CN1441792A - 油产品用静标记及其检测方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及使用荧光材料的酯衍生物作为静标记标记石油产品以及检测标记的方法。按照本发明，静标记可通过测量在酶催化作用下选择性水解酯部分而产生的荧光来测得。

Description

油产品用静标记及其检测方法
技术领域
本发明涉及使用静标记来标记一种石油产品以及检测静标记的方法。更具体地，本发明涉及使用静标记(它是荧光材料的酯衍生物)标记石油产品的方法和通过使用酶促水解测量产生的荧光来检测静标记的方法。
现有技术
最近，由于多种原因(如政府税收政策、石油产品原料的价格上升等)，假冒石油产品的销售急剧上升。此外，考虑到假冒燃料对交通工具的使用寿命和环境的严重影响，需要阻止它的使用。但是，因为很难用肉眼识别这些假冒石油产品，所以应进行复杂的化学分析。
在此使用的术语“荧光材料”定义为这样的一种物质，当被特定波长的光照射时，它会通过形成电子共振结构，产生与施加的光的波长不同的光。因此，即使在石油产品中存在少量的荧光材料，也可利用对其照射可见光或紫外线容易进行检测。但是，大部分荧光材料在石油产品(如汽油)中的溶解性较差。
在这里，“标记”指通过酯化反应在荧光材料的活性部位上连接C4-C18的烃基的物质。上述标记在石油产品中显示出高的溶解性，但是却没有显示出它们本身的荧光性，因为由于酯化反应使它们失去了电子共振结构。但是，当酯部分分解的时候，荧光材料就会溶解在水中，从而重新显示出荧光性。因此，如果在销售前使用这种标记对石油产品进行标记的话，通过定量分析销售网中石油产品的标记的荧光性，就可以确定真正的石油产品是不是已经被其它公司的低价产品或者低级产品替代或与其混合。此外，用上述同样的方法，可从税率更高的类似产品中鉴别出税率较低的产品。
在这点上，美国专利5980593提出了线型或支链型C1-C18烷基酸酯7-羟基-4-甲基香豆素作为标记石油产品用的静荧光材料。在传统技术(包括上述专利)中，使用化学方法鉴别静标记，即使用碱性溶液分解酯部分。但是，上述过程会破坏荧光材料，使得定量分析荧光材料变得很难。因此，传统方法中可用的荧光材料是相当有限的。此外，其它荧光材料(天然存在于石油产品中)能够与所需的荧光材料一起被碱性溶液萃取出来，从而不能对静标记进行精确的定量分析。
具体地说，需要使用额外的加热装置和催化剂来实施上述方法。因此，不仅花费很长的时间来检测荧光性，而且会失去实际效果。而且，酯部分较稳定，从而使用碱性溶液会使稳定性比酯部分差的其它部分分解。结果，在传统方法中可使用的静标记被限制到了具体的物质，例如在上述专利提到的标记。
发明内容
本发明的一个目的是提供一种适合用来标记石油产品的静标记，它是荧光材料的酯衍生物。
本发明的另一个目的是提供一种检测静标记用的组合物，它包括能够选择性水解静标记的酯部分的酶或连接聚合物的酶。
本发明的再一个目的是提供一种石油产品的静标记方法。
本发明的再一个目的是提供一种石油产品用静标记的检测方法，它使用了能够选择性水解静标记的酯部分的酶或连有聚合物的酶。
本发明还有一个目的是提供一种通过酶催化作用鉴定石油产品的方法。
根据本发明的第一个方面，提供了用下列分子式I、II和III表示的静标记：
                           分子式I
Figure A0181275700081
其中R1和R2是相同或不同的，它们是C4-C18烷基。
                           分子式II其中R3是C4-C18烷基；R4是氢原子、甲基或三氟甲基；R5是氢原子、卤原子或氰基。
                        分子式III
Figure A0181275700091
其中R6和R7是相同或不同的，它们是C19-C24烷基。
