CN1313751A - 美白用皮肤外用剂 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及美白用皮肤外用剂,其特征在于,含有茄科(Solanaceae)睡茄(Withania)属植物的提取物。可以提供具有优良美白效果的美白用皮肤外用剂。
Description
技术领域
本发明涉及美白用皮肤外用剂。更详细的说，本发明涉及显著改善了皮肤美白效果的、高安全性的美白用皮肤外用剂。
背景技术
皮肤的老年斑、雀斑等色素沉着是以荷尔蒙异常或紫外线刺激作为契机，表皮色素细胞内形成黑色素，过剩地沉着于表皮而产生的。
在表皮基层的黑素细胞(melanocyte)内的黑色素生成颗粒(黑素体，melanosome)中产生这种黑色素，生成的黑色素摄入表皮细胞，向表皮扩散。推测这种黑素细胞中的生化反应如下所述。
也就是说，必须氨基酸酪氨酸在酶酪氨酸酶的作用下，经多巴成为多巴醌，该物质在酶的或非酶的氧化作用下，经红色色素和无色色素，变化成为黑色的黑色素的过程即为黑色素的生成过程。
因此，抑制反应中第一阶段酪氨酸酶的作用对于抑制黑色素的产生是重要的。
以前，为了防止老年斑、雀斑，对于抑制黑色素生成的物质进行了研究，采取了例如大量投给L-抗坏血酸的方法，注射谷胱甘肽等的方法，或者将氢醌、曲酸、半胱氨酸等配入软膏、雪花膏、洗剂等皮肤外用剂中局部涂敷等的方法。
但是，这些物质大多在稳定性、安全性、气味方面存在问题，另外，能够期待的效果差，尚不能满足需要。
本发明者等鉴于上述情况，为了得到具有优良美白效果、稳定性和安全性高的皮肤外用剂，反复进行了悉心研究，结果发现茄科(Solanaceae)睡茄(Withania)属植物的提取物具有抑制酪氨酸酶活性的效果以及抑制黑色素生成的作用，如果在皮肤外用剂中配合该提取物，能够得到具有优良美白效果的皮肤外用剂，从而完成了本发明。
本发明的目的在于提供具有优良美白效果、稳定性和安全性高的美白用皮肤外用剂。
发明公开
也就是说，本发明提供美白用皮肤外用剂，其特征在于，含有茄科(Solanaceae)睡茄(Withania)属植物的提取物。
另外，本发明提供上述美白用皮肤外用剂，其特征在于，所述茄科(Solanaceae)睡茄(Withania)属植物是催眠醉茄(通用名：Musali、学名：Withania somnifera)。
进一步，本发明提供上述美白用皮肤外用剂，其特征在于，所述茄科(Solanaceae)睡茄(Withania)属植物提取物的含量相对于美白用皮肤外用剂总量为0.0001～20.0重量％。
另外，本发明提供上述美白用皮肤外用剂，其特征在于，所述茄科(Solanaceae)睡茄(Withania)属植物提取物的含量相对于美白用皮肤外用剂总量为0.0001～20.0重量％。
此外，本发明提供皮肤美白方法，其特征在于，将上述美白用皮肤外用剂施用于皮肤。
另外，本发明提供黑色素生成抑制剂，其特征在于，含有茄科(Solanaceae)睡茄(Withania)属植物的提取物。
进一步，本发明提供上述黑色素生成抑制剂，其特征在于，所述茄科(Solanaceae)睡茄(Withania)属植物是催眠醉茄(惯用名：Musali、学名：Withania somnifera)。
另外，本发明提供酪氨酸酶活性抑制剂，其特征在于，含有茄科(Solanaceae)睡茄(Withania)属植物的提取物。
进一步，本发明提供的上述酪氨酸酶活性抑制剂，其特征在于：所述茄科(Solanaceae)睡茄(Withania)属植物是催眠醉茄(惯用名：Musali、学名：Withania somnifera)。
