CN1372640A - 色谱测定装置 - Google Patents
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Abstract
根据本发明的色谱测定装置,如图1所示,至少,将从色谱试验片1的保持指示剂的指示剂保持部3起直至可以观察到显色反应的特异蛋白质固定部5的区域,用由塑料带等不透过液体的片状材料6以贴紧的状态加以覆盖,除此之外的区域不覆盖是敞开的。在这样构成的色谱测定装置中,可以减少结构构件且简化试验片制造工艺,以低成本获得高灵敏度、高性能的装置。
Description
技术领域
本发明涉及对被检测物质进行定性或定量测定用的色谱测定装置。
背景技术
在现有技术中，作为进行水质检测及尿检查等液体试样的化学试验或临床试验的方法，广泛地采用利用抗原抗体反应的色谱测定。这种色谱测定可以说是一种将混合物按其成分分离的方法，用于进行色谱测定的色谱测定装置一般地由以下部分，即，添加液体试样的试样添加部，保持由液体试样渗透、可移动的指示剂的指示剂保持部，将和指示剂一起流动的液体试样中的分析对象进行特异化合的蛋白质固定的特异蛋白质固定部，进行特异的化合反应的反应层，吸收流体试样的吸水部形成，并且将这些结构构件依次层叠或连接到用塑料等构成的支承体上，以并列的状态构成。
下面，对利用这种通用的色谱测定装置的色谱测定进行说明。
当把液体试样添加到试样添加部上时，接着到达指示剂保持部的区域。其次，被保持在该指示剂保持部区域的指示剂通过前述液体试样的浸透而溶解，与前述液体试样一起浸透到反应层区域。在反应层区域上具有特异蛋白质固定部，在前述试样中含有分析对象的情况下，固定在特异蛋白质固定部上的特异的蛋白质对分析对象与指示剂的复合体伴随着显色或着色产生化合反应，可借助目视检测方式进行判断。另一方面，在前述液体试样中不含有分析对象时，不会引起化合反应，不会观察到显色或着色。最后，前述液体试样被设在色谱测定装置下端区域的吸收部所吸收，反应结束。
这样，由于利用现有的色谱测定装置的色谱测定可以非常容易地判断检查结果，所以其用途十分广泛，可用于各种各样的分析对象的检查。
但是，在利用上述现有的色谱测定装置的色谱测定中，由于在色谱展开时添加的液体试样中的水分从色谱测定装置的上表面及侧面上自然蒸发，所以在流到测定区域中的分析对象的量不均匀的同时，在一定时间当中，流过色谱测定装置上的液体试样的量及指示剂的量是不一定的，不能进行准确的色谱测定。
此外，由于现有技术的色谱测定装置是将载体上的试样添加部，指示剂保持部、特异蛋白质固定部、反应层、吸收部等结构部件叠层或连接的片切断成试验片的大小制作而成的，在切成试验片大小时，层叠或连接到载体上的构件存在着剥离的问题。
进而，为用现有技术的色谱测定装置进行准确的色谱测定，前述试样添加部，指示剂保持部、特异的蛋白质固定部、反应层、吸收部等结构部件是必不可少的，不可能消减。因此，在制造色谱测定装置时，要花费一定的成本，导致成本加高。
发明内容
本发明为了解决这些问题，其目的是提供一种在色谱测定装置中，可以减少结构部件，且简化试样片的制造工艺，成本低、高灵敏度、高性能的色谱测定装置。
根据本发明的(权利要求1所述的)色谱测定装置，具有作为进行色谱测定用的试验片的色谱试验片、将添加到该色谱试验片上的被检查物质定性或定量测定用，其特征为，利用不透过液体的片状材料以贴紧的状态将前述色谱试验片的色谱上游侧和下游侧两端区域以外的部分覆盖。
在这样构成的色谱测定装置中，所添加的液体试样借助毛细管现象向色谱下游侧渗透，在用不透过液体的片状材料以贴紧的状态覆盖的区域，不进行水分蒸发，当试样到达开放部(即未被覆盖的部分)时，试样的水分蒸发并干燥。另一方面，在试样添加部，由于试样被保持，所以液体试样不会倒流，向色谱下游方向展开。借此，液体试样的渗透方向及渗透状态均匀，同时，不仅在一定时间内流过的液体试样与指示剂能够以均匀的浓度流出，而且在下游侧区域没有必要设置吸收试样的吸水部，可减少结构构件，且简化试验片制造工艺，可实现与现有技术相比具有高灵敏度、高性能、低成本的色谱测定装置。
本发明(权利要求2)的特征为，在权利要求1所述的色谱测定装置中，将前述色谱试验片的色谱上游侧及色谱下游侧的两端区域以外的上表面利用不透过液体的片状材料以贴紧的状态加以覆盖。
在这种结构的色谱测定装置中，所添加的液体试样借助毛细管现象向色谱下游方向渗透，在用不透过液体的片状材料以贴紧的状态覆盖的区域中，不进行水分的蒸发，当液体试样到达开放部时，进行试样水分的蒸发干燥。另一方面，在试样添加部，由于液体试样被保持，液体试样不会倒流，向色谱下游方向展开。同时，由于只将色谱传递装置的表面用不透过液体的片状材料覆盖，所以在制造色谱测定装置时不必把不透过液体的片状材料卷绕到色谱试验片的背面，同时，在把制成的色谱片切割成色谱试验片的大小时，由于色谱测定片用不透过液体的片状材料以贴紧的状态覆盖，所以不必担心在切割时构件的剥离。借此，在下游区域没有必要设置吸水液体试样用的吸水部，减少结构构件、且简化试验片的制造工艺，可以实现比现有技术高的高灵敏度、高性能及低成本的色谱测定装置。
本发明(权利要求3)的特征为，在权利要求1所述的色谱测定装置中，前述色谱试验片的除色谱上游侧与色谱下游侧两端区域以外的上表面和侧面用不透过液体的片状材料以贴紧的状态加以覆盖。
在这种结构的色谱测定装置中，所添加的试样由于毛细管现象向色谱下游侧渗透，在以贴紧的状态用不透过液体的片状材料覆盖的区域不进行水分的蒸发，当液体试样到达开放部时，进行试样的水分蒸发干燥。另一方面，在试样添加部，由于液体试样被保持，所以特异试样不会倒流，向色谱下游方向展开。借此，在下游区域没有必要设置吸收试样的吸水部，减少结构构件，且可以实现试样片制造工艺简化、比现有技术具有高灵敏度、高性能、低成本的色谱测定装置。
本发明(权利要求4)的特征为，在权利要求1所述的色谱测定装置中，前述色谱试验片除色谱上游侧及色谱下游侧两端的区域之外的上表面、侧面，及下表面以贴紧的状态覆盖以不透过液体的片状材料。
