CN1318055C - 一种药物的制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种药物的制备方法，尤其是一种中药的制备方法，主要采用了水提、醇提、喷雾干燥等技术，将其制成所需剂型，克服了原有工艺的不足之处，提高了生产效率，产品更加精制，宜被患者接受。

Description

一种药物的制备方法

技术领域

本发明公开了一种药物的制备方法，尤其是一种中药的制备方法，属中药领域。

背景技术

目前市场有一种用于治疗妇科炎症的中成药“金鸡胶囊”，处方组成为鸡血藤、金樱根、千斤拔、功劳木、两面针和穿心莲，各药味的重量比为：30∶16∶16∶16∶6∶5，该药临床应用效果较好。但还存在如下不足：

1、药物含量不精确，波动较大；

2、药物精制程度低，服用量大，需要每天服用12粒。

在国家药典委员会检索到“金鸡胶囊”的工艺过程为：取穿心莲30g，粉碎成细粉，剩余穿心莲与金樱根等五味加水煎煮二次，每次2.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成稠膏状，加入上述细粉，混匀，干燥，粉碎，过筛，装入胶囊，即得。可见，原工艺中的药材主要是采用了留粉和水提两种方法进行处理的，而这两种方法是目前中药提取精制方法中精制程度最低的。同时，文献方法中没有具体的参数，因而也不具备可操作性，要想解决以上种种不足，就必须重新设计一套新的提取制备方法。

发明内容

针对原产品存在的问题，结合处方特点，发明人进行了系统的研究，创制出新的制备方法，既能保持药效，又可以降低服用量。这一方法包含了如下工艺步骤：

a.取鸡血藤，功劳木，穿心莲，两面针，加6～10倍量的60％～80％的乙醇，提取2～3次，每次1～2小时，滤过，合并滤液，回收乙醇，滤过，滤液备用；

b.取金樱根和千斤拔，加6～10倍量水，煎煮2～3次，每次1～2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成浸膏；

c.将b中浸膏与a中滤液合并，继续浓缩至60℃时相对密度为1.10~1.20的浸膏；

d.将c中浸膏干燥，制成细粉。

按上述工艺过程提取精制后，最终得膏率为6～8％；而同时的对比实验显示，按原工艺方法提取精制的得膏率已达到15％。可见，本发明设计的工艺方法比原工艺方法具有一定的先进性，可以明显减小制成总量，从而也减小了服用量，方便了患者使用。

在上述工艺基础上，发明人进一步研究出优选的工艺过程：

a.取鸡血藤，功劳木，穿心莲，两面针，加8倍量的70％乙醇，提取三次，每次2小时，滤过，合并滤液，回收乙醇至无醇味，静置，滤过，滤液备用；

b.取金樱根，千斤拔，加8倍量水，煎煮二次，每次2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成浸膏；

c.将b中浸膏与a中滤液合并，混匀，继续浓缩至60℃时相对密度为1.15~1.20的浸膏；

d.将c中浸膏喷雾干燥成细粉。

经过中试验证，以上工艺过程实际可行，基本达到了发明人的最初目的。而应用这套工艺方法，与现代制剂技术相结合，就可以制成临床所需的各种剂型，如：在药粉中加入崩解剂、粘合剂及润滑剂等，压制成片；将药粉制粒后装成胶囊剂；在药粉中加入矫味剂，制粒，制成颗粒剂等。为了掩盖药物不良气味，提高药物稳定性和载药量的准确性，发明人优选制成软胶囊剂。

软胶囊剂稳定性是否良好，与混悬剂的种类及加入量密切相关，发明人经研究后选用了助悬剂与植物油的混合物作为混悬剂。这里的助悬剂可以是蜂蜡、卵磷脂、单硬脂酸铝、乙基纤维素等中的一种或几种的混合物，优选为蜂蜡；而植物油可以是大豆油、芝麻油、花生油、菜籽油及其他可食用植物油中的一种或几种的混合物，鉴于大豆油的价格低廉、产量大、品质稳定，故定为最佳选择。

