CN1332202C - 一种利用蛋白质芯片研究蛋白质相互作用的方法 - Google Patents
一种利用蛋白质芯片研究蛋白质相互作用的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN1332202C CN1332202C CNB2005101052945A CN200510105294A CN1332202C CN 1332202 C CN1332202 C CN 1332202C CN B2005101052945 A CNB2005101052945 A CN B2005101052945A CN 200510105294 A CN200510105294 A CN 200510105294A CN 1332202 C CN1332202 C CN 1332202C
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- protein
- chip
- fusion
- detected
- immunology
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 title claims abstract description 63
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 title claims abstract description 63
- 238000011160 research Methods 0.000 title claims abstract description 24
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 21
- 230000006916 protein interaction Effects 0.000 title description 15
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims abstract description 14
- 230000004927 fusion Effects 0.000 claims description 27
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 20
- 239000000758 substrate Substances 0.000 claims description 15
- 108020001580 protein domains Proteins 0.000 claims description 12
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims description 12
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims description 11
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims description 7
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 6
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 5
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 5
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 claims description 5
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims description 5
- 238000007789 sealing Methods 0.000 claims description 5
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 claims description 4
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 claims description 4
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 4
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 claims description 4
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 claims description 4
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 claims description 4
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 3
- 230000009918 complex formation Effects 0.000 claims description 2
- 230000002452 interceptive effect Effects 0.000 claims description 2
- 239000003620 semiochemical Substances 0.000 claims description 2
- 229940027941 immunoglobulin g Drugs 0.000 claims 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 claims 1
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 abstract description 12
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 abstract description 12
- 230000003993 interaction Effects 0.000 abstract description 6
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 abstract description 5
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 abstract description 4
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 abstract description 4
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 abstract description 3
- 230000004907 flux Effects 0.000 abstract description 2
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 abstract 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 12
- 239000000020 Nitrocellulose Substances 0.000 description 6
- 102000000470 PDZ domains Human genes 0.000 description 6
- 108050008994 PDZ domains Proteins 0.000 description 6
- 229920001220 nitrocellulos Polymers 0.000 description 6
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 6
- 238000013461 design Methods 0.000 description 5
- 102100023408 KH domain-containing, RNA-binding, signal transduction-associated protein 1 Human genes 0.000 description 4
- 101710094958 KH domain-containing, RNA-binding, signal transduction-associated protein 1 Proteins 0.000 description 4
- 238000012856 packing Methods 0.000 description 4
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 3
- 238000000749 co-immunoprecipitation Methods 0.000 description 3
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 3
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 3
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 3
- 238000004020 luminiscence type Methods 0.000 description 3
- 238000002823 phage display Methods 0.000 description 3
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- 238000001086 yeast two-hybrid system Methods 0.000 description 3
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 2
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 2
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 2
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 2
- 150000007523 nucleic acids Chemical group 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 238000006555 catalytic reaction Methods 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 1
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 1
- 238000004375 physisorption Methods 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 230000004850 protein–protein interaction Effects 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000008844 regulatory mechanism Effects 0.000 description 1
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 1
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 1
- 241001515965 unidentified phage Species 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本发明提供了一种利用蛋白质芯片研究具有PDZ结构域与相关蛋白质相互作用的方法。该方法制备具有PDZ结构域一类蛋白质的融合蛋白文库，将融合蛋白点印到芯片的基片上，待检测的蛋白质或蛋白质片段制成具有免疫学标签的融合蛋白，将待测蛋白质与芯片进行杂交，检测杂交结果，该方法使用抗免疫学标签的单一抗体，即可对多种能够发生相互作用的蛋白质进行研究，达到高通量、简便快速的要求。
Description
技术领域
本发明属于生命科学领域，特别涉及一种利用蛋白质芯片研究蛋白质相互作用的方法。
背景技术
蛋白质芯片是一种在固态基底上有序排布的蛋白质或多肽阵列，可对蛋白质样品进行检测、识别和鉴定，应用于生物学、医学及其相关领域。
蛋白质与蛋白质的相互作用是生物调控的基本单元，对于理解生物调控机制具有重要意义，是后基因组时代生命科学与其它学科交叉研究的热点。蛋白质-蛋白质相互作用和识别在诸如生物催化、转运、信号传导、免疫、细胞调控等多种生命过程中起着重要的作用。研究蛋白质相互作用的方法很多，目前较普遍的生物化学与分子生物学方法包括：免疫共沉淀(co-immnol precipitation，co-IP Moon and Lazarides 1983)、GST-pull down、Far Westem分析、噬菌体展示和酵母双杂交(Fields and Song 1989)等。这些技术的发展为蛋白质相互作用的研究提供了非常有效的手段。