附图的简单说明
图1是表示催眠醉茄提取物的酪氨酸酶启动子活性变化的图。
图2是表示催眠醉茄提取物的酪氨酸酶蛋白表达量变化的图。
发明的最佳实施方式
下面详细说明本发明的构成。
本发明中使用的茄科(Solanaceae)睡茄(Withania)属植物优选催眠醉茄(惯用名：Musali、学名：Withania somnifera)。催眠醉茄(惯用名：Musali、学名：Withania somnifera)是分布在尼泊尔、印度西部和南非的茄科睡茄属植物。茄科(Solanaceae)睡茄(Withania)属植物提取物的黑色素生成抑制作用是本发明者首次发现的效果，其在美白剂、美白用皮肤外用剂方面的应用尚完全不知道。
本发明中使用的提取物是将上述植物的叶、包含地下茎在内的茎、果实等植物全草与提取溶剂同时浸渍或加热回流后，过滤，浓缩后使用的。本发明中使用的提取溶剂只要是通常用于提取的溶剂，任何溶剂均可，例如可以单独使用或组合使用乙醇等醇类、含水醇、丙酮、乙酸乙酯等有机溶剂。
本发明的皮肤外用剂中配合的茄科(Solanaceae)睡茄(Withania)属植物提取物的含量并没有特别限定，一般相对于皮肤外用剂总量，作为干燥物含有0.0001～20重量％，优选0.001～10重量％、特别优选0.01～7重量％。该含量如果不足0.0001重量％，就有缺乏皮肤外用剂美白效果的倾向，相反，即使含量超过20重量％，实质上也不能期待效果增加，而且在皮肤外用剂的配合方面有变困难的倾向。
本发明美白用皮肤外用剂中除上述必须成分之外，通常根据需要可以适当配合化妆品或药品等皮肤外用剂中使用的其他成分，例如油分、湿润剂、紫外线吸收剂、抗氧化剂、表面活性剂、防腐剂、保湿剂、香料、水、醇、增粘剂等，可以采用常规方法制造。
本发明皮肤外用剂的剂型是任意的，例如化妆水等可溶解系，乳液、膏霜等乳化系，软膏、分散液、面膜等现有皮肤外用剂所采用的任意剂型。
实施例
下面通过实施例更具体的说明本发明，但本发明的技术范围并不受这些实施例限定。另外，下述实施例中的含量为重量％。
首先，在实施例之前，首先说明本发明中使用的植物提取物的黑色素生成抑制效果、酪氨酸酶活性抑制效果和美白效果的试验方法及评价方法，含量表示重量％。
1、催眠醉茄提取物的调制
室温下，将催眠醉茄(惯用名：Musali、学名：Withania somnifera)的原草(根部分)在甲醇中浸渍1周，浓缩提取液，得到催眠醉茄提取物。将该提取物溶解在DMSO中达到1重量％，稀释该溶液，调整浓度，在以下的试验和实施例中使用。
2、细胞培养方法
使用来源于小鼠的B16黑素瘤培养细胞。用含10％FBS和茶碱(0.09mg/ml)的Eagle EM培养基，在CO2恒温箱(95％空气、5％二氧化碳)内，在37℃的条件下培养。培养24小时后，添加试样溶液使最终浓度(按提取干燥物换算的浓度)达到10-2～10-5重量％，在进一步培养3天，按照下述方法视觉判断黑素生成量，并测定酪氨酸酶活性。
3、黑素生成量的视觉判断
在96孔板的盖上设置扩散板，用倒立显微镜观察细胞内的黑素量，与未添加植物提取物的试样(基准)的情况相比。其结果如“表1”所示。
另外，作为比较例，对已知具有黑素生成抑制作用的ケイガイ(唇形科野芝麻属)提取物进行与上述相同的试验。其结果一并列于“表1”。
<判定基准>
○：与基准相比为白(与基准相比黑素量少)
△：与基准相比稍微发白(与基准相比黑素量稍少)
×：与基准程度相同(与基准相比黑素量程度相同)
