CN1413575A

CN1413575A - 可包覆高含量疏水性物质的脂质体

Info

Publication number: CN1413575A
Application number: CN 01135935
Authority: CN
Inventors: 甘霈; 王蔼君; 陈宛珂; 曹智菀
Original assignee: Industrial Technology Research Institute ITRI
Current assignee: Industrial Technology Research Institute ITRI
Priority date: 2001-10-25
Filing date: 2001-10-25
Publication date: 2003-04-30

Abstract

一种可包覆高含量疏水性物质的脂质体。此脂质体包括：两种相转移温度不同的磷脂，例如饱和磷脂酰胆碱与不饱和磷脂酰胆碱，疏水性物质，胆固醇和/或其衍生物，及亲水高分子修饰的磷脂，如MPEG－DSPE。

Description

可包覆高含量疏水性物质的脂质体

发明声明

本发明的部分内容，因研究、实验的目的，已在2000年7月10日发表于The 27th International Symposium on Controlled Release of BioactiveMaterials；巴黎，法国。

发明领域

本发明是有关一种脂质体(Liposome)，特别是一种有关可稳定包覆高含量疏水性物质的脂质体投药系统(drug delivery system)。

发明背景

脂质体已广泛用作药物包埋载体，因为脂质体组成是人体细胞膜成分，结构也相近，已被认为生物体相容性优良且最能够降低静脉注射的全身毒性(systemic toxicity)，并同时达到与原剂型相同的疗效的一种方式。

疏水性药物，紫杉醇(paclitaxel)于1992年上市，初期为乳腺癌与子宫癌的二线治疗，于1998年开始与顺氯氨铂(cisplatin)合用作为非小细胞型肺癌与子宫癌的一线治疗。唯市售产品的剂型是使用酒精与Cremophore EL的系统，其毒性高，易造成病人治疗癌症时对身体产生副作用。包括抑制骨髓作用、降低嗜中性白血球的数目、心跳减缓、血块降低、末梢神经毒性、贫血等症状。因为脂质体系统具有上述优良的生物体相容性、最能够降低静脉注射的系统毒性以及达到与原剂型相同疗效的优点，研究包覆毒性药物，例如紫杉醇，并能适用于临床治疗的脂质体投药系统已成为一种热门的课题。

紫杉醇-脂质体(paclitaxel-liposome)的剂型，无论使用带电的磷脂，如磷脂酰甘油(phosphatidyl glycerol，PG)与磷脂酰胆碱(phosphatidyl choline，PC)的组合(US Pat.US5415869)，或单独使用不饱和磷脂酰胆碱(unsaturated PC)或部分不饱和磷脂酰胆碱(partially unsaturated PC)所组成的脂质体，在这些典型的配方中紫杉醇约占磷脂(phospholipid)的3摩尔％左右，只有在这低比例下，紫杉醇-脂质体才较稳定。一旦将比例升高到4摩尔％，紫杉醇-脂质体只能稳定两天，而比例上升至8摩尔％时，在制备过程中就会有针状紫杉醇结晶析出。即使添加亲水高分子修饰的磷脂甲氧基聚乙二醇-磷脂酰乙醇胺(methoxy polyethylene glycol-phosphatidyl ethanolamine)，来增加脂质体在体内的半衰期(half-life)，虽然对于改善药物在生物体内代谢有正面作用，但储存的稳定性也差，在包覆3摩尔％时稳定性小于一星期。

熟悉本技艺的都知道，低包覆率的脂质体投药系统具有相当的不适用性。尤其，当需要大量给药时，服药者相对地会服下大量的脂质体，大量的脂质体在人体内会造成不可预测的可能毒性；并且，使用大量的脂质体使制造成本提高。此二个明显的不便与缺点，使得提高脂质体投药系统的疏水性药物包覆率成为当务之急。

另外，在美国专利US5424073中揭露一种紫杉醇-脂质体配方，在主成分磷脂酰胆碱(PC)外，添加一种特别的磷脂，心脂(cardiolipid)，这种磷脂较为特殊，其分子结构具有一个较大的亲水基与四个脂肪碳链所组成，可使包埋的紫杉醇与总磷脂比例提升至9摩尔％，但在4℃下的储存，其稳定性仅有一个月左右。