但是，免疫共沉淀、GST-pull down和Far Westem分析都是针对某一种蛋白质相互作用的分析和鉴定，远远无法满足当今蛋白质组学研究中高通量的要求；同时，免疫共沉淀和GST-pull down还需要针对目的蛋白质特异性的抗体，因此在实践上有许多限制；噬菌体展示和酵母双杂交技术虽然可以对蛋白相互作用组进行大规模的筛选，但噬菌体展示技术更适合筛选较短的肽段，而较大蛋白质分子由于很难得到噬菌体展示库，因此对于筛选与其相互作用的蛋白质有很大的局限性；酵母双杂交是检验在细胞内蛋白质与蛋白质的相互作用的一种方法，它的局限性在于所研究的蛋白质必须能够进入细胞核同时该蛋白质不是细胞核转录调控因子。
发明内容
本发明的目的是提供一种新的利用蛋白质芯片研究蛋白质相互作用的方法，使待测蛋白质与多种蛋白质的相互作用仅用一张芯片即可筛选鉴定，实现高通量、简便快速的要求。
本发明的技术方案如下：
一种利用蛋白质芯片研究蛋白质相互作用的方法，首先制备具有共同结构特性的一类蛋白质的融合蛋白文库，所述融合蛋白为带有免疫学标签的融合蛋白。按照预先设计的顺序将取自该文库的融合蛋白点印到芯片的基片上，使融合蛋白通过物理吸附作用与基片相连接，从而将融合蛋白固定在芯片基片上。待检测的蛋白质或蛋白质片段也制成具有免疫学标签的融合蛋白，将待测蛋白质与蛋白质芯片进行杂交，检测杂交结果，将显示蛋白质的相互作用情况，即在一张芯片表面即可筛选检测出文库中能与待测蛋白相互作用的蛋白质或蛋白质片段。
一种利用蛋白质芯片研究蛋白质相互作用的方法，其所涉及的蛋白质芯片的制备方法，采取下列步骤：
(1)将一类具有共同结构特性的蛋白质或蛋白质的片段分别制备成带有免疫学标签的融和蛋白，组成融合蛋白质文库；
(2)将所制备的各种融合蛋白按照预先设计的顺序点印到芯片的基片上，使融合蛋白与基片相连接；
(3)室温放置24小时，待其自然干燥，密封包装后存放于4℃待用。
一种利用蛋白质芯片研究蛋白质相互作用的方法，其所涉及的检测方法为使用抗免疫学标签的单一抗体可同时对多种能够发生相互作用的蛋白进行研究，其步骤为：
(1)在大肠杆菌中表达并纯化待测蛋白质或蛋白质片段与免疫学标签的融合蛋白；
(2)将蛋白质芯片放入封闭液中，封闭芯片基片上剩余的活性基团；
(3)将待测蛋白质或蛋白质片段的融合蛋白加入封闭液中，使其终浓度为lnM-luM，在温度为4-25℃，相对湿度为70-85％的条件下轻摇孵育至反应平衡；
(4)洗涤芯片；
(5)加入作为第一信号物质的可与芯片捕获蛋白的免疫学标签配对的检测抗体，使两个可相互作用的蛋白质与抗体形成复合物；
(6)洗涤芯片；
(7)加入与酶连接的第二信号物质，使其与前述复合物实现连接形成复合物；
(8)洗涤芯片；
(9)干燥后进行检测。
本发明是在固态基片上有序排布融合蛋白质或融合蛋白质片段阵列，可对蛋白质样品间的相互作用进行检测、筛选和鉴定。现有的研究蛋白质相互作用的方法有的只是针对某一种蛋白质相互作用的分析和鉴定；有的需要针对目的蛋白质特异性的抗体；有的只适合筛选较短的肽段；有的对被研究蛋白质的定位及性质有所限定。总之均不能满足蛋白质组学研究中简便、快速、高通量的要求。而采用本发明的研究方法，则可以把大量的具有共同结构特性的一类蛋白质或蛋白结构域片段同时点阵于一张芯片上，经过简单的检测操作即可筛选鉴定出有相互作用的一对蛋白质，大大提高了筛选鉴定的速度和效率，适用于多种蛋白质相互作用的研究。
本发明的制备工艺简单，操作安全快捷，尤其是每次检测过程仅使用针对于免疫学标签的一种抗体即可完成操作，大大降低了研究成本，经济实用性强。
附图说明
图1是芯片上PDZ蛋白结构域的排布情况
图2是利用蛋白质芯片研究筛选与betal-肾上腺素受体相互作用的PDZ蛋白结构域的结果图
图3是芯片上PDZ蛋白结构域的排布情况
图4是利用蛋白质芯片研究筛选与P2Y1R相互作用的PDZ蛋白结构域的结果图
图5是芯片上WW蛋白结构域的排布情况
图6是利用蛋白质芯片研究筛选与Sam68相互作用的WW蛋白结构域的结果图
具体实施方式
实施例1
利用蛋白质芯片研究筛选与betal-肾上腺素受体相互作用的PDZ蛋白结构域
(1)制备PDZ结构域的融合蛋白质文库。将若干PDZ结构域分别构建到His融合蛋白表达载体pET30a上，分别表达并纯化His-PDZ融合蛋白；
(2)在作为芯片基片的硝酸纤维素膜上按照96孔板的的排列方式画上96个方格，将所制备的各种融合蛋白(0.1M-1mM)按照预先设计的顺序点印到膜上的各方格内，使融合蛋白与硝酸纤维素膜相连接；
(3)室温放置24小时，待其自然干燥，密封包装后存放于4℃待用。
(4)将betal-肾上腺素受体的羧基末端约30个氨基酸所对应的核酸序列片段装入蛋白质表达载体pGEX-4T-1内，在大肠杆菌BL21中表达并纯化GST融合蛋白GST-β1-AR-ct；
(5)将蛋白质芯片放入封闭液中于室温轻摇30分钟，封闭芯片基片上剩余的活性基团；封闭液包含：2％脱脂奶粉，100mMNaCl，10mM Tris pH7.4，0.1％Tween 20；
(6)将融合蛋白GST-β1-AR-ct加入封闭液中，使其终浓度为100nM，于4℃轻摇过夜孵育；
(7)封闭液洗涤芯片3次，每次5分钟；
(8)加入与酶连接的可与芯片捕获蛋白的免疫学标签GST配对的检测抗体，即辣根过氧化物酶标记的抗GST抗体，室温孵育1h；
(9)封闭液洗涤芯片3次，每次5分钟；
(10)ECL化学发光试剂盒处理蛋白质芯片3分钟；
(11)干燥后进行X-光片成像检测。
芯片上各PDZ蛋白结构域的排布情况如图1所示。
结果如图2所示：格子A5、A6、A10、B8、B10、C3、E10和G2内的点代表阳性结果，其所对应的PDZ结构域融合蛋白即为与β1-AR-ct有相互作用的PDZ蛋白结构域。斑点的大小和深浅可反映相互作用的强弱。
实施例2
利用蛋白质芯片研究筛选与P2Y1R相互作用的PDZ蛋白结构域
(1)制备PDZ结构域的融合蛋白质文库。将众多PDZ结构域分别构建到His融合蛋白表达载体pET30a上，分别表达并纯化His-PDZ融合蛋白；
(2)在作为芯片基片的硝酸纤维素膜上按照96孔板的的排列方式画上96个方格，将所制备的各种融合蛋白(0.1M-1mM)按照预先设计的顺序点印到膜上的各方格内，使融合蛋白与硝酸纤维素膜相连接；
(3)室温放置24小时，待其自然干燥，密封包装后存放于4℃待用。
(4)将P2Y1R的羧基末端所对应的核酸序列片段装入蛋白质表达载体pGEX-4T-1内，在大肠杆菌BL21中表达并纯化GST融合蛋白GST-P2Y1R-CT；
(5)将蛋白质芯片放入封闭液中于室温轻摇30分钟，封闭芯片基片上剩余的活性基团；封闭液包含：2％脱脂奶粉，100mM NaCl，10mM Tris pH7.4，0.1％Tween 20；
(6)将融合蛋白GST-P2Y1R-CT加入封闭液中，使其终浓度为100nM，于4℃轻摇过夜孵育；
(7)封闭液洗涤芯片3次，每次5分钟；
(8)加入与酶连接的可与芯片捕获蛋白的免疫学标签GST配对的检测抗体，即辣根过氧化物酶标记的抗GST抗体，室温孵育1h；
(9)封闭液洗涤芯片3次，每次5分钟；
(10)ECL化学发光试剂盒处理蛋白质芯片3分钟；
(11)干燥后进行X-光片成像检测。
芯片上蛋白的排布情况如图3所示。
结果如图4所示：格子B5、B11内的点代表阳性结果，其所对应的PDZ结构域融合蛋白即为与P2Y1R-CT有相互作用的PDZ蛋白结构域。斑点的大小和深浅可反映相互作用的强弱。
实施例3
利用蛋白质芯片研究筛选与Sam68相互作用的WW蛋白结构域
(1)制备WW结构域的融合蛋白质文库。将众多WW结构域分别构建到His融合蛋白表达载体pET30a上，分别表达并纯化His-WW融合蛋白；
(2)在作为芯片基片的硝酸纤维素膜上按照96孔板的排列方式画上96个方格，将所制备的各种融合蛋白(0.1M-1mM)按照预先设计的顺序点印到膜上的各方格内，使融合蛋白与硝酸纤维素膜相连接；
(3)室温放置24小时，待其自然干燥，密封包装后存放于4℃待用。
(4)将编码Sam68的核酸序列装入蛋白质表达载体pGEX-4T-1内，在大肠杆菌Top10中表达并纯化GST融合蛋白GST-Sam68；
(5)将蛋白质芯片放入封闭液中于室温轻摇30分钟，封闭芯片基片上剩余的活性基团；封闭液包含：2％脱脂奶粉，100mM NaCl，10mM Tris pH7.4，0.1％Tween 20；
(6)将融合蛋白GST-Sam68加入封闭液中，使其终浓度为100nM，于4℃轻摇过夜孵育；
(7)封闭液洗涤芯片3次，每次5分钟；
(8)加入与酶连接的可与芯片捕获蛋白的免疫学标签GST配对的检测抗体，即辣根过氧化物酶标记的抗GST抗体，室温孵育1h；
(9)封闭液洗涤芯片3次，每次5分钟；
(10)ECL化学发光试剂盒处理蛋白质芯片3分钟；
(11)干燥后进行X-光片成像检测。
芯片上蛋白的排布情况如图5所示。
结果如图6所示：格子A12和C11内的点代表阳性结果，其所对应的WW结构域融合蛋白即为与Sam68有相互作用的WW蛋白结构域。斑点的大小和深浅可反映相互作用的强弱。
Claims (5)
1、一种利用蛋白质芯片研究PDZ蛋白结构域与相关蛋白质相互作用的方法，其特征在于：使用抗免疫学标签的单一抗体可同时对多种具有PDZ蛋白结构域能够发生相互作用的蛋白质进行研究，其步骤为：
(1)在大肠杆菌中表达并纯化具有PDZ蛋白结构域的蛋白质或蛋白质片段和免疫学标签的融合蛋白；
(2)将蛋白质芯片放入封闭液中，封闭芯片基片上剩余的活性基团；
(3)将待测蛋白质或蛋白质片段的融合蛋白加入封闭液中，使其终浓度为1nM-1uM，在温度为4-25℃，相对湿度为70-85％的条件下轻摇孵育至反应平衡；
(4)洗涤芯片；
(5)加入作为第一信号物质的可与芯片捕获蛋白的免疫学标签配对的检测抗体，使两个可相互作用的蛋白质与抗体形成复合物；
(6)洗涤芯片；
(7)加入与酶连接的第二信号物质，使其与前述复合物实现连接形成复合物；
(8)洗涤芯片；
(9)干燥后进行检测。
2、如权利要求1所述的检测方法，其特征在于：所述免疫学标签为GST、His。
3、如权利要求1所述的检测方法，其特征在于：所述封闭液配方为：0.2-5％脱脂奶粉，10-1000mM NaCl，1-100mM Tris pH7.4，0.01-1％Tween 20。
4、如权利要求1所述的检测方法，其特征在于：所述第二信号物质为抗种属免疫球蛋白G抗体。
5、如权利要求1所述的检测方法，其特征在于：所述检测的方法为化学发光检测法和荧光发光检测法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CNB2005101052945A CN1332202C (zh) | 2005-11-30 | 2005-11-30 | 一种利用蛋白质芯片研究蛋白质相互作用的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CNB2005101052945A CN1332202C (zh) | 2005-11-30 | 2005-11-30 | 一种利用蛋白质芯片研究蛋白质相互作用的方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN1776425A CN1776425A (zh) | 2006-05-24 |
| CN1332202C true CN1332202C (zh) | 2007-08-15 |
Family
ID=36766053
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CNB2005101052945A Expired - Fee Related CN1332202C (zh) | 2005-11-30 | 2005-11-30 | 一种利用蛋白质芯片研究蛋白质相互作用的方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN1332202C (zh) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102621301B (zh) * | 2011-01-28 | 2014-10-08 | 上海铭源数康生物芯片有限公司 | 一种基于硝酸纤维素膜的蛋白芯片封闭液的制备方法 |
| CN104991072B (zh) * | 2015-06-16 | 2017-03-29 | 西北农林科技大学 | 一种昆虫体外蛋白质相互作用检测系统的制备方法及应用 |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1999001475A2 (de) * | 1997-07-04 | 1999-01-14 | Deutsches Krebsforschungszentrum Stiftung des öffentlichen Rechts | Humaner antikörper gegen ein fusions(poly)peptid bzw. -protein, das einen anteil von mindestens sechs histidinen aufweist |
| CN1470875A (zh) * | 2003-06-19 | 2004-01-28 | 苏恩本 | 三抗法快速定量测定心肌肌钙蛋白ⅰ |
| CN1527720A (zh) * | 2001-05-11 | 2004-09-08 | Ү³��ѧ | 利用蛋白组芯片全面分析蛋白活性 |
-
2005
- 2005-11-30 CN CNB2005101052945A patent/CN1332202C/zh not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1999001475A2 (de) * | 1997-07-04 | 1999-01-14 | Deutsches Krebsforschungszentrum Stiftung des öffentlichen Rechts | Humaner antikörper gegen ein fusions(poly)peptid bzw. -protein, das einen anteil von mindestens sechs histidinen aufweist |