在这种结构的色谱测定装置中，所添加的液体试样借助毛细管现象向色谱下游方向渗透，在用不透过液体的片状材料以贴紧的状态覆盖的区域，不进行水分的蒸发，当液体试样到达开放部时进行试样的水分蒸发和干燥。另一方面，在试样添加部，由于液体试样被保持，所以液体试样不倒流，向色谱下游方向展开。同时，不透过液体的片状材料也可以同时起着反应层载体的作用，以便减少构成色谱测定装置的结构构件的数目。借此，在下游区域没有必要设置吸收试样的吸水部，以期减少结构构件，并且可以实现简化试验片制造工艺、与现有技术相比具有高灵敏度、高性能、低成本的色谱测定装置。
本发明(权利要求5)的特征为，在权利要求1至权利要求4所述的色谱测定装置中，至少，前述色谱试验片上从位于色谱上游侧的保持指示剂的指示剂保持部开始直至位于色谱下游侧将特异蛋白质固定的特异蛋白质固定部的测定区域用不透过液体的片状材料以贴紧的状态加以覆盖。
在这种结构的色谱测定装置中，从指示剂保持区至特异蛋白质保持区之间，所添加的液体试样一面进行反应，一面借助毛细管现象向色谱下游渗透，在用不透过液体的片状材料以贴紧的状态覆盖的区域，不进行水分的蒸发，当液体试样到达开放部时，进行试样的水分蒸发和干燥。另一方面，在试样添加部由于液体试样被保持，液体试样不会倒流，向色谱下游方向展开。借此，在下游区域不必设置吸收试样的吸水部，以期减少结构构件，且可以实现简化试验片制造工艺，与现有技术相比具有高灵敏度、高性能、低成本的色谱测定装置。
本发明(权利要求6)的特征为，在权利要求1至权利要求5中任何一个所述的色谱测定装置中，前述色谱试验片是将多个多孔质材料层叠或连接制成的。
在这种结构的色谱测定装置中，所添加的液体试样借助毛细管现象向色谱下游渗透，在用不透过液体的片状材料以贴紧的状态覆盖的区域不进行水分的蒸发，当液体试样到达开放部时，进行试样的水分蒸发和干燥。另一方面，在试样添加部，由于液体试样被保持，所以液体试样不会倒流，向色谱下游方向展开。借此，在下游区域不必设置吸收试样的吸水部，以期减少结构构件，且可以实现简化试验片制造工艺、与现有技术相比具有高灵敏度、高性能、低成本的色谱测定装置。
本发明(权利要求7)的特征为，在权利要求1至权利要求5中任何一个所述的色谱测定装置中，前述色谱试验片由单层多孔质材料构成。
在这种结构的色谱测定装置中，所添加的液体试样借助毛细管现象向色谱下游渗透，在用不透过液体的片状材料以贴紧的状态覆盖的区域不进行水分的蒸发，当液体试样到达开放部时，进行试样的水分蒸发和干燥。另一方面，在试样添加部，由于液体试样被保持，所以液体试样不会倒流，向色谱下游方向展开。借此，在下游区域不必设置吸收试样的吸水部，以期减少结构构件，且可以实现简化试验片制造工艺、与现有技术相比具有高灵敏度、高性能、低成本的色谱测定装置。
本发明(权利要求8)的特征为，在权利要求7所述的色谱测定装置中，前述单层多孔质材料为硝化纤维(ニトロセルロ-ス)。
在这种结构的色谱测定装置中，不仅添加的液体的量极微量就足够了，而且所添加的液体试样由于毛细管现象向色谱下游渗透，在用不透过液体的片状材料以贴紧的状态覆盖的区域不进行水分的蒸发，当液体试样到达开放部时，进行试样的水分蒸发干燥。另一方面，在试样添加部，由于液体试样被保持，所以，液体试样不会倒流，向色谱下游方向展开的效果以更高的效率进行。借此，没有必要在下游区域设置现有技术中所必须的吸收试样的吸水部。同时，由于构成色谱试验片的基本构件是单层的，所以可减少结构构件的数目且能够实现简化试验片的制造工艺、与现有技术相比具有高灵敏度、高性能、低成本、被检测体微量化的色谱测定装置。
本发明(权利要求9)的特征为，在权利要求1至8的任何一个所述的色谱测定装置中，将未用不透过液体的片状材料覆盖的色谱下游区域用透气性材料加以覆盖。
在这种结构的色谱测定装置中，所添加的液体试样借助毛细管现象向色谱下游渗透，在用不透过液体的片状材料以贴紧的状态覆盖的区域不进行水分的蒸发，当液体试样到达开放部时，进行试样的水分蒸发和干燥。另一方面，在试样添加部，由于液体试样被保持，所以液体试样不会倒流，向色谱下游方向展开。同时，由于通过将下游区域用透气性材料覆盖，不会直接用于触及露出来的反应层，所以不会由附着在手上的物质污染反应层，保持其吸水性。同时，即使在用手触及试验片的下游区域的情况下，液体试样也不会附着在手上。借此，不必在下游区域设置吸收试样的吸收部，减少结构材料，且可以实现简化试验片制造工艺、可更加安全与卫生地使用的、与现有技术相比具有更高灵敏度、高性能、低成本的色谱测定装置。
本发明(权利要求10)的特征为，在权利要求9所述的色谱测定装置中，前述透气性材料为无纺布等任意多孔质薄膜材料。
在这种结构的色调测定装置中，由于是透气性优异的薄膜材料，所以其本身缺少吸水力，当液体试样到达下游区域时，不仅可以进行试样的水分蒸发、干燥，而且，通过将下游区域用透气性材料覆盖，不会直接用手触及露出来的反应层，不会由附着在手上的物质污染反应层，吸水性得到维持。同时，即使在用手触及试验片的下游区域时，液体试样也不会附着在手上。借此在下游区域不必设置吸收试样的吸水部，减少结构材料，且可以实现简化试验片制造工艺，可更安全而卫生的使用比现有技术具有更高的灵敏度、高性能、低成本的色谱测定装置。
本发明(权利要求11)的特征为，在权利要求9所述的色谱测定装置中，前述透气性材料为网状组织。
在这种结构的色谱测定装置中，因为是网状组织从而透气性优异的材料其本身缺乏吸水性，当液体试样达到下游区域时，不仅可以进行试样水分的蒸发干燥，而且通过用透气性材料覆盖下游区域，不会直接用手触及露出的反应层，所以不会用附着在手上的物质污染反应层，维持其吸水性。同时，即使在用手触及试验片的下游区域时，液体试样也不会附着在手上。借此在下游区域不必设置吸收试样的吸水部就能够实现减少制造材料，简化试验片制造工艺，可更安全并卫生地使用的、与现有技术相比具有高灵敏度、高性能、低成本的色谱测定装置。
本发明(权利要求12)的特征为，在权利要求1至权利要求8任何一个所述的色谱测定装置中，在不用不透过液体的片状材料覆盖的色谱下游区域上配备有形成任意空间的空间形成部。
在这种结构的色谱测定装置中，通过在下游区域配备空间形成部，不能直接用手触及露出的反应层，不会用附着在手上的物质污染反应层，维持其吸水性。此外，即使用手触及试验片的下游区域时，液体试样也不会附着在手上。此外，由于在下游区域形成空间，所以当液体试样到达下游区域时，可以进行试样的水分蒸发和干燥。借此，在下游区域不必设置吸收试样的吸水部，可以实现减少制造材料、且简化试验片制造工艺，可更安全且卫生地使用的、与现有技术相比具有高灵敏度、高性能、低成本的色谱测定装置。
