CN1528745A - 吡咯烷类基质金属蛋白酶抑制剂及其制备方法 - Google Patents
吡咯烷类基质金属蛋白酶抑制剂及其制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN1528745A CN1528745A CNA2003101054227A CN200310105422A CN1528745A CN 1528745 A CN1528745 A CN 1528745A CN A2003101054227 A CNA2003101054227 A CN A2003101054227A CN 200310105422 A CN200310105422 A CN 200310105422A CN 1528745 A CN1528745 A CN 1528745A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- acryloyl
- acid methyl
- methyl esters
- amino
- pyrrolidine
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Landscapes
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Pyrrole Compounds (AREA)
Abstract
吡咯烷类基质金属蛋白酶抑制剂及其制备方法,本发明涉及具有通式(I)结构化合物的制备,其抑制基质金属蛋白酶的活性试验,以及它们作为活性成分的药物组合物。
Description
(一)技术领域
本发明涉及一类具有抑制基质金属蛋白酶(MMPs)作用的化合物及其制备方法、活性试验,以及这些组合物的用途。
(二)背景技术
基质金属蛋白酶(MMPs)是一类依赖锌离子的内肽酶,在细胞外基质的降解和重建过程中起重要作用,其活性由内源性组织金属蛋白酶抑制剂调控,参见高莫斯D.E.等,欧洲细胞生物学杂志1997;74:111-122(Gomez D.E.,et al.Eur.J.Cell Biol.1997;74:111-122)。其间的微妙平衡在许多病理条件下被打破,如肿瘤、骨关节炎、风湿性关节炎等。
目前在哺乳动物中至少发现了MMPs家族的24个成员,见钱伯斯A.F.等,国立癌症研究所杂志,1997;89:1260-1270(Chambers A.F.,J.Natl.Cancer Inst.1997;89:1260-1270),根据其结构、特异性底物和不同的细胞位置,分为不同亚型,包括3种胶原酶(MMP-1,-8和-13),2种明胶酶(MMP-2和-9),3种基质降解酶(MMP-3,-10和-11),5种膜型—基质金属蛋白酶(MMP-14,-15,-16,-17和-24),以及其它未归类的如基质溶解素(MMP-7和-26)和巨嗜细胞金属弹性蛋白(MMP-12)等。其中明胶酶(MMP-2和-9)已被证明与侵袭性肿瘤的恶性表型及癌症病人的不良预后密切相关,它们参与了肿瘤细胞对基底膜、基质的侵袭,对血管壁的穿透,以及瘤细胞的转移,参见斯坦勒—史蒂文生WG,等,在侵袭和转移过程中肿瘤细胞与细胞外基质的相互作用,细胞生物学年度评论1993;9:541-573;和佐藤H.等,一种在侵袭肿瘤细胞表面表达的基质金属蛋白酶,自然1994,370:61-65(Stetler-Stevenson WG,et al.Tumor cell interactions withthe extracellular matrix during invasion and metastasis.Annu.Rev.Cell Biol.1993;9:541-573,Sato H.,et al.A matrix metallo-proteinase expressed on the surface of invasivetumor cells.Nature 1994,370:61-65)。近年来研究表明,MMPs还与原发性肿瘤和继发性肿瘤的生长、以及肿瘤组织的血管生成有关,甚至对肿瘤增殖过程亦起促进作用。因此,瞄准以这些酶为作用靶点的治疗策略也迅速发展起来,MMPs抑制剂(MMPs Inhibitors,MMPIs)已成为癌症治疗药物研究中的热点。
90年代以来,随着分子生物学和蛋白质化学的迅速发展,以及晶体结构测定(如X—射线晶体衍射技术、mD-NMR)手段的丰富,许多MMPs及其与抑制剂复合物的三维结构已经解析出来,这为研究MMPs及其抑制剂的分子识别提供了有利的条件,并确定了抑制剂的结构特征如下图所示。
目前已报道的活性较高的MMPIs均含有丁二酰骨架,一端与锌离子螯合基团(ZBG)相连。锌离子螯合基团可以螯合MMPs催化活性中心的金属锌离子,从而起到抑制酶活性的作用。目前已知的活性最强的螯合基团是异羟肟酸基团,见保卡科帝N.,等,天然结构生物学,1994 Feb;1(2):106-110(Borkakoti N,et al.Nat Struct Biol.1994Feb;1(2):106-110),但在体内,异羟肟酸基团存在代谢和药动学方面的问题,如因透明质酸化和硫酸化导致其体内半衰期较短,参见马尔德G.J.等,环境健康透视,1983Mar;49:27-32(Mulder GJ,等,Environ Health Perspect.1983 Mar;49:27-32);在毒性方面也有问题,许多异羟肟酸基团不稳定,水解成羟胺导致毒性;而且异羟肟酸水溶性较差,给用药途径的选择和制剂增加了困难,见维斯利S.等,药物化学杂志,1999 Jul 15;42(14):2610-20(Vassiliou S,et al.J Med Chem.1999 Jul 15;42(14):2610-20)。R2和R3基团的大小决定抑制剂对各MMPs亚型的选择性,其基团较大,能选择性抑制MMP-2,-8,-9和-13;基团较小,对MMP-1,-7和-11的活性抑制较强,研究证明MMPIs最常见的骨骼肌酸痛的副作用就是由于抑制MMP-1而引发的,因此,为提高抗肿瘤活性,降低毒副作用,R2和R3应为较大基团。
(三)发明内容
本发明针对现有技术的不足,提供一种吡咯烷类基质金属蛋白酶抑制剂及其制备方法。
本发明以羟脯氨酸为母核。羟脯氨酸是体内含量最多的蛋白质—胶原蛋白的所含的一种特异氨基酸,体内除弹性蛋白中含有少许外,其它蛋白中均无,这就使得羟脯氨酸成为反映体内胶原蛋白代谢的客观指标,而MMPs的主要底物就是胶原蛋白,以羟脯氨酸为母核的MMPIs可提高化合物的靶向性。在此基础上我们将咖啡酸、没食子酸、苯乙酸、阿魏酸等有机酸拼合到羟脯氨酸母核上,形成丁二酰骨架的电子等排体,符合抑制剂结构的基本要求,而且这些有机酸自身具有抗肿瘤活性,可增强抑酶活性。