按照一般规律，混悬剂的量越大，混悬液的稳定性就越好，然而在实际生产中，混悬剂的量太大，又会造成成本的增加，给生产过程也带来麻烦，因此必须在能达到稳定效果的基础上尽量减小混悬剂用量，发明人经过实验摸索，确定了药粉与蜂蜡、大豆油的最佳重量比为1∶0.1∶1.4，这样既能完全满足稳定性的要求，又节约了混悬剂的用量。

完成上述发明内容后，所得到的产品相对原有技术的产品，更加精制，单位制剂载药量增加，且含药量准确，无不良气味，患者服用方便，基本克服了原有技术产品的各种弊端，达到了本发明的目的。

具体实施方式

在本发明完成技术内容之后，为证明其疗效，还进行了药效学研究：

1、实验材料

1.1动物

大鼠：SD种，雌性，体重220+20克；雄性，体重160+10克，SPF级；小鼠：ICR种，雄性，体重20+2克，SPF级。

1.2药物与试剂

金鸡软胶囊提取物：按本发明最优工艺提取制得，每克提取物含生药15.7克。金鸡胶囊：市售。氧氟沙星片：市售，每片含氧氟沙星200mg。阿司匹林片：市售。苯酚胶浆：液态酚5ml、西黄芪胶1ml、甘油4g，加蒸馏水至20ml。

1.3菌种

大肠杆菌临床分离株、肉汤培养基、伊红美兰琼脂：市售，符合试验标准。

1.4仪器

BV-100血流变测试仪。

2、方法和结果

2.1对盆腔炎模型的影响

2.1.1大肠杆菌感染所致大鼠盆腔炎模型的抑制作用^[1]

菌种制备：取经小鼠传代后的大肠杆菌加入到肉汤培养基中，经37℃温箱培养7小时，取0.1ml菌液加入到10ml营养肉汤培养基中，再培养17小时，使用前以无菌生理盐水比浊计数，稀释至10⁷/ml，备用。

取大鼠以0.3％的戊巴比妥钠腹腔注射麻醉，1ml/Kg，固定动物，在无菌条件下开腹，暴露左侧子宫，抽取0.2ml菌液，用注射器针头机械损伤子宫内膜组织，边磨损边注入0.1ml菌液，然后注入余下的0.1ml菌液。分层关腹，消毒术区。假手术组仅进行开腹、暴露左侧子宫和关腹手术，不注入菌液。造模后10天，将除假手术组外的动物随机分为模型组、阳性药组、金鸡软胶囊提取物大、中、小剂量组，每组10只。按照下表中剂量分别灌胃给药，大、中、小剂量分别相当临床剂量的15、7.5、3.75倍，连续给药20天，每日1次，给药体积为0.5ml/100g，假手术组和模型组给予同体积水，阳性对照药组给予氧氟沙星片，相当临床剂量的10倍。末次给药后24小时，将动物用0.3％的戊巴比妥钠腹腔注射麻醉，剖腹，摘取双侧子宫，取子宫内膜液在大肠杆菌鉴定培养基上接种、置37℃温箱中培养24小时后，检查有无大肠杆菌均落生长。脏器除去脂肪组织后，用电子天平分别称双侧子宫和卵巢的重量。以左右两侧子宫重量的差值为肿胀度，计算肿胀率。称重后将子宫和卵巢用10％甲醛固定，石蜡包埋，常规切片，HE染色，光镜下观察子宫病理形态学的变化，按照分级标准，采用SSPS软件进行统计，比较组间差异。

2.1.1.1对大肠杆菌的抑制作用

金鸡软胶囊提取物给药20天后，模型组大鼠子宫内膜液接种于大肠杆菌鉴定培养基后，培养24小时，仍可检出大肠杆菌，大肠杆菌菌落的检出率为100％，假手术组全部检不出大肠杆菌，与假手术组比较差异显著。阳性药组和给药三剂量组大鼠子宫内膜液接种于大肠杆菌鉴定培养基后，经培养，大肠杆菌菌落的检出率为10-30％，检出率明显下降。提示，金鸡软胶囊提取物对在体子宫大肠杆菌感染具有一定的抑制作用。见表1。