| CN1527720A (zh) * | 2001-05-11 | 2004-09-08 | Ү³��ѧ | 利用蛋白组芯片全面分析蛋白活性 |
| CN1470875A (zh) * | 2003-06-19 | 2004-01-28 | 苏恩本 | 三抗法快速定量测定心肌肌钙蛋白ⅰ |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN1776425A (zh) | 2006-05-24 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Sjöberg et al. | Exploration of high-density protein microarrays for antibody validation and autoimmunity profiling | |
| Hu et al. | Functional protein microarray technology | |
| Washburn et al. | Protein pathway and complex clustering of correlated mRNA and protein expression analyses in Saccharomyces cerevisiae | |
| Naaby-Hansen et al. | Proteomics–post-genomic cartography to understand gene function | |
| Fuchs et al. | Influence of combinatorial histone modifications on antibody and effector protein recognition | |
| Khandurina et al. | Microchip-based high-throughput screening analysis of combinatorial libraries | |
| Peck | Update on proteomics in Arabidopsis. Where do we go from here? | |
| Hallborn et al. | Automated screening procedure for high-throughput generation of antibody fragments | |
| WO2019036055A2 (en) | METHODS OF SELECTING BINDING REAGENTS | |
| Silen et al. | Screening for novel antimicrobials from encoded combinatorial libraries by using a two-dimensional agar format | |
| AU7257396A (en) | Matrices with memories, sensors with memories and uses thereof | |
| Budayeva et al. | A mass spectrometry view of stable and transient protein interactions | |
| JP2010156715A (ja) | Ｂｌｅ遺伝子によってコード化されるタンパク質およびブレオマイシン・ファミリー由来抗生物質の新しい使用 | |
| Pei et al. | Developments with bead-based screening for novel drug discovery | |
| Kerbler et al. | From affinity to proximity techniques to investigate protein complexes in plants | |
| Swaney et al. | Proteomic analysis of protein posttranslational modifications by mass spectrometry | |
| CN1332202C (zh) | 一种利用蛋白质芯片研究蛋白质相互作用的方法 | |
| Kassa et al. | Evaluation of affinity-purification coupled to mass spectrometry approaches for capture of short linear motif-based interactions | |
| Schwaar et al. | Efficient screening of combinatorial peptide libraries by spatially ordered beads immobilized on conventional glass slides | |
| Edwards | Immunodiagnostics: a practical approach | |
| Schwenk et al. | Antibody suspension bead arrays | |
| Cheng et al. | Peptide labeling using isobaric tagging reagents for quantitative phosphoproteomics | |
| Kaboord et al. | Enrichment of low-abundant protein targets by immunoprecipitation upstream of mass spectrometry | |
| Resing | Analysis of signaling pathways using functional proteomics | |
| Yim et al. | Using peptide arrays created by the SPOT method for defining protein-protein interactions |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| C19 | Lapse of patent right due to non-payment of the annual fee | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |