CN1475227A - 防治绝经期综合症、骨质疏松症和乳腺癌的组合物 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种防治绝经期综合症、骨质疏松症和乳腺癌的组合物。该组合物的基本成分为大豆异黄酮类物质和乳酸菌。大豆异黄酮类物质是以大豆芽汁为原料经过乳酸菌发酵制成的异黄酮甙元；乳酸菌具有促进内源性雌激素再吸收，提高机体的内源性雌激素水平，同时还具有提高异黄酮类物质的吸收和再吸收的能力。由于该组合物具有提高内源性雌激素水平和补充外源性雌激素样物质的双重作用，因而对于防治绝经期综合症、骨质疏松症和乳腺癌具有更显著的效果。而且该组合物中的大豆异黄酮类物质是通过乳酸菌发酵制备的，因此它不存在化学物质的污染物。

Description

防治绝经期综合症、骨质疏松症和乳腺癌的组合物

技术领域

本发明涉及一种防治绝经期综合症、骨质疏松症和乳腺癌的组合物，具体涉及包括含大豆异黄酮类物质和乳酸菌的组合物。

背景技术

妇女绝经后雌激素水平下降，会发生与雌激素缺乏相关的疾病如绝经后综合症。由于雌激素水平下降会使体内的钙平衡受到干扰，导致骨质多孔和骨质密度下降，即发生所谓的骨质疏松症。而雌激素水平的下降与肠内菌群失调有极其密切关系，通常体内循环的内源性雌激素有60％从胆囊分泌到肠道内，再经过肠道细菌的作用使之重新吸收入血，重新发挥生物活性作用。当使用广谱抗生素时，血中雌激素的含量比正常时偏低，雌激素被再吸收的能力也明显下降，而此时粪便中雌激素的含量却比正常时高出几十倍。这种现象往往是由于使用抗生素使肠内正常菌群受到抑制，尤其是双歧杆菌等有益菌的含量明显下降，导致雌激素再吸收能力下降，引发与雌激素缺乏相关的疾病。双歧杆菌等肠道有益菌对维持体内雌激素水平发挥重要作用。

大豆异黄酮也称植物雌激素，具有雌激素样作用。大豆及其制品中主要以结合型糖甙形式存在，结合型异黄酮不能通过小肠壁，不具有生物学活性。肠道内的有益菌(如双歧杆菌、乳酸杆菌)具有β-葡萄糖甙酶，能够将糖甙基部分降解掉，生成异黄酮甙元(Hawkswirth G，Drasar BS，Hill MJ.Intestinal bacteriaand the hydrolysis of glycosidic bonds.Med Microbiol，1971，4：451-9.)，只有以甙元的形式才能被吸收入血，发挥生物学活性，未被吸收的则随粪便排出体外。吸收入血的异黄酮甙元经肝脏摄取和灭活后，以葡萄糖醛酸及硫酸结合的形式部分随尿液排出，但大部分从胆道排入肠腔，经肠道细菌的葡糖醛酸糖苷酶等脱结合酶作用，重新形成甙元，重新吸收入血，形成肝肠循环。肠道菌群，尤其肠道的有益菌在异黄酮类物质的吸收和再吸收中发挥重要作用(Xu X，HarrisKS，Wang HJ，et al.Bioavailability of soybean isoflavones depends upon gutmicroflora in women.J Nutr，1995，125：2307-15.)。

大豆异黄酮具有如下的生理功能：

1.防治绝经后骨质疏松大豆异黄酮具有雌激素样作用，对绝经后骨质疏松具有明显的作用，能够使骨质密度明显增加。

2.预防肿瘤的发生大豆异黄酮是酪氨酸蛋白激酶(PTK)的强抑制剂，抑制PTK的活性即抑制肿瘤细胞生长；大豆异黄酮还可抑制拓扑异构酶，导致细胞内DNA双键断裂，从而引起肿瘤细胞生长抑制或死亡。乳酸菌具有如下的生理功能：

1.提高内源性雌激素水平  乳酸菌能够维持和调节肠道菌群平衡，健康的肠道菌群有利于雌激素的重吸收，进而提高内源性雌激素水平。

2.营养作用乳酸菌能够促进机体对钙、铁和维生素D的吸收，这对于防治绝经期骨质疏松有重要作用。

3.提高异黄酮类物质的生物利用度  双歧杆菌和乳酸杆菌具有β-葡萄糖甙

酶和葡糖醛酸糖苷酶等脱结合酶，能够将结合型异黄酮降解为游离型甙元，

重新吸收入血，更大限度地发挥异黄酮的生物效应。

异黄酮类物质和乳酸菌虽然都具有多种重要的生理功能，然而异黄酮类物质的吸收和再吸收依赖于肠道菌群，而肠道菌群受影响的因素较多，因而它的吸收和再吸收的能力往往很低，尤其在缺少肠道有益菌的中老年人，吸收率则更低；而单独应用乳酸菌通过促进雌激素重吸收来提高雌激素水平的途径也有限，因为绝经期后体内雌激素分泌急剧减少，仅靠提高重吸收也不能满足机体的需要。然而目前忽略了这两种成分联用后，在各自用量减少的情况下，呈现的相辅相依的协同作用，因此提供一种能够发挥协同效应的异黄酮类物质与乳酸菌的组合物是十分必要的。

本发明人对成年志愿者，年龄在25到60岁之间的100名妇女，单次摄入含有类异黄酮的代表食品豆奶后，测量血液中异黄酮类物质的浓度和计数粪便中双歧杆菌的活菌数。结果显示：双歧杆菌的活菌数与血液中异黄酮浓度有明显的正相关性，肠道内有益菌占优势的年轻人血液中异黄酮浓度很高，而且在食入豆奶48小时后在血液中仍能检测到。肠道内缺乏有益菌的中老年人血液的异黄酮浓度则很低，食入豆奶24小时后在血液中即很难检测到了。

基于上述的发现，本发明人进行深入研究，结果成功地研制一种组合物，该组合物能促进内源性雌激素再吸收从而提高机体的内源性雌激素水平；还能促进异黄酮类物质吸收和再吸收，从而提高其雌激素样作用。该组合物既能提高内源性雌激素水平又能高效利用补充的外源性雌激素样物质，因而对防治绝经期综合症、骨质疏松症和乳腺癌等具有更显著的效果。

发明内容

一方面本发明提供了一种食品或药物的组合物，该组合物含有作为基本成分的一种具有雌激素样作用的大豆异黄酮类物质和一种提高内源性雌激素重吸收和异黄酮类物质的吸收和重吸收的乳酸菌物质。

本发明中大豆异黄酮为配糖体异黄酮经具有β-葡萄糖甙酶的乳酸菌发酵降解去掉糖基形成的异黄酮甙元，这样在体内更容易吸收，更具活性。其中乳酸菌可以为嗜酸乳杆菌、嗜热链球菌、保加利亚乳杆菌、干酪乳杆菌、双歧杆菌一株或一株以上的组合。

在本发明的组合物中可以使用提纯的异黄酮甙元物质和乳酸菌冻干粉，也可以直接使用含有异黄酮甙元和乳酸菌的发酵产物。

本发明进一步涉及将所述的组合物用于防治绝经期综合症、骨质疏松症和乳腺癌。

本发明还提供了食品形式的所述的组合物，所述食品形式包括饮料、奶制品、发酵牛奶、棒状食品、颗粒状食品形式、粉末状食品、胶囊状食品和片状食品。

本发明进一步提供药物制剂形式的所述的组合物，其中所述药物制剂形式包括水溶液、乳剂、颗粒剂、粉剂、胶囊和片剂。

在本发明的组合物中用作基本成分的上述乳酸菌为该乳酸菌的活菌，包括它的培养物以及冻干品，它的含量没有特别的限制，但可以根据乳酸菌的类型，在其他因素中明智的选择。例如，对于口服液中的乳酸菌，活菌数最好控制在约10⁸-10⁹/ml范围内。通过用稀释样品接种营养琼脂培养基确定活菌数，即37℃厌氧培养，对形成的菌落计数来确定样品的活菌数。对于其他发酵液或最终产品同样可以以上述方式确定乳酸菌的活菌数。

通常通过混合预定量的所述基本成分和其他任选成分制备本发明的组合物，然后将所述混合物加工成为合适的食品或药品制剂形式，用作食品的形式包括饮料、奶制品、发酵牛奶、棒状食品、颗粒状食品、粉末状食品、胶囊状食品和片状食品。用作药物制剂的形式包括水溶液、乳剂、颗粒剂、粉剂、胶囊和片剂等。可以应用通常方法生产上述剂型。在上述剂型的生产中用到的载体包括食用载体和药物可接受的赋性剂和稀释剂。具体对于食品时，优选可口的并能够改善味觉的载体。

因为本发明的组合物含有上述乳酸菌(活菌)，在加工成终产品的过程中，该组合物最好不要受热和/或受压。因此，在将本发明的组合物加工成棒状、颗粒状、粉状、片状等形式时，最好加入所述乳酸菌的冻干粉。

本发明的组合物可以任意添加各种其他具有营养价值的食品添加剂或各种制药领域常规使用的添加剂。上述食品添加剂包括钙、维生素B、维生素D、维生素C和维生素E。

因为该组合物的活性成分是一种天然物质，而且该组合物通过乳酸菌发酵制备，因此它不仅不存在化学物质等的污染物，还具有高产量和低成本的优点。通过发酵技术，利用所述含异黄酮类的产品例如豆腐、豆奶、大豆芽和大豆等，优选大豆芽汁作为发酵底物制备本发明的组合物。更具体地说，该技术包括对溶液形式的底物进行灭菌，将乳酸菌的一株或一株以上的组合加入其中，在37℃条件培养约24-96小时，以便进行发酵。如果需要，可以加入pH控制剂、还原物质(酵母提取物、西红柿汁、L-半胱氨酸等)。

以双歧杆菌作为例子，可以如下述具体地进行上述发酵过程。首先，将双歧杆菌在灭菌的大豆芽汁(浓度为20-30％)培养基中生长约24-96小时，制备种子培养物，然后将该种子培养物接种到灭菌的大豆芽汁培养基(浓度为20-30％)中，接种量为0.5-2％，接种后的培养基在37℃厌氧条件下培养48-72小时，由此可以得到所需的含有异黄酮甙元和乳酸菌(活菌)的发酵液。

可以用常规的方法从该发酵液中分离和纯化异黄酮甙元和乳酸菌。典型的程序可以包括发酵液中用食用级乙醇，调节发酵液的乙醇浓度至70％，并用盐酸或氢氧化钠溶液调发酵液的pH值至蛋白质的等电点(4.0-5.0)，离心发酵液，湿菌体进行冷冻干燥，得到乳酸菌冻干粉，活菌数为10⁹-10¹¹/g。取离心后的上清液经过减压浓缩回收乙醇等工序，浓缩液通过聚酰胺吸附层吸柱，然后用95％食用级乙醇洗脱得目标物质。聚酰胺通过分子中的酰胺羰基与黄酮类化合物分子上的酚羟基形成氢键缔和而产生吸附作用，洗脱时流出先后按母核上酚羟基数目顺序为大豆素(含一个酚羟基)、染料木素(含二个酚羟基)。经过浓缩和灭菌、喷雾干燥可得异黄酮甙元晶体，每克发酵液中含有大豆异黄酮甙元为600μg。

采用高效液相色谱法(HPLC)测量原料及不同组分的异黄酮甙元：

1.色谱仪装置：Waters515泵，Waters2487UV检测器，Rheodyne7725I进样阀；Branson1200超声清洗器；旋转薄膜蒸发器。

2.化学品：

(1)标准样品大豆素(daidzein)和染料木素(genistein)均来自美国Sigma公司。

(2)甲醇、乙醇和乙酸均为分析纯

(3)水：Millipore-Q超纯水

3.色谱条件：

(1)色谱柱YWGC18,250mm×4.5mm，10μm(大连依利特公司)。

(2)流动相为甲醇∶水∶乙酸为10∶10∶1

(3)流速：0.8ml/min

(4)柱温：60℃

(5)波长：260nm

通过将上述制备的含异黄酮甙元和乳酸菌的培养液或从中分离出来的异黄酮甙元晶体和乳酸菌冻干粉与其他任选食品材料调配，制备适当的食品和药物形式。

本发明的组合物用于预防和治疗绝经期综合症、骨质疏松症和乳腺癌。需要接受这种预防和治疗的中老年妇女服用或摄取有效量的本发明上述组合物，可以成功地实现这种预防和治疗的目的。本发明的组合物中乳酸菌具有调节肠道微生态平衡的功效，进而促进内源性雌激素再吸收，提高了机体的内源雌激素水平，同时具有提高异黄酮类物质的吸收和再吸收的能力。由于该组合物具有提高内源性雌激素水平和补充外源性雌激素样物质的双重作用，因而在防治绝经期综合症、骨质疏松症和乳腺癌中具有更显著的效果。该组合物的有效量没有特别的限制，只要它能够成功地预防和治疗绝经期综合症、骨质疏松症和乳腺癌，但是可以根据想要的是食品形式还是药物制剂形式确定该含量。通常，有效量优选如下：每天约摄取10-60mg异黄酮甙元和0.1g的乳酸菌冻干粉(活菌数为10⁹-10¹⁰/g)。

具体实施方式

为了进一步详细描述本发明，如下提供了制备本发明的组合物的实施例，然而应当理解，本发明的范围不因这些实施例而受到限制。

实施例1

饮料的制备

按照下列配方称重混合各成分，以提供饮料的本发明的组合物。

豆芽汁发酵液      10ml

蔗糖              10g

维生素和矿物质    q.s.

