的一种或一种以上。
5.一种如权利要求1-4任一所述的消毒凝胶的制备方法，其特征在于包括如下步骤：
按比例称取溶葡萄球菌酶、溶菌酶、增稠剂、润肤剂与水，混合均匀即获得所需消毒凝胶。
6.一种如权利要求1-4所述的消毒凝胶的应用，其特征在于用于身体皮肤及黏膜的清洁和消毒。
7.根据权利要求6所述的消毒凝胶的应用，其特征在于，用于手部皮肤及黏膜的清洁和消毒。
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
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| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| CX01 | Expiry of patent term | ||
| CX01 | Expiry of patent term |
Granted publication date: 20070411 |