本发明设计合成了一类具有全新结构母核的基质金属蛋白酶抑制剂。体外试验表明其无细胞毒活性,体内动物试验则显示了较高的抗癌活性。有望成为一类非细胞毒类抗癌候选药物。
本发明的技术方案如下:
具有如下通式的化合物,
其中,
(a)R1为烃代羰氧基、烃代砜氧基、烃代羰胺、烃氧基、烃氧代磷酰胺、烃氧代磷羰氧基、烃氨代磷酰胺、烃氨代磷羰氧基。所述“烃”为C1-C16烷基,C1-C8环烷基,C1-C12烯基,C1-C12炔基,C5-C12芳基,C4-C11芳杂基,该烷基、环烷基、烯基、炔基、芳基和芳杂基可被卤素、氧、硫、氮、叠氮、氰基取代。
(b)R2为甲氧基或羟氨基。
(c)R3为C1-C8烷基,C1-C8环烷基,芳基,杂芳基,芳烷基,芳烯基,杂环芳烷基,羟烷基,羧烷基,氨烷基及取代的氨烷基,R3的芳基可被例如下列基团所取代:烷基,烯基,芳烷基,醛基,芳酰基,卤烷基,卤素,羧基,烷氧羰基,氨基甲酰基,烷基氨基甲酰基,芳基氨基甲酰基,氰基。
上述的化合物(I)具体包括如下:
1-[(E)-3-(3,4-二甲氧苯基)-2-丙烯酰]-4-(甲磺酰氧)-2-吡咯烷酸甲酯
1-[(E)-3-(3,4-二乙酰氧苯基)-2-丙烯酰]-4-(甲磺酰氧)-2-吡咯烷酸甲酯
1-[(E)-3-(3,4-二甲氧苯基)-2-丙烯酰]-4-[(4-甲苯基)磺酰]氧基-2-吡咯烷酸甲酯
1-[(E)-3-(3,4-二乙酰氧苯基)-2-丙烯酰]-4-[(4-甲苯基)磺酰]氧基-2-吡咯烷酸甲酯
1-[(E)-3-(3,4-二乙酰氧苯基)-2-丙烯酰]-4-[3,4,5-三(乙酰氧)苯甲酰基]氧基-2-吡咯烷酸甲酯
1-[(E)-3-(3,4-二羟基苯基)-2-丙烯酰]-4-[(4-甲苯基)磺酰]氧基-2-吡咯烷酸甲酯
1-[(E)-3-(3,4-二羟基苯基)-2-丙烯酰]-4-[(甲磺酰)氧基]-2-吡咯烷酸甲酯
1-[(E)-3-(3,4-二羟基苯基)-2-丙烯酰]-4-[(甲磺酰)氧基]-2-吡咯烷酸甲酯
1-[(E)-3-(3,4-二甲氧苯基)-2-丙烯酰]-4-(丙酰氨基)-2-吡咯烷酸甲酯
1-[(E)-3-(3,4-二甲氧苯基)-2-丙烯酰]-4-(己酰氨基)-2-吡咯烷酸甲酯
1-[(E)-3-(3,4-二甲氧苯基)-2-丙烯酰]-4-[(3-吡啶甲酰)氨基]-2-吡咯烷酸甲酯
1-[(E)-3-(3,4-二甲氧苯基)-2-丙烯酰]-4-[(甲磺酰)氨基]-2-吡咯烷酸甲酯
1-[(E)-3-(3,4-二甲氧苯基)-2-丙烯酰]-4-[(E)-3-(4-甲氧苯基)-2-丙烯酰]氨基-2-吡咯烷酸甲酯
4-[1-[(E)-3-(3,4-二甲氧苯基)-2-丙烯酰]-5-(甲氧羰基)四氢-1H-3吡咯]氨基-4-氧代丁酸
1-[(E)-3-(3,4-二甲氧苯基)-2-丙烯酰]-4-[(2-苯乙酰)氨基]-2-吡咯烷酸甲酯
1-[(E)-3-(3,4-二甲氧苯基)-2-丙烯酰]-4-[(3-苯丙酰)氨基]-2-吡咯烷酸甲酯
11-[(E)-3-(3,4-二甲氧苯基)-2-丙烯酰]-4-[(E)-3-(4-甲氧苯基)-2-丙烯酰]氨基-2-吡咯烷酸甲酯
1-[(E)-3-(3,4-二甲氧苯基)-2-丙烯酰]-4-羟基-2-N-羟酰氨吡咯烷(41)的制备
1-[(E)-3-(3,4-二甲氧苯基)-2-丙烯酰]-4-(己酰氨基)-2-N-羟酰氨吡咯烷
1-[(E)-3-(3,4-二甲氧苯基)-2-丙烯酰]-2-N-羟酰氨-4-丙酰氨基吡咯烷
1-[(E)-3-(3,4-二甲氧苯基)-2-丙烯酰]-2-N-羟酰氨-4-(2-苯乙酰)氨基吡咯烷
1-[(E)-3-(3,4-二甲氧苯基)-2-丙烯酰]-2-N-羟酰氨-4-甲磺酰氨基吡咯烷
1-[(E)-3-(3,4-二甲氧苯基)-2-丙烯酰]-2-N-羟酰氨-4-(3-苯丙酰)氨基吡咯烷
1-[(E)-3-(3,4-二甲氧苯基)-2-丙烯酰]-2-N-羟酰氨-4-[(E)-3-(4-甲氧苯基)-2-丙烯酰]氨基吡咯烷
1-[(E)-3-(3,4-二甲氧苯基)-2-丙烯酰]-2-N-羟酰氨-4-(3-吡啶甲酰)氨基吡咯烷
4-[(甲磺酰)氧基-1-(3,4,5-三甲氧苯甲酰)-2-吡咯烷酸甲酯
4-[(甲磺酰)氨基]-1-(3,4,5-三甲氧苯甲酰)-2-吡咯烷酸甲酯
4-[(4-甲苯基)磺酰]氨基-1-(3,4,5-三甲氧苯甲酰)-2-吡咯烷酸甲酯
4-(丙酰氨基)-1-(3,4,5-三甲氧苯甲酰)-2-吡咯烷酸甲酯
4-(己酰氨基)-1-(3,4,5-三甲氧苯甲酰)-2-吡咯烷酸甲酯
4-[(3-吡啶甲酰)氨基]-1-(3,4,5-三甲氧苯甲酰)-2-吡咯烷酸甲酯
4-[5-(甲氧羰基)-1-(3,4,5--三甲氧苯甲酰)四氢-1H-3-吡咯]氨基-4-氧代丁酸
4-[(2-苯乙酰)氨基]-1-(3,4,5-三甲氧苯甲酰)-2-吡咯烷酸甲酯
4-[(E)-3(3,4-二甲氧苯基)-2-丙烯酰]氨基-1-(3,4,5-三甲氧苯甲酰)-2-吡咯烷酸甲酯
4-[(E)-3(3,4-二羟苯基)-2-丙烯酰]氨基-1-(3,4,5-三甲氧苯甲酰)-2-吡咯烷酸甲酯
4-[(3,4,5-三羟苯基)氨基]-1-(3,4,5-三甲氧苯甲酰)-2-吡咯烷酸甲酯
4-[(E)-3(3,4-二甲氧苯基)-2-丙烯酰]氨基-2-N-羟酰氨-1-(3,4,5-三甲氧苯甲酰)吡咯烷
4-(己酰氨基)-2-N-羟酰氨-1-(3,4,5-三甲氧苯甲酰)吡咯烷
2-N-羟酰氨-4-[(4-甲苯基)磺酰]氨基-1-(3,4,5-三甲氧苯甲酰)吡咯烷
1-[(E)-3-(3,4-二甲氧苯基)-2-丙烯酰]-2-N-羟酰氨-4-甲氧基吡咯烷
1-[(E)-3-(3,4-二甲氧苯基)-2-丙烯酰]-4-异丙氨基膦酰氧基-2-吡咯烷酸甲酯。
上述通式(I)的化合物中间体为1-[(E)-3-(3,4-二甲氧苯基)-2-丙烯酰]-4-羟基-2-吡咯烷酸甲酯,4-氨基-1-[(E)-3-(3,4-二甲氧苯基)-2-丙烯酰]-2-吡咯烷酸甲酯,1-[(E)-3-(3-甲氧基-4-羟基苯基)-2-丙烯酰]-4-羟基-2-吡咯烷酸甲酯,4-氨基-1-[(E)-3-(3-甲氧基-4-羟基苯基)-2-丙烯酰]-2-吡咯烷酸甲酯,4-羟基-1-(3,4,5-三甲氧苯甲酰)-2-吡咯烷酸甲酯,4-氨基-1-(3,4,5-三甲氧苯甲酰)-2-吡咯烷酸甲酯,1-苯乙酰-4-羟基-2-吡咯烷酸甲酯,4-氨基-1-苯乙酰-2-吡咯烷酸甲酯,1-苯丙酰-4-羟基-2-吡咯烷酸甲酯,和/或4-氨基-1-苯丙酰-2-吡咯烷酸甲酯。
上述通式(I)的化合物的制备方法,以羟脯氨酸甲酯盐酸盐为原料,在碱性条件下缩合,所得的化合物作为中间体,再与酰化、磺酰化试剂反应,分离纯化而得。
具体合成路线根据所要制备的某种具体的化合物结合本领域的现有技术进行设计。
下面以咖啡酰吡咯烷类衍生物为例,说明该类化合物的合成路线及制备方法。
路线1
路线2
路线3
路线4
(1)据路线1制备:
用Me2SO4保护咖啡酸的游离羟基,然后与羟脯氨酸甲酯盐酸盐在碱性条件下缩合,所得的1-[(E)-3-(3,4-二甲氧苯基)-2-丙烯酰]-4羟基-2-吡咯烷酸甲酯(化合物II)在氮氛中与甲磺酰氯反应,所得产物在非质子性极性溶剂中经叠氮钠亲核取代,5%Pd/CaCO3催化氢化还原得关键中间体4-氨基-1-[(E)-3-(3,4-二甲氧苯基)-2-丙烯酰]-2-吡咯烷酸甲酯(化合物III)。
上述中间体与各种酰化,磺酰化试剂反应后,在NH2OK的无水甲醇溶液中搅拌24h,分离纯化即得终产物。
(2)据路线2制备:
氮氛中,向NaH的无水THF混悬液中滴加化合物II的无水THF溶液,再滴加卤代烃的无水THF溶液,逐渐升温反应,薄层层析TLC监测至反应完全,得到的醚类化合物在NH2OK的无水甲醇溶液中搅拌24h,分离纯化,得产物。
(3)据路线3制备:
氮氛中,化合物II或III的CH2Cl2溶液滴加至冷的POCl3的无水Py溶液中,保持冷浴数小时,滴加另一种醇或胺的CH2Cl2溶液,维持低温反应,TLC监测至反应完全后,加入H2O,所得反应物分离纯化,得产物。
(4)考虑到含有游离酚羟基的化合物(如咖啡酸)具有抑制基质金属蛋白酶的活性,据路线4制备了含有游离酚羟基的化合物。
用乙酰基保护咖啡酸的游离羟基,然后与羟脯氨酸甲酯盐酸盐在碱性条件下缩合,所得的1-[(E)-3-(3,4-二乙酰氧苯基)-2-丙烯酰]-4-羟基-2-吡咯烷酸甲酯与酰化试剂反应后,在酸性条件下脱除乙酰保护基,暴露出邻二酚羟基。
上述通式(I)的化合物的体外抑酶试验如下:
琥珀酰明胶已证明能被明胶酶(包括MMP-2,-9)水解,肽键水解产生的游离氨基浓度的高低与酶活性大小呈正相关。琥珀酸酐保护明胶中的游离氨基,水解后暴露的伯氨与2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)反应显色,通过检测450nm处的吸收度确定氨基含量,从而确定明胶酶的活性。
通式(I)的化合物的体外抑酶试验证明该化合物为一种吡咯烷类基质金属蛋白酶抑制剂。
(四)附图说明
图1是实施例7抑酶试验中明胶中游离氨基测定的浓度——吸收度标准曲线。
(五)具体实施方式
以下结合实施例对本发明作进一步说明,但本发明的范围决不限于这些实施例。
本发明方法适用于四种手性原料的不对称合成,所有这些化合物的各种光学异构体均应理解为包括在本发明的范围之内。
实施例1.1-[(E)-3-(3,4-二甲氧苯基)-2-丙烯酰]-4-羟基-2-吡咯烷酸甲酯(中间体II)
(1)4-羟基脯氨酸甲酯盐酸盐的制备。
将20g(0.15mol)4-羟基脯氨酸混悬于150mL无水甲醇中,通HCl至溶液澄清,回流3h,旋转蒸除甲醇至析出白色沉淀,低温静置2h后,抽滤得白色结晶,分别用丙酮、乙醚洗涤滤饼,减压干燥得白色结晶25.0g。产率90%。熔点162-164℃。
(2)(E)-3-(3,4-二甲氧苯基)-2-丙烯酸的制备。
18g(0.1mol)咖啡酸溶于90mL冷的4N NaOH中,控制内温低于20℃,加入20mLMe2SO4,反应20min后,同时滴加50mL 4N NaOH和20mL Me2SO4,滴加完毕,于1h内缓缓升温使回流,反应1.5h,再加入50mL 4N NaOH回流2h,冷至室温,浓盐酸调pH至2,静置3-4h,抽滤,冷水洗涤滤饼,得粗品,乙醇:水重结晶得淡黄色片状结晶16.4g,遇K3Fe(SCN)6/FeCl3不显蓝色,产率78.8%。熔点179.4-181.1℃。
(3)(E)-3-(3,4-二甲氧苯基)-2-丙烯酰氯的制备。
将20.8g(10mmol)(E)-3-(3,4-二甲氧苯基)-2-丙烯酸溶于40mL SOCl2和320ml苯中,回流3h,减压蒸除溶剂,得淡黄色结晶。
(4)1-[(E)-3-(3,4-二甲氧苯基)-2-丙烯酰]-4-羟基-2-吡咯烷酸甲酯(中间体II)的制备。
将1.85g(11mmol)4-羟基脯氨酸甲酯盐酸盐溶于20mL Py中,加入3mL Et3N,室温搅拌20min,抽滤,除去白色沉淀,滤液降温至-5℃,在此温度下滴加20mL含有2.82g(10mmol)(E)-3-(3,4-二甲氧苯基)-2-丙烯酰氯的CH2Cl2溶液,室温搅拌过夜,滤除沉淀,滤液旋转蒸发,得棕红色粘稠状液体,加入少量甲苯,旋转蒸发,尽量除净吡啶。所得粗品经减压柱层析分离,洗脱液为石油醚∶乙酸乙酯(4∶1~1∶4)得2.4g淡黄色固体,产率71.6%。熔点62.5-65.5℃。核磁共振氢谱1HNMR(300MHz):2.027-2.134(m,1H),2.305-2.335(m,1H),3.050(s,1H),3.706(s,1H),3.732(s,3H),3.849(s,3H),3.873(s,3H),3.896-3.932(m,1H),4.589(s,1H),4.696(t,J=7.8Hz,1H),6.487(d,J=15.6Hz,1H),6.783(d,J=8.4Hz,1H),7.018(s,1H),7.032(d,J=8.4Hz,1H),7.582(d,J=15.6Hz,1H)
实施例2.4-氨基-1-[(E)-3-(3,4-二甲氧苯基)-2-丙烯酰]-2-吡咯烷酸甲酯(中间体III)
(1)1-[(E)-3-(3,4-二甲氧苯基)-2-丙烯酰]-4-(甲磺酰氧)-2-吡咯烷酸甲酯的制备。
氮氛中,将3.35g(10mmol)1-[(E)-3-(3,4-二甲氧苯基)-2-丙烯酰]-4羟基-2-吡咯烷酸甲酯溶于20mL无水CH2Cl2中,振动溶液,0℃下加入4.5mL Et3N,逐滴加入5mL含有0.8mL甲磺酰氯的无水CH2Cl2溶液,撤去冷浴,室温搅拌4h后,CH2Cl2稀释反应液,分别用饱和NaHCO3水溶液,蒸馏水,饱和食盐水洗涤有机相,无水Na2SO4干燥。蒸除有机相得浅黄色油状物,减压柱层析分离,洗脱液为石油醚∶丙酮(4∶1~1∶2),得3.4g白色结晶。产率82.3%。熔点139.1-140.0℃。1HNMR(300MHz):2.258-2.348(m,2H),2.562-2.645(m,1H),3.067(s,3H),3.770(s,3H),3.899-3.916(6H),4.046-4.152(m,2H),4.714(t,J=8.1Hz,1H),6.490(d,J=15.3Hz,1H),6.850(d,J=8.1Hz,1H),7.090(s,1H),7.103(d,J=8.1Hz,1H),7.674(d,J=15.3Hz,1H)
(2)1-[(E)-3-(3,4-二甲氧苯基)-2-丙烯酰]-2-甲氧甲酰-4-叠氮基吡咯烷的制备。