香精              q.s.

水                q.s.

总量              100ml

上述豆芽汁发酵液通过如下方法制备，将比例为1∶1的嗜热链球菌和保加利亚乳杆菌在灭菌的大豆芽汁培养基(浓度为20％)中生长约48小时，制备种子培养物，然后将该种子培养物接种到经过灭菌的大豆芽汁培养基(浓度为20％)中，接种量为0.5-2％，在37℃培养24-48小时，由此可以得到所需的含异黄酮甙元和乳酸菌的发酵液，乳酸菌的活菌数控制在10⁸-10⁹/ml范围内。

实施例2

口服液的制备

按照下列配方称重混合各成分，以提供口服液的本发明的组合物。

豆芽汁发酵液    10ml

蔗糖            2.0g

水              q.s.

总量            20ml

上述豆芽汁发酵液通过如下方法制备，将双歧杆菌在灭菌的大豆芽汁培养基(浓度为20％)中生长约48小时，制备种子培养物，然后将该种子培养物接种到经过灭菌的大豆芽汁培养基(浓度为20％)中，接种量为0.5-2％，在37℃培养72小时，由此可以得到所需的含异黄酮甙元和双歧杆菌的发酵液，双歧杆菌的活菌数控制在10⁸-10⁹/ml范围内。

实施例3

果冻的制备

按照下列配方称重并混合各成分，以提供果冻形式的本发明的组合物。

豆芽汁发酵液      1.6g

果汁              50.0g

蔗糖              50.0g

琼脂              2.5g

维生素和矿物质    q.s.

香精              q.s.

与实施例1中相同的方式制备豆芽汁发酵液。

实施例4

粉状物的制备

按照下列配方称重并混合各成分，以提供粉末形式的本发明的组合物。

异黄酮甙元晶体    2.0g

双歧杆菌冻干粉    1.0g

低聚果寡糖        16g

维生素和矿物质    q.s.

香精              q.s.

总量              20g

上述的异黄酮晶体和双歧杆菌冻干粉通过如下方法制备，将双歧杆菌在经过灭菌的大豆芽汁培养基(浓度为20％)中生长约48小时，制备种子培养物，然后将该种子培养物接种到经过灭菌的大豆芽汁培养基(浓度为20％)中，接种量为0.5-2％，接种后的培养基在37℃厌氧培养72小时。用食用级乙醇，调节发酵液的乙醇浓度至70％，并用盐酸或氢氧化钠溶液调节该发酵液pH为4.5左右，离心发酵液，湿菌体进行冷冻干燥，得到乳酸菌冻干粉，活菌数为10⁹-10¹⁰/g。取离心后的上清液经过减压浓缩、回收乙醇等工艺，将浓缩液通过聚酰胺吸附层吸柱，然后用95％食用级乙醇洗脱得目标物质，经过浓缩、灭菌和喷雾干燥可得异黄酮甙元晶体。在每克发酵液中，含有大豆异黄酮600μg。

Claims (8)

1.一种含有异黄酮类物质和乳酸菌作为基本成分的组合物。

2.根据权利要求1的组合物，其特征在于该组合物中异黄酮类物质为大豆异黄酮甙元。

3.根据权利要求1的组合物，其特征在于该组合物中的乳酸菌可以为菌液或冻干菌粉的形式。

4.根据权利要求1的组合物，其特征在于该组合物中乳酸菌为嗜酸乳杆菌、嗜热链球菌、保加利亚乳杆菌、干酪乳杆菌和双歧杆菌的一株或一株以上的组合。

5.根据权利要求1的组合物，其特征在于该组合物用于预防和治疗绝经期综合症、骨质疏松症和乳腺癌。

6.根据权利要求1的组合物，其特征在于该组合物可以为食品形式和药物形式。

7.根据权利要求6的组合物，其特征在于该组合物的食品形式可以为饮料、奶制品、发酵牛奶、棒状食品、颗粒状食品、粉末状食品、胶囊状食品和片状食品形式。

8.根据权利要求6的组合物，其特征在于该组合物的药物形式可以为水溶液、乳剂、颗粒剂、粉剂、胶囊和片剂。