4、酪氨酸酶活性的测定
测定前除去孔中的培养基，用PBS100μl洗涤2次。在各孔中加入45μl含有1％TritonX(ロ-ム·アンド-ハ-ス公司制商品名，表面活性剂)的PBS。使板震动1分钟，充分破坏细胞膜，小平板读数器测定475nm处的吸光度，作为0分钟时的吸光度。之后，迅速加入5μl的10mM L-多巴溶液，移至37℃的恒温箱，使之反应60分钟。使板震动1分钟，测定60分钟时的吸光度(475nm)。以相对于未添加植物提取物的试样(对照)的场合0分钟时和60分钟时的吸光度差，植物提取物添加试样的上述吸光度差的减少量作为酪氨酸酶活性抑制率(％)。其结果如“表1”所示。
另外，作为比较例，对已知具有酪氨酸酶活性抑制作用的ケイガイ乙醇提取物进行与上述相同的试验。其结果一并列于“表1”。另外，表中-是指与对照相比在显著水平5％以内确认有显著差异。
表1
由表1可知催眠醉茄提取物与ケイガイ提取物相比，具有优良的黑素生成抑制效果以及酪氨酸酶活性抑制效果。
5、美白效果试验
[试验方法]
以66名在夏季阳光下照射4小时(1日2小时，2天)被测者的上臂内侧皮肤作为对象，在阳光照射日的5日后，早晚各1次涂敷各试样4周。将被测分成11组，每组6名，配制下述处方的洗剂，将其作为试样进行试验。
“洗剂”
(醇相) 重量％
95％乙醇 25.0
聚氧乙烯(25摩尔)硬化蓖麻油醚 2.0
防腐剂、抗氧化剂 适量
香料 适量
药剂(‘表2’记载) ‘表2’记载量
(水相)
甘油 2.0
丙二醇 1.0
离子交换水 余量
(制备方法)制备水相、醇相后溶解制成。
[评价方法]
基于下述判断基准，判断使用后颜色变淡的效果。
(判断基准)
◎：被测者中显示出显著效果和有效的比例在80％以上时。
○：被测者中显示出显著效果和有效的比例在50％～不足80％时。
△：被测者中显示出显著效果和有效的比例在30％～不足50％时。
×：被测者中显示出显著效果和有效的比例不足30％时。
配制由上述试验方法记载的配方构成的皮肤外用剂，使用‘表2’记载的药剂，比较美白效果。结果如‘表2’所示。
表2
| 药剂 | 含量(重量％) | 效果 |
| 未添加 | 0 | × |
| 氢醌 | 1.0 | △ |
| 催眠醉茄提取物 | 0.1 | △ |
| 催眠醉茄提取物 | 1.0 | ○ |
| 催眠醉茄提取物 | 10.0 | ◎ |
由‘表2’可知，配有催眠醉茄提取物的洗剂具有优良的皮肤美白效果。
其次，对于酪氨酸酶活性的抑制效果，通过下述(1)和(2)测定，确认抑制酪氨酸酶表达的效果。
(1)酪氨酸酶启动子活性变化的测定
将酪氨酸启动子结合在荧光素酶基因上的载体基因导入来源于小鼠的B16黑素瘤培养细胞中。3小时后，添加如上所述得到的催眠醉茄提取物(0,0.001,0.002％)，48小时后溶解细胞，测定启动子活性。作为内标，导入载体半乳糖苷酶基因，使活性值标准化。这一结果如图1所示。作为比较，同时记载SV40启动子、TFEC基因启动子活性变化。另外，启动子活性量以未添加催眠醉茄提取物的场合为1。由图1可知催眠醉茄提取物可以抑制酪氨酸酶启动子活性量。
(2)酪氨酸酶蛋白表达量变化的测定
在来源于小鼠的B16黑素瘤培养细胞中添加催眠醉茄提取物(0,0.001,0.002％)，24小时后溶解细胞。将其用作抗酪氨酸酶抗体，采用蛋白质印迹法，检测出酪氨酸酶蛋白谱带，用密度计将其强度数值化，如图2所示。作为比较，同时记载ERK2以及肌动蛋白量。另外，蛋白量以未添加催眠醉茄提取物的场合为1。由图2可知催眠醉茄提取物可以抑制酪氨酸酶蛋白表达量。
由上述(1)和(2)的结果可以确认催眠醉茄提取物具有在启动子水平抑制酪氨酸酶表达量的效果。
以下，作为实施例列举出本发明的各种剂型的美白用皮肤外用剂的配方例。这些均是皮肤美白效果优良，稳定性和安全性高的美白用皮肤外用剂。含量表示重量％。
实施例1美白用干性膏霜
硬脂酸 6.0
脱水山梨醇单硬脂酸酯 2.0
聚氧乙烯(20摩尔)
脱水山梨醇单硬脂酸酯 1.5
熊果苷 7.0
亚硫酸氢钠 0.03
丙二醇 10.0
催眠醉茄提取物 0.0001
防腐剂、抗氧化剂 适量
香料 适量
离子交换水 余量
(制备方法)
在离子交换水中加入催眠醉茄提取物和熊果苷以及丙二醇，加热，保持在70℃(水相)。混合其他成分，加热融解，保持在70℃(油相)。在水相中加入油相进行预乳化，用高速混合器乳化均匀后，充分搅拌的同时冷却至30℃。
实施例2 美白用中性膏霜
硬脂醇 7.0
硬脂酸 2.0
加氢羊毛脂 2.0
4-叔丁基-4’-t-甲氧基二苯甲酰基甲烷 3.5
角鲨烷 5.0
2-辛基十二烷基醇 6.0
聚氧乙烯(25摩尔)鲸蜡醇醚 3.0
甘油单硬脂酸酯 2.0
胎盘提取物 0.1
丙二醇 5.0
催眠醉茄提取物 10.0
香料 适量
防腐剂、抗氧化剂 适量
离子交换水 余量
(制备方法)
在离子交换水中加入催眠醉茄提取物、胎盘提取物以及丙二醇，加热，保持在70℃(水相)。混合其他成分，加热融化，保持在70℃(油相)。在水相中加入油相进行预乳化，用高速混合器乳化均匀后，充分搅拌的同时冷却至30℃。
实施例3 美白用冷霜
固体石蜡 5.0
蜜蜡 10.0
凡士林 15.0
液体石蜡 41.0
甘油单硬脂酸酯 2.0
聚氧乙烯(20摩尔)
脱水山梨醇单月桂酸酯 2.0
曲酸 2.0
4-叔丁基-4’-t-甲氧基二苯甲酰基甲烷 3.5
肥皂粉 0.1
硼砂 0.2
催眠醉茄提取物 0.1
离子交换水 余量
香料 适量
防腐剂、抗氧化剂 适量
(制备方法)
在离子交换水中加入催眠醉茄提取物、曲酸、肥皂粉和硼砂，加热溶解，保持在70℃(水相)。混合其他成分，加热融化，保持在70℃(油相)。搅拌的同时在水相中缓慢加入油相进行反应。反应结束后用高速混合器乳化均匀，乳化后在充分搅拌的同时冷却至30℃。实施例4 美白用乳液
聚氧乙烯(20摩尔)
聚氧丙烯(2摩尔)鲸蜡醇 1.0
对甲氧基月桂酸辛酯 3.5
硅氧烷KF96(20cs)(信越化学工业) 20.0
液体石蜡(中粘度) 3.0
丙二醇 5.0
熊果苷 2.0
亚硫酸氢钠 0.03
甘油 2.0
乙醇 15.0
羧基乙烯基聚合物 0.3
羟丙基纤维素 0.1
KOH 适量
防腐剂 适量
催眠醉茄提取物 20.0
离子交换水 余量
(制备方法)
在离子交换水和乙醇中加入催眠醉茄提取物的含水醇提取物和熊果苷，加热溶解，进一步溶解丙二醇以下的水溶性成分，保持在70℃(水相)。混合其他油性成分，加热融解，保持在70℃(油相)。在水相中加入油相进行预乳化，用高速混合器乳化均匀，乳化后充分搅拌的同时冷却至30℃。
实施例5 美白用乳液
聚氧乙烯(20摩尔)
聚氧丙烯(2摩尔)鲸蜡醇 1.0
硅氧烷KF96(20cs)(信越化学工业) 2.0
液体石蜡(中粘度) 3.0
丙二醇 5.0
抗坏血酸糖苷 5.0
对甲氧基月桂酸辛酯 3.5
甘油 2.0
乙醇 15.0
羧基乙烯基聚合物 0.3
羟丙基纤维素 0.1
KOH 适量
防腐剂 适量
催眠醉茄提取物 7.0
离子交换水 余量
(制备方法)
在离子交换水和乙醇中加入催眠醉茄提取物，加热溶解，进一步溶解丙二醇以下的水溶性成分，保持在70℃(水相)。混合其他油性成分，加热融解，保持在70℃(油相)。在水相中加入油相进行预乳化，用高速混合器乳化均匀，乳化后充分搅拌的同时冷却至30℃。实施例6 美白用乳液
聚氧乙烯(20摩尔)
聚氧丙烯(2摩尔)鲸蜡醇 1.0
硅氧烷KF96(20cs)(信越化学工业) 2.0
液体石蜡(中粘度) 3.0
丙二醇 5.0
甘油 2.0
4-叔丁基-4’-甲氧基二苯甲酰基甲烷 3.5
乙醇 15.0
羧基乙烯基聚合物 0.3
羟丙基纤维素 0.1
KOH 适量
防腐剂 适量
胎盘提取物 5.0
催眠醉茄提取物 0.001
离子交换水 余量
(制备方法)
在离子交换水和乙醇中加入催眠醉茄提取物和胎盘提取物，加热溶解，进一步溶解丙二醇以下的水溶性成分，保持在70℃(水相)。混合其他油性成分，加热融解，保持在70℃(油相)。在水相中加入油相进行预乳化，用高速混合器乳化均匀，乳化后充分搅拌的同时冷却至30℃。实施例7 美白用乳液
聚氧乙烯(20摩尔)
聚氧丙烯(2摩尔)鲸蜡醇 1.0
硅氧烷KF96(20cs)(信越化学工业) 2.0
液体石蜡(中粘度) 3.0
丙二醇 5.0
甘油 2.0
乙醇 15.0
羧基乙烯基聚合物 0.3
羟丙基纤维素 0.1
KOH 适量
防腐剂 适量
曲酸 3.0
催眠醉茄提取物 3.0
离子交换水 余量
(制备方法)
将离子交换水和催眠醉茄提取物以及曲酸加热溶解，进一步溶解丙二醇以下的水溶性成分，保持在70℃(水相)。混合其他油性成分，加热融解，保持在70℃(油相)。在水相中加入油相进行预乳化，用高速混合器乳化均匀，乳化后充分搅拌的同时冷却至30℃。实施例8 美白用乳液
硬脂酸 1.5
鲸蜡醇 0.5
蜜蜡 2.0
聚氧乙烯(20摩尔)单油酸酯 1.0
甘油单硬脂酸酯 1.0
乙醇 10.0
熊果苷 20.0
亚硫酸氢钠 0.03
丙二醇 5.0
催眠醉茄提取物 0.5
离子交换水 余量
香料 适量
防腐剂、抗氧化剂 适量
(制备方法)
在离子交换水中加入催眠醉茄提取物、熊果苷和丙二醇，加热溶解，保持在70℃(水相)。在乙醇中加入香料溶解(醇相)。混合其他油性成分，加热融解，保持在70℃(油相)。在水相中加入油相进行预乳化，用高速混合器乳化均匀。在对其进行搅拌的同时加入醇相。之后在充分搅拌的同时冷却至30℃。
实施例9 美白用乳液
微晶蜡 1.0
蜜蜡 2.0
羊毛脂 2.0
液体石蜡 20.0
角鲨烷 10.0
脱水山梨醇倍半油酸酯 4.0
聚氧乙烯(20摩尔)
脱水山梨醇单油酸酯 1.0
熊果苷 5.0
亚硫酸氢钠 0.03
凝血酸 5.0
丙二醇 7.0
催眠醉茄提取物 0.1
4-叔丁基-4’-甲氧基二苯甲酰基甲烷 3.5
离子交换水 余量
香料 适量
防腐剂、抗氧化剂 适量
(制备方法)
在离子交换水中加入催眠醉茄提取物、熊果苷、凝血酸和丙二醇，加热，保持在70℃(水相)。混合其他成分，加热溶解，保持在70℃(油相)。边搅拌油相，边在该油相中缓慢加入水相，用高速混合器乳化均匀。乳化后在充分搅拌的同时冷却至30℃。
实施例10 美白用凝胶
95％乙醇 10.0
一缩二丙二醇 15.0
聚氧乙烯(15摩尔)油醇醚 2.0
熊果苷 0.5
亚硫酸氢钠 0.03
抗坏血酸二硬脂酸酯 0.5
羧基乙烯基聚合物(商品名：Carbopole941) 1.0
氢氧化钾 0.15
L-精氨酸 0.1
催眠醉茄提取物 2.0
香料 适量
防腐剂 适量
离子交换水 余量
(制备方法)
在离子交换水中均匀溶解催眠醉茄提取物、熊果苷和Carbopole941，另一方面在95％醇中溶解一缩二丙二醇、聚氧乙烯(15摩尔)油醇醚、其他成分，添加到水相中。然后用氢氧化钾、L-精氨酸中和增粘。
实施例11 美白用剥离型面膜
(醇相)
95％乙醇 10.0
聚氧乙烯(15摩尔)油醇醚 2.0
4-叔丁基-4’-甲氧基二苯甲酰基甲烷 3.5
防腐剂 适量
香料 适量
(水相)
催眠醉茄提取物 3.0
熊果苷 1.0
亚硫酸氢钠 0.03
聚乙烯醇 12.0
甘油 3.0
聚乙二醇1500 1.0
离子交换水 余量
(制备方法)
在80℃配制水相，冷却到50℃。然后添加在室温下配制的醇相，之后混合均匀，放冷。
实施例12 美白用掺粉面膜
(醇相)
95％乙醇 2.0
防腐剂 适量
香料 适量
色料 适量
抗坏血酸二油酸酯 1.0
(水相)
催眠醉茄提取物 7.0
熊果苷 1.0
丙二醇 7.0
氧化锌 25.0
高龄土 20.0
离子交换水 余量
(制备方法)
在室温下均匀配制水相。然后添加在室温下配制的醇相，混合均匀。
实施例13 美白用吸水软膏
凡士林 40.0
硬脂醇 18.0
木蜡 20.0
聚氧乙烯(10摩尔)单油酸酯 0.25
甘油单硬脂酸酯 0.25
胎盘提取物 1.0
催眠醉茄提取物 10.0
离子交换水 余量
(制备方法)
在离子交换水中加入催眠醉茄提取物、胎盘提取物，保持在70℃(水相)。在70℃下混合溶解其他成分(油相)。在上述水相中添加油相，用高速混合器均匀乳化后，冷却。
工业实用性
按照本发明可以提供美白效果优良，安全性和稳定性高的美白用皮肤外用剂以及皮肤的美白方法。本发明的美白效果、黑色素生成抑制效果、酪氨酸酶活性抑制效果是本发明新发现的，能够期待优良的应用。
Claims (10)
1．美白用皮肤外用剂，其特征在于，含有茄科(Solanaceae)睡茄(Withania)属植物的提取物。
2．如权利要求1所述的美白用皮肤外用剂，其特征在于，所述茄科(Solanaceae)睡茄(Withania)属植物是催眠醉茄(通用名：Musali、学名：Withania somnifera)。
3．如权利要求1所述的美白用皮肤外用剂，其特征在于，所述茄科(Solanaceae)睡茄(Withania)属植物提取物的含量相对于美白用皮肤外用剂总量为0.0001～20.0重量％。
4．如权利要求2所述的美白用皮肤外用剂，其特征在于，所述茄科(Solanaceae)睡茄(Withania)属植物提取物的含量相对于美白用皮肤外用剂总量为0.0001～20.0重量％。
5．皮肤美白方法，其特征在于，将权利要求1所述的美白用皮肤外用剂施用于皮肤。
6．皮肤美白方法，其特征在于，将权利要求2所述的美白用皮肤外用剂施用于皮肤。
7．黑色素生成抑制剂，其特征在于，含有茄科(Solanaceae)睡茄(Withania)属植物的提取物。
8．如权利要求7所述的黑色素生成抑制剂，其特征在于，所述茄科(Solanaceae)睡茄(Withania)属植物是催眠醉茄(通用名：Musali、学名：Withania somnifera)。
9．酪氨酸酶活性抑制剂，其特征在于，含有茄科(Solanaceae)睡茄(Withania)属植物的提取物。
10．如权利要求9所述的酪氨酸酶活性抑制剂，其特征在于：所述茄科(Solanaceae)睡茄(Withania)属植物是催眠醉茄(通用名：Musali、学名：Withania somnifera)。
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