氮氛中,将4.13g(10mmol)1-[(E)-3-(3,4-二甲氧苯基)-2-丙烯酰]-4-(甲磺酰氧)-2-吡咯烷酸甲酯溶于15mL无水DMF中,加入0.65g(10mmol)研细的NaN3,该混合物于55~60℃反应10h。冷却反应液,倾入冰水中,振动,析出白色沉淀,AcOEt(4×15ml)提取,合并有机相,饱和食盐水洗涤,无水Na2SO4干燥。抽滤,旋转蒸除滤液,得黄褐色的蓬松固体,减压柱层析分离,洗脱液为石油醚∶乙酸乙酯(4∶1~1∶2),得2.1g淡黄色固体。产率58.2%。IR:νCH3 2953,νN3 2104,νC=O 1749,1650,νC=C 1597,1513
(3)4-氨基-1-[(E)-3-(3,4-二甲氧苯基)-2-丙烯酰]-2-吡咯烷酸甲酯(中间体III)的制备。
将11g(30mmol)1-[(E)-3-(3,4-二甲氧苯基)-2-丙烯酰]-2-甲氧甲酰-4-叠氮基吡咯烷溶于380mL无水乙醇中,加入3g 5%Pd/CaCO3,于760mmHg氢化,室温反应2h,间歇排除生成的N2,滤液浓缩得棕红色油状物,减压柱层析分离,洗脱液为二氯甲烷∶甲醇(100∶1~5∶1)得6.2g黄绿色油状产品。冷置,得片状结晶。产率60.8%。IR:νNH2 3345.94,3257.87,νCH3 2936,νC=O 1726,1641,νC=C 1590,1514
实施例3.1-[(E)-3-(3,4-二甲氧苯基)-2-丙烯酰]-2-N-羟酰氨-4-(2-苯乙酰)氨基吡咯烷的制备
(1)1-[(E)-3-(3,4-二甲氧苯基)-2-丙烯酰]-4-[(2-苯乙酰)氨基]-2-吡咯烷酸甲酯的制备。
将334mg(1mmol)4-氨基-1-[(E)-3-(3,4-二甲氧苯基)-2-丙烯酰]-2-吡咯烷酸甲酯溶于2mL无水CH2Cl2和0.5mL Et3N中,滴加2mL含有155mg苯乙酰氯的CH2Cl2溶液,室温搅拌3h,其间有白色固体生成,加CH2Cl2稀释反应液,分别用1%盐酸,5%Na2CO3,蒸馏水洗涤有机相,无水Na2SO4干燥。旋转蒸除溶剂,得黄色蓬松固体,减压柱层析分离,洗脱液为石油醚∶乙酸乙酯(4∶1~1∶4),得268mg白色结晶。产率58.9%。熔点72.5-74.6℃。1HNMR(300MHz)2.415-2.465(m,2H),3.481(m,2H),3.700(s,3H),3.900(s,3H),3.914(s,3H),3.853-3.931(m,2H),4.549(dd,J=2.4,7.5Hz,1H),4.720(d,J=3Hz,1H),6.461(d,J=15.6Hz,1H),6.950(d,J=7.5Hz,1H),60.811-7.091(3H),7.197-7.313(5H),7.639(d,J=15.6Hz,1H)
(2)1-[(E)-3-(3,4-二甲氧苯基)-2-丙烯酰]-2-N-羟酰氨-4-(2-苯乙酰)氨基吡咯烷
将670mg(2mmol)1-[(E)-3-(3,4-二甲氧苯基)-2-丙烯酰]-4-[(2-苯乙酰)氨基]-2-吡咯烷酸甲酯溶于7mL无水甲醇中,加入1.5mL NH2OK的甲醇溶液,(按Fieser and Fieser,Vol 1,P 478制备),室温搅拌,24h后加入1.5g硅胶,旋转蒸除溶剂,所得干粉硅胶上减压硅胶柱,二氯甲烷∶甲醇(50∶1~5∶1)洗脱,得淡黄色固体392mg,遇FeCl3溶液显红色,产率58.3%。熔点117.3-118.8℃。1HNMR(300MHz)1.187-1.778(m,1H),2.381-2.409(m,1H),3.401(s,2H),3.704-3.742(m,1H)3.775(s,3H),3.801(s,3H),4.009-4.342(m,3H),6.845(d,J=15.3Hz,1H),6.934(d,J=8.4Hz,1H),7.172-7.328(m,7H),7.382(d,J=15.3Hz,1H)
实施例4.1-[(E)-3-(3,4-二甲氧苯基)-2-丙烯酰]-2-N-羟酰氨-4-甲氧基吡咯烷
氮氛中,将2.5g NaH混悬于20mL无水THF中,冷浴中滴加10mL含有3.35g(10mmol)1-[((E)-3-(3,4-二甲氧苯基)-2-丙烯酰]-4羟基-2-吡咯烷酸甲酯的无水THF溶液,再滴加10mL含有1.56g CH3I的无水THF溶液,逐渐升温至50-55℃,TLC监测至反应完全,冷却反应液,加入含冰的稀盐酸至中性,CH2Cl2(4×15ml)提取,合并有机相,蒸馏水洗涤至中性,无水Na2SO4干燥。抽滤,旋转蒸除滤液,得浅黄色的蓬松固体,减压柱层析分离,洗脱液为石油醚∶乙酸乙酯(4∶1~1∶2),得1.8g白色固体。产率51.7%。ESI-MS:M+1 350.2。得到的醚类化合物在NH2OK的无水甲醇溶液中搅拌24h,分离纯化,得产物。ESI-MS:M+1 351.3。
实施例5.1-[(E)-3-(3,4-二甲氧苯基)-2-丙烯酰]-4-异丙氨基膦酰氧基-2-吡咯烷酸甲酯(按路线3)。
氮氛中,将0.92mL POCl3溶于干燥CHCl3中,冷却至-10℃,30min内滴加入10mL含有3g(9mmol)1-[((E)-3-(3,4-二甲氧苯基)-2-丙烯酰]-4-羟基-2-吡咯烷酸甲酯和3.2mLPy的无水CHCl3溶液,保温0℃以下反应3h,冷却至-20℃,逐滴加入10mL含0.6g异丙胺的无水CHCl3溶液,缓慢升温并保持内温0-10℃反应2h,加入1.5mL H2O,搅拌30min,CH2Cl2稀释反应液,分别用饱和NaHCO3水溶液,蒸馏水,饱和食盐水洗涤有机相,无水Na2SO4干燥。蒸除有机相得浅黄色油状物,减压柱层析分离,洗脱液为二氯甲烷∶甲醇(100∶1~10∶1),得2.4g白色结晶。产率52.5%。熔点99.1-102.0℃。ESI-MS:M-1 456.5
实施例6.含有游离酚羟基化合物的制备(按路线4)。
(1)(E)-3-(3,4-二乙酰氧苯基)-2-丙烯酸的制备。
将18g(0.1mmol)咖啡酸溶于75mL乙酸酐中,滴入催化量浓H2SO4,于60℃反应10min,反应液冷却后倾入冰水中剧烈搅拌至析出白色沉淀,抽滤,水洗滤饼,得粗品,乙酸乙酯∶正己烷重结晶得24.6g白色结晶,遇K3Fe(SCN)6/FeCl3不显蓝色,产率93.2%。熔点144.5-146.7℃。
(2)(E)-3-(3,4-二乙酰氧苯基)-2-丙烯酰氯的制备。
以(E)-3-(3,4-二乙酰氧苯基)-2-丙烯酸为原料,方法同实施例1中(3),得白色针状结晶。
(3)1-[(E)-3-(3,4-二乙酰氧苯基)-2-丙烯酰]-4-羟基-2-吡咯烷酸甲酯的制备。
以化合物(E)-3-(3,4-二乙酰氧苯基)-2-丙烯酰氯和4-羟基脯氨酸甲酯盐酸盐为原料,方法同实施例1中(4),得白色结晶,产率72.6%。熔点139-141℃。
(4)1-[(E)-3-(3,4-二乙酰氧苯基)-2-丙烯酰]-4-[(4-甲苯基)磺酰]氧基-2-吡咯烷酸甲酯的制备。
