CN1332683C - 一种治疗乳腺囊性增生的药物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种治疗乳腺囊性增生的药物及其制备方法，其中药组方由含有下列重量份数比的原料制成的：柴胡，0.8-1.2；赤芍，1.8-2.2；夏枯草，2.2-2.6；牡蛎，2.2-2.6；当归，1.8-2.2；田三七，1.8-2.2；党参，1.4-1.8。为了使本发明的药物配伍更加完善，所述原料中还含有下列重量份数比的成分：青皮，0.8-1.2；橘核，1.4-1.8；荠菜，1.4-1.8；漏芦，1.4-1.8；鬼箭羽，1.0-1.4；王不留行，1.4-1.8。本发明药物既能解郁散结，又能调经活血止痛，经临床试验观察，治疗乳腺囊性增生有显著效果的为52.8%，总有效率达93.5%，并无毒副作用。

Description

一种治疗乳腺囊性增生的药物及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种中药及其制备方法，特别是涉及一种治疗乳腺囊性增生的药物及其制备方法。

背景技术

乳腺囊性增生(Hyperplastic disease of breart HDB)是一种既非炎症也非肿瘤的增生性乳腺疾病，属中医“乳癖”、“乳中结核”范畴，是中青年妇女的常见、多发病，其发病率约占育龄妇女的40％，居妇女乳腺疾病的首位，约占其中的60％～70％。乳腺囊性增生病的主要表现为乳房胀痛和乳房结块，并有随月经周期或情志改变而变化的特点，严重危害中青年妇女的身心健康，且具有增加患乳腺癌的危险性。乳腺囊性增生病多由于忧郁忿怒，则肝气郁结，气血运行失常，或思虑伤脾，或肝病犯脾，脾失健运，痰湿内蕴，以致气滞、血瘀、痰凝互结于乳而成。肝气郁结是本病的发病关键，因此，舒肝理气是阻断本病发生、发展的主要环节。目前，治疗乳腺囊性增生病的药物，西医多用性激素，包括抗激素药物三苯氧胺、雄激素类药物和催乳素药物，但是这些药物存在副作用大、服药周期长、不宜常规使用等缺点。西医治疗乳腺囊性增生病还采用手术方法，但由于众所周知的原因手术不易被患者接受。目前，治疗乳腺囊性增生病的中药，包括天冬素片、消核片、乳癖消片、乳块消片、乳康片、乳宁片、乳增宁片、乳核散结片、乳疾灵颗粒、逍遥丸、小金丹等，常用中成药是乳癖消片、乳块消片、乳核散结片、乳核散结片等，它们虽然在临床具有一定效果，但目前还不能满足治疗需要，不能从调经活血止痛入手，对乳腺囊性增生病肝郁血瘀和冲任气血受损等起到疗效。因此，在临床药物中需要研制开发一种既能解郁散结，又能调经活血止痛的治疗乳腺囊性增生病的中药新药。

发明内容

本发明的目的是提供一种既能解郁散结，又能调经活血止痛的治疗乳腺囊性增生的药物及其制备方法。

本发明所提供的治疗乳腺囊性增生的药物，是由含有下列重量份数比的原料制成的：

柴胡      0.8-1.2    赤芍    1.8-2.2

夏枯草    2.2-2.6    牡蛎    2.2-2.6

当归    1.8-2.2    田三七    1.8-2.2

党参    1.4-1.8。

为了使本发明的药物配伍更加完善，所述原料中还含有下列重量份数比的成分：

青皮    0.8-1.2    橘核    1.4-1.8

荠菜    1.4-1.8    漏芦    1.4-1.8

鬼箭羽  1.0-1.4。

在此基础上，为了进一步完善本发明药物的配伍，所述原料中还含有重量份数比为1.4-1.8份的王不留行。

本发明优选的原料配方是：

柴胡    1      赤芍    2

夏枯草  2.4    牡蛎    2.4

当归    2      田三七  2

党参    1.6    青皮    1

橘核    1.6    荠菜    1.6

漏芦    1.6    鬼箭羽  1.2

王不留行1.6。

本发明所提供的生产治疗乳腺囊性增生的药物的方法，包括以下步骤：

1)称取下列重量份数比的原料：

柴胡        0.8-1.2    赤芍    1.8-2.2

夏枯草      2.2-2.6    牡蛎    2.2-2.6

当归        1.8-2.2    田三七  1.8-2.2

党参        1.4-1.8    青皮    0.8-1.2

橘核        1.4-1.8    荠菜    1.4-1.8

漏芦        1.4-1.8    鬼箭羽  1.0-1.4

王不留行    1.4-1.8

2)将柴胡、当归、漏芦和青皮粉碎成粗粉，加入到4-8倍于所述粗粉重量的水中蒸馏3-7小时，获得挥发油；

3)用6-8倍于挥发油重量的β-CD(β-环糊精)、变性淀粉、环糊精、甲基环糊精、羟丙基环糊精、羟乙基环糊精、环糊精聚合物或支链环糊精及淀粉在环状糊精糖基转移酶作用下水解得到的环糊精衍生物，对挥发油进行包合，获得包合物备用，药渣备用；

4)将王不留行炒制；将田三七和炒制后的王不留行粉碎成粗粉，加入到浓度为60-80％的乙醇中加热回流，得到乙醇提取液，将提取液减压浓缩，得到醇清膏备用，药渣备用；

5)将牡蛎加入到6-10倍于牡蛎重量的水中浸泡后煎煮1-1.5小时；

6)将赤芍、夏枯草、党参、橘核、荠菜和鬼箭羽加入到10-14倍于该步总药物重量的水中，并与第5)步得到的煎煮液一同进行煎煮，然后再将步骤4)乙醇提取后的药渣及步骤3)挥发油包合后的药渣加入到所得煎煮液中进行共同煎煮；

