CN1428435A - 肝癌诊断、监护及肝硬化监护试剂盒 - Google Patents
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Abstract
本发明属生物制剂技术领域。本发明公开了一种肝癌诊断、监护及肝硬化监护试剂盒。该试剂盒是一种体外诊断试剂，用来测定人血清中α－L－岩藻糖苷酶(AFU)活性，对原发性肝癌的诊断、监护以及肝硬化的监护具有广泛的临床意义。本发明提供了制备方法。
Description
技术领域
本发明属生物制剂技术领域，具体涉及一种肝癌诊断、监护及肝硬化监护试剂盒。
背景技术
血清中α-L-岩藻糖苷酶(AFU)测定用于肝癌诊断，已有近二十年历史(早期用于岩藻苷贮积症诊断，八十年代起用于肝癌诊断)，但测定试剂中的关键试剂——底物，一直采用对硝基苯-α-L-岩藻吡喃糖苷(PNPF)。PNPF制成测定溶液后，化学性质十分稳定，保存和使用十分方便，但其最大缺陷在于反应产物PNP的解离常数pKa值(7.0)远高于AFU酶反应的最适pH值(约5)，在pH5时不能显色。因此，市场上用PNPF作底物制成的试剂盒，存在着以下无法克服的缺点：
1.由于产物PNP在反应过程中不显色，不能采用酶分析中最合理的连续监测法，只能采用两点法，即在反应一定时间后加入终止液，终止酶反应并使反应产物显色，进行比色测定；
2.由于终止液加入前后，反应液的成份、各成份的浓度和溶液pH等，都会发生显著改变，因此每例测定必须加做样品空白，既增加操作程序，而且必然引入新的误差；
3.反应时间长。经典的以PNP为底物的两点法，反应时间长达一小时，发展到今天的自动化方法，尚需300秒。对酶分析来说，有失测定反应初速度的理想条件。
发明内容
本发明所要解决的技术问题在于：
1.改变PNPF两点法不能采用连续监测法的状况，研制以2-氯对硝基苯-α-L-岩藻吡喃糖苷CNPF为底物的连续监测法试剂盒；
2.重点解决CNPF在液体状态下稳定性差的问题，研制稳定的液体型AFU(CNPF)连续监测法试剂盒，显著提高方法的实用性和技术水准，广泛适应各大小实验室的需要；
3.通过优选，使酶反应条件更臻合理。
本发明提供了一种肝癌诊断、监护及肝硬化监护试剂盒。本发明的试剂盒是由试剂1和试剂2组成的，其中试剂1为：
(0.5-9％)柠檬酸三钠 0-300mmol/L
(0-5.5％)Na2HPO4 0-300mmol/L
(0-4％) NaAc 0-300mmol/L
(0-7.8％)CAPSO 0-300mmol/L
NaN3 0-0.1％
(0-4.7％)NaH2PO4 0-300mmol/L
试剂2为：
(0.5-6.5％)柠檬酸 0-300mmol/L
(0-10％) HAc 0-300mmol/L
(0-0.3％) HCl 0-300mmol/L
(0-0.2％) 苯甲酸 0-12mmol/L
(0.1-2％) CNPF 0-5mmol/L
本发明的另一所要解决的技术问题是提供了上述肝癌诊断、监护及肝硬化监护试剂盒的制备方法，该方法包括下列步骤：
1.用不同种类、不同浓度、不同pH的缓冲系统，测定同份样品中AFU活性，初选出相对满意的缓冲系统；实验研究中各物质浓度范围如下：
柠檬酸三钠 0-300mmol/L 柠檬酸 0-300mmol/L
Na2HPO4 0-300mmol/L HAc 0-300mmol/L
NaAc 0-300mmol/L HCl 0-300mmol/L
CAPSO 0-300mmol/L 苯甲酸 0-12mmol/L
NaN3 0-0.1％ CNPF 0-5mmol/L
NaH2PO4 0-300mmol/L
2.对初选出的缓冲系统，逐一完成缓冲液浓度和pH对酶活性的影响试验，以及各系统中底物CNPF的稳定性实验，进一步缩小缓冲系统的可选范围；
3.择优选用能提高CNPF稳定性的缓冲系统，实验求出该系统中酶反应产物CNP的摩尔吸光度(ε)，并求出该系统中CNPF浓度对AFU活性的影响曲线，在此基础上确定下一步实验的CNPF的浓度范围；制备在此范围内不同CNPF浓度的缓冲系统，经过对血清AFU活性测定，用Linewear-Burk双倒数作图法，求出在该系统中AFU对CNPF的米氏常数Km值；结合CNPF浓度对AFU活性的影响曲线，确定试剂中CNPF的配制浓度；
4.经过上述选择，配制成选定的缓冲系统和底物浓度的试剂，经37℃加热试验，并通过与其他糖苷类试剂的比较，进一步确定CNPF在该系统中的稳定性；
5.作重复性试验和线性试验；
本发明的试剂盒既可作稳定的双试剂(试剂1和试剂2)直接使用，也可将试剂1与试剂2按4∶1的比例混合，作稳定的单试剂直接使用。通常，本发明的试剂盒采用连续监测法，必要时也可加用终止液，改为两点比色法。检测参数为：