以化合物1-[(E)-3-(3,4-二乙酰氧苯基)-2-丙烯酰]-4-羟基-2-吡咯烷酸甲酯为原料,方法同实施例2中(1),得白色结晶,产率78.9%。熔点117-120℃(分解)。
(5)1-[(E)-3-(3,4-二羟基苯基)-2-丙烯酰]-4-[(4-甲苯基)磺酰]氧基-2-吡咯烷酸甲酯的制备。
将0.81g(1.66mmol)1-[(E)-3-(3,4-二乙酰氧苯基)-2-丙烯酰]-4-[(4-甲苯基)磺酰]氧基-2-吡咯烷酸甲酯溶于8mL甲醇和8mL THF混合溶液中,加入3mL浓盐酸,60℃下搅拌20min,冷却反应液,加入冷水,充分混和,乙酸乙酯(4×10mL)提取产生的白色沉淀,饱和食盐水洗涤有机相至中性,无水Na2SO4干燥。旋转蒸除溶剂,得白色蓬松固体,VLC分离,洗脱液为石油醚∶乙酸乙酯∶乙酸(30∶10∶1~10∶30∶1),得0.47g白色结晶,遇K3Fe(SCN)6/FeCl3显蓝色。产率61.4%。熔点142.0-144.5℃。
实施例7.抑酶试验
(1)明胶中游离氨基测定:
甘氨酸溶于50mmol/L硼酸钠缓冲液(5ml,pH8.5)中,配制成0.007mol/L溶液,取不同体积甘氨酸溶液与2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)反应30min,测定450nm波长处吸收度,作出浓度——吸收度标准曲线,见图1。
编号 0 1 2 3 4 5 6
甘氨酸溶液(mL) 0 0.3 0.6 1.2 1.8 2.4 3.0
硼酸钠缓冲液(mL) 3.0 2.7 2.4 1.8 1.2 0.6 0
0.03%TNBS溶液(μL) 80 80 80 80 80 80 80
吸收度A 0 0.082 0.179 0.379 0.536 0.761 0.929
甘氨酸浓度C(μ/L) 0 0.7 1.4 2.4 4.2 5.6 7
标准曲线为:A=0.13485C-0.10038 r=0.9996明胶配制成20mg/3mL的溶液,按上述方法测定吸收度为0.142,即20mg明胶中约含有1.8μmol游离氨基。
(2)明胶琥珀酰化:
明胶(100mg)溶于50mmol/L硼酸钠缓冲液(5ml,pH8.5)中,琥珀酸酐(10mg)分批加入,用1mol/L NaOH调节,使溶液保持pH8.0-8.5,TLC检测反应,反应完全后,用50mmol/L硼酸钠缓冲液(pH8.5)充分透析,最终蛋白浓度由福林-酚蛋白分析测定为3.64mg/mL。
(3)明胶酶活性分析:
96孔板中分别加入上述琥珀酰明胶溶液55μL(约含200μg琥珀酰明胶),明胶酶溶液[3mg明胶酶溶于50mmol/L硼酸钠缓冲液(pH8.5)100ml中],50mmol/L硼酸钠缓冲液(pH8.5)补足150μL,37℃孵化30min,加入0.03%TNBS溶液50μL,室温放置20min,于450nm波长处测定吸收度。
编号 1 2 3 4 5
明胶酶溶液(μL) 2.5 5 7.5 10 12.5
琥珀酰明胶溶液(μL) 55 55 55 55 55
硼酸钠缓冲液(μL) 92.5 90 87.5 85 82.5
吸收度 0.505 0.686 1.036 1.163 1.437
空白组
编号 1 2 3 4 5
明胶酶溶液(μL) 2.5 5 7.5 10 12.5
硼酸钠缓冲液(μL) 147.5 145 142.5 140 137.5
吸收度 0.320 0.322 0.331 0.339 0.344
2号孔中的吸收度为0.364,适于吸收度测定,所以选定酶溶液的体积为5μL
(4)抑酶检测:
96孔板中分别加入上述琥珀酰明胶溶液55μL,明胶酶溶液5μL,不同梯度浓度的化合物,50mmol/L硼酸钠缓冲液(pH8.5)补足150μL;100%组不含抑制剂,空白组仅加入5μL明胶酶溶液,均用硼酸钠缓冲液补足150μL。37℃孵化30min,加入0.03%TNBS溶液50μL,室温放置20min,于450nm波长处测定吸收度。按照如下公式计算抑制率:
然后以抑制率为横坐标,为浓度纵坐标,利用半对数坐标纸上求出各化合物的IC50。
IC50 熔点
R1 R2 R3
(nmol) (℃)
OH MeO Me 657.9 62.5-65.5
OSO2CH3 MeO Me 198.9 139.1-140.0
OSO2CH3 MeO Ac 234.5 77.0-79.0
OSO2C6H4CH3-p MeO Me 182.3 60.2-62.1
OSO2C6H4CH3-p MeO Ac 160.0 118.5-120.8
OCOC6H2(OCOCH3)3-3’,4’,5’ MeO Ac 731.4 81.4-83.6
OSO2C6H4CH3-p MeO H 104.9 142.0-144.5
OSO2CH3 MeO H 168.1 179.0-180.5
OH MeO H 523.8 179.0-180.5
NHCOCH2CH3 MeO Me 479.4 132.0-133.7
NHCO(CH2)4CH3 MeO Me 130.7 64.3-66.4
NHCOC5H4N MeO Me 91.2 121.9-123.1
NHSO2CH3 MeO Me 155.5 83.0-84.7
NHSO2C6H4CH3-p MeO Me 178.0 101.9-103.4
NHCO(CH2)2COOH MeO Me 103.1 155.3-157.0
NHCOCH2C6H5 MeO Me 110.6 72.5-74.6
NHCO(CH2)2C6H5 MeO Me 93.4 80.3-81.5
NHCOCH=CHC6H3(OMe)-4’ MeO Me 65.7 154.4-155.7
OH NHOH Me 9.7 117.3-118.8
NHCO(CH2)4CH3 NHOH Me 7.8 105.0-107.5
NHCOCH2CH3 NHOH Me 15.7 123.0-125.4
NHCOCH2C6H5 NHOH Me 11.5 124.9-125.7
NHSO2C6H4CH3-p NHOH Me 9.7 99.7-101.9
NHCO(CH2)2C6H5 NHOH Me 9.4 137.9-140.5
NHCOCH=CHC6H3(OMe)-4’ NHOH Me 6.7 154.4-155.7
NHCOC5H4N NHOH 9.0 147.5-149.6
IC50 熔点
R1 R2
(nmol) (℃)
OH OMe >1000 139.2-140.4
OSO2CH3 OMe 541.4 156.7-158.9
NHSO2CH3 OMe 262.5 52.5-55.4
NHSO2C6H4CH3-p OMe 113.1 68.8-70.3