7)过滤煎煮液然后进行离心，将离心液减压浓缩得到清膏；

8)将清膏与醇清膏合并，然后真空干燥或喷雾干燥获得干粉；

9)将干粉和包合物混匀，得到本发明的药物。

在上述过程中，所述步骤3)中包合的温度为30-50℃，包合时间2-4小时；所述步骤4)中加热回流的次数为2次，第一次乙醇重量为本步骤所述中药总量的4-8倍，回流提取1-3小时，第二次乙醇重量为本步骤所述中药总量的3-7倍，回流提取0.5-2.5小时，然后合并2次乙醇提取液，提取液减压浓缩后得到的醇清膏的相对密度为1.10；所述步骤6)中将乙醇提取后的药渣及挥发油包合后的药渣加入到所得煎煮液中进行共同煎煮时，需加入8-12倍赤芍、夏枯草、党参、橘核、荠菜和鬼箭羽总量的水；所述步骤7)得到的清膏的相对密度为1.10。所述喷雾干燥的进风温度为180～190℃，出口温度为80～90℃，进口负压为11-13Kpa，出口负压为11-13Kpa；所述低温干燥的温度为60～80℃。

为了便于造粒，所述步骤9)中将干粉和包合物混匀前，还要加入所述干粉质量百分比3-7％的低取代羟丙基纤维素及微晶纤维素。当将药物制成片剂时，所述混合物用70-90％乙醇制成颗粒，过14～16目筛，压制成片。药片用包薄膜衣。

本发明治疗乳腺囊性增生的药物，临床命名为柴芍乳核消片，其药物组方中，柴胡、赤芍为君药，柴胡的主要成分对中枢神经系统有明显解热、镇静、镇痛作用，并具有消炎止痛功效，还具有抑制肾上腺素和ACTH诱导的脂库中脂肪分解作用，也具有抑制胰岛素促进脂肪生成的作用；赤芍的主要成分具有显著的镇静、镇痛作用，还有显著的抗病原微生物作用。本发明药物组方中夏枯草、牡蛎、当归、田三七、党参为臣药，夏枯草的主要成分具有抑制中枢、抗菌、抗炎及降酶作用；当归挥发油和水煎液具有镇静、催眠、镇痛作用；牡蛎水溶性提取物具有提高机体细胞免疫功能的作用；田三七的主要成分具有抗炎、镇静、镇痛作用。本发明药物组方中青皮、橘核、荠菜、漏芦、鬼箭羽为佐药，漏芦水提物能减少体内的过氧化脂质，具有清除提内自由基作用。本发明药物组方中王不留行为佐使，王不留行醇提液具有雌性激素样作用。实验表明，只由君药和臣药组成的本发明药物和由君、臣、佐、使共同组成的本发明的药物相比，虽然效果有差别，但并不显著，足以实现本发明的目的。

本发明的药物可以制成片剂、胶囊剂、颗粒剂、粉剂、粒剂、口服液、注射液等多种药物形式，但以片剂为优选。上述各种剂型的药物均可以按照药学领域的常规方法制备。需要的时候，还可以加入一种或多种药学上可接受的辅料，所述辅料包括药学领域常规的稀释剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、湿润剂、吸收促进剂、表面活性剂、润滑剂、稳定剂等，必要时还可加入香味剂、甜味剂及色素等。

通过动物实验，对柴芍乳核消片的治疗作用、镇痛作用和抗炎作用的研究结果表明，柴芍乳核消片能增加乳腺增生大鼠体重，增加脾脏系数和降低子宫系数，能抑制雌激素引起的乳房肿大，能降低乳腺增生大鼠血清雌二醇含量，升高孕酮含量和促卵泡激素含量，调节血液中雌孕激素的相对平衡，能改善乳腺增生大鼠血液流变性，具有活血化瘀的作用，能降低乳腺增生大鼠乳腺小叶数、腺泡数、腺泡腔直径、导管直径以及胞浆面积，改善乳腺结构。柴芍乳核消片能明显降低气滞血瘀模型大鼠血液流变学各项指标，具有行气活血的功效，能增加小鼠痛阈，降低小鼠扭体反应数，具有明显的镇痛作用。能抑制小鼠二甲苯所致小鼠耳肿胀和醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性增高，具有明显的抗炎消肿作用。急性毒性试验结果表明，按体重折算相当于70Kg成人临床用量的334倍给药，连续观察7天，试验动物未见异常反应；长期毒性试验结果表明，按体重折算相当于70Kg成人临床用量的7.4倍、21.6倍、62.8倍给药，连续观察26周，试验动物未见异常反应。急性和长期毒性试验结果表明，柴芍乳核消片无毒副作用，具有临床应用的安全性。经280例临床试验观察，显效为52.8％，总有效率达93.5％，明显优于对照组乳癖消片的疗效，并未见毒副作用。

本发明由于采取以上技术方案，其具有以下优点：1、本发明药物配方针对郁瘀痰的病理用药，行气活血并重，化痰为次，注重调经活血止痛，重点突出。2、本发明药物配方既以柴胡、青皮、橘核、行气止痛，又用赤芍、当归、田三七、鬼箭羽活血定痛，镇痛效果好；用青皮、橘核行气散结，夏枯草、荠菜、漏芦清热散结，牡蛎软坚散结，配以活血化瘀药活血软坚散结，散结消块作用强。3、本发明药物配方在大量行气药中配以党参健脾益气、生津养血，使行气而不耗气。选用赤芍、鬼箭羽、王不留行活血化瘀的同时，用当归、田三七活血养血、化瘀止血，使活血而不伤血。

具体实施方式

实施例1、本发明治疗乳腺囊性增生药物的制备

治疗乳腺囊性增生的药物，其中药组方如下：柴胡125g、赤芍250g、夏枯草300g、牡蛎300g、当归250g、田三七250g、党参200g、青皮125g、橘核200g、荠菜200g、漏芦200g、鬼箭羽150g、王不留行200g。