总之，当紫杉醇包埋于脂质体双层膜内时，会有自行聚集析出的趋势。过去文献报导的脂质体配方能达到的最高包埋效率为3-4摩尔％(药物/脂之比)，而较稳定的配方比例则在3摩尔％左右，若继续增加紫杉醇的比例，在制备脂质体过程中即有结晶析出现象。

发明目的及概述

因此，本发明的目的在于提出一种可包覆的高含量疏水性物质，特别是疏水性药物的脂质体投药系统，该投药系统使被包覆药物具有高稳定性，并且应用于毒性药物时，更有助于防止服药者产生副作用。

根据本发明的目的，提出一种可包覆性高含量疏水性药物的脂质体，至少包括：第一磷脂与第二磷脂，疏水性药物以及亲水高分子修饰的磷脂(例如MPEG-DSPE)、胆固醇、胆固醇衍生物、抗氧化剂等。第一磷脂的相转移温度为T_g1，第二磷脂的相转移温度为T_g2。T_g1与T_g2差别很大，使得在一特定投药温度T₁及储存温度T₂下，其中T_g1＞T₁＞T₂＞T_g2，即无论在投药或储存时，脂质体的双层膜上都会形成多个不连续不互溶的两相共存。

其中，相转移温度高的磷脂优选的是氢化天然磷脂或长碳链饱和的磷脂，例如磷脂酰胆碱(phosphatidyl choline；PC)、磷脂酰甘油(phosphatidylglycerol；PC)、磷脂酰丝氨酸(phosphatidyl serine；PS)、或磷脂酰乙醇胺(phosphatidyl ethanolamine；PE)。磷脂酰胆碱(phosphatidyl choline；PC)的实例包含但不限于，氢化卵磷脂酰基胆碱(hydrogenated egg phosphatidyl choline；HEPC)，氢化大豆磷脂酰胆碱(hydrogenated soy phosphatidyl choline；HSPC)；长碳链饱和的磷脂酰胆碱，如二棕榈酰基磷脂酰胆碱(dipalmitoylphosphatidyl choline；DPPC)及二硬脂酰基磷脂基胆碱(distearyloylphosphatidyl choline；DSPC)，或者其中任两种或两种以上的组合。

相转移温度低的磷脂优选的是不饱和磷脂，或短碳链饱和的磷脂，如磷脂酰胆碱、磷脂酰甘油、磷脂酰丝氨酸或磷脂酰乙醇胺。

不饱和磷脂酰胆碱的实例包含但不限于，卵磷脂酰胆碱(egg phosphatidylcholine；EPC)，大豆磷脂酰胆碱(soy phosphatidyl choline；SPC)，其他人工合成的不饱和PC以及天然不饱和PC，及短碳链饱和的磷脂酰胆碱，如二肉豆蔻酰基磷脂酰胆碱(dimyristoyl phosphatidyl choline；DMPC)，以及二月桂酰基磷脂酰胆碱(dilauroyl phosphatidyl choline；DLPC)，或者其中任两种或两种以上的组合。

为使本发明的上述目的、特征、和优点能更明显易懂，下文特举一优选实施方案，并配合附图，作详细说明如下：

附图的简述

图1显示以相转移温度差别很大的两种磷脂组成的脂质体，在其双层膜上两相共存的现象。

图2绘示依照本发明一优选实施方案所得的结果，其表示胆固醇含量对包覆紫杉醇的脂质体的包覆率及平均粒径的影响。

表1显示依照本发明一优选实施方案，不同磷脂组成及比例与脂质体包覆率与粒径大小的关系。

表2显示依照本发明一优选实施方案，药物/磷脂比例对包覆率的关系。

表3显示依照本发明一优选实施方案，单一成分磷脂的脂质体，其药物/脂质比例与包覆率的关系。

表4显示依照本发明一优选实施方案的脂质体成分与储存稳定性的关系。

表5显示依照本发明一优选实施方案的脂质体投药系统的动物试验结果。

优选实施方案

Korlach J等人，在Pro Natl Acad Sci USA 1999；96：8461-8466中证实相转移温度(phase transition temp.)不同的两种磷脂组成，如不饱和磷脂(unsaturated phospholipids)与饱和磷脂(saturated phospholipids)在特定比例及特定温度范围下，会使脂质体的双层膜(bilayer)上分成两相---凝胶相(gelphase)及液晶相(liquid-crystal phase)，如图1所示。这二不互溶的两相共存在脂质体上形成多个不连续的区域。

由于上述特性，大量疏水性物质可以包埋于脂质体双层膜间，通过不同相之间的边界障碍(boundary barrier)，可以避免疏水性物质自行聚集(self-aggregation)析出和破坏脂质体的结构及稳定，因此可以提高疏水性物质在脂质体内的包埋容量，也使这种脂质体在包含高含量疏水性物质时较其他配方型式更为稳定。

因此，本发明设计一种脂质体投药系统，包括两种磷脂，这两种磷脂的相转移温度T_g1、T_g2不同。相转移温度(T_g1)高的磷脂可以是饱和磷脂，相转移温度(T_g2)低的磷脂可以是不饱和磷脂。这两种磷脂在特定比例及特定的温度T下，其中T_g1＞T＞T_g2，会使脂质体双层膜形成多个不连续不互溶的两相共存，例如凝胶相及液晶相。其中，特定的温度T可以是脂质体在投药或储存时的温度，依脂质体系统不同，特定的温度T有所选择或更改，甚至是包含投药及储存温度的一个温度范围，例如投药温度为37℃，而储存温度为4℃，则较佳的选择可以为T_g1＞℃40℃，T_g2＜0℃。

其中，相转移温度高的磷脂优选的是氢化天然磷脂或长碳链饱和的磷脂，例如磷脂酰胆碱(PC)、磷脂酰甘油(PG)、磷脂酰丝氨酸(PS)或磷脂酰乙醇胺(PE)。磷脂酰胆碱(PC)的实例包含但不限于，氢化卵磷脂酰胆碱(HEPC)，氢化大豆磷脂酰胆碱(HSPC)；长碳链饱和的磷脂酰胆碱，如二棕榈酰基磷脂酰胆碱(DPPC)及二硬脂酰基磷脂酰胆碱(DSPC)，或者其中任两种或两种以上的组合。

相转移温度低的磷脂优选的是不饱和磷脂，或短碳链饱和的磷脂，如磷脂酰胆碱(PC)、磷脂酰甘油(PG)、磷脂酰丝氨酸(PS)或磷脂酰乙醇胺(PE)。

不饱和磷脂酰胆碱的实例包含但不限于，卵磷脂酰胆碱(EPC)，大豆磷脂酰胆碱(SPC)，其他人工合成的不饱和PC以及天然不饱和PC，及短碳链饱和的磷脂酰胆碱，如二肉豆蔻酰基磷脂酰胆碱(DMPC)，以及二月桂酰基磷脂酰胆碱(DLPC)，或者其中任两种或两种以上的组合。

在此，以含有饱和磷脂酰胆碱与不饱和磷脂酰胆碱的脂质体包覆疏水性药物为例，说明根据本发明一优选实施方案的脂质体，但本发明不限于此，脂质体包含的磷脂范围如上所述，包覆物质应包含所有疏水性物质。实施例1

本实施例是一种制备包覆紫杉醇的脂质体投药系统的方法。

为制备紫杉醇/脂质摩尔比为1/14的脂质体投药系统，先添加1.23mg的紫杉醇于包含下列组成的醇类混合物中：12.2mg/ml卵磷脂酰胆碱(EPC)，2.28mg/ml氢化卵磷脂酰胆碱(HEPC)，2.28mg/ml胆固醇，5.4mg/ml甲氧基聚乙二醇-二硬脂酰基磷脂酰基乙醇胺(MPEG-DSPE)。当然，醇类混合物中也可以包括其他抗氧化剂，或以其他胆固醇衍生物替代胆固醇，所以本发明虽以上述配方为例，但不应限定于此。将上述添加有紫杉醇的醇类混合物再于真空中进行蒸发，以除去溶剂并于圆底烧瓶的瓶壁形成脂质膜。蒸发结束后，再加入1ml 10％(w/v)蔗糖(Sucrose)于圆底烧瓶以进行水合(Hydration)。大粒径多层(multilamellar)脂质体悬浮后，经超音波(sonication)震荡10分钟后，就会形成小粒径的单层(unilamellar)脂质体。含有紫杉醇的脂质体接着以0.2μm醋酸纤维素膜过滤以灭菌。再以激光粒径分析仪(Laser particle sizeanalyzer；Coulter N4 plus)以分析其粒径大小，得知平均粒径约为120nm。接着，将过滤后的在微脂粒中的紫杉醇浓度以HPLC测出，约为1mg/ml，因此，包埋率(incorporation efficiency)至少为80％。实施例2

本实施例也是制备包覆紫杉醇的脂质体投药系统的方法。方法类似于实施例1，再加上挤压成形的制程。

由超音波震荡或水合过程形成的脂质体，再经挤压成形。挤压成形过程是采用一系列的薄膜，而不是如实施例1的消毒过滤法。这薄膜是具有1.0到0.2μm均匀孔径大小的聚碳酸酯薄膜。氮气槽(nitrogen tank)释出的气压作为成形的驱动力。根据Lipex Co.的设备操作手册，氮气槽可供的压力最高达750psi。藉此可以获得粒径大小的窄分布(narrow distribution)的脂质体。平均粒径大小为150nm，多分散指数为0.3。此过程中造成的包覆紫杉醇损失率约为10％。实施例3

本实施例探讨不同磷脂组成及比例对脂质体包覆率与粒径大小的影响。

本实施例的包覆紫杉醇的脂质体投药系统，是修改实施例1的方法所制成。其中，脂质体组成包括氢化大豆磷脂酰胆碱(HSPC)或氢化卵磷脂酰胆碱(HEPC)。并且，本实施例以不同比例的HSPC/脂质之比或HEPC/脂质之比做试验。

结果如表1所示，当HSPC的含量增加，紫杉醇的包埋率会降低。当HSPC/脂质比高于60摩尔％，会有针状沉淀出现。

表1的结果又显示，相较于包含HSPC的脂质体，包含HEPC的脂质体粒径较小且有较高的载药量。实验证明，从特定品种纯化得到的HPC可以包覆高含量的亲脂性药物(即疏水性药物)。但是，为达到最高包覆率的最佳的HPC/脂质比决定于各种磷脂的组合。

表1

脂质体成分(莫耳比) 包覆率(％)^# 平均粒径(nm)紫衫醇/EPC/HSPC/胆固醇/MPEG^$(0.3/8/2/1/0.5) 82.2 149.5紫衫醇/EPC/HSPC/胆固醇/MPEG(0.3/6/4/1/0.5) 62.2 167.8紫衫醇/EPC/HSPC/胆固醇/MPEG(0.3/4/6/1/0.5) 针状沉淀^*紫衫醇/EPC/HSPC/胆固醇/MPEG(0.3/8/2/1/0.5) 69.2 113.3紫衫醇/EPC/HEPC/胆固醇/MPEG(0.3/6/4/1/0.5) 63.8 120.8紫衫醇/EPC/HEPC/胆固醇/MPEG(0.3/4/6/1/0.5) 73.6 128.4#包覆率＝包覆于脂质体中的紫衫醇量/添加的紫衫醇量^*制备过程中即出现针状沉淀。$MPEG全名为甲氧基聚乙二醇-二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺实施例4

本实施例探讨胆固醇含量对包覆紫衫醇的脂质体的包覆率及平均粒径的影响。

胆固醇含量影响脂质体的药物包覆率及粒径大小。另一方面，添加胆固醇增强脂质体的强度(rigidity)。一般认为，脂质体强度的增加有助于静脉注射药物时，延长循环时间(Circulation time)。

如图2所示，增加胆固醇含量有降低紫杉醇的包覆率的趋势，并且使得脂质体平均粒径减小。假定嵌有胆固醇的磷脂双层膜间可容纳亲脂性药物，所以添加胆固醇的影响会因脂质与亲脂性药物的不同组合而有所改变。本实施例是依照一般的脂质与亲脂性药物组成配方所得的结果。为了要取得最理想化的脂质体包覆率与粒径大小，需先决定胆固醇含量的最佳范围。如图2的实验结果所示，此最佳范围为0.2-0.3胆固醇/脂质摩尔比。实施例5

本实施例探讨增加药物/磷脂比例对包覆率的影响。

于醇类混合物中，加入不同量的10mg/ml紫杉醇试样，以改变脂质体中的药物/脂质摩尔比例。脂质体的制备方法类似于实施例1所述。根据HPLC定出的浓度，可以计算出紫杉醇的包覆率。从表2可得知，当药物/脂质摩尔比升至20摩尔％时，紫杉醇包覆率可维持于80％以上。然而，当药物/脂质摩尔比升至25摩尔％时，紫杉醇包覆率降至60％。

表2配方 [脂质] 药物/脂质 [紫衫醇] 包覆率平均粒径

(mM) (mole％) (mg/ml) (％) ±SD(nm)A^* 40 3 1.03 80.4 120.0±45.5B^# 20 7 1.04 84.5 114.3±43.6C^# 40 7 2.02 82.4 115.8±41.0D^# 20 10 1.34 78.8 116.2±44.1E^# 20 13 1.60 75.0 119.0±44.2F^# 20 15 2.07 81.0 125.4±46.8G^# 20 20 2.90 85.1 134.9±44.6H^# 20 25 2.32 54.6 146.3±50.4^*脂质体成分：EPC/HEPC/胆固醇/MPEG(32/8/12/2)#脂质体成分：EPC/HEPC/胆固醇/MPEG(16/3/6/2)实施例6

本实施例探讨单一成分磷脂的脂质体，其药物/脂质比例与包覆率的关系。

首先，依照类似实施例1的方法制备仅包含不饱和PC或仅包含饱和PC的脂质体。结果如表3所示。单以卵磷脂酰胆碱(egg PC；EPC)制成的脂质体，只有当紫杉醇/脂质摩尔比在3摩尔％时，其包覆率高于90％；然而，当紫杉醇/脂质摩尔比升至7摩尔％时，紫衫醇包覆率降至40％。

相反地，单以HEPC制成的脂质体无法包覆多于3摩尔％的紫衫醇。当药物/脂质比为3摩尔％时，其紫衫醇包覆率为40-60％之间。

表3脂质体组成 [脂质] 药物/脂质 [紫衫醇] 包覆率平均粒径

(mM) (mole％) (mg/ml) (％) ±SD(nm)EPC/胆固醇/MPEG-PE 20 3 0.45 88.4 142.9±55.4(20/8/1) 20 7 0.52 42.1 174.1±71.3HEPC/胆固醇/MPEG- 20 3 0.35 68.1 93.2±36.1PE(10/1/1)HEPC/DPPG/胆固醇 60 3 1.20 34.0 118.9±45.2(7/3/1)实施例7

本实施例是脂质体成分与储存稳定度关系的探讨。

在制备完成后，包覆紫衫醇的脂质体随即储存于4℃。紫衫醇结晶与大粒径脂质体是以0.2μm的CA-膜过滤除去。紫衫醇浓度以HPLC测得。结果列于表4。在高紫衫醇/脂质比例时，依照本发明较佳实施例的包含EPC及HEPC的脂质体较以单一EPC或HEPC制成的微脂质体为稳定。如表4所示，在储存一个月之内，包覆率变化小于15％。

表4微脂粒组成药物/脂质 [脂质] [紫衫醇]^# 包覆率(％)^*

(mole％) (mM) (mg/ml) 14天 30天 60天EPC/胆固醇/MPEG 3 20 0.49 89.3 77.9(20/8/1) 7 20 0.45 67.8 35.4HEPC/胆固醇 3 20 0.32 76.7 63.6/MPEG(10/1/1)EPC/HEPC/胆固醇 3 40 0.77 108.4 - 73.9/MPEG(32/8/12/2)EPC/HEPC/胆固醇 7 20 0.92 105.3 97.9 104.6/MPEG(16/3/6/2)