NHCOCH2CH3 OMe 451.7 142.5-143.9
NHCO(CH2)4CH3 OMe ------ 72.5-74.6
NHCOC5H4N OMe 71.9 55.0-57.1
NHCO(CH2)2COOH OMe 76.1 72.5-75.5
NHCOCH2C6H5 OMe 103.4 73.0-74.5
NHMc OMe 62.0 176.5-177.0
NHCa OMe 2.1 137.7-141.3
NHGa OMe 49.3 115.6-117.8
NHMc NHOH 0.9 211.6-213.0
NHCO(CH2)4CH3 NHOH 7.7 183.3-185.3
NHSO2C6H4CH3-p NHOH 11.9 101.5-104.5
Mc:COCH=CHC6H3(OMe)2-3’,4’;Ca:COCH=CHC6H3(OH)2-3’,4’;
Ga:COC6H2(OH)3-3’,4’,5’
实施例8.抑制荷肝癌H22小鼠血道转移实验(体内试验)
(1)实验原理:
转移是恶性肿瘤细胞借助血道、淋巴道等途径在远离原发肿瘤生长部位的组织器官内形成继发肿瘤的过程。肿瘤细胞借助基质金属蛋白酶穿透血管的基底膜进入血液循环系统,进而在基质金属蛋白酶的帮助下在远端组织定位、生长。肺部由于毛细血管比较丰富,肿瘤细胞进入血道后较易侵袭转移进入肺部在肺部形成转移灶。我们通过在小鼠尾静脉中注射一定数量的肿瘤细胞,来近似地模拟肿瘤细胞侵袭进入血液循环。然后通过定量给药来观察目标化合物对肿瘤细胞转移进入肺部的抑制作用。从而初步定性的说明目标化合物对肿瘤细胞侵袭、转移的干扰抑制作用。
(2)实验材料
动物:
雄性昆明系小鼠,体重18~22g,山东大学实验动物中心提供。
荷肝癌H22腹水型小鼠(瘤种),山东省医学科学院提供。
Bouin固定液:
饱和苦味酸溶液∶甲醛∶冰乙酸=15∶5∶1,使用前24小时配制。
受试化合物溶液的配制:
称取各受试化合物,加0.5%羧甲基纤维素钠(CMC-Na)溶液溶解,使化合物浓度为4mg/mL(ZBG=COOMe)或2mg/mL(ZBG=CONHOH)。水不溶性化合物使用前在超声波中振荡10min,使之成为均匀的悬浮液,以5%CMC-Na为空白组。
(3)实验方法:
取生长良好的荷肝癌H22小鼠,抽取腹水,加生理盐水稀释10倍,置于冰浴中。用4号半针头给每只小鼠尾静脉注射瘤悬液0.2ml。5小时后称重,随机分组。24小时后按100mg/kg/d(ZBG=COOMe)或50mg/kg/d(ZBG=CONHOH)剂量分别灌胃给药。给药6天,停药一天。第13天给药24小时后颈椎脱臼处死小鼠,分别称体重,解剖取肺,称肺重后将肺用Bouin液固定。24小时后分别计数肺转移灶数(结节数)。用Origin5.0软件的单因素方差分析(One-Way ANOVA)功能求算出整体差异;用t检验分别对各给药组与空白对照组进行两两比较;用下面公式求出抑制率:
(4)实验结果与讨论
数据处理采用单因素方差分析(One-Way ANOVA)方法比较组间差异时,各组体重与空白组均无显著性差异(p<0.05);各组肺重与空白组均无显著性差异(p<0.05);结节数均存在极显著性差异(p<0.01)。与空白组比较,体重与肺重无显著性差异说明所合成的抑制剂毒副作用较小;结节数明显减少说明所合成的抑制剂显示了很好的抑制肿瘤转移活性。
Claims (4)
1.具有通式(I)的化合物,
其中,
(a)R1为烃代羰氧基、烃代砜氧基、烃代羰胺、烃氧基、烃氧代磷酰胺、烃氧代磷羰氧基、烃氨代磷酰胺、烃氨代磷羰氧基,所述的烃为C1-C16烷基,C1-C8环烷基,C1-C12烯基,C1-C12炔基,C5-C12芳基,C4-C11芳杂基,该烷基、环烷基、烯基、炔基、芳基和芳杂基可被卤素、氧、硫、氮、叠氮、氰基取代;
(b)R2为甲氧基或羟氨基;
(c)R3为C1-C8烷基,C1-C8环烷基,芳基,杂芳基,芳烷基,芳烯基,杂环芳烷基,羟烷基,羧烷基,氨烷基及取代的氨烷基,R3的芳基可被下列基团所取代:烷基,烯基,芳烷基,醛基,芳酰基,卤烷基,卤素,羧基,烷氧羰基,氨基甲酰基,烷基氨基甲酰基,芳基氨基甲酰基,氰基。
2.根据权利要求1所述的化合物,其特征在于,具体包括:
1-[(E)-3-(3,4-二甲氧苯基)-2-丙烯酰]-4-(甲磺酰氧)-2-吡咯烷酸甲酯
1-[(E)-3-(3,4-二乙酰氧苯基)-2-丙烯酰]-4-(甲磺酰氧)-2-吡咯烷酸甲酯
1-[(E)-3-(3,4-二甲氧苯基)-2-丙烯酰]-4-[(4-甲苯基)磺酰]氧基-2-吡咯烷酸甲酯
1-[(E)-3-(3,4-二乙酰氧苯基)-2-丙烯酰]-4-[(4-甲苯基)磺酰]氧基-2-吡咯烷酸甲酯
1-[(E)-3-(3,4-二乙酰氧苯基)-2-丙烯酰]-4-[3,4,5-三(乙酰氧)苯甲酰基]氧基-2-吡咯烷酸甲酯
1-[(E)-3-(3,4-二羟基苯基)-2-丙烯酰]-4-[(4-甲苯基)磺酰]氧基-2-吡咯烷酸甲酯
1-[(E)-3-(3,4-二羟基苯基)-2-丙烯酰]-4-[(甲磺酰)氧基]-2-吡咯烷酸甲酯
1-[(E)-3-(3,4-二羟基苯基)-2-丙烯酰]-4-[(甲磺酰)氧基]-2-吡咯烷酸甲酯
1-[(E)-3-(3,4-二甲氧苯基)-2-丙烯酰]-4-(丙酰氨基)-2-吡咯烷酸甲酯
1-[(E)-3-(3,4-二甲氧苯基)-2-丙烯酰]-4-(己酰氨基)-2-吡咯烷酸甲酯
1-[(E)-3-(3,4-二甲氧苯基)-2-丙烯酰]-4-[(3-吡啶甲酰)氨基]-2-吡咯烷酸甲酯
1-[(E)-3-(3,4-二甲氧苯基)-2-丙烯酰]-4-[(甲磺酰)氨基]-2-吡咯烷酸甲酯
1-[(E)-3-(3,4-二甲氧苯基)-2-丙烯酰]-4-[(E)-3-(4-甲氧苯基)-2-丙烯酰]氨基-2-吡咯烷酸甲酯
4-[1-[(E)-3-(3,4-二甲氧苯基)-2-丙烯酰]-5-(甲氧羰基)四氢-1H-3吡咯]氨基-4-氧代丁酸
1-[(E)-3-(3,4-二甲氧苯基)-2-丙烯酰]-4-[(2-苯乙酰)氨基]-2-吡咯烷酸甲酯
1-[(E)-3-(3,4-二甲氧苯基)-2-丙烯酰]-4-[(3-苯丙酰)氨基]-2-吡咯烷酸甲酯
11-[(E)-3-(3,4-二甲氧苯基)-2-丙烯酰]-4-[(E)-3-(4-甲氧苯基)-2-丙烯酰]氨基-2-吡咯烷酸甲酯
1-[(E)-3-(3,4-二甲氧苯基)-2-丙烯酰]-4-羟基-2-N-羟酰氨吡咯烷(41)的制备
1-[(E)-3-(3,4-二甲氧苯基)-2-丙烯酰]-4-(己酰氨基)-2-N-羟酰氨吡咯烷
1-[(E)-3-(3,4-二甲氧苯基)-2-丙烯酰]-2-N-羟酰氨-4-丙酰氨基吡咯烷
1-[(E)-3-(3,4-二甲氧苯基)-2-丙烯酰]-2-N-羟酰氨-4-(2-苯乙酰)氨基吡咯烷
1-[(E)-3-(3,4-二甲氧苯基)-2-丙烯酰]-2-N-羟酰氨-4-甲磺酰氨基吡咯烷
1-[(E)-3-(3,4-二甲氧苯基)-2-丙烯酰]-2-N-羟酰氨-4-(3-苯丙酰)氨基吡咯烷
1-[(E)-3-(3,4-二甲氧苯基)-2-丙烯酰]-2-N-羟酰氨-4-[(E)-3-(4-甲氧苯基)-2-丙烯酰]氨基吡咯烷
1-[(E)-3-(3,4-二甲氧苯基)-2-丙烯酰]-2-N-羟酰氨-4-(3-吡啶甲酰)氨基吡咯烷
4-[(甲磺酰)氧基-1-(3,4,5-三甲氧苯甲酰)-2-吡咯烷酸甲酯
4-[(甲磺酰)氨基]-1-(3,4,5-三甲氧苯甲酰)-2-吡咯烷酸甲酯
4-[(4-甲苯基)磺酰]氨基-1-(3,4,5-三甲氧苯甲酰)-2-吡咯烷酸甲酯
4-(丙酰氨基)-1-(3,4,5-三甲氧苯甲酰)-2-吡咯烷酸甲酯
4-(己酰氨基)-1-(3,4,5-三甲氧苯甲酰)-2-吡咯烷酸甲酯
4-[(3-吡啶甲酰)氨基]-1-(3,4,5-三甲氧苯甲酰)-2-吡咯烷酸甲酯
4-[5-(甲氧羰基)-1-(3,4,5--三甲氧苯甲酰)四氢-1H-3-吡咯]氨基-4-氧代丁酸
4-[(2-苯乙酰)氨基]-1-(3,4,5-三甲氧苯甲酰)-2-吡咯烷酸甲酯
4-[(E)-3(3,4-二甲氧苯基)-2-丙烯酰]氨基-1-(3,4,5-三甲氧苯甲酰)-2-吡咯烷酸甲酯
4-[(E)-3(3,4-二羟苯基)-2-丙烯酰]氨基-1-(3,4,5-三甲氧苯甲酰)-2-吡咯烷酸甲酯
4-[(3,4,5-三羟苯基)氨基]-1-(3,4,5-三甲氧苯甲酰)-2-吡咯烷酸甲酯
4-[(E)-3(3,4-二甲氧苯基)-2-丙烯酰]氨基-2-N-羟酰氨-1-(3,4,5-三甲氧苯甲酰)吡咯烷
4-(己酰氨基)-2-N-羟酰氨-1-(3,4,5-三甲氧苯甲酰)吡咯烷
2-N-羟酰氨-4-[(4-甲苯基)磺酰]氨基-1-(3,4,5-三甲氧苯甲酰)吡咯烷
1-[(E)-3-(3,4-二甲氧苯基)-2-丙烯酰]-2-N-羟酰氨-4-甲氧基吡咯烷
1-[(E)-3-(3,4-二甲氧苯基)-2-丙烯酰]-4-异丙氨基膦酰氧基-2-吡咯烷酸甲酯。
3.制备权利要求1所述化合物的中间体,其特征在于,是1-[(E)-3-(3,4-二甲氧苯基)-2-丙烯酰]-4羟基-2-吡咯烷酸甲酯,4-氨基-1-[(E)-3-(3,4-二甲氧苯基)-2-丙烯酰]-2-吡咯烷酸甲酯,1-[(E)-3-(3-甲氧基-4-羟基苯基)-2-丙烯酰]-4羟基-2-吡咯烷酸甲酯,4-氨基-1-[(E)-3-(3-甲氧基-4-羟基苯基)-2-丙烯酰]-2-吡咯烷酸甲酯,4-羟基-1-(3,4,5-三甲氧苯甲酰)-2-吡咯烷酸甲酯,4-氨基-1-(3,4,5-三甲氧苯甲酰)-2-吡咯烷酸甲酯,1-苯乙酰-4-羟基-2-吡咯烷酸甲酯,4-氨基-1-苯乙酰-2-吡咯烷酸甲酯,1-苯丙酰-4-羟基-2-吡咯烷酸甲酯或4-氨基-1-苯丙酰-2-吡咯烷酸甲酯。
4.权利要求1所述化合物的制备方法,其特征在于,以羟脯氨酸甲酯盐酸盐为原料,在碱性条件下缩合,所得的化合物作为中间体,再与酰化、磺酰化试剂反应,分离纯化而得。
Priority Applications (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CNA2003101054227A CN1528745A (zh) | 2003-10-21 | 2003-10-21 | 吡咯烷类基质金属蛋白酶抑制剂及其制备方法 |
CNB2004100878667A CN1294120C (zh) | 2003-10-21 | 2004-10-20 | 吡咯烷类基质金属蛋白酶抑制剂及其应用 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CNA2003101054227A CN1528745A (zh) | 2003-10-21 | 2003-10-21 | 吡咯烷类基质金属蛋白酶抑制剂及其制备方法 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN1528745A true CN1528745A (zh) | 2004-09-15 |
Family
ID=34304337
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CNA2003101054227A Pending CN1528745A (zh) | 2003-10-21 | 2003-10-21 | 吡咯烷类基质金属蛋白酶抑制剂及其制备方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN1528745A (zh) |
Cited By (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US7622496B2 (en) | 2005-12-23 | 2009-11-24 | Zealand Pharma A/S | Modified lysine-mimetic compounds |
CN101357893B (zh) * | 2008-08-22 | 2011-12-07 | 山东大学 | 乙二胺类金属蛋白酶抑制剂及其应用 |
EP2424854A2 (en) * | 2009-04-23 | 2012-03-07 | Invasc Therapeutic, Inc. | Compositions and methods for treatment of cardiovascular disease |
CN101538311B (zh) * | 2009-04-16 | 2012-10-31 | 山东大学 | α-氨基酰环酰亚胺类肽金属蛋白酶抑制剂及其应用 |
AU2007249952B2 (en) * | 2006-05-10 | 2013-05-02 | Arizona Biomedical Research Commission | Modified chalcone compounds as antimitotic agents |
US8927590B2 (en) | 2006-12-21 | 2015-01-06 | Zealand Pharma A/S | Synthesis of pyrrolidine compounds |
JP2017528460A (ja) * | 2014-09-10 | 2017-09-28 | エピザイム インコーポレイテッド | 不可逆的smyd阻害剤としてのイソオキサゾールカルボキサミド |