根据本发明的第二个方面，提供了一种石油产品的静标记方法，即在石油产品中加入标记，所述标记是荧光材料的酯衍生物。
根据本发明的第三个方面，提供了一种石油产品用静标记的检测方法，它包括以下步骤：
a)使用静标记标记石油产品，所述标记是荧光材料的酯衍生物；
b)把检测组合物与石油产品加在一起，该检测组合物包含尤其能够分解静标记的酯部分的酶；和
c)测量步骤b)中产生的荧光。
根据本发明的第四个方面，提供了一种鉴定石油产品的方法，它包括以下步骤：
a)把已用静标记(它是荧光材料的酯衍生物)标记的石油产品与包含尤其能够分解标记的酯部分的酶的组合物加在一起；和
b)测量从步骤a)中产生的荧光。
根据本发明的第五个方面，提供了一种检测石油产品中静标记(它是荧光材料的酯衍生物)的组合物，其中所述组合物包括pH为7或更高的水溶液，所述水溶液包含能够选择性水解标记的酯部分的酶。
附图简述
本发明的上述目的以及其它特征和优点可从下列结合附图的详细描述变得更加明显。
图1是图示石油中试卤灵二棕榈酸酯含量上升最高到100ppb的定量分析图，它是根据本发明的实施例12使用便携式(potable)荧光计得到的；
图2是图示石油中荧光素二棕榈酸酯含量上升最高到100ppb的定量分析图，它是根据本发明的实施例13使用便携式(potable)荧光计得到的；
图3是图示石油中3-氯-4一甲基-7-羟基香豆素棕榈酸酯含量上升最高到100ppb的定量分析图，它是根据本发明的实施例14使用便携式(potable)荧光计得到的；
图4是图示石油中使用波长为350纳米的光激发的荧光材料的定量分析图，它是根据本发明的实施例20使用荧光分光光度计得到的；和
图5是图示本发明实施例19中静标记的发光与浓度之间的关系图。
实施本发明的最佳方式
根据本发明，静标记指荧光材料的酯衍生物，其中烃基通过酯化反应连接到了荧光材料的活性部位，如羟基。对于本文中可使用的静标记没有限制，只要所述静音能够通过水解它的酯部分来恢复荧光性就可以了。具体地说，试卤灵、荧光素或香豆素的烷基酸酯可优选用作静标记。
本发明的静标记可用下列分子式I、II和III表示：
                          分子式I
Figure A0181275700101
其中R1和R2是相同或不同的，它们是C4-C18烷基。每个R1和R2优选是C15H31基团。
                          分子式II其中R3是C4-C18烷基；R4是氢原子、甲基或三氟甲基；R5是氢原子、卤原子或氰基。R3优选是C15H31基团，R4优选是甲基，R5优选是氯原子。
                       分子式III其中R6和R7是相同或不同的，它们是C19-C24烷基。尤其R6和R7可用来提高分子式III的静标记在有机液体中的溶解性。
在本发明中，所述静标记的典型例子包括7-羟基-4-三氟甲基香豆素、7-羟基香豆素、3-氰基-7-羟基-4-甲基香豆素、4-羟基香豆素、7-羟基-4-甲基香豆素(美国专利5980593)、3-氯-7-羟基-4-甲基香豆素和3-氯-7-羟基-4-甲基香豆素的酯衍生物、试卤灵的酯衍生物、荧光素的酯衍生物(美国专利5498808)以及它们的混合物。
根据本发明，作为加入上述标记的石油产品，有可用作交通工具的燃料，如汽油、液化天然气(LNG)、液化石油气(LPG)、柴油、煤油、重油等。因此，各种用途的石油产品(由逃税者生产和/或销售)以及混合各种溶剂(如苯、甲苯等)制造的假冒石油产品可容易地进行鉴定。
在本发明中，石油产品中标记的用量为0.01-30ppm，优选是0.5-10ppm。检测时，相当于静标记的荧光材料发出与其它材料不同的荧光波长。如果石油产品使用两种标记的混合物(以已知的比例共混)来进行标记，那么就会检测到从两种不同荧光的组合得到的第三种荧光。在这点上，可使用不同的静标记来标记汽油和煤油。
此外，因为把预定量的静标记加到石油产品中，从而可通过定量检测来测定样品中标记的石油产品的量。即，如果标记是以恒量加入到真正的石油产品中的话，那么不仅可以通过观察发出的荧光来确定石油产品是不是真的，而且也可以通过测量荧光的强度来确定石油产品是不是与其它液体混合。
根据本发明，为了检测标记，可使用能够选择性水解标记的酯部分的酶。具体地说，把包含恒定浓度的酶的水溶液(pH是7或更高)以恒量送入检测器具中，接着使之冷冻干燥来提高对有机液体的可接近性和用于检测的反应的重现性。在韩国专利162270中提到使用一种冷冻干燥的酶来提高反应的重现性的上述方法。
适合用于本发明的酶优选选自脂肪酶、酯酶和纤维素酶，这些可从各种微生物或从动物内脏中得到。这些酶中的大部分都在较高的温度下工作，例如50℃或更高，且都有优良的热稳定性，从而检测标记用的组合物能够容易进行储藏。其中，脂肪酶在有机液体中比其它酶更稳定，因为它在体内用作脂肪的消化酶。
而且，酶可与连接的一种(或者一种或多种)聚合物部分(烃聚合物部分)一起使用，以提高酶在有机液体中的溶解性和稳定性。这种连接到酶的烃聚合物优选分子量为2000道尔顿或更高，更优选使用聚乙二醇(PEG)、Triton X等。
为了把酶连接到聚合物部分上，包含能够与氨基酸中的胺基、巯基或羟基反应的部分以及能够与聚合物中的羟基反应的部分的化合物优选用作连接体。具体的结构用下列分子式IV表示，其中酶通过连接体(如氰尿酰氯)连接到聚合物部分：
                            分子式IV
在酶和聚合物的连接反应中，存在于酶表面的赖氨酸残基可以1∶1或2∶1的比例连接到聚合物上，因为酶和聚合物之间的混合比会随着酶上的赖氨酸残基数目而变化。
如果连接到聚合物部分的酶用于标记的检测的话，那么可提供下列优点。
首先，可阻止钝化酶的蛋白酶接近酶。第二，也会在有机溶剂中建立酶通过与水分子之间的氢键形成活性三维结构的环境，以极大地提高酶活性。第三，即使在室温下把酶储存在有机溶剂中，酶的活性也可以保持超过3个月，因为使用烃聚合物部分可防止酶三维结构的破坏(由于温度上升而把酶的憎水性部分暴露于溶剂而引起的(Inada，Y.等，1986))。
包含连接到上述聚合物部分的酶的水溶液(pH为7或更高)可用作检测组合物。上述水溶液优选在冷冻干燥后使用。
把上述水溶液加入到用适量静标记标记且混合良好的石油产品中。接着，得到的水溶液层用特定波长的光照射，从而发出另一特定波长的光。在这种情况下，从水溶液层发出的大部分荧光是可见光。例如，试卤灵发出红光，荧光素发出绿光，香豆素发出蓝光。发射荧光的能力由使用了可分解酯的酶的静标记的酯键水解而产生。酶反应发生在石油和水的相界面，因为水溶液中的酶使用水来分解溶解在石油相中标记的酯键，接着荧光材料(从标记的烃部分分离)就释放进入水相中。因此，水相中产生的荧光可使用荧光分光光度计检测。而且，如果使用便携式荧光分光光度计的话，那么石油产品中的荧光就很容易精确检测。
在下文中，将参照下列实施例详细描述本发明。实施例可用来说明本发明，但并不是用来限制本发明的。
实施例1
合成试卤灵二棕榈酸酯
在250毫升烧瓶中把1.6克试卤灵溶解在40毫升四氢呋喃中，接着在溶液中加入3.1克碳酸钾和3.1毫升三乙胺。30分钟后，加入7.0毫升棕榈酰氯，并在室温下搅拌混合物2小时。此后，加入50毫升蒸馏水和250毫升乙酸乙酯，以把标题(title)化合物萃取到乙酸乙酯相中。使用200毫升盐水洗涤乙酸乙酯相，接着使用锰酐(manganese anhydride)干燥。接下来对溶剂进行蒸馏和蒸发，使用己烷和乙酸乙酯对残留物进行重结晶，得到微红的试卤灵二棕榈酸酯。
实施例2
合成荧光素二棕榈酸酯
在250毫升烧瓶中把2.5克荧光素溶解在四氢呋喃中，接着在溶液中加入3.1克碳酸钾和3.1毫升三乙胺。30分钟后，加入7.0毫升棕榈酰氯，并在室温下搅拌混合物2小时。此后，加入50毫升蒸馏水和250毫升乙酸乙酯，以把标题(title)化合物萃取到乙酸乙酯相中。使用200毫升盐水洗涤乙酸乙酯相，接着使用锰酐(manganese anhydride)干燥。接下来对溶剂进行蒸馏和蒸发，使用己烷和乙酸乙酯对残留物进行重结晶，得到皮肤色的荧光素二棕榈酸酯。