本发明(权利要求13)的特征为，在权利要求12所述的色谱测定装置中，在前述空间形成部的色谱下游区域的端部或平行侧面或空间形成部上表面的任意部位上配备有可以流入空气的间隙部。
在这种结构的色谱测定装置中，由于通过在下游区域配备空间形成部，不会直接用手触及露出的反应层，所以不会用附着在手上的物质污染反应层，维持其吸水性。此外，即使手触及到试验片的下游区域时，液体试样也不会附着在手上。同时，由于在下游区域形成空间，且备有在任意位置处的间隙部，所以透气性良好，当液体试样到达下游区域时，能够进行试样的水分蒸发及干燥。借此，不必在下游区域设置吸收试样的吸水部，能够实现减少制造材料、且简化制造工艺，可更安全且卫生地使用的、与现有技术相比具有高灵敏度、高性能、低成本的色谱测定装置。
本发明(权利要求14)的特征为，在权利要求12或权利要求13中所述的色谱测定装置中，前述空间形成部是用不透过液体的材料形成的。
在这种结构的色谱测定装置中，由于通过在下游区域配备采用不透过液体的材料的空间形成部，不会用手直接触及露出的反应层，所以不会用附着在手上的物质污染反应层，保持其吸水性。此外，即使用手触及试验片的下游区域时，液体试样也不会附着在手上。此外由于在下游区域形成空间，所以当液体试样到达下游区域时，可以进行试样的水分蒸发干燥。借此，不必在下游区域设置吸收试样的吸水部，能够实现减少制造材料、且简化制造工艺，可更安全且卫生地使用的、与现有技术相比具有高灵敏度、高性能、低成本的色谱测定装置。
本发明(权利要求15)的特征为，在权利要求1至权利要求14中任何一个所述的色谱测定装置中，前述色谱试验片是利用抗原抗体反应的免疫色谱试验片。
在这种结构的色谱测定装置中，通过获得对测定对象的抗体或抗原，能够实现可以测定多种测定对象并且能够更加安全且卫生地进行使用的、与现有技术相比具有高灵敏度、高性能、低成本的色谱测定装置。
此外，这里所示的免疫色谱试验片，是指在色谱展开的载体上，利用抗原抗体反应进行试样溶液中的被检测物质的检测用的试验片。
本发明(权利要求16)的特征为，在权利要求1至权利要求15中任何一个所述的色谱测定装置中，前述色谱试验片是干式分析部件。
在这种结构的色谱测定装置中，可以把蛋白质等的变性抑制到最低限度，能够长期保持测定装置。
本发明(权利要求17)的特征为，在权利要求1至权利要求16中任何一个所述的色谱测定装置中，前述色谱试验片是单步试验片。
在这种结构的色谱测定装置中，不必进行试样溶液的前处理，只要把试样溶液滴在试验片上就可以，操作简便。
附图的简单说明
图1是表示根据本发明的第一种实施形式的色谱测定装置的结构的图示。
图2是表示根据本发明的第一种实施形式的色谱测定装置的除去不透过液体的片状材料之外的色谱试验片的结构的图示。
图3是表示根据本发明的第二种实施形式的色谱测定装置的结构的图示。
图4是表示根据本发明的第二种实施形式的色谱测定装置的除去不透过液体的片状材料之外的色谱试验片的结构的图示。
图5是将根据本发明的第三种实施形式的色谱测定装置相对于色谱方向平行剖开的剖面图。
图6是将根据本发明的第三种实施形式的色谱测定装置相对于色谱方向垂直剖开的剖面图。
图7是将根据本发明的第四种实施形式的色谱测定装置相对于色谱方向平行剖开的剖面图。
图8是将根据本发明的第四种实施形式的色谱测定装置相对于色谱方向垂直剖开的剖面图。
图9是构成本发明的第五种实施形式的色谱测定装置的结构的图示。
图10是将根据本发明的第五种实施形式的色谱测定装置相对于色谱方向平行剖开的剖面图。
图11是将根据本发明的第五种实施形式的色谱测定装置相对于色谱方向垂直剖开的剖面图。
图12是表示根据本发明的第六种实施形式的色谱测定装置的结构的图示。
图13是表示根据本发明的第七种实施形式的色谱测定装置的结构的图示。
图14是将根据本发明的第七种实施形式的色谱测定装置相对于色谱方向垂直剖开的剖面图。
图15是将根据本发明的第七种实施形式的色谱测定装置相对于色谱方向垂直剖开的剖面图。
图16是表示根据本发明的第七种实施形式的色谱测定装置的结构的图示。
图17是表示根据本发明的第七种实施形式的色谱测定装置的结构的图示。
图18是将根据本发明的第七种实施形式的色谱测定装置相对于色谱方向平行剖开的剖面图。
实施发明的最佳形式
以下，参照图面说明本发明的实施形式。
此外，这里所示的实施形式始终是一个例子，并不限于这种实施形式。
(第一种实施形式)
下面参照图1及图2说明根据本发明的第一种实施形式的色谱测定装置。
图1是表示根据本发明的第一种实施形式的色谱测定装置的图示，图2是表示去掉该色谱测定装置的不透过液体的片状材料的色谱试验片。
图1是表示对添加到色谱试验片1上的被检测物质进行定性或定量测量用的色谱测定装置，前述色谱试验片1的色谱上游侧及色谱下游侧的两端区域以外的部分用不透过液体的片状测量以贴紧的状态加以覆盖。
图2所示的色谱试验片1由以下部分构成，即，用吸水性强的无纺布等多孔质材料制成的、添加或涂布液体试样用的试样添加部2，保持通过液体试样的渗透可移动的指示剂的指示剂保持部3，由硝化纤维等多孔质材料构成的、与流动的液体试样中的分析对象物进行特异化合反应的反应层4，作为在反应层4的区域上流动的液体试样中的分析对象物进行特异化合的蛋白质的固定部位的特异蛋白质固定部5。
同时，这种色谱试验片1将由多孔质材料构成的试样添加部2，反应层的流过部位层叠或连接到用塑料等构成的支承体7上构成，在由该多孔质材料构成的构件上设置指示剂保持部3，以及特异蛋白质固定部5。此外，在本发明中，所谓层叠指的是将不同的多种材料与相邻的构件稍稍重叠的状态，所谓连接指的是不同的多种材料不与相邻的构件重叠而紧密接触的状态。
此外，根据本发明的色谱层叠装置，将图1所示的色谱试验片1的色谱上游侧与色谱下游侧的两端区域以外的部分，用由塑料带等构成的不透过液体的片状材料6以贴紧的状态加以覆盖。
同时，在本发明中，所谓任意表面，优选地是指色谱试验片1的上游侧及下游侧两个区域是相同的，或者在下游侧的区域较大的状态，但除此之外的状态也没有什么关系。
下面对于采用本发明的第一种实施形式的色谱测定装置(参照图1)进行的色谱测定加以说明。