表1对细菌性盆腔炎模型大鼠子宫内膜大肠杆菌检出率的影响
				组别	剂量(g生药/Kg)	菌落数(个)	检出率(％)
假手术组		0	0
				模型对照组		10	100##
氧氟沙星组	0.07	0	0-
				大剂量组	22.2	1	10*
中剂量组	11.1	2	20*
				小剂量组	5.6	3	30*

注：秩和检验：与假手术组比较##P＜0.O1；与模型组比较*P＜0.05。

2.1.2对非特异性大鼠盆腔炎模型的抑制作用

取大鼠按照体重随机分为正常对照组、模型对照组、阳性药对照组和给药大剂量组、中剂量组、小剂量组，每组l0只。除正常对照组外，其余动物用特制细长形灌胃器，进入阴道深部注入25％苯酚胶浆，每只1.5ml，3天1次，共3次。造模后第3天按照表2中剂量分别灌胃给药，大、中、小剂量分别相当临床剂量的15、7.5、3.75倍，连续给药12天。以金鸡胶囊为阳性对照药，相当临床剂量的40倍。每日1次，给药体积均为0.5ml/100g。未次给药后1小时，以3％的戊巴比妥纳麻醉动物，腹主动脉取血，测定血液流变学指标，解剖取出子宫及卵巢观察并记录肉眼所见，取材阴道至子宫分角处组织，置10％的甲醛溶液中固定，取材后流动水冲洗，梯度乙醇脱水，二甲苯透明，3天后将组织自中线纵向切开，浸蜡包埋，切片，HE染色，光学树脂封片，光镜下观察各组动物的阴道至子宫组织形态学变化及黏膜、黏膜下间质形态学的炎症改变程度，按照分级标准进行统计，比较组间差异。

2.1.2.1对血液流变学的影响

与正常对照组比较，模型组大鼠在切变率为94.5和0.945时的全血粘度均较正常对照组大鼠有明显升高，但对红细胞压积和血浆粘度无明显影响。阳性药和金鸡软胶囊提取物大、中剂量组大鼠在切变率为94.5和0.945时的全血粘度均较模型对照组大鼠有不同程度地降低，小剂量组减低全血粘度的作用与模型组比较不显著。提示，金鸡软胶囊提取物在非特异性盆腔炎模型上显示一定的活血化瘀作用。见表2。

表2对盆腔炎模型大鼠血液 流变学指标的影响(X±S；n＝10 )
						组别	剂量	全血粘度 (mpa.s)		红细胞压积	血浆黏度
	(g生药/Kg)	94.5-1	0.945-1	(％)	(mpa.s)
						空白对照组	-	4.21±0.46##	8.88±1.46##	37.50±1.18	1.09±0.04
模型对照组	-	5.11±0.53	12.67±1.55	37.30±1.42	1.14±0.06
						金鸡胶囊组	8粒	4.69±O.36*	11.32±1.32*	36.60±1.84	1.07±0.19
大剂量组	22.2	4.06±1.41*	9.86±1.62**	39.00±3.43	1.31±0.34
						中剂量组	11.1	4.60±.035*	11.10±1.13*	36.50±1.58	1.15±0.24
小剂量组	5.6	5.02±0.41	11.51±l.01	36.20+1.75	1.62±1.33

注：组间T检验：与正常对照组比较：##P＜0.01；与模型对照组比较：*P＜0.05：**P＜0.01。

2.1.2.2对大体形态的影响

对大鼠阴道外口的观察可见，造模后第3天起多数动物的阴道外口可见有浓稠的分泌物，动物的活动减少。各给药组动物阴道外口的分泌物在给药5天后，与模型组相比有不同程度地减少。

解剖后肉眼观察可见，正常对照组：剪开腹膜，腹腔内未见有红肿，周围组织未见明显变化。子宫颜色，硬度正常，未见充血、淤血，卵巢未见异常。模型组：部分子宫颜色暗红，子宫颈明显肿胀、充血，个别动物腹腔轻度粘连，卵巢未见明显异常。给药组：阳性药组、大剂量组、中剂量组、小剂量组与模型组相比，动物腹腔和子宫充血、肿胀、腔内渗出物及组织与腹腔周围的粘连程度均较模型组有不同程度的减轻，其中给药大剂量组明显减轻。