主波长 405nm 次波长 600nm
光 径 1cm 温度 37℃
延滞时间 90秒 监测时间 90秒
试剂1 200μl 试剂2 50μl
样品 25μl 计算因数 3207
如改用单试剂操作，只需将试剂1与试剂2按规定比例混合均匀，即得稳定的液体单试剂。
如所用仪器不含有405nm波长，可将主/次波长改为410nm/600nm，计算因数改为3337，其余测定参数不变。
本发明的检测效果如下：
最低检测限：0.6U/L
方法灵敏度：ΔA405nm/min＝3.12×10-4/U，即F＝3207
批内精密度：CV＝1.72-3.7％
天间精密度：CV＝4.64％
线性范围：达250U/L(正常参考范围：10-35.5U/L)
方法比较：与经典的PNPF两点法比较，两者结果显著相关，r＝0.955，P＜0.01，y＝0.32x+0(y为PNPF两点法，x为本法，均以U/L表示)。回归分析表明，本法显著提高了酶对底物的水解速率，达PNPF两点法的三倍以上。
AFU测定试剂盒在临床用于肝癌诊断的试验如下：
1.我们以健康人血清中AFU X+3S为诊断临界值，对原发性肝癌(PHC)的诊断敏感性为84.9％。但是，急性黄疸型肝炎、慢活肝、肝硬化病人血清中AFU水平与PHC病人有明显交叠。为解决这一鉴别诊断中的问题，我们对这四组病人进行了随访观察。除PHC组外，其余三组病人经过对症治疗约十天后，血清AFU逐渐下降，而未经抗癌治疗或手术切除的PHC病人血清中AFU保持在持续高值，与其余三组病例的血清AFU水平明显分离。这一现象的发现，显著提高了血清AFU测定对PHC诊断的特异性。
2.血清AFU水平与肝癌大小不相关。有文献报道，小肝癌病人组，血清AFU升高的阳性率在70％以上，而同组病人AFP升高者仅37.5％。说明血清AFU对小肝癌的诊断敏感性远远高于血清AFP。
3.血清AFU活性与AFP水平不相关，两者同时检测，互为补偿，可明显提高PHC的发现率。我们在34例AFP阳性的PHC病人中发现，AFU阳性29例，占85.3％；在19例AFP阴性的PHC病人中，AFU阳性16例，占84.2％。说明在无法借AFP检出的PHC病人中，如同时检测AFU，可以减少大约84.2％的病人被漏诊。我们的资料还证明，同时测定AFU和AFP，可使PHC的阳性检出率从单测AFP的64.2％提高到94.3％！
4.对肝硬化等病人的随访监护具有重要价值。这些病人如果血清AFU由正常转为持续升高，或者始终保持异常高值不降，应高度警惕并发肝癌。国外报道，凡有上述升高情况者，无一幸免肝癌，其中一例在确诊PHC前66个月，已出现血清AFU升高，嗣后一直持续不降。就此而言，不仅其诊断特异性几达100％，而且具有早期发现肝癌的价值。
5.对PHC的疗效观察和随访具有价值。PHC经手术切除后，血清AFU下降，再度升高提示PHC复发。
6.对影象诊断难以定性的肝占位病变，可协助诊断；不受AFP＞400μg/l持续四周，和＞200μg/l持续八周在时间上的限制，有利于肝癌的早期诊断。
7.其它脏器癌症发生肝转移时，血清中AFU活性也可明显升高，尽管升高程度略低于PHC病人，但仍具有很好的辅助诊断价值。
本发明的试剂盒是一种体外诊断试剂，用来测定人血清(体液)中α-L-岩藻糖苷酶(AFU)活性，对原发性肝癌的诊断和监护，以及监护肝硬化病人是否并发肝癌，独具价值。本发明的试剂盒既适用于全自动生化分析仪，也适用于半自动生化分析仪，需要时还可改为手工操作使用，操作十分简便，适于各种实验室，市场前景广阔。
具体实施方式实施例1 液体双试剂之组成
试剂1：
0.1mol/L柠檬酸三钠 555ml
0.2mol/L CAPSO 100ml
NaAc 20.5g
NaN3 1g
NaCl 7.3g
CNPF 1g
H2O加至 1000ml
试剂2：
0.1mol/L柠檬酸 445ml
HAc 63ml
NaN3 1g
H2O加至 1000ml
实施例2
试剂1：
0.2mol/L Na2HPO4 467.5ml
0.2mol/L CAPSO 100ml
NaAc 20.5g
NaN3 1g
NaCl 7.3g
CNPF 1g
H2O加至 1000ml
试剂2：
0.1mol/L柠檬酸 532.5ml
HAc 63ml
NaN3 1g
H2O加至 1000ml
实施例3
试剂1：
0.2mol/L Na2HPO4 374ml
NaAc 16.4g
NaN3 1g
NaCl 5.85g
0.1mol/L柠檬酸 106ml
HAc 12.6ml
H2O加至 1000ml
试剂2：
CNPF 3.5g
用试剂1溶解并补足至1000ml
Claims (3)
1、一种肝癌诊断、监护及肝硬化监护试剂盒，其特征在于该试剂盒是由试剂1和试剂2组成的，其中试剂1为：
(0.5-9％)柠檬酸三钠 0-300mmol/L
(0-5.5％)Na2HPO4 0-300mmol/L
(0-4％) NaAc 0-300mmol/L
(0-7.8％)CAPSO 0-300mmol/L
NaN3 0-0.1％
(0-4.7％)NaH2PO4 0-300mmol/L
试剂2为：
(0.5-6.5％)柠檬酸 0-300mmol/L
(0-10％) HAc 0-300mmol/L
(0-0.3％) HCl 0-300mmol/L
(0-0.2％) 苯甲酸 0-12mmol/L
(0.1-2％) CNPF 0-5mmol/L
2、一种如权利要求1所述的一种肝癌诊断、监护及肝硬化监护试剂盒的制备方法，其特征在于该方法包括下列步骤：
(1)用不同种类、不同浓度、不同pH的缓冲系统，测定同份样品中AFU活性，初选出相对满意的缓冲系统；实验研究中各物质浓度范围如下：
柠檬酸三钠 0-300mmol/L 柠檬酸 0-300mmol/L
Na2HPO4 0-300mmol/L HAc 0-300mmol/L
NaAc 0-300mmol/L HCl 0-300mmol/L
CAPSO 0-300mmol/L 苯甲酸 0-12mmol/L
NaN3 0-0.1％ CNPF 0-5mmol/L
NaH2PO4 0-300mmol/L
(2)对初选出的缓冲系统，逐一完成缓冲液浓度和pH对酶活性的影响试验，以及各系统中底物CNPF的稳定性实验，进一步缩小缓冲系统的可选范围；
(3)择优选用能提高CNPF稳定性的缓冲系统，实验求出该系统中酶反应产物CNP的摩尔吸光度(ε)，并求出该系统中CNPF浓度对AFU活性的影响曲线，在此基础上确定下一步实验的CNPF的浓度范围；制备在此范围内不同CNPF浓度的缓冲系统，经过对血清AFU活性测定，用Linewear-Burk双倒数作图法，求出在该系统中AFU对CNPF的米氏常数Km值；结合CNPF浓度对AFU活性的影响曲线，确定试剂中CNPF的配制浓度；
(4)经过上述选择，配制成选定的缓冲系统和底物浓度的试剂，经37℃加热试验，并通过与其他糖苷类试剂的比较，进一步确定CNPF在该系统中的稳定性；
(5)作重复性试验和线性试验；
3、根据权利要求1所述的一种肝癌诊断监护及肝硬化监护试剂盒，其特征在于该试剂盒为液体型双试剂或液体型单试剂。
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Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101779128A (zh) * | 2007-06-14 | 2010-07-14 | 弗拉芒区生物技术研究所 | 早期肝癌检测的诊断测试 |
| CN102967571A (zh) * | 2012-12-24 | 2013-03-13 | 北京利德曼生化股份有限公司 | 检测α-L-岩藻糖苷酶的液体单试剂及其制备方法 |
| CN103430022A (zh) * | 2011-01-31 | 2013-12-04 | 帝国创新有限公司 | 诊断方法 |
| CN104388532A (zh) * | 2014-12-05 | 2015-03-04 | 重庆乾德生物技术有限公司 | 一种检测α-L-岩藻糖苷酶含量的试剂盒 |
| CN107505295A (zh) * | 2017-07-21 | 2017-12-22 | 江苏先思达生物科技有限公司 | 一种肝癌监测试剂盒及其使用方法 |
-
2001
- 2001-12-27 CN CN 01139259 patent/CN1197973C/zh not_active Expired - Lifetime
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101779128A (zh) * | 2007-06-14 | 2010-07-14 | 弗拉芒区生物技术研究所 | 早期肝癌检测的诊断测试 |
| CN103430022A (zh) * | 2011-01-31 | 2013-12-04 | 帝国创新有限公司 | 诊断方法 |
| CN102967571A (zh) * | 2012-12-24 | 2013-03-13 | 北京利德曼生化股份有限公司 | 检测α-L-岩藻糖苷酶的液体单试剂及其制备方法 |
| CN104388532A (zh) * | 2014-12-05 | 2015-03-04 | 重庆乾德生物技术有限公司 | 一种检测α-L-岩藻糖苷酶含量的试剂盒 |
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