在图1所示的色谱测定装置中，当把液体试样添加到试样添加部2上时，试样接着达到指示剂保持部3的区域。然后，保持在该指示剂保持部3的区域上的指示剂通过前述液体试样的渗透被溶解，与前述液体试样一起渗透到反应层4的区域。在反应层4的区域上，具有特异蛋白质固定部5，当在前述液体试样中含有分析对象物时，固定在特异蛋白质固定部5上的特异蛋白质对分析对象物和指示剂的复合体起化合反应，在特异蛋白质固定部5的区域上可观察到显色反应。另一方面，在前述液体试样中不包含分析对象物时，不引起化合反应，观察不到显色反应。最后，前述液体试样渗透到色谱试验片1的下端区域，反应结束。
这时，至少把从色谱试验片1的表面的位于上游侧的指示剂保持部3直到下游侧的特异蛋白质固定部5的测定区域，利用由塑料带等构成的不透过液体的片状材料6在贴紧的状态加以覆盖，可以防止在测定区域的水分蒸发，同时，可以使渗透到测定区域的液体试样的量均匀化，进而，在一定的时间内可使流过测定区域的引入试样及指示剂的浓度成为恒定，从而可准确地进行色谱测定。
同时，通过不用不透过液体的片状材料覆盖色谱试验片1的下游区域，当液体试样渗透到作为该色谱试验片1的下端的开放区的下端开放部时，水分慢慢蒸发。由于在前述下端开放部的液体试样的蒸发速度比添加的液体试样向该色谱试验片1的下游侧的渗透速度快，所以液体试样不会倒流而干燥。同时，持续地将液体试样添加到试样添加部2上，以便保持与该色谱试验片1的下游区域的水分比例均匀，前述液体试样向该色谱试验片1的下游侧区域展开，在反应层4上进行准确的反应。
如上所述，采用根据本发明的第一种实施形式的色谱测定装置，通过把色谱试验片1除其上游侧及下游侧两个端部以外的部分的表面最低至少从指示剂保持部3直至特异蛋白质固定部5的区域用不透过液体的片状材料6以贴紧的状态加以覆盖，不必用吸水性强的构件在该色谱试验片1的下游侧区域将展开的液体上游吸收，就可以进行色谱展开。此外，所述水平试验片1作为由上游添加部2，指示剂保持部3，特异蛋白质固定部5及反应层4构成，进而具有支承这些结构构件的支承体7的色谱测定装置，可以减少结构构件，且简化试验片的制造工艺，以低成本实现高灵敏度、高性能的色谱测定装置。
此外，说明说明了在本发明的色谱测定装置中，位于反应层4上的特异蛋白质固定部5的区域为一个时的情况，但并不限于只有一个，在反应层4的区域上可以存在任意数目的特异蛋白质固定区域。同时，作为色谱测定用的反应成分对采用特异蛋白质的情况进行了说明，但并不限于此，例如，也可以采用像酵素这种在反应后会产生某种变化的物质作为色谱测定反应成分。
此外，作为支承体7的结构例。列举了塑料等例子，但也可采用尼龙带及PET(Polyethylene Terephalate聚对苯甲二酸乙二酯)等任意不透过液体的材料。此外，作为试样添加部2，指示剂保持部3，反应层4的结构例列举了无纺布及硝化纤维作为例子，但采用任意的多孔质载体结构都没有关系。
此外，在本发明中，构成色谱测定装置的色谱试验片1通过把硝化纤维及玻璃纤维滤纸这类任意多种多孔质材料层叠或连接构成。由这样的材料构成的色谱试验片1，例如，利用像抗原抗体反应这样的测定原理可以定量地分析检测出某种特定物质。此外，它可以测定水及水溶液、尿、血液、溶有固体、粉体及气体的溶液等液体试样，作为它的用途有尿检查、妊娠检查、水质检查、大便检查、土壤分析、食品分析等。
(第二种实施形式)
下面利用图3及图4说明根据本发明的第二种实施形式的色谱测定装置。
图3是表示根据本发明的第二种实施形式的色谱测定装置图。
图4是该色谱测定装置的除去不透过用途的片状材料的色谱试验片。
图3是对添加在色谱试验片1上的被检查物质进行定性或定量检测用的色谱测定装置，在前述色谱试验片1上，除色谱上游侧及下游侧的两端的区域以外的部分用不通过液体的片状材料6以贴紧的方式加以覆盖。
与用图2所说明的第一种实施形式的色谱试验片1的不同之处在于，图4所示的试验片1不设置液体试样添加部2，通过在反应层4上直接添加或涂布液体试样，仅由反应层4单层构成色谱试验片的基本结构构件。因此，处于和前述第一种实施形式的色谱测定装置相同的结构部件赋予相同的标号，并省略其说明。
下面对于采用根据本发明的第二种实施形式的色谱测定装置(参见图3)所进行的色谱测定进行说明。
在图3所示的色谱测定装置中，当把液体试样添加到反应层4上时，接着到达指示剂保持部3的区域。然后，保持在该指示剂保持部3的区域内的指示剂由于前述液体试样的渗透而溶解，与前述液体试样一起向特异蛋白质固定部5渗透。当前述液体试样中含有分析对象物时，固定在特异蛋白质固定部5上的特异的蛋白质对分析对象物与指示剂的复合体起化合反应，在特异的蛋白质固定部5上观察到显色反应。另一方面，当前述液体试样中不含分析对象物时，不引起化合反应，也观察不到显色反应。最后，前述液体试样渗透到色谱试验片1的下端区域，反应结束。
这时，至少将色谱试验片1的表面上，从位于上游侧的指示剂保持部3起直至位于下游侧的特异的蛋白质固定部5的区域用不透过液体的片状材料6以贴紧的状态加以覆盖，借此，可以防止在该测定区域中的水分的蒸发，同时，使渗透到测定区域的液体试样的量均匀化，进而，也可以在一定的时间内使流过测定区域内的液体试样及指示剂的浓度恒定，从而可以准确地进行色谱测定。
此外，通过色谱试验片1的下游侧区域不用不透过液体的片状材料6覆盖，当液体试样渗透到作为该色谱试验片1的下端开放的区域的下端开放部时，水分慢慢蒸发。由于在前述下端开放部中液体试样的蒸发速度比所添加的液体试样向该色谱试验片1的下游侧区域的渗透速度快，所以液体试样不会倒流而干燥。
进而，通过在反应层4上直接添加或涂布液体试样，不设置试样添加部2由于色谱试验片1仅由反应层4的单层多孔质材料构成基本构件，从而可以减少构成色谱测定装置的结构构件的数目。此外，在单层的多孔质材料是由硝化纤维构成的情况下，液体试样的添加量是微量就足够了，所以能够实现被检测体的微量化色谱测定装置。
如上所述，采用第二种实施形式，不必设置试样添加部2，把用单层多孔质材料构成的色谱试验片1的除上游侧及下游侧的流过端部之外的部分的任意表面以贴紧的状态用塑料带等不透过液体的片状材料加以覆盖，在色谱试验片1的下游侧区域不必设置吸收上游的吸水部，可实现减少结构构件、简化试验片的制造工艺、低成本、高灵敏度，高性能的色谱测定装置。