2.1.2.3对病理组织形态学的影响

镜下观察可见：

正常对照组：子宫内膜未见明显增厚，内膜表面上皮正常或有轻度增生，腺体未见病变，未见明显淋巴细胞浸润，卵巢未见明显病变。

模型对照组：子宫内膜明显增生、增厚，内膜表面上皮增生，核分裂相较多见，上皮细胞间，时见凋亡小体并可见较多核碎片。间质内可见中至重度炎细胞浸润，上皮下有散在或灶状淋巴细胞、中性粒细胞浸润。有时见炎细胞浸润于内膜腺体周围或腺腔内。双侧卵巢未见有明显病变。

阳性药对照组：子宫内膜腺上皮增生及炎症细胞浸润程度较模型对照组有所减轻。卵巢未见明显病变。

金鸡软胶囊大剂量组：子宫内膜增生、增厚较模型组有一定程度地减轻，上皮下有轻度炎细胞浸润。

金鸡软胶囊中剂量组：子宫内膜上皮细胞有轻度增生，个别样品上皮细胞有少量凋亡，上皮下有程度不一的炎细胞浸润。

金鸡软胶囊小剂量组：子宫内膜上皮有增生，上皮下炎细胞浸润，个别较明显。

按照分级标准，用SSPS软件，对子宫粘膜组织的病变程度进行统计的结果显示，模型组大鼠子宫粘膜呈现明显病变，与正常对照组比较差异显著。各给药组的病变程度与模型组比较均有不同程度地减轻，与模型组比较差异显著。见表3。

表3对非特异性盆腔炎模型大鼠病理组织变化的影响(n＝10)

组别	剂量(g生药/Kg)	子宫粘膜病变程度-    +   ++   +++   ++++
			正常对照组模型对照组##金鸡胶囊组##大剂量组##中剂量组##小剂量组#	8粒22.211.15.6	6    4    0      0      00     0    8     0     21    5    4     0      01    6    2     1     00    7    3     0      00    7    1     2     0

注：秩和检验：与正常对照组比较##P＜0.01；与模型组比较**P＜0.01。

分级标准：“-”大鼠盆腔结构正常

“+”：大鼠盆腔、子宫、卵巢、阴道浆膜面未见明显炎症

“++”：大鼠盆腔、子宫、卵巢、阴道浆膜面轻度充血、淤血，上皮细胞膜面有炎症，阴道上皮增生，角化过度

“+++”：大鼠盆腔、子宫、卵巢、阴道上端上皮浆膜面明显淤血、肿胀，炎症浸润明显，阴道上皮过度角化，上皮明显增生

2.2对非特异性炎症模型的影响

2.2.1对大鼠棉球肉芽肿的影响^[3]

取体重150-160克的雄性大鼠50只，在乙醚浅麻醉条件下作腹部切口，将已恒重(30mg)、灭菌的棉球植入大鼠两侧腹股沟皮下，术后随机分为5组，每组10只，手术当天本品以22.2、11.1、5.6g/Kg剂量开始灌胃给药，给药体积0.5ml/100g，连续给药7天，以阿司匹林为阳性对照药。给药后24小时处死动物，剥离并取出肉芽组织，于60-90℃烘箱内干燥1小时后称重，减去原棉球重量，即为肉芽肿净重。比较肉芽肿组间重量，计算抑制率。见表4。

表4对大 鼠棉球肉芽肿干重的影响(X±SD)
			组别	剂量(g生药/Kg)	肉芽干重(mg)      抑制率(％)
模型组		117.81±12.22
			阿司匹林组	0.10	80.45±8.02**     46
大剂量组	22.2	97.12±9.32*      21
			中剂量组	11.1	97.15±9.52*      21
小剂量组	5.6	99.88±12.37      18

注：组间T检验：与模型对照组比较：*P＜0.05；**P＜0.01。

2.2.2对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响^[3]