制备治疗乳腺囊性增生药物的方法，包括以下具体步骤：

1)称取上述组方中的组分，并进行常规性前处理；

2)将柴胡、当归、漏芦和青皮粉碎成粗粉，然后将其加入到6倍于柴胡、当归、漏芦和青皮总重量的水中蒸馏5小时，获得挥发油约1.2g；

3)用8倍于挥发油重量的β-CD环糊精(或甲基环糊精、羟丙基环糊精、羟乙基环糊精、环糊精聚合物、支链环糊精，以及淀粉在环状糊精糖基转移酶作用下水解得到的环糊精衍生物中的任一种)，对挥发油进行包合，包合温度为40℃，包合时间3小时，获得包合物10.8g备用，药渣及药液备用；

4)将王不留行按常规方法进行炒制；将田三七和炒制后的王不留行粉碎成粗粉，然后将其加入到70％的乙醇中加热回流2次，第一次乙醇重量为田三七和王不留行总重量的6倍，回流提取2小时，第二次乙醇重量为田三七和王不留行总重量的5倍，回流提取1.5小时，然后合并2次乙醇提取液，再将提取液减压浓缩至相对密度为1.10的醇清膏备用，药渣备用；

5)将牡蛎过60目，然后将其加入到8倍于牡蛎重量的水中浸泡0.5小时，再煎煮0.5小时，然后将赤芍、夏枯草、党参、橘核、荠菜和鬼箭羽，加入到煎煮液中进行2次煎煮，第一次加12倍于赤芍、夏枯草、党参、橘核、荠菜和鬼箭羽重量之和的水，煎煮2.0小时，第二次煎煮前，先将乙醇提取后的药渣及挥发油β-CD包合后的药渣加入到煎煮液中，再加入10倍于赤芍、夏枯草、党参、橘核、荠菜和鬼箭羽重量之和的水，煎煮1.5小时；

6)将过滤煎煮液离心(16000rpm)，离心液减压浓缩至相对密度为1.10的清膏；

7)将清膏与醇清膏合并后，对其进行喷雾干燥，干燥时进风温度为180～190℃，出口温度为80～90℃，进口负压12Kpa，出口负压12Kpa，干燥后获得干粉约465g；

8)将465g干粉和23g低取代羟丙基纤维素及23g微晶纤素混合均匀，再加入上述步骤3)制备的包合物10.8g，然后用80％乙醇制成颗粒，过12目筛，经60～80℃低温干燥，过14～16目筛，得到整粒，混匀压片；

9)将混匀压片后的药片包薄膜衣，即制成1000片异型片。临床实验时将此治疗乳腺囊性增生的药物命名为柴芍乳核消片。

在该实施例中，为了验证只由君、臣成分组成的药物的效果，制备了实验用君、臣药物片剂，其制备方法同上，只是原料中没有青皮、橘核、荠菜、漏芦、鬼箭羽和王不留行。

实施例2、本发明治疗乳腺囊性增生的药物对苯甲酸雌二醇乳腺增生模型大鼠影响的实验

采用实施例1制备的治疗乳腺囊性增生的药物(临床实验命名为柴芍乳核消片)，对苯甲酸雌二醇乳腺增生模型大鼠进行动物实验，通过对照实验，考察本发明药物对乳腺增生大鼠的治疗作用。具体实验过程如下：

取SD大鼠60只，雌性，体重199.2±11.9g，随机分为6个实验组，包括正常对照组，模型对照组，施用柴芍乳核消片三组剂量分别为2.97g/Kg、5.94g/Kg、11.88g/Kg的三个组，乳癖消片组施用剂量为1.04g/Kg组，每组实验大鼠各10只。

正常对照组大鼠肌肉注射生理盐水0.1ml/只，每天一次，连续30天；其他各组肌肉注射苯甲酸雌二醇0.5mg/Kg，每天一次，连续25天，随后肌肉注射黄体酮4mg/Kg，每天一次，连续5天。

从造模第一天起，施用柴芍乳核消片的低、中、高剂量组和施用乳癖消片组灌胃相应浓度药液10ml/Kg；正常对照组和模型对照组灌胃等体积蒸馏水，每天一次，连续33天。

末次给药后一小时，腹腔注射(ip)戊巴比妥钠30mg/Kg麻醉，取下受试大鼠第二对、第三对乳房，取其脾脏、子宫、卵巢等脏器，在其腹主动脉取血，进行有关检测。检测采用常规方法进行。

本实施例的实验结果如下：

(1)对大鼠体重的影响：结果见表1。

表1  柴芍乳核消片对乳腺增生大鼠体重的影响

组别	动物数(只)	剂量(/Kg)	体重(g)
					给药前	给药后
			正常对照组	10			10ml	198.9±12.4※	232.8±14.2※※
模型对照组	10	10ml			197.8±11.1	215.8±16.9
			柴芍乳核消片(低)组	10			2.97g	198.7±11.7※	219.1±16.3※
柴芍乳核消片(中)组	10	5.94g			199.7±12.0※	228.1±18.3※
			柴芍乳核消片(高)组	10			11.88g	199.5±13.5※	234.8±18.2※※

乳癖消片组

10

1.04g

200.7±13.7※

223.2±15.1※

(与模型对照组比较，^※P＞0.05，^※※P＜0.05。)

由表1可见，实验后期正常动物体重明显增加，乳腺增生模型组动物体重增长缓慢(与正常组比较，P＜0.05)，柴芍乳核消片各剂量组体重较模型组有不同程度的增加，高剂量组与模型组比较，差异有统计学意义。