实施例3
合成3-氯-4-甲基-7-羟基香豆素棕榈酸酯
在250毫升烧瓶中把2.5克3-氯-4-甲基-7-羟基香豆素溶解在60毫升四氢呋喃中，接着在溶液中加入3.6克碳酸钾和3.6毫升三乙胺。30分钟后，加入10.0毫升棕榈酰氯，并在室温下搅拌混合物2小时。此后，加入50毫升蒸馏水和250毫升乙酸乙酯，以把标题(title)化合物萃取到乙酸乙酯相中。使用200毫升盐水洗涤乙酸乙酯相，接着使用锰酐(manganese anhydride)干燥。接下来对溶剂进行蒸馏和蒸发，使用己烷和乙酸乙酯对残留物进行重结晶，得到白色的3-氯-4-甲基-7-羟基香豆素棕榈酸酯。
实施例4
合成7-羟基香豆素棕榈酸酯
在500毫升烧瓶中把1.0克7-羟基香豆素溶解在100毫升吡啶中，并加入2.9毫升棕榈酰氯，接着在室温下搅拌。反应3小时后，通过在真空下蒸发除去吡啶。以1∶1的比例加入蒸馏水和二氯甲烷，以把标题化合物萃取到二氯甲烷相中。只使用二氯甲烷对二氯甲烷相进行色谱洗脱。除去第一洗出液中的溶剂，得到白色7-羟基香豆素棕榈酸酯。
实施例5
合成3-氯-4-甲基-7-羟基香豆素月桂酸酯
在250毫升烧瓶中把2.5克3-氯-4-甲基-7-羟基香豆素溶解在60毫升四氢呋喃中，接着在溶液中加入3.6克碳酸钾和3.6毫升三乙胺。30分钟后，加入8.0毫升月桂酰氯，并在室温下搅拌混合物2小时。此后，加入50毫升蒸馏水和250毫升乙酸乙酯，以把标题(title)化合物萃取到乙酸乙酯相中。使用200毫升盐水洗涤乙酸乙酯相，接着使用无水锰干燥。接下来对溶剂进行蒸馏和蒸发，使用己烷和乙酸乙酯对残留物进行重结晶，得到白色的3-氯-4-甲基-7-羟基香豆素月桂酸酯。
实施例6
制备包含检测用脂肪酶的反应物
在4℃的温度下，把由假单胞菌属(Pseudomonas cepacis)纯化的1克脂肪酶完全溶解在25毫升100mM用盐酸调节到pH为8的三羟甲基氨基甲烷缓冲液中。在把20ul溶液加到2毫升试管后，溶液在Centra evaporatorTM(BioneerCorporation，Kerea)中进行干燥，并冷冻储存。
实施例7
制备连接到聚乙二醇上的脂肪酶
在500毫升烧瓶中把20.00克单甲氧基聚乙二醇(M.W.约4500)和0.37克作为连接体的氰尿酰氯一起溶解在100毫升苯中。加入6.5克碳酸钠之后，在80℃反应40小时。这是用甲氧基取代聚乙二醇的两个端羟基中的一个来制备的，单甲氧基聚乙二醇是只含一个活性羟基的烃聚合物。过滤掉盐，除去溶剂得到白色固体。5克白色固体与由假单胞菌属(Pseudomonas cepacis)纯化的78毫克脂肪酶一起溶解在25毫升100mM用盐酸调节pH为8的三羟甲基氨基甲烷缓冲液中，并在4℃反应2小时。通过带有1kDa截流(cutoff)的过滤除去未反应的聚乙二醇后，把20微升溶液加到1.5毫升试管中，在Centra evaporatorTM(BioneerCorporation，Korea)中干燥，并冷冻储存。这在随后的实验中可用作检测组合物。
实施例8
定量检测石油中的试卤灵二棕榈酸酯
在实施例6中得到的检测用酶溶液中加入0.5毫升蒸馏水和1.0毫升含1ppm实施例1得到的试卤灵二棕榈酸酯的石油，接着搅拌溶液。当用自然光照射水相时，就可通过肉眼检测到红光。
实施例9
定量检测石油中的荧光素二棕榈酸酯
在实施例6中得到的检测用酶溶液中加入0.5毫升蒸馏水和1.0毫升含1ppm实施例2得到的荧光素二棕榈酸酯的石油，接着搅拌溶液。当用自然光照射水相时，就可通过肉眼检测到绿光。
实施例10
定量检测石油中的3-氯-4-甲基-7-羟基香豆素棕榈酸酯