US11324799B2 (en) | 2017-05-05 | 2022-05-10 | Zealand Pharma A/S | Gap junction intercellular communication modulators and their use for the treatment of diabetic eye disease |
-
2003
- 2003-10-21 CN CNA2003101054227A patent/CN1528745A/zh active Pending
Cited By (12)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US7622496B2 (en) | 2005-12-23 | 2009-11-24 | Zealand Pharma A/S | Modified lysine-mimetic compounds |
US8431540B2 (en) | 2005-12-23 | 2013-04-30 | Zealand Pharma A/S | Modified lysine-mimetic compounds |
AU2007249952B2 (en) * | 2006-05-10 | 2013-05-02 | Arizona Biomedical Research Commission | Modified chalcone compounds as antimitotic agents |
US8927590B2 (en) | 2006-12-21 | 2015-01-06 | Zealand Pharma A/S | Synthesis of pyrrolidine compounds |
US9469609B2 (en) | 2006-12-21 | 2016-10-18 | Zealand Pharma A/S | Synthesis of pyrrolidine compounds |
CN101357893B (zh) * | 2008-08-22 | 2011-12-07 | 山东大学 | 乙二胺类金属蛋白酶抑制剂及其应用 |
CN101538311B (zh) * | 2009-04-16 | 2012-10-31 | 山东大学 | α-氨基酰环酰亚胺类肽金属蛋白酶抑制剂及其应用 |
EP2424854A2 (en) * | 2009-04-23 | 2012-03-07 | Invasc Therapeutic, Inc. | Compositions and methods for treatment of cardiovascular disease |
CN102459220A (zh) * | 2009-04-23 | 2012-05-16 | 因瓦斯科医疗有限公司 | 治疗心血管疾病的组合物及其方法 |
EP2424854A4 (en) * | 2009-04-23 | 2012-10-17 | Invasc Therapeutic Inc | COMPOSITIONS AND METHODS FOR TREATING CARDIOVASCULAR DISEASE |
JP2017528460A (ja) * | 2014-09-10 | 2017-09-28 | エピザイム インコーポレイテッド | 不可逆的smyd阻害剤としてのイソオキサゾールカルボキサミド |
US11324799B2 (en) | 2017-05-05 | 2022-05-10 | Zealand Pharma A/S | Gap junction intercellular communication modulators and their use for the treatment of diabetic eye disease |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN1036920C (zh) | 含杂环碳酸衍生物 | |
CN1198807C (zh) | 作为环加氧酶-2抑制剂的5-芳基-1h-1,2,4-三唑化合物及含有它们的药物组合物 | |
CN1028992C (zh) | 1,4,-苯并硫杂吖庚因衍生物的制备方法 | |
CN1048245C (zh) | 5-吡咯基-2-吡啶基甲基亚磺酰基苯并咪唑衍生物,其制备方法及含它们的抗溃疡组合物 | |
CN1473154A (zh) | 2,3-二氮杂萘酮衍生物 | |
CN1221417A (zh) | 具有抗糖尿病、降低血脂、抗高血压性能的噻唑烷二酮化合物,其制备方法及其药物组合物 | |
CN88101542A (zh) | 新颖的苯并唑衍生物及其制备方法 | |
CN1219929A (zh) | 用作肌苷-5'-一磷酸脱氢酶抑制剂的脲衍生物 | |
CN1430599A (zh) | 苯基甘氨酸衍生物 | |
CN1976919A (zh) | 作为erk蛋白激酶抑制剂的吡咯化合物、它们的合成和中间体 | |
CN1175252A (zh) | 作为蛋白激酶特别是egf-r酪氨酸激酶的抑制剂的咪唑衍生物 | |
CN1331076A (zh) | 稠合的吡唑基化合物、包含该化合物的组合物及该化合物的应用 | |
CN1226248A (zh) | 用于抑制细胞增殖的取代的双吲哚基马来酰亚胺 | |
CN1143960A (zh) | 治疗用杂环化合物 | |
CN1914151A (zh) | 作为环氧合酶-2抑制剂的二芳基-2(5h)-呋喃酮类的释放一氧化氮的前药 | |
CN1035663A (zh) | 取代的喹啉衍生物的制备方法 | |
CN1528745A (zh) | 吡咯烷类基质金属蛋白酶抑制剂及其制备方法 | |
CN1150175C (zh) | 1,3,4-噁二唑酮衍生物 | |
CN1216547A (zh) | 质子泵抑制剂 | |
CN1148593A (zh) | 色酮衍生物、其制造方法及医药组合物 | |
CN1914169A (zh) | 作为环氧合酶-2抑制剂的二芳基-2-(5h)-呋喃酮的氧化氮释放前药 | |
CN1122031C (zh) | 用作法呢基蛋白转移酶抑制剂的取代的苯并芳庚并吡啶衍生物 | |
CN1243746C (zh) | 抑制血管生成的杂环化合物 | |
CN1214677A (zh) | 作为环氧化酶-2抑制剂药物前体的二苯基1,2-二苯乙烯类化合物 | |
CN1849306A (zh) | 基质金属蛋白酶抑制剂 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C02 | Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001) | ||
WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |