CN1315411C - 一种具有通便美容功能的保健品及制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种具有通便美容功能的保健品及制备方法。该保健品由主要含银杏叶、芦荟、蜂胶、甲壳素的活性成分，与其他添加剂和药用辅料制成的口服制剂。本发明运用传统中医药理论，通过润肠、通便而达到消祛黄褐斑的作用。

Description

一种具有通便美容功能的保健品及制备方法

技术领域

本发明涉及保健品领域，具体涉及一种具有通便美容功能的保健品及制备方法。

背景技术

一个人机体健康最基本的条件之一是新陈代谢状况显示正常，表现之一就是人的大便畅通。如果便秘，粪便在肠内存留的时间过长，毒素就会被人体吸收，不但人体的各个系统会出现不同程度的不适感，而且，还会在皮肤上产生色斑与疱块。所以，便秘是美容的大敌。此外，人体过量氧自由基的产生也是引起衰老的主要原因。

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于运用中药医理论，合理利用各种天然物质，提供一种具有润肠通便、祛黄褐斑功能确切的保健品。

本发明公开的具有通便美容功能的保健品是由主要含银杏叶、芦荟、蜂胶、甲壳素的活性成分，与其他添加剂和药用辅料制成的口服制剂。

本发明所述各主要活性成分占活性成份总重量的百分含量为：银杏叶30-60％、芦荟30-60％、蜂胶4-8％、甲壳素6-12％。

本发明所述的其他添加剂是指对上述活性成分有辅助增效作用的物质或营养剂；包括月见草油，紫苏油、麻油等，所述的药用辅料为常用制备口服制剂的各种辅料；所述的口服制剂为各种医学上可接受的口服剂型，包括软胶囊、硬胶囊、颗粒剂、口服液等。

本发明所要解决的另一技术问题在于提供上述具有通便美容功能的保健品的制备方法。

本发明所述保健品的制备方法包括下列步骤：

1.银杏叶、芦荟用水和/或乙醇浸泡后回流提取，提取液浓缩，喷雾干燥得浸膏粉；

2.按处方量将蜂胶、甲壳素过筛，与上述浸膏粉混合均匀；

3.按常规方法制得各种口服制剂；

4.采用分光光度法检测制剂中总黄酮含量以芦丁计不小于2691mG/100g，高效液相法检测制剂中芦荟苷含量不小于25.69mg/100g。

本发明运用传统中医的作用机理，通过润肠、通便而达到消祛黄褐斑的作用。

在组方中，银杏叶含有多糖类、氨基酸、黄酮及人体所需的多种微量元素，能改善心脑血管循环、抗炎、抗病毒、抗过敏性疾病，还能延缓衰老和美容保健，促进睡眠，增强体质。银杏叶提取物中含黄酮甙和银杏苦内酯能消除人体氧化代谢所产生过量的氧自由基，从而具有抗氧化、延缓衰老的作用，有助于气行血畅、生机勃勃。

芦荟为百合科肉质草本植物，性味苦、寒，入肝、心、脾经。其寒能除热，苦能泄热燥湿。具有清肝热，泻下通便的功能。便秘是由于大肠机能减退，蠕动减少，食物在大肠中停留时间过长的表现，排出的粪便没有水分，质硬呈块状，称为松弛性便秘，由于精神紧张不安造成痉挛，所排出的粪便呈颗粒状，称为痉挛性便秘。芦荟中主要活性成分是羟基蒽醌类衍生物。包括：芦荟大黄甙、芦荟大黄素、芦荟苦素等20多种，其中芦荟大黄素是最基本的成分之一，芦荟大黄素甙在肠道中也释放出芦荟大黄素，发挥刺激性泻下作用。实验证明芦荟制剂具有较好的润肠通便作用，这与历代本草记载的芦荟泻下通便、清肝泻热功能一致。芦荟中富含的芦荟大黄素可增加小肠液的分泌，并增加脂肪酶和二肽酶的活性，同时也使大肠内的水分含量大大增加而导致大便稀软，刺激直肠和结肠，诱发大肠的蠕动，使病人在不腹泻的前提下达到自然通便的效果，从而达到美容的作用。其主要有效成分是以芦荟苷(barbaloin)为主的多种羟基蒽醌类衍生物，在这些具生物活性的有效物质协同下，芦荟具泻热导积、凉肝通便，从而具有美容祛黄褐斑的作用。

蜂胶是一种宝贵的蜂副产品，在国外被誉为“上帝赋予人类最伟大的天然物质”。蜂胶具有防治脂褐素的功能可从以下几方面阐述：①蜂胶中的黄酮类化合物具有改善血管的弹性和渗透性，舒张血管、清除血管内壁积存物，从而净化血液，降低血液粘度，改善血液循环状态，增强血液供氧能力，促进皮下组织血液循环，具有营养肌肤，增强其弹性，分解色斑的作用，从而使肌肤红润和有光泽；②各种黄酮成分其结构上的酚羟基很易被氧自由基氧化，即消除了过剩的氧自由基，抑制过氧化脂质的形成；③黄酮醇能抑制酪氨酸酶的活性，既能减少黑色素的生成，又能吸收紫外线，从而保护了皮肤；④蜂胶中的组织蛋白酶、脂肪酶等酶类物质能恢复膜结构，并且蜂胶中还含有不饱和脂肪酸及人体必需氨基酸，能够补充皮肤损失的营养物质，起到减皱、抗衰、护肤的功效；⑤蜂胶中的阿魏酸通过多种机制拮抗自由基对组织的损害；⑥蜂胶中的维生素A原、维生素C、维生素E等均为有机抗氧剂，能有效地抑制脂肪酸尤其是不饱和脂肪酸的过氧化作用。维生素E还具有促进人体血液循环、保湿滋润等作用。祛斑作用与黄酮类成分相似。维生素A和维生素E能降低紫外线对人体组织的损伤。不饱和双键具有抑制自由基的功能；⑦蜂胶中的锌、硒、锗等多种生命元素对脂褐素有一定影响。因为血清铜含量的增加可导致色斑的产生，而蜂胶中的锌具有控制血清铜的作用。有机锗能有效地提高体内SOD的活性，从而使诱发过氧化物反应的活性氧成为基态氧和双氧水。后者进一步分解使毒性解除。它不仅作用于皮肤表面，且能通过毛细管作用于皮肤的深层组织，调整皮肤微循环，使皮肤红润光亮。硒作为谷胱甘肽过氧化物酶的必要组分，与维生素E、A有协同作用，通过促进核酸蛋白质的生物合成以及增强免疫系统的功能，从而达到延缓衰老的目的；⑧蜂胶中还含有卵磷脂、矿物质、鲨烯等成分，能够软化角质层，使皮肤细嫩、富有弹性。综上所述，蜂胶祛斑、增白、抗皱的作用明显。

甲壳素与壳聚糖是天然的金属离子螯合剂。它们在体内以膳食纤维形式，抑制生物体对某些微量元素的吸收，此外也可将此类化合物与微量元素预先制成络合物，再添加到食品中，从而使人体内的微量元素水平得到平衡和调解。甲壳素与壳聚糖能与机体内胆固醇、胆汁酸等高热能类物质结合生成不能被胃液水解而又难以消化的络合物，直接抑制了这些物质的吸收，并促使它们很快排出体外，使食物的热能大大降低，这对肥胖患者的减肥十分有益。

若将本发明保健品制成软胶囊，同时添加月见草油可进一步提高本发明制剂的美容功能。

月见草又称夜来香，为柳叶科多年生草本植物，其种子油称为月见草油。月见草油中含有人体生长所必需及体内不能合成的几种多不饱和脂肪酸，如亚油酸、亚麻酸等，它是至今为止发现的唯一含有大量γ-亚麻酸的植物。在本品中用月见草油作为软胶囊的赋形剂，也考虑体内含足量γ-亚麻酸的人可维持正常体重，肥胖者则是多价不饱和脂肪酸不足所致。γ-亚麻酸具有抑制脂肪合成和降低胆固醇的作用；体内的糖类经由乙醇基酵素作用转变成脂肪，而γ-亚麻酸能抑制此种酵素的发生作用，所以可以预防体内脂肪的积蓄。

综上所述，本发明通便美容保健品配方按中医药理论，以银杏叶为君药，芦荟为臣，蜂胶为佐，甲壳素为使，既利用了银杏叶、芦荟的特性，又利用了蜂胶、甲壳素等天然资源，它们各自又都有现代药理及临床研究的依据，可达到润肠通便和祛黄褐斑的保健功能。

用本发明通便美容保健品(杏灵牌通美保软胶囊)进行毒理试验，结果显示本发明制剂安全无毒：

1.大鼠急性经口LD₅₀大于2000mg/kg.bw，判属无毒类。

2.遗传毒理学试验：Ames试验、小赎骨髓细胞微核试验和小鼠精子畸形试验三项遗传毒性试验均为阴性结果，表明本检品无致突变作用。

3.大鼠30天喂养试验受试物未引起大鼠整体健康状况、生理生化功能和器官组织形态学各重要指标的异常变化，初步估计最大无作用剂量大于2500mg/kg.bw(人体推荐量的100倍)。

用本发明通便美容保健品(杏灵牌通美保软胶囊)进行保健功能评价试验：

1.杏灵牌通美保软胶囊的通便功能检验结果表明，对小鼠体重无不良影响。在小肠运动试验中，三个剂量组的小肠推进率均明显高于模型对照组。在小鼠排便试验中，三个剂量组的首粒黑便时间明显短于模型对照组，250和500mg/kg.bw剂量组的排便总重量明显高于模型对照组，各组排便总粒数与模型对照组比较无明显差异。据评价标准，杏灵牌通美保软胶囊具有通便功能。

2.杏灵牌通美保软胶囊通便功能人体试食试验结果表明，试验期间受试者的精神、饮食、睡眠、大小便等未见异常，表明本检品对人体无不良影响。试验组受试者在试验后排便次数与试验前相比显著增加，与对照组相比亦显著增加；试验组受试者在试验后排便困难程度积分和粪便性状积分均显著低于试验前，排便困难程度积分亦显著低于对照组。按评价标准，杏灵牌通美保软胶囊具有通便功能。

3.100例黄褐斑受试者，按黄褐斑颜色、面积情况随机分为试食组和对照组(各50例)，分别食用杏灵牌通美保软胶囊和安慰剂，每日3次，每次2粒。30天后结果表明：试食组连续食用杏灵牌通美保软胶囊30天，黄褐斑颜色积分下降与试食前比较差异有显著性(P＜0.01)，与对照组比较差异也有显著性(p＜0.01)；黄褐斑面积减少与试食前比较差异有显著性(p＜0.01)，与对照组比较差异也有显著性(p＜0.01)。试食组有效34例，总有效率68％，与对照组(10％)比较，经X²检验差异有显著性(P＜0.01)。说明杏灵牌通美保软胶囊具有祛黄褐斑作用。试食杏灵牌通美保软胶囊前后，血象、肝肾功能各项检测指标均在正常范围内，也未观察到过敏及其它不良反应，说明杏灵牌通美保软胶囊对机体健康无不良影响。

具体实施方式

实施例1  杏灵牌通美保软胶囊通便作用功能试验

1.材料与方法

1.1.样品

杏灵牌通美保软胶囊，批号：20030505，样品(胶囊内容物)外观为褐色油状物，由上海杏灵科技药业股份有限公司提供，推荐成人日服用建议剂量为1.5g/人/日(60kg.bw)。

1.2.试验动物

雌性昆明小鼠，体重18g-22g，

1.3.实验方法

1.3.1.小肠运动实验

雄性昆明种小鼠50只，体重18-22g，随机分为5组，每组10只。即杏灵牌通美保软胶囊125、250、500mg/kg.bw三个剂量组(分别相当于成人建议量1.5g/人/日的5、10、20倍)，一个阴性对照组(蒸馏水20ml/kg.bw)和一个模型对照组(复方地芬诺酯5mg/kg.bw)。三个剂量组分别按不同剂量按2ml/100g.bw经口灌胃，每天一次，连续7天后，各组动物禁食不禁水16小时后，阴性对照组给蒸馏水、模型对照组和三个剂量组灌胃复方地芬诺脂(5mg/kg.bw)一次，0.5小时后，阴性对照组和模型组按2ml/100g.bw灌胃墨计(含5％活性碳和10％阿拉伯树胶粉蒸馏水混悬液)一次，三个剂量组按2ml/kg.bw灌胃含相应受试样品的墨计一次。25分钟后立即脱颈处死动物、打开腹腔取小肠上自幽门、下至回盲部，测量肠管总长和墨计推进长度(自幽门至墨计推进前沿处)按下列公式计算出墨汁推进率。

墨汁推进率(％)＝墨汁推进长度(cm)/小肠总长度×100％

1.3.2.排便时间、粪便粒数和粪便重量测定

雄性昆明种小鼠50只，体重18-22g，随机分为5组，每组10只。即杏灵牌通美保软胶囊125、250、500mg/kg.bw三个剂量组分别相当成人建议量1.5g/人/口的5、10、20倍，一个阴性对照组(蒸馏水)和一个模型对照组(复方地芬诺酯10mg/kg.bw)。三个剂量组分别按不同剂量、按2ml/100g.bw经口灌胃，每天一次、连续7天后，各组动物禁食不禁水16小时。阴性对照组给蒸馏水、模型对照组和三个剂量组按10mg/kg.bw灌胃复方地芬诺酯一次，0.5小时后，阴性对照组和模型对照组按2ml/100g.bw灌胃墨汁(含5％活性碳和10％阿拉伯树胶粉的蒸馏水混悬液)一次、三个剂量组按2ml/100g.bw灌胃含相应受试样品的墨汁一次。记录每只动物从灌墨汁开始至排首粒黑便的时间，以及5小时内排黑便的总粒数和总重量。

2.结果

2.1.小肠运动实验

杏灵牌通美保软胶囊对小鼠体重的增长无不良影响。见表1。

表1  杏灵牌通美保软胶囊对小鼠体重增长的影响

经方差分析，阴性对照组和三个剂量组墨汁推进率明显高于模型对照组(P＜O.05，P＜O.01)。即本检品小鼠小肠运动实验为阳性结果。见表2。

表2  杏灵牌通美保软胶囊对小鼠小肠运动的影响

^**与空白对照比较P＜O.01；^△与模型对照比较P＜O；05；^△△与模型对照比较P＜O.01

2.2.小鼠排便时间、粪便粒数和粪便重量测定

杏灵牌通美保软胶囊对小鼠体重的增长无不良影响。见表3。

表3  杏灵牌通美保软胶囊对小鼠体重增长的影响

经方差分析三个受试物剂量组排首粒黑便时间明显短于模型组(P＜0.01)。排便总重量中，高剂量组明显高于模型对照组(P＜0.01)，而排黑便总粒数各组与模型组比较无差异F＝1.84、P＞0.05。即本检品小鼠排便试验为阳性结果。见表4。

表4杏灵牌通美保软胶囊对小鼠排便功能的影响

^**与空白对照比较P＜0.01^△△与模型比较P＜0.01

3.小结

杏灵牌通美保软胶囊的通便功能检验结果表明，本检品对小鼠体重无不良影响。在小肠运动试验中，三个剂量组的小肠推进率均明显高于模型对照组。在小鼠排便试验中，三个剂量组的首粒黑便时间明显短于模型对照组，250和500mg/kg.bw剂量组的排便总重量明显高于模型对照组，各组排便总粒数与模型组比较无明显差异。据评价标准，杏灵牌通美保软胶囊具有通便功能。

实施例2  杏灵牌通美保软胶囊通便功能人体试食试验

1.材料与方法

1.1.样品：杏灵牌通美保软胶囊由上海杏灵科技药业股份有限公司提供，批号：0030505。

包装规格为0.5g×50粒/瓶，人体推荐摄入量为3g/人/日。

1.2.受试人群：按自愿原则选择符合下述标准者。

1.2.1.受试者的选择标准：

经体检合格具有便秘症状(排便次数减少和粪便硬度增加：大便一周少于3次，以及排便困难并伴有疼痛)的自愿受试成人。

1.2.2.受试者排除标准：

不能经口进食者或不能按规定服用受试样品者、主诉不清者、体质虚弱无法进行试验者、30天内进行过外科手术引起便秘症状发生者、因严重器质病变引起的近期排便困难者(结肠癌，严重的肠炎、肠梗阻，炎症性肠病等)、30天内发生过急性胃肠道疾病者、孕期及经期妇女、合并有心血管、肝、肾和造血系统等严重全身疾病者、有其它伴随疾病正在治疗者。

1.3.试验设计及分组：

按受试者的便秘症状(排便次数、粪便性状、症状持续时间等)将受试人群随机分为对照组(51人)和试验组(54人)。两组受试者年龄、性别、日常饮食、便秘原因相近。观察受试者试验前6天的一般状况、排便次数、排便困难程度、粪便性状等情况，每日进行记录，同时记录受试者每日进食纤维类食物的比例。采用自身前后对照和组间对照两种研究方法。

1.4.服用剂量及时间：

试食组每人每日口服三次，每次2粒，连续服用时间7天。对照组不作任何处理。试验期间受试者不改变原来的饮食习惯，正常饮食。观察受试者在试验期间的一般状况、排便次数、排便困难程度、粪便性状等情况，每日进行记录，同时记录受试者每日进食纤维类食物的比例及试验期间有无不良反应。

1.5.观察指标

1.5.1.一般状况：包括受试者的精神、睡眠、饮食、大小便、血压等。

1.5.2.安全性指标：血常规、尿常规、大便常规、X线胸部透视、腹部B超、心电图、肝功能、肾功能等。

1.5.3.功效性指标：

1.5.3.1.每日排便次数：记录受试者试食前后排便次数的变化，以实际排便次数为参数进行统计：

1.5.3.2.排便状况：根据排便困难程度(腹痛或肛门烧灼感、下坠感、不适感，有否便频但排便困难而量少等症状)分为I-IV级，统计积分值。

I级(0分)：排便正常

II级(1分)：仅有下坠感、不适感

III级(2分)：下坠感、不适感明显，或有便频但排便困难而量少，较少出现腹痛或肛门烧灼感

IV级(3分)：经常出现腹痛或肛门烧灼感，影响排便

1.5.3.3.粪便性状：根据布里斯托(Bristol)粪便性状分类法将粪便性状分为I-III级。

I级(0分)：像香肠或蛇，平滑而且软；像香肠，但在它的表面有裂痕；软的团块，有明显的边缘(容易排出)

II级(1分)：香肠形状，但有团块；松散的块状，边缘粗糙，像泥浆状的粪便

III级(2分)：分离的硬团，像果核(不易排出)

1.6.实验数据统计分析：使用医学百科全书统计软件包(PEMS3.0)进行统计分析。各指标试验前后差异的比较采用配对t检验。试验前、后试食组和对照组组间差异的比较采用两样本均数t检验，方差不齐时采用t’检验。

2.结果

2.1.一般状况：试验期间受试者的精神、饮食、睡眠、大小便等均未见异常。

2.2.安全性指标观察结果：受试者心率、血压、心电图、X线胸部透视、腹部B超、血常规、血生化指标未见异常。

2.3.功效性指标观察结果：

2.3.1.试验前后排便次数变化情况：见表5。试食组试验前后自身比较排便次数显著增加(P＜0.01)。试验后试食组与对照组相比排便次数亦显著增加(P＜0.05)。

表5试验前后排便次数变化情况(X±SD)

项目	对照组(N＝51)		试食组(N＝54)
					试验前	试验后	试验前	试验后
	排便次数	4.27±1.70	4.35±1.73	3.78±1.54					5.15±1.42#*

注：自身前后比较：^#P＜0.01组间比较：^*P＜0.05

2.3.2.试验前后排便困难程度变化情况，见表6。试食组试验前后自身比较排便困难程度积分显著下降(P＜0.01)。试验后试食组与对照组相比排便困难程度积分亦显著下降(P＜0.01)。

表6试验前后排便困难程度积分变化情况(X±SD)

项目	对照组(N＝51)		试食组(N＝54)
					试验前	试验后	试验前	试验后
	排便困难程度	5.86±3.65	6.02±3.66	4.74±2.35					3.94±2.10#*

注：自身前后比较：^#P＜0.01；组间比较：^*P＜0.01

2.3.3.试验前后粪便性状变化情况，见表7。试食组试验前后自身比较粪便性状积分显著下降(P＜0.05)。试验后试食组与对照组相比粪便性状积分亦有所降低，但无统计学意义(P＜0.05)。

表7试验前后粪便性状积分变化情况(X±SD)

项目	对照组(N＝51)		试食组(N＝54)
					试验前	试验后	试验前	试验后
	粪便性状	5.06±2.60	4.90±2.66	4.57±2.21					4.00±2.10#

注：自身前后比较：^#P＜0.05

3.小结

杏灵牌通美保软胶囊通便功能人体试食试验结果表明，试验期间受试者的精神、饮食、睡眠、大小便等未见异常，体检亦未见异常，表明本检品对人体无不良影响。试验组受试者在试验后排便次数与试验前相比显著增加，与对照组相比亦显著增加。试验组受试者在试验后排便困难程度积分和粪便性状积分均显著低于试验前，排便困难程度积分亦显著低于对照组。按评价标准，杏灵牌通美保软胶囊具有通便功能。

实施例3  杏灵牌通美保软胶囊祛斑功能人体试食试验

1.材料和方法

1.1.样品

杏灵牌通美保软胶囊1号、2号，均由上海杏灵科技药业股份有限公司提供，人体推荐摄入量为3克/日。安慰剂的外观色泽、推荐摄入量均与受试物相同。

1.2.受试对象：采用组间对照设计和自身对照设计。100例黄褐斑受试者均为女性，年龄在18-65岁，无严重心、肝、肾等并发症，按黄褐斑颜色、面积情况随机分为试食组和对照组，并尽可能考虑影响结果的主要因素如户外活动情况、性别、年龄等，进行均衡性检验。

1.2.1.纳入标准：经体检符合下列条件的自愿受试者。

1.2.1.1.面部淡褐色至深褐色，界限清楚的斑片，通常对称性分布，无炎症表现及鳞屑；

1.2.1.2.无明显自觉症状；

1.2.1.3.主要发生在青春期后，女性多发；

1.2.1.4.病情有一定季节性，夏重冬轻；

1.2.1.5.无明显内分泌疾病，并排除其它疾病引起的色素沉着。

1.2.2.排除标准：

1.2.2.1.年龄在18岁以下或65岁以上者，妊娠或哺乳期妇女，过敏体质及对本品过敏者；

1.2.2.2.合并有心、肝、肾和造血系统等严重疾病及内分泌疾病，精神病患者；

1.2.2.3.嗜酒者或吸烟者；

1.2.2.4.短期内服用与受试功能有关的物品，影响到对结果的判断者；

1.2.2.5.未按规定服用受试样品，无法判断疗效或资料不全影响疗效或安全性判断者。

1.3.试食方法：100例黄褐斑受试者，随机分为试食组和对照组。试食组服杏灵牌通美保软胶囊，每日3次，每次2粒，每粒0.5克，连续观察30天。对照组服安慰剂，剂量与试食组相同。两组受试者在试验期间停止使用其它口服及外用有关养颜祛斑的用品。试验期间不改变原来的饮食习惯，正常饮食。

1.4.仪器与试剂：F-820型血球计数仪，MIDIRON尿十项分析仪(德国产)，OLympus全自动生化仪(日本产)，型号AU600，生化试剂盒全部由中生公司提供。

2.观察指标

2.1.安全性指标

2.1.1.一般状况：包括精神、睡眠、饮食、大小便、血压等；

2.1.2.血、尿、便常规检查；

2.1.3.肝肾功能检查；

2.1.4.心电图、腹部B超、X线胸部透视(仅试验前检查一次)。

2.2.功效性指标

2.2.1.颜面部黄褐斑面积大小检测：用标尺测量受试前后整个颜面部黄褐斑的面积(cm²)

2.2.2.颜面部黄褐斑颜色深浅检测：按照中国科学院地理研究所设计研制，测绘出版社1992年出版的《实用标准色卡》(第一版)中的棕色(Y+M+BK即黄+品红+黑的叠色)色卡为黄褐斑深浅的判断标准：I度(15、20、5)，II度(30、40、10)，m度(40、60、15)。

3.试验数据统计

结果用均值±标准差(x±SD)表示，试食前后自身比较用配对t检验，组间比较用成组t检验，百分率用X²检验。

4.功效判定

4.1.对试食前后黄褐斑颜色积分和面积变化进行统计，同时计算有效率。色卡I度、II度、III度分别计1分，2分和3分。

4.2.功效判定标准

4.2.1.有效：黄褐斑颜色下降I度，面积减少＞10％，且不产生新黄褐斑；

4.2.2.无效：黄褐斑颜色及面积无明显变化。

5.结果

5.1.一般情况：共观察100例，均为女性。其两组观测前一般情况比较，见表8。试食前两组各项指标相比差异无显著性，具有可比性。

表8试食前一般情况比较

分组	例数(n)	年龄	黄褐斑颜色(积分)	黄褐斑面积(em2)
					对照组试食组	5050	37.26±6.6936.94±6.64	2.00±0.732.02±0.59	28.35±17.3127.82±16.77

5.2.试食前后两组黄褐斑变化情况：

5.2.1.两组黄褐斑颜色变化情况，见表9，试食后试食组黄褐斑颜色积分平均下降0.68±0.47度，与试食前比较差异有显著性(P＜0.01)，与对照组比较差异也有显著性(P＜0.01)。

表9黄褐斑颜色变化比较(积分，X±SD)

组别	例数(n)	试食前	试食后	差值
					对照组试食组	5050	2.00±0.732.02±0.59	1.90±0.711.34±0.52*#	0.10±0.300.68±0.47#

注：自身对照^*P＜0.01；组间对照^#P＜0.01

5.2.2.两组黄褐斑面积变化情况，见表10，试食后试食组黄褐斑面积平均减少4.04±3.74cm²，与试食前比较差异有显著性(P＜0.01)，与对照组比较差异也有显著性(P＜0.01)。

表10黄褐斑面积变化比较(cm²，X±SD)

组别	例数(n)	试食前	试食后	差值
					对照组试食组	5050	28.35±17.3127.82±16.77	27.63±16.0523.78±14.16*	0.85±2.614.04±3.74#

注：自身对照^*P＜0.01；组间对照^#P＜0.01

5.3.功效评定，见表11，两组总有效率经X²检验差异有显著性(P＜0.01)。

表11  祛黄褐斑功效比较

组别	例数(n)	有效	无效	总有效率％
					对照组试食组	5050	534	4516	10.0068.00

5.4.安全性监察，见表12，食用受试物一个月，两组血象、肝肾功能各项监测指标均在正常范围内，说明杏灵牌通美保软胶囊对机体健康无明显损害。

表12试验前、后两组血象、血脂、血糖、肝肾功能的变化(X±SD)

项目	试食组(n＝50)                                        对照组(n＝50)
					试验前	试验后	试验前	试验后
	红细胞(×1012/L)白细胞(×109/L)血红蛋白(g/L)胆固醇(mmol/L)	4.71±0.495.93±1.49135.8±15.624.68±0.40	4.55 ±0.345.88±1.17129.77±21.954.76 ±0.52	4.56±0.445.45±1.32132.6±13.704.61±0.53					4.65±0.455.53±1.11135.18±12.184.55±0.86

甘油三酯(mmol/L)高脂蛋白(mmol/L)血糖(mmol/L)血清总蛋白(g/L)血清白蛋白(g/L)谷丙转氨酶(u/L)谷草转氨酶(u/L)尿素氮(mmol/L)肌酐(umol/L)

1.61±0.451.45±0.245.03±0.5973.02±1.5943.22±1.5124.80±7.5319.30±6.524.74±0.7180.32±11.84

1.80±0.551.41±0.215.09±0.7172.89±1.6442.97±1.6523.16±8.1519.10±6.504.80±0.7078.24±10.44

1.41±0.451.49±0.274.85±0.6372.24±2.1742.58±1.7621.30±5.1520.12±6.894.56±0.5385.43±12.81

1.48±0.441.470.274.74±0.5672.50±2.0043.26±1.9321.72±6.1919.30±6.574.43±0.7775.08±13.02

6.结论

100例黄褐斑受试者，按黄褐斑颜色、面积情况随机分为试食组和对照组(各50例)，分别食用杏灵牌通美保软胶囊和安慰剂，每日3次，每次2粒。30天后结果表明：试食组连续食用杏灵牌通美保软胶囊30天，黄褐斑颜色积分下降与试食前比较差异有显著性(P＜0.01)，与对照组比较差异也有显著性(P＜0.01)；黄褐斑面积减少与试食前比较差异有显著性(P＜0.01)，与对照组比较差异也有显著性(P＜0.01)。试食组有效34例，总有效率68％，与对照组(10％)比较，经X2检验差异有显著性(P＜0.01)。说明杏灵牌通美保软胶囊具有祛黄褐斑作用。试食杏灵牌通美保软胶囊前后，血象、肝肾功能各项检测指标均在正常范围内，也未观察到过敏及其它不良反应，说明杏灵牌通美保软胶囊对机体健康无不良影响。

实施例4   软胶囊制备

银杏叶    7000g

芦荟      7000g

蜂胶      840g

甲壳素    1680g

月见草油  1400g

麻油      1400g

紫苏油    2573g

蜂蜡      280g

大豆磷脂  280g

1.银杏叶、芦荟经过鉴定检验、称重，投入多功能提取罐中，加入12倍量的70％的乙醇，浸泡1小时后，加热煎煮1小时，残渣加10倍量水再同法提取1小时，合并两次提取液；

2.管式高速离心机：8000转/分高速离心；上清液减压浓缩至比重为1.15(60℃)；

3.药液喷雾干燥，得干粉1507g；

4.将上述喷雾干燥粉与蜂胶、甲壳素(分别过200目筛)混合均匀，得混合粉4027g；

5.上述混合粉与月见草油、麻油及软胶囊的基质混合并且强力搅拌，得混悬物(内容物)10kg；

6.灭菌处理：上述混合物进行微波灭菌处理，微波频率2450MHz，灭菌时间5min；

7.压制：灭菌好的干燥粉进行功效成分含量、理化、微生物的测定，符合质量标准后在十万级条件下的空间，将上述的内容物压制成软胶囊，其中主要的生产步骤为：

(1)化胶：化胶是软胶囊压制的第一道工序，化胶要将所有的工具、容器、化胶锅等用75％浓度的酒精消毒。将化胶锅加热到60℃，投入明胶、甘油、蒸馏水，继续加热到一定的程度，抽真空，检测胶液，测其粘度指标。放胶、过滤、稳胶；

(2)压丸：稳胶后一段时间进行压丸操作，压丸前先用75％酒精试压1小时，以达到消毒的作用，同时调整压力参数，然后进行压丸；

(3)干燥：主机压制的胶丸经过输送机进入滚笼干燥，每节滚笼内放置75％酒精擦丸布，进行工序中的每次消毒，共计三次。每节滚笼内停留1小时，当滚笼内的胶丸更换一次时，擦丸布就及时更换一次。从滚笼倾出的胶丸进入干燥盘，干燥好的胶囊用75％的酒精清洗，进行第四次消毒；

8.干燥：将成形的软胶囊(每粒0.5g)进行干燥(≤60℃)，得成品；

经检测总黄酮含量为2701mg/100g，芦荟苷含量28.45mg/100g。

实施例5制剂中总黄酮测定

1.芦丁标准对照品溶液：精密称取在105℃减压干燥至恒重的芦丁对照品15.0mg，加甲醇溶解并定容至100mL，配成150μg/mL芦丁标准溶液。

2.标准曲线

精密吸取标准芦丁标准溶液0.0、0.50、1.00、2.00、3.00、4.00mL，相当于芦丁0、75、150、300、450、600μg移入10mL刻度比色管中，各加30％乙醇至5ml，各加5％NaNO₂溶液0.3ml，摇匀放置5min，各加10％Al(NO₃)₃溶液0.3ml，摇匀，再放置6min，加1.0mol/LNaOH溶液2ml，用30％乙醇定容至刻度，摇匀放置10-20min，在510nm波长处，以零管溶液作空白分别测定吸光度，以吸光度对浓度进行回归，绘制标准曲线。

3.供试品溶液的制备

称取1.0g样品，(实施例4方法制得内容物)用滤纸包紧，置于平底烧瓶中，加入50-100mL70％乙醇，浸润后，在80℃水浴下回流2h，至黄酮类化合物基本提取完全。粗提液冷却后，减压抽滤，并用少量25％乙醇溶液洗涤滤渣，合并滤液。在50℃下减压蒸馏，除去其中的乙醇，直至烧瓶内溶液呈无醇味。倒出烧瓶内溶液，并用30mL热水分3次洗涤烧瓶，抽滤后，将滤液倒入分液漏斗中，以75mL氯仿分3次萃取脱脂，待完全分层后，收集各次下层水溶液并定容至50mL。