在实施例6中得到的检测用酶溶液中加入0.5毫升蒸馏水和1.0毫升含10ppm实施例3得到的3-氯-4-甲基-7-羟基香豆素棕榈酸酯的石油，接着搅拌溶液。当用365纳米波长的光照射水相时，就可通过肉眼检测到蓝光。
实施例11
定量检测石油中试卤灵二棕榈酸酯和3-氯-4-甲基-7-羟基香豆素棕榈酸酯的混合物
把在实施例1和3中得到的试卤灵二棕榈酸酯和3-氯-4-甲基-7-羟基香豆素棕榈酸酯分别以1和10ppm的量加入到石油中。在实施例6中得到的检测用酶溶液中加入0.5毫升蒸馏水和1.0毫升含标记的石油，接着搅拌溶液。当用365纳米波长的光照射水相时，就可通过肉眼检测到紫光。
实施例12
定量检测石油中的试卤灵二棕榈酸酯
含100ppb(w/v)由实施例1得到的标记的煤油以0/100、1/100、2/100、10/100、20/100和100/100进行稀释，分别得到0ppb、1ppb、2ppb、5ppb、10ppb、20ppb、50ppb和100ppb的溶液，接着把1毫升每种溶液加到实施例6所得的酶溶液中，然后与1.5毫升蒸馏水混合。当用570纳米波长的光照射水相时，可使用荧光计定量测量585纳米的荧光，结果如图1所示。
实施例13
定量检测石油中的荧光素二棕榈酸酯
含100ppb(w/v)由实施例2得到的标记的石油以0/100、1/100、2/100、5/100、10/100、20/100、50/100和100/100进行稀释，分别得到0ppb、1ppb、2ppb、5ppb、10ppb、20ppb、50ppb和100ppb的溶液，接着把1毫升每种溶液加到实施例6所得的酶溶液中，然后与1.5毫升蒸馏水混合。当用490纳米波长的光照射水相时，可使用荧光计定量测量514纳米的荧光，结果如图2所示。
实施例14
定量检测石油中的3-氯-4-甲基-7-羟基香豆素棕榈酸酯
含100ppb(w/v)由实施例3得到的标记的石油以0/10、1/10、2/10、5/10和10/10进行稀释，分别得到0ppb、10ppb、20ppb、50ppb和100ppb的溶液，接着把1毫升每种溶液加到实施例6所得的酶溶液中，然后与1.5毫升蒸馏水混合。当用350纳米波长的光照射水相时，可使用荧光计定量测量470纳米的荧光，结果如图3所示。
实施例15
定量检测石油中的4-甲基-7-羟基香豆素棕榈酸酯
含100ppb(w/v)4-甲基-7-羟基香豆素棕榈酸酯的石油以0/10、1/10、2/10、5/10和10/10进行稀释，分别得到0ppb、10ppb、20ppb、50ppb和100ppb的溶液，接着把1毫升每种溶液加到实施例6所得的酶溶液中，然后与1.5毫升蒸馏水混合。当用365纳米波长的光照射水相时，可使用荧光计定量测量470纳米的荧光。
实施例16
定量检测石油中的荧光素二棕榈酸酯
在实施例7中得到的酶溶液中加入相同量的蒸馏水和含10ppm实施例2得到的荧光素棕榈酸酯的石油，接着搅拌溶液。当用365纳米波长的紫外光照射水相时，就可通过肉眼检测到蓝光。
实施例17
定量检测石油中的3-氯-4-甲基-7-羟基香豆素棕榈酸酯
在实施例7中得到的酶溶液中加入相同量的蒸馏水和含10ppm实施例3得到的3-氯-4-甲基-7-羟基香豆素棕榈酸酯的石油，接着搅拌溶液。当用365纳米波长的紫外光照射水相时，就可通过肉眼检测到蓝光。
实施例18
定量检测含荧光素二棕榈酸酯和3-氯-4-甲基-7-羟基香豆素棕榈酸酯混合物的石油
在石油中溶解荧光素二棕榈酸酯和3-氯-4-甲基-7-羟基香豆素棕榈酸酯，它们分别是实施例2和3得到的。在实施例7中得到的酶溶液中加入相同量的蒸馏水和含上述标记的石油，接着搅拌溶液。当用365纳米波长的紫外光照射水相时，就可通过肉眼检测到微黄色光。
实施例19
定量检测石油中的荧光素二棕榈酸酯