此外，对不设置试样添加部2、在反应层4上直接添加或涂布试样的色谱测定装置进行了说明，而由于反应层4是利用多孔质材料进行制造的，所以在液体试样添加量极微量的情况下就完全可以进行测定。
(第三种实施形式)
下面，利用图5及图6说明在根据前述第一种实施形式的色谱测定装置中，色谱试验片1用不透过液体的片状材料6覆盖的状态。
图5和图6是用于说明利用不透过液体的片状材料6覆盖图1中的色谱测定装置的图示。图5是相对于液体试样的方向分析(下面称之为“色谱方向”)平行地将图1所示的色谱测定装置剖开的剖面图，图6是表示相对于色谱方向垂直地将图1所示的色谱测定装置剖开的剖面图。
同时，对于和前述第一种实施形式所述的色谱测定装置相同的结构部件赋予相同的标号，并省略其说明。
这时，通过将至少在色谱试验片1的表面上、从位于上游侧的指示剂保持部3起直至位于下游侧的特异蛋白质固定部5为止的测定区域的上表面及侧面，用由塑料带等构成的不透过液体的片状材料6以贴紧的状态加以覆盖，防止在测定区域的水分的蒸发，同时，使渗透到测定区域的液体上游的量均匀，进而，可以使在一定的时间内流过测定区域的液体上游及指示剂的浓度成为恒定的，从而可以准确地进行色谱测定。
此外，通过不用不透过液体的片状材料6覆盖色谱试验片1的下游区域，当液体试样渗透到作为该色谱试验片1的下端开放区域的下端开放部时，水分慢慢蒸发。由于在前述下端开放部的液体试样的蒸发速度比添加的液体试样向该色谱试验片1的下游侧区域的渗透速度快，所以液体试样不会倒流。同时，持续将液体试样添加到试样添加部2上，使之与该色谱试验片1的下游侧区域保持水分玻璃的均衡，前述液体试样向色谱试验片1的下游侧区域展开，在反应层4准确地进行反应。
如上所述，采用根据第三种实施形式的色谱测定装置，通过至少将色谱测定装置表面的从位于上游侧的指示剂保持部3直到位于下游侧的特异蛋白质固定部5为止的测定区域的上表面及侧面用由塑料带等构成的不透过液体的片状材料6以贴紧的状态加以覆盖，可以防止该测定区域的水分蒸发，所以在均匀地进行色谱展开，准确地进行色谱测定的同时，在色谱试验片1的下游侧区域不必设置吸收液体试样的吸水部，从而可以实现能够减少结构构件且简化试验片制造工艺、以低的成本达到高灵敏度、高性能的色谱测定装置。
此外，在这种第三种实施形式中，对于用不透过液体的片状材料6覆盖根据前述第一种实施形式的色谱测定装置的状态进行了说明，但用不透过液体的片状材料6将前述第二种实施形式的色谱测定装置的上表面及侧面，也可以获得和第三种实施形式相同的效果。
(第四种实施形式)
下面利用图7和图8说明用不透过液体的片状材料6对前述第一种实施形式和第二种实施形式中的色谱测定装置中的色谱试验片1进行覆盖的状态。
图7和图8是用于说明用不透过液体的片状材料6对图1所示的色谱测定装置的被覆状态的图示。图7是将图1所示的色谱测定装置相对于色谱方向平行剖开的剖面图，图8是将图1所示的色谱测定装置相对色谱方向垂直地剖开的剖面图。此外，对和前述第一种实施形式的色谱测定装置相同的结构部件赋予相同的标号，并省略其说明。
这时，通过用由塑料带等构成的不透过液体的片状材料6在贴紧状态下至少将色谱试验片1的表面的从位于上游侧的指示剂保持部3直至位于下游侧的特异蛋白质固定部5的测定区域的上表面加以覆盖，可以防止在该测定区域中的水分蒸发，同时使渗透到测定区域中的液体试样的量均匀，进而，能够在一定的时间内使流过测定区域的液体试样及指示剂的浓度保持恒定，从而可以准确地进行色谱测定。
同时，通过不用不透过液体的片状材料6覆盖色谱试验片1的下游侧区域，当液体试样渗透到作为该色谱试验片1的下端的开放的区域的下端开放部时，水分会慢慢蒸发。前述下端开放部中的液体试样的蒸发速度比添加的试样向该色谱试验片1的下游侧区域的渗透速度快，所以液体试样不会倒流。此外，在试样添加部2上持续添加液体试样，使之与该色谱试验片1的下游侧区域的水的比例保持均匀，前述液体试样向该色谱试验片1的下游区域展开，在反应层4上准确地进行反应。
进而，如图8所示，由于不透过液体的片状材料6以贴紧的状态仅仅覆盖色谱测定装置的上表面，所以，在制造色谱测定装置时不必将不透过液体的片状材料6卷入到色谱试验片1的背面，同时在把制成的色谱片切割成色谱试验片的大小时，由于色谱片的表面用不透过液体的片状材料6以贴紧的状态覆盖，所以不必担心在切割时构件的剥离。
如上所述，采用这种第四种实施形式的色谱测定装置，通过用由塑料带等不透过液体的片状材料6以贴紧的状态将至少色谱测定装置的表面的、从位于其上游侧的指示剂保持部3直至位于下游侧的特异的蛋白质固定部5的测定区域的上表面加以覆盖，可防止在测定区域中水分的蒸发，所以在进行均匀的展开，准确地进行色谱测定的同时，在色谱试验片1的下游侧区域不必设置吸收液体材料的吸水部，从而可以减少结构构件，简化试验片制造工艺，能够以低成本实现高灵敏度、高性能的色谱测定装置。
此外，在第四种实施吸收中，对于用不透过液体的片状材料6覆盖前述第一种实施形式的色谱测定装置的被覆盖状态进行了说明，但用不透过液体的片状材料6被覆前述第二种实施形式的色谱测定装置的表面，也可以获得和这种第四种实施形式相同的效果。
(第五种实施形式)
下面用图9、图10和图11对根据本发明的第五种实施形式的色谱测定装置进行说明。
图9是表示根据本发明的第五种实施形式的色谱测定装置的图示。此外，图10及图11是用于说明用不透过液体的片状材料覆盖图9所示的色谱测定装置的被覆盖状态的图示，图10是将图9所示的色谱测定装置相对于色谱方向平行地剖开的剖面图，图11是将图9所示的色谱测定装置相对于色谱方向垂直地剖开的剖面图。
此外，由于如图9所示的根据这种第五种实施形式的色谱测定装置，用不透过液体的片状材料6将色谱试验片1的上表面、侧面、及下表面以贴紧的状态加以覆盖，所以，不需要设置支承体7。即，根据这种第五种实施形式的色谱测定装置的结构构件与用图1说明的第一种实施形式所述的色谱测定装置的结构构件相比，其不同之处仅在于不设置支承体7。从而，对于和前述第一种实施形式所述的色谱测定装置相同的结构部件赋予相同的标号，并省略对它们的说明。
下面对利用根据本发明的第五种实施形式的色谱测定装置(参照图9)所进行的色谱测定进行说明。
