CN1532276A - 细胞在常温条件下长期存活装置 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种细胞在常温条件下长期存活装置,它是由容器、容器内的培养液和浸在培养液中的具孔微载体三部分组成;所述具孔微载体是球状或其它形状的无毒高分子化合物;所述培养液选用下述3种常用基本培养液,即达贝克改良型培养液(Dulbeccos Modified Eagle Medium,DMEM)、海穆-F12(Ham-F12)培养液、1640培养液中的任何一种按比例加入下述两种成分:(1)谷氨酰胺:添加量为在每升上述基本培养液中加入0.5~3克;(2)氢化可的松:添加量为在每升上述基本培养液中加入0.5~1.5毫克;所述容器为无菌、无细胞毒性的透明容器;本装置简单,但可使哺乳动物的细胞在本装置内长期存活,方便了细胞的运输和太空科学实验。

Description

细胞在常温条件下长期存活装置
技术领域
本发明涉及一种细胞在常温条件下长期存活装置。
背景技术
目前,纤弱的哺乳动物细胞在体外存活,或放于液氮装置中冻存,或在哺乳动物体外非常严格的条件下培养,培养装置中的温度需为36.5±0.5℃,需要氧气、二氧化碳气,还要定期更换培养液等等。但在一些特殊的情况下,如长途运送、太空搭载实验,就很难满足以上细胞培养所需要的条件,这就限制了人们对细胞的研究和应用。
发明内容
本发明的目的在于改进现有技术之缺点,而提供一种简便、价廉、易操作的细胞在常温条件下长期存活装置。所述装置可在无电源、无热源、无氧气、无二氧化碳气供应,无需更换培养液的条件下,维持细胞在18℃~22℃常温存活,当细胞从18℃~22℃常温返回36.5±0.5℃温度后可继续生长繁殖。
为实现上述目的,本发明采取以下设计方案:本装置是由容器、容器内的培养液和浸在培养液中的具孔微载体三部分组成。所述具孔微载体是球状或其它形状的无毒高分子化合物,其直径为100微米~500微米;孔径为20微米~60微米;其材质可选用纤维素、甲壳素和胶原等。所述培养液可选用下述3种常用基本培养液,即达贝克改良型培养液(Dulbecco’s Modified EagleMedium,DMEM)、海穆-F12(Ham-F12)培养液、1640培养液中的任何一种按比例加入下述两种成份:
1、谷氨酰胺  添加量为在每升培养液中加入0.5~3克;
2、氢化可的松  添加量为在每升培养液中加入0.5~1.5毫克;
所述容器为无菌、无细胞毒性的透明容器,优先选用具有弹性的塑料材料。在细胞运输或太空搭载实验中,将实验细胞注入本装置后密封,细胞进入具孔微载体的微孔中或贴附于具孔微载体的表面,在18℃~22℃的常温下,细胞可存活至少16天,细胞从18℃~22℃常温返回36.5±0.5℃后可继续生长增殖。
本装置简单,但可使哺乳动物的细胞在本装置内长期存活,方便了细胞的运输和太空科学实验。
附图说明
图1为本发明装置结构示意图
图2为具孔微载体结构示意图
图3为常温培养16天的小鼠黑色素细胞(B16)在37℃继续培养形成的克隆(光镜下观察)
图4为常温培养16天的人宫颈癌细胞(Caski)在36℃继续培养形成的克隆(光镜下观察)
图5为常温培养16天的人口腔癌细胞(KB)在36.5℃继续培养形成的克隆(光镜下观察)
具体实施方式
实施例1
请参阅图1~3所示,本装置容器是采用由聚丙烯材料制的细胞冻存管1,其内装有合成培养液2,该合成培养液是由常用的达贝克改良型培养液(Dulbecco’s Modified Eagle Medium,DMEM)和在上述培养液中按每升加2克的比例加入的谷氨酰胺、按每升加1毫克的比例加入的氢化可的松的合成培养液。在所述合成培养液中浸有具孔微载体3,该微载体3是瑞士Pharmacia公司产品,商品为Cytopore II,微粒成分为Cellulose,微粒直径230微米,孔径30微米,在上述装置内加入小鼠黑色素瘤细胞(B16),维持细胞在18~22℃常温下存活16天,该细胞从18~22℃常温返回37℃后,可继续生长增殖,光镜下观察,细胞形态未见明显变化。
实施例2
请参阅图1、图2、图4所示,本装置容器是采用由聚丙烯材料制的细胞冻存管1,其内装有合成培养液2,该合成培养液是由常用的1640培养液和在上述培养液中按每升加3克的比例加入的谷氨酰胺、按每升加1.5毫克的比例加入的氢化可的松的合成培养液。在所述合成培养液中浸有具孔微载体3,该微载体3是瑞士Pharmacia公司产品,商品为Cytopore II,微粒成分为Cellulose,微粒直径100微米,孔径20微米,在上述装置内加入人宫颈癌细胞(Caski),维持细胞在18~22℃常温下存活16天,该细胞从18~22℃常温返回36℃后,可继续生长增殖,光镜下观察,细胞形态未见明显变化。
实施例3
请参阅图1、图2、图5所示,本装置容器是采用由聚丙烯材料制的细胞冻存管1,其内装有合成培养液2,该合成培养液是由常用的海穆-F12(Ham-F12)培养液和在上述培养液中按每升加0.5克的比例加入的谷氨酰胺、按每升加0.5毫克的比例加入的氢化可的松的合成培养液。在所述合成培养液中浸有具孔微载体3,该微载体3是瑞士Pharmacia公司产品,商品为CytoporeII,微粒成分Cellulose,微粒直径500微米,孔径60微米,在上述装置内加入人口腔癌细胞(KB),维持细胞在18~22℃常温下存活16天,该细胞从18~22℃常温返回36.5℃后,可继续生长增殖,光镜下观察,细胞形态末见明显变化。

Claims (4)

1、一种细胞在常温条件下长期存活装置,其特征在于:本装置是由容器、容器内的培养液和浸在培养液中的具孔微载体三部分组成;所述具孔微载体是球状或其它形状的无毒高分子化合物;所述培养液选用下述3种常用基本培养液,即达贝克改良型培养液(Dulbeccos Modified Eagle Mediunm,DMEM)、海穆-F12(Ham-F12)培养液、1640培养液中的任何一种按比例加入下述两种成份:
(1)谷氨酰胺  添加量为在每升上述基本培养液中加入0.5~3克;
(2)氢化可的松  添加量为在每升上述基本培养液中加入0.5~1.5毫克;
所述容器为无菌、无细胞毒性的透明容器。
2、根据权利要求1所述的一种细胞在常温条件下长期存活装置,其特征在于:所述具孔微载体其材质选用纤维素、甲壳素和胶原等。
3、根据权利要求1所述的一种细胞在常温条件下长期存活装置,其特征在于:所述具孔微载体其直径为100微米~500微米,孔径20微米~60微米。
4、根据权利要求1所述的一种细胞在常温条件下长期存活装置,其特征在于:所述容器采用由聚丙烯材料制的细胞冻存管。
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