称取1-2g经预处理的聚酰胺树脂粉末，湿法装柱，用水饱和。吸取上述脱脂后的水溶液1-2mL，沿层析柱慢慢滴入柱内，放置一定时间，待测液被充分吸附后，用70％乙醇或甲醇洗脱，流速为1.0mL/min，至流出液基本无色，一般收集10mL即可。上述洗出液用洗脱剂定容后即可用于测定。

4.样品测定

精密吸取样品提取液1.00ml于10ml比色管中，按标准曲线制备操作步骤于510nm处进行吸光度的测定。

5.计算

$X=\begin{array}{c}m1\×V2\\ ------------------\\ m\×V2\×106\end{array}\×100=2701\mathrm{mg}/100g$

式中：X：样品中总黄酮的含量(以芦丁计)，mg/100g；

m1：依据标准曲线计算出被测液中黄酮含量，μg；

m：试样的质量，g；

V1：待测液分取的体积，mL；

V2：待测液的总体积，mL。

实施例6制剂中芦荟苷测定

1.芦荟苷标准溶液：准确称取10mg芦荟苷标准品，加流动相溶解并定容至100mL，浓度为100μg/mL。

2.样品处理

准确称取样品2.0g(实施例4方法制得样品内容物)左右于250mL的碘量瓶中，加入20％甲醇水溶液50mL，置于超声波中超声10分钟，加入氯仿50mL，振床振摇15分钟，以5000转/分速度离心分离后，弃去氯仿层，重复用氯仿50mL萃取两次，弃去氯仿层，上层水相用乙酸乙酯提取3次，合并

乙酸乙酯层，旋转蒸发仪55℃蒸干。50％甲醇水溶液定容至5mL，0.3μm微孔膜过滤后，进样20μL。

3.色谱分离条件

色谱柱：Luna 5um C₁₈(2)，250×4.60mm。

流动相：甲醇∶水(55∶45)。

流速：1mL/min。

柱温：40℃。

检测波长：293nm。

4.样品测定

准确吸取样品处理液和标准液各20μL注入高效液相色谱仪进行分离，以其标准溶液峰的保留时间定性，以其峰面积求出样液中被测物质的含量。

5.结果计算

$X=\begin{array}{c}{A}_1\×C\×V\\ ----------------------\\ A_2\×m\end{array}=28.45\mathrm{mg}/100g$

式中：X：样品中芦荟苷的含量(mg/100g)；

A₁：试样中芦荟苷的峰面积；

C：标准溶液的质量浓度(mg/mL)；

A₂：标准溶液中芦荟苷的峰面积；

V：试样定容体积(mL)；

m：试样的质量(g)。

实施例  7片剂的制备

将0.8kg干燥银杏叶，1.2kg干燥芦荟同实施例4方法提取制得喷雾干燥粉205g，加蜂胶100g，甲壳素150g，淀粉295g，糊精250g，微晶纤维素50g，分别过80目筛，混合均匀，以稀乙醇为润湿剂制粒，干燥整粒，干拌润滑剂硬脂酸镁10g，压片，每片0.5g。

实施例  8口服液制备

将1kg干燥银杏叶，1.8kg干燥芦荟，加28L水浸泡后加热提取1小时，残渣加22L水同法提取，合并两次提取液，加蜂胶150g，甲壳素200g，糖精15g苯甲酸钠25g，搅拌溶解，过滤，加水至40L灌装，封口，灭菌，包装。

Claims (3)

1、一种具有通便美容功能的保健品，其特征在于该保健品是由主要含银杏叶、芦荟、蜂胶、甲壳素的活性成分，与添加剂和药用辅料制成的口服制剂；

其中各主要活性成分占活性成分总重量的百分含量为：银杏叶30-60％、芦荟30-60％、蜂胶4-8％、甲壳素6-12％；

主要活性成分是将银杏叶、芦荟用水和/或乙醇浸泡后回流提取，浓缩，喷雾干燥得浸膏粉，再与蜂胶、甲壳素混合制得。

2、根据权利要求1所述的具有通便美容功能的保健品，其特征在于其中所述的添加剂是指对活性成分有辅助增效作用的物质或营养剂，该物质或营养剂为月见草油，紫苏油和麻油。

3、根据权利要求1所述的具有通便美容功能的保健品的制备方法，其特征在于所述保健品的制备方法包括下列步骤：

1)银杏叶、芦荟用水和/或乙醇浸泡后回流提取，提取液浓缩，喷雾干燥得浸膏粉；

2)将蜂胶、甲壳素过筛，与上述浸膏粉混合均匀；

3)按常规方法制得各种口服制剂；

4)采用分光光度法检测制剂中总黄酮含量以芦丁计不小于2691mg/100g，高效液相法检测制剂中芦荟苷含量不小于25.69mg/100g。