在图9所示的色谱测定装置中，当把液体试样添加到试样添加部2上时，接着到达指示剂保持部3。然后，保持在该指示剂保持部3上的指示剂由于前述液体的渗透而溶解，与前述液体试样一起渗透到反应层4。在反应层4的区域上，具有特异的蛋白质固定部5，当前述液体试样中含有分析对象物时，固定在特异蛋白质固定部5处的特异蛋白质对分析对象物与指示剂的复合体起化合反应，在特异蛋白质固定部5可以观察到显色反应。另一方面，当前述液体试样中不包含分析对象物时，不引起化合反应，也观察不到显色反应。最后，前述液体试样渗透到色谱试验片的下端区域，反应结束。
这时，通过用由塑料带等构成的不透过液体的片状材料6以贴紧的状态覆盖至少色谱试验片1的表面的从位于上游侧的指示剂保持部3直至位于下游侧的特异蛋白质固定部5的测定区域的上表面、侧面及下表面，防止在该测定区域中的水分蒸发，同时使得渗透到测定区域的液体试样的量均匀，进而能够在一定时间内使流过测定区域的液体试样及指示剂的浓度保持恒定，可以准确地进行色谱测定。
此外，通过不用不透过液体的片状材料6覆盖色谱试验片1的下游侧区域，当试样渗透到作为该色谱试验片1的下端开放的区域的下端开放部时，水分慢慢蒸发。由于在前述下端开放部的液体试样的蒸发速度比所添加的液体试样向色谱试验片1的下游侧渗透的速度快，所以液体试样不会倒流而干燥。同时，向试样添加部2持续添加液体试样，与该色谱试验片1的下游侧区域保持均匀的水分比例，前述液体试样向该色谱试验片1的下游侧区域展开，在反应层4准确地进行反应。
进而，由于不透过液体的片状材料6同时还起着支承体7的作用，可以减少构成色谱测定装置的结构构件数目。
如上所述，采用根据第五种实施形式的色谱测定装置，通过把色谱试验片1的上游侧和下游侧的两个端部以外的部分的任意的表面用由塑料带等构成的不透过液体的片状材料6以贴紧的状态加以覆盖，可以防止在该测定区域的水分蒸发，在可以均匀地进行色谱的展开、准确地进行色谱测定的同时，还不必在色谱试验片1的下游区域设置吸收液体试样的吸水部。进而，通过利用不透过液体的片状材料6以贴紧的状态将色谱试验片1的上表面、侧面及下表面覆盖，不必设置支承体7，所以，可以减少结构构件，同时简化试验片的制作工艺，能够从低成本实现高灵敏度、高性能的色谱测定装置。
此外，在第五种实施形式中，利用根据前述第一种实施形式的色谱测定装置的色谱试验片1的结构进行了说明，但对仅用反应层4单层构成前述第二种实施形式中所说明的基本构件的色谱试验片1，也可以获得与第五种实施形式同样的效果。
(第六种实施形式)
下面，用图12说明根据本发明的第六种实施形式的色谱测定装置。
图12是表示根据本发明第六种实施形式的色谱测定装置的图示。
图12是表示对添加到色谱试验片1上的被检查物质进行定性或定量测定用的色谱测定装置，前述色谱试验片1的色谱上游侧及色谱下游侧的两端区域以外的部分用不透过液体的片状材料6以贴紧的状态加以覆盖。
如图12所示，根据本发明的第六种实施形式的色谱测定装置，只有将不用不透过液体的片状材料6覆盖的色谱下游区域用透气性材料8加以覆盖这一点与用图1所说明的第一种实施形式的色谱测定装置不同。因此，对于和根据前述第一种实施形式的色谱测定装置相同的结构部件，赋予相同的标号，并省略对它们的说明。
透气性材料8，只要是带有细孔的网眼状材料什么样都可以，优选地采用吸水性差的材质。
下面，对利用根据本发明的第六种实施形式的色谱测定装置进行的色谱测定进行说明。
在图12所示的色谱测定装置中，当把液体试样添加到试样添加部2上时，接着到达指示剂保持部3的区域。然后，保持在该指示剂保持部3的区域的指示剂由于前述液体试样的渗透而溶解，与前述液体试样一起渗透到反应层4的区域。在反应层4的区域上，具有特异蛋白质固定部5，在前述液体试样中含有分析对象的情况下，固定在特异蛋白质固定部5上的特异的蛋白质与分析对象物和指示剂的复合体发生化合反应，在特异蛋白质固定部5的区域上观察到显色反应。另一方面，当前述液体试样中不含有分析对象物的情况，不引起化合反应观察不到显色反应。最后，前述液体试样渗透到色谱试验片的下端区域，反应结束。
这时，通过用由塑料带等构成的不透过液体的片状材料6以贴紧的状态覆盖至少从色谱试验片1的表面的位于上游侧的指示剂保持部3直至位于下游侧的特异蛋白质固定部5的测定区域，可防止该测定区域的水分的蒸发，同时使渗透到液体试样的量均匀，进而使得在一定的时间内流过测定区域的液体试样和指示剂的浓度成为恒定的，可进行准确的色谱测定。
此外，不用不透过液体的片状材料6覆盖色谱试验片1的下游区域，通过用透气性材料8覆盖，当液体试样渗透到该色谱试验片1的下端区域时，水分慢慢蒸发。在前述下端区域的液体试样的蒸发速度比添加的液体试样向该色谱试验片1的下游区域的渗透速度快，液体试样不倒流并且干燥。前述透气性材料可以是无纺布等任意的多孔性薄膜材料，这种多孔性薄膜材料由于是多孔性的所以透气性非常好，优选地它是厚度在1mm以下且其本身所具有的吸水性较低的材料。此外前述透气性材料可以是网状组织，这里所说的网状组织指的是利用纤维或树脂成形加工制成的网眼状材料，其本身有没有毛细活性或吸水性都无关紧要。这时的网眼形状只要是多边形可以采取任意形状，优选地网眼是规则排列的，这种网状组织最好是单层的。
同时，在试样添加部2上不断添加液体试样，保持与该色谱试验片1的下游侧区域均匀的水分比例，前述液体试样向该色谱试验片1的下游侧区域展开，在反应层4上准确地进行反应。
进而，如图12所示，由于透气性材料8覆盖色谱下游区域，所以，不仅人能够看到试样添加部2，而且不能用于直接触及下游区域的反应层4，所以，不会有由附着在手上的物质污染反应层4的危险，即不必担心由于污染造成反应层4的吸水性恶化也不必担心液体试样附着在手上，可以进行安全而卫生的测定。
如上所述，采用根据第六种实施形式的色谱测定装置，通过用由塑料带等构成的不透过液体的片状材料6以贴紧的状态将至少从色谱测定装置表面的从位于上游侧的指示剂保持部3直到位于下游侧的特异蛋白质固定部5的测定区域覆盖，可以防止该测定区域的水分的蒸发，所以均匀地进行色谱展开，准确地进行色谱测定。进而，通过用透气性材料8覆盖色谱试验片1的下游侧区域，不但能促进水分蒸发，而且容易观察到试样添加部2，并能够防止由于污染物质造成的反应层的吸水性恶化。借此，液体试样不会附着在手上，从而能够实现可以更安全而卫生的使用的、低成本、高灵敏度、高性能的色谱测定装置。