含250ppm(w/v)由实施例2得到的荧光素二棕榈酸酯的石油以1、1/2、1/4、1/8、1/16和1/32进行稀释，分别得到250ppm、125ppm、62.5ppm、31.3ppm、15.6ppm和7.8ppm的溶液，接着把0.5毫升每种溶液加到实施例7所得的酶溶液中，然后与0.6毫升蒸馏水混合。在把0.5毫升水相稀释到4倍后，可使用荧分光光度计(JASCO.FP-750)定量测量从稀释的水相中发出的荧光。结果如图5所示，其中450纳米的荧光强度与标记材料的浓度成线性关系。
实施例20
定量检测3-氯-4-甲基-7-羟基香豆素棕榈酸酯
含250ppm(w/v)由实施例3得到的3-氯-4-甲基-7-羟基香豆素棕榈酸酯的石油以1、1/2、1/4、1/8、1/16和1/32进行稀释，分别得到250ppm、125ppm、62.5ppm、31.3ppm、15.6ppm和7.8ppm的溶液，接着把0.5毫升每种溶液加到实施例7所得的酶溶液中，然后与0.6毫升蒸馏水混合。在把水相稀释到4倍后，可使用荧光分光光度计(JASCO.FP-750)定量测量从稀释的水相中发出的荧光。当用波长为350纳米的光照射时，如图4所示，就可在470纳米得到最大峰。
工业应用
本发明具有非常高的灵敏度，这是因为使用酶(可选择性地水解酯部分)来检测静标记，且石油产品中天然存在的荧光材料的背景信号也可极大地减少。而且，检测标记的方法非常简单和容易，因为只有酶溶液(可选择性地水解酯键)加入到石油产品中。另外，本发明的酶体系同时能够检测石油中的多种标记。
如果把本发明应用到真正的石油中的话，荧光只从真正的石油中发射出来，因此，能从真正的石油中区别出假冒石油。此外，本发明不再需要复杂方法(如化学分析)来检测标记，从而本发明可由消费者当场进行。例如，在含标记的石油和水加入到含干燥的酶溶液的器具中并摇动后，可确定石油是不是真品。

Claims (36)

1.一种用下列分子式I表示化合物，
                           分子式I其中，R1和R2是相同或不同的，它们是C4-C18烷基。
2.一种用下列分子式II表示化合物，
                           分子式II
Figure A0181275700022
其中，R3是C4-C18烷基；R4是甲基或三氟甲基；R5是氢原子、卤原子或氰基。
3.一种用下列分子式III表示化合物，
                           分子式III
Figure A0181275700023
其中，R6和R7是相同或不同的，它们是C19-C24烷基。
4.一种石油产品用静标记方法，它把标记加到石油产品中，所述标记是荧光材料的酯衍生物。
5.如权利要求4所述的静标记方法，其特征在于所述标记是用下列分子式I表示的：
                      分子式I
Figure A0181275700031
其中，R1和R2是相同或不同的，它们是C4-C18烷基。
6.如权利要求4所述的静标记方法，其特征在于所述标记是用下列分子式II表示的：
                      分子式II
Figure A0181275700032
其中，R3是C4-C18烷基；R4是甲基或三氟甲基；R5是氢原子、卤原子或氰基。
7.如权利要求4所述的静标记方法，其特征在于所述标记是用下列分子式III表示的：
                      分子式III其中，R6和R7是相同或不同的，它们是C19-C24烷基。
8.如权利要求4所述的静标记方法，其特征在于所述标记选自7-羟基-4-三氟甲基香豆素、7-羟基香豆素、3-氰基-7-羟基-4-甲基香豆素、4-羟基香豆素、7-羟基-4-甲基香豆素和3-氯-7-羟基-4-甲基香豆素的酯衍生物；试卤灵的酯衍生物；荧光素的酯衍生物；和它们的混合物。
9.如权利要求6所述的静标记方法，其特征在于所述R4是甲基，所述R5是氯原子。
10.如权利要求5或6所述的静标记方法，其特征在于每个所述R1、R2和R3是C15H31基团。
11.如权利要求4所述的静标记方法，其特征在于所述标记加入到石油产品中的量是0.01-30ppm。
12.如权利要求4所述的静标记方法，其特征在于所述石油产品选自汽油、液化天然气(LNG)、液化石油气(LPG)、柴油、煤油和重油。
13.一种石油产品用静标记的检测方法，它包括以下步骤：
a)使用静标记标记石油产品，所述标记是荧光材料的酯衍生物；
b)把检测组合物加入所述石油产品，该检测组合物包含尤其能够分解静标记的酯部分的酶；和
c)测量步骤b)中产生的荧光。
14.如权利要求13所示的检测方法，其特征在于所述标记是用下列分子式I表示的：
                          分子式I
Figure A0181275700041
其中，R1和R2是相同或不同的，它们是C4-C18烷基。
15.如权利要求13所述的检测方法，其特征在于所述标记是用下列分子式II表示的：
                         分子式II
Figure A0181275700042
其中，R3是C4-C18烷基；R4是甲基或三氟甲基；R5是氢原子、卤原子或氰基。
16.如权利要求13所述的检测方法，其特征在于所述标记是用下列分子式III表示的：
                        分子式III其中，R6和R7是相同或不同的，它们是C19-C24烷基。
17.如权利要求13所述的检测方法，其特征在于所述荧光材料选自7-羟基-4-三氟甲基香豆素、7-羟基香豆素、3-氰基-7-羟基-4-甲基香豆素、4-羟基香豆素、7-羟基-4-甲基香豆素和3-氯-7-羟基-4-甲基香豆素的酯衍生物；试卤灵的酯衍生物；荧光素的酯衍生物；和它们的混合物。
18.如权利要求13所述的检测方法，其中所述R4是甲基，所述R5是氯原子。
19.如权利要求14或15所述的检测方法，其中每个所述R1、R2和R3是C15H31基团。
20.如权利要求13所述的检测方法，其特征在于所述标记加入到石油产品中的量是0.01-30ppm。
21.如权利要求13所述的检测方法，其特征在于所述石油产品选自汽油、液化天然气(LNG)、液化石油气(LPG)、柴油、煤油和重油。
22.如权利要求13所述的检测方法，其特征在于所述酶能够选择性地水解标记的酯部分。
23.如权利要求13所述的检测方法，其特征在于所述酶选自酯酶和纤维素酶。
24.如权利要求13所述的检测方法，其特征在于所述酶是脂肪酶。
25.如权利要求13所述的检测方法，其特征在于所述酶与至少一种与它连接的聚合物部分一起使用。
26.如权利要求25所述的检测方法，其特征在于所述酶通过连接体与聚合物部分相连。
27.如权利要求26所述的检测方法，其特征在于所述连接体是氰尿酰氯。
28.如权利要求25所述的检测方法，其特征在于所述聚合物连接的酶是用下列通式IV表示的：
                     分子式IV
Figure A0181275700061
29.如权利要求25所述的检测方法，其特征在于所述聚合物部分是聚乙二醇。
30.一种检测石油产品中静标记用的组合物，所述标记是荧光材料的酯衍生物，其中所述组合物包括pH为7或更高的水溶液，该水溶液含有能够选择性水解标记的酯部分的酶。
31.如权利要求30所述的组合物，其特征在于所述酶选自纤维素酶和酯酶。
32.如权利要求30所述的组合物，其特征在于所述酶是脂肪酶。
33.一种鉴定石油产品的方法，它包括以下步骤：
a)把包含尤其能够分解标记的酯部分的酶加入已用静标记标记的石油产品中，该静标记是荧光材料的酯衍生物；和
b)测量从步骤a)中产生的荧光。
34.如权利要求33所述的方法，其特征在于所述酶能够选择性地水解标记的酯部分。
35.如权利要求33所述的方法，其特征在于所述酶选自酯酶和纤维素。
36.如权利要求33所述的方法，其特征在于所述酶是脂肪酶。
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