(2)对大鼠脏器系数的影响：结果见表2。

表2  柴芍乳核消片对乳腺增生大鼠脏器系数的影响

组别	剂量(/Kg)	脏器系数(g/100g)
					脾脏	子宫	卵巢
		正常对照组	10ml	0.267±0.049※※※				0.193±0.069※※※	0.057±0.007※
模型对照组	10ml				0.202±0.031	0.306±0.092	0.054±0.010
		柴芍乳核消片低剂量组	2.97g	0.212±0.041※				0.238±0.063※	0.054±0.013※
柴芍乳核消片中剂量组	5.94g				0.223±0.037※	0.215±0.035※※	0.051±0.007※
		柴芍乳核消片高剂量组	11.88g	0.241±0.042※※				0.212±0.031※※※	0.052±0.008※
乳癖消片组	1.04g				0.215±0.024※	0.226±0.055※※	0.058±0.011※

(与模型对照组比较，^※P＞0.05，^※※P＜0.05，^※※※P＜0.01。)

由表2可见，与正常对照组比较，模型组动物脾脏系数明显减少，子宫系数明显增加；与模型组比较，柴芍乳核消片高剂量组脾脏系数明显增加，子宫系数明显减少，表明柴芍乳核消片对雌激素引起的大鼠脾脏萎缩、子宫肿大有一定的对抗作用。

(3)对大鼠乳房直径和乳头高度的影响：结果见表3。

表3柴芍乳核消片对乳腺增生大鼠乳房直径和乳头高度的影响(n＝10，

)

组别	剂量(/Kg)	乳房直径(mm)			乳头高度(mm)
								给药前	给药后	差值	给药前	给药后	差值
		正常对照组	10ml	0.99±0.09※	1.03±0.08※※※	0.03±0.02※※※	1.71±0.13※							1.75±0.14※※※	0.04±0.22※※※
模型对照组	10ml							1.01±0.08	1.96±0.18	0.95±0.15	1.72±0.11	2.08±0.21	0.36±0.17

柴芍乳核消片低剂量组	2.97g	1.02±0.11※	1.87±0.11※	0.85±0.07※	1.68±0.08	1.96±0.16※	0.29±0.11※
								柴芍乳核消片中剂量组	5.94g	0.97±0.10※	1.73±0.22※※	0.75±0.14※※※	1.69±0.10※	1.88±0.17※※	0.19±0.15※※
柴芍乳核消片高剂量组	11.88g	0.97±0.09※	1.69±0.25※※	0.72±0.21※※	1.69±0.12※	1.85±0.18※※	0.17±0.11※※※
								乳癖消片组	1.04g	1.03±0.10※	1.75±0.24※※	0.73±0.23※※	1.68±0.12※	1.87±0.17※※	0.20±0.09※※

(与模型对照组比较，^※P＞0.05，^※※P＜0.05，^※※※P＜0.01。)

由表3可见，动物注射雌激素后乳房明显肿大，表现为乳房直径和乳头高度均较正常组显著增加，柴芍乳核消片能抑制雌激素引起的乳房肿大，中、高剂量组乳房直径和乳头高度明显减少。

(4)对大鼠性激素水平的影响：结果见表4。

表4柴芍乳核消片对乳腺增生大鼠性激素的影响(n＝10，

)

组别	剂量(/Kg)	E2(pg/ml)	P(ng/ml)	FSH(mIU/ml)	LH(mIU/ml)
						正常对照组	10ml	4.76±7.61※※※	7.58±6.28※※※	1.45±0.54※※	3.36±0.60※
模型对照组	10ml	24.27±13.37	2.03±0.64	0.97±0.32	3.16±0.40
						柴芍乳核消片低剂量组	2.97g	19.92±14.99※	2.30±0.48※	1.58±0.44※※※	3.24±0.27※
柴芍乳核消片中剂量组	5.94g	12.03±18.23※	2.52±1.32※	1.61±0.49※※※	3.24±0.39※
						柴芍乳核消片高剂量组	11.88g	7.15±3.09※※※	3.40±1.61※※	1.58±0.37※※※	3.46±0.27※
乳癖消片组	1.04g	19.49±16.51※	2.41±0.96※	1.64±0.46※※※	3.33±0.48※

(与模型对照组比较，^※P＞0.05，^※※P＜0.05，^※※※P＜0.01。)

由表4可见，与正常组相比，乳腺增生模型组动物血清雌二醇(E²)含量显著增加，孕酮(P)和促卵泡激素(FSH)含量显著降低，经柴芍乳核消片和乳癖消片治疗后，促卵泡激素含量均明显增高，柴芍乳核消片高剂量还能使雌二醇含量明显降低、孕酮含量明显升高；实验中各组促黄体生成素(LH)水平与模型组比较无明显差异。

(5)对大鼠血液流变性的影响：结果见表5。

表5  柴芍乳核消片对乳腺增生大鼠血液流变的影响(n＝10，

)

组别	剂量(/Kg)	全血比粘度		血浆比粘度	红细胞压积(％)
						9.6S-1	192S-1
		正常对照组	10ml					11.12±2.25※※※	5.53±0.92※※	1.57±0.09※※	36.68±1.82※※
模型对照组	10ml			15.19±3.63	6.71±1.44	1.69±0.15	39.41±3.15
		柴芍乳核消片低剂量组	2.97g					13.55±3.17※	6.32±1.50※	1.66±0.11※	38.37±1.33※
柴芍乳核消片中剂量组	5.94g			11.68±2.91※※	6.19±1.26※	1.59±0.12※	37.94±1.62※
		柴芍乳核消片高剂量组	11.88g					11.48±2.58※※	5.81±1.30※	1.55±0.10※※	36.15±1.90※※
乳癖消片组	1.04g			12.72±2.37※	5.97±1.11※	1.61±0.11※	37.02±1.63※※

(与模型对照组比较，^※P＞0.05，^※※P＜0.05，^※※P＜0.01。)

由表5可见，乳腺增生模型组动物各项血液流变学指标与正常对照组比较有明显改变，表现为全血比粘度、血浆比粘度、红细胞压积值升高，柴芍乳核消片能使模型组动物各项血液流变学指标有不同程度的降低，以高剂量组作用更为明显。

(6)对大鼠乳腺组织病理组织学的影响：结果见表6。

表6  柴芍乳核消片对乳腺增生大鼠

小叶、腺泡、腺导管、胞浆面积的影响(n＝10，

)

组别	剂量(/Kg)	小叶数(个/切面)	腺泡数(个/切面)	腺泡腔直径(μm)	导管直径(μm)	胞浆面积(μm2)
							正常对照组	10ml	9.4±2.6※※	54.1±28.4※※※	17.8±4.8※※※	65.0±18.1※※※	211.5±104.8※※※
模型对照组	10ml	13.0±4.2	347.9±145.1	54.4±23.7	152.1±54.2	2276.8±1872.2

柴芍乳核消片低剂量组	2.97g	10.5±2.2※	312.8±91.4※	52.6±13.5※	144.0±50.6※	1846.3±831.7※
							柴芍乳核消片中剂量组	5.94g	9.4±2.7※※	246.9±113.6※	40.9±14.2※	129.6±55.7※	1169.6±833.7※
柴芍乳核消片高剂量组	11.88g	10.1±2.3※	278.8±132.3※	26.6±12.1※※※	102.2±41.8※※	569.5±623.3※※※
							乳癖消片组	1.04g	13.1±2.4※	316.4±105.5※	34.4±9.5※※	102.5±33.6※※	786.9±404.8※※※

(与模型对照组比较，^※P＞0.05，^※※P＜0.05，^※※※P＜0.01。)

光镜下观察，正常对照组动物腺细胞无增生性病变，腺泡少，导管无分泌，管腔无扩张；模型对照组动物小叶明显增多、增大，腺泡数增多，腺泡腔和腺导管腔扩张，内有分泌物；柴芍乳核消片低剂量组动物小叶增大，腺泡数增多，腺泡腔和腺导管腔有扩张，内有分泌物；柴芍乳核消片中剂量组动物小叶增大不明显，腺泡腔和腺导管腔有少数扩张，分泌物减少，脂肪组织增生；柴芍乳核消片高剂量组动物小叶缩小，腺泡数减少，腺泡腔和腺导管腔扩张不明显，分泌物减少，脂肪组织增生；乳癖消片组动物小叶缩小，腺泡、导管分泌不明显，脂肪组织增生。结果表明，柴芍乳核消片中、高剂量组对大鼠乳腺组织增生病理改变有明显的改善作用。由表6可见，乳腺增生模型动物小叶数、腺泡数、腺泡腔直径、导管直径以及胞浆面积明显高于正常对照组，柴芍乳核消片能使上述各项指标有不同程度的降低，以高剂量作用显著。

(7)对大鼠乳腺组织电镜结构的影响

各组乳腺组织电镜观察结构如下：

正常对照组：乳腺细胞为单层立方上皮细胞，排列整齐，腺腔狭窄、紧缩，腺细胞内几乎未见分泌颗粒(偶见1～2个)，溶酶体少见，基底胶原纤维丰富。

模型对照组：腺泡密集，常呈背靠背排列，间质成分少，腺细胞内大量脂滴，腺腔扩张，内有大量分泌颗粒，腺细胞增生，体积增大，其内质网，糖原丰富。

柴芍乳核消片低剂量组：部分腺腔可见分泌颗粒，但大部分腺腔紧缩，腺细胞内脂滴少见，线粒体、间质网、分泌颗粒较模型组显著减少。

柴芍乳核消片中剂量组：腺腔紧缩，腺细胞内脂滴、分泌颗粒少见，溶酶体减少，线粒可见空泡变，部分腺细胞固缩，体积变小。

柴芍乳核消片高剂量组：腺腔缩小，腺细胞排列整齐，内有少量分泌颗粒，溶酶体少见，偶见脂滴，间质成分多。

乳癖消片组：腺腔缩小，腺细胞内脂滴少见，分泌颗粒少，但内质网及糖原与模型组变化不大。

电镜结果表明，柴芍乳核消片对大鼠乳腺增生具有较好的抑制作用。

实施例3、本发明治疗乳腺囊性增生药物对气滞血瘀模型大鼠影响的实验

采用实施例1制备的治疗乳腺囊性增生的药物(临床实验命名为柴芍乳核消片)，对气滞血瘀模型大鼠进行动物实验，通过对照实验，考察本发明药物对试验大鼠的治疗作用。具体实验过程如下：

取SD大鼠60只，雌性，体重203.4±14.5g，随机分为6个实验组，包括正常对照组，模型对照组，施用柴芍乳核消片剂量分别为2.97g/Kg、5.94g/Kg、11.88g/Kg的三个组，乳癖消片施用剂量为1.04g/Kg组，每组实验大鼠各10只。除正常对照组外，其他各动物灌胃200％大黄煎剂20ml/Kg，一小时后将大鼠置于水深约40cm、水温42±1℃的水箱中游泳，至其自然下沉无力浮出为止，每天一次，连续14天。造模后第11天开始灌胃给药，柴芍乳核消片低、中、高剂量组和乳癖消片组给予相应浓度药液，空白对照组和模型对照组给予等体积蒸馏水，每天一次，连续10天。末次给药后一小时，戊巴比妥钠腹腔注射(ip)30mg/Kg麻醉，心脏取血10ml，用肝素钠31.25u/ml抗凝，然后用粘度计测全血比粘度(取切速分别为9.6S^-1和192S^-1，恒温25℃)；将全血混匀注入红细胞压积管内，以3000rpm离心30分钟，观察并记录红细胞压积；取上述所余抗凝全血，以2000rpm离心10分钟，取上清液即为血液，用粘度计测血浆比粘度，结果见表7。

表7  柴芍乳核消片对气滞血瘀大鼠血液流变的影响(n＝10，

)

组别	剂量(/Kg)	全血比粘度		血液比粘度	红细胞压积(％)
						9.6S-1	192S-1
		正常对照组	10ml					9.48±1.85※※※	5.87±1.39※※※	1.46±0.16※※※	35.06±4.12※※※
模型对照组	10ml			14.96±2.96	7.79±1.21	1.74±0.21	42.21±5.04
		柴芍乳核消片低剂量组	2.97g					12.31±1.93※※	6.69±1.28※	1.55±0.17※※	40.48±3.83※
柴芍乳核消片中剂量组	5.94g			12.29±1.83※※	6.46±1.42※※	1.48±0.18※※※	37.62±3.50※※
		柴芍乳核消片高剂量组	11.88g					11.85±1.65※※※	6.20±1.45※※	1.50±0.22※※	35.86±3.96※※※
乳癖消片组	1.04g			12.91±	6.76±	1.56±	37.23±

1.44※※

1.14※

0.15※※

3.19※※

(与模型对照组比较，^※P＞0.05，^※※P＜0.05，^※※※P＜0.01。)

由表7可见，气滞血瘀模型组动物各项血液流变学指标与正常对照组比较有明显变化，表现为全血比粘度、血浆比粘度、红细胞压积值显著升高，柴芍乳核消片剂量为2.97g/Kg、5.94g/Kg、11.88g/Kg的三个组能使模型动物各项血液流变学指标有不同程度的降低，以剂量为5.94g/Kg、11.88g/Kg的二个组作用更为明显，表明柴芍乳核消片具有行气活血的功效。

实施例4、本发明治疗乳腺囊性增生的药物对小鼠痛阈的影响

采用实施例1所制备的治疗乳腺囊性增生的药物(临床实验命名为柴芍乳核消片)，对小鼠痛阈的影响进行实验，考察本发明药物的镇痛作用。具体实验过程如下：

取IDR清洁级雌性小鼠，体重18～22g。实验前将小鼠置于55±0.2℃测痛仪的热板上测其正常痛阈值，以小鼠舔后足所需时间(秒)为痛阈出现的指标，凡痛阈值超过30秒或低于5秒或跳跃者均弃之不用。取痛阈值在5～30秒之间的小鼠60只，体重20.0±0.9g，每只测其正常痛阈值二次，取其均值作为该鼠给药前的正常痛阈值，将动物随机分为6个实验组，每组10只，包括空白对照组，施用柴芍乳核消片剂量分别为4.29g/Kg、8.58g/Kg、17.16g/Kg的三个组，乳癖消片施用剂量为1.50g/Kg组和复方阿斯匹林片施用剂量为0.21g/Kg组，各组均灌胃给药，对照组给予等体积蒸馏水，每天一次，连续5天，于末次给药后30分钟、60分钟、90分钟时各测一次每组动物的痛阈值，并与对照组比较，进行统计学处理，结果见表8。

表8  柴芍乳核消片对小鼠痛阈(秒)的影响(n＝10，

)

组别	剂量(/Kg)	给药前痛阈(秒)	给药后不同时间痛阈(秒)
						30min	60min	90min
			空白对照组	20ml	20.2±3.7				20.6±3.3(2.0)	21.9±3.8(8.4)	21.2±3.0(4.9)
柴芍乳核消片低剂量组	4.29g	19.9±2.4				25.9±5.2※※(30.2)	27.4±5.6※※(37.7)	25.1±5.1※(26.1)
			柴芍乳核消片中剂量组	8.58g	21.0±4.1				34.1±8.2※※(62.4)	36.8±9.6※※※(75.2)	33.7±7.2※※※(60.5)
柴芍乳核消片高剂量组	17.16g	19.2±2.8				38.8±10.3※※※(102.1)	37.1±9.9※※※(93.2)	35.4±7.5※※※(84.4)

乳癖消片组	1.50g	19.5±2.7	35.4±8.5※※※(81.5)	33.9±7.3※※※(73.8)	30.1±6.0※※※(54.4)
						复方阿斯匹林片组	0.21g	21.5±2.8	40.1±11.2※※※(86.5)	40.8±11.5※※※(89.8)	38.0±9.8※※※(76.7)

(与对照组比较，^※P＞0.05，^※※P＜0.05，^※※※P＜0.01。括号内为痛阈提高百分率)

结果表明，柴芍乳核消片剂量在4.29g/Kg、8.58g/Kg、17.16g/Kg时能明显增加小鼠的痛阈(与对照组比较，P＜0.05及P＜0.01)，具有明显的镇痛作用。

实施例5、本发明治疗乳腺囊性增生药物对小鼠醋酸扭体反应的影响

采用实施例1所制备的治疗乳腺囊性增生的药物(临床实验命名为柴芍乳核消片)，对小鼠醋酸扭体的影响进行实验，考察本发明药物的镇痛作用。具体实验过程如下：

取IDR清洁级小鼠60只，雌性，体重20.2±0.8g，随机分为6个实验组，包括空白对照组，施用柴芍乳核消片剂量分别为4.29g/Kg、8.58g/Kg、17.16g/Kg的三个组，乳癖消片施用剂量为1.50g/Kg组和复方阿斯匹林片施用剂量为0.21g/Kg组，每组10只，每天灌胃给药一次，连续5天，对照组给予等体积蒸馏水，于末次给药后30分钟各鼠腹腔注射0.6冰醋酸0.2ml/只，记录注射致痛剂15分钟内各鼠扭体反应(腹部内凹、伸屈后腿、臀部指高)数，计算扭体反应抑制率，结果见表9。

表9柴芍乳核消片对小鼠醋酸扭体反应的影响(

)

组别	动物数(只)	剂量(/Kg)	扭体数(次)	抑制率(％)
					空白对照组	10	20ml	18.4±6.5	/
柴芍乳核消片低剂量组	10	4.29g	12.5±5.4※※	32.1
					柴芍乳核消片中剂量组	10	8.58g	10.8±4.7※※※	41.3
柴芍乳核消片高剂量组	10	17.16g	9.7±5.2※※※	47.3
					乳癖消片组	10	1.50g	11.7±5.5※※	36.4
复方阿斯匹林片组	10	0.21g	8.6±3.6※※※	53.3

(与对照组比较，^※※P＜0.05，^※※※P＜0.01。)

结果表明，柴芍乳核消片剂量在4.29g/Kg、8.58g/Kg、17.16g/Kg时能明显降低醋酸所致小鼠扭体反应次数(与模型对照组比较，P＜0.05，或P＜0.01)，具有明显的镇痛作用。

实施例6、本发明治疗乳腺囊性增生的实验用君、臣药物片剂对小鼠耳廓二甲苯致炎的影响

采用实施例1所制备的治疗乳腺囊性增生的实验用君、臣药物片剂(临床实验命名为柴芍乳核消片实验用君、臣药物片剂)，对小鼠耳廓二甲苯致炎的影响进行实验，考察本发明药物的抗炎作用。具体实验过程如下：

取IDR清洁级雄性小鼠60只，体重20.2±0.7g，随机分为6个实验组，包括空白对照组，施用柴芍乳核消片实验用君、臣药物片剂剂量分别为4.29g/Kg、8.58g/Kg、17.16g/Kg的三个组，乳癖消片施用剂量为1.50g/Kg组和吲哚美辛0.01g/Kg组，每组10只，每天灌胃给药一次，连续7天，对照组给予等体积蒸馏水，末次给药后30分钟，给小鼠右耳涂以二甲苯0.05ml/只，15分钟后处死动物，用8mm打孔器将小鼠双耳等面积切下，用AB204型电子天平分别称重，以左右二耳片重量差值作为肿胀指标，并计算抑制率，结果见表10。

表10柴芍乳核消片对小鼠耳廓二甲苯致炎的影响(

)

组别	动物数(只)	剂量(/Kg)	肿胀度(mg)	抑制率(％)
					空白对照组	10	20ml	11.2±2.1	/
柴芍乳核消片实验用君、臣药物片剂低剂量组	10	4.29g	9.4±1.5※※	16.1
					柴芍乳核消片实验用君、臣药物片剂中剂量组	10	8.58g	9.1±1.9※※	18.8
柴芍乳核消片实验用君、臣药物片剂高剂量组	10	17.16g	8.8±1.5※※※	21.4
					乳癖消片组	10	1.50g	9.2±1.7※※	17.9
吲哚美辛片组	10	0.01g	6.6±1.4※※※	41.1

(与对照组比较，^※※P＜0.05，^※※※P＜0.01。)

结果表明，柴芍乳核消片实验用君、臣药物片剂剂量在4.29g/Kg、8.58g/Kg、17.16g/Kg时能明显抑制二甲苯所致小鼠耳肿胀(与空白对照组比较，P＜0.05或P＜0.01)，具有明显的抗炎消肿作用。

实施例7、本发明治疗乳腺囊性增生的实验用君、臣药物片剂对小鼠腹腔毛细管通透性的影响

取IDR清洁级雌性小鼠60只，体重20.1±0.8g，随机分为6个实验组，包括空白对照组，施用柴芍乳核消片实验用君、臣药物片剂剂量分别为4.29g/Kg、8.58g/Kg、17.16g/Kg的三个组，乳癖消片施用剂量为1.50g/Kg组和吲哚美辛0.01g/Kg组，每组10只，每天灌胃给药一次，连续7天，对照组给予等体积蒸馏水，末次给药后30分钟，给小鼠尾静脉注射1％伊文思兰0.2ml/只，立即腹腔注射0.7％醋酸生理盐水0.2ml/只，15分钟后处死动物，剪开腹部肌肉，用6 ml生理盐水分数次洗涤腹腔，收集腹腔洗液合并后加生理盐水至10ml，3000rpm离心15分钟，取上清液用7230型分光光度计于590nm处光密度OD值，以OD值的大小表示腹腔毛细血管通透性，结果见表11。

表11  柴芍乳核消片对小鼠腹腔毛细管通透性的影响

组别	动物数(只)	剂量(/Kg)	腹腔洗液OD值
				空白对照组	10	20ml	0.167±0.023
柴芍乳核消片实验用君、臣药物片剂低剂量组	10	4.29g	0.158±0.025※
				柴芍乳核消片实验用君、臣药物片剂中剂量组	10	8.58g	0.144±0.021※※
柴芍乳核消片实验用君、臣药物片剂高剂量组	10	17.16g	0.141±0.016※※※
				乳癖消片组	10	1.50g	0.148±0.015※※
吲哚美辛片组	10	0.01g	0.129±0.020※※※

(与对照组比较，^※P＞0.05，^※※P＜0.05，^※※※P＜0.01。)

结果表明，柴芍乳核消片实验用君、臣药物片剂剂量在8.58g/Kg、17.16g/Kg时能明显抑制醋酸所致小鼠腹腔毛细管通透性亢进(与空白对照组比较，P＜0.05或P＜0.01)，具有明显的抗炎作用。

实施例8、柴芍乳核消片治疗乳腺囊性增生临床试验

选择乳腺囊性增生病患者240例，试验组120例，其中轻型患者45例、中型患者56例、重型患者19例。对照组120例，其中轻型患者50例、中型患者52例、重型患者18例。