此外，上面说明了在本发明的色谱测定装置中，用透气性材料8覆盖下游区域的情况，但是也可以采用把由前述第三至第五实施形式中所说明的下游区域的上表面及侧面用透气性材料8覆盖以及用透气性材料8仅覆盖表面，或者用透气性材料8覆盖上表面、侧面及下表面等，透气性材料8存在于下游区域的任何一种形式。
此外，在第六种实施形式中，用前述第一种实施例的色谱测定装置的色谱试验片1的结构进行了说明，但对于仅由反应层4单层构成前述第二种实施形式中所说明的基本构件的色谱试验片1，也可以获得和第六种实施形式相同的效果。
(第七种实施形式)
下面用图13、图14、图15、图16、图17、图18说明根据本发明的第七种实施形式的色谱测定装置。
图13、图16、图17是表示本发明的第七种实施形式的色谱测定装置的图示，图14和图15是向色谱方向下游观察时所看到的相对于色谱方向沿垂直方向将图13所示的色谱测定装置剖开的剖面图。此外，图18是将图16所示的色谱测定装置相对于色谱方向平行地剖开的剖面图。
图13、图16、图17是将添加到色谱试验片1上的被检查物质进行定性或定量测定用的色谱测定装置，前述色谱试验片1的色谱上游侧与色谱下游侧的两端区域以外的部分用不透过液体的片状材料6以贴紧的状态加以覆盖。
如图13、图16、图17所示，根据本发明的第七种实施形式的色谱测定装置与用图1说明的根据第一实施形式的色谱测定装置的不同之处仅在于，不用不透过液体的片状材料6覆盖的色谱下游区域用空间形成材料9覆盖。因此，对于和前述第一种实施形式的色谱测定装置相同的结构部件赋予相同的标号，省略对它们的说明。
空间形成材料9是任意的不透过液体的材料，可以是透明的或半透明的或不透明的任何一种状态，但优选地是在反应层4上形成空间具有尽可能大的保持强度的材料。这时，空间形成材料9，如图18所示，以层叠在不透过液体的片状材料6的端部上的方式形成，或者，图中没有示出，也可以连接到不透过液体的片状材料6上的方式形成。
空间形成部11是由空间形成材料9形成的空间，与反应层4之间具有任意间隔，优选地处于可流入空气的状态。
间隙部10如图13所示配置在色谱下游的末端，或者如图16所示配置在色谱的平行侧面或者如图17所示，配置在空间形成部11的表面上等，可以配置在空间形成材料9的任意部位，也可以配备有任意数量。此外，这里所示的间隙部，可以是一个或一个以上的任意数目，不会存在问题。
下面对用根据本发明的第七种实施形式的色谱测定装置进行的色谱测定加以说明。
在图13、图16、图17所示的色谱测定装置中，当把液体试样添加到试样添加部2上时，接着到达指示剂保持部3的区域。然后，保持在该指示剂保持部3的区域上的指示剂由于前述液体试样的渗透而溶解，与前述液体试样一起渗透到反应层4的区域。在反应层4的区域上，具有特异蛋白质固定部5，在前述液体试样中含有分析对象物时，固定在特异蛋白质固定部5上的特异蛋白质与分析对象和指示剂的复合体进行化合反应，在特异蛋白质固定部5的区域上可观察到显色反应。另一方面，当前述液体试样中不含有分析对象物时，不起化合反应，也观察不到显色反应。最后，前述液体试样渗透到色谱试验片的下端区域，反应结束。
这时，通过用由塑料带等构成的不透过液体的片状材料从位于上游侧材料6以贴紧的状态将至少色谱试验片1的表面从位于上游侧的指示剂保持部3直到位于下游侧的特异蛋白质固定部5的测定区域加以覆盖，防止在该测定区域的水分蒸发，同时，使渗透到测定区域的液体试样的量均匀，进而，在一定的时间内能够使流过测定区域的液体试样和指示剂的浓度成为恒定的，可以准确地进行色谱测定。
此外，色谱试验片1的下游区域不用不透过液体的片状材料6覆盖，用空间形成材料9覆盖，当液体试样渗透到该色谱试验片1的下端区域时，水分慢慢蒸发。透过使空间形成材料9上具有间隙部10，使位于前述下端区域的液体试样的蒸发速度比添加的液体试样向色谱试验片1的下游区域的渗透速度快，所以液体试样不会倒流而干燥。此外，向试样添加部2持续添加液体试样，均匀地保持与该色谱试验片1的下游侧区域的水分比例，前述液体试样向该色谱试验片1的下游侧区域展开，在反应层4上准确地进行反应。
进而，如图13、图16、图17所示由于空间形成材料9覆盖色谱下游区域，所以，不仅人眼可以看到试样添加部2，而且不能直接用手触及下游区域的反应层4。因此，没有用附着在手上的物质污染反应层4的危险，不必担心因污染造成反应层4吸水性恶化，而且也不必怕液体试样附着在手上，可以安全且卫生地测定。
如上所述，采用根据第七种实施形式的色谱测定装置，通过用由塑料带等不透过液体的片状材料6以贴紧的状态至少覆盖从色谱测定装置表面的位于其上游侧的指示剂部起直至位于下游侧的特异蛋白质固定部5的测定区域，可以防止在该测定区域中的水分的蒸发，所以，色谱均匀展开，准确地进行色谱测定。进而，通过用空间形成材料9覆盖色谱试验片1的下游侧区域，不仅促进水分的蒸发，而且容易观察到试样添加部，同时可以防止污染物质造成的反应层的吸水性恶化。借此，液体试样不会附着在手上，可以实现更安全且卫生地使用的、低成本、高灵敏度、高性能的色谱测定装置。
此外，对于在本发明的色谱测定装置中，空间形成材料9覆盖下游区域的情况进行了说明，但具体地说，如图14所示，也可以在反应层4的表面上形成空间形成材料9。此外，可以采用如图15所示的在色谱测定装置的上表面及侧面形成空间形成材料9，或者图中没有示出，在上表面、侧面及下表面形成空间形成材料9等，空间形成材料9存在于下游区域上的任何一种形式。
此外，在第七种实施形式中，利用根据前述第一种实施形式的色谱测定装置的色谱试验片1的结构进行了说明，但对于在前述第二种实施形式中所说明的仅由反应层4单层构成基本构件的色谱试验片1而言，也可以获得和第七种实施形式同样的效果。
此外，本发明的色谱测定装置，其试验片也可以是干式分析部件，这里所说的干式分析部件是指构成试验片的试样添加部、反应层、吸水部等构件全部处于干燥状态，同时在这些构件载置或固定的试样试剂及特异蛋白质等试剂类也是干燥状态构成的试验片。通过将这种试验片制成干燥状态，可以把蛋白质的变性抑制到最低限度，可长期保存。
此外，本发明的色谱测定装置，也可以是具有单步试验片的装置。这里所说的单步，是指在其测定操作中，不必对试样溶液进行前处理，只要把试样溶液滴在试验片上，滴上之后，利用展开溶液将试样溶液展开，不必进行清洗操作等操作，从而可以很方便地进行测定。