取体重为25-30克雄性小鼠，随机分为5组，每组10只，以金鸡软胶囊提取物22.0、11.0、5.5g/Kg连续灌胃给药3天，阳性药阿司匹林的剂量为0.1g/Kg，末次给药后1小时，将二甲苯0.1ml用加样器滴于小鼠右耳的前后两面，左耳为对照，0.5小时后处死小鼠，沿耳廓基线剪下两耳，用8mm直径的打孔器分别在同一部位打下圆耳片，组织天平称重，以每鼠的右耳减去左耳片重即为肿胀度，计算各组肿胀度的均值及标准差，计算其抑制率，比较组间差异。

结果显示，本品26.0、13.0、5.7g/Kg剂量均可抑制二甲苯致小鼠的耳肿胀，提示本品对小鼠非特异性急性炎症模型具有一定地抑制作用。见表5。

表5、对 小鼠耳肿胀的影响 (X±S；n＝10 )

组别	剂量	肿胀度	抑制率
					(g生药/kg)	(mg)	％
模型组		20.10±4.78
				阿斯匹林组	0.10	11.31±3.28##	77.70
大剂量组	26.0	13.10±2.19##	53.44
				中剂量组	13.0	13.90±3.70##	44.60
小剂量组	6.5	15.06±5.48#	25.07

注：组间T检验：与模型对照组比较：*P＜0.05；**P＜0.01。

结论

3.1两种盆腔炎模型的试验结果显示，按本发明技术方案制得的药物可抑制大肠杆菌所致大鼠特异性盆腔炎模型和苯酚糊浆所致大鼠非特异盆腔炎模型，抑制大鼠阴道及子宫黏膜组织的炎细胞浸润及其病理性改变，降低其血液粘度。提示其对细菌和非细菌性感染所致盆腔炎模型具有一定地治疗作用。

3.2两种非特异性炎症模型的试验结果显示，按本发明技术方案制得的药物可抑制二甲苯所致小鼠耳肿胀和大鼠棉球肉芽肿。提示其对非特异性炎症模型具有抑制作用，且效果达到甚至超过了原工艺方法制得的产品。

以下通过实施例来进一步阐述本发明的具体实施过程。

实施例1：本发明在片剂制备中的应用

处方：鸡血藤30kg、金樱根16kg、千斤拔16kg、

功劳木16kg、两面针6kg、穿心莲5kg

制备方法：a.取鸡血藤，功劳木，穿心莲，两面针，加6倍量的60％的乙醇，提取2次，每次1小时，滤过，合并滤液，回收乙醇，滤过，滤液备用；

b.取金樱根和千斤拔，加6倍量水，煎煮2次，每次1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成浸膏；

c.将b中浸膏与a中滤液合并，继续浓缩至60℃时相对密度为1.10~1.15的浸膏；

d.将c中浸膏减压干燥，粉碎成细粉，过120目筛。

e.在上述细粉中加入适量淀粉和羧甲基纤维素钠，压制成片。

实施例2：本发明在胶囊剂制备中的应用

处方：鸡血藤30kg、金樱根16kg、千斤拔16kg、

功劳木16kg、两面针6kg、穿心莲5kg

制备方法：a.取鸡血藤，功劳木，穿心莲，两面针，加10倍量的80％的乙醇，提取3次，每次2小时，滤过，合并滤液，回收乙醇，滤过，滤液备用；

b.取金樱根和千斤拔，加10倍量水，煎煮3次，每次2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成浸膏；

c.将b中浸膏与a中滤液合并，继续浓缩至60℃时相对密度为1.15~1.20的浸膏；

d.将c中浸膏喷雾造粒，在颗粒中加入少量滑石粉，混合均匀后填充成胶囊。

实施例3：本发明在颗粒剂制备中的应用

处方：鸡血藤30kg、金樱根16kg、千斤拔16kg、

功劳木16kg、两面针6kg、穿心莲5kg

制备方法：a.取鸡血藤，功劳木，穿心莲，两面针，加8倍量的70％的乙醇，提取2次，每次1.5小时，滤过，合并滤液，回收乙醇，滤过，滤液备用；

b.取金樱根和千斤拔，加8倍量水，煎煮3次，每次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成浸膏；

c.将b中浸膏与a中滤液合并，继续浓缩至60℃时相对密度为1.15~1.20的浸膏；

d.将c中浸膏喷雾干燥，制成细粉。

e.将上述细粉，加入1～2倍的糊精及适量淀粉，以乙醇制粒，烘干，制成颗粒。

实施例4：本发明在软胶囊剂制备中的应用

处方：鸡血藤30kg、金樱根16kg、千斤拔16kg、

功劳木16kg、两面针6kg、穿心莲5kg

制备方法：a.取鸡血藤，功劳木，穿心莲，两面针，加8倍量的70％乙醇，提取三次，每次2小时，滤过，合并滤液，回收乙醇至无醇味，静置，滤过，滤液备用；

b.取金樱根，千斤拔，加8倍量水，煎煮二次，每次2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成浸膏；

c.将b中浸膏与a中滤液合并，混匀，继续浓缩至60℃时相对密度为1.15~1.20的浸膏；

d.将c中浸膏喷雾干燥成细粉。

e.在上述细粉中按1∶0.08∶1的重量比加入蜂蜡和花生油，混匀后压制成软胶囊。

实施例5：本发明在软胶囊制备中的应用

处方：鸡血藤30kg、金樱根16kg、千斤拔16kg、

功劳木16kg、两面针6kg、穿心莲5kg

制备方法：a.取鸡血藤，功劳木，穿心莲，两面针，加8倍量的70％乙醇，提取三次，每次2小时，滤过，合并滤液，回收乙醇至无醇味，静置，滤过，滤液备用；

b.取金樱根，千斤拔，加8倍量水，煎煮二次，每次2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成浸膏；

c.将b中浸膏与a中滤液合并，混匀，继续浓缩至60℃时相对密度为1.15~1.20的浸膏；

d.将c中浸膏喷雾干燥成细粉。

e.在上述细粉中按1∶0.1∶1.4的重量比加入蜂蜡和大豆油，混匀后压制成软胶囊。

Claims (6)

1.一种药物的制备方法，该药物的处方组成为鸡血藤、金樱根、千斤拔、功劳木、两面针和穿心莲，其特征在于该制备方法包含如下工艺过程：

a.取鸡血藤，功劳木，穿心莲，两面针，加6～10倍量的60％～80％的乙醇，提取2～3次，每次1～2小时，滤过，合并滤液，回收乙醇，滤过，滤液备用；

b.取金樱根和千斤拔，加6～10倍量水，煎煮2～3次，每次1～2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成浸膏；

c.将b中浸膏与a中滤液合并，继续浓缩至60℃时相对密度为1.10~1.20的浸膏；

d.将c中浸膏干燥，制成细粉。

2.如权利要求1所述的药物制备方法，其特征在于该方法包含如下工艺过程：

a.取鸡血藤，功劳木，穿心莲，两面针，加8倍量的70％乙醇，提取三次，每次2小时，滤过，合并滤液，回收乙醇至无醇味，静置，滤过，滤液备用；

b.取金樱根，千斤拔，加8倍量水，煎煮二次，每次2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成浸膏；

c.将b中浸膏与a中滤液合并，混匀，继续浓缩至60℃时相对密度为1.15~1.20的浸膏；

d.将c中浸膏喷雾干燥成细粉。

3.如权利要求1或2所述的药物制备方法，其特征在于将工艺d所得细粉加入相应辅料制成临床可用各种的剂型。

4.如权利要求3所述的药物制备方法，其特征在于将步骤d所得细粉中加入助悬剂、食用植物油，加入量足以使三者混悬混匀，制成软胶囊。

5.如权利要求4所述的药物制备方法，其特征在于所用助悬剂可以是蜂蜡、卵磷脂、单硬脂酸铝、乙基纤维素中的一种或几种的混合物，所用植物油可以是大豆油、芝麻油、花生油、菜籽油及其他可食用植物油中的一种或几种的混合物。

6.如权利要求5所述的药物制备方法，其特征在于药粉与蜂蜡、大豆油的最佳重量比为1∶0.1∶1.4。