轻型患者乳房隐痛、窜痛、单侧或双测乳房肿块，为单一小肿块，或呈颗粒状而范围小，或呈条索状物，较软，局限在一个象限。中型患者乳房钝痛或窜痛并有触痛，胀痛明显，肿块较大，或呈片状、盘状，累及双乳，但范围在两个象限。重型患者乳房坠痛或刺痛，触痛明显，肿块大，多发囊性结节，累及双乳，范围在两个象限以上。肝郁气滞证和血瘀证的症状包括：乳房胀痛或刺痛，可随月经周期及情绪变化而消长，乳房内肿块软硬不等，或胸肋胀痛，烦躁易怒，可伴月经不调，舌质红或暗红，苔薄白。脉弦或涩。

试验组服用柴芍乳核消片，每次4片，每日三次；对照组服用乳核散结片，每次4片，每日三次，两组用药均为3个月。

试验结果如下：

经240例临床试验观察，服用柴芍乳核消片后，患者乳房的疼痛和触痛消失或明显减轻，肿块不同程度的缩小或消失，试验组有显著效果的为52.8％，总有效率达93.5％，优于对照组乳核散结片的疗效(总有效率73.19％)，并未见毒副作用。

Claims (10)

1、一种治疗乳腺囊性增生的药物，是由含有下列重量份数比的原料制成的：

柴胡      0.8-1.2    赤芍      1.8-2.2

夏枯草    2.2-2.6    牡蛎      2.2-2.6

当归      1.8-2.2    田三七    1.8-2.2

党参      1.4-1.8。

2、如权利要求1所述的药物，其特征在于：所述原料中还含有下列重量份数比的成分：

青皮      0.8-1.2    橘核    1.4-1.8

荠菜      1.4-1.8    漏芦    1.4-1.8

鬼箭羽    1.0-1.4。

3、如权利要求2所述的药物，其特征在于：所述原料中还含有重量份数比为1.4-1.8份的王不留行。

4、如权利要求3所述的药物，其特征在于：所述药物是由下列重量份数比的原料制成的：

柴胡      1      赤芍      2

夏枯草    2.4    牡蛎      2.4

当归      2      田三七    2

党参      1.6    青皮      1

橘核      1.6    荠菜      1.6

漏芦      1.6    鬼箭羽    1.2

王不留行  1.6。

5、一种生产权利要求3所述的治疗乳腺囊性增生的药物的方法，包括以下步骤：

1)称取下列重量份数比的原料：

柴胡      0.8-1.2    赤芍      1.8-2.2

夏枯草    2.2-2.6    牡蛎      2.2-2.6

当归      1.8-2.2    田三七    1.8-2.2

党参      1.4-1.8    青皮      0.8-1.2

橘核      1.4-1.8    荠菜      1.4-1.8

漏芦        1.4-1.8    鬼箭羽     1.0-1.4

王不留行    1.4-1.8

2)将柴胡、当归、漏芦和青皮粉碎成粗粉，加入到4-8倍于所述粗粉重量的水中蒸馏3-7小时，获得挥发油；

3)用6-8倍于挥发油重量的β-环糊精、变性淀粉、环糊精、甲基环糊精、羟丙基环糊精、羟乙基环糊精、环糊精聚合物或支链环糊精，或淀粉在环状糊精糖基转移酶作用下水解得到的环糊精衍生物，对挥发油进行包合，获得包合物备用，药渣备用；

4)将王不留行炒制；将田三七和炒制后的王不留行粉碎成粗粉，加入到浓度为60-80％的乙醇中加热回流，得到乙醇提取液，将提取液减压浓缩，得到醇清膏备用，药渣备用；

5)将牡蛎加入到6-10倍于牡蛎重量的水中浸泡后煎煮1-1.5小时；

6)将赤芍、夏枯草、党参、橘核、荠菜和鬼箭羽加入到10-14倍于该步总药物重量的水中，并与第5)步得到的煎煮液一同进行煎煮，然后再将步骤4)乙醇提取后的药渣及步骤3)挥发油包合后的药渣加入到所得煎煮液中进行共同煎煮；

7)过滤煎煮液然后进行离心，将离心液减压浓缩得到清膏；

8)将清膏与醇清膏合并，然后真空干燥或喷雾干燥获得干粉；

9)将干粉和包合物混匀，得到本发明的药物。

6、如权利要求5所述的方法，其特征在于：所述步骤3)中包合的温度为30-50℃，包合时间2-4小时；所述步骤4)中加热回流的次数为2次，第一次乙醇重量为本步骤所述中药总量的4-8倍，回流提取1-3小时，第二次乙醇重量为本步骤所述中药总量的3-7倍，回流提取0.5-2.5小时，然后合并2次乙醇提取液，提取液减压浓缩后得到的醇清膏的相对密度为1.10；所述步骤6)中将乙醇提取后的药渣及挥发油包合后的药渣加入到所得煎煮液中进行共同煎煮时，需加入8-12倍赤芍、夏枯草、党参、橘核、荠菜和鬼箭羽总量的水；所述步骤7)得到的清膏的相对密度为1.10。

7、如权利要求6所述的方法，其特征在于：所述喷雾干燥的进风温度为180～190℃，出口温度为80～90℃，进口负压为11-13Kpa，出口负压为11-13Kpa；所述低温干燥的温度为60～80℃。

8、如权利要求5或6或7所述的方法，其特征在于：所述步骤9)中将干粉和包合物混匀前，还要加入各占所述干粉质量百分比3-7％的低取代羟丙基纤维素和微晶纤维素。

9、如权利要求8所述的方法，其特征在于：所述混合物用70-90％乙醇制成颗粒，过14～16目筛，压制成片。

10、如权利要求8所述的方法，其特征在于：所述药片包薄膜衣。