7 40 2.02 104.4 97.3 105.0

10 20 1.34 - 90.0 99.5

13 20 1.60 - 93.7 98.5

15 20 2.07 83.7 86.9 83.1

15 20 2.07 94.2 09.7 86.0

15 20 1.99 95.5 97.9 60.3

20 20 2.90 88.7 91.7 85.5

25 20 2.32 - 99.6 73.3#第零天时，紫衫醇的浓度。^*包覆率＝第N天的[紫衫醇]/第零天的[紫衫醇]。实施例8

本实施例探讨其他的长期储存方法。

在制备完成后，包覆紫衫醇的脂质体随即冷冻储存于-20℃或-75℃。脂质体粒径大小与紫衫醇浓度皆定期测量。结果显示，在-75℃下，包覆紫衫醇的脂质体可以维持稳定达3个月。此外，脂质体可以先经冷冻干燥(lyophilization)后，于4℃下以粉状储存数个月。实施例9

根据本发明的脂质体投药系统除了可以包覆高含量的紫衫醇，也可用以高含量包覆其他的疏水性药物。

为制成药物/脂质摩尔比为1/3的脂质体投药系统，先添加2mg的全反式视黄酸(all-trans retionic acid)(ATRA)于包含下列组成的醇类混合物中：12.2mg/ml EPC，2.28mg/ml HSPC，2.28mg/ml胆固醇，5.4mg/ml MPEG-DSPE。当然，醇类混合物中还可以包括其他抗氧化剂，或以其他胆固醇衍生物替代胆固醇，所以本发明虽以上述配方为例，但不应限定于此。上述添加ATRA的醇类混合物再于真空中进行蒸发，以除去溶剂并于圆底烧瓶的瓶壁形成脂质膜。蒸发结束后，再加入1ml 10％(w/v)庶糖(sucrose)于圆底烧瓶进行水合(hydration)。大粒径多层(multilamellar)脂质体悬浮后，经超音波(sonication)震荡10分钟后，就会形成小粒径的单层(unilamellar)脂质体。含有ATRA的脂质体接着以0.2μm CA-膜过滤以灭菌。再以激光颗粒径分析仪以分析其粒径大小。经计算得知，其平均粒径约为160nm。接着，过滤后ATRA在脂质体中的浓度以HPLC测出，约为1.9mg/ml，因此，包埋率(incorporation efficiency)高于90％，且ATRA/脂质比例可达33摩尔％。

因此，可以得知利用本发明的优选实施例的脂质体投药系统，可以高含量包覆ATRA。由此结果，熟习本技艺者可以知道利用本发明的优先实施例的脂质体投药系统应同样可高含量包覆所有的视黄酸及其衍生物，并且，其药物/磷脂的比例可以提高到约1摩尔％至40摩尔％。实施例10

本实施例探讨以依照本发明优选实施方案的脂质体投药系统以包覆高含量的喜树碱(camptothecin)的制程。

为制成药物/脂质摩尔比为3/10的脂质体投药系统，先添加2mg的喜树碱于包含下列组成的醇类混合物中：12.2mg/ml EPC，2.28mg/ml HSPC，2.28mg/ml胆固醇，5.4mg/ml MPEG-DSPE。当然，醇类混合物中也可以包括其他抗氧化剂，或以其他胆固醇衍生物替代胆固醇，所以本发明虽以上述配方为例，但不应限定于此。上述添加喜树碱的醇类混合物再于真空中进行蒸发，以除去溶剂并于圆底烧瓶的瓶壁形成脂质膜。蒸发结束之后，再加入1ml10％(w/v)蔗糖于圆底烧瓶进行水合。大粒径多层脂质体悬浮后，经超音波震荡10分钟后，就会形成小粒径的单层脂质体。再以激光颗粒尺寸分析仪以分析其粒径大小。经计算得知，其平均粒径约为148nm。制备过程中并无肉眼可见的沉淀出现，其喜树碱/脂质比例可达30摩尔％。

因此，可以得知利用本发明的优选实施方案的脂质体投药系统，可以高含量包覆喜树碱。藉此结果，熟习本技艺者可以知道利用本发明的优选实施方案的脂质体投药系统应同样可高含量包覆喜树碱的衍生物，并且，其药物/磷脂的比例可以提高到约40摩尔％。

由实施例1，2，9，10，可以得知，依照本发明的脂质体投药系统可以分别高含量包覆紫衫醇及其衍生物，视黄酸及其衍生物，以及喜树碱及其衍生物。但本发明不应限定于此，依照本发明的脂质体投药系统应可高含量包覆紫衫醇及其衍生物，视黄酸及其衍生物，以及喜树碱及其衍生物中任何两种以上药物的组合。实施例11

本实施例探讨动物实验的结果。

四组五至六周大的公ICR老鼠接受静脉注射，注射液是传统的紫衫醇(cremophore EL/ethanol＝1/1)或剂量的包覆20mg/kg及40mg/kg紫衫醇的脂质体。持续记录各组中存活的老鼠的反应超过14天。结果示于表5，相较于根据本发明的包覆高含量紫衫醇的脂质体投药系统，传统紫衫醇投药系统具有显著的毒性。

表5

剂量(mg/kg) 存活老鼠传统紫衫醇剂型 20 4/5

40 0/5脂质体紫衫醇剂型 40 8/8

发明效果

依照本发明实施例的脂质体系统可以包埋疏水性物质，例如紫衫醇，高达20摩尔(药物/脂质之比)，在4℃下储存超过一个月，包覆效率(encapsulationefficiency)及粒径变化(particle size variation)不超过15％，若使用7摩尔％的配方，与前相同储存条件下则至少稳定两个月以上。

因此，相对于过去已发表的紫杉醇-脂质体配方，本发明明显地超越过去配方中紫杉醇对磷脂比例的最大限制，提高单位磷脂所能携带紫杉醇的量达到20摩尔％。

主要原因是本配方使用两种不同物理性质(相转移温度)的磷脂的组合，在脂质体膜上形成不互溶不连续的分相，防止或减缓紫杉醇自行聚集而结晶析出的趋势，即使高含药量的脂质体也能维持一定的稳定性，根据这原理及配方，也可用于其他在脂质体剂型中易于结晶析出的疏水性药物，如A酸(全反式视黄酸)，在脂质体中可包埋约33摩尔％的高比例，而过去的配方最高多为20摩尔％左右。

综上所述，虽然本发明已以优选实施例揭露如上，然其并非用以限定本发明，任何熟习本技艺者，在不脱离本发明的精神和范围，当可作各种的更动与修饰，因此本发明的保护范围当视所附的权利要求书所界定的为准。

Claims

1.一种可包覆高含量疏水性物质的脂质体，至少包括：

第一磷脂；

第二磷脂；

疏水性物质；以及

形成脂质体所需的成分；

其中该第一磷脂与第二磷脂在脂质体中分成两相。

2.如权利要求1所述的脂质体，其中，该第一磷脂的相转移温度大于其特定的投药或储存的最高温度；该第二磷脂的相转移温度小于其特定的投药或储存的最低温度。

3.如权利要求2所述的脂质体，其中，该第一磷脂是一种氢化天然磷脂或长碳链饱和的磷脂。

4.如权利要求3所述的脂质体，其中，该第一磷脂选自磷脂酰胆碱(PC)、磷脂酰甘油(PG)、磷脂酰丝氨酸(PS)及磷脂酰乙醇胺(PE)。

5.如权利要求4所述的脂质体，其中该磷脂酰胆碱选自氢化卵磷脂酰胆碱(HEPC)，氢化大豆磷脂酰胆碱(HSPC)，二棕榈酰基磷脂酰胆碱(DPPC)及二硬脂酰基磷脂酰胆碱(DSPC)。

6.如权利要求2所述的脂质体，其中，该第二磷脂是一种不饱和磷脂，或短碳链饱和的磷脂。

7.如权利要求6所述的脂质体，其中，第二磷脂选自磷脂酰胆碱(PC)、磷脂酰甘油(PG)、磷脂酰丝氨酸(PS)及磷脂酰乙醇胺(PE)。

8.如权利要求7所述的脂质体，其中该磷脂酰胆碱选自卵磷脂酰胆碱(EPC)，大豆磷脂酰胆碱(SPC)，人工合成不饱和磷脂酰胆碱，天然不饱和磷脂酰胆碱，二肉豆蔻酰基磷脂酰胆碱(DMPC)，以及二月桂酰基磷脂酰胆碱(DLPC)。

9.如权利要求1所述的脂质体，其中，该疏水性物质是一疏水性药物。

10.如权利要求9所述的脂质体，其中，该疏水性药物是紫杉醇和/或其衍生物。

11.如权利要求10所述的脂质体，其中，紫杉醇及/或其衍生物与磷脂之比(药物/磷脂)约为0.5摩尔％至25摩尔％。

12.如权利要求9所述的脂质体，其中，该疏水性药物是视黄酸及/或其衍生物。

13.如权利要求12所述的脂质体，其中，视黄酸及/或其衍生物与磷脂之比(药物/磷脂)约为0.5摩尔％至40摩尔％。

14.如权利要求9所述的脂质体，其中该疏水性药物是喜树碱及/或其衍生物。

15.如权利要求14所述的脂质体，其中，喜树碱及/或其衍生物与磷脂之比(药物/磷脂)约为0.5摩尔％至30摩尔％。

16.如权利要求9所述的脂质体，其中，该疏水性药物是选自紫衫醇及其衍生物，视黄酸及其衍生物，以及喜树碱及其衍生物。

17.如权利要求1所述的脂质体，其中，该形成脂质体所需的成分选自亲水高分子修饰的磷脂如甲氧基聚乙二醇-二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺(MPEG-DSPE)，胆固醇，胆固醇衍生物以及抗氧化剂。

18.一种可包覆高含量疏水性物质的脂质体，至少包括：

第一磷脂酰胆碱；

第二磷脂酰胆碱；

疏水性物质；以及

形成脂质体所需的成分；

其中该第一磷脂酰胆碱与该第二磷脂酰胆碱在脂质体中分成两相。

19.如权利要求18所述的脂质体，其中，该第一磷脂酰胆碱的相转移温度大于其特定的投药或储存的最高温度；该第二磷脂酰胆碱的相转移温度小于其特定的投药或储存的最低温度。

20.如权利要求19所述的脂质体，其中，该第一磷脂酰胆碱是一种氢化天然磷脂酰胆碱或长碳链饱和的磷脂酰胆碱。

21.如权利要求20所述的脂质体，其中，该磷脂酰胆碱选自氢化卵磷脂酰胆碱(HEPC)、氢化大豆磷脂酰胆碱(HSPC)，二棕榈酰基磷脂酰胆碱(DPPC)及二硬脂酰基磷脂酰胆碱(DSPC)。

22.如权利要求19所述的脂质体，其中，该第二磷脂酰胆碱是一种不饱和磷脂酰胆碱，或短碳链饱和的磷脂酰胆碱。

23.如权利要求22所述的脂质体，其中，该磷脂酰胆碱选自卵磷脂酰胆碱(EPC)，大豆磷脂酰胆碱(SPC)，人工合成不饱和磷脂酰胆碱，天然不饱和磷脂酰胆碱，二肉豆蔻酰基磷脂酰胆碱(DMPC)，以及二月桂酰基磷脂酰胆碱(DLPC)。

24.如权利要求18所述的脂质体，其中，该疏水性物质是一疏水性药物。

25.如权利要求24所述的脂质体，其中，该疏水性药物是紫杉醇及/或其衍生物。

26.如权利要求25所述的脂质体，其中，紫杉醇及/或其衍生物与磷脂之比(药物/磷脂)约为0.5摩尔％至25摩尔％。

27.如权利要求24所述的脂质体，其中，该疏水性药物是视黄酸及/或其衍生物。

28.如权利要求27所述的脂质体，其中，视黄酸及/或其衍生物与磷脂之比(药物/磷脂)约为0.5摩尔％至40摩尔％。

29.如权利要求24所述的脂质体，其中，该疏水性药物是喜树碱及/或其衍生物。

30.如权利要求29所述的脂质体，其中，喜树碱及/或其衍生物与磷脂之比(药物/磷脂)约为0.5摩尔％至30摩尔％。

31.如权利要求24所述的脂质体，其中，该疏水性药物是选自紫衫醇及其衍生物，视黄酸及其衍生物，以及喜树碱及其衍生物。

32.如权利要求18所述的脂质体，其中该形成脂质体所需的成分选自亲水高分子修饰的磷脂，如甲氧基聚乙二醇-二硬脂酰基磷脂酰基乙醇胺(MPEG-DSPE)，胆固醇，胆固醇衍生物以及抗氧化剂。