实施例
借助下面的实施例，更详细地说明实施本发明的方法。此外，本发明不受下面的实施例的任何约束。
(尿中hCG的定性)
制造在硝化纤维膜中含有抗hCG-β抗体固定线及抗hCG-α抗体与金胶体的复合体的宽度的免疫色谱测定装置。这种色谱测定装置示于图1。图中，色谱测定装置包含有固定抗体的特异蛋白质固定部5，位于其前方的作为含有抗hCG-α抗体与金胶体的复合体的区域的指示剂保持部3，试样添加部2。
这些色谱测定装置按如下方式制造。
a)色谱测定装置的调制
准备用磷酸缓冲溶液稀释进行过浓度调整的抗hCG-β抗体溶液。用溶液排出装置将这种抗体溶液涂布到硝化纤维膜上，借此，获得在膜上的检测用抗体固定线。在该膜干燥后，将其浸渍在含有1％脱脂牛奶的Tris-HCl缓冲溶液中30分钟并缓慢的摇动。30分钟后，在Tris-HCl缓冲溶液槽中移动膜，在缓慢摇动10分钟后，利用另外的Tris-HCl缓冲溶液槽进一步缓慢摇动10分钟，对膜进行清洗。在进行两次清洗后，将膜从槽中取出，在室温下使之干燥。
金胶体通过在0.01％氯金酸回流中的100℃的溶液中加入1％的柠檬酸进行调制。在回流持续30分钟后，在室温下放置进行冷却。在利用0.2M的碳酸钾溶液调制到PH9的前述金胶体溶液中，加入抗CG-α抗体搅拌数分钟后，加入PH9的10％ BSA(牛血清血蛋白/アルブシン)，最后使一总量达到1％，通过搅拌调制成抗体-金胶体复合体(指示抗体)。通过将前述指示抗体在4℃以2000G进行50分钟的离心分离，将指示抗体分离出来，将其在清洗缓冲液(1％ BSA、磷酸缓冲液)中悬浊之后，再次进行离心分离，对指示抗体进行清洗分离。将这种指示抗体在清洗缓冲液中悬浊，用0.8μm的过滤器过滤后，调制成当初的金胶体溶液量的十分之一，在4℃下保存。
将前述指示抗体溶液置于溶液排出装置上，在涂布在离开抗hCG-β抗体固定干燥膜上的抗体固定位置的位置上之后，将膜干燥。借此，获得在抗体固定膜上具有指示抗体保持部3的色谱试验片1。
然后，在把该色谱试验片1粘贴在支承体7上之后，在色谱试验片1的距离上游的端部1.5cm的位置直到距离下游端部1.0cm的位置上，用透明带(日东电工制)以贴紧的状态覆盖在反应层表面上，获得色谱测定装置。
b)试样的调制
准备不含有hCG的男性人尿。通过该尿中加入一定浓度的hCG溶液，调制各种已知浓度的hCG溶液。
c)在色谱测定装置显色程度的测定
在色谱测定装置上的试样添加部上添加含有hCG的40μl左右的尿，向色谱试验片1的下游侧进行展开处理，使之进行抗原抗体反应，进行在抗体固定部上的显色反应。目视观察在向该测定装置上添加试样5分钟后的显色情况。
结果是，试样的色谱展开不会倒流，顺利地展开，可以确认伴随着hCG的存在的显色反应。
此外，在本实施例中，采用金胶体作为指示剂，但如果是能够显色的指示试剂，可以使用任何一种指示剂。
同时，本实施例中的色谱测定装置如上所述，采用将像硝化纤维这种任意的多孔质材料层叠或连接构成的试验片。由这种材料构成的试验片，例如可以利用抗原抗体反应这类的任意测定原理，定性或定量地分析检测出某种特定物质。
工业上的可利用性
如上所述，根据本发明的色谱测定装置，在色谱均匀地进行展开、准确地进行色谱测定的同时，可以减少结构构件的数目，能够高灵敏度、高性能地测定水溶液、尿、血液等液体试样，所以适合用于尿检查及妊娠检查、水质检查、大便检查、土壤分析、食品分析等。
Claims (17)
1.一种色谱测定装置，具有作为进行色谱测定用试验片的色谱试验片、对添加到该色谱试验片上的被检查物质进行定性或定量测定，其特征为，
前述色谱试验片的除色谱上游侧及色谱下游侧的两端区域以外的部分用不透过液体的片状材料以贴紧的状态加以覆盖。
2.如权利要求1所述的色谱测定装置，其特征为，
前述色谱试验片的除色谱上游侧及色谱下游侧的两端区域以外的上表面用不透过液体的片状材料以贴紧的状态加以覆盖。
3.如权利要求1所述的色谱测定装置，其特征为，
前述色谱试验片的除色谱上游侧及色谱下游侧的两端区域以外的上表面和侧面用不透过液体的片状材料以贴紧的状态加以覆盖。
4.如权利要求1所述的色谱测定装置，其特征为，
前述色谱试验片的除色谱上游侧及色谱下游侧的两端区域以外的上表面、侧面和下表面用不透过液体的片状材料以贴紧的状态加以覆盖。
5.如权利要求1至权利要求4的任一项所述的色谱测定装置，其特征为，
至少，将从前述试验片的位于色谱上游侧的保持指示剂的指示剂保持部直到位于色谱下游侧的固定特异蛋白质的特异蛋白质固定部的测定区域用不透过液体的片状材料以贴紧的状态加以覆盖。
6.如权利要求1至权利要求5的任一项所述的色谱测定装置，其特征为，
前述色谱试验片由把多个多孔质材料层叠或连接构成。
7.如权利要求1至权利要求5中的任一项所述的色谱层叠装置，其特征为，
前述色谱试验片由单层多孔质材料构成。
8.如权利要求7所述的色谱测定装置，其特征为，
前述单层多孔质材料为硝化纤维。
9.如权利要求1至权利要求8的任一项所述的色谱测定装置，其特征为，
在未用不透过液体的覆盖的色谱下游区域用透气性材料加以覆盖。
10.如权利要求9所述的色谱测定装置，其特征为，
前述透气性材料为无纺布的任意的多孔质薄膜材料。
11.如权利要求9所述的色谱测定装置，其特征为，
前述透气性材料为网状组织。
12.如权利要求1至权利要求8的任一项所述的色谱测定装置，其特征为，
未用不透过液体的材料覆盖的色谱下游区域上配备有形成任意空间的空间形成部。
13.如权利要求12所述的色谱测定装置，其特征为，
在前述空间形成部的色谱下游区域的端部或平行侧面或空间形成部上表面的任意部位上，备有空气可以流入的间隙部。
14.如权利要求12或权利要求13所述的色谱测定装置，其特征为，
前述空间形成部用不透过液体材料形成。
15.如权利要求1至权利要求14的任一项所述的色谱测定装置，其特征为，
前述色谱试验片为利用抗原抗体的免疫色谱试验片。
16.如权利要求1至权利要求15的任一项所述的色谱测定装置，其特征为，
前述色谱试验片为干式分析部件。
17.如权利要求1至权利要求16的任一项所述的色谱测定装置，其特征为，
前述色谱试验片为单步试验片。
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